There	O	O	O	O
is	O	O	O	O
a	O	O	O	O
single	O	O	O	O
methionine	B-DNA	O	O	O
codon	I-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
initiated	I-DNA	O	O	O
open	I-DNA	O	O	O
reading	I-DNA	O	O	O
frame	I-DNA	O	O	O
of	O	O	O	O
1	O	O	O	O
,	O	O	O	O
458	O	O	O	O
nt	O	O	O	O
in	O	O	O	O
frame	O	O	O	O
with	O	O	O	O
a	O	O	O	O
homeobox	B-DNA	O	O	O
and	O	O	O	O
a	O	O	O	O
CAX	B-DNA	O	O	O
repeat	I-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
the	O	O	O	O
open	B-DNA	O	O	O
reading	I-DNA	O	O	O
frame	I-DNA	O	O	O
is	O	O	O	O
predicted	O	O	O	O
to	O	O	O	O
encode	O	O	O	O
a	O	O	O	O
protein	O	O	O	O
of	O	O	O	O
51	O	O	O	O
,	O	O	O	O
659	O	O	O	O
daltons	O	O	O	O
.	O	O	O	O

When	O	O	O	O
the	O	O	O	O
homeodomain	B-DNA	O	O	O
from	O	O	O	O
HB24	B-DNA	O	O	O
was	O	O	O	O
compared	O	O	O	O
to	O	O	O	O
known	O	O	O	O
mammalian	O	O	O	O
and	O	O	O	O
Drosophila	O	O	O	O
homeodomains	O	O	O	O
it	O	O	O	O
was	O	O	O	O
found	O	O	O	O
to	O	O	O	O
be	O	O	O	O
only	O	O	O	O
moderately	O	O	O	O
conserved	O	O	O	O
,	O	O	O	O
but	O	O	O	O
when	O	O	O	O
it	O	O	O	O
was	O	O	O	O
compared	O	O	O	O
to	O	O	O	O
a	O	O	O	O
highly	O	O	O	O
diverged	O	O	O	O
Drosophila	O	B-DNA	O	O
homeodomain	B-DNA	I-DNA	O	O
,	O	O	O	O
H2	O	O	O	O
.	O	O	O	O
0	O	O	O	O
,	O	O	O	O
it	O	O	O	O
was	O	O	O	O
found	O	O	O	O
to	O	O	O	O
be	O	O	O	O
80	O	O	O	O
%	O	O	O	O
identical	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
HB24	B-RNA	O	O	O
mRNA	I-RNA	O	O	O
was	O	O	O	O
absent	O	O	O	O
or	O	O	O	O
present	O	O	O	O
at	O	O	O	O
low	O	O	O	O
levels	O	O	O	O
in	O	O	O	O
normal	O	O	O	O
B	O	O	O	O
and	O	O	O	O
T	B-cell_type	O	O	O
lymphocytes	I-cell_type	O	O	O
;	O	O	O	O
however	O	O	O	O
,	O	O	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
appropriate	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
signal	O	O	O	O
HB24	B-RNA	O	O	O
mRNA	I-RNA	O	O	O
was	O	O	O	O
induced	O	O	O	O
within	O	O	O	O
several	O	O	O	O
hours	O	O	O	O
even	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
presence	O	O	O	O
of	O	O	O	O
cycloheximide	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Characterization	O	O	O	O
of	O	O	O	O
HB24	B-DNA	O	O	O
expression	O	O	O	O
in	O	O	O	O
lymphoid	O	O	O	O
and	O	O	O	O
select	O	O	O	O
developing	O	O	O	O
tissues	O	O	O	O
was	O	O	O	O
performed	O	O	O	O
by	O	O	O	O
in	O	O	O	O
situ	O	O	O	O
hybridization	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Positive	O	O	O	O
hybridization	O	O	O	O
was	O	O	O	O
found	O	O	O	O
in	O	O	O	O
thymus	O	O	O	O
,	O	O	O	O
tonsil	O	O	O	O
,	O	O	O	O
bone	O	O	O	O
marrow	O	O	O	O
,	O	O	O	O
developing	O	O	O	O
vessels	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
in	O	O	O	O
fetal	O	O	O	O
brain	O	O	O	O
.	O	O	O	O

HB24	B-DNA	O	O	O
is	O	O	O	O
likely	O	O	O	O
to	O	O	O	O
have	O	O	O	O
an	O	O	O	O
important	O	O	O	O
role	O	O	O	O
in	O	O	O	O
lymphocytes	B-cell_type	O	O	O
as	O	O	O	O
well	O	O	O	O
as	O	O	O	O
in	O	O	O	O
certain	O	O	O	O
developing	O	O	O	O
tissues	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Platelet	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
activating	I-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
induces	O	O	O	O
phospholipid	O	O	O	O
turnover	O	O	O	O
,	O	O	O	O
calcium	O	O	O	O
flux	O	O	O	O
,	O	O	O	O
arachidonic	O	O	O	O
acid	O	O	O	O
liberation	O	O	O	O
,	O	O	O	O
eicosanoid	O	O	O	O
generation	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
oncogene	B-DNA	O	O	O
expression	O	O	O	O
in	O	O	O	O
a	O	O	O	O
human	B-cell_line	O	O	O
B	I-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
line	I-cell_line	O	O	O
.	O	O	O	O

Platelet	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
activating	I-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
is	O	O	O	O
a	O	O	O	O
potent	O	O	O	O
mediator	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
inflammatory	O	O	O	O
response	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Studies	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
actions	O	O	O	O
of	O	O	O	O
platelet	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
activating	I-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
have	O	O	O	O
centered	O	O	O	O
mainly	O	O	O	O
around	O	O	O	O
neutrophils	B-cell_type	O	O	O
,	O	O	O	O
monocytes	B-cell_type	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
platelets	B-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
this	O	O	O	O
report	O	O	O	O
we	O	O	O	O
begin	O	O	O	O
to	O	O	O	O
uncover	O	O	O	O
the	O	O	O	O
influence	O	O	O	O
of	O	O	O	O
platelet	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
activating	I-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
on	O	O	O	O
B	B-cell_type	O	O	O
lymphocytes	I-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

Employing	O	O	O	O
the	O	O	O	O
EBV	O	B-cell_line	O	O
-	O	I-cell_line	O	O
transformed	O	I-cell_line	O	O
human	B-cell_line	I-cell_line	O	O
B	I-cell_line	I-cell_line	O	O
cell	I-cell_line	I-cell_line	O	O
line	I-cell_line	I-cell_line	O	O
SKW6	B-cell_line	O	O	O
.	I-cell_line	O	O	O
4	I-cell_line	O	O	O
,	O	O	O	O
we	O	O	O	O
demonstrate	O	O	O	O
that	O	O	O	O
platelet	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
activating	I-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
significantly	O	O	O	O
alters	O	O	O	O
membrane	O	O	O	O
phospholipid	O	O	O	O
metabolism	O	O	O	O
indicated	O	O	O	O
by	O	O	O	O
the	O	O	O	O
incorporation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
32P	O	O	O	O
into	O	O	O	O
phosphatidylcholine	O	O	O	O
,	O	O	O	O
phosphatidylinositol	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
phosphatidic	O	O	O	O
acid	O	O	O	O
but	O	O	O	O
not	O	O	O	O
significantly	O	O	O	O
into	O	O	O	O
phosphatidylethanolamine	O	O	O	O
at	O	O	O	O
concentrations	O	O	O	O
ranging	O	O	O	O
from	O	O	O	O
10	O	O	O	O
(	O	O	O	O
-	O	O	O	O
9	O	O	O	O
)	O	O	O	O
to	O	O	O	O
10	O	O	O	O
(	O	O	O	O
-	O	O	O	O
6	O	O	O	O
)	O	O	O	O
M	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
inactive	O	O	O	O
precursor	O	O	O	O
,	O	O	O	O
lyso	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
platelet	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
activating	I-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
at	O	O	O	O
a	O	O	O	O
concentration	O	O	O	O
as	O	O	O	O
high	O	O	O	O
as	O	O	O	O
10	O	O	O	O
(	O	O	O	O
-	O	O	O	O
7	O	O	O	O
)	O	O	O	O
M	O	O	O	O
had	O	O	O	O
no	O	O	O	O
effect	O	O	O	O
on	O	O	O	O
any	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
membrane	O	O	O	O
phospholipids	O	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
also	O	O	O	O
show	O	O	O	O
that	O	O	O	O
platelet	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
activating	I-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
from	O	O	O	O
10	O	O	O	O
(	O	O	O	O
-	O	O	O	O
12	O	O	O	O
)	O	O	O	O
to	O	O	O	O
10	O	O	O	O
(	O	O	O	O
-	O	O	O	O
6	O	O	O	O
)	O	O	O	O
M	O	O	O	O
induced	O	O	O	O
rapid	O	O	O	O
and	O	O	O	O
significant	O	O	O	O
elevation	O	O	O	O
in	O	O	O	O
intracellular	O	O	O	O
calcium	O	O	O	O
levels	O	O	O	O
,	O	O	O	O
whereas	O	O	O	O
lyso	O	O	O	O
-	O	O	O	O
platelet	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
activating	I-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
was	O	O	O	O
again	O	O	O	O
ineffective	O	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
further	O	O	O	O
demonstrate	O	O	O	O
the	O	O	O	O
impact	O	O	O	O
of	O	O	O	O
platelet	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
activating	I-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
binding	O	O	O	O
to	O	O	O	O
B	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
by	O	O	O	O
measuring	O	O	O	O
platelet	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
activating	I-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
induced	O	O	O	O
arachidonic	O	O	O	O
acid	O	O	O	O
release	O	O	O	O
and	O	O	O	O
5	O	O	O	O
-	O	O	O	O
hydroxyeicosatetraenoic	O	O	O	O
acid	O	O	O	O
production	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Moreover	O	O	O	O
,	O	O	O	O
platelet	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
activating	I-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
was	O	O	O	O
capable	O	O	O	O
of	O	O	O	O
inducing	O	O	O	O
transcription	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
nuclear	B-DNA	O	O	O
proto	I-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
oncogenes	I-DNA	O	O	O
c	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
fos	I-DNA	O	O	O
and	O	O	O	O
c	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
jun	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

Finally	O	O	O	O
we	O	O	O	O
explored	O	O	O	O
the	O	O	O	O
possible	O	O	O	O
role	O	O	O	O
of	O	O	O	O
5	O	O	O	O
-	O	O	O	O
hydroxyeicosatetraenoic	O	O	O	O
acid	O	O	O	O
as	O	O	O	O
a	O	O	O	O
regulator	O	O	O	O
of	O	O	O	O
arachidonic	O	O	O	O
acid	O	O	O	O
liberation	O	O	O	O
demonstrating	O	O	O	O
that	O	O	O	O
endogenous	O	O	O	O
5	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
lipoxygenase	I-protein	O	O	O
activity	O	O	O	O
modulates	O	O	O	O
platelet	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
activating	I-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
induced	O	O	O	O
arachidonic	O	O	O	O
acid	O	O	O	O
release	O	O	O	O
perhaps	O	O	O	O
acting	O	O	O	O
at	O	O	O	O
the	O	O	O	O
level	O	O	O	O
of	O	O	O	O
phospholipase	B-protein	O	O	O
A2	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
summary	O	O	O	O
,	O	O	O	O
platelet	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
activating	I-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
is	O	O	O	O
shown	O	O	O	O
here	O	O	O	O
to	O	O	O	O
have	O	O	O	O
a	O	O	O	O
direct	O	O	O	O
and	O	O	O	O
profound	O	O	O	O
effect	O	O	O	O
on	O	O	O	O
a	O	O	O	O
pure	B-cell_line	O	O	O
B	I-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
line	I-cell_line	O	O	O
.	O	O	O	O

Positive	O	O	O	O
and	O	O	O	O
negative	O	O	O	O
regulation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
immunoglobulin	B-DNA	O	O	O
gene	I-DNA	O	O	O
expression	O	O	O	O
by	O	O	O	O
a	O	O	O	O
novel	O	O	O	O
B	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
cell	I-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
specific	I-DNA	O	O	O
enhancer	I-DNA	O	O	O
element	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

A	O	O	O	O
new	O	O	O	O
B	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
cell	I-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
specific	I-DNA	O	O	O
enhancer	I-DNA	O	O	O
element	I-DNA	O	O	O
has	O	O	O	O
been	O	O	O	O
identified	O	O	O	O
3	O	O	O	O
'	O	O	O	O
of	O	O	O	O
E4	O	O	O	O
and	O	O	O	O
the	O	O	O	O
octamerlike	O	O	O	O
motifs	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
human	B-protein	B-DNA	O	O
immunoglobulin	I-protein	I-DNA	O	O
heavy	I-protein	I-DNA	O	O
-	I-protein	I-DNA	O	O
chain	I-protein	I-DNA	O	O
gene	O	I-DNA	O	O
enhancer	O	I-DNA	O	O
.	O	O	O	O

Tandem	O	O	O	O
copies	O	O	O	O
of	O	O	O	O
this	O	O	O	O
67	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
bp	I-DNA	O	O	O
MnlI	I-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
AluI	I-DNA	O	O	O
fragment	I-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
when	O	O	O	O
fused	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
chloramphenicol	B-DNA	O	O	O
acetyltransferase	I-DNA	O	O	O
gene	I-DNA	O	O	O
driven	O	O	O	O
by	O	O	O	O
the	O	O	O	O
conalbumin	B-DNA	O	O	O
promoter	I-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
stimulated	O	O	O	O
transcription	O	O	O	O
in	O	O	O	O
B	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
but	O	O	O	O
not	O	O	O	O
in	O	O	O	O
Jurkat	B-cell_line	O	O	O
T	I-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
or	O	O	O	O
HeLa	B-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
.	O	O	O	O

Footprinting	O	O	O	O
analysis	O	O	O	O
revealed	O	O	O	O
that	O	O	O	O
the	O	O	O	O
identical	O	O	O	O
sequence	O	O	O	O
CCGAAACTGAAAAGG	O	O	O	O
,	O	O	O	O
designated	O	O	O	O
E6	B-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
was	O	O	O	O
protected	O	O	O	O
by	O	O	O	O
nuclear	O	O	O	O
extracts	O	O	O	O
from	O	O	O	O
B	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
,	O	O	O	O
T	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
,	O	O	O	O
or	O	O	O	O
HeLa	O	O	O	O
cells	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Gel	O	O	O	O
mobility	O	O	O	O
shift	O	O	O	O
assays	O	O	O	O
using	O	O	O	O
a	O	O	O	O
synthetic	B-DNA	O	O	O
E6	I-DNA	O	O	O
motif	I-DNA	O	O	O
detected	O	O	O	O
a	O	O	O	O
B	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
cell	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
specific	I-protein	O	O	O
complex	I-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
addition	O	O	O	O
to	O	O	O	O
a	O	O	O	O
ubiquitous	O	O	O	O
band	O	O	O	O
found	O	O	O	O
also	O	O	O	O
in	O	O	O	O
T	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
and	O	O	O	O
HeLa	B-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
agreement	O	O	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
results	O	O	O	O
of	O	O	O	O
gel	O	O	O	O
retardation	O	O	O	O
assays	O	O	O	O
,	O	O	O	O
tandem	O	O	O	O
copies	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
E6	B-DNA	O	O	O
motif	I-DNA	O	O	O
stimulated	O	O	O	O
transcription	O	O	O	O
in	O	O	O	O
ARH77	B-cell_line	O	O	O
and	O	O	O	O
Raji	B-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
but	O	O	O	O
not	O	O	O	O
in	O	O	O	O
Jurkat	B-cell_line	O	O	O
or	O	O	O	O
HeLa	B-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
.	O	O	O	O

Furthermore	O	O	O	O
,	O	O	O	O
a	O	O	O	O
mutant	B-DNA	O	O	O
E6	I-DNA	O	O	O
motif	I-DNA	O	O	O
lost	O	O	O	O
both	O	O	O	O
in	O	O	O	O
vitro	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
and	O	O	O	O
in	O	O	O	O
vivo	O	O	O	O
enhancer	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
striking	O	O	O	O
contrast	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
mouse	B-DNA	O	O	O
Ig	I-DNA	O	O	O
heavy	I-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
chain	I-DNA	O	O	O
enhancer	I-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
in	O	O	O	O
which	O	O	O	O
the	O	O	O	O
octamer	B-DNA	O	O	O
motif	I-DNA	O	O	O
acts	O	O	O	O
as	O	O	O	O
a	O	O	O	O
B	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
cell	I-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
specific	I-DNA	O	O	O
enhancer	I-DNA	O	O	O
element	I-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
human	B-DNA	O	O	O
enhancer	I-DNA	O	O	O
contains	O	O	O	O
an	O	O	O	O
octamerlike	B-DNA	O	O	O
sequence	I-DNA	O	O	O
with	O	O	O	O
one	O	O	O	O
base	O	O	O	O
substitution	O	O	O	O
which	O	O	O	O
bound	O	O	O	O
octamer	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
binding	I-protein	O	O	O
proteins	I-protein	O	O	O
with	O	O	O	O
only	O	O	O	O
very	O	O	O	O
low	O	O	O	O
affinity	O	O	O	O
and	O	O	O	O
showed	O	O	O	O
no	O	O	O	O
enhancer	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
of	O	O	O	O
its	O	O	O	O
own	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Interestingly	O	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
MnlI	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
AluI	I-DNA	O	O	O
fragment	I-DNA	O	O	O
could	O	O	O	O
suppress	O	O	O	O
the	O	O	O	O
basal	O	O	O	O
-	O	O	O	O
level	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
conalbumin	B-DNA	O	O	O
promoter	I-DNA	O	O	O
in	O	O	O	O
both	O	O	O	O
Jurkat	B-cell_line	O	O	O
and	O	O	O	O
HeLa	B-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
.	O	O	O	O

Moreover	O	O	O	O
,	O	O	O	O
simian	O	O	O	O
virus	O	O	O	O
40	O	O	O	O
enhancer	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
was	O	O	O	O
blocked	O	O	O	O
by	O	O	O	O
the	O	O	O	O
MnlI	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
AluI	I-DNA	O	O	O
fragment	I-DNA	O	O	O
in	O	O	O	O
HeLa	B-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
but	O	O	O	O
not	O	O	O	O
in	O	O	O	O
B	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

Thus	O	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
novel	O	O	O	O
enhancer	O	O	O	O
element	O	O	O	O
identified	O	O	O	O
in	O	O	O	O
this	O	O	O	O
study	O	O	O	O
is	O	O	O	O
probably	O	O	O	O
a	O	O	O	O
target	O	O	O	O
site	O	O	O	O
for	O	O	O	O
both	O	O	O	O
positive	B-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
negative	B-protein	O	O	O
factors	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Charybdotoxin	O	O	O	O
-	O	O	O	O
sensitive	O	O	O	O
,	O	O	O	O
Ca	O	O	O	O
(	O	O	O	O
2	O	O	O	O
+	O	O	O	O
)	O	O	O	O
-	O	O	O	O
dependent	O	O	O	O
membrane	O	O	O	O
potential	O	O	O	O
changes	O	O	O	O
are	O	O	O	O
not	O	O	O	O
involved	O	O	O	O
in	O	O	O	O
human	O	O	O	O
T	O	O	O	O
or	O	O	O	O
B	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
and	O	O	O	O
proliferation	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
involvement	O	O	O	O
of	O	O	O	O
ion	B-protein	O	O	O
channels	I-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
B	O	O	O	O
and	O	O	O	O
T	O	O	O	O
lymphocyte	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
is	O	O	O	O
supported	O	O	O	O
by	O	O	O	O
many	O	O	O	O
reports	O	O	O	O
of	O	O	O	O
changes	O	O	O	O
in	O	O	O	O
ion	O	O	O	O
fluxes	O	O	O	O
and	O	O	O	O
membrane	O	O	O	O
potential	O	O	O	O
after	O	O	O	O
mitogen	B-protein	O	O	O
binding	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Human	O	O	O	O
T	O	O	O	O
and	O	O	O	O
B	O	O	O	O
lymphocytes	O	O	O	O
demonstrate	O	O	O	O
an	O	O	O	O
early	O	O	O	O
and	O	O	O	O
transient	O	O	O	O
hyperpolarization	O	O	O	O
after	O	O	O	O
ligand	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Inasmuch	O	O	O	O
as	O	O	O	O
the	O	O	O	O
change	O	O	O	O
in	O	O	O	O
membrane	O	O	O	O
potential	O	O	O	O
is	O	O	O	O
dependent	O	O	O	O
on	O	O	O	O
elevation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
free	O	O	O	O
cytosolic	O	O	O	O
calcium	O	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
hyperpolarization	O	O	O	O
is	O	O	O	O
presumably	O	O	O	O
through	O	O	O	O
opening	O	O	O	O
of	O	O	O	O
Ca	O	O	O	O
(	O	O	O	O
2	O	O	O	O
+	O	O	O	O
)	O	O	O	O
-	O	O	O	O
stimulated	O	O	O	O
K	O	O	O	O
+	O	O	O	O
channels	O	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
have	O	O	O	O
used	O	O	O	O
charybdotoxin	O	O	O	O
,	O	O	O	O
a	O	O	O	O
known	O	O	O	O
inhibitor	O	O	O	O
of	O	O	O	O
Ca	B-protein	O	O	O
(	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
+	I-protein	O	O	O
)	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
dependent	I-protein	O	O	O
K	I-protein	O	O	O
+	I-protein	O	O	O
channels	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
to	O	O	O	O
study	O	O	O	O
the	O	O	O	O
role	O	O	O	O
of	O	O	O	O
these	O	O	O	O
channels	O	O	O	O
in	O	O	O	O
lymphocyte	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
and	O	O	O	O
mitogenesis	O	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
demonstrate	O	O	O	O
that	O	O	O	O
charybdotoxin	O	O	O	O
inhibits	O	O	O	O
the	O	O	O	O
ligand	O	O	O	O
-	O	O	O	O
induced	O	O	O	O
transient	O	O	O	O
membrane	O	O	O	O
hyperpolarization	O	O	O	O
in	O	O	O	O
B	O	O	O	O
and	O	O	O	O
T	O	O	O	O
cells	O	O	O	O
in	O	O	O	O
a	O	O	O	O
dose	O	O	O	O
-	O	O	O	O
dependent	O	O	O	O
fashion	O	O	O	O
,	O	O	O	O
without	O	O	O	O
affecting	O	O	O	O
changes	O	O	O	O
in	O	O	O	O
cytosolic	O	O	O	O
Ca2	O	O	O	O
+	O	O	O	O
.	O	O	O	O

However	O	O	O	O
,	O	O	O	O
blockade	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
Ca	B-protein	O	O	O
(	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
+	I-protein	O	O	O
)	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
activated	I-protein	O	O	O
K	I-protein	O	O	O
+	I-protein	O	O	O
channel	I-protein	O	O	O
is	O	O	O	O
not	O	O	O	O
associated	O	O	O	O
with	O	O	O	O
changes	O	O	O	O
in	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
-	O	O	O	O
cycle	O	O	O	O
gene	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
,	O	O	O	O
IL	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
production	O	O	O	O
,	O	O	O	O
IL	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2R	I-protein	O	O	O
expression	O	O	O	O
or	O	O	O	O
B	O	O	O	O
and	O	O	O	O
T	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
mitogenesis	O	O	O	O
.	O	O	O	O

These	O	O	O	O
results	O	O	O	O
imply	O	O	O	O
that	O	O	O	O
membrane	O	O	O	O
potential	O	O	O	O
changes	O	O	O	O
secondary	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
ligand	O	O	O	O
-	O	O	O	O
dependent	O	O	O	O
opening	O	O	O	O
of	O	O	O	O
Ca	B-protein	O	O	O
(	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
+	I-protein	O	O	O
)	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
activated	I-protein	O	O	O
K	I-protein	O	O	O
+	I-protein	O	O	O
channels	I-protein	O	O	O
are	O	O	O	O
not	O	O	O	O
involved	O	O	O	O
in	O	O	O	O
B	O	O	O	O
and	O	O	O	O
T	O	O	O	O
lymphocyte	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
and	O	O	O	O
mitogenesis	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Activity	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
kappa	B-DNA	O	O	O
B	I-DNA	O	O	O
enhancer	I-DNA	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
interleukin	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
receptor	I-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
chain	I-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
somatic	B-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
hybrids	I-cell_line	O	O	O
is	O	O	O	O
accompanied	O	O	O	O
by	O	O	O	O
the	O	O	O	O
nuclear	O	O	O	O
localization	O	O	O	O
of	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
two	B-protein	O	O	O
nuclear	I-protein	O	O	O
proteins	I-protein	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
consisting	O	O	O	O
of	O	O	O	O
subunits	O	O	O	O
p50	B-protein	O	O	O
an	O	O	O	O
dp65	B-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
and	O	O	O	O
the	O	O	O	O
DNA	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
binding	I-protein	O	O	O
subunit	I-protein	O	O	O
of	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
p50	B-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
by	O	O	O	O
itself	O	O	O	O
,	O	O	O	O
also	O	O	O	O
called	O	O	O	O
KBF1	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
are	O	O	O	O
constitutively	O	O	O	O
expressed	O	O	O	O
and	O	O	O	O
localized	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
nucleus	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
human	B-cell_line	O	O	O
T	I-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
line	I-cell_line	O	O	O
IARC	B-cell_line	O	O	O
301	I-cell_line	O	O	O
.	I-cell_line	O	O	O
5	I-cell_line	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
order	O	O	O	O
to	O	O	O	O
define	O	O	O	O
the	O	O	O	O
roles	O	O	O	O
of	O	O	O	O
these	O	O	O	O
two	O	O	O	O
factors	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
which	O	O	O	O
bind	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
same	O	O	O	O
kappa	B-DNA	O	O	O
B	I-DNA	O	O	O
enhancers	I-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
in	O	O	O	O
transcription	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
we	O	O	O	O
have	O	O	O	O
prepared	O	O	O	O
somatic	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
hybrids	O	O	O	O
between	O	O	O	O
IARC	B-cell_line	O	O	O
301	I-cell_line	O	O	O
.	I-cell_line	O	O	O
5	I-cell_line	O	O	O
and	O	O	O	O
a	O	O	O	O
murine	B-cell_line	O	O	O
myeloma	I-cell_line	O	O	O
.	O	O	O	O

Most	O	O	O	O
hybrids	O	O	O	O
express	O	O	O	O
both	O	O	O	O
KBF1	B-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
their	O	O	O	O
nuclei	O	O	O	O
,	O	O	O	O
but	O	O	O	O
one	O	O	O	O
hybrid	O	O	O	O
expresses	O	O	O	O
only	O	O	O	O
KBF1	B-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
kappa	B-DNA	O	O	O
B	I-DNA	O	O	O
enhancer	I-DNA	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
gene	O	O	O	O
encoding	O	O	O	O
the	O	O	O	O
interleukin	B-protein	B-protein	O	O
-	I-protein	I-protein	O	O
2	I-protein	I-protein	O	O
(	O	I-protein	O	O
IL	B-protein	I-protein	O	O
-	I-protein	I-protein	O	O
2	I-protein	I-protein	O	O
)	O	I-protein	O	O
receptor	O	I-protein	O	O
alpha	O	I-protein	O	O
chain	O	I-protein	O	O
(	O	O	O	O
IL	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2R	I-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
is	O	O	O	O
functional	O	O	O	O
only	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
hybrids	B-cell_line	O	O	O
expressing	O	O	O	O
nuclear	O	B-protein	O	O
NF	B-protein	I-protein	O	O
-	I-protein	I-protein	O	O
kappa	I-protein	I-protein	O	O
B	I-protein	I-protein	O	O
.	O	O	O	O

These	O	O	O	O
findings	O	O	O	O
show	O	O	O	O
that	O	O	O	O
nuclear	O	B-protein	O	O
NF	B-protein	I-protein	O	O
-	I-protein	I-protein	O	O
kappa	I-protein	I-protein	O	O
B	I-protein	I-protein	O	O
is	O	O	O	O
necessary	O	O	O	O
to	O	O	O	O
activate	O	O	O	O
the	O	O	O	O
kappa	B-DNA	O	O	O
B	I-DNA	O	O	O
enhancer	I-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
while	O	O	O	O
KBF1	B-protein	O	O	O
by	O	O	O	O
itself	O	O	O	O
is	O	O	O	O
not	O	O	O	O
sufficient	O	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
propose	O	O	O	O
that	O	O	O	O
KBF1	B-protein	O	O	O
is	O	O	O	O
a	O	O	O	O
competitive	O	O	O	O
inhibitor	O	O	O	O
of	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
discuss	O	O	O	O
how	O	O	O	O
these	O	O	O	O
factors	O	O	O	O
may	O	O	O	O
be	O	O	O	O
involved	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
transient	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
IL	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
IL	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
genes	O	O	O	O
during	O	O	O	O
the	O	O	O	O
immune	O	O	O	O
response	O	O	O	O
.	O	O	O	O

T	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
helper	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
cell	I-protein	O	O	O
determinants	I-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
protein	B-protein	O	O	O
antigens	I-protein	O	O	O
are	O	O	O	O
preferentially	O	O	O	O
located	O	O	O	O
in	O	O	O	O
cysteine	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
rich	I-protein	O	O	O
antigen	I-protein	O	O	O
segments	I-protein	O	O	O
resistant	O	O	O	O
to	O	O	O	O
proteolytic	O	O	O	O
cleavage	O	O	O	O
by	O	O	O	O
cathepsin	O	O	O	O
B	O	O	O	O
,	O	O	O	O
L	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
D	O	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
report	O	O	O	O
on	O	O	O	O
a	O	O	O	O
computer	O	O	O	O
algorithm	O	O	O	O
capable	O	O	O	O
of	O	O	O	O
predicting	O	O	O	O
the	O	O	O	O
location	O	O	O	O
of	O	O	O	O
T	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
helper	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
cell	I-protein	O	O	O
epitopes	I-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
protein	B-protein	O	O	O
antigen	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
Ag	B-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
by	O	O	O	O
analysing	O	O	O	O
the	O	O	O	O
Ag	B-protein	O	O	O
amino	B-protein	O	O	O
acid	I-protein	O	O	O
sequence	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
algorithm	O	O	O	O
was	O	O	O	O
constructed	O	O	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
aim	O	O	O	O
of	O	O	O	O
identifying	O	O	O	O
segments	O	O	O	O
in	O	O	O	O
Ag	B-protein	O	O	O
which	O	O	O	O
are	O	O	O	O
resistant	O	O	O	O
to	O	O	O	O
proteolytic	O	O	O	O
degradation	O	O	O	O
by	O	O	O	O
the	O	O	O	O
enzymes	O	O	O	O
cathepsin	O	O	O	O
B	O	O	O	O
,	O	O	O	O
L	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
D	O	O	O	O
.	O	O	O	O

These	O	O	O	O
are	O	O	O	O
prominent	O	O	O	O
enzymes	B-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
endocytic	O	O	O	O
pathway	O	O	O	O
through	O	O	O	O
which	O	O	O	O
soluble	O	B-protein	O	O
protein	O	I-protein	O	O
Ag	B-protein	I-protein	O	O
enter	O	O	O	O
APC	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
resistant	B-protein	O	O	O
segments	I-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
Ag	B-protein	O	O	O
may	O	O	O	O
,	O	O	O	O
therefore	O	O	O	O
,	O	O	O	O
be	O	O	O	O
expected	O	O	O	O
to	O	O	O	O
contain	O	O	O	O
more	O	O	O	O
T	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
cell	I-protein	O	O	O
determinants	I-protein	O	O	O
than	O	O	O	O
susceptible	B-protein	O	O	O
segments	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

From	O	O	O	O
information	O	O	O	O
available	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
literature	O	O	O	O
on	O	O	O	O
the	O	O	O	O
substrate	O	O	O	O
specificity	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
three	O	O	O	O
enzymes	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
it	O	O	O	O
is	O	O	O	O
clear	O	O	O	O
that	O	O	O	O
a	O	O	O	O
cysteine	O	O	O	O
is	O	O	O	O
not	O	O	O	O
accepted	O	O	O	O
in	O	O	O	O
any	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
S2	O	O	O	O
,	O	O	O	O
S1	O	O	O	O
,	O	O	O	O
S1	O	O	O	O
'	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
S2	O	O	O	O
'	O	O	O	O
subsites	O	O	O	O
of	O	O	O	O
cathepsin	O	O	O	O
B	O	O	O	O
and	O	O	O	O
L	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
not	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
S1	B-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
S1	B-protein	O	O	O
'	I-protein	O	O	O
subsites	O	O	O	O
of	O	O	O	O
cathepsin	B-protein	O	O	O
D	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Moreover	O	O	O	O
,	O	O	O	O
we	O	O	O	O
have	O	O	O	O
noticed	O	O	O	O
that	O	O	O	O
cysteine	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
containing	I-protein	O	O	O
T	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
cell	I-protein	O	O	O
determinants	I-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
a	O	O	O	O
number	O	O	O	O
of	O	O	O	O
protein	O	B-protein	O	O
Ag	B-protein	I-protein	O	O
are	O	O	O	O
particularly	O	O	O	O
rich	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
amino	O	O	O	O
acids	O	O	O	O
alanine	O	O	O	O
,	O	O	O	O
glycine	O	O	O	O
,	O	O	O	O
lysine	O	O	O	O
,	O	O	O	O
leucine	O	O	O	O
,	O	O	O	O
serine	O	O	O	O
,	O	O	O	O
threonine	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
valine	O	O	O	O
.	O	O	O	O

By	O	O	O	O
searching	O	O	O	O
protein	O	O	O	O
Ag	B-protein	O	O	O
for	O	O	O	O
clusters	O	O	O	O
of	O	O	O	O
amino	O	O	O	O
acids	O	O	O	O
containing	O	O	O	O
cysteine	O	O	O	O
and	O	O	O	O
two	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
other	O	O	O	O
amino	O	O	O	O
acids	O	O	O	O
we	O	O	O	O
were	O	O	O	O
able	O	O	O	O
to	O	O	O	O
predict	O	O	O	O
17	O	O	O	O
out	O	O	O	O
of	O	O	O	O
23	O	O	O	O
empirically	O	O	O	O
known	O	O	O	O
T	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
cell	I-protein	O	O	O
determinants	I-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
Ag	B-protein	O	O	O
with	O	O	O	O
a	O	O	O	O
relatively	O	O	O	O
low	O	O	O	O
number	O	O	O	O
of	O	O	O	O
false	O	O	O	O
(	O	O	O	O
positive	O	O	O	O
)	O	O	O	O
predictions	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Furthermore	O	O	O	O
,	O	O	O	O
we	O	O	O	O
present	O	O	O	O
a	O	O	O	O
new	O	O	O	O
principle	O	O	O	O
for	O	O	O	O
searching	O	O	O	O
Ag	B-protein	O	O	O
for	O	O	O	O
potential	O	O	O	O
amphipatic	B-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
helical	I-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
segments	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Such	O	O	O	O
segments	O	O	O	O
accord	O	O	O	O
well	O	O	O	O
with	O	O	O	O
empirically	O	O	O	O
known	O	O	O	O
T	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
cell	I-protein	O	O	O
determinants	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
our	O	O	O	O
algorithm	O	O	O	O
produces	O	O	O	O
a	O	O	O	O
lower	O	O	O	O
number	O	O	O	O
of	O	O	O	O
false	O	O	O	O
positive	O	O	O	O
predictions	O	O	O	O
than	O	O	O	O
the	O	O	O	O
principle	O	O	O	O
based	O	O	O	O
on	O	O	O	O
discrete	O	O	O	O
Fourier	O	O	O	O
transformations	O	O	O	O
previously	O	O	O	O
described	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Contribution	O	O	O	O
of	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
Sp1	B-DNA	O	O	O
binding	I-DNA	O	O	O
motifs	I-DNA	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
replicative	O	O	O	O
capacity	O	O	O	O
of	O	O	O	O
human	O	O	O	O
immunodeficiency	O	O	O	O
virus	O	O	O	O
type	O	O	O	O
1	O	O	O	O
:	O	O	O	O
distinct	O	O	O	O
patterns	O	O	O	O
of	O	O	O	O
viral	O	O	O	O
growth	O	O	O	O
are	O	O	O	O
determined	O	O	O	O
by	O	O	O	O
T	B-cell_type	O	O	O
-	I-cell_type	O	O	O
cell	I-cell_type	O	O	O
types	I-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

Starting	O	O	O	O
with	O	O	O	O
a	O	O	O	O
replication	O	O	O	O
-	O	O	O	O
incompetent	O	O	O	O
molecular	O	O	O	O
clone	O	O	O	O
of	O	O	O	O
human	O	O	O	O
immunodeficiency	O	O	O	O
virus	O	O	O	O
type	O	O	O	O
1	O	O	O	O
,	O	O	O	O
lacking	O	O	O	O
all	O	O	O	O
the	O	O	O	O
NF	O	O	O	O
-	O	O	O	O
kappa	O	O	O	O
B	O	O	O	O
and	O	O	O	O
Sp1	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
sites	O	O	O	O
present	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
native	B-DNA	O	O	O
long	I-DNA	O	O	O
terminal	I-DNA	O	O	O
repeat	I-DNA	O	O	O
(	O	O	O	O
LTR	B-DNA	O	O	O
)	O	O	O	O
,	O	O	O	O
proviruses	O	O	O	O
containing	O	O	O	O
reconstructed	B-DNA	O	O	O
LTRs	I-DNA	O	O	O
with	O	O	O	O
individual	O	O	O	O
or	O	O	O	O
combinations	O	O	O	O
of	O	O	O	O
NF	O	O	O	O
-	O	O	O	O
kappa	O	O	O	O
B	O	O	O	O
and	O	O	O	O
Sp1	O	O	O	O
elements	O	O	O	O
were	O	O	O	O
generated	O	O	O	O
and	O	O	O	O
evaluated	O	O	O	O
for	O	O	O	O
their	O	O	O	O
capacity	O	O	O	O
to	O	O	O	O
produce	O	O	O	O
virus	O	O	O	O
progeny	O	O	O	O
following	O	O	O	O
transfection	O	O	O	O
-	O	O	O	O
cocultivation	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Virus	O	O	O	O
stocks	O	O	O	O
obtained	O	O	O	O
from	O	O	O	O
these	O	O	O	O
experiments	O	O	O	O
exhibited	O	O	O	O
a	O	O	O	O
continuum	O	O	O	O
of	O	O	O	O
replicative	O	O	O	O
capacities	O	O	O	O
in	O	O	O	O
different	O	O	O	O
human	O	B-cell_type	O	O
T	B-cell_type	I-cell_type	O	O
-	I-cell_type	I-cell_type	O	O
cell	I-cell_type	I-cell_type	O	O
types	I-cell_type	I-cell_type	O	O
depending	O	O	O	O
on	O	O	O	O
which	O	O	O	O
element	B-DNA	O	O	O
(	O	O	O	O
s	O	O	O	O
)	O	O	O	O
was	O	O	O	O
present	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
LTR	B-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

For	O	O	O	O
example	O	O	O	O
,	O	O	O	O
in	O	O	O	O
experiments	O	O	O	O
involving	O	O	O	O
proviral	O	O	O	O
clones	O	O	O	O
with	O	O	O	O
LTRs	B-DNA	O	O	O
containing	O	O	O	O
one	O	O	O	O
or	O	O	O	O
two	O	O	O	O
NF	B-protein	B-DNA	O	O
-	I-protein	I-DNA	O	O
kappa	I-protein	I-DNA	O	O
B	I-protein	I-DNA	O	O
elements	O	I-DNA	O	O
(	O	O	O	O
and	O	O	O	O
no	O	O	O	O
Sp1	B-DNA	O	O	O
binding	I-DNA	O	O	O
sites	I-DNA	O	O	O
)	O	O	O	O
,	O	O	O	O
a	O	O	O	O
hierarchy	O	O	O	O
of	O	O	O	O
cellular	O	O	O	O
permissivity	O	O	O	O
to	O	O	O	O
virus	O	O	O	O
replication	O	O	O	O
(	O	O	O	O
peripheral	O	B-cell_type	O	O
blood	O	I-cell_type	O	O
lymphocytes	B-cell_type	I-cell_type	O	O
=	O	O	O	O
MT4	B-cell_line	O	O	O
greater	O	O	O	O
than	O	O	O	O
H9	B-cell_line	O	O	O
greater	O	O	O	O
than	O	O	O	O
CEM	B-cell_line	O	O	O
greater	O	O	O	O
than	O	O	O	O
Jurkat	B-cell_line	O	O	O
)	O	O	O	O
was	O	O	O	O
observed	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Of	O	O	O	O
note	O	O	O	O
was	O	O	O	O
the	O	O	O	O
associated	O	O	O	O
emergence	O	O	O	O
of	O	O	O	O
second	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
site	I-DNA	O	O	O
LTR	I-DNA	O	O	O
revertants	O	O	O	O
which	O	O	O	O
involved	O	O	O	O
an	O	O	O	O
alteration	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
TATA	B-DNA	O	O	O
box	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

These	O	O	O	O
results	O	O	O	O
suggest	O	O	O	O
that	O	O	O	O
the	O	O	O	O
human	B-DNA	O	O	O
immunodeficiency	I-DNA	O	O	O
virus	I-DNA	O	O	O
type	I-DNA	O	O	O
1	I-DNA	O	O	O
LTR	I-DNA	O	O	O
possesses	O	O	O	O
functional	O	O	O	O
redundancy	O	O	O	O
which	O	O	O	O
ensures	O	O	O	O
virus	O	O	O	O
replication	O	O	O	O
in	O	O	O	O
different	O	O	O	O
T	B-cell_type	O	O	O
-	I-cell_type	O	O	O
cell	I-cell_type	O	O	O
types	I-cell_type	O	O	O
and	O	O	O	O
is	O	O	O	O
capable	O	O	O	O
of	O	O	O	O
changing	O	O	O	O
depending	O	O	O	O
on	O	O	O	O
the	O	O	O	O
particular	O	O	O	O
combination	O	O	O	O
of	O	O	O	O
transcriptional	B-protein	O	O	O
factors	I-protein	O	O	O
present	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Stimulation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
interferon	B-DNA	O	O	O
beta	I-DNA	O	O	O
gene	I-DNA	O	O	O
transcription	O	O	O	O
in	O	O	O	O
vitro	O	O	O	O
by	O	O	O	O
purified	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
a	O	O	O	O
novel	O	O	O	O
TH	B-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
human	B-protein	B-DNA	O	O
interferon	I-protein	I-DNA	O	O
beta	I-protein	I-DNA	O	O
(	O	I-DNA	O	O
IFN	B-protein	I-DNA	O	O
-	I-protein	I-DNA	O	O
beta	I-protein	I-DNA	O	O
)	O	I-DNA	O	O
regulatory	O	I-DNA	O	O
element	O	I-DNA	O	O
consists	O	O	O	O
of	O	O	O	O
multiple	O	O	O	O
enhanson	B-DNA	O	O	O
domains	I-DNA	O	O	O
which	O	O	O	O
are	O	O	O	O
targets	O	O	O	O
for	O	O	O	O
transcription	B-protein	O	O	O
factors	I-protein	O	O	O
involved	O	O	O	O
in	O	O	O	O
inducible	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
promoter	B-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

To	O	O	O	O
further	O	O	O	O
characterize	O	O	O	O
the	O	O	O	O
protein	O	O	O	O
-	O	O	O	O
DNA	O	O	O	O
interactions	O	O	O	O
mediating	O	O	O	O
IFN	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
beta	I-protein	O	O	O
induction	O	O	O	O
,	O	O	O	O
positive	B-DNA	B-protein	O	O
regulatory	I-DNA	I-protein	O	O
domain	I-DNA	I-protein	O	O
(	I-DNA	I-protein	O	O
PRD	I-DNA	I-protein	O	O
)	I-DNA	I-protein	O	O
II	I-DNA	I-protein	O	O
binding	O	I-protein	O	O
proteins	O	I-protein	O	O
were	O	O	O	O
purified	O	O	O	O
from	O	O	O	O
phorbol	O	O	O	O
ester	O	O	O	O
induced	O	O	O	O
Jurkat	B-cell_line	O	O	O
T	I-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
and	O	O	O	O
from	O	O	O	O
IFN	B-protein	B-cell_line	O	O
primed	O	I-cell_line	O	O
,	O	I-cell_line	O	O
cycloheximide	O	I-cell_line	O	O
/	O	I-cell_line	O	O
polyinosinic	O	I-cell_line	O	O
-	O	I-cell_line	O	O
polycytidylic	O	I-cell_line	O	O
acid	O	I-cell_line	O	O
treated	O	I-cell_line	O	O
HeLa	O	I-cell_line	O	O
S3	O	I-cell_line	O	O
cells	O	I-cell_line	O	O
.	O	O	O	O

From	O	O	O	O
HeLa	B-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
,	O	O	O	O
two	O	O	O	O
major	O	O	O	O
proteins	O	O	O	O
of	O	O	O	O
52	O	O	O	O
and	O	O	O	O
45	O	O	O	O
kilodaltons	O	O	O	O
(	O	O	O	O
kD	O	O	O	O
)	O	O	O	O
copurified	O	O	O	O
with	O	O	O	O
DNA	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
,	O	O	O	O
whereas	O	O	O	O
from	O	O	O	O
T	B-cell_type	O	O	O
-	I-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
,	O	O	O	O
four	O	O	O	O
proteins	O	O	O	O
-	O	O	O	O
-	O	O	O	O
a	O	O	O	O
major	B-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
of	O	O	O	O
52	B-protein	O	O	O
kD	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
three	O	O	O	O
minor	B-protein	O	O	O
proteins	I-protein	O	O	O
of	O	O	O	O
82	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
67	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
43	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
47	I-protein	O	O	O
kD	I-protein	O	O	O
-	O	O	O	O
-	O	O	O	O
were	O	O	O	O
purified	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Also	O	O	O	O
,	O	O	O	O
an	O	O	O	O
induction	O	O	O	O
specific	B-protein	O	O	O
DNA	I-protein	O	O	O
binding	I-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
was	O	O	O	O
purified	O	O	O	O
from	O	O	O	O
HeLa	B-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
that	O	O	O	O
interacted	O	O	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
(	O	O	O	O
AAGTGA	O	O	O	O
)	O	O	O	O
4	O	O	O	O
tetrahexamer	B-DNA	O	O	O
sequence	I-DNA	O	O	O
and	O	O	O	O
the	O	O	O	O
PRDI	B-DNA	O	O	O
domain	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

This	O	O	O	O
protein	O	O	O	O
is	O	O	O	O
immunologically	O	O	O	O
distinct	O	O	O	O
from	O	O	O	O
IRF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
/	I-protein	O	O	O
ISGF2	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Uninduced	O	O	O	O
or	O	O	O	O
Sendai	O	O	O	O
virus	O	O	O	O
induced	O	O	O	O
HeLa	O	O	O	O
extracts	O	O	O	O
were	O	O	O	O
used	O	O	O	O
to	O	O	O	O
examine	O	O	O	O
transcription	O	O	O	O
in	O	O	O	O
vitro	O	O	O	O
using	O	O	O	O
a	O	O	O	O
series	O	O	O	O
of	O	O	O	O
IFN	B-DNA	O	O	O
beta	I-DNA	O	O	O
promoter	I-DNA	O	O	O
deletions	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

Deletions	O	O	O	O
upstream	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
PRDII	B-DNA	O	O	O
element	I-DNA	O	O	O
increased	O	O	O	O
transcription	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
uninduced	O	O	O	O
extract	O	O	O	O
,	O	O	O	O
indicating	O	O	O	O
predominantly	O	O	O	O
negative	O	O	O	O
regulation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
promoter	B-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

A	O	O	O	O
2	O	O	O	O
-	O	O	O	O
4	O	O	O	O
-	O	O	O	O
fold	O	O	O	O
increase	O	O	O	O
in	O	O	O	O
IFN	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
beta	I-DNA	O	O	O
promoter	I-DNA	O	O	O
transcription	O	O	O	O
was	O	O	O	O
observed	O	O	O	O
in	O	O	O	O
Sendai	O	O	O	O
virus	O	O	O	O
induced	O	O	O	O
extracts	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
deletion	O	O	O	O
of	O	O	O	O
PRDI	B-DNA	O	O	O
and	O	O	O	O
PRDII	B-DNA	B-DNA	O	O
elements	O	I-DNA	O	O
decreased	O	O	O	O
this	O	O	O	O
induced	O	O	O	O
level	O	O	O	O
of	O	O	O	O
transcription	O	O	O	O
.	O	O	O	O

When	O	O	O	O
purified	O	O	O	O
PRDII	O	O	O	O
and	O	O	O	O
tetrahexamer	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
proteins	O	O	O	O
were	O	O	O	O
added	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
induced	O	O	O	O
extract	O	O	O	O
,	O	O	O	O
a	O	O	O	O
4	O	O	O	O
-	O	O	O	O
fold	O	O	O	O
increase	O	O	O	O
in	O	O	O	O
transcription	O	O	O	O
was	O	O	O	O
observed	O	O	O	O
.	O	O	O	O

These	O	O	O	O
experiments	O	O	O	O
demonstrate	O	O	O	O
that	O	O	O	O
it	O	O	O	O
is	O	O	O	O
possible	O	O	O	O
to	O	O	O	O
modulate	O	O	O	O
IFN	O	O	O	O
-	O	O	O	O
beta	O	O	O	O
transcription	O	O	O	O
in	O	O	O	O
vitro	O	O	O	O
but	O	O	O	O
indicate	O	O	O	O
that	O	O	O	O
additional	O	O	O	O
proteins	O	O	O	O
may	O	O	O	O
be	O	O	O	O
required	O	O	O	O
to	O	O	O	O
fully	O	O	O	O
activate	O	O	O	O
IFN	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
beta	I-protein	O	O	O
transcription	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
rhombotin	B-DNA	O	O	O
family	I-DNA	O	O	O
of	O	O	O	O
cysteine	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
rich	I-DNA	O	O	O
LIM	I-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
domain	I-DNA	O	O	O
oncogenes	I-DNA	O	O	O
:	O	O	O	O
distinct	O	O	O	O
members	O	O	O	O
are	O	O	O	O
involved	O	O	O	O
in	O	O	O	O
T	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
cell	I-DNA	O	O	O
translocations	I-DNA	O	O	O
to	O	O	O	O
human	O	O	O	O
chromosomes	O	O	O	O
11p15	O	O	O	O
and	O	O	O	O
11p13	O	O	O	O
.	O	O	O	O

A	O	O	O	O
chromosomal	O	O	O	O
translocation	O	O	O	O
in	O	O	O	O
a	O	O	O	O
T	O	O	O	O
-	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
leukemia	O	O	O	O
involving	O	O	O	O
the	O	O	O	O
short	B-DNA	O	O	O
arm	I-DNA	O	O	O
of	O	O	O	O
human	B-DNA	O	O	O
chromosome	I-DNA	O	O	O
11	I-DNA	O	O	O
at	O	O	O	O
band	B-DNA	O	O	O
11p15	I-DNA	O	O	O
disrupts	O	O	O	O
the	O	O	O	O
rhombotin	B-DNA	O	O	O
gene	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

This	O	O	O	O
gene	O	O	O	O
encodes	O	O	O	O
a	O	O	O	O
protein	O	O	O	O
with	O	O	O	O
duplicated	O	O	O	O
cysteine	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
rich	I-protein	O	O	O
regions	I-protein	O	O	O
called	O	O	O	O
LIM	B-protein	O	O	O
domains	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
which	O	O	O	O
show	O	O	O	O
homology	O	O	O	O
to	O	O	O	O
zinc	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
binding	I-protein	O	O	O
proteins	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
to	O	O	O	O
iron	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
sulfur	I-protein	O	O	O
centers	I-protein	O	O	O
of	O	O	O	O
ferredoxins	B-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Two	O	O	O	O
homologues	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
rhombotin	B-DNA	O	O	O
gene	I-DNA	O	O	O
have	O	O	O	O
now	O	O	O	O
been	O	O	O	O
isolated	O	O	O	O
.	O	O	O	O

One	O	O	O	O
of	O	O	O	O
these	O	O	O	O
,	O	O	O	O
designated	O	O	O	O
Rhom	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
2	I-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
is	O	O	O	O
located	O	O	O	O
on	O	O	O	O
human	B-DNA	O	O	O
chromosome	I-DNA	O	O	O
11	I-DNA	O	O	O
at	O	O	O	O
band	B-DNA	O	O	O
11p13	I-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
where	O	O	O	O
a	O	O	O	O
cluster	O	O	O	O
of	O	O	O	O
T	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
cell	I-DNA	O	O	O
leukemia	I-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
specific	I-DNA	O	O	O
translocations	I-DNA	O	O	O
occur	O	O	O	O
;	O	O	O	O
all	O	O	O	O
translocation	O	O	O	O
breakpoints	O	O	O	O
at	O	O	O	O
11p13	B-DNA	O	O	O
are	O	O	O	O
upstream	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
Rhom	B-DNA	B-DNA	O	O
-	I-DNA	I-DNA	O	O
2	I-DNA	I-DNA	O	O
gene	O	I-DNA	O	O
.	O	O	O	O

Human	O	O	O	O
and	O	O	O	O
mouse	O	O	O	O
Rhom	O	O	O	O
-	O	O	O	O
2	O	O	O	O
are	O	O	O	O
highly	O	O	O	O
conserved	O	O	O	O
and	O	O	O	O
,	O	O	O	O
like	O	O	O	O
rhombotin	B-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
encode	O	O	O	O
two	O	O	O	O
tandem	O	B-DNA	O	O
cysteine	O	I-DNA	O	O
-	O	I-DNA	O	O
rich	O	I-DNA	O	O
LIM	B-protein	I-DNA	O	O
domains	I-protein	I-DNA	O	O
.	O	O	O	O

Rhom	B-DNA	B-RNA	O	O
-	I-DNA	I-RNA	O	O
2	I-DNA	I-RNA	O	O
mRNA	O	I-RNA	O	O
is	O	O	O	O
expressed	O	O	O	O
in	O	O	O	O
early	O	O	O	O
mouse	O	O	O	O
development	O	O	O	O
in	O	O	O	O
central	O	O	O	O
nervous	O	O	O	O
system	O	O	O	O
,	O	O	O	O
lung	O	O	O	O
,	O	O	O	O
kidney	O	O	O	O
,	O	O	O	O
liver	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
spleen	O	O	O	O
but	O	O	O	O
only	O	O	O	O
very	O	O	O	O
low	O	O	O	O
levels	O	O	O	O
occur	O	O	O	O
in	O	O	O	O
thymus	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
other	O	O	O	O
gene	O	O	O	O
,	O	O	O	O
designated	O	O	O	O
Rhom	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
3	I-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
is	O	O	O	O
not	O	O	O	O
on	O	O	O	O
chromosome	O	O	O	O
11	O	O	O	O
but	O	O	O	O
also	O	O	O	O
retains	O	O	O	O
homology	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
LIM	B-DNA	O	O	O
domain	I-DNA	O	O	O
of	O	O	O	O
rhombotin	B-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

Since	O	O	O	O
the	O	O	O	O
Rhom	B-DNA	B-DNA	O	O
-	I-DNA	I-DNA	O	O
2	I-DNA	I-DNA	O	O
gene	O	I-DNA	O	O
is	O	O	O	O
such	O	O	O	O
a	O	O	O	O
common	O	O	O	O
site	O	O	O	O
of	O	O	O	O
chromosomal	O	O	O	O
damage	O	O	O	O
in	O	O	O	O
T	B-cell_type	O	O	O
-	I-cell_type	O	O	O
cell	I-cell_type	O	O	O
tumors	I-cell_type	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
consistency	O	O	O	O
of	O	O	O	O
translocations	O	O	O	O
near	O	O	O	O
the	O	O	O	O
rhombotin	B-DNA	B-DNA	O	O
gene	O	I-DNA	O	O
was	O	O	O	O
further	O	O	O	O
examined	O	O	O	O
.	O	O	O	O

A	O	O	O	O
second	O	O	O	O
translocation	O	O	O	O
adjacent	O	O	O	O
to	O	O	O	O
rhombotin	B-DNA	O	O	O
was	O	O	O	O
found	O	O	O	O
and	O	O	O	O
at	O	O	O	O
the	O	O	O	O
same	O	O	O	O
position	O	O	O	O
as	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
previous	O	O	O	O
example	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Therefore	O	O	O	O
,	O	O	O	O
chromosome	B-DNA	O	O	O
bands	I-DNA	O	O	O
11p15	I-DNA	O	O	O
(	O	O	O	O
rhombotin	B-DNA	O	O	O
)	O	O	O	O
and	O	O	O	O
11p13	B-DNA	O	O	O
(	O	O	O	O
Rhom	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
2	I-DNA	O	O	O
)	O	O	O	O
are	O	O	O	O
consistent	O	O	O	O
sites	O	O	O	O
of	O	O	O	O
chromosome	O	O	O	O
translocation	O	O	O	O
in	O	O	O	O
T	O	O	O	O
-	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
leukemia	O	O	O	O
,	O	O	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
11p15	B-DNA	O	O	O
target	I-DNA	O	O	O
more	O	O	O	O
rarely	O	O	O	O
involved	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
results	O	O	O	O
define	O	O	O	O
the	O	O	O	O
rhombotin	B-DNA	O	O	O
gene	O	O	O	O
family	O	O	O	O
as	O	O	O	O
a	O	O	O	O
class	O	O	O	O
of	O	O	O	O
T	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
cell	I-DNA	O	O	O
oncogenes	I-DNA	O	O	O
with	O	O	O	O
duplicated	O	O	O	O
cysteine	O	O	O	O
-	O	O	O	O
rich	O	O	O	O
LIM	B-protein	O	O	O
domains	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
activation	O	O	O	O
by	O	O	O	O
tumor	B-protein	O	O	O
necrosis	I-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
Jurkat	B-cell_line	O	O	O
T	I-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
line	I-cell_line	O	O	O
is	O	O	O	O
independent	O	O	O	O
of	O	O	O	O
protein	B-protein	O	O	O
kinase	I-protein	O	O	O
A	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
protein	B-protein	O	O	O
kinase	I-protein	O	O	O
C	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
Ca	B-protein	O	O	O
(	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
+	I-protein	O	O	O
)	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
regulated	I-protein	O	O	O
kinases	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
is	O	O	O	O
a	O	O	O	O
DNA	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
binding	I-protein	O	O	O
regulatory	I-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
able	O	O	O	O
to	O	O	O	O
control	O	O	O	O
transcription	O	O	O	O
of	O	O	O	O
a	O	O	O	O
number	O	O	O	O
of	O	O	O	O
genes	O	O	O	O
,	O	O	O	O
including	O	O	O	O
human	B-DNA	O	O	O
immunodeficiency	I-DNA	O	O	O
virus	I-DNA	O	O	O
(	I-DNA	O	O	O
HIV	I-DNA	O	O	O
)	I-DNA	O	O	O
genes	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
T	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
,	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
is	O	O	O	O
activated	O	O	O	O
upon	O	O	O	O
cellular	O	O	O	O
treatment	O	O	O	O
by	O	O	O	O
phorbol	O	O	O	O
esters	O	O	O	O
and	O	O	O	O
the	O	O	O	O
cytokine	O	O	O	O
tumor	B-protein	O	O	O
necrosis	I-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
TNF	B-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
the	O	O	O	O
present	O	O	O	O
work	O	O	O	O
,	O	O	O	O
we	O	O	O	O
investigated	O	O	O	O
the	O	O	O	O
molecular	O	O	O	O
events	O	O	O	O
leading	O	O	O	O
to	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
activation	O	O	O	O
by	O	O	O	O
TNF	B-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
a	O	O	O	O
human	B-cell_line	O	O	O
T	I-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
line	I-cell_line	O	O	O
(	O	O	O	O
Jurkat	B-cell_line	O	O	O
)	O	O	O	O
and	O	O	O	O
its	O	O	O	O
subclone	O	O	O	O
JCT6	B-cell_line	O	O	O
,	O	O	O	O
which	O	O	O	O
presents	O	O	O	O
a	O	O	O	O
deficiency	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
PKA	B-protein	O	O	O
transduction	O	O	O	O
pathway	O	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
found	O	O	O	O
that	O	O	O	O
in	O	O	O	O
both	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
lines	O	O	O	O
,	O	O	O	O
both	O	O	O	O
phorbol	O	O	O	O
ester	O	O	O	O
and	O	O	O	O
TNF	B-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
were	O	O	O	O
able	O	O	O	O
to	O	O	O	O
activate	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Phorbol	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
was	O	O	O	O
positively	O	O	O	O
modulated	O	O	O	O
by	O	O	O	O
Ca2	O	O	O	O
+	O	O	O	O
influx	O	O	O	O
while	O	O	O	O
TNF	B-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
activation	O	O	O	O
was	O	O	O	O
not	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Furthermore	O	O	O	O
,	O	O	O	O
while	O	O	O	O
PMA	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
was	O	O	O	O
inhibited	O	O	O	O
by	O	O	O	O
the	O	O	O	O
PKC	B-protein	O	O	O
inhibitor	O	O	O	O
staurosporin	O	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
TNF	B-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
effect	O	O	O	O
was	O	O	O	O
unchanged	O	O	O	O
.	O	O	O	O

TNF	B-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
did	O	O	O	O
not	O	O	O	O
activate	O	O	O	O
cAMP	O	O	O	O
production	O	O	O	O
and	O	O	O	O
its	O	O	O	O
signal	O	O	O	O
was	O	O	O	O
not	O	O	O	O
modulated	O	O	O	O
by	O	O	O	O
cAMP	O	O	O	O
activators	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Moreover	O	O	O	O
,	O	O	O	O
cAMP	O	O	O	O
activators	O	O	O	O
did	O	O	O	O
not	O	O	O	O
activate	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
Jurkat	B-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
.	O	O	O	O

Thus	O	O	O	O
,	O	O	O	O
TNF	B-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
-	O	O	O	O
induced	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
activation	O	O	O	O
was	O	O	O	O
found	O	O	O	O
to	O	O	O	O
be	O	O	O	O
mediated	O	O	O	O
by	O	O	O	O
none	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
major	O	O	O	O
signal	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
mediating	I-protein	O	O	O
kinases	I-protein	O	O	O
such	O	O	O	O
as	O	O	O	O
protein	B-protein	O	O	O
kinase	I-protein	O	O	O
C	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
PKC	B-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
,	O	O	O	O
protein	B-protein	O	O	O
kinase	I-protein	O	O	O
A	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
or	O	O	O	O
Ca	B-protein	O	O	O
(	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
+	I-protein	O	O	O
)	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
regulated	I-protein	O	O	O
kinases	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Furthermore	O	O	O	O
,	O	O	O	O
we	O	O	O	O
found	O	O	O	O
that	O	O	O	O
cytoplasmic	O	O	O	O
acidification	O	O	O	O
facilitated	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
activation	O	O	O	O
by	O	O	O	O
both	O	O	O	O
TNF	B-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
PKC	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
by	O	O	O	O
a	O	O	O	O
mechanism	O	O	O	O
that	O	O	O	O
increases	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
/	B-protein	O	O	O
I	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
dissociation	O	O	O	O
without	O	O	O	O
affecting	O	O	O	O
the	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
translocation	O	O	O	O
step	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
functional	O	O	O	O
domains	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
murine	B-DNA	O	O	O
Thy	I-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
1	I-DNA	O	O	O
gene	I-DNA	O	O	O
promoter	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
Thy	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
1	I-DNA	O	O	O
gene	I-DNA	O	O	O
promoter	I-DNA	O	O	O
resembles	O	O	O	O
a	O	O	O	O
"	B-DNA	O	O	O
housekeeping	I-DNA	O	O	O
"	I-DNA	O	O	O
promoter	I-DNA	O	O	O
in	O	O	O	O
that	O	O	O	O
it	O	O	O	O
is	O	O	O	O
located	O	O	O	O
within	O	O	O	O
a	O	O	O	O
methylation	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
free	I-DNA	O	O	O
island	I-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
lacks	O	O	O	O
a	O	O	O	O
canonical	B-DNA	O	O	O
TATA	I-DNA	O	O	O
box	I-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
displays	O	O	O	O
heterogeneity	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
5	B-RNA	O	O	O
'	I-RNA	O	O	O
-	I-RNA	O	O	O
end	I-RNA	O	O	O
termini	I-RNA	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
mRNA	B-RNA	O	O	O
.	O	O	O	O

Using	O	O	O	O
transgenic	O	O	O	O
mice	O	O	O	O
,	O	O	O	O
we	O	O	O	O
show	O	O	O	O
that	O	O	O	O
this	O	O	O	O
promoter	B-DNA	O	O	O
does	O	O	O	O
not	O	O	O	O
confer	O	O	O	O
any	O	O	O	O
tissue	O	O	O	O
specificity	O	O	O	O
and	O	O	O	O
is	O	O	O	O
active	O	O	O	O
only	O	O	O	O
in	O	O	O	O
a	O	O	O	O
position	O	O	O	O
-	O	O	O	O
dependent	O	O	O	O
manner	O	O	O	O
.	O	O	O	O

It	O	O	O	O
can	O	O	O	O
only	O	O	O	O
be	O	O	O	O
activated	O	O	O	O
in	O	O	O	O
a	O	O	O	O
tissue	O	O	O	O
-	O	O	O	O
specific	O	O	O	O
manner	O	O	O	O
by	O	O	O	O
elements	O	O	O	O
that	O	O	O	O
lie	O	O	O	O
downstream	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
initiation	B-DNA	O	O	O
site	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
have	O	O	O	O
analyzed	O	O	O	O
the	O	O	O	O
functional	O	O	O	O
domains	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
minimal	B-DNA	O	O	O
Thy	I-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
1	I-DNA	O	O	O
promoter	I-DNA	O	O	O
and	O	O	O	O
show	O	O	O	O
that	O	O	O	O
the	O	O	O	O
dominant	B-DNA	O	O	O
promoter	I-DNA	O	O	O
elements	I-DNA	O	O	O
consist	O	O	O	O
of	O	O	O	O
multiple	B-DNA	O	O	O
binding	I-DNA	O	O	O
sites	I-DNA	O	O	O
for	O	O	O	O
the	O	O	O	O
transcription	B-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
Sp1	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
an	O	O	O	O
inverted	O	O	O	O
CCAAT	B-DNA	O	O	O
box	I-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
sequences	O	O	O	O
proximal	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
transcription	B-DNA	O	O	O
start	I-DNA	O	O	O
site	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

DNase	O	O	O	O
I	O	O	O	O
and	O	O	O	O
gel	O	O	O	O
mobility	O	O	O	O
shift	O	O	O	O
assays	O	O	O	O
show	O	O	O	O
the	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
of	O	O	O	O
a	O	O	O	O
number	O	O	O	O
of	O	O	O	O
nuclear	B-protein	O	O	O
factors	I-protein	O	O	O
to	O	O	O	O
these	O	O	O	O
elements	B-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
including	O	O	O	O
Sp1	B-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
CP1	B-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Our	O	O	O	O
results	O	O	O	O
show	O	O	O	O
that	O	O	O	O
the	O	O	O	O
structure	O	O	O	O
of	O	O	O	O
this	O	O	O	O
promoter	B-DNA	O	O	O
only	O	O	O	O
permits	O	O	O	O
productive	O	O	O	O
interactions	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
two	O	O	O	O
transcription	B-protein	O	O	O
factors	I-protein	O	O	O
Sp1	B-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
CP1	B-protein	O	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
basal	O	O	O	O
transcription	O	O	O	O
machinery	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
presence	O	O	O	O
of	O	O	O	O
enhancer	B-DNA	O	O	O
sequences	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

Nuclear	B-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
activates	O	O	O	O
proenkephalin	O	O	O	O
transcription	O	O	O	O
in	O	O	O	O
T	B-cell_type	O	O	O
lymphocytes	I-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

Upon	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
,	O	O	O	O
T	B-cell_type	O	O	O
lymphocytes	I-cell_type	O	O	O
accumulate	O	O	O	O
high	O	O	O	O
levels	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
neuropeptide	O	O	O	O
enkephalin	O	O	O	O
which	O	O	O	O
correlate	O	O	O	O
with	O	O	O	O
high	O	O	O	O
levels	O	O	O	O
of	O	O	O	O
proenkephalin	B-RNA	O	O	O
mRNA	I-RNA	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
cells	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Here	O	O	O	O
we	O	O	O	O
investigated	O	O	O	O
the	O	O	O	O
transcriptional	O	O	O	O
basis	O	O	O	O
for	O	O	O	O
these	O	O	O	O
changes	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
proenkephalin	O	O	O	O
promoter	O	O	O	O
contains	O	O	O	O
a	O	O	O	O
sequence	O	O	O	O
GGGGACGTCCCC	O	O	O	O
,	O	O	O	O
named	O	O	O	O
B2	B-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
which	O	O	O	O
is	O	O	O	O
similar	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
kappa	B-DNA	O	O	O
B	I-DNA	O	O	O
sequence	I-DNA	O	O	O
GGGGACTTTCC	O	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
site	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
transcription	B-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
nuclear	B-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
(	I-protein	O	O	O
NF	I-protein	O	O	O
)	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Activation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
T	B-cell_type	O	O	O
lymphocytes	I-cell_type	O	O	O
induces	O	O	O	O
an	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
-	O	O	O	O
like	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
B2	B-DNA	O	O	O
site	O	O	O	O
,	O	O	O	O
concomitant	O	O	O	O
with	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
proenkephalin	B-DNA	O	O	O
promoter	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

Mutations	O	O	O	O
at	O	O	O	O
the	O	O	O	O
B2	B-DNA	O	O	O
site	O	O	O	O
abolish	O	O	O	O
this	O	O	O	O
transcriptional	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
purified	O	O	O	O
homodimer	B-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
two	O	O	O	O
p50s	B-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
DNA	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
binding	I-protein	O	O	O
subunit	I-protein	O	O	O
of	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
binds	O	O	O	O
the	O	O	O	O
B2	B-DNA	O	O	O
site	O	O	O	O
of	O	O	O	O
proenkephalin	O	O	O	O
relatively	O	O	O	O
better	O	O	O	O
than	O	O	O	O
does	O	O	O	O
the	O	O	O	O
heterotetramer	B-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
two	O	O	O	O
p65s	B-protein	O	O	O
plus	O	O	O	O
two	O	O	O	O
p50s	B-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
form	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
factor	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Thus	O	O	O	O
,	O	O	O	O
it	O	O	O	O
appears	O	O	O	O
that	O	O	O	O
the	O	O	O	O
T	O	O	O	O
-	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
-	O	O	O	O
specific	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
proenkephalin	B-DNA	O	O	O
promoter	I-DNA	O	O	O
is	O	O	O	O
mediated	O	O	O	O
by	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

However	O	O	O	O
,	O	O	O	O
as	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
is	O	O	O	O
ubiquitous	O	O	O	O
and	O	O	O	O
the	O	O	O	O
transcriptional	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
through	O	O	O	O
the	O	O	O	O
B2	B-DNA	O	O	O
site	O	O	O	O
is	O	O	O	O
T	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
specific	O	O	O	O
,	O	O	O	O
yet	O	O	O	O
another	O	O	O	O
T	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
cell	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
specific	I-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
which	O	O	O	O
synergizes	O	O	O	O
with	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
should	O	O	O	O
be	O	O	O	O
considered	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Induction	O	O	O	O
of	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
KB	I-protein	O	O	O
during	O	O	O	O
monocyte	B-cell_type	O	O	O
differentiation	O	O	O	O
by	O	O	O	O
HIV	O	O	O	O
type	O	O	O	O
1	O	O	O	O
infection	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
production	O	O	O	O
of	O	O	O	O
human	O	O	O	O
immunodeficiency	O	O	O	O
virus	O	O	O	O
type	O	O	O	O
1	O	O	O	O
(	O	O	O	O
HIV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
1	O	O	O	O
)	O	O	O	O
progeny	O	O	O	O
was	O	O	O	O
followed	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
U937	B-cell_line	O	O	O
promonocytic	I-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
line	I-cell_line	O	O	O
after	O	O	O	O
stimulation	O	O	O	O
either	O	O	O	O
with	O	O	O	O
retinoic	O	O	O	O
acid	O	O	O	O
or	O	O	O	O
PMA	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
in	O	O	O	O
purified	O	O	O	O
human	O	O	O	O
monocytes	O	O	O	O
and	O	O	O	O
macrophages	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Electrophoretic	O	O	O	O
mobility	O	O	O	O
shift	O	O	O	O
assays	O	O	O	O
and	O	O	O	O
Southwestern	O	O	O	O
blotting	O	O	O	O
experiments	O	O	O	O
were	O	O	O	O
used	O	O	O	O
to	O	O	O	O
detect	O	O	O	O
the	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
of	O	O	O	O
cellular	B-protein	O	O	O
transactivation	I-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
KB	I-protein	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
double	B-DNA	O	O	O
repeat	I-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
KB	I-DNA	O	O	O
enhancer	I-DNA	O	O	O
sequence	I-DNA	O	O	O
located	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
long	B-DNA	O	O	O
terminal	I-DNA	O	O	O
repeat	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

PMA	O	O	O	O
treatment	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
not	O	O	O	O
retinoic	O	O	O	O
acid	O	O	O	O
treatment	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
U937	B-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
acts	O	O	O	O
in	O	O	O	O
inducing	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
KB	I-protein	O	O	O
expression	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
nuclei	O	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
nuclear	O	O	O	O
extracts	O	O	O	O
from	O	O	O	O
monocytes	B-cell_type	O	O	O
or	O	O	O	O
macrophages	B-cell_type	O	O	O
,	O	O	O	O
induction	O	O	O	O
of	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
KB	I-protein	O	O	O
occurred	O	O	O	O
only	O	O	O	O
if	O	O	O	O
the	O	O	O	O
cells	O	O	O	O
were	O	O	O	O
previously	O	O	O	O
infected	O	O	O	O
with	O	O	O	O
HIV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
1	O	O	O	O
.	O	O	O	O

When	O	O	O	O
U937	B-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
were	O	O	O	O
infected	O	O	O	O
with	O	O	O	O
HIV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
1	O	O	O	O
,	O	O	O	O
no	O	O	O	O
induction	O	O	O	O
of	O	O	O	O
NF	B-protein	B-protein	O	O
-	I-protein	I-protein	O	O
KB	I-protein	I-protein	O	O
factor	O	I-protein	O	O
was	O	O	O	O
detected	O	O	O	O
,	O	O	O	O
whereas	O	O	O	O
high	O	O	O	O
level	O	O	O	O
of	O	O	O	O
progeny	O	O	O	O
virions	O	O	O	O
was	O	O	O	O
produced	O	O	O	O
,	O	O	O	O
suggesting	O	O	O	O
that	O	O	O	O
this	O	O	O	O
factor	O	O	O	O
was	O	O	O	O
not	O	O	O	O
required	O	O	O	O
for	O	O	O	O
viral	O	O	O	O
replication	O	O	O	O
.	O	O	O	O

These	O	O	O	O
results	O	O	O	O
indicate	O	O	O	O
that	O	O	O	O
in	O	O	O	O
monocytic	B-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
lineage	I-cell_line	O	O	O
,	O	O	O	O
HIV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
1	O	O	O	O
could	O	O	O	O
mimic	O	O	O	O
some	O	O	O	O
differentiation	O	O	O	O
/	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
stimuli	O	O	O	O
allowing	O	O	O	O
nuclear	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
KB	I-protein	O	O	O
expression	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Disruption	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
human	B-DNA	O	O	O
SCL	I-DNA	O	O	O
locus	I-DNA	O	O	O
by	O	O	O	O
"	O	O	O	O
illegitimate	O	O	O	O
"	O	O	O	O
V	O	O	O	O
-	O	O	O	O
(	O	O	O	O
D	O	O	O	O
)	O	O	O	O
-	O	O	O	O
J	O	O	O	O
recombinase	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
.	O	O	O	O

A	O	O	O	O
fusion	B-DNA	O	O	O
complementary	I-DNA	O	O	O
DNA	I-DNA	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
T	B-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
line	I-cell_line	O	O	O
HSB	I-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
2	I-cell_line	O	O	O
elucidates	O	O	O	O
a	O	O	O	O
provocative	O	O	O	O
mechanism	O	O	O	O
for	O	O	O	O
the	O	O	O	O
disruption	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
putative	O	O	O	O
hematopoietic	B-protein	O	O	O
transcription	I-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
SCL	B-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
fusion	B-DNA	O	O	O
cDNA	I-DNA	O	O	O
results	O	O	O	O
from	O	O	O	O
an	O	O	O	O
interstitial	O	O	O	O
deletion	O	O	O	O
between	O	O	O	O
a	O	O	O	O
previously	O	O	O	O
unknown	B-DNA	O	O	O
locus	I-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
SIL	B-DNA	O	O	O
(	O	O	O	O
SCL	B-protein	B-DNA	O	O
interrupting	O	I-DNA	O	O
locus	O	I-DNA	O	O
)	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
the	O	O	O	O
5	B-DNA	O	O	O
'	I-DNA	O	O	O
untranslated	I-DNA	O	O	O
region	I-DNA	O	O	O
of	O	O	O	O
SCL	B-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Similar	O	O	O	O
to	O	O	O	O
1	O	O	O	O
;	O	O	O	O
14	O	O	O	O
translocations	O	O	O	O
,	O	O	O	O
this	O	O	O	O
deletion	O	O	O	O
disrupts	O	O	O	O
the	O	O	O	O
SCL	B-protein	B-DNA	O	O
5	O	I-DNA	O	O
'	O	I-DNA	O	O
regulatory	O	I-DNA	O	O
region	O	I-DNA	O	O
.	O	O	O	O

This	O	O	O	O
event	O	O	O	O
is	O	O	O	O
probably	O	O	O	O
mediated	O	O	O	O
by	O	O	O	O
V	O	O	O	O
-	O	O	O	O
(	O	O	O	O
D	O	O	O	O
)	O	O	O	O
-	O	O	O	O
J	O	O	O	O
recombinase	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
,	O	O	O	O
although	O	O	O	O
neither	O	O	O	O
locus	O	O	O	O
is	O	O	O	O
an	O	O	O	O
immunoglobulin	B-protein	O	O	O
or	O	O	O	O
a	O	O	O	O
T	B-protein	O	O	O
cell	I-protein	O	O	O
receptor	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Two	O	O	O	O
other	O	O	O	O
T	B-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
lines	I-cell_line	O	O	O
,	O	O	O	O
CEM	B-cell_line	O	O	O
and	O	O	O	O
RPMI	B-cell_line	O	O	O
8402	I-cell_line	O	O	O
,	O	O	O	O
have	O	O	O	O
essentially	O	O	O	O
identical	O	O	O	O
deletions	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Thus	O	O	O	O
,	O	O	O	O
in	O	O	O	O
lymphocytes	B-cell_type	O	O	O
,	O	O	O	O
growth	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
affecting	I-DNA	O	O	O
genes	I-DNA	O	O	O
other	O	O	O	O
than	O	O	O	O
immune	B-protein	O	O	O
receptors	I-protein	O	O	O
risk	O	O	O	O
rearrangements	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Thyroid	B-protein	O	O	O
hormone	I-protein	O	O	O
receptors	I-protein	O	O	O
form	O	O	O	O
distinct	O	O	O	O
nuclear	O	O	O	O
protein	O	O	O	O
-	O	O	O	O
dependent	O	O	O	O
and	O	O	O	O
independent	O	O	O	O
complexes	O	O	O	O
with	O	O	O	O
a	O	O	O	O
thyroid	B-DNA	O	O	O
hormone	I-DNA	O	O	O
response	I-DNA	O	O	O
element	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
have	O	O	O	O
examined	O	O	O	O
the	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
of	O	O	O	O
nuclear	B-protein	O	O	O
proteins	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
recombinant	B-protein	O	O	O
thyroid	I-protein	O	O	O
hormone	I-protein	O	O	O
receptors	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
TRs	B-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
palindromic	B-DNA	O	O	O
thyroid	I-DNA	O	O	O
hormone	I-DNA	O	O	O
responsive	I-DNA	O	O	O
element	I-DNA	O	O	O
AGGTCATGACCT	O	O	O	O
(	O	O	O	O
TREp	B-DNA	O	O	O
)	O	O	O	O
using	O	O	O	O
a	O	O	O	O
gel	O	O	O	O
electrophoretic	O	O	O	O
mobility	O	O	O	O
shift	O	O	O	O
assay	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Four	O	O	O	O
specific	O	O	O	O
protein	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
DNA	I-protein	O	O	O
complexes	I-protein	O	O	O
were	O	O	O	O
detected	O	O	O	O
after	O	O	O	O
incubation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
nuclear	O	O	O	O
extracts	O	O	O	O
(	O	O	O	O
NE	O	O	O	O
)	O	O	O	O
from	O	O	O	O
T3	B-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
responsive	I-cell_line	O	O	O
pituitary	I-cell_line	O	O	O
(	I-cell_line	O	O	O
GH3	I-cell_line	O	O	O
)	I-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
with	O	O	O	O
a	O	O	O	O
TREp	B-DNA	B-DNA	O	O
-	O	I-DNA	O	O
containing	O	I-DNA	O	O
DNA	O	I-DNA	O	O
fragment	O	I-DNA	O	O
.	O	O	O	O

This	O	O	O	O
was	O	O	O	O
compared	O	O	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
TREp	B-DNA	O	O	O
binding	O	O	O	O
of	O	O	O	O
reticulocyte	O	B-protein	O	O
lysate	O	I-protein	O	O
-	O	I-protein	O	O
synthesized	O	I-protein	O	O
TRs	B-protein	I-protein	O	O
.	O	O	O	O

TR	B-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
TR	B-protein	O	O	O
beta	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
each	O	O	O	O
formed	O	O	O	O
a	O	O	O	O
single	O	O	O	O
major	O	O	O	O
TR	B-protein	B-protein	O	O
:	O	I-protein	O	O
TREp	B-DNA	I-protein	O	O
complex	O	I-protein	O	O
which	O	O	O	O
comigrated	O	O	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
least	O	O	O	O
retarded	O	O	O	O
complex	O	O	O	O
formed	O	O	O	O
by	O	O	O	O
GH3	O	O	O	O
NE	O	O	O	O
,	O	O	O	O
while	O	O	O	O
TR	B-protein	O	O	O
beta	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
formed	O	O	O	O
multiple	O	O	O	O
complexes	O	O	O	O
suggesting	O	O	O	O
that	O	O	O	O
it	O	O	O	O
can	O	O	O	O
bind	O	O	O	O
to	O	O	O	O
TREp	B-DNA	O	O	O
as	O	O	O	O
an	O	O	O	O
oligomer	B-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Interestingly	O	O	O	O
,	O	O	O	O
coincubation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
35S	O	B-protein	O	O
-	O	I-protein	O	O
TR	B-protein	I-protein	O	O
alpha	I-protein	I-protein	O	O
1	I-protein	I-protein	O	O
,	O	O	O	O
GH3	O	O	O	O
NE	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
unlabeled	O	O	O	O
TREp	B-DNA	O	O	O
resulted	O	O	O	O
in	O	O	O	O
not	O	O	O	O
only	O	O	O	O
the	O	O	O	O
35S	O	B-protein	O	O
-	O	I-protein	O	O
TR	O	I-protein	O	O
:	O	I-protein	O	O
TREp	B-DNA	I-protein	O	O
complex	O	I-protein	O	O
,	O	O	O	O
but	O	O	O	O
in	O	O	O	O
two	O	O	O	O
additional	O	O	O	O
more	O	O	O	O
greatly	O	O	O	O
retarded	O	O	O	O
complexes	O	O	O	O
containing	O	O	O	O
35S	O	B-protein	O	O
-	O	I-protein	O	O
TR	B-protein	I-protein	O	O
alpha	I-protein	I-protein	O	O
1	I-protein	I-protein	O	O
and	O	O	O	O
comigrating	O	O	O	O
with	O	O	O	O
those	O	O	O	O
formed	O	O	O	O
by	O	O	O	O
GH3	O	O	O	O
extract	O	O	O	O
alone	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Incubation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
each	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
TRs	B-protein	O	O	O
with	O	O	O	O
NE	O	O	O	O
from	O	O	O	O
COS	B-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
7	I-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
,	O	O	O	O
which	O	O	O	O
do	O	O	O	O
not	O	O	O	O
possess	O	O	O	O
sufficient	O	O	O	O
endogenous	O	O	O	O
TRs	B-protein	O	O	O
to	O	O	O	O
mediate	O	O	O	O
T3	O	O	O	O
-	O	O	O	O
responses	O	O	O	O
,	O	O	O	O
resulted	O	O	O	O
in	O	O	O	O
formation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
a	O	O	O	O
new	O	O	O	O
,	O	O	O	O
more	O	O	O	O
greatly	B-protein	O	O	O
shifted	I-protein	O	O	O
complex	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

A	O	O	O	O
similar	O	O	O	O
,	O	O	O	O
heat	O	O	O	O
labile	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
which	O	O	O	O
altered	O	O	O	O
mobility	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
TR	B-protein	O	O	O
:	I-protein	O	O	O
TRE	I-protein	O	O	O
complex	I-protein	O	O	O
was	O	O	O	O
also	O	O	O	O
present	O	O	O	O
in	O	O	O	O
NE	O	O	O	O
from	O	O	O	O
T3	B-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
unresponsive	I-cell_line	O	O	O
JEG	I-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
3	I-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
.	O	O	O	O

At	O	O	O	O
high	O	O	O	O
concentration	O	O	O	O
of	O	O	O	O
NE	O	O	O	O
,	O	O	O	O
all	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
TR	B-protein	O	O	O
bound	O	O	O	O
to	O	O	O	O
TREp	B-DNA	O	O	O
was	O	O	O	O
more	O	O	O	O
greatly	O	O	O	O
retarded	O	O	O	O
than	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
absence	O	O	O	O
of	O	O	O	O
NE	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Truncation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
TR	B-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
at	O	O	O	O
amino	B-protein	O	O	O
acid	I-protein	O	O	O
210	I-protein	O	O	O
prevented	O	O	O	O
additional	O	O	O	O
complex	O	O	O	O
formation	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
presence	O	O	O	O
of	O	O	O	O
NE	O	O	O	O
without	O	O	O	O
affecting	O	O	O	O
DNA	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
,	O	O	O	O
suggesting	O	O	O	O
that	O	O	O	O
the	O	O	O	O
carboxyl	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
terminus	I-protein	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
TRs	B-protein	O	O	O
is	O	O	O	O
essential	O	O	O	O
for	O	O	O	O
interaction	O	O	O	O
with	O	O	O	O
nuclear	B-protein	O	O	O
proteins	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

(	O	O	O	O
ABSTRACT	O	O	O	O
TRUNCATED	O	O	O	O
AT	O	O	O	O
250	O	O	O	O
WORDS	O	O	O	O
)	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Cell	O	O	O	O
-	O	O	O	O
specific	O	O	O	O
differences	O	O	O	O
in	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
NF	B-protein	B-DNA	O	O
-	I-protein	I-DNA	O	O
kappa	I-protein	I-DNA	O	O
B	I-protein	I-DNA	O	O
regulatory	O	I-DNA	O	O
elements	O	I-DNA	O	O
of	O	O	O	O
human	O	O	O	O
immunodeficiency	O	O	O	O
virus	O	O	O	O
and	O	O	O	O
beta	O	O	O	O
interferon	O	O	O	O
promoters	O	O	O	O
by	O	O	O	O
tumor	B-protein	O	O	O
necrosis	I-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Three	O	O	O	O
aspects	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
involvement	O	O	O	O
of	O	O	O	O
tumor	B-protein	O	O	O
necrosis	I-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
human	O	O	O	O
immunodeficiency	O	O	O	O
virus	O	O	O	O
(	O	O	O	O
HIV	O	O	O	O
)	O	O	O	O
pathogenesis	O	O	O	O
were	O	O	O	O
examined	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Tumor	B-protein	B-RNA	O	O
necrosis	I-protein	I-RNA	O	O
factor	I-protein	I-RNA	O	O
alpha	I-protein	I-RNA	O	O
(	O	I-RNA	O	O
TNF	B-protein	I-RNA	O	O
-	I-protein	I-RNA	O	O
alpha	I-protein	I-RNA	O	O
)	O	I-RNA	O	O
mRNA	O	I-RNA	O	O
production	O	O	O	O
was	O	O	O	O
analyzed	O	O	O	O
by	O	O	O	O
polymerase	O	O	O	O
chain	O	O	O	O
reaction	O	O	O	O
amplification	O	O	O	O
in	O	O	O	O
monocytic	B-cell_line	O	O	O
U937	I-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
and	O	O	O	O
in	O	O	O	O
a	O	O	O	O
chronically	B-cell_line	O	O	O
HIV	I-cell_line	O	O	O
infected	I-cell_line	O	O	O
U937	I-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
line	I-cell_line	O	O	O
(	O	O	O	O
U9	B-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
IIIB	I-cell_line	O	O	O
)	O	O	O	O
.	O	O	O	O

TNF	B-protein	B-RNA	O	O
-	I-protein	I-RNA	O	O
alpha	I-protein	I-RNA	O	O
RNA	O	I-RNA	O	O
was	O	O	O	O
undetectable	O	O	O	O
in	O	O	O	O
U937	B-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
,	O	O	O	O
whereas	O	O	O	O
a	O	O	O	O
low	O	O	O	O
constitutive	O	O	O	O
level	O	O	O	O
was	O	O	O	O
detected	O	O	O	O
in	O	O	O	O
U9	B-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
IIIB	I-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
.	O	O	O	O

Paramyxovirus	O	O	O	O
infection	O	O	O	O
induced	O	O	O	O
a	O	O	O	O
5	O	O	O	O
-	O	O	O	O
to	O	O	O	O
10	O	O	O	O
-	O	O	O	O
fold	O	O	O	O
increase	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
steady	O	O	O	O
-	O	O	O	O
state	O	O	O	O
level	O	O	O	O
of	O	O	O	O
TNF	B-protein	B-RNA	O	O
-	I-protein	I-RNA	O	O
alpha	I-protein	I-RNA	O	O
RNA	O	I-RNA	O	O
in	O	O	O	O
U9	B-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
IIIB	I-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
compared	O	O	O	O
with	O	O	O	O
U937	B-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
,	O	O	O	O
suggesting	O	O	O	O
that	O	O	O	O
HIV	B-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
infected	I-cell_line	O	O	O
monocytic	I-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
produced	O	O	O	O
higher	O	O	O	O
levels	O	O	O	O
of	O	O	O	O
TNF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
than	O	O	O	O
did	O	O	O	O
normal	O	O	O	O
cells	O	O	O	O
after	O	O	O	O
a	O	O	O	O
secondary	O	O	O	O
virus	O	O	O	O
infection	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
effects	O	O	O	O
of	O	O	O	O
TNF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
on	O	O	O	O
gene	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
were	O	O	O	O
examined	O	O	O	O
by	O	O	O	O
transient	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
assays	O	O	O	O
using	O	O	O	O
reporter	B-DNA	O	O	O
chloramphenicol	I-DNA	O	O	O
acetyltransferase	I-DNA	O	O	O
plasmids	I-DNA	O	O	O
linked	O	O	O	O
to	O	O	O	O
regulatory	B-DNA	O	O	O
elements	I-DNA	O	O	O
from	O	O	O	O
the	O	O	O	O
HIV	B-DNA	O	O	O
long	I-DNA	O	O	O
terminal	I-DNA	O	O	O
repeat	I-DNA	O	O	O
(	O	O	O	O
LTR	B-DNA	O	O	O
)	O	O	O	O
and	O	O	O	O
the	O	O	O	O
beta	B-DNA	O	O	O
interferon	I-DNA	O	O	O
promoter	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
U937	O	O	O	O
and	O	O	O	O
Jurkat	O	O	O	O
T	O	O	O	O
lymphoid	O	O	O	O
cells	O	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
inducibility	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
different	O	O	O	O
hybrid	B-DNA	O	O	O
promoters	I-DNA	O	O	O
by	O	O	O	O
TNF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
or	O	O	O	O
phorbol	O	O	O	O
ester	O	O	O	O
varied	O	O	O	O
in	O	O	O	O
a	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
type	O	O	O	O
-	O	O	O	O
and	O	O	O	O
promoter	O	O	O	O
context	O	O	O	O
-	O	O	O	O
specific	O	O	O	O
manner	O	O	O	O
;	O	O	O	O
the	O	O	O	O
levels	O	O	O	O
of	O	O	O	O
gene	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
of	O	O	O	O
NF	B-protein	B-DNA	O	O
-	I-protein	I-DNA	O	O
kappa	I-protein	I-DNA	O	O
B	I-protein	I-DNA	O	O
-	O	I-DNA	O	O
containing	O	I-DNA	O	O
plasmids	O	I-DNA	O	O
correlated	O	O	O	O
directly	O	O	O	O
with	O	O	O	O
induction	O	O	O	O
of	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
DNA	O	O	O	O
-	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Although	O	O	O	O
the	O	O	O	O
intact	O	O	O	O
beta	B-DNA	O	O	O
interferon	I-DNA	O	O	O
promoter	I-DNA	O	O	O
was	O	O	O	O
only	O	O	O	O
weakly	O	O	O	O
stimulated	O	O	O	O
by	O	O	O	O
phorbol	O	O	O	O
ester	O	O	O	O
or	O	O	O	O
TNF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
multimers	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
PRDII	O	B-DNA	O	O
NF	B-protein	I-DNA	O	O
-	I-protein	I-DNA	O	O
kappa	I-protein	I-DNA	O	O
B	I-protein	I-DNA	O	O
-	O	I-DNA	O	O
binding	O	I-DNA	O	O
domain	O	I-DNA	O	O
were	O	O	O	O
inducible	O	O	O	O
by	O	O	O	O
both	O	O	O	O
agents	O	O	O	O
.	O	O	O	O

TNF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
was	O	O	O	O
able	O	O	O	O
to	O	O	O	O
increase	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
HIV	B-DNA	O	O	O
LTR	I-DNA	O	O	O
in	O	O	O	O
T	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
,	O	O	O	O
but	O	O	O	O
in	O	O	O	O
monocytic	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
,	O	O	O	O
TNF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
did	O	O	O	O
not	O	O	O	O
induce	O	O	O	O
the	O	O	O	O
HIV	B-DNA	O	O	O
LTR	I-DNA	O	O	O
above	O	O	O	O
a	O	O	O	O
constitutive	O	O	O	O
level	O	O	O	O
of	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
.	O	O	O	O

This	O	O	O	O
level	O	O	O	O
of	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
-	O	O	O	O
independent	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
appears	O	O	O	O
to	O	O	O	O
be	O	O	O	O
sufficient	O	O	O	O
for	O	O	O	O
virus	O	O	O	O
multiplication	O	O	O	O
,	O	O	O	O
since	O	O	O	O
TNF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
treatment	O	O	O	O
had	O	O	O	O
no	O	O	O	O
effect	O	O	O	O
on	O	O	O	O
the	O	O	O	O
kinetics	O	O	O	O
of	O	O	O	O
de	O	O	O	O
novo	O	O	O	O
HIV	O	O	O	O
type	O	O	O	O
1	O	O	O	O
(	O	O	O	O
HIV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
1	O	O	O	O
)	O	O	O	O
infection	O	O	O	O
and	O	O	O	O
viral	B-RNA	O	O	O
RNA	I-RNA	O	O	O
production	O	O	O	O
in	O	O	O	O
U937	B-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
.	O	O	O	O

However	O	O	O	O
,	O	O	O	O
in	O	O	O	O
Jurkat	B-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
,	O	O	O	O
TNF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
dramatically	O	O	O	O
enhanced	O	O	O	O
the	O	O	O	O
spread	O	O	O	O
of	O	O	O	O
HIV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
1	O	O	O	O
through	O	O	O	O
the	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
population	O	O	O	O
and	O	O	O	O
increased	O	O	O	O
viral	B-RNA	O	O	O
RNA	I-RNA	O	O	O
synthesis	O	O	O	O
,	O	O	O	O
indicating	O	O	O	O
that	O	O	O	O
in	O	O	O	O
T	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
HIV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
1	O	O	O	O
multiplication	O	O	O	O
was	O	O	O	O
stimulated	O	O	O	O
by	O	O	O	O
TNF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
treatment	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Functional	O	O	O	O
analysis	O	O	O	O
of	O	O	O	O
cis	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
linked	I-DNA	O	O	O
regulatory	I-DNA	O	O	O
sequences	I-DNA	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
HLA	B-DNA	O	O	O
DRA	I-DNA	O	O	O
promoter	I-DNA	O	O	O
by	O	O	O	O
transcription	O	O	O	O
in	O	O	O	O
vitro	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Two	O	O	O	O
consensus	O	O	O	O
sequences	O	O	O	O
,	O	O	O	O
called	O	O	O	O
X	O	O	O	O
and	O	O	O	O
Y	O	O	O	O
boxes	O	O	O	O
,	O	O	O	O
capable	O	O	O	O
of	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
nuclear	B-protein	O	O	O
proteins	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
regulating	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
in	O	O	O	O
B	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
have	O	O	O	O
been	O	O	O	O
defined	O	O	O	O
within	O	O	O	O
the	O	O	O	O
immediate	O	O	O	O
upstream	O	O	O	O
region	O	O	O	O
of	O	O	O	O
major	B-DNA	O	O	O
histocompatibility	I-DNA	O	O	O
complex	I-DNA	O	O	O
(	I-DNA	O	O	O
MHC	I-DNA	O	O	O
)	I-DNA	O	O	O
class	I-DNA	O	O	O
II	I-DNA	O	O	O
promoters	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

Unlike	O	O	O	O
other	O	O	O	O
class	B-DNA	O	O	O
II	I-DNA	O	O	O
promoters	I-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
HLA	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
DR	I-DNA	O	O	O
alpha	I-DNA	O	O	O
(	I-DNA	O	O	O
DRA	I-DNA	O	O	O
)	I-DNA	O	O	O
promoter	I-DNA	O	O	O
also	O	O	O	O
contains	O	O	O	O
one	O	O	O	O
element	O	O	O	O
identical	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
"	B-DNA	O	O	O
octamer	I-DNA	O	O	O
"	I-DNA	O	O	O
motif	I-DNA	O	O	O
of	O	O	O	O
immunoglobulin	B-DNA	O	O	O
variable	I-DNA	O	O	O
region	I-DNA	O	O	O
promoters	I-DNA	O	O	O
that	O	O	O	O
is	O	O	O	O
responsible	O	O	O	O
for	O	O	O	O
B	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
-	O	O	O	O
specific	O	O	O	O
transcription	O	O	O	O
.	O	O	O	O

This	O	O	O	O
"	O	O	O	O
octamer	B-DNA	O	O	O
"	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
context	O	O	O	O
of	O	O	O	O
DRA	B-protein	O	O	O
appears	O	O	O	O
capable	O	O	O	O
of	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
both	O	O	O	O
the	O	O	O	O
ubiquitous	B-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
OTF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
and	O	O	O	O
lymphoid	O	B-protein	O	O
-	O	I-protein	O	O
specific	O	I-protein	O	O
(	O	I-protein	O	O
OTF	B-protein	I-protein	O	O
-	I-protein	I-protein	O	O
2	I-protein	I-protein	O	O
)	O	I-protein	O	O
"	O	I-protein	O	O
octamer	O	I-protein	O	O
"	O	I-protein	O	O
binding	O	I-protein	O	O
proteins	O	I-protein	O	O
,	O	O	O	O
but	O	O	O	O
at	O	O	O	O
least	O	O	O	O
one	O	O	O	O
other	O	O	O	O
distinct	O	O	O	O
"	B-protein	O	O	O
octamer	I-protein	O	O	O
"	I-protein	O	O	O
complex	I-protein	O	O	O
was	O	O	O	O
found	O	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
order	O	O	O	O
to	O	O	O	O
characterize	O	O	O	O
the	O	O	O	O
function	O	O	O	O
of	O	O	O	O
cis	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
acting	I-DNA	O	O	O
elements	I-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
we	O	O	O	O
have	O	O	O	O
developed	O	O	O	O
an	O	O	O	O
in	O	O	O	O
vitro	O	O	O	O
system	O	O	O	O
in	O	O	O	O
which	O	O	O	O
a	O	O	O	O
DRA	B-DNA	O	O	O
promoter	I-DNA	O	O	O
construct	I-DNA	O	O	O
is	O	O	O	O
transcribed	O	O	O	O
more	O	O	O	O
efficiently	O	O	O	O
in	O	O	O	O
extracts	O	O	O	O
from	O	O	O	O
B	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
than	O	O	O	O
in	O	O	O	O
extracts	O	O	O	O
from	O	O	O	O
class	B-cell_line	O	O	O
II	I-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
negative	I-cell_line	O	O	O
HeLa	I-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
.	O	O	O	O

5	O	O	O	O
'	O	O	O	O
deletion	O	O	O	O
constructs	O	O	O	O
which	O	O	O	O
lacked	O	O	O	O
the	O	O	O	O
Y	B-DNA	O	O	O
box	I-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
but	O	O	O	O
retained	O	O	O	O
the	O	O	O	O
"	B-DNA	O	O	O
octamer	I-DNA	O	O	O
"	I-DNA	O	O	O
motif	I-DNA	O	O	O
and	O	O	O	O
TATA	B-DNA	O	O	O
box	I-DNA	O	O	O
were	O	O	O	O
completely	O	O	O	O
inactive	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
internal	O	O	O	O
deletion	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
Y	B-DNA	O	O	O
box	I-DNA	O	O	O
reduced	O	O	O	O
transcription	O	O	O	O
by	O	O	O	O
95	O	O	O	O
%	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Using	O	O	O	O
supercoiled	O	O	O	O
,	O	O	O	O
but	O	O	O	O
not	O	O	O	O
linear	O	O	O	O
templates	O	O	O	O
,	O	O	O	O
we	O	O	O	O
observed	O	O	O	O
differences	O	O	O	O
in	O	O	O	O
transcription	O	O	O	O
efficiencies	O	O	O	O
from	O	O	O	O
templates	O	O	O	O
lacking	O	O	O	O
or	O	O	O	O
disrupting	O	O	O	O
the	O	O	O	O
X	B-DNA	O	O	O
consensus	I-DNA	O	O	O
element	I-DNA	O	O	O
that	O	O	O	O
reflect	O	O	O	O
effects	O	O	O	O
of	O	O	O	O
random	O	O	O	O
replacement	O	O	O	O
of	O	O	O	O
X	B-DNA	O	O	O
box	I-DNA	O	O	O
sequences	I-DNA	O	O	O
in	O	O	O	O
transient	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
assays	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Demonstration	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
complete	O	O	O	O
dependence	O	O	O	O
on	O	O	O	O
the	O	O	O	O
Y	B-DNA	O	O	O
box	I-DNA	O	O	O
in	O	O	O	O
this	O	O	O	O
system	O	O	O	O
suggests	O	O	O	O
that	O	O	O	O
,	O	O	O	O
despite	O	O	O	O
its	O	O	O	O
demonstrated	O	O	O	O
importance	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
DRA	B-DNA	O	O	O
promoter	I-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
DRA	B-DNA	O	O	O
"	I-DNA	O	O	O
octamer	I-DNA	O	O	O
"	I-DNA	O	O	O
does	O	O	O	O
not	O	O	O	O
utilize	O	O	O	O
OTF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
a	O	O	O	O
manner	O	O	O	O
analogous	O	O	O	O
to	O	O	O	O
immunoglobulin	B-DNA	O	O	O
promoters	I-DNA	O	O	O
in	O	O	O	O
B	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

Lipopolysaccharide	O	O	O	O
is	O	O	O	O
a	O	O	O	O
potent	O	O	O	O
monocyte	O	O	O	O
/	O	O	O	O
macrophage	O	O	O	O
-	O	O	O	O
specific	O	O	O	O
stimulator	O	O	O	O
of	O	O	O	O
human	O	O	O	O
immunodeficiency	O	O	O	O
virus	O	O	O	O
type	O	O	O	O
1	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Lipopolysaccharide	O	O	O	O
(	O	O	O	O
LPS	O	O	O	O
)	O	O	O	O
potently	O	O	O	O
stimulates	O	O	O	O
human	B-DNA	B-DNA	O	O
immunodeficiency	I-DNA	I-DNA	O	O
virus	I-DNA	I-DNA	O	O
type	I-DNA	I-DNA	O	O
1	I-DNA	I-DNA	O	O
-	I-DNA	I-DNA	O	O
long	I-DNA	I-DNA	O	O
terminal	I-DNA	I-DNA	O	O
repeat	I-DNA	I-DNA	O	O
(	O	I-DNA	O	O
HIV	B-DNA	I-DNA	O	O
-	I-DNA	I-DNA	O	O
1	I-DNA	I-DNA	O	O
-	I-DNA	I-DNA	O	O
LTR	I-DNA	I-DNA	O	O
)	O	I-DNA	O	O
CAT	O	I-DNA	O	O
constructs	O	I-DNA	O	O
transfected	O	O	O	O
into	O	O	O	O
monocyte	B-cell_line	O	O	O
/	I-cell_line	O	O	O
macrophage	I-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
like	I-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
lines	I-cell_line	O	O	O
but	O	O	O	O
not	O	O	O	O
a	O	O	O	O
T	B-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
line	I-cell_line	O	O	O
.	O	O	O	O

This	O	O	O	O
effect	O	O	O	O
appears	O	O	O	O
to	O	O	O	O
be	O	O	O	O
mediated	O	O	O	O
through	O	O	O	O
the	O	O	O	O
induction	O	O	O	O
of	O	O	O	O
nuclear	B-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Electrophoretic	O	O	O	O
mobility	O	O	O	O
shift	O	O	O	O
assays	O	O	O	O
demonstrate	O	O	O	O
that	O	O	O	O
LPS	O	O	O	O
induces	O	O	O	O
a	O	O	O	O
DNA	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
indistinguishable	O	O	O	O
from	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
U937	B-cell_line	O	O	O
and	O	O	O	O
THP	B-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
1	I-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
.	O	O	O	O

LPS	O	O	O	O
is	O	O	O	O
also	O	O	O	O
shown	O	O	O	O
to	O	O	O	O
dramatically	O	O	O	O
increase	O	O	O	O
HIV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
1	O	O	O	O
production	O	O	O	O
from	O	O	O	O
a	O	O	O	O
chronically	B-cell_line	O	O	O
infected	I-cell_line	O	O	O
monocyte	I-cell_line	O	O	O
/	I-cell_line	O	O	O
macrophage	I-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
like	I-cell_line	O	O	O
cloned	I-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
line	I-cell_line	O	O	O
,	O	O	O	O
U1	B-cell_line	O	O	O
,	O	O	O	O
which	O	O	O	O
produces	O	O	O	O
very	O	O	O	O
low	O	O	O	O
levels	O	O	O	O
of	O	O	O	O
HIV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
1	O	O	O	O
at	O	O	O	O
baseline	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
stimulation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
viral	O	O	O	O
production	O	O	O	O
from	O	O	O	O
this	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
line	O	O	O	O
occurs	O	O	O	O
only	O	O	O	O
if	O	O	O	O
these	O	O	O	O
cells	O	O	O	O
are	O	O	O	O
treated	O	O	O	O
with	O	O	O	O
granulocyte	B-protein	O	O	O
/	I-protein	O	O	O
macrophage	I-protein	O	O	O
colony	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
stimulating	I-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
GM	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
CSF	I-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
before	O	O	O	O
treatment	O	O	O	O
with	O	O	O	O
LPS	O	O	O	O
.	O	O	O	O

This	O	O	O	O
stimulation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
HIV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
1	O	O	O	O
production	O	O	O	O
is	O	O	O	O
correlated	O	O	O	O
with	O	O	O	O
an	O	O	O	O
increase	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
level	O	O	O	O
of	O	O	O	O
HIV	B-RNA	O	O	O
-	I-RNA	O	O	O
1	I-RNA	O	O	O
RNA	I-RNA	O	O	O
and	O	O	O	O
and	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

LPS	O	O	O	O
is	O	O	O	O
not	O	O	O	O
able	O	O	O	O
to	O	O	O	O
induce	O	O	O	O
HIV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
1	O	O	O	O
production	O	O	O	O
in	O	O	O	O
a	O	O	O	O
cloned	O	O	O	O
T	B-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
line	I-cell_line	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
effect	O	O	O	O
of	O	O	O	O
LPS	O	O	O	O
on	O	O	O	O
HIV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
1	O	O	O	O
replication	O	O	O	O
occurs	O	O	O	O
at	O	O	O	O
picogram	O	O	O	O
per	O	O	O	O
milliliter	O	O	O	O
concentrations	O	O	O	O
and	O	O	O	O
may	O	O	O	O
be	O	O	O	O
clinically	O	O	O	O
significant	O	O	O	O
in	O	O	O	O
understanding	O	O	O	O
the	O	O	O	O
variability	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
natural	O	O	O	O
history	O	O	O	O
of	O	O	O	O
HIV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
1	O	O	O	O
infection	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Steroid	O	O	O	O
dose	O	O	O	O
sparing	O	O	O	O
:	O	O	O	O
pharmacodynamic	O	O	O	O
responses	O	O	O	O
to	O	O	O	O
single	O	O	O	O
versus	O	O	O	O
divided	O	O	O	O
doses	O	O	O	O
of	O	O	O	O
methylprednisolone	O	O	O	O
in	O	O	O	O
man	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Inhibitory	O	O	O	O
drug	O	O	O	O
interactions	O	O	O	O
affecting	O	O	O	O
the	O	O	O	O
metabolism	O	O	O	O
of	O	O	O	O
methylprednisolone	O	O	O	O
(	O	O	O	O
MP	O	O	O	O
)	O	O	O	O
may	O	O	O	O
produce	O	O	O	O
either	O	O	O	O
steroid	O	O	O	O
sparing	O	O	O	O
or	O	O	O	O
adverse	O	O	O	O
effects	O	O	O	O
partly	O	O	O	O
by	O	O	O	O
increasing	O	O	O	O
the	O	O	O	O
exposure	O	O	O	O
time	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
steroid	O	O	O	O
.	O	O	O	O

This	O	O	O	O
phenomenon	O	O	O	O
can	O	O	O	O
be	O	O	O	O
mimicked	O	O	O	O
by	O	O	O	O
administering	O	O	O	O
MP	O	O	O	O
in	O	O	O	O
divided	O	O	O	O
doses	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Two	O	O	O	O
types	O	O	O	O
of	O	O	O	O
responses	O	O	O	O
were	O	O	O	O
compared	O	O	O	O
after	O	O	O	O
a	O	O	O	O
single	O	O	O	O
MP	O	O	O	O
dose	O	O	O	O
(	O	O	O	O
40	O	O	O	O
mg	O	O	O	O
bolus	O	O	O	O
)	O	O	O	O
and	O	O	O	O
a	O	O	O	O
divided	O	O	O	O
regimen	O	O	O	O
(	O	O	O	O
20	O	O	O	O
mg	O	O	O	O
bolus	O	O	O	O
and	O	O	O	O
a	O	O	O	O
5	O	O	O	O
mg	O	O	O	O
bolus	O	O	O	O
8	O	O	O	O
hours	O	O	O	O
later	O	O	O	O
)	O	O	O	O
in	O	O	O	O
six	O	O	O	O
healthy	O	O	O	O
male	O	O	O	O
volunteers	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
suppression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
basophils	B-cell_type	O	O	O
measured	O	O	O	O
as	O	O	O	O
whole	O	O	O	O
blood	O	O	O	O
histamine	O	O	O	O
and	O	O	O	O
plasma	O	O	O	O
cortisol	O	O	O	O
concentrations	O	O	O	O
was	O	O	O	O
assessed	O	O	O	O
during	O	O	O	O
32	O	O	O	O
hours	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
37	O	O	O	O
.	O	O	O	O
5	O	O	O	O
%	O	O	O	O
reduction	O	O	O	O
in	O	O	O	O
dose	O	O	O	O
produced	O	O	O	O
a	O	O	O	O
23	O	O	O	O
%	O	O	O	O
overall	O	O	O	O
decreased	O	O	O	O
blood	O	O	O	O
histamine	O	O	O	O
response	O	O	O	O
.	O	O	O	O

A	O	O	O	O
pharmacodynamic	O	O	O	O
model	O	O	O	O
for	O	O	O	O
basophil	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
distribution	O	O	O	O
to	O	O	O	O
and	O	O	O	O
from	O	O	O	O
an	O	O	O	O
extravascular	O	O	O	O
compartment	O	O	O	O
describes	O	O	O	O
the	O	O	O	O
effects	O	O	O	O
of	O	O	O	O
MP	O	O	O	O
after	O	O	O	O
both	O	O	O	O
regimens	O	O	O	O
.	O	O	O	O

A	O	O	O	O
slower	O	O	O	O
initial	O	O	O	O
decline	O	O	O	O
in	O	O	O	O
blood	O	O	O	O
histamine	O	O	O	O
after	O	O	O	O
the	O	O	O	O
divided	O	O	O	O
regimen	O	O	O	O
may	O	O	O	O
be	O	O	O	O
related	O	O	O	O
to	O	O	O	O
incomplete	O	O	O	O
suppression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
basophil	B-cell_type	O	O	O
cell	I-cell_type	O	O	O
return	O	O	O	O
to	O	O	O	O
blood	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
50	O	O	O	O
%	O	O	O	O
inhibitory	O	O	O	O
concentrations	O	O	O	O
of	O	O	O	O
MP	O	O	O	O
of	O	O	O	O
about	O	O	O	O
5	O	O	O	O
ng	O	O	O	O
/	O	O	O	O
ml	O	O	O	O
were	O	O	O	O
similar	O	O	O	O
for	O	O	O	O
both	O	O	O	O
regimens	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
decline	O	O	O	O
and	O	O	O	O
return	O	O	O	O
of	O	O	O	O
cortisol	O	O	O	O
concentrations	O	O	O	O
were	O	O	O	O
similar	O	O	O	O
between	O	O	O	O
MP	O	O	O	O
treatments	O	O	O	O
with	O	O	O	O
suppression	O	O	O	O
continuing	O	O	O	O
for	O	O	O	O
24	O	O	O	O
hours	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
50	O	O	O	O
%	O	O	O	O
inhibitory	O	O	O	O
concentrations	O	O	O	O
of	O	O	O	O
MP	O	O	O	O
values	O	O	O	O
for	O	O	O	O
adrenal	O	O	O	O
suppression	O	O	O	O
were	O	O	O	O
about	O	O	O	O
1	O	O	O	O
ng	O	O	O	O
/	O	O	O	O
ml	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Pharmacodynamic	O	O	O	O
modeling	O	O	O	O
is	O	O	O	O
useful	O	O	O	O
in	O	O	O	O
quantitating	O	O	O	O
corticosteroid	O	O	O	O
responses	O	O	O	O
and	O	O	O	O
generally	O	O	O	O
predicted	O	O	O	O
the	O	O	O	O
"	O	O	O	O
dose	O	O	O	O
-	O	O	O	O
sparing	O	O	O	O
"	O	O	O	O
effects	O	O	O	O
that	O	O	O	O
were	O	O	O	O
achieved	O	O	O	O
by	O	O	O	O
prolonging	O	O	O	O
MP	O	O	O	O
plasma	O	O	O	O
concentrations	O	O	O	O
.	O	O	O	O

This	O	O	O	O
study	O	O	O	O
supports	O	O	O	O
previous	O	O	O	O
clinical	O	O	O	O
observations	O	O	O	O
that	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
may	O	O	O	O
require	O	O	O	O
morning	O	O	O	O
through	O	O	O	O
evening	O	O	O	O
exposure	O	O	O	O
to	O	O	O	O
MP	O	O	O	O
to	O	O	O	O
optimize	O	O	O	O
efficacy	O	O	O	O
while	O	O	O	O
adrenal	O	O	O	O
suppression	O	O	O	O
is	O	O	O	O
being	O	O	O	O
minimized	O	O	O	O
.	O	O	O	O

1	O	O	O	O
,	O	O	O	O
25	O	O	O	O
(	O	O	O	O
OH	O	O	O	O
)	O	O	O	O
2D2	O	O	O	O
production	O	O	O	O
by	O	O	O	O
T	B-cell_type	O	O	O
lymphocytes	I-cell_type	O	O	O
and	O	O	O	O
alveolar	B-cell_type	O	O	O
macrophages	I-cell_type	O	O	O
recovered	O	O	O	O
by	O	O	O	O
lavage	O	O	O	O
from	O	O	O	O
normocalcemic	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
with	O	O	O	O
tuberculosis	O	O	O	O
.	O	O	O	O

To	O	O	O	O
compare	O	O	O	O
extra	O	O	O	O
-	O	O	O	O
renal	O	O	O	O
1	O	O	O	O
,	O	O	O	O
25	O	O	O	O
(	O	O	O	O
OH	O	O	O	O
)	O	O	O	O
2D3	O	O	O	O
production	O	O	O	O
in	O	O	O	O
different	O	O	O	O
types	O	O	O	O
of	O	O	O	O
granulomatous	O	O	O	O
disease	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
to	O	O	O	O
identify	O	O	O	O
the	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
types	O	O	O	O
responsible	O	O	O	O
,	O	O	O	O
we	O	O	O	O
have	O	O	O	O
evaluated	O	O	O	O
the	O	O	O	O
conversion	O	O	O	O
of	O	O	O	O
25	O	O	O	O
(	O	O	O	O
OH	O	O	O	O
)	O	O	O	O
D3	O	O	O	O
in	O	O	O	O
1	O	O	O	O
,	O	O	O	O
25	O	O	O	O
(	O	O	O	O
OH	O	O	O	O
)	O	O	O	O
2D3	O	O	O	O
by	O	O	O	O
uncultured	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
recovered	O	O	O	O
by	O	O	O	O
bronchoalveolar	O	O	O	O
lavage	O	O	O	O
and	O	O	O	O
blood	B-cell_type	O	O	O
mononuclear	I-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
from	O	O	O	O
normocalcemic	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
with	O	O	O	O
sarcoidosis	O	O	O	O
and	O	O	O	O
tuberculosis	O	O	O	O
.	O	O	O	O

1	O	O	O	O
,	O	O	O	O
25	O	O	O	O
(	O	O	O	O
OH	O	O	O	O
)	O	O	O	O
2D3	O	O	O	O
was	O	O	O	O
produced	O	O	O	O
both	O	O	O	O
by	O	O	O	O
lavage	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
(	O	O	O	O
12	O	O	O	O
/	O	O	O	O
12	O	O	O	O
tuberculosis	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
,	O	O	O	O
2	O	O	O	O
/	O	O	O	O
6	O	O	O	O
sarcoidosis	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
)	O	O	O	O
and	O	O	O	O
blood	B-cell_type	O	O	O
mononuclear	I-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
(	O	O	O	O
3	O	O	O	O
/	O	O	O	O
5	O	O	O	O
tuberculosis	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
,	O	O	O	O
0	O	O	O	O
/	O	O	O	O
3	O	O	O	O
sarcoidosis	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
)	O	O	O	O
from	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
but	O	O	O	O
not	O	O	O	O
controls	O	O	O	O
,	O	O	O	O
but	O	O	O	O
significantly	O	O	O	O
greater	O	O	O	O
amounts	O	O	O	O
were	O	O	O	O
produced	O	O	O	O
by	O	O	O	O
lavage	O	O	O	O
cells	O	O	O	O
from	O	O	O	O
tuberculosis	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
than	O	O	O	O
those	O	O	O	O
of	O	O	O	O
sarcoidosis	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
(	O	O	O	O
P	O	O	O	O
less	O	O	O	O
than	O	O	O	O
0	O	O	O	O
.	O	O	O	O
001	O	O	O	O
)	O	O	O	O
.	O	O	O	O

1	O	O	O	O
,	O	O	O	O
25	O	O	O	O
(	O	O	O	O
OH	O	O	O	O
)	O	O	O	O
2D3	O	O	O	O
production	O	O	O	O
by	O	O	O	O
lavage	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
from	O	O	O	O
tuberculosis	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
correlated	O	O	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
number	O	O	O	O
of	O	O	O	O
CD8	O	O	O	O
+	O	O	O	O
T	B-cell_type	O	O	O
lymphocytes	I-cell_type	O	O	O
present	O	O	O	O
but	O	O	O	O
not	O	O	O	O
other	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
types	O	O	O	O
.	O	O	O	O

T	B-cell_type	O	O	O
lymphocytes	I-cell_type	O	O	O
appeared	O	O	O	O
to	O	O	O	O
be	O	O	O	O
an	O	O	O	O
important	O	O	O	O
source	O	O	O	O
of	O	O	O	O
1	O	O	O	O
,	O	O	O	O
25	O	O	O	O
(	O	O	O	O
OH	O	O	O	O
)	O	O	O	O
2D3	O	O	O	O
production	O	O	O	O
,	O	O	O	O
since	O	O	O	O
purified	O	O	O	O
T	B-cell_type	O	O	O
lymphocytes	I-cell_type	O	O	O
from	O	O	O	O
all	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
with	O	O	O	O
tuberculosis	O	O	O	O
produced	O	O	O	O
1	O	O	O	O
,	O	O	O	O
25	O	O	O	O
(	O	O	O	O
OH	O	O	O	O
)	O	O	O	O
2D3	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
1	O	O	O	O
,	O	O	O	O
25	O	O	O	O
(	O	O	O	O
OH	O	O	O	O
)	O	O	O	O
2D3	O	O	O	O
production	O	O	O	O
by	O	O	O	O
these	O	O	O	O
cells	O	O	O	O
correlated	O	O	O	O
closely	O	O	O	O
with	O	O	O	O
that	O	O	O	O
produced	O	O	O	O
by	O	O	O	O
unseparated	O	O	O	O
lavage	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

Because	O	O	O	O
1	O	O	O	O
,	O	O	O	O
25	O	O	O	O
(	O	O	O	O
OH	O	O	O	O
)	O	O	O	O
2D3	O	O	O	O
can	O	O	O	O
improve	O	O	O	O
the	O	O	O	O
capacity	O	O	O	O
of	O	O	O	O
macrophages	B-cell_type	O	O	O
to	O	O	O	O
kill	O	O	O	O
mycobacteria	O	O	O	O
,	O	O	O	O
our	O	O	O	O
results	O	O	O	O
support	O	O	O	O
the	O	O	O	O
conclusion	O	O	O	O
that	O	O	O	O
macrophage	O	O	O	O
-	O	O	O	O
lymphocyte	O	O	O	O
interactions	O	O	O	O
,	O	O	O	O
mediated	O	O	O	O
at	O	O	O	O
least	O	O	O	O
in	O	O	O	O
part	O	O	O	O
by	O	O	O	O
1	O	O	O	O
,	O	O	O	O
25	O	O	O	O
(	O	O	O	O
OH	O	O	O	O
)	O	O	O	O
2D3	O	O	O	O
,	O	O	O	O
may	O	O	O	O
be	O	O	O	O
an	O	O	O	O
important	O	O	O	O
component	O	O	O	O
of	O	O	O	O
a	O	O	O	O
successful	O	O	O	O
antituberculous	O	O	O	O
immune	O	O	O	O
response	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Megakaryocytic	O	O	O	O
and	O	O	O	O
erythrocytic	O	O	O	O
lineages	O	O	O	O
share	O	O	O	O
specific	O	O	O	O
transcription	B-protein	O	O	O
factors	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Erythroid	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
specific	I-DNA	O	O	O
genes	I-DNA	O	O	O
contain	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
sites	O	O	O	O
for	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
E1	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
also	O	O	O	O
called	O	O	O	O
GF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
Eryf	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
;	O	O	O	O
refs	O	O	O	O
1	O	O	O	O
-	O	O	O	O
3	O	O	O	O
respectively	O	O	O	O
)	O	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
principal	O	O	O	O
DNA	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
binding	I-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
erythrocytic	B-cell_type	O	O	O
lineage	I-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
E1	I-protein	O	O	O
expression	O	O	O	O
seems	O	O	O	O
to	O	O	O	O
be	O	O	O	O
restricted	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
erythrocytic	B-cell_type	O	O	O
lineage	I-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

A	O	O	O	O
closely	O	O	O	O
related	O	O	O	O
(	O	O	O	O
if	O	O	O	O
not	O	O	O	O
identical	O	O	O	O
)	O	O	O	O
protein	O	O	O	O
is	O	O	O	O
found	O	O	O	O
in	O	O	O	O
both	O	O	O	O
a	O	O	O	O
human	B-cell_line	O	O	O
megakaryocytic	I-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
line	I-cell_line	O	O	O
and	O	O	O	O
purified	B-cell_line	O	O	O
human	I-cell_line	O	O	O
megakaryocytes	I-cell_line	O	O	O
;	O	O	O	O
it	O	O	O	O
binds	O	O	O	O
to	O	O	O	O
promoter	B-DNA	O	O	O
regions	I-DNA	O	O	O
of	O	O	O	O
two	O	O	O	O
megakaryocytic	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
specific	I-DNA	O	O	O
genes	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
sites	O	O	O	O
and	O	O	O	O
partial	O	O	O	O
proteolysis	O	O	O	O
profile	O	O	O	O
of	O	O	O	O
this	O	O	O	O
protein	O	O	O	O
are	O	O	O	O
indistinguishable	O	O	O	O
from	O	O	O	O
those	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
erythroid	B-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
;	O	O	O	O
also	O	O	O	O
,	O	O	O	O
NF	B-protein	B-RNA	O	O
-	I-protein	I-RNA	O	O
E1	I-protein	I-RNA	O	O
messenger	O	I-RNA	O	O
RNA	O	I-RNA	O	O
is	O	O	O	O
the	O	O	O	O
same	O	O	O	O
size	O	O	O	O
in	O	O	O	O
both	O	O	O	O
the	O	O	O	O
megakaryocytic	O	O	O	O
and	O	O	O	O
erythroid	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
lines	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Furthermore	O	O	O	O
,	O	O	O	O
point	O	O	O	O
mutations	O	O	O	O
that	O	O	O	O
abolish	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
of	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
E1	I-protein	O	O	O
result	O	O	O	O
in	O	O	O	O
a	O	O	O	O
70	O	O	O	O
%	O	O	O	O
decrease	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
transcriptional	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
of	O	O	O	O
a	O	O	O	O
megakaryocytic	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
specific	I-DNA	O	O	O
promoter	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
also	O	O	O	O
find	O	O	O	O
that	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
E2	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
another	O	O	O	O
trans	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
acting	I-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
erythrocytic	B-cell_type	O	O	O
lineage	I-cell_type	O	O	O
,	O	O	O	O
is	O	O	O	O
present	O	O	O	O
in	O	O	O	O
megakaryocytes	B-cell_line	O	O	O
.	O	O	O	O

Transcriptional	O	O	O	O
effects	O	O	O	O
in	O	O	O	O
both	O	O	O	O
lineages	O	O	O	O
might	O	O	O	O
then	O	O	O	O
be	O	O	O	O
mediated	O	O	O	O
in	O	O	O	O
part	O	O	O	O
by	O	O	O	O
the	O	O	O	O
same	O	O	O	O
specific	O	O	O	O
trans	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
acting	I-protein	O	O	O
factors	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Our	O	O	O	O
data	O	O	O	O
strengthen	O	O	O	O
the	O	O	O	O
idea	O	O	O	O
of	O	O	O	O
a	O	O	O	O
close	O	O	O	O
association	O	O	O	O
between	O	O	O	O
the	O	O	O	O
erythrocytic	O	O	O	O
and	O	O	O	O
the	O	O	O	O
megakaryocytic	O	O	O	O
lineages	O	O	O	O
and	O	O	O	O
could	O	O	O	O
also	O	O	O	O
explain	O	O	O	O
the	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
markers	O	O	O	O
specific	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
erythrocytic	O	O	O	O
and	O	O	O	O
megakaryocytic	O	O	O	O
lineages	O	O	O	O
in	O	O	O	O
most	O	O	O	O
erythroblastic	O	O	O	O
and	O	O	O	O
megakaryoblastic	O	O	O	O
permanent	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
lines	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Transcriptional	O	O	O	O
down	O	O	O	O
-	O	O	O	O
regulation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
c	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
myc	I-DNA	O	O	O
expression	O	O	O	O
by	O	O	O	O
protein	O	O	O	O
synthesis	O	O	O	O
-	O	O	O	O
dependent	O	O	O	O
and	O	O	O	O
-	O	O	O	O
independent	O	O	O	O
pathways	O	O	O	O
in	O	O	O	O
a	O	O	O	O
human	B-cell_line	O	O	O
T	I-cell_line	O	O	O
lymphoblastic	I-cell_line	O	O	O
tumor	I-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
line	I-cell_line	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
show	O	O	O	O
that	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
human	B-cell_line	O	O	O
T	I-cell_line	O	O	O
lymphoblastic	I-cell_line	O	O	O
tumor	I-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
line	I-cell_line	O	O	O
Molt4	O	B-RNA	O	O
c	B-DNA	I-RNA	O	O
-	I-DNA	I-RNA	O	O
myc	I-DNA	I-RNA	O	O
mRNA	O	I-RNA	O	O
and	O	O	O	O
protein	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
is	O	O	O	O
down	O	O	O	O
-	O	O	O	O
regulated	O	O	O	O
after	O	O	O	O
exposure	O	O	O	O
to	O	O	O	O
dimethyl	O	O	O	O
sulfoxide	O	O	O	O
,	O	O	O	O
to	O	O	O	O
phorbol	O	O	O	O
myristate	O	O	O	O
acetate	O	O	O	O
,	O	O	O	O
or	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
calcium	O	O	O	O
ionophore	O	O	O	O
A23187	O	O	O	O
,	O	O	O	O
which	O	O	O	O
raises	O	O	O	O
the	O	O	O	O
intracellular	O	O	O	O
calcium	O	O	O	O
concentration	O	O	O	O
.	O	O	O	O

A	O	O	O	O
block	O	O	O	O
to	O	O	O	O
RNA	O	O	O	O
elongation	O	O	O	O
is	O	O	O	O
largely	O	O	O	O
responsible	O	O	O	O
for	O	O	O	O
decreased	O	O	O	O
c	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
myc	I-DNA	O	O	O
transcription	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Although	O	O	O	O
negative	O	O	O	O
regulation	O	O	O	O
by	O	O	O	O
dimethyl	O	O	O	O
sulfoxide	O	O	O	O
takes	O	O	O	O
place	O	O	O	O
even	O	O	O	O
when	O	O	O	O
protein	O	O	O	O
synthesis	O	O	O	O
is	O	O	O	O
inhibited	O	O	O	O
by	O	O	O	O
cycloheximide	O	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
phorbol	O	O	O	O
myristate	O	O	O	O
acetate	O	O	O	O
effect	O	O	O	O
is	O	O	O	O
blocked	O	O	O	O
to	O	O	O	O
some	O	O	O	O
extent	O	O	O	O
only	O	O	O	O
by	O	O	O	O
cycloheximide	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
calcium	O	O	O	O
ionophore	O	O	O	O
-	O	O	O	O
induced	O	O	O	O
c	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
myc	I-DNA	O	O	O
suppression	O	O	O	O
,	O	O	O	O
however	O	O	O	O
,	O	O	O	O
strictly	O	O	O	O
requires	O	O	O	O
de	O	O	O	O
novo	O	O	O	O
protein	O	O	O	O
synthesis	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Therefore	O	O	O	O
,	O	O	O	O
two	O	O	O	O
different	O	O	O	O
negative	O	O	O	O
regulatory	O	O	O	O
pathways	O	O	O	O
are	O	O	O	O
involved	O	O	O	O
in	O	O	O	O
c	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
myc	I-DNA	O	O	O
regulation	O	O	O	O
:	O	O	O	O
one	O	O	O	O
which	O	O	O	O
is	O	O	O	O
independent	O	O	O	O
and	O	O	O	O
one	O	O	O	O
which	O	O	O	O
depends	O	O	O	O
on	O	O	O	O
de	O	O	O	O
novo	O	O	O	O
protein	O	O	O	O
synthesis	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
latter	O	O	O	O
one	O	O	O	O
appears	O	O	O	O
to	O	O	O	O
be	O	O	O	O
mediated	O	O	O	O
by	O	O	O	O
a	O	O	O	O
rapidly	O	O	O	O
calcium	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
dependent	I-protein	O	O	O
induced	I-protein	O	O	O
gene	I-protein	O	O	O
product	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Oestrogen	B-protein	O	O	O
receptor	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
ER	B-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
analysis	O	O	O	O
in	O	O	O	O
B	O	O	O	O
-	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
chronic	O	O	O	O
lymphocytic	O	O	O	O
leukemia	O	O	O	O
:	O	O	O	O
correlation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
biochemical	O	O	O	O
and	O	O	O	O
immunocytochemical	O	O	O	O
methods	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Oestrogen	B-protein	O	O	O
receptors	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
ER	B-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
are	O	O	O	O
present	O	O	O	O
in	O	O	O	O
neoplastic	B-cell_type	O	O	O
lymphoid	I-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
and	O	O	O	O
have	O	O	O	O
been	O	O	O	O
considered	O	O	O	O
a	O	O	O	O
physiological	O	O	O	O
marker	O	O	O	O
of	O	O	O	O
growth	O	O	O	O
rate	O	O	O	O
or	O	O	O	O
differentiation	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Tamoxifen	O	O	O	O
,	O	O	O	O
an	O	O	O	O
oestrogen	O	O	O	O
antagonist	O	O	O	O
,	O	O	O	O
has	O	O	O	O
been	O	O	O	O
given	O	O	O	O
in	O	O	O	O
some	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
with	O	O	O	O
CLL	O	O	O	O
and	O	O	O	O
Hodgkin	O	O	O	O
'	O	O	O	O
s	O	O	O	O
disease	O	O	O	O
,	O	O	O	O
with	O	O	O	O
dramatic	O	O	O	O
response	O	O	O	O
in	O	O	O	O
single	O	O	O	O
cases	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Until	O	O	O	O
now	O	O	O	O
,	O	O	O	O
ER	B-protein	O	O	O
status	O	O	O	O
has	O	O	O	O
been	O	O	O	O
assessed	O	O	O	O
using	O	O	O	O
a	O	O	O	O
steroid	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
assay	O	O	O	O
(	O	O	O	O
SBA	O	O	O	O
)	O	O	O	O
which	O	O	O	O
has	O	O	O	O
many	O	O	O	O
inherent	O	O	O	O
problems	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Recently	O	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
development	O	O	O	O
of	O	O	O	O
monoclonal	O	O	O	O
antibodies	O	O	O	O
directed	O	O	O	O
against	O	O	O	O
ER	B-protein	O	O	O
has	O	O	O	O
been	O	O	O	O
applied	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
study	O	O	O	O
of	O	O	O	O
breast	O	O	O	O
carcinomas	O	O	O	O
and	O	O	O	O
results	O	O	O	O
obtained	O	O	O	O
show	O	O	O	O
good	O	O	O	O
correlation	O	O	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
quantitative	O	O	O	O
SBA	O	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
studied	O	O	O	O
49	O	O	O	O
cases	O	O	O	O
of	O	O	O	O
B	O	O	O	O
-	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
chronic	O	O	O	O
lymphocytic	O	O	O	O
leukemia	O	O	O	O
(	O	O	O	O
CLL	O	O	O	O
)	O	O	O	O
using	O	O	O	O
immunostaining	O	O	O	O
of	O	O	O	O
cytospin	O	O	O	O
preparations	O	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
30	O	O	O	O
of	O	O	O	O
these	O	O	O	O
cases	O	O	O	O
ER	B-protein	O	O	O
enzyme	O	O	O	O
immunoassay	O	O	O	O
(	O	O	O	O
ER	B-protein	O	O	O
-	O	O	O	O
EIA	O	O	O	O
)	O	O	O	O
was	O	O	O	O
also	O	O	O	O
performed	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Cultured	B-cell_line	O	O	O
MCF	I-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
7	I-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
,	O	O	O	O
derived	O	O	O	O
from	O	O	O	O
a	O	O	O	O
pleural	O	O	O	O
effusion	O	O	O	O
of	O	O	O	O
a	O	O	O	O
breast	O	O	O	O
cancer	O	O	O	O
patient	O	O	O	O
,	O	O	O	O
known	O	O	O	O
to	O	O	O	O
contain	O	O	O	O
high	O	O	O	O
levels	O	O	O	O
of	O	O	O	O
ER	B-protein	O	O	O
were	O	O	O	O
used	O	O	O	O
as	O	O	O	O
a	O	O	O	O
positive	O	O	O	O
control	O	O	O	O
(	O	O	O	O
40	O	O	O	O
-	O	O	O	O
48	O	O	O	O
%	O	O	O	O
ER	B-protein	B-cell_type	O	O
positive	O	I-cell_type	O	O
cells	O	I-cell_type	O	O
by	O	O	O	O
immunocytochemistry	O	O	O	O
;	O	O	O	O
200	O	O	O	O
fmol	O	O	O	O
/	O	O	O	O
mg	O	O	O	O
protein	O	O	O	O
by	O	O	O	O
EIA	O	O	O	O
)	O	O	O	O
.	O	O	O	O

All	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
CLL	O	O	O	O
cases	O	O	O	O
except	O	O	O	O
two	O	O	O	O
(	O	O	O	O
96	O	O	O	O
%	O	O	O	O
)	O	O	O	O
were	O	O	O	O
negative	O	O	O	O
for	O	O	O	O
ER	B-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
less	O	O	O	O
than	O	O	O	O
1	O	O	O	O
%	O	O	O	O
staining	O	O	O	O
;	O	O	O	O
less	O	O	O	O
than	O	O	O	O
4	O	O	O	O
fmol	O	O	O	O
/	O	O	O	O
mg	O	O	O	O
protein	O	O	O	O
)	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
two	O	O	O	O
positive	O	O	O	O
cases	O	O	O	O
expressed	O	O	O	O
granular	O	O	O	O
ER	B-protein	O	O	O
staining	O	O	O	O
over	O	O	O	O
the	O	O	O	O
nucleus	O	O	O	O
(	O	O	O	O
9	O	O	O	O
.	O	O	O	O
2	O	O	O	O
and	O	O	O	O
12	O	O	O	O
.	O	O	O	O
1	O	O	O	O
%	O	O	O	O
positive	O	O	O	O
cells	O	O	O	O
)	O	O	O	O
and	O	O	O	O
were	O	O	O	O
positive	O	O	O	O
by	O	O	O	O
EIA	O	O	O	O
and	O	O	O	O
SBA	O	O	O	O
.	O	O	O	O

It	O	O	O	O
is	O	O	O	O
concluded	O	O	O	O
that	O	O	O	O
(	O	O	O	O
i	O	O	O	O
)	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
with	O	O	O	O
CLL	O	O	O	O
rarely	O	O	O	O
express	O	O	O	O
ER	B-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
(	O	O	O	O
ii	O	O	O	O
)	O	O	O	O
immunocytochemical	O	O	O	O
staining	O	O	O	O
of	O	O	O	O
cytospin	O	O	O	O
preparations	O	O	O	O
is	O	O	O	O
a	O	O	O	O
valid	O	O	O	O
technique	O	O	O	O
for	O	O	O	O
the	O	O	O	O
measurement	O	O	O	O
of	O	O	O	O
ER	B-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

It	O	O	O	O
is	O	O	O	O
of	O	O	O	O
interest	O	O	O	O
that	O	O	O	O
one	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
positive	O	O	O	O
cases	O	O	O	O
was	O	O	O	O
diagnosed	O	O	O	O
as	O	O	O	O
CLL	O	O	O	O
with	O	O	O	O
Richter	O	O	O	O
'	O	O	O	O
s	O	O	O	O
transformation	O	O	O	O
confirming	O	O	O	O
earlier	O	O	O	O
findings	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Type	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
II	I-protein	O	O	O
estrogen	I-protein	O	O	O
binding	I-protein	O	O	O
sites	I-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
a	O	O	O	O
lymphoblastoid	B-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
line	I-cell_line	O	O	O
and	O	O	O	O
growth	O	O	O	O
-	O	O	O	O
inhibitory	O	O	O	O
effect	O	O	O	O
of	O	O	O	O
estrogen	O	O	O	O
,	O	O	O	O
anti	O	O	O	O
-	O	O	O	O
estrogen	O	O	O	O
and	O	O	O	O
bioflavonoids	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Type	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
II	I-protein	O	O	O
estrogen	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
binding	I-protein	O	O	O
sites	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
type	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
II	I-protein	O	O	O
EBS	I-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
have	O	O	O	O
been	O	O	O	O
demonstrated	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
human	O	B-cell_line	O	O
lymphoblastoid	B-cell_line	I-cell_line	O	O
cell	I-cell_line	I-cell_line	O	O
line	I-cell_line	I-cell_line	O	O
IM	B-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
9	I-cell_line	O	O	O
using	O	O	O	O
a	O	O	O	O
whole	O	O	O	O
-	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
assay	O	O	O	O
with	O	O	O	O
(	O	O	O	O
6	O	O	O	O
,	O	O	O	O
7	O	O	O	O
-	O	O	O	O
3H	O	O	O	O
)	O	O	O	O
estradiol	O	O	O	O
(	O	O	O	O
3H	O	O	O	O
-	O	O	O	O
E2	O	O	O	O
)	O	O	O	O
as	O	O	O	O
tracer	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Competition	O	O	O	O
analysis	O	O	O	O
showed	O	O	O	O
that	O	O	O	O
the	O	O	O	O
anti	O	O	O	O
-	O	O	O	O
estrogen	O	O	O	O
tamoxifen	O	O	O	O
and	O	O	O	O
the	O	O	O	O
flavonoids	O	O	O	O
quercetin	O	O	O	O
and	O	O	O	O
rutin	O	O	O	O
competed	O	O	O	O
for	O	O	O	O
(	O	O	O	O
3H	O	O	O	O
)	O	O	O	O
-	O	O	O	O
E2	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
to	O	O	O	O
type	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
II	I-protein	O	O	O
EBS	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Growth	O	O	O	O
experiments	O	O	O	O
demonstrated	O	O	O	O
that	O	O	O	O
diethylstilbestrol	O	O	O	O
(	O	O	O	O
DES	O	O	O	O
)	O	O	O	O
tamoxifen	O	O	O	O
(	O	O	O	O
TAM	O	O	O	O
)	O	O	O	O
,	O	O	O	O
quercetin	O	O	O	O
and	O	O	O	O
rutin	O	O	O	O
exerted	O	O	O	O
a	O	O	O	O
reversible	O	O	O	O
dose	O	O	O	O
-	O	O	O	O
dependent	O	O	O	O
inhibition	O	O	O	O
of	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
proliferation	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
range	O	O	O	O
of	O	O	O	O
concentrations	O	O	O	O
between	O	O	O	O
10	O	O	O	O
nM	O	O	O	O
and	O	O	O	O
10	O	O	O	O
microM	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
relative	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
affinity	O	O	O	O
of	O	O	O	O
quercetin	O	O	O	O
,	O	O	O	O
rutin	O	O	O	O
,	O	O	O	O
DES	O	O	O	O
and	O	O	O	O
TAM	O	O	O	O
for	O	O	O	O
type	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
II	I-protein	O	O	O
EBS	I-protein	O	O	O
correlated	O	O	O	O
well	O	O	O	O
with	O	O	O	O
their	O	O	O	O
potency	O	O	O	O
as	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
growth	O	O	O	O
inhibitors	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Moreover	O	O	O	O
,	O	O	O	O
hesperidin	O	O	O	O
,	O	O	O	O
a	O	O	O	O
flavonoid	O	O	O	O
which	O	O	O	O
does	O	O	O	O
not	O	O	O	O
bind	O	O	O	O
to	O	O	O	O
type	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
II	I-protein	O	O	O
EBS	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
was	O	O	O	O
ineffective	O	O	O	O
in	O	O	O	O
inhibiting	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
growth	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Cell	O	O	O	O
-	O	O	O	O
cycle	O	O	O	O
analysis	O	O	O	O
showed	O	O	O	O
that	O	O	O	O
the	O	O	O	O
growth	O	O	O	O
-	O	O	O	O
inhibitory	O	O	O	O
effect	O	O	O	O
of	O	O	O	O
DES	O	O	O	O
,	O	O	O	O
TAM	O	O	O	O
or	O	O	O	O
quercetin	O	O	O	O
was	O	O	O	O
due	O	O	O	O
to	O	O	O	O
a	O	O	O	O
blocking	O	O	O	O
effect	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
G0	O	O	O	O
-	O	O	O	O
G1	O	O	O	O
phases	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Our	O	O	O	O
results	O	O	O	O
suggest	O	O	O	O
that	O	O	O	O
high	O	O	O	O
estrogen	O	O	O	O
and	O	O	O	O
anti	O	O	O	O
-	O	O	O	O
estrogen	O	O	O	O
concentrations	O	O	O	O
and	O	O	O	O
flavonoids	O	O	O	O
may	O	O	O	O
regulate	O	O	O	O
IM	B-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
9	I-cell_line	O	O	O
cell	O	O	O	O
growth	O	O	O	O
through	O	O	O	O
a	O	O	O	O
common	O	O	O	O
mechanism	O	O	O	O
involving	O	O	O	O
a	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
interaction	O	O	O	O
with	O	O	O	O
type	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
II	I-protein	O	O	O
EBS	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

[	O	O	O	O
Glucocorticoid	B-protein	O	O	O
receptors	I-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
peripheral	B-cell_type	O	O	O
blood	I-cell_type	O	O	O
lymphocytes	I-cell_type	O	O	O
of	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
with	O	O	O	O
bronchial	O	O	O	O
asthma	O	O	O	O
]	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Quantitation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
glucocorticoid	B-protein	O	O	O
receptors	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
GCR	B-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
and	O	O	O	O
the	O	O	O	O
study	O	O	O	O
of	O	O	O	O
their	O	O	O	O
affinity	O	O	O	O
for	O	O	O	O
glucocorticosteroids	O	O	O	O
(	O	O	O	O
GCS	O	O	O	O
)	O	O	O	O
were	O	O	O	O
made	O	O	O	O
in	O	O	O	O
peripheral	B-cell_type	O	O	O
blood	I-cell_type	O	O	O
lymphocytes	I-cell_type	O	O	O
of	O	O	O	O
bronchial	O	O	O	O
asthma	O	O	O	O
(	O	O	O	O
BA	O	O	O	O
)	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
in	O	O	O	O
consideration	O	O	O	O
of	O	O	O	O
GCR	B-protein	O	O	O
treatment	O	O	O	O
and	O	O	O	O
serum	O	O	O	O
levels	O	O	O	O
of	O	O	O	O
endogenous	O	O	O	O
cortisol	O	O	O	O
.	O	O	O	O

It	O	O	O	O
is	O	O	O	O
stated	O	O	O	O
that	O	O	O	O
GCR	B-protein	O	O	O
of	O	O	O	O
healthy	O	O	O	O
controls	O	O	O	O
and	O	O	O	O
GCS	O	O	O	O
-	O	O	O	O
untreated	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
outnumbered	O	O	O	O
those	O	O	O	O
of	O	O	O	O
cortisol	O	O	O	O
-	O	O	O	O
dependent	O	O	O	O
BA	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
on	O	O	O	O
hormone	O	O	O	O
therapy	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Following	O	O	O	O
discontinuation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
glucocorticoid	O	O	O	O
drugs	O	O	O	O
GCR	B-protein	O	O	O
count	O	O	O	O
in	O	O	O	O
cortisol	O	O	O	O
-	O	O	O	O
dependent	O	O	O	O
BA	O	O	O	O
tends	O	O	O	O
to	O	O	O	O
rise	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Endogenous	O	O	O	O
cortisol	O	O	O	O
has	O	O	O	O
no	O	O	O	O
effect	O	O	O	O
on	O	O	O	O
GCR	B-protein	O	O	O
level	O	O	O	O
estimated	O	O	O	O
by	O	O	O	O
3H	O	O	O	O
-	O	O	O	O
triamcinolone	O	O	O	O
acetonide	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Two	O	O	O	O
glucocorticoid	B-protein	O	O	O
binding	I-protein	O	O	O
sites	I-protein	O	O	O
on	O	O	O	O
the	O	O	O	O
human	B-protein	O	O	O
glucocorticoid	I-protein	O	O	O
receptor	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Glucocorticoids	O	O	O	O
are	O	O	O	O
known	O	O	O	O
to	O	O	O	O
have	O	O	O	O
a	O	O	O	O
lytic	O	O	O	O
effect	O	O	O	O
in	O	O	O	O
leukemic	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
via	O	O	O	O
interactions	O	O	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
glucocorticoid	B-protein	O	O	O
receptor	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
GR	B-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Cortisol	O	O	O	O
and	O	O	O	O
various	O	O	O	O
synthetic	O	O	O	O
glucocorticoids	O	O	O	O
bind	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
GR	B-protein	O	O	O
with	O	O	O	O
one	O	O	O	O
-	O	O	O	O
site	O	O	O	O
kinetics	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Cortivazol	O	O	O	O
(	O	O	O	O
CVZ	O	O	O	O
)	O	O	O	O
is	O	O	O	O
a	O	O	O	O
unique	O	O	O	O
,	O	O	O	O
high	O	O	O	O
potency	O	O	O	O
synthetic	O	O	O	O
glucocorticoid	O	O	O	O
,	O	O	O	O
which	O	O	O	O
has	O	O	O	O
a	O	O	O	O
phenylpyrazol	O	O	O	O
fused	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
A	O	O	O	O
-	O	O	O	O
ring	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
steroid	O	O	O	O
nucleus	O	O	O	O
and	O	O	O	O
displays	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
consistent	O	O	O	O
with	O	O	O	O
two	O	O	O	O
or	O	O	O	O
more	O	O	O	O
sites	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
cytosol	O	O	O	O
from	O	O	O	O
CEM	B-cell_line	O	O	O
C7	I-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
(	O	O	O	O
a	O	O	O	O
human	B-cell_line	O	O	O
acute	I-cell_line	O	O	O
lymphoblastic	I-cell_line	O	O	O
T	I-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
line	I-cell_line	O	O	O
)	O	O	O	O
.	O	O	O	O

It	O	O	O	O
has	O	O	O	O
previously	O	O	O	O
been	O	O	O	O
shown	O	O	O	O
that	O	O	O	O
the	O	O	O	O
lower	O	O	O	O
affinity	O	O	O	O
class	O	O	O	O
of	O	O	O	O
sites	O	O	O	O
are	O	O	O	O
similar	O	O	O	O
in	O	O	O	O
affinity	O	O	O	O
and	O	O	O	O
site	O	O	O	O
molarity	O	O	O	O
to	O	O	O	O
those	O	O	O	O
recognized	O	O	O	O
by	O	O	O	O
dexamethasone	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
higher	O	O	O	O
affinity	O	O	O	O
sites	O	O	O	O
bind	O	O	O	O
CVZ	O	O	O	O
with	O	O	O	O
20	O	O	O	O
-	O	O	O	O
to	O	O	O	O
50	O	O	O	O
-	O	O	O	O
fold	O	O	O	O
greater	O	O	O	O
affinity	O	O	O	O
,	O	O	O	O
consistent	O	O	O	O
with	O	O	O	O
CVZ	O	O	O	O
'	O	O	O	O
s	O	O	O	O
enhanced	O	O	O	O
biological	O	O	O	O
effects	O	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
mutant	O	O	O	O
leukemic	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
resistant	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
lytic	O	O	O	O
effects	O	O	O	O
of	O	O	O	O
dexamethasone	O	O	O	O
,	O	O	O	O
CVZ	O	O	O	O
both	O	O	O	O
lyses	O	O	O	O
the	O	O	O	O
cells	O	O	O	O
and	O	O	O	O
recognizes	O	O	O	O
a	O	O	O	O
single	O	O	O	O
class	O	O	O	O
of	O	O	O	O
sites	O	O	O	O
similar	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
high	O	O	O	O
affinity	O	O	O	O
site	O	O	O	O
in	O	O	O	O
CEM	B-cell_line	O	O	O
C7	I-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
have	O	O	O	O
carried	O	O	O	O
out	O	O	O	O
experiments	O	O	O	O
to	O	O	O	O
define	O	O	O	O
the	O	O	O	O
nature	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
higher	B-protein	O	O	O
affinity	I-protein	O	O	O
CVZ	I-protein	O	O	O
binding	I-protein	O	O	O
site	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
now	O	O	O	O
show	O	O	O	O
that	O	O	O	O
:	O	O	O	O
1	O	O	O	O
)	O	O	O	O
CVZ	O	O	O	O
has	O	O	O	O
more	O	O	O	O
than	O	O	O	O
one	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
site	O	O	O	O
in	O	O	O	O
a	O	O	O	O
second	O	O	O	O
,	O	O	O	O
independent	O	O	O	O
,	O	O	O	O
B	B-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
line	I-cell_line	O	O	O
,	O	O	O	O
IM	B-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
9	I-cell_line	O	O	O
;	O	O	O	O
2	O	O	O	O
)	O	O	O	O
the	O	O	O	O
antiglucocorticoid	O	O	O	O
RU	O	O	O	O
38486	O	O	O	O
is	O	O	O	O
able	O	O	O	O
to	O	O	O	O
block	O	O	O	O
both	O	O	O	O
CVZ	O	O	O	O
'	O	O	O	O
s	O	O	O	O
higher	O	O	O	O
and	O	O	O	O
lower	O	O	O	O
affinity	O	O	O	O
sites	O	O	O	O
;	O	O	O	O
3	O	O	O	O
)	O	O	O	O
all	O	O	O	O
of	O	O	O	O
CVZ	B-protein	O	O	O
'	I-protein	O	O	O
s	I-protein	O	O	O
binding	I-protein	O	O	O
sites	I-protein	O	O	O
are	O	O	O	O
on	O	O	O	O
a	O	O	O	O
protein	O	O	O	O
immunologically	O	O	O	O
indistinguishable	O	O	O	O
from	O	O	O	O
the	O	O	O	O
human	O	O	O	O
GR	B-protein	O	O	O
;	O	O	O	O
and	O	O	O	O
4	O	O	O	O
)	O	O	O	O
freshly	O	O	O	O
isolated	O	O	O	O
clones	O	O	O	O
of	O	O	O	O
CVZ	O	O	O	O
-	O	O	O	O
resistant	O	O	O	O
cells	O	O	O	O
have	O	O	O	O
lost	O	O	O	O
all	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
sites	O	O	O	O
for	O	O	O	O
CVZ	O	O	O	O
.	O	O	O	O

These	O	O	O	O
data	O	O	O	O
indicate	O	O	O	O
that	O	O	O	O
CVZ	O	O	O	O
is	O	O	O	O
recognizing	O	O	O	O
two	O	O	O	O
glucocorticoid	B-protein	O	O	O
binding	I-protein	O	O	O
sites	I-protein	O	O	O
on	O	O	O	O
the	O	O	O	O
human	O	O	O	O
GR	B-protein	O	O	O
or	O	O	O	O
a	O	O	O	O
protein	O	O	O	O
very	O	O	O	O
similar	O	O	O	O
to	O	O	O	O
it	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Retroviral	O	O	O	O
mediated	O	O	O	O
transfer	O	O	O	O
and	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
exogenous	B-DNA	O	O	O
genes	I-DNA	O	O	O
in	O	O	O	O
primary	B-cell_type	O	O	O
lymphoid	I-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
:	O	O	O	O
assaying	O	O	O	O
for	O	O	O	O
a	O	O	O	O
viral	O	O	O	O
transactivator	B-protein	O	O	O
activity	O	O	O	O
in	O	O	O	O
normal	O	O	O	O
and	O	O	O	O
malignant	O	O	O	O
cells	O	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
this	O	O	O	O
report	O	O	O	O
we	O	O	O	O
describe	O	O	O	O
the	O	O	O	O
use	O	O	O	O
of	O	O	O	O
recombinant	O	O	O	O
retroviruses	O	O	O	O
to	O	O	O	O
characterize	O	O	O	O
the	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
of	O	O	O	O
an	O	O	O	O
exogenous	B-DNA	O	O	O
promoter	I-DNA	O	O	O
in	O	O	O	O
primary	O	O	O	O
cells	O	O	O	O
obtained	O	O	O	O
from	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
with	O	O	O	O
lymphoproliferative	O	O	O	O
disorders	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
infection	O	O	O	O
of	O	O	O	O
a	O	O	O	O
variety	O	O	O	O
of	O	O	O	O
cultured	O	O	O	O
and	O	O	O	O
primary	B-cell_type	O	O	O
lymphoid	I-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
with	O	O	O	O
a	O	O	O	O
recombinant	O	O	O	O
retrovirus	O	O	O	O
containing	O	O	O	O
a	O	O	O	O
histone	B-protein	B-DNA	O	O
promoter	I-protein	I-DNA	O	O
-	I-protein	I-DNA	O	O
driven	I-protein	I-DNA	O	O
beta	I-protein	I-DNA	O	O
-	I-protein	I-DNA	O	O
galactosidase	I-protein	I-DNA	O	O
gene	O	I-DNA	O	O
is	O	O	O	O
shown	O	O	O	O
to	O	O	O	O
result	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
beta	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
galactosidase	I-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
50	O	O	O	O
%	O	O	O	O
to	O	O	O	O
100	O	O	O	O
%	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
cells	O	O	O	O
.	O	O	O	O

A	O	O	O	O
similar	O	O	O	O
infection	O	O	O	O
with	O	O	O	O
a	O	O	O	O
recombinant	O	O	O	O
retrovirus	O	O	O	O
containing	O	O	O	O
the	O	O	O	O
beta	B-protein	B-DNA	O	O
-	I-protein	I-DNA	O	O
galactosidase	I-protein	I-DNA	O	O
gene	O	I-DNA	O	O
with	O	O	O	O
an	O	O	O	O
adenovirus	B-DNA	O	O	O
E2	I-DNA	O	O	O
promoter	I-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
results	O	O	O	O
in	O	O	O	O
beta	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
galactosidase	I-protein	O	O	O
activity	O	O	O	O
in	O	O	O	O
a	O	O	O	O
limited	O	O	O	O
number	O	O	O	O
of	O	O	O	O
cultured	B-cell_line	O	O	O
and	O	O	O	O
primary	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

Since	O	O	O	O
the	O	O	O	O
adenovirus	B-DNA	O	O	O
E2	I-DNA	O	O	O
promoter	I-DNA	O	O	O
has	O	O	O	O
been	O	O	O	O
well	O	O	O	O
characterized	O	O	O	O
and	O	O	O	O
is	O	O	O	O
known	O	O	O	O
to	O	O	O	O
be	O	O	O	O
regulated	O	O	O	O
by	O	O	O	O
transactivators	B-protein	O	O	O
encoded	O	O	O	O
by	O	O	O	O
many	O	O	O	O
viruses	O	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
of	O	O	O	O
this	O	O	O	O
promoter	O	O	O	O
in	O	O	O	O
specific	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
types	O	O	O	O
is	O	O	O	O
discussed	O	O	O	O
in	O	O	O	O
reference	O	O	O	O
to	O	O	O	O
both	O	O	O	O
the	O	O	O	O
biology	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
and	O	O	O	O
the	O	O	O	O
possible	O	O	O	O
presence	O	O	O	O
of	O	O	O	O
as	O	O	O	O
yet	O	O	O	O
undetected	O	O	O	O
viral	B-protein	O	O	O
gene	I-protein	O	O	O
products	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

[	O	O	O	O
The	O	O	O	O
effect	O	O	O	O
of	O	O	O	O
24	O	O	O	O
,	O	O	O	O
25	O	O	O	O
-	O	O	O	O
dihydroxyvitamin	O	O	O	O
D3	O	O	O	O
(	O	O	O	O
dioxyvit	O	O	O	O
)	O	O	O	O
on	O	O	O	O
Ca	O	O	O	O
metabolism	O	O	O	O
and	O	O	O	O
immune	O	O	O	O
status	O	O	O	O
during	O	O	O	O
chronic	O	O	O	O
kidney	O	O	O	O
failure	O	O	O	O
]	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Active	O	O	O	O
metabolite	O	O	O	O
of	O	O	O	O
vitamin	O	O	O	O
D3	O	O	O	O
,	O	O	O	O
24R	O	O	O	O
,	O	O	O	O
25	O	O	O	O
(	O	O	O	O
OH	O	O	O	O
)	O	O	O	O
2D3	O	O	O	O
(	O	O	O	O
dioxyvit	O	O	O	O
)	O	O	O	O
was	O	O	O	O
used	O	O	O	O
at	O	O	O	O
a	O	O	O	O
daily	O	O	O	O
dose	O	O	O	O
of	O	O	O	O
100	O	O	O	O
micrograms	O	O	O	O
in	O	O	O	O
treatment	O	O	O	O
of	O	O	O	O
children	O	O	O	O
affected	O	O	O	O
with	O	O	O	O
tubulointerstitial	O	O	O	O
disease	O	O	O	O
of	O	O	O	O
kidney	O	O	O	O
and	O	O	O	O
with	O	O	O	O
chronic	O	O	O	O
glomerulonephritis	O	O	O	O
under	O	O	O	O
conditions	O	O	O	O
of	O	O	O	O
kidney	O	O	O	O
insufficiency	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
drug	O	O	O	O
exhibited	O	O	O	O
distinct	O	O	O	O
normalizing	O	O	O	O
effect	O	O	O	O
on	O	O	O	O
patterns	O	O	O	O
of	O	O	O	O
calcium	O	O	O	O
metabolism	O	O	O	O
:	O	O	O	O
increase	O	O	O	O
of	O	O	O	O
total	O	O	O	O
and	O	O	O	O
ionized	O	O	O	O
Ca2	O	O	O	O
+	O	O	O	O
and	O	O	O	O
of	O	O	O	O
25	O	O	O	O
-	O	O	O	O
OHD	O	O	O	O
,	O	O	O	O
decrease	O	O	O	O
in	O	O	O	O
concentration	O	O	O	O
of	O	O	O	O
parath	O	O	O	O
hormone	O	O	O	O
and	O	O	O	O
osteocalcine	O	O	O	O
in	O	O	O	O
blood	O	O	O	O
serum	O	O	O	O
as	O	O	O	O
well	O	O	O	O
as	O	O	O	O
on	O	O	O	O
immunological	O	O	O	O
parameters	O	O	O	O
:	O	O	O	O
restoration	O	O	O	O
of	O	O	O	O
decreased	O	O	O	O
content	O	O	O	O
of	O	O	O	O
T	O	O	O	O
-	O	O	O	O
and	O	O	O	O
0	O	O	O	O
-	O	O	O	O
lymphocytes	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Concentration	O	O	O	O
of	O	O	O	O
receptors	O	O	O	O
of	O	O	O	O
hormonal	O	O	O	O
form	O	O	O	O
of	O	O	O	O
1	O	O	O	O
,	O	O	O	O
25	O	O	O	O
(	O	O	O	O
OH	O	O	O	O
)	O	O	O	O
2D3	O	O	O	O
was	O	O	O	O
found	O	O	O	O
to	O	O	O	O
be	O	O	O	O
minimal	O	O	O	O
in	O	O	O	O
lymphocytes	B-cell_type	O	O	O
under	O	O	O	O
conditions	O	O	O	O
of	O	O	O	O
chronic	O	O	O	O
kidney	O	O	O	O
insufficiency	O	O	O	O
,	O	O	O	O
while	O	O	O	O
their	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
,	O	O	O	O
after	O	O	O	O
the	O	O	O	O
dioxyvit	O	O	O	O
action	O	O	O	O
,	O	O	O	O
was	O	O	O	O
detected	O	O	O	O
only	O	O	O	O
in	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
with	O	O	O	O
glomerulonephritis	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Specific	O	O	O	O
calcitropic	O	O	O	O
effect	O	O	O	O
of	O	O	O	O
dioxyvit	O	O	O	O
with	O	O	O	O
simultaneous	O	O	O	O
correction	O	O	O	O
of	O	O	O	O
vitamin	O	O	O	O
D	O	O	O	O
deficiency	O	O	O	O
were	O	O	O	O
apparently	O	O	O	O
responsible	O	O	O	O
for	O	O	O	O
high	O	O	O	O
efficacy	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
drug	O	O	O	O
in	O	O	O	O
treatment	O	O	O	O
of	O	O	O	O
calcium	O	O	O	O
metabolism	O	O	O	O
and	O	O	O	O
immunity	O	O	O	O
impairments	O	O	O	O
in	O	O	O	O
children	O	O	O	O
with	O	O	O	O
renal	O	O	O	O
deteriorations	O	O	O	O
at	O	O	O	O
the	O	O	O	O
step	O	O	O	O
of	O	O	O	O
chronic	O	O	O	O
kidney	O	O	O	O
insufficiency	O	O	O	O
.	O	O	O	O

[	O	O	O	O
The	O	O	O	O
role	O	O	O	O
of	O	O	O	O
glucocorticoid	B-protein	O	O	O
receptors	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
HLA	B-protein	O	O	O
antigens	I-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
pathogenesis	O	O	O	O
of	O	O	O	O
Cushing	B-protein	O	O	O
'	I-protein	O	O	O
s	I-protein	O	O	O
syndrome	I-protein	O	O	O
]	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Lymphocytic	O	O	O	O
levels	O	O	O	O
of	O	O	O	O
glucocorticoid	B-protein	O	O	O
receptors	I-protein	O	O	O
were	O	O	O	O
evaluated	O	O	O	O
in	O	O	O	O
114	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
suffering	O	O	O	O
from	O	O	O	O
Icenko	O	O	O	O
-	O	O	O	O
Cushing	B-protein	O	O	O
'	I-protein	O	O	O
s	I-protein	O	O	O
syndrome	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Incidence	O	O	O	O
of	O	O	O	O
HLA	B-protein	O	O	O
antigens	I-protein	O	O	O
was	O	O	O	O
determined	O	O	O	O
in	O	O	O	O
94	O	O	O	O
of	O	O	O	O
them	O	O	O	O
.	O	O	O	O

A	O	O	O	O
significant	O	O	O	O
rise	O	O	O	O
of	O	O	O	O
A10	B-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
B27	B-protein	O	O	O
antigen	I-protein	O	O	O
incidence	O	O	O	O
compared	O	O	O	O
to	O	O	O	O
that	O	O	O	O
in	O	O	O	O
normal	O	O	O	O
subjects	O	O	O	O
allows	O	O	O	O
these	O	O	O	O
antigens	O	O	O	O
to	O	O	O	O
be	O	O	O	O
considered	O	O	O	O
genetic	O	O	O	O
markers	O	O	O	O
of	O	O	O	O
Icenko	O	O	O	O
-	O	O	O	O
Cushing	B-protein	O	O	O
'	I-protein	O	O	O
s	I-protein	O	O	O
syndrome	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
levels	O	O	O	O
of	O	O	O	O
glucocorticoid	B-protein	O	O	O
receptors	I-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
lymphocytes	B-cell_type	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
are	O	O	O	O
lower	O	O	O	O
than	O	O	O	O
in	O	O	O	O
normal	O	O	O	O
subjects	O	O	O	O
both	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
active	O	O	O	O
stage	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
disease	O	O	O	O
and	O	O	O	O
following	O	O	O	O
bilateral	O	O	O	O
total	O	O	O	O
adrenalectomy	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
carrying	O	O	O	O
B27	B-protein	O	O	O
antigen	I-protein	O	O	O
had	O	O	O	O
lymphocytic	O	O	O	O
receptor	O	O	O	O
concentrations	O	O	O	O
under	O	O	O	O
the	O	O	O	O
levels	O	O	O	O
of	O	O	O	O
such	O	O	O	O
in	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
free	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
antigen	O	O	O	O
carriage	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Antigen	B-protein	O	O	O
B27	I-protein	O	O	O
seems	O	O	O	O
to	O	O	O	O
be	O	O	O	O
a	O	O	O	O
cause	O	O	O	O
of	O	O	O	O
lower	O	O	O	O
levels	O	O	O	O
of	O	O	O	O
glucocorticoid	B-protein	O	O	O
receptors	I-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
blood	O	B-cell_type	O	O
lymphocytes	B-cell_type	I-cell_type	O	O
.	O	O	O	O

Effects	O	O	O	O
of	O	O	O	O
1	O	O	O	O
alpha	O	O	O	O
,	O	O	O	O
25	O	O	O	O
-	O	O	O	O
dihydroxyvitamin	O	O	O	O
D3	O	O	O	O
on	O	O	O	O
the	O	O	O	O
human	B-cell_line	O	O	O
chronic	I-cell_line	O	O	O
myelogenous	I-cell_line	O	O	O
leukemia	I-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
line	I-cell_line	O	O	O
RWLeu	B-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
4	I-cell_line	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
effects	O	O	O	O
of	O	O	O	O
1	O	O	O	O
alpha	O	O	O	O
,	O	O	O	O
25	O	O	O	O
-	O	O	O	O
dihydroxyvitamin	O	O	O	O
D3	O	O	O	O
(	O	O	O	O
VD3	O	O	O	O
)	O	O	O	O
on	O	O	O	O
proliferation	O	O	O	O
,	O	O	O	O
differentiation	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
macromolecular	O	O	O	O
synthesis	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
new	O	O	O	O
Philadelphia	B-cell_line	O	O	O
chromosome	I-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
positive	I-cell_line	O	O	O
chronic	I-cell_line	O	O	O
myelogenous	I-cell_line	O	O	O
leukemia	I-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
line	I-cell_line	O	O	O
,	O	O	O	O
RWLeu	B-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
4	I-cell_line	O	O	O
,	O	O	O	O
were	O	O	O	O
investigated	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Binding	O	O	O	O
of	O	O	O	O
[	O	O	O	O
3H	O	O	O	O
]	O	O	O	O
VD3	O	O	O	O
was	O	O	O	O
saturable	O	O	O	O
,	O	O	O	O
with	O	O	O	O
approximately	O	O	O	O
2000	O	O	O	O
-	O	O	O	O
3000	O	O	O	O
sites	O	O	O	O
/	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
half	O	O	O	O
-	O	O	O	O
maximal	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
occurring	O	O	O	O
at	O	O	O	O
0	O	O	O	O
.	O	O	O	O
21	O	O	O	O
-	O	O	O	O
0	O	O	O	O
.	O	O	O	O
33	O	O	O	O
nM	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Treatment	O	O	O	O
of	O	O	O	O
RWLeu	B-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
4	I-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
with	O	O	O	O
VD3	O	O	O	O
induced	O	O	O	O
24R	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
hydroxylase	I-protein	O	O	O
activity	O	O	O	O
,	O	O	O	O
a	O	O	O	O
marker	O	O	O	O
of	O	O	O	O
vitamin	O	O	O	O
D3	O	O	O	O
responsiveness	O	O	O	O
in	O	O	O	O
many	O	O	O	O
tissues	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Exposure	O	O	O	O
of	O	O	O	O
RWLeu	B-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
4	I-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
to	O	O	O	O
VD3	O	O	O	O
also	O	O	O	O
inhibited	O	O	O	O
proliferation	O	O	O	O
and	O	O	O	O
DNA	O	O	O	O
synthesis	O	O	O	O
with	O	O	O	O
a	O	O	O	O
50	O	O	O	O
%	O	O	O	O
effective	O	O	O	O
dose	O	O	O	O
of	O	O	O	O
3	O	O	O	O
.	O	O	O	O
5	O	O	O	O
-	O	O	O	O
10	O	O	O	O
nM	O	O	O	O
within	O	O	O	O
72	O	O	O	O
h	O	O	O	O
;	O	O	O	O
in	O	O	O	O
addition	O	O	O	O
,	O	O	O	O
protein	O	O	O	O
and	O	O	O	O
RNA	O	O	O	O
synthesis	O	O	O	O
were	O	O	O	O
inhibited	O	O	O	O
by	O	O	O	O
VD3	O	O	O	O
treatment	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Exposure	O	O	O	O
of	O	O	O	O
RWLeu	B-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
4	I-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
to	O	O	O	O
5	O	O	O	O
nM	O	O	O	O
VD3	O	O	O	O
for	O	O	O	O
72	O	O	O	O
h	O	O	O	O
caused	O	O	O	O
50	O	O	O	O
%	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
cells	O	O	O	O
to	O	O	O	O
differentiate	O	O	O	O
into	O	O	O	O
macrophage	B-cell_type	O	O	O
/	I-cell_type	O	O	O
monocyte	I-cell_type	O	O	O
type	I-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
as	O	O	O	O
judged	O	O	O	O
by	O	O	O	O
nitroblue	O	O	O	O
tetrazolium	O	O	O	O
staining	O	O	O	O
and	O	O	O	O
adherence	O	O	O	O
to	O	O	O	O
plastic	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Progressive	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
cell	B-protein	O	O	O
surface	I-protein	O	O	O
maturation	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
specific	I-protein	O	O	O
antigens	I-protein	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
monocyte	B-cell_type	O	O	O
/	I-cell_type	O	O	O
macrophage	I-cell_type	O	O	O
lineage	I-cell_type	O	O	O
was	O	O	O	O
induced	O	O	O	O
by	O	O	O	O
treatment	O	O	O	O
of	O	O	O	O
RWLeu	B-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
4	I-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
with	O	O	O	O
VD3	O	O	O	O
for	O	O	O	O
24	O	O	O	O
to	O	O	O	O
72	O	O	O	O
h	O	O	O	O
at	O	O	O	O
doses	O	O	O	O
that	O	O	O	O
inhibited	O	O	O	O
cellular	O	O	O	O
proliferation	O	O	O	O
.	O	O	O	O

c	B-RNA	O	O	O
-	I-RNA	O	O	O
myc	I-RNA	O	O	O
RNA	I-RNA	O	O	O
,	O	O	O	O
which	O	O	O	O
is	O	O	O	O
constitutively	O	O	O	O
expressed	O	O	O	O
in	O	O	O	O
RWLeu	B-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
4	I-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
,	O	O	O	O
increased	O	O	O	O
after	O	O	O	O
0	O	O	O	O
.	O	O	O	O
5	O	O	O	O
h	O	O	O	O
of	O	O	O	O
treatment	O	O	O	O
with	O	O	O	O
50	O	O	O	O
nM	O	O	O	O
VD3	O	O	O	O
and	O	O	O	O
then	O	O	O	O
rapidly	O	O	O	O
decreased	O	O	O	O
to	O	O	O	O
barely	O	O	O	O
detectable	O	O	O	O
levels	O	O	O	O
after	O	O	O	O
4	O	O	O	O
h	O	O	O	O
of	O	O	O	O
treatment	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Finally	O	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
in	O	O	O	O
vitro	O	O	O	O
tyrosine	O	O	O	O
kinase	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
associated	O	O	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
p210bcr	B-DNA	B-protein	O	O
-	I-DNA	I-protein	O	O
abl	I-DNA	I-protein	O	O
oncogene	I-DNA	I-protein	O	O
product	O	I-protein	O	O
was	O	O	O	O
decreased	O	O	O	O
approximately	O	O	O	O
50	O	O	O	O
%	O	O	O	O
by	O	O	O	O
VD3	O	O	O	O
treatment	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Because	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
presence	O	O	O	O
of	O	O	O	O
a	O	O	O	O
functional	O	O	O	O
receptor	O	O	O	O
-	O	O	O	O
effector	O	O	O	O
system	O	O	O	O
for	O	O	O	O
VD3	O	O	O	O
and	O	O	O	O
multiple	O	O	O	O
biological	O	O	O	O
responses	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
hormone	O	O	O	O
,	O	O	O	O
these	O	O	O	O
cells	O	O	O	O
provide	O	O	O	O
a	O	O	O	O
unique	O	O	O	O
model	O	O	O	O
system	O	O	O	O
with	O	O	O	O
which	O	O	O	O
to	O	O	O	O
probe	O	O	O	O
the	O	O	O	O
specific	O	O	O	O
effects	O	O	O	O
of	O	O	O	O
VD3	O	O	O	O
on	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
growth	O	O	O	O
and	O	O	O	O
differentiation	O	O	O	O
in	O	O	O	O
chronic	O	O	O	O
myelogenous	O	O	O	O
leukemia	O	O	O	O
.	O	O	O	O

A	O	O	O	O
new	O	O	O	O
member	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
leucine	B-protein	B-protein	O	O
zipper	I-protein	I-protein	O	O
class	O	I-protein	O	O
of	O	O	O	O
proteins	O	O	O	O
that	O	O	O	O
binds	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
HLA	B-DNA	O	O	O
DR	I-DNA	O	O	O
alpha	I-DNA	O	O	O
promoter	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

Several	O	O	O	O
mutants	O	O	O	O
derived	O	O	O	O
from	O	O	O	O
transformed	B-cell_line	O	O	O
human	I-cell_line	O	O	O
B	I-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
lines	I-cell_line	O	O	O
are	O	O	O	O
defective	O	O	O	O
in	O	O	O	O
expressing	O	O	O	O
major	B-DNA	O	O	O
histocompatibility	I-DNA	O	O	O
complex	I-DNA	O	O	O
(	I-DNA	O	O	O
MHC	I-DNA	O	O	O
)	I-DNA	O	O	O
class	I-DNA	O	O	O
II	I-DNA	O	O	O
genes	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
failure	O	O	O	O
to	O	O	O	O
express	O	O	O	O
a	O	O	O	O
class	B-DNA	O	O	O
II	I-DNA	O	O	O
gene	I-DNA	O	O	O
in	O	O	O	O
at	O	O	O	O
least	O	O	O	O
one	O	O	O	O
such	O	O	O	O
mutant	B-cell_line	O	O	O
line	I-cell_line	O	O	O
has	O	O	O	O
been	O	O	O	O
mapped	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
MHC	B-DNA	O	O	O
class	I-DNA	O	O	O
II	I-DNA	O	O	O
X	I-DNA	O	O	O
box	I-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
a	O	O	O	O
conserved	B-DNA	O	O	O
transcriptional	I-DNA	O	O	O
element	I-DNA	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
promoter	B-DNA	O	O	O
region	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

A	O	O	O	O
complementary	B-DNA	O	O	O
DNA	I-DNA	O	O	O
encoding	O	O	O	O
a	O	O	O	O
DNA	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
binding	I-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
human	B-protein	O	O	O
X	I-protein	O	O	O
box	I-protein	O	O	O
binding	I-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
hXBP	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
whose	O	O	O	O
target	O	O	O	O
is	O	O	O	O
the	O	O	O	O
human	B-DNA	O	O	O
DR	I-DNA	O	O	O
alpha	I-DNA	O	O	O
X	I-DNA	O	O	O
box	I-DNA	O	O	O
and	O	O	O	O
the	O	O	O	O
3	B-DNA	O	O	O
'	I-DNA	O	O	O
flanking	I-DNA	O	O	O
region	I-DNA	O	O	O
has	O	O	O	O
now	O	O	O	O
been	O	O	O	O
cloned	O	O	O	O
.	O	O	O	O

This	O	O	O	O
complementary	B-DNA	O	O	O
DNA	I-DNA	O	O	O
encoded	O	O	O	O
a	O	O	O	O
protein	O	O	O	O
with	O	O	O	O
structural	O	O	O	O
similarities	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
c	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
jun	I-protein	O	O	O
proto	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
oncogene	I-protein	O	O	O
product	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
its	O	O	O	O
target	O	O	O	O
sequence	O	O	O	O
was	O	O	O	O
closely	O	O	O	O
related	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
palindromic	B-DNA	O	O	O
target	I-DNA	O	O	O
sequence	I-DNA	O	O	O
of	O	O	O	O
c	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
jun	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

Mutation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
hXBP	B-protein	B-DNA	O	O
-	I-protein	I-DNA	O	O
1	I-protein	I-DNA	O	O
DNA	O	I-DNA	O	O
target	O	I-DNA	O	O
sequence	O	I-DNA	O	O
decreased	O	O	O	O
DR	B-DNA	O	O	O
alpha	I-DNA	O	O	O
promoter	I-DNA	O	O	O
activity	O	O	O	O
in	O	O	O	O
vivo	O	O	O	O
.	O	O	O	O

These	O	O	O	O
studies	O	O	O	O
suggest	O	O	O	O
that	O	O	O	O
the	O	O	O	O
hXBP	B-protein	B-protein	O	O
-	I-protein	I-protein	O	O
1	I-protein	I-protein	O	O
protein	O	I-protein	O	O
acts	O	O	O	O
as	O	O	O	O
a	O	O	O	O
transcription	B-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
B	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

Pseudohypoaldosteronism	O	O	O	O
in	O	O	O	O
eight	O	O	O	O
families	O	O	O	O
:	O	O	O	O
different	O	O	O	O
forms	O	O	O	O
of	O	O	O	O
inheritance	O	O	O	O
are	O	O	O	O
evidence	O	O	O	O
for	O	O	O	O
various	O	O	O	O
genetic	O	O	O	O
defects	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Pseudohypoaldosteronism	O	O	O	O
is	O	O	O	O
a	O	O	O	O
rare	O	O	O	O
hereditary	O	O	O	O
disorder	O	O	O	O
presenting	O	O	O	O
in	O	O	O	O
early	O	O	O	O
infancy	O	O	O	O
with	O	O	O	O
renal	O	O	O	O
salt	O	O	O	O
loss	O	O	O	O
leading	O	O	O	O
to	O	O	O	O
hyponatremia	O	O	O	O
and	O	O	O	O
hyperkalemia	O	O	O	O
despite	O	O	O	O
high	O	O	O	O
levels	O	O	O	O
of	O	O	O	O
plasma	O	O	O	O
aldosterone	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
are	O	O	O	O
insensitive	O	O	O	O
to	O	O	O	O
mineralocorticoids	O	O	O	O
;	O	O	O	O
however	O	O	O	O
,	O	O	O	O
sodium	O	O	O	O
supplementation	O	O	O	O
is	O	O	O	O
able	O	O	O	O
to	O	O	O	O
correct	O	O	O	O
electrolyte	O	O	O	O
abnormalities	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Absent	O	O	O	O
or	O	O	O	O
greatly	O	O	O	O
diminished	O	O	O	O
type	O	O	O	O
I	B-protein	O	O	O
aldosterone	I-protein	O	O	O
receptors	I-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
peripheral	B-cell_type	O	O	O
mononuclear	I-cell_type	O	O	O
leucocytes	I-cell_type	O	O	O
have	O	O	O	O
been	O	O	O	O
recently	O	O	O	O
demonstrated	O	O	O	O
and	O	O	O	O
explain	O	O	O	O
the	O	O	O	O
lack	O	O	O	O
of	O	O	O	O
response	O	O	O	O
to	O	O	O	O
mineralocorticoids	O	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
have	O	O	O	O
studied	O	O	O	O
the	O	O	O	O
mode	O	O	O	O
of	O	O	O	O
inheritance	O	O	O	O
in	O	O	O	O
eight	O	O	O	O
families	O	O	O	O
with	O	O	O	O
a	O	O	O	O
total	O	O	O	O
of	O	O	O	O
nine	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
.	O	O	O	O

There	O	O	O	O
was	O	O	O	O
evidence	O	O	O	O
for	O	O	O	O
an	O	O	O	O
autosomal	O	O	O	O
recessive	O	O	O	O
form	O	O	O	O
of	O	O	O	O
inheritance	O	O	O	O
in	O	O	O	O
four	O	O	O	O
families	O	O	O	O
,	O	O	O	O
while	O	O	O	O
the	O	O	O	O
other	O	O	O	O
four	O	O	O	O
families	O	O	O	O
appeared	O	O	O	O
to	O	O	O	O
have	O	O	O	O
an	O	O	O	O
autosomal	O	O	O	O
dominant	O	O	O	O
mode	O	O	O	O
of	O	O	O	O
transmission	O	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
three	O	O	O	O
families	O	O	O	O
the	O	O	O	O
autosomal	O	O	O	O
recessive	O	O	O	O
form	O	O	O	O
was	O	O	O	O
characterized	O	O	O	O
by	O	O	O	O
normal	B-protein	O	O	O
receptor	I-protein	O	O	O
as	O	O	O	O
well	O	O	O	O
as	O	O	O	O
hormone	O	O	O	O
data	O	O	O	O
in	O	O	O	O
both	O	O	O	O
parents	O	O	O	O
,	O	O	O	O
while	O	O	O	O
in	O	O	O	O
one	O	O	O	O
family	O	O	O	O
receptor	O	O	O	O
levels	O	O	O	O
in	O	O	O	O
both	O	O	O	O
parents	O	O	O	O
were	O	O	O	O
greatly	O	O	O	O
reduced	O	O	O	O
,	O	O	O	O
but	O	O	O	O
hormone	O	O	O	O
levels	O	O	O	O
were	O	O	O	O
normal	O	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
the	O	O	O	O
four	O	O	O	O
families	O	O	O	O
with	O	O	O	O
an	O	O	O	O
autosomal	O	O	O	O
dominant	O	O	O	O
mode	O	O	O	O
of	O	O	O	O
transmission	O	O	O	O
there	O	O	O	O
was	O	O	O	O
always	O	O	O	O
one	O	O	O	O
parent	O	O	O	O
with	O	O	O	O
reduced	O	O	O	O
receptor	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
in	O	O	O	O
peripheral	B-cell_type	O	O	O
mononuclear	I-cell_type	O	O	O
leucocytes	I-cell_type	O	O	O
and	O	O	O	O
elevated	O	O	O	O
serum	O	O	O	O
hormone	O	O	O	O
levels	O	O	O	O
.	O	O	O	O

These	O	O	O	O
parents	O	O	O	O
were	O	O	O	O
entirely	O	O	O	O
asymptomatic	O	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
an	O	O	O	O
extended	O	O	O	O
family	O	O	O	O
we	O	O	O	O
were	O	O	O	O
able	O	O	O	O
to	O	O	O	O
study	O	O	O	O
an	O	O	O	O
aunt	O	O	O	O
and	O	O	O	O
her	O	O	O	O
newborn	O	O	O	O
daughter	O	O	O	O
,	O	O	O	O
who	O	O	O	O
were	O	O	O	O
both	O	O	O	O
also	O	O	O	O
biochemically	O	O	O	O
affected	O	O	O	O
but	O	O	O	O
clinically	O	O	O	O
asymptomatic	O	O	O	O
.	O	O	O	O

It	O	O	O	O
,	O	O	O	O
therefore	O	O	O	O
,	O	O	O	O
appears	O	O	O	O
that	O	O	O	O
this	O	O	O	O
dual	O	O	O	O
pattern	O	O	O	O
of	O	O	O	O
genetic	O	O	O	O
transmission	O	O	O	O
may	O	O	O	O
indicate	O	O	O	O
differing	O	O	O	O
genetic	O	O	O	O
defects	O	O	O	O
which	O	O	O	O
cause	O	O	O	O
the	O	O	O	O
same	O	O	O	O
clinical	O	O	O	O
picture	O	O	O	O
of	O	O	O	O
pseudohypoaldosteronism	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Perceived	O	O	O	O
social	O	O	O	O
support	O	O	O	O
and	O	O	O	O
tumor	O	O	O	O
estrogen	B-protein	O	O	O
/	I-protein	O	O	O
progesterone	I-protein	O	O	O
receptor	I-protein	O	O	O
status	O	O	O	O
as	O	O	O	O
predictors	O	O	O	O
of	O	O	O	O
natural	B-cell_type	B-protein	O	O
killer	I-cell_type	I-protein	O	O
cell	I-cell_type	I-protein	O	O
activity	O	I-protein	O	O
in	O	O	O	O
breast	O	O	O	O
cancer	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
.	O	O	O	O

This	O	O	O	O
report	O	O	O	O
is	O	O	O	O
concerned	O	O	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
prediction	O	O	O	O
of	O	O	O	O
natural	O	O	O	O
killer	B-cell_type	O	O	O
(	I-cell_type	O	O	O
NK	I-cell_type	O	O	O
)	I-cell_type	O	O	O
cell	I-cell_type	O	O	O
activity	O	O	O	O
in	O	O	O	O
61	O	O	O	O
Stage	O	O	O	O
I	O	O	O	O
and	O	O	O	O
II	O	O	O	O
breast	O	O	O	O
cancer	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
,	O	O	O	O
between	O	O	O	O
the	O	O	O	O
ages	O	O	O	O
of	O	O	O	O
25	O	O	O	O
and	O	O	O	O
70	O	O	O	O
,	O	O	O	O
who	O	O	O	O
were	O	O	O	O
accrued	O	O	O	O
to	O	O	O	O
this	O	O	O	O
project	O	O	O	O
.	O	O	O	O

All	O	O	O	O
baseline	O	O	O	O
interview	O	O	O	O
and	O	O	O	O
testing	O	O	O	O
data	O	O	O	O
were	O	O	O	O
obtained	O	O	O	O
either	O	O	O	O
just	O	O	O	O
before	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
were	O	O	O	O
discharged	O	O	O	O
from	O	O	O	O
the	O	O	O	O
hospital	O	O	O	O
,	O	O	O	O
or	O	O	O	O
at	O	O	O	O
their	O	O	O	O
first	O	O	O	O
outpatient	O	O	O	O
visit	O	O	O	O
,	O	O	O	O
within	O	O	O	O
two	O	O	O	O
weeks	O	O	O	O
of	O	O	O	O
discharge	O	O	O	O
.	O	O	O	O

A	O	O	O	O
major	O	O	O	O
interest	O	O	O	O
of	O	O	O	O
this	O	O	O	O
project	O	O	O	O
is	O	O	O	O
the	O	O	O	O
predictive	O	O	O	O
value	O	O	O	O
of	O	O	O	O
perceived	O	O	O	O
social	O	O	O	O
support	O	O	O	O
,	O	O	O	O
as	O	O	O	O
a	O	O	O	O
potential	O	O	O	O
"	O	O	O	O
stress	O	O	O	O
"	O	O	O	O
buffer	O	O	O	O
,	O	O	O	O
related	O	O	O	O
to	O	O	O	O
NK	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
the	O	O	O	O
main	O	O	O	O
model	O	O	O	O
reported	O	O	O	O
here	O	O	O	O
,	O	O	O	O
we	O	O	O	O
found	O	O	O	O
that	O	O	O	O
a	O	O	O	O
significant	O	O	O	O
amount	O	O	O	O
of	O	O	O	O
NK	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
variance	O	O	O	O
could	O	O	O	O
be	O	O	O	O
explained	O	O	O	O
by	O	O	O	O
five	O	O	O	O
variables	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Higher	O	O	O	O
NK	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
could	O	O	O	O
be	O	O	O	O
predicted	O	O	O	O
by	O	O	O	O
the	O	O	O	O
perception	O	O	O	O
of	O	O	O	O
high	O	O	O	O
quality	O	O	O	O
emotional	O	O	O	O
support	O	O	O	O
from	O	O	O	O
a	O	O	O	O
spouse	O	O	O	O
or	O	O	O	O
intimate	O	O	O	O
other	O	O	O	O
,	O	O	O	O
perceived	O	O	O	O
social	O	O	O	O
support	O	O	O	O
from	O	O	O	O
the	O	O	O	O
patient	O	O	O	O
'	O	O	O	O
s	O	O	O	O
physician	O	O	O	O
,	O	O	O	O
estrogen	B-protein	O	O	O
receptor	I-protein	O	O	O
-	O	O	O	O
negative	O	O	O	O
tumor	O	O	O	O
status	O	O	O	O
,	O	O	O	O
having	O	O	O	O
an	O	O	O	O
excisional	B-protein	O	O	O
biopsy	I-protein	O	O	O
as	O	O	O	O
surgical	B-protein	O	O	O
treatment	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
actively	O	O	O	O
seeking	O	O	O	O
social	B-protein	O	O	O
support	I-protein	O	O	O
as	O	O	O	O
a	O	O	O	O
major	O	O	O	O
coping	O	O	O	O
strategy	O	O	O	O
(	O	O	O	O
R2	O	O	O	O
=	O	O	O	O
0	O	O	O	O
.	O	O	O	O
33	O	O	O	O
,	O	O	O	O
F	O	O	O	O
(	O	O	O	O
5	O	O	O	O
,	O	O	O	O
55	O	O	O	O
)	O	O	O	O
=	O	O	O	O
5	O	O	O	O
.	O	O	O	O
5	O	O	O	O
,	O	O	O	O
p	O	O	O	O
less	O	O	O	O
than	O	O	O	O
0	O	O	O	O
.	O	O	O	O
0004	O	O	O	O
)	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Findings	O	O	O	O
are	O	O	O	O
discussed	O	O	O	O
in	O	O	O	O
terms	O	O	O	O
of	O	O	O	O
host	O	O	O	O
interaction	O	O	O	O
with	O	O	O	O
tumor	B-protein	O	O	O
endocrine	I-protein	O	O	O
status	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
the	O	O	O	O
role	O	O	O	O
that	O	O	O	O
social	B-protein	O	O	O
support	I-protein	O	O	O
might	O	O	O	O
play	O	O	O	O
in	O	O	O	O
modulating	O	O	O	O
such	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
.	O	O	O	O

[	O	O	O	O
Estrogen	B-protein	O	O	O
receptor	I-protein	O	O	O
content	O	O	O	O
of	O	O	O	O
peripheral	B-cell_type	O	O	O
blood	I-cell_type	O	O	O
lymphocytes	I-cell_type	O	O	O
in	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
with	O	O	O	O
systemic	O	O	O	O
lupus	O	O	O	O
erythematosus	O	O	O	O
]	O	O	O	O
.	O	O	O	O

ER	O	O	O	O
content	O	O	O	O
in	O	O	O	O
lymphocytes	B-cell_type	O	O	O
of	O	O	O	O
peripheral	O	O	O	O
blood	O	O	O	O
from	O	O	O	O
27	O	O	O	O
SLE	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
and	O	O	O	O
20	O	O	O	O
healthy	O	O	O	O
controls	O	O	O	O
were	O	O	O	O
determined	O	O	O	O
by	O	O	O	O
dextran	O	O	O	O
-	O	O	O	O
coated	O	O	O	O
charcoal	O	O	O	O
assay	O	O	O	O
.	O	O	O	O

ER	B-protein	O	O	O
content	O	O	O	O
in	O	O	O	O
lymphocytes	B-cell_type	O	O	O
of	O	O	O	O
each	O	O	O	O
sample	O	O	O	O
was	O	O	O	O
expressed	O	O	O	O
by	O	O	O	O
both	O	O	O	O
fmol	O	O	O	O
/	O	O	O	O
mg	O	O	O	O
of	O	O	O	O
lymphocyte	B-protein	O	O	O
cytosolic	I-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
fmol	O	O	O	O
/	O	O	O	O
micrograms	O	O	O	O
of	O	O	O	O
lymphocyte	B-DNA	O	O	O
DNA	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
results	O	O	O	O
showed	O	O	O	O
that	O	O	O	O
there	O	O	O	O
was	O	O	O	O
no	O	O	O	O
significant	O	O	O	O
difference	O	O	O	O
between	O	O	O	O
the	O	O	O	O
ER	B-protein	O	O	O
content	O	O	O	O
of	O	O	O	O
lymphocytes	B-cell_type	O	O	O
from	O	O	O	O
the	O	O	O	O
controls	O	O	O	O
and	O	O	O	O
that	O	O	O	O
from	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
with	O	O	O	O
SLE	O	O	O	O
.	O	O	O	O

But	O	O	O	O
the	O	O	O	O
logarithmic	O	O	O	O
mean	O	O	O	O
of	O	O	O	O
ER	B-protein	O	O	O
content	O	O	O	O
in	O	O	O	O
lymphocytes	B-cell_type	O	O	O
,	O	O	O	O
expressed	O	O	O	O
by	O	O	O	O
fmol	O	O	O	O
/	O	O	O	O
mg	O	O	O	O
of	O	O	O	O
cytosolic	B-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
in	O	O	O	O
14	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
with	O	O	O	O
active	O	O	O	O
SLE	O	O	O	O
(	O	O	O	O
0	O	O	O	O
.	O	O	O	O
9356	O	O	O	O
+	O	O	O	O
/	O	O	O	O
-	O	O	O	O
0	O	O	O	O
.	O	O	O	O
31	O	O	O	O
)	O	O	O	O
was	O	O	O	O
significantly	O	O	O	O
higher	O	O	O	O
than	O	O	O	O
that	O	O	O	O
in	O	O	O	O
13	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
with	O	O	O	O
inactive	O	O	O	O
SLE	O	O	O	O
(	O	O	O	O
0	O	O	O	O
.	O	O	O	O
2979	O	O	O	O
+	O	O	O	O
/	O	O	O	O
-	O	O	O	O
0	O	O	O	O
.	O	O	O	O
23	O	O	O	O
,	O	O	O	O
P	O	O	O	O
less	O	O	O	O
than	O	O	O	O
0	O	O	O	O
.	O	O	O	O
001	O	O	O	O
)	O	O	O	O
and	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
controls	O	O	O	O
(	O	O	O	O
0	O	O	O	O
.	O	O	O	O
6204	O	O	O	O
+	O	O	O	O
/	O	O	O	O
-	O	O	O	O
0	O	O	O	O
.	O	O	O	O
52	O	O	O	O
,	O	O	O	O
P	O	O	O	O
less	O	O	O	O
than	O	O	O	O
0	O	O	O	O
.	O	O	O	O
001	O	O	O	O
)	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
normal	O	O	O	O
upper	O	O	O	O
limit	O	O	O	O
of	O	O	O	O
ER	B-protein	O	O	O
content	O	O	O	O
in	O	O	O	O
lymphocytes	B-cell_type	O	O	O
,	O	O	O	O
expressed	O	O	O	O
by	O	O	O	O
fmol	O	O	O	O
/	O	O	O	O
micrograms	O	O	O	O
of	O	O	O	O
DNA	O	O	O	O
,	O	O	O	O
was	O	O	O	O
0	O	O	O	O
.	O	O	O	O
136	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
elevated	O	O	O	O
rate	O	O	O	O
of	O	O	O	O
ER	B-protein	O	O	O
content	O	O	O	O
in	O	O	O	O
lymphocytes	B-cell_type	O	O	O
in	O	O	O	O
14	O	O	O	O
active	O	O	O	O
SLE	O	O	O	O
(	O	O	O	O
92	O	O	O	O
.	O	O	O	O
9	O	O	O	O
%	O	O	O	O
)	O	O	O	O
was	O	O	O	O
also	O	O	O	O
higher	O	O	O	O
than	O	O	O	O
that	O	O	O	O
in	O	O	O	O
quieiescent	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
(	O	O	O	O
23	O	O	O	O
.	O	O	O	O
1	O	O	O	O
%	O	O	O	O
,	O	O	O	O
P	O	O	O	O
less	O	O	O	O
than	O	O	O	O
0	O	O	O	O
.	O	O	O	O
001	O	O	O	O
)	O	O	O	O
and	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
controls	O	O	O	O
(	O	O	O	O
10	O	O	O	O
%	O	O	O	O
,	O	O	O	O
P	O	O	O	O
less	O	O	O	O
than	O	O	O	O
0	O	O	O	O
.	O	O	O	O
001	O	O	O	O
)	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Moreover	O	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
elevated	O	O	O	O
level	O	O	O	O
of	O	O	O	O
ER	B-protein	O	O	O
content	O	O	O	O
was	O	O	O	O
found	O	O	O	O
to	O	O	O	O
be	O	O	O	O
related	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
positive	O	O	O	O
antidsDNA	B-protein	O	O	O
antibody	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
hypocomplementemia	O	O	O	O
.	O	O	O	O

An	O	O	O	O
in	O	O	O	O
vitro	O	O	O	O
globin	B-DNA	O	O	O
gene	I-DNA	O	O	O
switching	O	O	O	O
model	O	O	O	O
based	O	O	O	O
on	O	O	O	O
differentiated	B-cell_type	O	O	O
embryonic	I-cell_type	O	O	O
stem	I-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
used	O	O	O	O
mouse	B-cell_type	O	O	O
embryonic	I-cell_type	O	O	O
stem	I-cell_type	O	O	O
(	I-cell_type	O	O	O
ES	I-cell_type	O	O	O
)	I-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
to	O	O	O	O
study	O	O	O	O
globin	B-DNA	O	O	O
gene	I-DNA	O	O	O
expression	O	O	O	O
and	O	O	O	O
switching	O	O	O	O
in	O	O	O	O
vitro	O	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
show	O	O	O	O
that	O	O	O	O
ES	B-cell_type	O	O	O
-	I-cell_type	O	O	O
derived	I-cell_type	O	O	O
embryoid	I-cell_type	O	O	O
bodies	I-cell_type	O	O	O
express	O	O	O	O
the	O	O	O	O
full	O	O	O	O
complement	O	O	O	O
of	O	O	O	O
mouse	B-DNA	O	O	O
embryonic	I-DNA	O	O	O
globin	I-DNA	O	O	O
genes	I-DNA	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
correct	O	O	O	O
temporal	O	O	O	O
order	O	O	O	O
and	O	O	O	O
that	O	O	O	O
on	O	O	O	O
further	O	O	O	O
differentiation	O	O	O	O
,	O	O	O	O
a	O	O	O	O
switch	O	O	O	O
occurs	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
fetal	B-DNA	O	O	O
/	I-DNA	O	O	O
adult	I-DNA	O	O	O
genes	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
addition	O	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
erythroid	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
specific	I-protein	O	O	O
transcription	I-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
E1	I-protein	O	O	O
was	O	O	O	O
shown	O	O	O	O
to	O	O	O	O
be	O	O	O	O
expressed	O	O	O	O
coordinately	O	O	O	O
with	O	O	O	O
that	O	O	O	O
of	O	O	O	O
globin	B-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
embryoid	B-cell_type	O	O	O
bodies	I-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
conclude	O	O	O	O
from	O	O	O	O
these	O	O	O	O
experiments	O	O	O	O
that	O	O	O	O
the	O	O	O	O
ES	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
system	O	O	O	O
provides	O	O	O	O
a	O	O	O	O
good	O	O	O	O
model	O	O	O	O
to	O	O	O	O
study	O	O	O	O
hematopoietic	O	O	O	O
development	O	O	O	O
.	O	O	O	O

When	O	O	O	O
the	O	O	O	O
human	O	O	O	O
epsilon	O	O	O	O
-	O	O	O	O
or	O	O	O	O
beta	O	O	O	O
-	O	O	O	O
globin	O	O	O	O
genes	O	O	O	O
driven	O	O	O	O
by	O	O	O	O
the	O	O	O	O
dominant	B-DNA	O	O	O
control	I-DNA	O	O	O
region	I-DNA	O	O	O
(	O	O	O	O
DCR	B-DNA	O	O	O
)	O	O	O	O
are	O	O	O	O
introduced	O	O	O	O
into	O	O	O	O
this	O	O	O	O
system	O	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
human	O	B-DNA	O	O
epsilon	O	I-DNA	O	O
-	O	I-DNA	O	O
globin	B-DNA	I-DNA	O	O
gene	I-DNA	I-DNA	O	O
,	O	O	O	O
in	O	O	O	O
contrast	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
beta	O	B-DNA	O	O
-	O	I-DNA	O	O
globin	B-DNA	I-DNA	O	O
gene	I-DNA	I-DNA	O	O
,	O	O	O	O
is	O	O	O	O
not	O	O	O	O
deregulated	O	O	O	O
by	O	O	O	O
the	O	O	O	O
presence	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
DCR	B-DNA	O	O	O
and	O	O	O	O
is	O	O	O	O
expressed	O	O	O	O
strictly	O	O	O	O
as	O	O	O	O
an	O	O	O	O
embryonic	B-DNA	O	O	O
gene	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
conclude	O	O	O	O
from	O	O	O	O
this	O	O	O	O
that	O	O	O	O
the	O	O	O	O
epsilon	O	B-DNA	O	O
-	O	I-DNA	O	O
globin	B-DNA	I-DNA	O	O
gene	I-DNA	I-DNA	O	O
is	O	O	O	O
not	O	O	O	O
regulated	O	O	O	O
by	O	O	O	O
competition	O	O	O	O
with	O	O	O	O
other	O	O	O	O
genes	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
human	B-DNA	O	O	O
beta	I-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
globin	I-DNA	O	O	O
locus	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

Cloning	O	O	O	O
of	O	O	O	O
a	O	O	O	O
mitogen	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
inducible	I-DNA	O	O	O
gene	I-DNA	O	O	O
encoding	O	O	O	O
a	O	O	O	O
kappa	B-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
DNA	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
binding	I-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
with	O	O	O	O
homology	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
rel	B-DNA	O	O	O
oncogene	I-DNA	O	O	O
and	O	O	O	O
to	O	O	O	O
cell	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
cycle	I-DNA	O	O	O
motifs	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
have	O	O	O	O
cloned	O	O	O	O
and	O	O	O	O
characterized	O	O	O	O
a	O	O	O	O
mitogen	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
inducible	I-DNA	O	O	O
gene	I-DNA	O	O	O
isolated	O	O	O	O
from	O	O	O	O
human	B-cell_type	O	O	O
T	I-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
that	O	O	O	O
predicts	O	O	O	O
a	O	O	O	O
protein	O	O	O	O
of	O	O	O	O
968	B-protein	O	O	O
amino	I-protein	O	O	O
acids	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
amino	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
terminal	I-protein	O	O	O
domain	I-protein	O	O	O
has	O	O	O	O
regions	O	O	O	O
homologous	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
oncogene	B-DNA	O	O	O
rel	I-DNA	O	O	O
and	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
developmentally	O	O	O	O
important	O	O	O	O
gene	O	O	O	O
dorsal	B-DNA	O	O	O
of	O	O	O	O
Drosophila	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
carboxy	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
terminal	I-protein	O	O	O
domain	I-protein	O	O	O
contains	O	O	O	O
repeat	O	O	O	O
structures	O	O	O	O
found	O	O	O	O
in	O	O	O	O
a	O	O	O	O
variety	O	O	O	O
of	O	O	O	O
proteins	O	O	O	O
that	O	O	O	O
are	O	O	O	O
involved	O	O	O	O
in	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
-	O	O	O	O
cycle	O	O	O	O
control	O	O	O	O
of	O	O	O	O
yeast	O	O	O	O
and	O	O	O	O
in	O	O	O	O
tissue	O	O	O	O
differentiation	O	O	O	O
in	O	O	O	O
Drosophila	O	O	O	O
and	O	O	O	O
Ceanorhabditis	O	O	O	O
elegans	O	O	O	O
,	O	O	O	O
as	O	O	O	O
well	O	O	O	O
as	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
putative	B-DNA	O	O	O
human	I-DNA	O	O	O
oncogene	I-DNA	O	O	O
bcl	I-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
3	I-DNA	O	O	O
and	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
ankyrin	B-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

A	O	O	O	O
truncated	O	O	O	O
form	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
product	O	O	O	O
of	O	O	O	O
this	O	O	O	O
gene	O	O	O	O
translated	O	O	O	O
in	O	O	O	O
vitro	O	O	O	O
is	O	O	O	O
a	O	O	O	O
DNA	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
binding	I-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
which	O	O	O	O
interacts	O	O	O	O
specifically	O	O	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
kappa	B-DNA	O	O	O
B	I-DNA	O	O	O
binding	I-DNA	O	O	O
site	I-DNA	O	O	O
found	O	O	O	O
in	O	O	O	O
many	O	O	O	O
inducible	B-DNA	O	O	O
genes	I-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
including	O	O	O	O
the	O	O	O	O
enhancer	O	O	O	O
in	O	O	O	O
human	O	O	O	O
immunodeficiency	O	O	O	O
virus	O	O	O	O
.	O	O	O	O

This	O	O	O	O
gene	O	O	O	O
is	O	O	O	O
yet	O	O	O	O
another	O	O	O	O
in	O	O	O	O
a	O	O	O	O
growing	O	O	O	O
list	O	O	O	O
of	O	O	O	O
important	O	O	O	O
regulatory	O	O	O	O
molecules	O	O	O	O
whose	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
is	O	O	O	O
transcriptionally	O	O	O	O
induced	O	O	O	O
upon	O	O	O	O
cellular	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Extrarenal	O	O	O	O
receptor	O	O	O	O
-	O	O	O	O
effector	O	O	O	O
-	O	O	O	O
mechanisms	O	O	O	O
for	O	O	O	O
aldosterone	O	O	O	O
:	O	O	O	O
the	O	O	O	O
sequence	O	O	O	O
of	O	O	O	O
effects	O	O	O	O
on	O	O	O	O
the	O	O	O	O
cellular	O	O	O	O
electrolyte	O	O	O	O
transport	O	O	O	O
in	O	O	O	O
human	O	B-cell_type	O	O
lymphocytes	B-cell_type	I-cell_type	O	O
and	O	O	O	O
their	O	O	O	O
implications	O	O	O	O
for	O	O	O	O
disorders	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
water	O	O	O	O
and	O	O	O	O
electrolyte	O	O	O	O
balances	O	O	O	O
.	O	O	O	O

High	O	O	O	O
affinity	O	O	O	O
aldosterone	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
sites	O	O	O	O
have	O	O	O	O
not	O	O	O	O
only	O	O	O	O
been	O	O	O	O
described	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
classic	O	O	O	O
target	O	O	O	O
tissues	O	O	O	O
such	O	O	O	O
as	O	O	O	O
the	O	O	O	O
renal	O	O	O	O
tubules	O	O	O	O
,	O	O	O	O
but	O	O	O	O
also	O	O	O	O
in	O	O	O	O
non	O	O	O	O
-	O	O	O	O
classic	O	O	O	O
target	O	O	O	O
tissues	O	O	O	O
such	O	O	O	O
as	O	O	O	O
the	O	O	O	O
hippocampus	O	O	O	O
,	O	O	O	O
mammary	O	O	O	O
gland	O	O	O	O
,	O	O	O	O
endothelial	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
and	O	O	O	O
,	O	O	O	O
recently	O	O	O	O
,	O	O	O	O
human	B-cell_type	O	O	O
mononuclear	I-cell_type	O	O	O
leukocytes	I-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

An	O	O	O	O
in	O	O	O	O
vitro	O	O	O	O
effect	O	O	O	O
of	O	O	O	O
aldosterone	O	O	O	O
on	O	O	O	O
intracellular	O	O	O	O
sodium	O	O	O	O
,	O	O	O	O
potassium	O	O	O	O
and	O	O	O	O
calcium	O	O	O	O
concentrations	O	O	O	O
and	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
volume	O	O	O	O
was	O	O	O	O
shown	O	O	O	O
in	O	O	O	O
human	B-cell_type	O	O	O
mononuclear	I-cell_type	O	O	O
leukocytes	I-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
the	O	O	O	O
absence	O	O	O	O
of	O	O	O	O
aldosterone	O	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
intracellular	O	O	O	O
Na	O	O	O	O
+	O	O	O	O
,	O	O	O	O
K	O	O	O	O
+	O	O	O	O
and	O	O	O	O
Ca2	O	O	O	O
+	O	O	O	O
concentrations	O	O	O	O
and	O	O	O	O
the	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
volume	O	O	O	O
decreased	O	O	O	O
significantly	O	O	O	O
,	O	O	O	O
but	O	O	O	O
remained	O	O	O	O
constant	O	O	O	O
when	O	O	O	O
aldosterone	O	O	O	O
(	O	O	O	O
1	O	O	O	O
.	O	O	O	O
4	O	O	O	O
nmol	O	O	O	O
/	O	O	O	O
l	O	O	O	O
)	O	O	O	O
was	O	O	O	O
added	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
incubation	O	O	O	O
medium	O	O	O	O
.	O	O	O	O

These	O	O	O	O
effects	O	O	O	O
of	O	O	O	O
aldosterone	O	O	O	O
were	O	O	O	O
blocked	O	O	O	O
by	O	O	O	O
the	O	O	O	O
aldosterone	O	O	O	O
antagonist	O	O	O	O
canrenone	O	O	O	O
(	O	O	O	O
140	O	O	O	O
nmol	O	O	O	O
/	O	O	O	O
l	O	O	O	O
)	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
sodium	B-protein	O	O	O
/	I-protein	O	O	O
proton	I-protein	O	O	O
exchanger	I-protein	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
membrane	O	O	O	O
could	O	O	O	O
be	O	O	O	O
identified	O	O	O	O
as	O	O	O	O
the	O	O	O	O
primary	O	O	O	O
target	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
aldosterone	O	O	O	O
action	O	O	O	O
,	O	O	O	O
possibly	O	O	O	O
non	O	O	O	O
-	O	O	O	O
genomically	O	O	O	O
mediated	O	O	O	O
through	O	O	O	O
membrane	B-protein	O	O	O
receptors	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
clinical	O	O	O	O
significance	O	O	O	O
of	O	O	O	O
this	O	O	O	O
model	O	O	O	O
was	O	O	O	O
underlined	O	O	O	O
by	O	O	O	O
the	O	O	O	O
demonstration	O	O	O	O
of	O	O	O	O
absent	O	O	O	O
or	O	O	O	O
a	O	O	O	O
decreased	O	O	O	O
number	O	O	O	O
of	O	O	O	O
mineralocorticoid	B-protein	O	O	O
receptors	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
the	O	O	O	O
lack	O	O	O	O
of	O	O	O	O
electrolyte	O	O	O	O
response	O	O	O	O
to	O	O	O	O
aldosterone	O	O	O	O
in	O	O	O	O
human	B-cell_type	O	O	O
mononuclear	I-cell_type	O	O	O
leukocytes	I-cell_type	O	O	O
of	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
with	O	O	O	O
pseudohypoaldosteronism	O	O	O	O
and	O	O	O	O
aldosteronism	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Additionally	O	O	O	O
,	O	O	O	O
an	O	O	O	O
abnormal	O	O	O	O
effector	O	O	O	O
mechanism	O	O	O	O
could	O	O	O	O
be	O	O	O	O
demonstrated	O	O	O	O
in	O	O	O	O
human	B-cell_type	O	O	O
mononuclear	I-cell_type	O	O	O
leukocytes	I-cell_type	O	O	O
from	O	O	O	O
essential	O	O	O	O
hypertensives	O	O	O	O
.	O	O	O	O

These	O	O	O	O
studies	O	O	O	O
are	O	O	O	O
the	O	O	O	O
first	O	O	O	O
to	O	O	O	O
demonstrate	O	O	O	O
the	O	O	O	O
significance	O	O	O	O
of	O	O	O	O
extrarenal	O	B-protein	O	O
,	O	I-protein	O	O
nonepithelial	O	I-protein	O	O
mineralocorticoid	B-protein	I-protein	O	O
receptors	I-protein	I-protein	O	O
and	O	O	O	O
the	O	O	O	O
related	O	O	O	O
effector	O	O	O	O
mechanism	O	O	O	O
in	O	O	O	O
different	O	O	O	O
disorders	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
water	O	O	O	O
and	O	O	O	O
electrolyte	O	O	O	O
balance	O	O	O	O
in	O	O	O	O
man	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Immunohistochemical	O	O	O	O
study	O	O	O	O
of	O	O	O	O
steroid	O	O	O	O
hormones	O	O	O	O
and	O	O	O	O
an	O	O	O	O
estrogen	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
assay	O	O	O	O
in	O	O	O	O
malignant	B-cell_type	O	O	O
soft	I-cell_type	O	O	O
tissue	I-cell_type	O	O	O
tumors	I-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

Immunohistochemically	O	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
immunoreaction	O	O	O	O
against	O	O	O	O
5	O	O	O	O
steroid	O	O	O	O
hormone	O	O	O	O
anti	O	O	O	O
-	O	O	O	O
sera	O	O	O	O
(	O	O	O	O
estradiol	O	O	O	O
,	O	O	O	O
estriol	O	O	O	O
,	O	O	O	O
cortisol	O	O	O	O
,	O	O	O	O
progesterone	O	O	O	O
and	O	O	O	O
testosterone	O	O	O	O
)	O	O	O	O
was	O	O	O	O
examined	O	O	O	O
in	O	O	O	O
39	O	O	O	O
cases	O	O	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
malignant	B-cell_type	O	O	O
soft	I-cell_type	O	O	O
tissue	I-cell_type	O	O	O
tumors	I-cell_type	O	O	O
(	O	O	O	O
fibrosarcoma	O	O	O	O
:	O	O	O	O
8	O	O	O	O
,	O	O	O	O
malignant	O	O	O	O
fibrous	O	O	O	O
histiocytoma	O	O	O	O
:	O	O	O	O
6	O	O	O	O
,	O	O	O	O
rhabdomyosarcoma	O	O	O	O
:	O	O	O	O
10	O	O	O	O
,	O	O	O	O
leiomyosarcoma	O	O	O	O
:	O	O	O	O
10	O	O	O	O
,	O	O	O	O
liposarcoma	O	O	O	O
:	O	O	O	O
5	O	O	O	O
)	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Seventeen	O	O	O	O
cases	O	O	O	O
revealed	O	O	O	O
distinct	O	O	O	O
immunostaining	O	O	O	O
against	O	O	O	O
at	O	O	O	O
least	O	O	O	O
1	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
5	O	O	O	O
steroid	O	O	O	O
hormones	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Immunostained	B-cell_type	O	O	O
tumor	I-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
were	O	O	O	O
more	O	O	O	O
frequently	O	O	O	O
distributed	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
area	O	O	O	O
where	O	O	O	O
tumor	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
infiltration	O	O	O	O
was	O	O	O	O
more	O	O	O	O
invasive	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
majority	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
positive	O	O	O	O
cases	O	O	O	O
occurred	O	O	O	O
in	O	O	O	O
female	O	O	O	O
cases	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Furthermore	O	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
existence	O	O	O	O
of	O	O	O	O
estrogen	B-protein	O	O	O
receptor	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
estrogen	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
)	O	O	O	O
was	O	O	O	O
examined	O	O	O	O
histochemically	O	O	O	O
in	O	O	O	O
39	O	O	O	O
cases	O	O	O	O
and	O	O	O	O
it	O	O	O	O
was	O	O	O	O
detected	O	O	O	O
in	O	O	O	O
8	O	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
concluded	O	O	O	O
that	O	O	O	O
steroid	O	O	O	O
hormones	O	O	O	O
might	O	O	O	O
be	O	O	O	O
closely	O	O	O	O
related	O	O	O	O
to	O	O	O	O
tumor	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
infiltration	O	O	O	O
of	O	O	O	O
some	O	O	O	O
malignant	B-cell_type	O	O	O
soft	I-cell_type	O	O	O
tissue	I-cell_type	O	O	O
tumors	I-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

Involvement	O	O	O	O
of	O	O	O	O
cyclic	B-protein	O	O	O
AMP	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
dependent	I-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
kinases	I-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
signal	O	O	O	O
transduction	O	O	O	O
pathway	O	O	O	O
for	O	O	O	O
interleukin	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
a	O	O	O	O
highly	O	O	O	O
specific	O	O	O	O
protein	O	O	O	O
inhibitor	O	O	O	O
for	O	O	O	O
cyclic	B-protein	O	O	O
AMP	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
dependent	I-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
kinases	I-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
interleukin	B-protein	B-cell_line	O	O
-	I-protein	I-cell_line	O	O
1	I-protein	I-cell_line	O	O
(	O	I-cell_line	O	O
IL	O	I-cell_line	O	O
-	O	I-cell_line	O	O
1	O	I-cell_line	O	O
)	O	I-cell_line	O	O
-	O	I-cell_line	O	O
responsive	O	I-cell_line	O	O
cells	O	I-cell_line	O	O
blocked	O	O	O	O
IL	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
1	I-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
induced	I-DNA	O	O	O
gene	I-DNA	O	O	O
transcription	O	O	O	O
that	O	O	O	O
was	O	O	O	O
driven	O	O	O	O
by	O	O	O	O
the	O	O	O	O
kappa	B-DNA	O	O	O
immunoglobulin	I-DNA	O	O	O
enhancer	I-DNA	O	O	O
or	O	O	O	O
the	O	O	O	O
human	B-DNA	O	O	O
immunodeficiency	I-DNA	O	O	O
virus	I-DNA	O	O	O
long	I-DNA	O	O	O
terminal	I-DNA	O	O	O
repeat	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

This	O	O	O	O
inhibitor	O	O	O	O
did	O	O	O	O
not	O	O	O	O
affect	O	O	O	O
protein	B-protein	O	O	O
kinase	I-protein	O	O	O
C	I-protein	O	O	O
-	O	O	O	O
mediated	O	O	O	O
gene	O	O	O	O
transcription	O	O	O	O
,	O	O	O	O
suggesting	O	O	O	O
that	O	O	O	O
cyclic	B-protein	O	O	O
AMP	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
dependent	I-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
kinases	I-protein	O	O	O
are	O	O	O	O
involved	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
signal	O	O	O	O
transduction	O	O	O	O
pathway	O	O	O	O
for	O	O	O	O
IL	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
a	O	O	O	O
number	O	O	O	O
of	O	O	O	O
responsive	B-cell_type	O	O	O
cell	I-cell_type	O	O	O
types	I-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
Epstein	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
Barr	I-DNA	O	O	O
virus	I-DNA	O	O	O
(	I-DNA	O	O	O
EBV	I-DNA	O	O	O
)	I-DNA	O	O	O
ORI1yt	I-DNA	O	O	O
enhancer	I-DNA	O	O	O
is	O	O	O	O
not	O	O	O	O
B	O	O	O	O
-	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
specific	O	O	O	O
and	O	O	O	O
does	O	O	O	O
not	O	O	O	O
respond	O	O	O	O
synergistically	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
EBV	O	O	O	O
transcription	O	O	O	O
factors	O	O	O	O
R	O	O	O	O
and	O	O	O	O
Z	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
Epstein	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
Barr	I-DNA	O	O	O
virus	I-DNA	O	O	O
DR	I-DNA	O	O	O
promoter	I-DNA	O	O	O
is	O	O	O	O
located	O	O	O	O
upstream	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
PstI	B-DNA	O	O	O
repeats	I-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
in	O	O	O	O
addition	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
TATA	B-DNA	O	O	O
box	I-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
it	O	O	O	O
contains	O	O	O	O
an	O	O	O	O
upstream	B-DNA	O	O	O
region	I-DNA	O	O	O
(	O	O	O	O
positions	O	O	O	O
-	O	O	O	O
69	O	O	O	O
to	O	O	O	O
-	O	O	O	O
220	O	O	O	O
)	O	O	O	O
responsive	O	O	O	O
to	O	O	O	O
EB1	B-protein	O	O	O
(	I-protein	O	O	O
Z	I-protein	O	O	O
)	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
the	O	O	O	O
BZLF1	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
encoded	I-protein	O	O	O
transcription	I-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
and	O	O	O	O
an	O	O	O	O
enhancer	B-DNA	O	O	O
with	O	O	O	O
two	O	O	O	O
functionally	O	O	O	O
distinct	O	O	O	O
domains	O	O	O	O
,	O	O	O	O
A	B-DNA	O	O	O
and	O	O	O	O
B	B-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

Domain	B-DNA	O	O	O
B	I-DNA	O	O	O
has	O	O	O	O
been	O	O	O	O
described	O	O	O	O
as	O	O	O	O
a	O	O	O	O
B	O	B-DNA	O	O
-	O	I-DNA	O	O
cell	O	I-DNA	O	O
-	O	I-DNA	O	O
specific	O	I-DNA	O	O
EB1	B-protein	I-DNA	O	O
-	O	I-DNA	O	O
responsive	O	I-DNA	O	O
element	O	I-DNA	O	O
(	O	O	O	O
P	O	O	O	O
.	O	O	O	O
M	O	O	O	O
.	O	O	O	O
Lieberman	O	O	O	O
,	O	O	O	O
J	O	O	O	O
.	O	O	O	O
M	O	O	O	O
.	O	O	O	O
Hardwick	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
S	O	O	O	O
.	O	O	O	O
D	O	O	O	O
.	O	O	O	O
Hayward	O	O	O	O
,	O	O	O	O
J	O	O	O	O
.	O	O	O	O
Virol	O	O	O	O
.	O	O	O	O
63	O	O	O	O
:	O	O	O	O
3040	O	O	O	O
-	O	O	O	O
3050	O	O	O	O
,	O	O	O	O
1989	O	O	O	O
)	O	O	O	O
activated	O	O	O	O
synergistically	O	O	O	O
by	O	O	O	O
EB1	B-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
R	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
an	O	O	O	O
EBV	B-protein	O	O	O
early	I-protein	O	O	O
product	I-protein	O	O	O
encoded	O	O	O	O
by	O	O	O	O
the	O	O	O	O
open	O	B-DNA	O	O
reading	O	I-DNA	O	O
frame	O	I-DNA	O	O
BRLF1	B-DNA	I-DNA	O	O
(	O	O	O	O
M	O	O	O	O
.	O	O	O	O
A	O	O	O	O
.	O	O	O	O
Cox	O	O	O	O
,	O	O	O	O
J	O	O	O	O
.	O	O	O	O
Leahy	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
J	O	O	O	O
.	O	O	O	O
M	O	O	O	O
.	O	O	O	O
Hardwick	O	O	O	O
,	O	O	O	O
J	O	O	O	O
.	O	O	O	O
Virol	O	O	O	O
.	O	O	O	O
64	O	O	O	O
:	O	O	O	O
313	O	O	O	O
-	O	O	O	O
321	O	O	O	O
,	O	O	O	O
1990	O	O	O	O
)	O	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
show	O	O	O	O
here	O	O	O	O
that	O	O	O	O
domain	B-DNA	O	O	O
B	I-DNA	O	O	O
is	O	O	O	O
an	O	O	O	O
R	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
responsive	I-DNA	O	O	O
element	I-DNA	O	O	O
in	O	O	O	O
HeLa	B-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
and	O	O	O	O
is	O	O	O	O
therefore	O	O	O	O
not	O	O	O	O
an	O	O	O	O
EB1	B-protein	B-DNA	O	O
-	O	I-DNA	O	O
responsive	O	I-DNA	O	O
B	O	I-DNA	O	O
-	O	I-DNA	O	O
cell	O	I-DNA	O	O
-	O	I-DNA	O	O
specific	O	I-DNA	O	O
element	O	I-DNA	O	O
.	O	O	O	O

However	O	O	O	O
,	O	O	O	O
there	O	O	O	O
is	O	O	O	O
an	O	O	O	O
EB1	B-protein	B-DNA	O	O
-	O	I-DNA	O	O
binding	O	I-DNA	O	O
site	O	I-DNA	O	O
(	O	O	O	O
ZRE	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
B	I-DNA	O	O	O
)	O	O	O	O
located	O	O	O	O
within	O	O	O	O
the	O	O	O	O
R	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
responsive	I-DNA	O	O	O
enhancer	I-DNA	O	O	O
region	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

ZRE	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
B	I-DNA	O	O	O
can	O	O	O	O
be	O	O	O	O
deleted	O	O	O	O
without	O	O	O	O
affecting	O	O	O	O
the	O	O	O	O
R	O	O	O	O
-	O	O	O	O
dependent	O	O	O	O
enhancer	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Moreover	O	O	O	O
,	O	O	O	O
there	O	O	O	O
is	O	O	O	O
no	O	O	O	O
cooperation	O	O	O	O
or	O	O	O	O
synergy	O	O	O	O
between	O	O	O	O
R	B-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
EB1	B-protein	O	O	O
when	O	O	O	O
activating	O	O	O	O
the	O	O	O	O
B	B-DNA	O	O	O
domain	I-DNA	O	O	O
(	O	O	O	O
ZRE	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
B	I-DNA	O	O	O
plus	O	O	O	O
the	O	O	O	O
R	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
responsive	I-DNA	O	O	O
element	I-DNA	O	O	O
)	O	O	O	O
positioned	O	O	O	O
as	O	O	O	O
an	O	O	O	O
enhancer	B-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

ZRE	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
B	I-DNA	O	O	O
is	O	O	O	O
therefore	O	O	O	O
not	O	O	O	O
part	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
R	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
inducible	I-DNA	O	O	O
enhancer	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
have	O	O	O	O
tested	O	O	O	O
several	O	O	O	O
subregions	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
DR	B-DNA	O	O	O
enhancer	I-DNA	O	O	O
B	B-DNA	O	O	O
domain	I-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
either	O	O	O	O
alone	O	O	O	O
or	O	O	O	O
in	O	O	O	O
combination	O	O	O	O
,	O	O	O	O
for	O	O	O	O
their	O	O	O	O
capacity	O	O	O	O
to	O	O	O	O
transmit	O	O	O	O
the	O	O	O	O
R	O	O	O	O
-	O	O	O	O
activating	O	O	O	O
signal	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
rabbit	B-DNA	O	O	O
beta	I-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
globin	I-DNA	O	O	O
promoter	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
found	O	O	O	O
that	O	O	O	O
the	O	O	O	O
R	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
responsive	I-DNA	O	O	O
element	I-DNA	O	O	O
is	O	O	O	O
composed	O	O	O	O
of	O	O	O	O
four	O	O	O	O
protoenhancers	B-DNA	O	O	O
that	O	O	O	O
span	O	O	O	O
the	O	O	O	O
whole	O	O	O	O
B	B-DNA	O	O	O
domain	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

These	O	O	O	O
protoenhancers	B-DNA	O	O	O
alone	O	O	O	O
are	O	O	O	O
weakly	O	O	O	O
or	O	O	O	O
not	O	O	O	O
responsive	O	O	O	O
to	O	O	O	O
R	B-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

One	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
protoenhancers	B-DNA	O	O	O
contains	O	O	O	O
the	O	O	O	O
overlapping	B-DNA	O	O	O
palindromes	I-DNA	O	O	O
5	O	O	O	O
'	O	O	O	O
-	O	O	O	O
TTGTCCcgtGGACAAaTGTCC	O	O	O	O
-	O	O	O	O
3	O	O	O	O
'	O	O	O	O
.	O	O	O	O

However	O	O	O	O
,	O	O	O	O
one	O	O	O	O
palindrome	B-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
either	O	O	O	O
alone	O	O	O	O
or	O	O	O	O
duplicated	O	O	O	O
,	O	O	O	O
or	O	O	O	O
the	O	O	O	O
overlapping	B-DNA	O	O	O
palindromes	I-DNA	O	O	O
did	O	O	O	O
not	O	O	O	O
respond	O	O	O	O
to	O	O	O	O
R	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Nuclear	O	O	O	O
3	B-protein	O	O	O
,	I-protein	O	O	O
5	I-protein	O	O	O
,	I-protein	O	O	O
3	I-protein	O	O	O
'	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
triiodothyronine	I-protein	O	O	O
receptors	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
T3R	B-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
of	O	O	O	O
circulating	O	B-cell_type	O	O
human	O	I-cell_type	O	O
lymphocytes	B-cell_type	I-cell_type	O	O
in	O	O	O	O
hyper	O	O	O	O
-	O	O	O	O
and	O	O	O	O
hypothyroidism	O	O	O	O
and	O	O	O	O
nonthyroidal	O	O	O	O
diseases	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
clinical	O	O	O	O
implications	O	O	O	O
of	O	O	O	O
nuclear	O	O	O	O
T3R	B-protein	O	O	O
alterations	O	O	O	O
of	O	O	O	O
circulating	O	B-cell_type	O	O
lymphocytes	B-cell_type	I-cell_type	O	O
in	O	O	O	O
hyperthyroidism	O	O	O	O
,	O	O	O	O
hypothyroidism	O	O	O	O
and	O	O	O	O
nonthyroidal	O	O	O	O
diseases	O	O	O	O
were	O	O	O	O
investigated	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Nuclear	O	O	O	O
T3R	B-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
lymphocytes	B-cell_type	O	O	O
was	O	O	O	O
determined	O	O	O	O
by	O	O	O	O
radio	O	O	O	O
-	O	O	O	O
ligand	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
analysis	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
results	O	O	O	O
showed	O	O	O	O
that	O	O	O	O
in	O	O	O	O
hyper	O	O	O	O
-	O	O	O	O
and	O	O	O	O
hypothyroid	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
the	O	O	O	O
nuclear	O	O	O	O
affinity	O	O	O	O
(	O	O	O	O
Ka	O	O	O	O
)	O	O	O	O
for	O	O	O	O
T3	O	O	O	O
was	O	O	O	O
similar	O	O	O	O
to	O	O	O	O
that	O	O	O	O
of	O	O	O	O
normal	O	O	O	O
subjects	O	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
hyperthyroidism	O	O	O	O
nuclear	O	O	O	O
T3	O	O	O	O
maximal	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
capacity	O	O	O	O
(	O	O	O	O
MBC	O	O	O	O
)	O	O	O	O
was	O	O	O	O
unaltered	O	O	O	O
,	O	O	O	O
whereas	O	O	O	O
in	O	O	O	O
hypothyroidism	O	O	O	O
the	O	O	O	O
MBC	O	O	O	O
was	O	O	O	O
significantly	O	O	O	O
increased	O	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
the	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
with	O	O	O	O
diabetes	O	O	O	O
mellitus	O	O	O	O
,	O	O	O	O
chronic	O	O	O	O
renal	O	O	O	O
failure	O	O	O	O
and	O	O	O	O
hepatic	O	O	O	O
cirrhosis	O	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
nuclear	O	B-protein	O	O
T3R	B-protein	I-protein	O	O
MBC	O	O	O	O
of	O	O	O	O
lymphocytes	B-cell_type	O	O	O
was	O	O	O	O
about	O	O	O	O
1	O	O	O	O
.	O	O	O	O
5	O	O	O	O
-	O	O	O	O
1	O	O	O	O
.	O	O	O	O
6	O	O	O	O
times	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
normal	O	O	O	O
controls	O	O	O	O
.	O	O	O	O

It	O	O	O	O
was	O	O	O	O
concluded	O	O	O	O
that	O	O	O	O
there	O	O	O	O
existed	O	O	O	O
hormonal	O	O	O	O
regulation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
nuclear	O	B-protein	O	O
T3R	B-protein	I-protein	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
up	O	O	O	O
-	O	O	O	O
regulation	O	O	O	O
was	O	O	O	O
seen	O	O	O	O
in	O	O	O	O
hypothyroidism	O	O	O	O
and	O	O	O	O
low	O	O	O	O
T3	O	O	O	O
syndrome	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Lymphocyte	B-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
lines	I-cell_line	O	O	O
from	O	O	O	O
vitamin	O	O	O	O
D	O	O	O	O
-	O	O	O	O
dependent	O	O	O	O
rickets	O	O	O	O
type	O	O	O	O
II	O	O	O	O
show	O	O	O	O
functional	O	O	O	O
defects	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
1	B-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
,	I-protein	O	O	O
25	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
dihydroxyvitamin	I-protein	O	O	O
D3	I-protein	O	O	O
receptor	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Lymphocyte	B-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
lines	I-cell_line	O	O	O
were	O	O	O	O
established	O	O	O	O
from	O	O	O	O
five	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
with	O	O	O	O
vitamin	O	O	O	O
D	O	O	O	O
-	O	O	O	O
dependent	O	O	O	O
rickets	O	O	O	O
,	O	O	O	O
type	O	O	O	O
II	O	O	O	O
(	O	O	O	O
VDDR	O	O	O	O
-	O	O	O	O
II	O	O	O	O
)	O	O	O	O
.	O	O	O	O

These	O	O	O	O
lines	O	O	O	O
were	O	O	O	O
established	O	O	O	O
by	O	O	O	O
infection	O	O	O	O
with	O	O	O	O
human	O	O	O	O
T	O	O	O	O
-	O	O	O	O
lymphotrophic	O	O	O	O
virus	O	O	O	O
type	O	O	O	O
I	O	O	O	O
(	O	O	O	O
HTLV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
I	O	O	O	O
)	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Binding	O	O	O	O
of	O	O	O	O
[	O	O	O	O
3H	O	O	O	O
]	O	O	O	O
1	O	O	O	O
alpha	O	O	O	O
,	O	O	O	O
25	O	O	O	O
-	O	O	O	O
dihydroxyvitamin	O	O	O	O
D3	O	O	O	O
(	O	O	O	O
1	O	O	O	O
,	O	O	O	O
25	O	O	O	O
(	O	O	O	O
OH	O	O	O	O
)	O	O	O	O
2D3	O	O	O	O
)	O	O	O	O
to	O	O	O	O
its	O	O	O	O
receptor	O	O	O	O
in	O	O	O	O
these	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
lines	O	O	O	O
was	O	O	O	O
compared	O	O	O	O
to	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
studies	O	O	O	O
using	O	O	O	O
a	O	O	O	O
T	B-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
lymphocyte	I-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
line	I-cell_line	O	O	O
(	O	O	O	O
S	B-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
LB1	I-cell_line	O	O	O
)	O	O	O	O
from	O	O	O	O
a	O	O	O	O
normal	O	O	O	O
individual	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
1	O	O	O	O
,	O	O	O	O
25	O	O	O	O
(	O	O	O	O
OH	O	O	O	O
)	O	O	O	O
2D3	O	O	O	O
receptor	O	O	O	O
of	O	O	O	O
S	B-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
LB1	I-cell_line	O	O	O
was	O	O	O	O
comparable	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
well	O	O	O	O
-	O	O	O	O
characterized	O	O	O	O
chick	B-protein	O	O	O
intestinal	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
,	I-protein	O	O	O
25	I-protein	O	O	O
(	I-protein	O	O	O
OH	I-protein	O	O	O
)	I-protein	O	O	O
2D3	I-protein	O	O	O
receptor	I-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
terms	O	O	O	O
of	O	O	O	O
its	O	O	O	O
ligand	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
affinity	O	O	O	O
and	O	O	O	O
capacity	O	O	O	O
,	O	O	O	O
its	O	O	O	O
mobility	O	O	O	O
on	O	O	O	O
5	O	O	O	O
-	O	O	O	O
20	O	O	O	O
%	O	O	O	O
sucrose	O	O	O	O
gradients	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
its	O	O	O	O
adsorption	O	O	O	O
to	O	O	O	O
and	O	O	O	O
elution	O	O	O	O
properties	O	O	O	O
from	O	O	O	O
DNA	O	O	O	O
-	O	O	O	O
cellulose	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Three	O	O	O	O
cell	B-cell_line	O	O	O
lines	I-cell_line	O	O	O
established	O	O	O	O
from	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
with	O	O	O	O
VDDR	O	O	O	O
-	O	O	O	O
II	O	O	O	O
(	O	O	O	O
Rh	O	O	O	O
-	O	O	O	O
VDR	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
Sh	O	O	O	O
-	O	O	O	O
VDR	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
Ab	O	O	O	O
-	O	O	O	O
VDR	B-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
showed	O	O	O	O
no	O	O	O	O
specific	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
of	O	O	O	O
1	O	O	O	O
,	O	O	O	O
25	O	O	O	O
(	O	O	O	O
OH	O	O	O	O
)	O	O	O	O
2D3	O	O	O	O
to	O	O	O	O
a	O	O	O	O
receptor	B-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
treatment	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
cultured	B-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
with	O	O	O	O
1	O	O	O	O
,	O	O	O	O
25	O	O	O	O
(	O	O	O	O
OH	O	O	O	O
)	O	O	O	O
2D3	O	O	O	O
did	O	O	O	O
not	O	O	O	O
stimulate	O	O	O	O
production	O	O	O	O
of	O	O	O	O
24	O	O	O	O
,	O	O	O	O
25	O	O	O	O
-	O	O	O	O
dihydroxy	O	O	O	O
-	O	O	O	O
vitamin	O	O	O	O
D3	O	O	O	O
(	O	O	O	O
24	O	O	O	O
,	O	O	O	O
25	O	O	O	O
(	O	O	O	O
OH	O	O	O	O
)	O	O	O	O
2D3	O	O	O	O
)	O	O	O	O
,	O	O	O	O
a	O	O	O	O
response	O	O	O	O
which	O	O	O	O
is	O	O	O	O
diagnostic	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
presence	O	O	O	O
of	O	O	O	O
a	O	O	O	O
functional	B-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
,	I-protein	O	O	O
25	I-protein	O	O	O
(	I-protein	O	O	O
OH	I-protein	O	O	O
)	I-protein	O	O	O
2D3	I-protein	O	O	O
receptor	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
a	O	O	O	O
fourth	O	O	O	O
cell	B-cell_line	O	O	O
line	I-cell_line	O	O	O
,	O	O	O	O
A1	B-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
VDR	I-cell_line	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
receptor	O	O	O	O
for	O	O	O	O
1	O	O	O	O
,	O	O	O	O
25	O	O	O	O
(	O	O	O	O
OH	O	O	O	O
)	O	O	O	O
2D3	O	O	O	O
had	O	O	O	O
a	O	O	O	O
low	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
capacity	O	O	O	O
and	O	O	O	O
25	B-protein	O	O	O
(	I-protein	O	O	O
OH	I-protein	O	O	O
)	I-protein	O	O	O
D3	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
24	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
hydroxylase	I-protein	O	O	O
activity	O	O	O	O
was	O	O	O	O
not	O	O	O	O
detectable	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Induction	O	O	O	O
of	O	O	O	O
24	O	O	O	O
,	O	O	O	O
25	O	O	O	O
-	O	O	O	O
(	O	O	O	O
OH	O	O	O	O
)	O	O	O	O
2D3	O	O	O	O
synthesis	O	O	O	O
by	O	O	O	O
1	O	O	O	O
,	O	O	O	O
25	O	O	O	O
(	O	O	O	O
OH	O	O	O	O
)	O	O	O	O
2D3	O	O	O	O
was	O	O	O	O
observed	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
fifth	O	O	O	O
cell	B-cell_line	O	O	O
line	I-cell_line	O	O	O
,	O	O	O	O
designated	O	O	O	O
Ro	B-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
VDR	I-cell_line	O	O	O
,	O	O	O	O
although	O	O	O	O
the	O	O	O	O
sensitivity	O	O	O	O
to	O	O	O	O
hormone	O	O	O	O
treatment	O	O	O	O
was	O	O	O	O
lower	O	O	O	O
than	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
control	B-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
line	I-cell_line	O	O	O
from	O	O	O	O
a	O	O	O	O
normal	O	O	O	O
donor	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
capacity	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
receptor	B-protein	O	O	O
for	O	O	O	O
1	O	O	O	O
,	O	O	O	O
25	O	O	O	O
(	O	O	O	O
OH	O	O	O	O
)	O	O	O	O
2D3	O	O	O	O
was	O	O	O	O
low	O	O	O	O
in	O	O	O	O
Ro	B-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
VDR	I-cell_line	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
all	O	O	O	O
cell	B-cell_line	O	O	O
lines	I-cell_line	O	O	O
where	O	O	O	O
1	O	O	O	O
,	O	O	O	O
25	O	O	O	O
(	O	O	O	O
OH	O	O	O	O
)	O	O	O	O
2D3	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
to	O	O	O	O
a	O	O	O	O
receptor	B-protein	O	O	O
was	O	O	O	O
detectable	O	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
receptor	B-protein	O	O	O
had	O	O	O	O
the	O	O	O	O
typical	O	O	O	O
sedimentation	O	O	O	O
coefficient	O	O	O	O
of	O	O	O	O
3	O	O	O	O
.	O	O	O	O
7	O	O	O	O
S	O	O	O	O
on	O	O	O	O
sucrose	O	O	O	O
density	O	O	O	O
gradient	O	O	O	O
analysis	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Binding	O	O	O	O
and	O	O	O	O
elution	O	O	O	O
properties	O	O	O	O
to	O	O	O	O
DNA	O	O	O	O
-	O	O	O	O
cellulose	O	O	O	O
,	O	O	O	O
however	O	O	O	O
,	O	O	O	O
differed	O	O	O	O
from	O	O	O	O
normal	O	O	O	O
in	O	O	O	O
both	O	O	O	O
Ro	B-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
VDR	I-cell_line	O	O	O
and	O	O	O	O
A1	B-cell_line	B-cell_line	O	O
-	I-cell_line	I-cell_line	O	O
VDR	I-cell_line	I-cell_line	O	O
cells	O	I-cell_line	O	O
where	O	O	O	O
elution	O	O	O	O
from	O	O	O	O
DNA	O	O	O	O
-	O	O	O	O
cellulose	O	O	O	O
occurred	O	O	O	O
at	O	O	O	O
a	O	O	O	O
lower	O	O	O	O
salt	O	O	O	O
concentration	O	O	O	O
than	O	O	O	O
is	O	O	O	O
typical	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
1	O	O	O	O
,	O	O	O	O
25	O	O	O	O
(	O	O	O	O
OH	O	O	O	O
)	O	O	O	O
2D3	O	O	O	O
receptor	B-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

While	O	O	O	O
Ro	B-cell_line	B-cell_line	O	O
-	I-cell_line	I-cell_line	O	O
VDR	I-cell_line	I-cell_line	O	O
cells	O	I-cell_line	O	O
showed	O	O	O	O
typical	O	O	O	O
nuclear	O	O	O	O
localization	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
unoccupied	O	B-protein	O	O
1	O	I-protein	O	O
,	O	I-protein	O	O
25	O	I-protein	O	O
(	O	I-protein	O	O
OH	O	I-protein	O	O
)	O	I-protein	O	O
2D3	O	I-protein	O	O
receptor	B-protein	I-protein	O	O
,	O	O	O	O
neither	O	O	O	O
the	O	O	O	O
unoccupied	O	O	O	O
nor	O	O	O	O
the	O	O	O	O
occupied	O	O	O	O
receptor	B-protein	O	O	O
from	O	O	O	O
A1	B-cell_line	B-cell_line	O	O
-	I-cell_line	I-cell_line	O	O
VDR	I-cell_line	I-cell_line	O	O
cells	O	I-cell_line	O	O
was	O	O	O	O
completely	O	O	O	O
localized	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
nucleus	O	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
a	O	O	O	O
series	O	O	O	O
of	O	O	O	O
functional	O	O	O	O
studies	O	O	O	O
we	O	O	O	O
found	O	O	O	O
that	O	O	O	O
modulation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
level	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
mRNAs	B-RNA	O	O	O
coding	O	O	O	O
for	O	O	O	O
both	O	O	O	O
the	O	O	O	O
c	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
myc	I-DNA	O	O	O
oncogene	I-DNA	O	O	O
and	O	O	O	O
the	O	O	O	O
growth	O	O	O	O
factor	O	O	O	O
known	O	O	O	O
as	O	O	O	O
granulocyte	O	O	O	O
-	O	O	O	O
monocyte	O	O	O	O
colony	O	O	O	O
stimulating	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
by	O	O	O	O
1	O	O	O	O
,	O	O	O	O
25	O	O	O	O
(	O	O	O	O
OH	O	O	O	O
)	O	O	O	O
2D3	O	O	O	O
correlated	O	O	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
1	O	O	O	O
,	O	O	O	O
25	O	O	O	O
(	O	O	O	O
OH	O	O	O	O
)	O	O	O	O
2D3	O	O	O	O
receptor	B-protein	O	O	O
status	O	O	O	O
of	O	O	O	O
these	O	O	O	O
cells	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Use	O	O	O	O
of	O	O	O	O
these	O	O	O	O
cell	B-cell_line	O	O	O
lines	I-cell_line	O	O	O
will	O	O	O	O
facilitate	O	O	O	O
further	O	O	O	O
study	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
molecular	O	O	O	O
defect	O	O	O	O
(	O	O	O	O
s	O	O	O	O
)	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
receptor	B-protein	O	O	O
for	O	O	O	O
1	O	O	O	O
,	O	O	O	O
25	O	O	O	O
(	O	O	O	O
OH	O	O	O	O
)	O	O	O	O
2D3	O	O	O	O
in	O	O	O	O
vitamin	O	O	O	O
D	O	O	O	O
-	O	O	O	O
dependent	O	O	O	O
rickets	O	O	O	O
type	O	O	O	O
II	O	O	O	O
and	O	O	O	O
will	O	O	O	O
allow	O	O	O	O
a	O	O	O	O
correlation	O	O	O	O
with	O	O	O	O
impairment	O	O	O	O
of	O	O	O	O
cellular	O	O	O	O
functions	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Transcriptional	O	O	O	O
and	O	O	O	O
post	O	O	O	O
-	O	O	O	O
transcriptional	O	O	O	O
regulation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
c	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
jun	I-DNA	O	O	O
expression	O	O	O	O
during	O	O	O	O
monocytic	O	O	O	O
differentiation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
human	B-cell_line	O	O	O
myeloid	I-cell_line	O	O	O
leukemic	I-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
.	O	O	O	O

AP	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
polypeptide	O	O	O	O
product	O	O	O	O
of	O	O	O	O
c	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
jun	I-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
recognizes	O	O	O	O
and	O	O	O	O
binds	O	O	O	O
to	O	O	O	O
specific	B-DNA	O	O	O
DNA	I-DNA	O	O	O
sequences	I-DNA	O	O	O
and	O	O	O	O
stimulates	O	O	O	O
transcription	O	O	O	O
of	O	O	O	O
genes	B-DNA	O	O	O
responsive	O	O	O	O
to	O	O	O	O
certain	O	O	O	O
growth	O	O	O	O
factors	O	O	O	O
and	O	O	O	O
phorbol	O	O	O	O
esters	O	O	O	O
such	O	O	O	O
as	O	O	O	O
12	O	O	O	O
-	O	O	O	O
O	O	O	O	O
-	O	O	O	O
tetradecanoylphorbol	O	O	O	O
-	O	O	O	O
13	O	O	O	O
-	O	O	O	O
acetate	O	O	O	O
(	O	O	O	O
TPA	O	O	O	O
)	O	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
studied	O	O	O	O
the	O	O	O	O
effects	O	O	O	O
of	O	O	O	O
TPA	O	O	O	O
on	O	O	O	O
the	O	O	O	O
regulation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
c	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
jun	I-DNA	O	O	O
gene	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
in	O	O	O	O
HL	B-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
60	I-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
during	O	O	O	O
monocytic	O	O	O	O
differentiation	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Low	O	O	O	O
levels	O	O	O	O
of	O	O	O	O
c	B-DNA	B-RNA	O	O
-	I-DNA	I-RNA	O	O
jun	I-DNA	I-RNA	O	O
transcripts	O	I-RNA	O	O
were	O	O	O	O
detectable	O	O	O	O
in	O	O	O	O
untreated	B-cell_line	O	O	O
HL	I-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
60	I-cell_line	O	O	O
leukemic	I-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
,	O	O	O	O
increased	O	O	O	O
significantly	O	O	O	O
by	O	O	O	O
6	O	O	O	O
h	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
reached	O	O	O	O
near	O	O	O	O
maximal	O	O	O	O
levels	O	O	O	O
by	O	O	O	O
24	O	O	O	O
h	O	O	O	O
of	O	O	O	O
exposure	O	O	O	O
to	O	O	O	O
32	O	O	O	O
nM	O	O	O	O
TPA	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Similar	O	O	O	O
kinetics	O	O	O	O
of	O	O	O	O
c	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
jun	I-DNA	O	O	O
induction	O	O	O	O
by	O	O	O	O
TPA	O	O	O	O
were	O	O	O	O
observed	O	O	O	O
in	O	O	O	O
human	B-cell_line	O	O	O
U	I-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
937	I-cell_line	O	O	O
and	O	O	O	O
THP	B-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
1	I-cell_line	O	O	O
monocytic	I-cell_line	O	O	O
leukemia	I-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
.	O	O	O	O

Similar	O	O	O	O
findings	O	O	O	O
were	O	O	O	O
obtained	O	O	O	O
with	O	O	O	O
bryostatin	O	O	O	O
1	O	O	O	O
(	O	O	O	O
10	O	O	O	O
nM	O	O	O	O
)	O	O	O	O
,	O	O	O	O
another	O	O	O	O
activator	O	O	O	O
of	O	O	O	O
protein	B-protein	O	O	O
kinase	I-protein	O	O	O
C	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
inducer	O	O	O	O
of	O	O	O	O
monocytic	O	O	O	O
differentiation	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Furthermore	O	O	O	O
,	O	O	O	O
1	O	O	O	O
,	O	O	O	O
25	O	O	O	O
-	O	O	O	O
dihydroxyvitamin	O	O	O	O
D3	O	O	O	O
(	O	O	O	O
0	O	O	O	O
.	O	O	O	O
5	O	O	O	O
microM	O	O	O	O
)	O	O	O	O
,	O	O	O	O
a	O	O	O	O
structurally	O	O	O	O
distinct	O	O	O	O
agent	O	O	O	O
which	O	O	O	O
also	O	O	O	O
induces	O	O	O	O
HL	O	O	O	O
-	O	O	O	O
60	O	O	O	O
monocytic	O	O	O	O
differentiation	O	O	O	O
,	O	O	O	O
increased	O	O	O	O
c	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
jun	I-DNA	O	O	O
expression	O	O	O	O
.	O	O	O	O

TPA	O	O	O	O
treatment	O	O	O	O
of	O	O	O	O
HL	B-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
60	I-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
presence	O	O	O	O
of	O	O	O	O
cycloheximide	O	O	O	O
was	O	O	O	O
associated	O	O	O	O
with	O	O	O	O
superinduction	O	O	O	O
of	O	O	O	O
c	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
jun	I-DNA	O	O	O
transcripts	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Run	O	O	O	O
-	O	O	O	O
on	O	O	O	O
analysis	O	O	O	O
demonstrated	O	O	O	O
detectable	O	O	O	O
levels	O	O	O	O
of	O	O	O	O
c	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
jun	I-DNA	O	O	O
gene	O	O	O	O
transcription	O	O	O	O
in	O	O	O	O
untreated	O	B-cell_line	O	O
HL	B-cell_line	I-cell_line	O	O
-	I-cell_line	I-cell_line	O	O
60	I-cell_line	I-cell_line	O	O
cells	I-cell_line	I-cell_line	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
that	O	O	O	O
exposure	O	O	O	O
to	O	O	O	O
TPA	O	O	O	O
increases	O	O	O	O
this	O	O	O	O
rate	O	O	O	O
3	O	O	O	O
.	O	O	O	O
3	O	O	O	O
-	O	O	O	O
fold	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Treatment	O	O	O	O
of	O	O	O	O
HL	B-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
60	I-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
with	O	O	O	O
both	O	O	O	O
TPA	O	O	O	O
and	O	O	O	O
cycloheximide	O	O	O	O
had	O	O	O	O
no	O	O	O	O
effect	O	O	O	O
on	O	O	O	O
the	O	O	O	O
rates	O	O	O	O
of	O	O	O	O
c	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
jun	I-DNA	O	O	O
transcription	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
half	O	O	O	O
-	O	O	O	O
life	O	O	O	O
of	O	O	O	O
c	B-DNA	B-RNA	O	O
-	I-DNA	I-RNA	O	O
jun	I-DNA	I-RNA	O	O
RNA	O	I-RNA	O	O
as	O	O	O	O
determined	O	O	O	O
by	O	O	O	O
treating	O	O	O	O
HL	B-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
60	I-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
with	O	O	O	O
TPA	O	O	O	O
and	O	O	O	O
actinomycin	O	O	O	O
D	O	O	O	O
was	O	O	O	O
30	O	O	O	O
min	O	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
contrast	O	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
half	O	O	O	O
-	O	O	O	O
life	O	O	O	O
of	O	O	O	O
c	B-DNA	B-RNA	O	O
-	I-DNA	I-RNA	O	O
jun	I-DNA	I-RNA	O	O
RNA	O	I-RNA	O	O
in	O	O	O	O
TPA	O	O	O	O
-	O	O	O	O
treated	O	O	O	O
HL	B-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
60	I-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
exposed	O	O	O	O
to	O	O	O	O
cycloheximide	O	O	O	O
and	O	O	O	O
actinomycin	O	O	O	O
D	O	O	O	O
was	O	O	O	O
greater	O	O	O	O
than	O	O	O	O
2	O	O	O	O
h	O	O	O	O
.	O	O	O	O

These	O	O	O	O
findings	O	O	O	O
suggested	O	O	O	O
that	O	O	O	O
the	O	O	O	O
increase	O	O	O	O
in	O	O	O	O
c	B-DNA	B-RNA	O	O
-	I-DNA	I-RNA	O	O
jun	I-DNA	I-RNA	O	O
RNA	O	I-RNA	O	O
observed	O	O	O	O
during	O	O	O	O
TPA	O	O	O	O
-	O	O	O	O
induced	O	O	O	O
monocytic	O	O	O	O
differentiation	O	O	O	O
is	O	O	O	O
mediated	O	O	O	O
by	O	O	O	O
both	O	O	O	O
transcriptional	O	O	O	O
and	O	O	O	O
post	O	O	O	O
-	O	O	O	O
transcriptional	O	O	O	O
mechanisms	O	O	O	O
.	O	O	O	O

[	O	O	O	O
Hormonal	O	O	O	O
interactions	O	O	O	O
and	O	O	O	O
glucocorticoid	B-protein	O	O	O
receptors	I-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
nephrotic	O	O	O	O
syndrome	O	O	O	O
]	O	O	O	O
.	O	O	O	O

As	O	O	O	O
many	O	O	O	O
as	O	O	O	O
27	O	O	O	O
children	O	O	O	O
aged	O	O	O	O
6	O	O	O	O
to	O	O	O	O
15	O	O	O	O
years	O	O	O	O
with	O	O	O	O
morphologically	O	O	O	O
verified	O	O	O	O
nephropathies	O	O	O	O
were	O	O	O	O
examined	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Four	O	O	O	O
variants	O	O	O	O
of	O	O	O	O
changes	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
thyroid	O	O	O	O
status	O	O	O	O
,	O	O	O	O
characteristic	O	O	O	O
of	O	O	O	O
children	O	O	O	O
with	O	O	O	O
different	O	O	O	O
variants	O	O	O	O
of	O	O	O	O
nephrotic	O	O	O	O
syndrome	O	O	O	O
were	O	O	O	O
distinguished	O	O	O	O
:	O	O	O	O
1	O	O	O	O
)	O	O	O	O
biochemical	O	O	O	O
signs	O	O	O	O
of	O	O	O	O
primary	O	O	O	O
hypothyroidism	O	O	O	O
,	O	O	O	O
2	O	O	O	O
)	O	O	O	O
biochemical	O	O	O	O
signs	O	O	O	O
of	O	O	O	O
secondary	O	O	O	O
hypothyroidism	O	O	O	O
,	O	O	O	O
3	O	O	O	O
)	O	O	O	O
low	O	O	O	O
content	O	O	O	O
of	O	O	O	O
T3	O	O	O	O
,	O	O	O	O
4	O	O	O	O
)	O	O	O	O
dysfunction	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
hypophyseal	O	O	O	O
and	O	O	O	O
thyroid	O	O	O	O
system	O	O	O	O
.	O	O	O	O

It	O	O	O	O
is	O	O	O	O
shown	O	O	O	O
that	O	O	O	O
the	O	O	O	O
low	O	O	O	O
level	O	O	O	O
of	O	O	O	O
steroid	B-protein	O	O	O
receptors	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
thyroid	O	O	O	O
hormones	O	O	O	O
that	O	O	O	O
the	O	O	O	O
low	O	O	O	O
level	O	O	O	O
of	O	O	O	O
steroid	B-protein	O	O	O
receptors	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
thyroid	O	O	O	O
hormones	O	O	O	O
(	O	O	O	O
T3	O	O	O	O
and	O	O	O	O
T4	O	O	O	O
)	O	O	O	O
and	O	O	O	O
cortisol	O	O	O	O
is	O	O	O	O
typical	O	O	O	O
of	O	O	O	O
children	O	O	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
signs	O	O	O	O
of	O	O	O	O
renal	O	O	O	O
dysplasia	O	O	O	O
.	O	O	O	O

It	O	O	O	O
is	O	O	O	O
assumed	O	O	O	O
that	O	O	O	O
superaddition	O	O	O	O
under	O	O	O	O
such	O	O	O	O
conditions	O	O	O	O
of	O	O	O	O
immune	O	O	O	O
glomerulopathy	O	O	O	O
(	O	O	O	O
glomerulonephritis	O	O	O	O
and	O	O	O	O
nephrotic	O	O	O	O
syndrome	O	O	O	O
)	O	O	O	O
gives	O	O	O	O
rise	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
resistance	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
treatment	O	O	O	O
with	O	O	O	O
glucocorticoids	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Lymphoid	O	O	O	O
specific	O	O	O	O
gene	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
adenovirus	B-DNA	O	O	O
early	I-DNA	O	O	O
region	I-DNA	O	O	O
3	I-DNA	O	O	O
promoter	I-DNA	O	O	O
is	O	O	O	O
mediated	O	O	O	O
by	O	O	O	O
NF	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
kappa	I-DNA	O	O	O
B	I-DNA	O	O	O
binding	I-DNA	O	O	O
motifs	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

A	O	O	O	O
primary	O	O	O	O
site	O	O	O	O
of	O	O	O	O
infection	O	O	O	O
by	O	O	O	O
human	O	O	O	O
adenoviruses	O	O	O	O
is	O	O	O	O
lymphoid	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

However	O	O	O	O
,	O	O	O	O
analysis	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
viral	B-DNA	O	O	O
control	I-DNA	O	O	O
elements	I-DNA	O	O	O
and	O	O	O	O
the	O	O	O	O
cellular	B-protein	O	O	O
factors	I-protein	O	O	O
that	O	O	O	O
regulate	O	O	O	O
adenoviral	O	O	O	O
gene	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
in	O	O	O	O
lymphocytes	B-cell_type	O	O	O
has	O	O	O	O
not	O	O	O	O
been	O	O	O	O
reported	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
adenovirus	B-DNA	B-protein	O	O
early	I-DNA	I-protein	O	O
region	I-DNA	I-protein	O	O
3	I-DNA	I-protein	O	O
(	O	I-protein	O	O
ES	B-DNA	I-protein	O	O
)	O	I-protein	O	O
gene	O	I-protein	O	O
products	O	I-protein	O	O
are	O	O	O	O
involved	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
maintenance	O	O	O	O
of	O	O	O	O
viral	O	O	O	O
persistence	O	O	O	O
by	O	O	O	O
complexing	O	O	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
class	B-protein	O	O	O
I	I-protein	O	O	O
MHC	I-protein	O	O	O
antigens	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
thus	O	O	O	O
preventing	O	O	O	O
their	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
surface	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
with	O	O	O	O
a	O	O	O	O
resultant	O	O	O	O
decrease	O	O	O	O
in	O	O	O	O
host	O	O	O	O
immunologic	O	O	O	O
destruction	O	O	O	O
.	O	O	O	O

To	O	O	O	O
determine	O	O	O	O
whether	O	O	O	O
different	O	O	O	O
cellular	B-protein	O	O	O
factors	I-protein	O	O	O
were	O	O	O	O
involved	O	O	O	O
in	O	O	O	O
E3	O	O	O	O
regulation	O	O	O	O
in	O	O	O	O
lymphocytes	B-cell_type	O	O	O
as	O	O	O	O
compared	O	O	O	O
with	O	O	O	O
HeLa	B-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
,	O	O	O	O
both	O	O	O	O
DNA	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
and	O	O	O	O
transfection	O	O	O	O
analysis	O	O	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
E3	B-DNA	O	O	O
promoter	I-DNA	O	O	O
in	O	O	O	O
both	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
types	O	O	O	O
were	O	O	O	O
performed	O	O	O	O
.	O	O	O	O

These	O	O	O	O
studies	O	O	O	O
detected	O	O	O	O
two	O	O	O	O
novel	B-DNA	O	O	O
domains	I-DNA	O	O	O
referred	O	O	O	O
to	O	O	O	O
as	O	O	O	O
L1	B-DNA	O	O	O
and	O	O	O	O
L2	B-DNA	O	O	O
with	O	O	O	O
a	O	O	O	O
variety	O	O	O	O
of	O	O	O	O
lymphoid	O	O	O	O
but	O	O	O	O
not	O	O	O	O
HeLa	O	O	O	O
extracts	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Each	O	O	O	O
of	O	O	O	O
these	O	O	O	O
domains	O	O	O	O
possessed	O	O	O	O
strong	O	O	O	O
homology	O	O	O	O
to	O	O	O	O
motifs	O	O	O	O
previously	O	O	O	O
found	O	O	O	O
to	O	O	O	O
bind	O	O	O	O
the	O	O	O	O
cellular	O	B-protein	O	O
factor	O	I-protein	O	O
NF	B-protein	I-protein	O	O
-	I-protein	I-protein	O	O
kappa	I-protein	I-protein	O	O
B	I-protein	I-protein	O	O
.	O	O	O	O

Transfections	O	O	O	O
of	O	O	O	O
E3	B-DNA	O	O	O
constructs	I-DNA	O	O	O
linked	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
chloramphenicol	B-DNA	O	O	O
acetyltransferase	I-DNA	O	O	O
gene	I-DNA	O	O	O
revealed	O	O	O	O
that	O	O	O	O
mutagenesis	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
distal	O	B-DNA	O	O
NF	B-protein	I-DNA	O	O
-	I-protein	I-DNA	O	O
kappa	I-protein	I-DNA	O	O
B	I-protein	I-DNA	O	O
motif	O	I-DNA	O	O
(	O	O	O	O
L2	B-DNA	O	O	O
)	O	O	O	O
had	O	O	O	O
minimal	O	O	O	O
effects	O	O	O	O
on	O	O	O	O
promoter	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
in	O	O	O	O
HeLa	B-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
,	O	O	O	O
but	O	O	O	O
resulted	O	O	O	O
in	O	O	O	O
dramatic	O	O	O	O
decreases	O	O	O	O
in	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
by	O	O	O	O
lymphoid	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
contrast	O	O	O	O
,	O	O	O	O
mutagenesis	O	O	O	O
of	O	O	O	O
proximal	B-DNA	O	O	O
NF	I-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
kappa	I-DNA	O	O	O
B	I-DNA	O	O	O
motif	I-DNA	O	O	O
(	O	O	O	O
L1	B-DNA	O	O	O
)	O	O	O	O
had	O	O	O	O
minimal	O	O	O	O
effects	O	O	O	O
on	O	O	O	O
gene	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
in	O	O	O	O
both	O	O	O	O
HeLa	B-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
and	O	O	O	O
lymphoid	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
but	O	O	O	O
resulted	O	O	O	O
in	O	O	O	O
a	O	O	O	O
small	O	O	O	O
,	O	O	O	O
but	O	O	O	O
reproducible	O	O	O	O
,	O	O	O	O
increase	O	O	O	O
in	O	O	O	O
gene	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
in	O	O	O	O
lymphoid	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
when	O	O	O	O
coupled	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
L2	B-DNA	O	O	O
mutation	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Reversing	O	O	O	O
the	O	O	O	O
position	O	O	O	O
and	O	O	O	O
subsequent	O	O	O	O
mutagenesis	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
L1	B-DNA	O	O	O
and	O	O	O	O
L2	B-DNA	B-DNA	O	O
domains	O	I-DNA	O	O
indicated	O	O	O	O
that	O	O	O	O
the	O	O	O	O
primary	B-DNA	O	O	O
sequence	I-DNA	O	O	O
of	O	O	O	O
these	O	O	O	O
motifs	O	O	O	O
rather	O	O	O	O
than	O	O	O	O
their	O	O	O	O
position	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
E3	B-DNA	O	O	O
promoter	I-DNA	O	O	O
was	O	O	O	O
critical	O	O	O	O
for	O	O	O	O
regulating	O	O	O	O
gene	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
.	O	O	O	O

(	O	O	O	O
ABSTRACT	O	O	O	O
TRUNCATED	O	O	O	O
AT	O	O	O	O
250	O	O	O	O
WORDS	O	O	O	O
)	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Characterization	O	O	O	O
of	O	O	O	O
defensin	B-protein	O	O	O
resistance	O	O	O	O
phenotypes	O	O	O	O
associated	O	O	O	O
with	O	O	O	O
mutations	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
phoP	B-DNA	O	O	O
virulence	I-DNA	O	O	O
regulon	I-DNA	O	O	O
of	O	O	O	O
Salmonella	O	O	O	O
typhimurium	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
defensin	B-protein	O	O	O
sensitivities	O	O	O	O
of	O	O	O	O
Salmonella	O	O	O	O
typhimurium	O	O	O	O
strains	O	O	O	O
with	O	O	O	O
mutations	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
phoP	B-DNA	O	O	O
/	I-DNA	O	O	O
phoQ	I-DNA	O	O	O
two	I-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
component	I-DNA	O	O	O
virulence	I-DNA	O	O	O
regulon	I-DNA	O	O	O
were	O	O	O	O
tested	O	O	O	O
by	O	O	O	O
using	O	O	O	O
purified	B-protein	O	O	O
defensins	I-protein	O	O	O
NP	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
NP	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Strains	O	O	O	O
with	O	O	O	O
mutations	O	O	O	O
in	O	O	O	O
either	O	O	O	O
gene	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
regulatory	B-DNA	O	O	O
pair	I-DNA	O	O	O
(	O	O	O	O
phoP	B-DNA	O	O	O
[	O	O	O	O
transcriptional	B-DNA	O	O	O
activator	I-DNA	O	O	O
]	O	O	O	O
or	O	O	O	O
phoQ	B-DNA	O	O	O
[	O	O	O	O
membrane	B-protein	O	O	O
sensor	I-protein	O	O	O
kinase	I-protein	O	O	O
]	O	O	O	O
)	O	O	O	O
had	O	O	O	O
increased	O	O	O	O
sensitivities	O	O	O	O
to	O	O	O	O
defensin	B-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
predicted	O	O	O	O
periplasmic	B-protein	O	O	O
domain	I-protein	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
PhoQ	B-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
contained	O	O	O	O
a	O	O	O	O
markedly	O	O	O	O
anionic	O	O	O	O
domain	O	O	O	O
that	O	O	O	O
could	O	O	O	O
interact	O	O	O	O
with	O	O	O	O
cationic	B-protein	O	O	O
proteins	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
that	O	O	O	O
could	O	O	O	O
be	O	O	O	O
responsible	O	O	O	O
for	O	O	O	O
resistance	O	O	O	O
to	O	O	O	O
defensin	B-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Because	O	O	O	O
insertion	O	O	O	O
mutations	O	O	O	O
in	O	O	O	O
phoP	B-DNA	O	O	O
are	O	O	O	O
polar	O	O	O	O
on	O	O	O	O
phoQ	B-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
we	O	O	O	O
constructed	O	O	O	O
strains	O	O	O	O
that	O	O	O	O
expressed	O	O	O	O
the	O	O	O	O
PhoQ	B-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
absence	O	O	O	O
of	O	O	O	O
PhoP	B-protein	O	O	O
to	O	O	O	O
test	O	O	O	O
whether	O	O	O	O
resistance	O	O	O	O
to	O	O	O	O
defensin	O	O	O	O
requires	O	O	O	O
only	O	O	O	O
the	O	O	O	O
phoQ	B-DNA	B-protein	O	O
gene	O	I-protein	O	O
product	O	I-protein	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
found	O	O	O	O
that	O	O	O	O
resistance	O	O	O	O
to	O	O	O	O
defensin	O	O	O	O
requires	O	O	O	O
the	O	O	O	O
function	O	O	O	O
of	O	O	O	O
both	O	O	O	O
components	O	O	O	O
of	O	O	O	O
this	O	O	O	O
regulatory	O	O	O	O
system	O	O	O	O
,	O	O	O	O
because	O	O	O	O
strains	O	O	O	O
expressing	O	O	O	O
PhoQ	B-protein	O	O	O
without	O	O	O	O
PhoP	B-protein	O	O	O
were	O	O	O	O
still	O	O	O	O
markedly	O	O	O	O
sensitive	O	O	O	O
to	O	O	O	O
defensins	B-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

This	O	O	O	O
implied	O	O	O	O
that	O	O	O	O
a	O	O	O	O
pag	B-DNA	O	B-protein	O
(	O	O	I-protein	O
phoP	B-DNA	B-DNA	I-protein	O
-	O	I-DNA	I-protein	O
activated	O	I-DNA	I-protein	O
gene	O	I-DNA	I-protein	O
)	O	O	I-protein	O
product	O	O	I-protein	O
is	O	O	O	O
responsible	O	O	O	O
for	O	O	O	O
defensin	B-protein	O	O	O
resistance	O	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
also	O	O	O	O
tested	O	O	O	O
for	O	O	O	O
the	O	O	O	O
ability	O	O	O	O
of	O	O	O	O
defensins	B-protein	O	O	O
NP	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
NP	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
5	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
HNP	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
to	O	O	O	O
activate	O	O	O	O
pag	B-DNA	O	O	O
expression	O	O	O	O
and	O	O	O	O
found	O	O	O	O
that	O	O	O	O
these	O	O	O	O
peptides	O	O	O	O
have	O	O	O	O
no	O	O	O	O
effect	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Defensin	O	O	O	O
resistance	O	O	O	O
is	O	O	O	O
not	O	O	O	O
the	O	O	O	O
only	O	O	O	O
virulence	O	O	O	O
characteristic	O	O	O	O
controlled	O	O	O	O
by	O	O	O	O
the	O	O	O	O
PhoP	B-protein	B-protein	O	O
-	B-protein	I-protein	O	O
PhoQ	I-protein	I-protein	O	O
regulon	O	I-protein	O	O
because	O	O	O	O
mutations	O	O	O	O
in	O	O	O	O
pagC	B-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
as	O	O	O	O
well	O	O	O	O
as	O	O	O	O
ones	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
phoP	B-DNA	B-DNA	O	O
locus	O	I-DNA	O	O
that	O	O	O	O
resulted	O	O	O	O
in	O	O	O	O
constitutive	O	O	O	O
pag	B-DNA	O	O	O
activation	O	O	O	O
(	O	O	O	O
phenotype	O	O	O	O
PhoPc	B-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
,	O	O	O	O
had	O	O	O	O
no	O	O	O	O
effect	O	O	O	O
on	O	O	O	O
defensin	B-protein	O	O	O
resistance	O	O	O	O
,	O	O	O	O
even	O	O	O	O
though	O	O	O	O
they	O	O	O	O
rendered	O	O	O	O
the	O	O	O	O
organism	O	O	O	O
avirulent	O	O	O	O
and	O	O	O	O
deficient	O	O	O	O
in	O	O	O	O
survival	O	O	O	O
within	O	O	O	O
macrophages	B-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
virulence	O	O	O	O
defect	O	O	O	O
conferred	O	O	O	O
by	O	O	O	O
mutations	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
phoP	B-DNA	O	O	O
-	B-DNA	O	O	O
phoQ	I-DNA	O	O	O
two	O	O	O	O
-	O	O	O	O
component	O	O	O	O
regulatory	O	O	O	O
system	O	O	O	O
is	O	O	O	O
not	O	O	O	O
completely	O	O	O	O
explained	O	O	O	O
by	O	O	O	O
alterations	O	O	O	O
in	O	O	O	O
resistance	O	O	O	O
to	O	O	O	O
cationic	B-protein	O	O	O
proteins	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
involves	O	O	O	O
the	O	O	O	O
control	O	O	O	O
of	O	O	O	O
other	O	O	O	O
proteins	O	O	O	O
necessary	O	O	O	O
for	O	O	O	O
S	O	O	O	O
.	O	O	O	O
typhimurium	O	O	O	O
survival	O	O	O	O
within	O	O	O	O
macrophages	B-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

Stimulation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
a	O	O	O	O
human	B-cell_line	O	O	O
T	I-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
clone	I-cell_line	O	O	O
with	O	O	O	O
anti	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
CD3	I-protein	O	O	O
or	O	O	O	O
tumor	B-protein	O	O	O
necrosis	I-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
induces	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
translocation	O	O	O	O
but	O	O	O	O
not	O	O	O	O
human	O	O	O	O
immunodeficiency	O	O	O	O
virus	O	O	O	O
1	O	O	O	O
enhancer	O	O	O	O
-	O	O	O	O
dependent	O	O	O	O
transcription	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
transiently	O	O	O	O
transfected	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
vectors	O	O	O	O
under	O	O	O	O
the	O	O	O	O
control	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
long	B-DNA	O	O	O
terminal	I-DNA	O	O	O
repeat	I-DNA	O	O	O
(	O	O	O	O
LTR	B-DNA	O	O	O
)	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
human	O	O	O	O
immunodeficiency	O	O	O	O
virus	O	O	O	O
(	O	O	O	O
HIV	O	O	O	O
)	O	O	O	O
or	O	O	O	O
its	O	O	O	O
enhancer	B-DNA	O	O	O
sequence	I-DNA	O	O	O
and	O	O	O	O
the	O	O	O	O
translocation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
HIV	B-protein	O	O	O
enhancer	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
binding	I-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
were	O	O	O	O
analyzed	O	O	O	O
in	O	O	O	O
two	O	O	O	O
human	O	O	O	O
T	B-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
clones	I-cell_line	O	O	O
stimulated	O	O	O	O
through	O	O	O	O
their	O	O	O	O
T	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
cell	I-protein	O	O	O
receptor	I-protein	O	O	O
complex	I-protein	O	O	O
or	O	O	O	O
by	O	O	O	O
tumor	B-protein	O	O	O
necrosis	I-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
or	O	O	O	O
phorbol	O	O	O	O
12	O	O	O	O
-	O	O	O	O
myristate	O	O	O	O
13	O	O	O	O
-	O	O	O	O
acetate	O	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
found	O	O	O	O
a	O	O	O	O
dissociation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
translocation	O	O	O	O
from	O	O	O	O
transactivation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
either	O	O	O	O
the	O	O	O	O
HIV	B-DNA	O	O	O
LTR	I-DNA	O	O	O
or	O	O	O	O
the	O	O	O	O
HIV	B-DNA	O	O	O
enhancer	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

Interleukin	B-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
induced	O	O	O	O
proliferation	O	O	O	O
but	O	O	O	O
not	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
translocation	O	O	O	O
or	O	O	O	O
LTR	B-DNA	O	O	O
transactivation	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Phorbol	O	O	O	O
ester	O	O	O	O
or	O	O	O	O
specific	O	O	O	O
antigen	O	O	O	O
recognition	O	O	O	O
induced	O	O	O	O
HIV	B-DNA	O	O	O
LTR	I-DNA	O	O	O
transactivation	O	O	O	O
,	O	O	O	O
whereas	O	O	O	O
stimulation	O	O	O	O
with	O	O	O	O
tumor	B-protein	O	O	O
necrosis	I-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
or	O	O	O	O
antibody	O	O	O	O
to	O	O	O	O
CD3	B-protein	O	O	O
did	O	O	O	O
not	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
two	O	O	O	O
latter	O	O	O	O
signals	O	O	O	O
were	O	O	O	O
nevertheless	O	O	O	O
able	O	O	O	O
to	O	O	O	O
induce	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
translocation	O	O	O	O
with	O	O	O	O
a	O	O	O	O
pattern	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
band	O	O	O	O
-	O	O	O	O
shift	O	O	O	O
assay	O	O	O	O
indistinguishable	O	O	O	O
from	O	O	O	O
that	O	O	O	O
observed	O	O	O	O
using	O	O	O	O
phorbol	O	O	O	O
ester	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Our	O	O	O	O
finding	O	O	O	O
that	O	O	O	O
induction	O	O	O	O
of	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
by	O	O	O	O
tumor	B-protein	O	O	O
necrosis	I-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
or	O	O	O	O
antibody	B-protein	O	O	O
to	I-protein	O	O	O
CD3	I-protein	O	O	O
is	O	O	O	O
not	O	O	O	O
sufficient	O	O	O	O
to	O	O	O	O
induce	O	O	O	O
HIV	B-DNA	O	O	O
enhancer	I-DNA	O	O	O
-	O	O	O	O
dependent	O	O	O	O
transcription	O	O	O	O
in	O	O	O	O
cloned	B-cell_line	O	O	O
T	I-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
contrasts	O	O	O	O
with	O	O	O	O
results	O	O	O	O
obtained	O	O	O	O
in	O	O	O	O
most	O	O	O	O
lymphoblastoid	B-cell_line	O	O	O
T	I-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
lines	I-cell_line	O	O	O
and	O	O	O	O
indicates	O	O	O	O
that	O	O	O	O
normal	O	O	O	O
T	O	B-cell_type	O	O
lymphocytes	B-cell_type	I-cell_type	O	O
differ	O	O	O	O
from	O	O	O	O
tumoral	B-cell_type	O	O	O
T	I-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
in	O	O	O	O
terms	O	O	O	O
of	O	O	O	O
requirements	O	O	O	O
for	O	O	O	O
HIV	B-DNA	O	O	O
LTR	I-DNA	O	O	O
activation	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Furthermore	O	O	O	O
,	O	O	O	O
our	O	O	O	O
results	O	O	O	O
suggest	O	O	O	O
that	O	O	O	O
events	O	O	O	O
linked	O	O	O	O
to	O	O	O	O
T	O	O	O	O
-	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
,	O	O	O	O
in	O	O	O	O
addition	O	O	O	O
to	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
translocation	O	O	O	O
per	O	O	O	O
se	O	O	O	O
,	O	O	O	O
induce	O	O	O	O
functional	O	O	O	O
interactions	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
NF	B-protein	B-protein	O	O
-	I-protein	I-protein	O	O
kappa	I-protein	I-protein	O	O
B	I-protein	I-protein	O	O
complex	O	I-protein	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
HIV	B-DNA	O	O	O
enhancer	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

Decreased	O	O	O	O
concentration	O	O	O	O
of	O	O	O	O
1	B-protein	O	O	O
,	I-protein	O	O	O
25	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
dihydroxyvitamin	I-protein	O	O	O
D3	I-protein	O	O	O
receptors	I-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
peripheral	B-cell_type	O	O	O
mononuclear	I-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
of	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
with	O	O	O	O
X	O	O	O	O
-	O	O	O	O
linked	O	O	O	O
hypophosphatemic	O	O	O	O
rickets	O	O	O	O
:	O	O	O	O
effect	O	O	O	O
of	O	O	O	O
phosphate	O	O	O	O
supplementation	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Abnormal	O	O	O	O
renal	O	O	O	O
tubular	O	O	O	O
phosphate	O	O	O	O
transport	O	O	O	O
is	O	O	O	O
considered	O	O	O	O
to	O	O	O	O
be	O	O	O	O
the	O	O	O	O
primary	O	O	O	O
defect	O	O	O	O
in	O	O	O	O
X	O	O	O	O
-	O	O	O	O
linked	O	O	O	O
hypophosphatemic	O	O	O	O
rickets	O	O	O	O
(	O	O	O	O
XLH	O	O	O	O
)	O	O	O	O
.	O	O	O	O

However	O	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
resistance	O	O	O	O
to	O	O	O	O
vitamin	O	O	O	O
D	O	O	O	O
treatment	O	O	O	O
in	O	O	O	O
XLH	O	O	O	O
cannot	O	O	O	O
be	O	O	O	O
explained	O	O	O	O
by	O	O	O	O
hypophosphatemia	O	O	O	O
alone	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Since	O	O	O	O
most	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
actions	O	O	O	O
of	O	O	O	O
vitamin	O	O	O	O
D	O	O	O	O
are	O	O	O	O
mediated	O	O	O	O
by	O	O	O	O
its	O	O	O	O
receptors	O	O	O	O
(	O	O	O	O
VDR	B-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
,	O	O	O	O
abnormalities	O	O	O	O
of	O	O	O	O
VDR	B-protein	O	O	O
have	O	O	O	O
been	O	O	O	O
postulated	O	O	O	O
in	O	O	O	O
XLH	O	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
order	O	O	O	O
to	O	O	O	O
investigate	O	O	O	O
this	O	O	O	O
possibility	O	O	O	O
,	O	O	O	O
we	O	O	O	O
measured	O	O	O	O
the	O	O	O	O
concentration	O	O	O	O
of	O	O	O	O
VDR	B-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
PHA	O	B-cell_line	O	O
-	O	I-cell_line	O	O
activated	O	I-cell_line	O	O
peripheral	B-cell_type	I-cell_line	O	O
mononuclear	I-cell_type	I-cell_line	O	O
cells	I-cell_type	I-cell_line	O	O
from	O	O	O	O
10	O	O	O	O
XLH	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Patients	O	O	O	O
without	O	O	O	O
phosphate	O	O	O	O
supplementation	O	O	O	O
showed	O	O	O	O
significantly	O	O	O	O
lower	O	O	O	O
concentration	O	O	O	O
(	O	O	O	O
21	O	O	O	O
.	O	O	O	O
7	O	O	O	O
+	O	O	O	O
/	O	O	O	O
-	O	O	O	O
5	O	O	O	O
.	O	O	O	O
1	O	O	O	O
fmol	O	O	O	O
/	O	O	O	O
mg	O	O	O	O
protein	O	O	O	O
,	O	O	O	O
mean	O	O	O	O
+	O	O	O	O
/	O	O	O	O
-	O	O	O	O
SEM	O	O	O	O
)	O	O	O	O
compared	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
normal	O	O	O	O
controls	O	O	O	O
(	O	O	O	O
60	O	O	O	O
.	O	O	O	O
7	O	O	O	O
+	O	O	O	O
/	O	O	O	O
-	O	O	O	O
4	O	O	O	O
.	O	O	O	O
0	O	O	O	O
)	O	O	O	O
.	O	O	O	O

On	O	O	O	O
the	O	O	O	O
contrary	O	O	O	O
,	O	O	O	O
there	O	O	O	O
was	O	O	O	O
no	O	O	O	O
significant	O	O	O	O
difference	O	O	O	O
between	O	O	O	O
the	O	O	O	O
phosphate	O	O	O	O
-	O	O	O	O
supplemented	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
(	O	O	O	O
58	O	O	O	O
.	O	O	O	O
3	O	O	O	O
+	O	O	O	O
/	O	O	O	O
-	O	O	O	O
2	O	O	O	O
.	O	O	O	O
7	O	O	O	O
)	O	O	O	O
and	O	O	O	O
controls	O	O	O	O
.	O	O	O	O

There	O	O	O	O
was	O	O	O	O
a	O	O	O	O
significant	O	O	O	O
positive	O	O	O	O
correlation	O	O	O	O
between	O	O	O	O
VDR	B-protein	O	O	O
concentration	O	O	O	O
and	O	O	O	O
serum	O	O	O	O
phosphate	O	O	O	O
(	O	O	O	O
P	O	O	O	O
less	O	O	O	O
than	O	O	O	O
0	O	O	O	O
.	O	O	O	O
05	O	O	O	O
)	O	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
two	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
,	O	O	O	O
VDR	B-protein	O	O	O
was	O	O	O	O
increased	O	O	O	O
after	O	O	O	O
daily	O	O	O	O
phosphate	O	O	O	O
supplementation	O	O	O	O
was	O	O	O	O
started	O	O	O	O
.	O	O	O	O

These	O	O	O	O
results	O	O	O	O
indicate	O	O	O	O
that	O	O	O	O
a	O	O	O	O
decreased	O	O	O	O
concentration	O	O	O	O
of	O	O	O	O
VDR	B-protein	O	O	O
secondary	O	O	O	O
to	O	O	O	O
persistent	O	O	O	O
hypophosphatemia	O	O	O	O
is	O	O	O	O
one	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
causes	O	O	O	O
of	O	O	O	O
vitamin	O	O	O	O
D	O	O	O	O
resistance	O	O	O	O
in	O	O	O	O
XLH	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Two	O	O	O	O
distinct	O	O	O	O
forms	O	O	O	O
of	O	O	O	O
active	B-protein	O	O	O
transcription	I-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
CREB	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
cAMP	B-protein	O	O	O
response	I-protein	O	O	O
element	I-protein	O	O	O
binding	I-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Mammalian	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
express	O	O	O	O
two	O	O	O	O
distinct	O	O	O	O
forms	O	O	O	O
of	O	O	O	O
transcription	O	B-protein	O	O
factor	O	I-protein	O	O
CREB	B-protein	I-protein	O	O
(	O	O	O	O
cAMP	B-protein	O	O	O
response	I-protein	O	O	O
element	I-protein	O	O	O
binding	I-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
that	O	O	O	O
are	O	O	O	O
apparently	O	O	O	O
the	O	O	O	O
products	O	O	O	O
of	O	O	O	O
alternative	O	O	O	O
splicing	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
CREB	B-protein	B-RNA	O	O
gene	O	I-RNA	O	O
transcript	O	I-RNA	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
two	O	O	O	O
proteins	O	O	O	O
differ	O	O	O	O
by	O	O	O	O
a	O	O	O	O
14	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
amino	I-protein	O	O	O
acid	I-protein	O	O	O
serine	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
rich	I-protein	O	O	O
insertion	I-protein	O	O	O
present	O	O	O	O
in	O	O	O	O
one	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
CREB	B-protein	B-protein	O	O
isoforms	O	I-protein	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
show	O	O	O	O
that	O	O	O	O
both	O	O	O	O
CREB	B-protein	B-protein	O	O
isoforms	O	I-protein	O	O
are	O	O	O	O
expressed	O	O	O	O
in	O	O	O	O
many	B-cell_type	O	O	O
cell	I-cell_type	O	O	O
types	I-cell_type	O	O	O
and	O	O	O	O
mammalian	O	O	O	O
species	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Both	O	O	O	O
encode	O	O	O	O
proteins	O	O	O	O
that	O	O	O	O
bind	O	O	O	O
specifically	O	O	O	O
to	O	O	O	O
a	O	O	O	O
cAMP	B-DNA	O	O	O
response	I-DNA	O	O	O
element	I-DNA	O	O	O
in	I-DNA	O	O	O
vitro	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

As	O	O	O	O
expected	O	O	O	O
for	O	O	O	O
proteins	O	O	O	O
of	O	O	O	O
this	O	O	O	O
class	O	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
CREB	B-protein	B-protein	O	O
proteins	O	I-protein	O	O
bind	O	O	O	O
DNA	O	O	O	O
as	O	O	O	O
dimers	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Both	O	O	O	O
proteins	O	O	O	O
impart	O	O	O	O
cAMP	O	O	O	O
-	O	O	O	O
regulated	O	O	O	O
transcriptional	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
to	O	O	O	O
a	O	O	O	O
heterologous	B-DNA	O	O	O
DNA	I-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
binding	I-DNA	O	O	O
domain	I-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
showing	O	O	O	O
that	O	O	O	O
cAMP	O	O	O	O
directly	O	O	O	O
modulates	O	O	O	O
the	O	O	O	O
transcriptional	O	O	O	O
stimulatory	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
of	O	O	O	O
CREB	B-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
presence	O	O	O	O
of	O	O	O	O
multiple	O	O	O	O
CREB	B-protein	B-protein	O	O
isoforms	O	I-protein	O	O
with	O	O	O	O
identical	O	O	O	O
DNA	O	O	O	O
-	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
specificities	O	O	O	O
but	O	O	O	O
differences	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
presumed	O	O	O	O
regulatory	B-protein	O	O	O
domain	I-protein	O	O	O
raises	O	O	O	O
the	O	O	O	O
possibility	O	O	O	O
that	O	O	O	O
CREB	B-protein	B-protein	O	O
proteins	O	I-protein	O	O
may	O	O	O	O
be	O	O	O	O
able	O	O	O	O
to	O	O	O	O
integrate	O	O	O	O
distinct	O	O	O	O
regulatory	O	O	O	O
signals	O	O	O	O
at	O	O	O	O
the	O	O	O	O
level	O	O	O	O
of	O	O	O	O
gene	O	O	O	O
transcription	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Human	B-protein	O	O	O
immunodeficiency	I-protein	O	O	O
virus	I-protein	O	O	O
vpr	I-protein	O	O	O
product	I-protein	O	O	O
is	O	O	O	O
a	O	O	O	O
virion	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
associated	I-protein	O	O	O
regulatory	I-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
vpr	B-protein	O	O	O
product	I-protein	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
human	O	O	O	O
immunodeficiency	O	O	O	O
virus	O	O	O	O
type	O	O	O	O
1	O	O	O	O
(	O	O	O	O
HIV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
1	O	O	O	O
)	O	O	O	O
acts	O	O	O	O
in	O	O	O	O
trans	O	O	O	O
to	O	O	O	O
accelerate	O	O	O	O
virus	O	O	O	O
replication	O	O	O	O
and	O	O	O	O
cytopathic	O	O	O	O
effect	O	O	O	O
in	O	O	O	O
T	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

Here	O	O	O	O
it	O	O	O	O
is	O	O	O	O
shown	O	O	O	O
that	O	O	O	O
the	O	O	O	O
HIV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
1	O	O	O	O
viral	O	O	O	O
particle	O	O	O	O
contains	O	O	O	O
multiple	O	O	O	O
copies	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
vpr	B-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
vpr	B-protein	O	O	O
product	I-protein	O	O	O
is	O	O	O	O
the	O	O	O	O
first	O	O	O	O
regulatory	O	O	O	O
protein	O	O	O	O
of	O	O	O	O
HIV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
1	O	O	O	O
to	O	O	O	O
be	O	O	O	O
found	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
virus	O	O	O	O
particle	O	O	O	O
.	O	O	O	O

This	O	O	O	O
observation	O	O	O	O
raises	O	O	O	O
the	O	O	O	O
possibility	O	O	O	O
that	O	O	O	O
vpr	B-DNA	O	O	O
acts	O	O	O	O
to	O	O	O	O
facilitate	O	O	O	O
the	O	O	O	O
early	O	O	O	O
steps	O	O	O	O
of	O	O	O	O
infection	O	O	O	O
before	O	O	O	O
de	O	O	O	O
novo	O	O	O	O
viral	O	O	O	O
protein	O	O	O	O
synthesis	O	O	O	O
occurs	O	O	O	O
.	O	O	O	O

A	O	O	O	O
novel	O	O	O	O
B	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
cell	I-protein	O	O	O
lineage	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
specific	I-protein	O	O	O
transcription	I-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
present	O	O	O	O
at	O	O	O	O
early	O	O	O	O
but	O	O	O	O
not	O	O	O	O
late	O	O	O	O
stages	O	O	O	O
of	O	O	O	O
differentiation	B-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

A	O	O	O	O
novel	O	O	O	O
B	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
cell	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
specific	I-protein	O	O	O
transcription	I-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
BSAP	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
was	O	O	O	O
identified	O	O	O	O
as	O	O	O	O
a	O	O	O	O
mammalian	B-protein	O	O	O
homolog	I-protein	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
sea	B-protein	O	O	O
urchin	I-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
TSAP	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
which	O	O	O	O
interacts	O	O	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
promoters	B-DNA	O	O	O
of	O	O	O	O
four	O	O	O	O
tissue	O	O	O	O
-	O	O	O	O
specific	O	O	O	O
late	O	O	O	O
histone	O	O	O	O
H2A	O	O	O	O
-	O	O	O	O
2	O	O	O	O
and	O	O	O	O
H2B	O	O	O	O
-	O	O	O	O
2	O	O	O	O
genes	O	O	O	O
.	O	O	O	O

As	O	O	O	O
shown	O	O	O	O
by	O	O	O	O
mobility	O	O	O	O
-	O	O	O	O
shift	O	O	O	O
,	O	O	O	O
methylation	O	O	O	O
interference	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
mutational	O	O	O	O
analyses	O	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
mammalian	B-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
BSAP	B-protein	O	O	O
recognizes	O	O	O	O
all	O	O	O	O
four	O	O	O	O
sea	B-DNA	O	O	O
urchin	I-DNA	O	O	O
binding	I-DNA	O	O	O
sites	I-DNA	O	O	O
in	O	O	O	O
a	O	O	O	O
manner	O	O	O	O
indistinguishable	O	O	O	O
from	O	O	O	O
TSAP	B-protein	O	O	O
;	O	O	O	O
however	O	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
two	O	O	O	O
proteins	O	O	O	O
differ	O	O	O	O
in	O	O	O	O
molecular	O	O	O	O
weight	O	O	O	O
.	O	O	O	O

BSAP	B-protein	O	O	O
is	O	O	O	O
exclusively	O	O	O	O
restricted	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
B	O	O	O	O
-	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
lineage	O	O	O	O
of	O	O	O	O
lymphoid	O	O	O	O
differentiation	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Its	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
appears	O	O	O	O
to	O	O	O	O
be	O	O	O	O
activated	O	O	O	O
during	O	O	O	O
pro	O	O	O	O
-	O	O	O	O
B	O	O	O	O
-	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
development	O	O	O	O
,	O	O	O	O
is	O	O	O	O
abundant	O	O	O	O
at	O	O	O	O
the	O	O	O	O
pre	O	O	O	O
-	O	O	O	O
B	O	O	O	O
-	O	O	O	O
and	O	O	O	O
mature	O	O	O	O
B	O	O	O	O
-	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
stages	O	O	O	O
,	O	O	O	O
but	O	O	O	O
is	O	O	O	O
absent	O	O	O	O
in	O	O	O	O
terminally	B-cell_type	O	O	O
differentiated	I-cell_type	O	O	O
plasma	I-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

Moreover	O	O	O	O
,	O	O	O	O
BSAP	B-protein	O	O	O
is	O	O	O	O
clearly	O	O	O	O
a	O	O	O	O
B	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
cell	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
specific	I-protein	O	O	O
transcription	I-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
as	O	O	O	O
a	O	O	O	O
wild	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
type	I-DNA	O	O	O
but	O	O	O	O
not	O	O	O	O
a	O	O	O	O
mutant	O	B-DNA	O	O
TSAP	B-protein	I-DNA	O	O
-	O	I-DNA	O	O
binding	O	I-DNA	O	O
site	O	I-DNA	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
sea	O	O	O	O
urchin	O	O	O	O
functions	O	O	O	O
only	O	O	O	O
in	O	O	O	O
transfected	B-cell_line	O	O	O
B	I-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
as	O	O	O	O
an	O	O	O	O
upstream	B-DNA	O	O	O
promoter	I-DNA	O	O	O
element	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

Competition	O	O	O	O
experiments	O	O	O	O
did	O	O	O	O
not	O	O	O	O
reveal	O	O	O	O
any	O	O	O	O
high	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
affinity	I-DNA	O	O	O
binding	I-DNA	O	O	O
site	I-DNA	O	O	O
for	O	O	O	O
BSAP	B-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
known	O	O	O	O
regulatory	B-DNA	O	O	O
regions	I-DNA	O	O	O
of	O	O	O	O
immunoglobulin	O	O	O	O
and	O	O	O	O
class	O	O	O	O
II	O	O	O	O
major	O	O	O	O
histocompatibility	O	O	O	O
(	O	O	O	O
MHC	O	O	O	O
)	O	O	O	O
genes	O	O	O	O
,	O	O	O	O
suggesting	O	O	O	O
that	O	O	O	O
BSAP	B-protein	O	O	O
is	O	O	O	O
a	O	O	O	O
regulator	O	O	O	O
of	O	O	O	O
a	O	O	O	O
different	O	O	O	O
set	O	O	O	O
of	O	O	O	O
B	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
lymphoid	I-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
specific	I-DNA	O	O	O
genes	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

Octamer	B-protein	O	O	O
transcription	I-protein	O	O	O
factors	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
the	O	O	O	O
cell	B-DNA	O	O	O
type	I-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
specificity	I-DNA	O	O	O
of	I-DNA	O	O	O
immunoglobulin	I-DNA	O	O	O
gene	I-DNA	O	O	O
expression	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Antibodies	B-protein	O	O	O
are	O	O	O	O
produced	O	O	O	O
exclusively	O	O	O	O
in	O	O	O	O
B	O	B-cell_type	O	O
lymphocytes	B-cell_type	I-cell_type	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
antibody	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
encoding	I-DNA	O	O	O
genes	I-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
immunoglobulin	B-DNA	O	O	O
(	I-DNA	O	O	O
Ig	I-DNA	O	O	O
)	I-DNA	O	O	O
genes	I-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
is	O	O	O	O
also	O	O	O	O
restricted	O	O	O	O
to	O	O	O	O
B	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
octamer	B-DNA	O	O	O
sequence	I-DNA	O	O	O
ATGCAAAT	O	O	O	O
is	O	O	O	O
present	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
promoter	B-DNA	O	O	O
and	O	O	O	O
the	O	O	O	O
enhancer	B-DNA	O	O	O
of	O	O	O	O
Ig	B-DNA	O	O	O
genes	I-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
plays	O	O	O	O
an	O	O	O	O
important	O	O	O	O
role	O	O	O	O
in	O	O	O	O
its	O	O	O	O
tissue	O	O	O	O
-	O	O	O	O
specific	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
.	O	O	O	O

This	O	O	O	O
sequence	B-DNA	O	O	O
motif	I-DNA	O	O	O
is	O	O	O	O
a	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
site	O	O	O	O
for	O	O	O	O
nuclear	B-protein	O	O	O
proteins	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
so	O	O	O	O
-	O	O	O	O
called	O	O	O	O
octamer	B-protein	O	O	O
transcription	I-protein	O	O	O
factors	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
Oct	B-protein	O	O	O
or	O	O	O	O
OTF	B-protein	O	O	O
factors	I-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
Oct	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
is	O	O	O	O
present	O	O	O	O
in	O	O	O	O
all	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
types	O	O	O	O
analyzed	O	O	O	O
so	O	O	O	O
far	O	O	O	O
,	O	O	O	O
whereas	O	O	O	O
Oct	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2A	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
Oct	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2B	I-protein	O	O	O
are	O	O	O	O
found	O	O	O	O
mainly	O	O	O	O
in	O	O	O	O
B	O	B-cell_type	O	O
lymphocytes	B-cell_type	I-cell_type	O	O
.	O	O	O	O

All	O	O	O	O
three	O	O	O	O
proteins	O	O	O	O
show	O	O	O	O
the	O	O	O	O
same	O	O	O	O
sequence	O	O	O	O
specificity	O	O	O	O
and	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
affinity	O	O	O	O
.	O	O	O	O

It	O	O	O	O
appears	O	O	O	O
that	O	O	O	O
the	O	O	O	O
B	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
-	O	O	O	O
specific	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
Ig	B-DNA	O	O	O
genes	I-DNA	O	O	O
is	O	O	O	O
mediated	O	O	O	O
at	O	O	O	O
least	O	O	O	O
in	O	O	O	O
part	O	O	O	O
by	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
type	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
specific	I-protein	O	O	O
Oct	I-protein	O	O	O
factors	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
that	O	O	O	O
there	O	O	O	O
are	O	O	O	O
both	O	O	O	O
quantitative	O	O	O	O
and	O	O	O	O
qualitative	O	O	O	O
differences	O	O	O	O
between	O	O	O	O
Oct	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
Oct	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
factors	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Recently	O	O	O	O
,	O	O	O	O
a	O	O	O	O
number	O	O	O	O
of	O	O	O	O
other	O	O	O	O
octamer	B-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
variants	I-protein	O	O	O
were	O	O	O	O
identified	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Many	O	O	O	O
of	O	O	O	O
these	O	O	O	O
may	O	O	O	O
be	O	O	O	O
created	O	O	O	O
by	O	O	O	O
alternative	O	O	O	O
splicing	O	O	O	O
of	O	O	O	O
a	O	O	O	O
primary	B-RNA	O	O	O
transcript	I-RNA	O	O	O
of	O	O	O	O
one	O	O	O	O
Oct	O	O	O	O
factor	O	O	O	O
gene	O	O	O	O
and	O	O	O	O
may	O	O	O	O
serve	O	O	O	O
a	O	O	O	O
specific	O	O	O	O
function	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
fine	O	O	O	O
tuning	O	O	O	O
of	O	O	O	O
gene	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
.	O	O	O	O

A	O	O	O	O
factor	O	O	O	O
known	O	O	O	O
to	O	O	O	O
bind	O	O	O	O
to	O	O	O	O
endogenous	B-DNA	O	O	O
Ig	I-DNA	O	O	O
heavy	I-DNA	O	O	O
chain	I-DNA	O	O	O
enhancer	I-DNA	O	O	O
only	O	O	O	O
in	O	O	O	O
lymphocytes	B-cell_type	O	O	O
is	O	O	O	O
a	O	O	O	O
ubiquitously	B-protein	O	O	O
active	I-protein	O	O	O
transcription	I-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
transcriptional	B-DNA	O	O	O
enhancer	I-DNA	O	O	O
located	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
first	O	O	O	O
intron	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
immunoglobulin	B-DNA	O	O	O
heavy	I-DNA	O	O	O
chain	I-DNA	O	O	O
constant	I-DNA	O	O	O
region	I-DNA	O	O	O
is	O	O	O	O
a	O	O	O	O
major	O	O	O	O
determinant	O	O	O	O
of	O	O	O	O
B	O	O	O	O
-	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
-	O	O	O	O
specific	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
immunoglobulin	B-DNA	O	O	O
genes	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

Like	O	O	O	O
other	O	O	O	O
enhancers	B-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
Ig	B-DNA	O	O	O
heavy	I-DNA	O	O	O
chain	I-DNA	O	O	O
enhancer	I-DNA	O	O	O
contains	O	O	O	O
several	O	O	O	O
short	O	O	O	O
sequence	B-DNA	O	O	O
motifs	I-DNA	O	O	O
that	O	O	O	O
bind	O	O	O	O
specific	B-protein	O	O	O
transcription	I-protein	O	O	O
factors	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Each	O	O	O	O
binding	B-DNA	O	O	O
site	I-DNA	O	O	O
contributes	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
overall	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
enhancer	B-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
however	O	O	O	O
no	O	O	O	O
single	O	O	O	O
element	O	O	O	O
seems	O	O	O	O
absolutely	O	O	O	O
required	O	O	O	O
for	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
.	O	O	O	O

For	O	O	O	O
a	O	O	O	O
better	O	O	O	O
understanding	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
Ig	B-DNA	B-DNA	O	O
heavy	I-DNA	I-DNA	O	O
chain	I-DNA	I-DNA	O	O
enhancer	I-DNA	I-DNA	O	O
components	O	I-DNA	O	O
,	O	O	O	O
we	O	O	O	O
have	O	O	O	O
cloned	O	O	O	O
and	O	O	O	O
analyzed	O	O	O	O
individual	O	O	O	O
sequence	B-DNA	O	O	O
elements	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
find	O	O	O	O
that	O	O	O	O
the	O	O	O	O
factor	O	O	O	O
that	O	O	O	O
binds	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
E3	B-DNA	O	O	O
enhancer	I-DNA	O	O	O
motif	I-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
CATGTGGC	O	O	O	O
,	O	O	O	O
is	O	O	O	O
a	O	O	O	O
ubiquitous	B-protein	O	O	O
transcription	I-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

It	O	O	O	O
is	O	O	O	O
present	O	O	O	O
in	O	O	O	O
an	O	O	O	O
active	O	O	O	O
form	O	O	O	O
in	O	O	O	O
both	O	O	O	O
B	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
and	O	O	O	O
non	O	B-cell_type	O	O
-	O	I-cell_type	O	O
B	B-cell_type	I-cell_type	O	O
cells	I-cell_type	I-cell_type	O	O
,	O	O	O	O
where	O	O	O	O
it	O	O	O	O
can	O	O	O	O
mediate	O	O	O	O
transcriptional	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
in	O	O	O	O
vitro	O	O	O	O
and	O	O	O	O
in	O	O	O	O
vivo	O	O	O	O
.	O	O	O	O

However	O	O	O	O
,	O	O	O	O
despite	O	O	O	O
its	O	O	O	O
ability	O	O	O	O
to	O	O	O	O
activate	O	O	O	O
transcription	O	O	O	O
of	O	O	O	O
a	O	O	O	O
transfected	B-DNA	O	O	O
reporter	I-DNA	O	O	O
gene	I-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
factor	O	O	O	O
is	O	O	O	O
apparently	O	O	O	O
unable	O	O	O	O
to	O	O	O	O
bind	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
endogenous	O	B-DNA	O	O
Ig	B-DNA	I-DNA	O	O
heavy	I-DNA	I-DNA	O	O
chain	I-DNA	I-DNA	O	O
enhancer	I-DNA	I-DNA	O	O
in	O	O	O	O
non	O	B-cell_type	O	O
-	O	I-cell_type	O	O
lymphoid	B-cell_type	I-cell_type	O	O
cells	I-cell_type	I-cell_type	O	O
:	O	O	O	O
In	O	O	O	O
previous	O	O	O	O
experiments	O	O	O	O
by	O	O	O	O
others	O	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
characteristic	O	O	O	O
in	O	O	O	O
vivo	O	O	O	O
footprint	O	O	O	O
of	O	O	O	O
this	O	O	O	O
factor	O	O	O	O
,	O	O	O	O
designated	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
muE3	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
was	O	O	O	O
detected	O	O	O	O
in	O	O	O	O
B	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
but	O	O	O	O
not	O	O	O	O
in	O	O	O	O
non	B-cell_type	O	O	O
-	I-cell_type	O	O	O
B	I-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

From	O	O	O	O
this	O	O	O	O
and	O	O	O	O
other	O	O	O	O
findings	O	O	O	O
the	O	O	O	O
picture	O	O	O	O
emerges	O	O	O	O
that	O	O	O	O
there	O	O	O	O
are	O	O	O	O
at	O	O	O	O
least	O	O	O	O
three	O	O	O	O
categories	O	O	O	O
of	O	O	O	O
factors	O	O	O	O
which	O	O	O	O
mediate	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
-	O	O	O	O
type	O	O	O	O
-	O	O	O	O
specific	O	O	O	O
transcription	O	O	O	O
in	O	O	O	O
B	O	B-cell_type	O	O
lymphocytes	B-cell_type	I-cell_type	O	O
:	O	O	O	O
(	O	O	O	O
a	O	O	O	O
)	O	O	O	O
cell	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
specific	I-protein	O	O	O
factors	I-protein	O	O	O
such	O	O	O	O
as	O	O	O	O
Oct	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2A	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
Oct	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2B	I-protein	O	O	O
that	O	O	O	O
are	O	O	O	O
not	O	O	O	O
expressed	O	O	O	O
in	O	O	O	O
most	O	O	O	O
other	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
types	O	O	O	O
:	O	O	O	O
(	O	O	O	O
b	O	O	O	O
)	O	O	O	O
ubiquitous	B-protein	O	O	O
factors	I-protein	O	O	O
such	O	O	O	O
as	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
that	O	O	O	O
are	O	O	O	O
constitutively	O	O	O	O
active	O	O	O	O
in	O	O	O	O
B	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
but	O	O	O	O
are	O	O	O	O
sequestered	O	O	O	O
in	O	O	O	O
an	O	O	O	O
inactive	O	O	O	O
form	O	O	O	O
in	O	O	O	O
other	O	O	O	O
cells	O	O	O	O
;	O	O	O	O
(	O	O	O	O
c	O	O	O	O
)	O	O	O	O
ubiquitously	B-protein	O	O	O
active	I-protein	O	O	O
factors	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
exemplified	O	O	O	O
by	O	O	O	O
the	O	O	O	O
one	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
E3	B-DNA	O	O	O
sequence	I-DNA	O	O	O
motif	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

This	O	O	O	O
factor	O	O	O	O
is	O	O	O	O
present	O	O	O	O
in	O	O	O	O
an	O	O	O	O
active	O	O	O	O
form	O	O	O	O
in	O	O	O	O
a	O	O	O	O
variety	O	O	O	O
of	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
types	O	O	O	O
but	O	O	O	O
is	O	O	O	O
apparently	O	O	O	O
unable	O	O	O	O
to	O	O	O	O
bind	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
endogenous	O	B-DNA	O	O
Ig	B-DNA	I-DNA	O	O
heavy	I-DNA	I-DNA	O	O
chain	I-DNA	I-DNA	O	O
enhancer	I-DNA	I-DNA	O	O
in	O	O	O	O
non	B-cell_type	O	O	O
-	I-cell_type	O	O	O
B	I-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
,	O	O	O	O
perhaps	O	O	O	O
due	O	O	O	O
to	O	O	O	O
a	O	O	O	O
non	O	O	O	O
-	O	O	O	O
permissive	O	O	O	O
chromatin	B-DNA	O	O	O
structure	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
Ig	B-DNA	O	O	O
heavy	I-DNA	O	O	O
chain	I-DNA	O	O	O
locus	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

[	O	O	O	O
Endocrine	O	O	O	O
status	O	O	O	O
changes	O	O	O	O
in	O	O	O	O
children	O	O	O	O
with	O	O	O	O
bronchial	O	O	O	O
asthma	O	O	O	O
]	O	O	O	O
.	O	O	O	O

A	O	O	O	O
study	O	O	O	O
was	O	O	O	O
made	O	O	O	O
of	O	O	O	O
adrenocortical	O	O	O	O
function	O	O	O	O
by	O	O	O	O
measuring	O	O	O	O
blood	O	O	O	O
plasma	O	O	O	O
cortisol	O	O	O	O
concentration	O	O	O	O
and	O	O	O	O
amount	O	O	O	O
of	O	O	O	O
glucocorticoid	B-protein	O	O	O
receptors	I-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
lymphocytes	B-cell_type	O	O	O
as	O	O	O	O
well	O	O	O	O
as	O	O	O	O
thyroid	O	O	O	O
function	O	O	O	O
by	O	O	O	O
measuring	O	O	O	O
blood	O	O	O	O
plasma	O	O	O	O
triidothyronine	O	O	O	O
and	O	O	O	O
thyroxine	O	O	O	O
concentration	O	O	O	O
in	O	O	O	O
58	O	O	O	O
bronchial	O	O	O	O
asthma	O	O	O	O
children	O	O	O	O
aged	O	O	O	O
1	O	O	O	O
to	O	O	O	O
14	O	O	O	O
years	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
authors	O	O	O	O
revealed	O	O	O	O
alterations	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
functional	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
indicated	O	O	O	O
endocrine	O	O	O	O
glands	O	O	O	O
depending	O	O	O	O
on	O	O	O	O
the	O	O	O	O
intensity	O	O	O	O
of	O	O	O	O
bronchial	O	O	O	O
patency	O	O	O	O
disorders	O	O	O	O
and	O	O	O	O
the	O	O	O	O
nature	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
therapeutic	O	O	O	O
measures	O	O	O	O
carried	O	O	O	O
out	O	O	O	O
.	O	O	O	O

TAR	B-DNA	O	O	O
independent	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
human	O	O	O	O
immunodeficiency	O	O	O	O
virus	O	O	O	O
in	O	O	O	O
phorbol	O	O	O	O
ester	O	O	O	O
stimulated	O	O	O	O
T	B-cell_type	O	O	O
lymphocytes	I-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

Multiple	B-DNA	O	O	O
regulatory	I-DNA	O	O	O
elements	I-DNA	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
human	O	O	O	O
immunodeficiency	O	O	O	O
virus	O	O	O	O
long	B-DNA	O	O	O
terminal	I-DNA	O	O	O
repeat	I-DNA	O	O	O
(	O	O	O	O
HIV	B-DNA	O	O	O
LTR	I-DNA	O	O	O
)	O	O	O	O
are	O	O	O	O
required	O	O	O	O
for	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
HIV	O	O	O	O
gene	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Previous	O	O	O	O
transfection	O	O	O	O
studies	O	O	O	O
of	O	O	O	O
HIV	B-DNA	B-DNA	O	O
LTR	I-DNA	I-DNA	O	O
constructs	O	I-DNA	O	O
linked	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
chloramphenicol	B-DNA	O	O	O
acetyltransferase	I-DNA	O	O	O
gene	I-DNA	O	O	O
indicated	O	O	O	O
that	O	O	O	O
multiple	O	O	O	O
regulatory	B-DNA	O	O	O
regions	I-DNA	O	O	O
including	O	O	O	O
the	O	O	O	O
enhancer	B-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
SP1	B-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
TATA	B-DNA	O	O	O
and	O	O	O	O
TAR	B-DNA	O	O	O
regions	I-DNA	O	O	O
were	O	O	O	O
important	O	O	O	O
for	O	O	O	O
HIV	O	O	O	O
gene	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
.	O	O	O	O

To	O	O	O	O
characterize	O	O	O	O
these	O	O	O	O
regulatory	B-DNA	O	O	O
elements	I-DNA	O	O	O
further	O	O	O	O
,	O	O	O	O
mutations	O	O	O	O
in	O	O	O	O
these	O	O	O	O
regions	O	O	O	O
were	O	O	O	O
inserted	O	O	O	O
into	O	O	O	O
both	O	O	O	O
the	O	O	O	O
5	O	O	O	O
'	O	O	O	O
and	O	O	O	O
3	O	O	O	O
'	O	O	O	O
HIV	B-DNA	O	O	O
LTRs	I-DNA	O	O	O
and	O	O	O	O
infectious	O	O	O	O
proviral	O	O	O	O
constructs	O	O	O	O
were	O	O	O	O
assembled	O	O	O	O
.	O	O	O	O

These	O	O	O	O
constructs	O	O	O	O
were	O	O	O	O
transfected	O	O	O	O
into	O	O	O	O
either	O	O	O	O
HeLa	B-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
,	O	O	O	O
Jurkat	B-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
or	O	O	O	O
U937	B-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
in	O	O	O	O
both	O	O	O	O
the	O	O	O	O
presence	O	O	O	O
and	O	O	O	O
absence	O	O	O	O
of	O	O	O	O
phorbol	O	O	O	O
esters	O	O	O	O
which	O	O	O	O
have	O	O	O	O
previously	O	O	O	O
been	O	O	O	O
demonstrated	O	O	O	O
to	O	O	O	O
activate	O	O	O	O
HIV	O	O	O	O
gene	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Viral	O	O	O	O
gene	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
was	O	O	O	O
assayed	O	O	O	O
by	O	O	O	O
the	O	O	O	O
level	O	O	O	O
of	O	O	O	O
p24	B-protein	O	O	O
gag	I-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
released	O	O	O	O
from	O	O	O	O
cultures	O	O	O	O
transfected	O	O	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
proviral	O	O	O	O
constructs	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Results	O	O	O	O
in	O	O	O	O
all	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
lines	O	O	O	O
indicated	O	O	O	O
that	O	O	O	O
mutations	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
SP1	B-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
TATA	B-DNA	O	O	O
and	O	O	O	O
the	O	O	O	O
TAR	B-DNA	O	O	O
loop	I-DNA	O	O	O
and	O	O	O	O
stem	B-DNA	O	O	O
secondary	I-DNA	O	O	O
structure	I-DNA	O	O	O
resulted	O	O	O	O
in	O	O	O	O
marked	O	O	O	O
decreases	O	O	O	O
in	O	O	O	O
gene	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
while	O	O	O	O
mutations	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
enhancer	B-DNA	O	O	O
motif	I-DNA	O	O	O
or	O	O	O	O
TAR	B-DNA	O	O	O
primary	I-DNA	O	O	O
sequence	I-DNA	O	O	O
resulted	O	O	O	O
in	O	O	O	O
only	O	O	O	O
slight	O	O	O	O
decreases	O	O	O	O
.	O	O	O	O

However	O	O	O	O
,	O	O	O	O
viruses	O	O	O	O
containing	O	O	O	O
mutations	O	O	O	O
in	O	O	O	O
either	O	O	O	O
the	O	O	O	O
TAR	B-DNA	O	O	O
loop	I-DNA	O	O	O
sequences	I-DNA	O	O	O
or	O	O	O	O
stem	B-DNA	O	O	O
secondary	I-DNA	O	O	O
structure	I-DNA	O	O	O
which	O	O	O	O
were	O	O	O	O
very	O	O	O	O
defective	O	O	O	O
for	O	O	O	O
gene	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
in	O	O	O	O
untreated	O	O	O	O
Jurkat	B-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
,	O	O	O	O
gave	O	O	O	O
nearly	O	O	O	O
wild	O	O	O	O
-	O	O	O	O
type	O	O	O	O
levels	O	O	O	O
of	O	O	O	O
gene	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
in	O	O	O	O
phorbol	O	O	O	O
ester	O	O	O	O
-	O	O	O	O
treated	O	O	O	O
Jurkat	B-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
but	O	O	O	O
not	O	O	O	O
in	O	O	O	O
phorbol	B-cell_line	O	O	O
ester	I-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
treated	I-cell_line	O	O	O
HeLa	I-cell_line	O	O	O
or	O	O	O	O
U937	B-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
.	O	O	O	O

High	O	O	O	O
level	O	O	O	O
gene	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
these	O	O	O	O
TAR	B-DNA	O	O	O
mutant	I-DNA	O	O	O
constructs	I-DNA	O	O	O
in	O	O	O	O
phorbol	O	O	O	O
ester	O	O	O	O
-	O	O	O	O
treated	O	O	O	O
Jurkat	B-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
was	O	O	O	O
eliminated	O	O	O	O
by	O	O	O	O
second	O	O	O	O
site	O	O	O	O
mutations	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
enhancer	B-DNA	O	O	O
region	I-DNA	O	O	O
or	O	O	O	O
by	O	O	O	O
disruption	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
tat	B-DNA	O	O	O
gene	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

(	O	O	O	O
ABSTRACT	O	O	O	O
TRUNCATED	O	O	O	O
AT	O	O	O	O
250	O	O	O	O
WORDS	O	O	O	O
)	O	O	O	O
.	O	O	O	O

A	O	O	O	O
case	O	O	O	O
of	O	O	O	O
hypersensitivity	O	O	O	O
to	O	O	O	O
thyroid	O	O	O	O
hormones	O	O	O	O
with	O	O	O	O
normally	O	O	O	O
functioning	O	O	O	O
thyroid	O	O	O	O
gland	O	O	O	O
and	O	O	O	O
increased	O	O	O	O
nuclear	O	O	O	O
triiodothyronine	B-protein	O	O	O
receptors	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

A	O	O	O	O
52	O	O	O	O
-	O	O	O	O
year	O	O	O	O
-	O	O	O	O
old	O	O	O	O
male	O	O	O	O
presented	O	O	O	O
himself	O	O	O	O
with	O	O	O	O
tachycardia	O	O	O	O
crises	O	O	O	O
which	O	O	O	O
appeared	O	O	O	O
first	O	O	O	O
during	O	O	O	O
childhood	O	O	O	O
,	O	O	O	O
increased	O	O	O	O
in	O	O	O	O
frequency	O	O	O	O
without	O	O	O	O
goiter	O	O	O	O
or	O	O	O	O
exophthalmos	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Cardiac	O	O	O	O
and	O	O	O	O
adrenergic	O	O	O	O
diseases	O	O	O	O
were	O	O	O	O
excluded	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
thyroid	O	O	O	O
function	O	O	O	O
was	O	O	O	O
normal	O	O	O	O
regarding	O	O	O	O
T4	O	O	O	O
,	O	O	O	O
free	O	O	O	O
T4	O	O	O	O
and	O	O	O	O
T3	O	O	O	O
,	O	O	O	O
TBG	O	O	O	O
,	O	O	O	O
radioiodine	O	O	O	O
uptake	O	O	O	O
,	O	O	O	O
TSH	O	O	O	O
and	O	O	O	O
T3	O	O	O	O
suppressibility	O	O	O	O
;	O	O	O	O
however	O	O	O	O
the	O	O	O	O
TSH	O	O	O	O
response	O	O	O	O
to	O	O	O	O
TRH	O	O	O	O
was	O	O	O	O
decreased	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
lymphocyte	B-protein	O	O	O
nuclear	I-protein	O	O	O
T3	I-protein	O	O	O
receptor	I-protein	O	O	O
was	O	O	O	O
found	O	O	O	O
with	O	O	O	O
an	O	O	O	O
affinity	O	O	O	O
close	O	O	O	O
to	O	O	O	O
that	O	O	O	O
of	O	O	O	O
normal	O	O	O	O
volunteers	O	O	O	O
(	O	O	O	O
Ka	O	O	O	O
:	O	O	O	O
1	O	O	O	O
.	O	O	O	O
42	O	O	O	O
x	O	O	O	O
10	O	O	O	O
(	O	O	O	O
10	O	O	O	O
)	O	O	O	O
M	O	O	O	O
-	O	O	O	O
1	O	O	O	O
vs	O	O	O	O
1	O	O	O	O
.	O	O	O	O
95	O	O	O	O
+	O	O	O	O
/	O	O	O	O
-	O	O	O	O
0	O	O	O	O
.	O	O	O	O
35	O	O	O	O
x	O	O	O	O
10	O	O	O	O
(	O	O	O	O
10	O	O	O	O
)	O	O	O	O
M	O	O	O	O
-	O	O	O	O
1	O	O	O	O
)	O	O	O	O
and	O	O	O	O
a	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
capacity	O	O	O	O
markedly	O	O	O	O
increased	O	O	O	O
(	O	O	O	O
9	O	O	O	O
.	O	O	O	O
9	O	O	O	O
vs	O	O	O	O
3	O	O	O	O
.	O	O	O	O
7	O	O	O	O
+	O	O	O	O
/	O	O	O	O
-	O	O	O	O
0	O	O	O	O
.	O	O	O	O
4	O	O	O	O
fmol	O	O	O	O
T3	O	O	O	O
/	O	O	O	O
100	O	O	O	O
micrograms	O	O	O	O
DNA	O	O	O	O
)	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Pindolol	O	O	O	O
was	O	O	O	O
inefficient	O	O	O	O
on	O	O	O	O
the	O	O	O	O
dysrhythmia	O	O	O	O
which	O	O	O	O
disappeared	O	O	O	O
with	O	O	O	O
carbimazole	O	O	O	O
and	O	O	O	O
relapsed	O	O	O	O
after	O	O	O	O
withdrawal	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
antithyroid	O	O	O	O
drug	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Under	O	O	O	O
carbimazole	O	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
plasma	O	O	O	O
T4	O	O	O	O
markedly	O	O	O	O
decreased	O	O	O	O
(	O	O	O	O
27	O	O	O	O
.	O	O	O	O
7	O	O	O	O
+	O	O	O	O
/	O	O	O	O
-	O	O	O	O
3	O	O	O	O
.	O	O	O	O
6	O	O	O	O
nmol	O	O	O	O
/	O	O	O	O
l	O	O	O	O
)	O	O	O	O
but	O	O	O	O
the	O	O	O	O
patient	O	O	O	O
remained	O	O	O	O
euthyroid	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
clinical	O	O	O	O
course	O	O	O	O
and	O	O	O	O
the	O	O	O	O
laboratory	O	O	O	O
data	O	O	O	O
suggest	O	O	O	O
that	O	O	O	O
the	O	O	O	O
tachycardia	O	O	O	O
crises	O	O	O	O
are	O	O	O	O
the	O	O	O	O
consequence	O	O	O	O
of	O	O	O	O
a	O	O	O	O
hypersensitivity	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
heart	O	O	O	O
to	O	O	O	O
thyroid	O	O	O	O
hormones	O	O	O	O
,	O	O	O	O
associated	O	O	O	O
with	O	O	O	O
an	O	O	O	O
increased	O	O	O	O
number	O	O	O	O
of	O	O	O	O
T3	B-protein	O	O	O
nuclear	I-protein	O	O	O
receptor	I-protein	O	O	O
sites	O	O	O	O
in	O	O	O	O
lymphocytes	B-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

Induction	O	O	O	O
of	O	O	O	O
immediate	B-DNA	O	O	O
early	I-DNA	O	O	O
response	I-DNA	O	O	O
genes	I-DNA	O	O	O
by	O	O	O	O
macrophage	B-protein	O	O	O
colony	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
stimulating	I-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
normal	B-cell_type	O	O	O
human	I-cell_type	O	O	O
monocytes	I-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

A	O	O	O	O
group	O	O	O	O
of	O	O	O	O
coordinately	O	O	O	O
induced	O	O	O	O
protooncogenes	B-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
cytoskeletal	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
extracellular	O	O	O	O
matrix	O	O	O	O
genes	O	O	O	O
have	O	O	O	O
been	O	O	O	O
termed	O	O	O	O
immediate	B-DNA	O	O	O
early	I-DNA	O	O	O
response	I-DNA	O	O	O
genes	I-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
their	O	O	O	O
induction	O	O	O	O
has	O	O	O	O
been	O	O	O	O
associated	O	O	O	O
with	O	O	O	O
growth	B-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
-	O	O	O	O
stimulated	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
proliferation	O	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
have	O	O	O	O
investigated	O	O	O	O
the	O	O	O	O
induction	O	O	O	O
of	O	O	O	O
these	O	O	O	O
genes	O	O	O	O
by	O	O	O	O
macrophage	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
CSF	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
M	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
CSF	I-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
in	O	O	O	O
human	B-cell_type	O	O	O
monocytes	I-cell_type	O	O	O
that	O	O	O	O
do	O	O	O	O
not	O	O	O	O
proliferate	O	O	O	O
in	O	O	O	O
response	O	O	O	O
to	O	O	O	O
M	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
CSF	I-protein	O	O	O
but	O	O	O	O
require	O	O	O	O
the	O	O	O	O
factor	O	O	O	O
for	O	O	O	O
optimal	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
differentiation	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Normal	O	O	O	O
human	B-cell_type	O	O	O
monocytes	I-cell_type	O	O	O
were	O	O	O	O
isolated	O	O	O	O
,	O	O	O	O
carefully	O	O	O	O
washed	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
incubated	O	O	O	O
for	O	O	O	O
36	O	O	O	O
to	O	O	O	O
48	O	O	O	O
h	O	O	O	O
in	O	O	O	O
fetal	O	O	O	O
bovine	O	O	O	O
serum	O	O	O	O
-	O	O	O	O
containing	O	O	O	O
medium	O	O	O	O
.	O	O	O	O

At	O	O	O	O
the	O	O	O	O
end	O	O	O	O
of	O	O	O	O
this	O	O	O	O
incubation	O	O	O	O
the	O	O	O	O
resting	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
were	O	O	O	O
stimulated	O	O	O	O
with	O	O	O	O
M	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
CSF	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
RNA	B-RNA	O	O	O
was	O	O	O	O
isolated	O	O	O	O
for	O	O	O	O
analysis	O	O	O	O
by	O	O	O	O
Northern	O	O	O	O
blotting	O	O	O	O
.	O	O	O	O

RNA	B-RNA	O	O	O
from	O	O	O	O
control	O	O	O	O
resting	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
contained	O	O	O	O
low	O	O	O	O
to	O	O	O	O
undetectable	O	O	O	O
levels	O	O	O	O
of	O	O	O	O
c	B-RNA	O	O	O
-	I-RNA	O	O	O
jun	I-RNA	O	O	O
,	O	O	O	O
fibronectin	B-RNA	O	O	O
receptor	I-RNA	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
actin	B-RNA	O	O	O
mRNA	I-RNA	O	O	O
.	O	O	O	O

Within	O	O	O	O
15	O	O	O	O
to	O	O	O	O
30	O	O	O	O
min	O	O	O	O
of	O	O	O	O
addition	O	O	O	O
of	O	O	O	O
M	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
CSF	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
however	O	O	O	O
,	O	O	O	O
there	O	O	O	O
was	O	O	O	O
a	O	O	O	O
dramatic	O	O	O	O
coordinate	O	O	O	O
induction	O	O	O	O
of	O	O	O	O
these	O	O	O	O
genes	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
c	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
jun	I-DNA	O	O	O
gene	I-DNA	O	O	O
expression	O	O	O	O
was	O	O	O	O
very	O	O	O	O
transient	O	O	O	O
and	O	O	O	O
was	O	O	O	O
not	O	O	O	O
detectable	O	O	O	O
by	O	O	O	O
60	O	O	O	O
min	O	O	O	O
after	O	O	O	O
M	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
CSF	I-protein	O	O	O
addition	O	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
contrast	O	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
actin	O	O	O	O
and	O	O	O	O
fibronectin	O	O	O	O
receptor	O	O	O	O
mRNA	O	O	O	O
was	O	O	O	O
more	O	O	O	O
sustained	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
the	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
these	O	O	O	O
genes	O	O	O	O
remained	O	O	O	O
elevated	O	O	O	O
at	O	O	O	O
24	O	O	O	O
to	O	O	O	O
48	O	O	O	O
h	O	O	O	O
after	O	O	O	O
M	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
CSF	I-protein	O	O	O
addition	O	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
also	O	O	O	O
observed	O	O	O	O
the	O	O	O	O
induction	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
myelomonocytic	B-protein	B-DNA	O	O
specific	I-protein	I-DNA	O	O
tyrosine	I-protein	I-DNA	O	O
kinase	I-protein	I-DNA	O	O
hck	O	I-DNA	O	O
gene	O	I-DNA	O	O
simultaneously	O	O	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
other	O	O	O	O
immediate	B-DNA	O	O	O
early	I-DNA	O	O	O
response	I-DNA	O	O	O
genes	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
protein	O	O	O	O
synthesis	O	O	O	O
inhibitor	O	O	O	O
cycloheximide	O	O	O	O
did	O	O	O	O
not	O	O	O	O
block	O	O	O	O
the	O	O	O	O
induction	O	O	O	O
of	O	O	O	O
any	O	O	O	O
of	O	O	O	O
these	O	O	O	O
genes	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
in	O	O	O	O
fact	O	O	O	O
,	O	O	O	O
super	O	O	O	O
-	O	O	O	O
induced	O	O	O	O
the	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
c	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
jun	I-DNA	O	O	O
and	O	O	O	O
hck	B-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

Nuclear	O	O	O	O
run	O	O	O	O
on	O	O	O	O
transcription	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
c	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
jun	I-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
hck	B-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
actin	B-DNA	O	O	O
genes	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

Therefore	O	O	O	O
,	O	O	O	O
in	O	O	O	O
normal	O	B-cell_type	O	O
human	B-cell_type	I-cell_type	O	O
monocytes	I-cell_type	I-cell_type	O	O
M	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
CSF	I-protein	O	O	O
induces	O	O	O	O
immediate	B-DNA	O	O	O
early	I-DNA	O	O	O
response	I-DNA	O	O	O
genes	I-DNA	O	O	O
without	O	O	O	O
inducing	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
proliferation	O	O	O	O
.	O	O	O	O

These	O	O	O	O
genes	O	O	O	O
may	O	O	O	O
then	O	O	O	O
play	O	O	O	O
a	O	O	O	O
role	O	O	O	O
in	O	O	O	O
altering	O	O	O	O
the	O	O	O	O
physiologic	O	O	O	O
status	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
cells	O	O	O	O
in	O	O	O	O
response	O	O	O	O
to	O	O	O	O
CSF	B-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Inducible	O	O	O	O
nuclear	B-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
binding	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
kappa	B-DNA	O	O	O
B	I-DNA	O	O	O
elements	I-DNA	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
human	B-DNA	O	O	O
immunodeficiency	I-DNA	O	O	O
virus	I-DNA	O	O	O
enhancer	I-DNA	O	O	O
in	O	O	O	O
T	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
can	O	O	O	O
be	O	O	O	O
blocked	O	O	O	O
by	O	O	O	O
cyclosporin	O	O	O	O
A	O	O	O	O
in	O	O	O	O
a	O	O	O	O
signal	O	O	O	O
-	O	O	O	O
dependent	O	O	O	O
manner	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Cyclosporin	O	O	O	O
A	O	O	O	O
(	O	O	O	O
CsA	O	O	O	O
)	O	O	O	O
is	O	O	O	O
thought	O	O	O	O
to	O	O	O	O
exert	O	O	O	O
its	O	O	O	O
immunosuppressive	O	O	O	O
effects	O	O	O	O
by	O	O	O	O
inhibiting	O	O	O	O
the	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
a	O	O	O	O
distinct	O	O	O	O
set	O	O	O	O
of	O	O	O	O
lymphokine	B-DNA	O	O	O
genes	I-DNA	O	O	O
which	O	O	O	O
are	O	O	O	O
induced	O	O	O	O
upon	O	O	O	O
T	O	O	O	O
-	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
,	O	O	O	O
among	O	O	O	O
them	O	O	O	O
the	O	O	O	O
gene	O	O	O	O
coding	O	O	O	O
for	O	O	O	O
interleukin	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
addition	O	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
human	O	O	O	O
immunodeficiency	O	O	O	O
virus	O	O	O	O
(	O	O	O	O
HIV	O	O	O	O
)	O	O	O	O
is	O	O	O	O
partially	O	O	O	O
suppressed	O	O	O	O
.	O	O	O	O

To	O	O	O	O
better	O	O	O	O
understand	O	O	O	O
the	O	O	O	O
molecular	O	O	O	O
mechanisms	O	O	O	O
underlying	O	O	O	O
suppression	O	O	O	O
by	O	O	O	O
CsA	O	O	O	O
,	O	O	O	O
we	O	O	O	O
have	O	O	O	O
investigated	O	O	O	O
the	O	O	O	O
effects	O	O	O	O
of	O	O	O	O
this	O	O	O	O
drug	O	O	O	O
on	O	O	O	O
transcription	B-protein	O	O	O
factors	I-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
T	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

Here	O	O	O	O
we	O	O	O	O
report	O	O	O	O
that	O	O	O	O
the	O	O	O	O
formation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
two	O	O	O	O
distinct	O	O	O	O
mitogen	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
inducible	I-protein	O	O	O
DNA	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
binding	I-protein	O	O	O
complexes	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
kappa	B-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
complex	I-protein	O	O	O
within	O	O	O	O
the	O	O	O	O
HIV	B-DNA	O	O	O
enhancer	I-DNA	O	O	O
and	O	O	O	O
the	O	O	O	O
NFAT	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
complex	I-protein	O	O	O
within	O	O	O	O
the	O	O	O	O
interleukin	B-protein	B-DNA	O	O
-	I-protein	I-DNA	O	O
2	I-protein	I-DNA	O	O
enhancer	O	I-DNA	O	O
,	O	O	O	O
is	O	O	O	O
inhibited	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
presence	O	O	O	O
of	O	O	O	O
CsA	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
kappa	O	O	O	O
B	O	O	O	O
-	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
HIV	B-DNA	O	O	O
enhancer	I-DNA	O	O	O
is	O	O	O	O
inhibited	O	O	O	O
only	O	O	O	O
if	O	O	O	O
it	O	O	O	O
is	O	O	O	O
activated	O	O	O	O
via	O	O	O	O
the	O	O	O	O
mitogen	B-protein	O	O	O
phytohemagglutinin	B-protein	O	O	O
whereas	O	O	O	O
phorbol	O	O	O	O
myristate	O	O	O	O
acetate	O	O	O	O
-	O	O	O	O
mediated	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
is	O	O	O	O
completely	O	O	O	O
insensitive	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
drug	O	O	O	O
.	O	O	O	O

This	O	O	O	O
suggests	O	O	O	O
a	O	O	O	O
model	O	O	O	O
in	O	O	O	O
which	O	O	O	O
functionally	O	O	O	O
indistinguishable	O	O	O	O
kappa	B-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
complexes	I-protein	O	O	O
can	O	O	O	O
be	O	O	O	O
activated	O	O	O	O
via	O	O	O	O
two	O	O	O	O
separate	O	O	O	O
pathways	O	O	O	O
of	O	O	O	O
signal	O	O	O	O
transduction	O	O	O	O
distinguishable	O	O	O	O
by	O	O	O	O
CsA	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Purification	O	O	O	O
of	O	O	O	O
TCF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
a	O	O	O	O
T	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
cell	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
specific	I-protein	O	O	O
transcription	I-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
that	O	O	O	O
activates	O	O	O	O
the	O	O	O	O
T	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
cell	I-DNA	O	O	O
receptor	I-DNA	O	O	O
C	I-DNA	O	O	O
alpha	I-DNA	O	O	O
gene	I-DNA	O	O	O
enhancer	I-DNA	O	O	O
in	O	O	O	O
a	O	O	O	O
context	O	O	O	O
-	O	O	O	O
dependent	O	O	O	O
manner	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
differentiation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
T	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
into	O	O	O	O
functionally	O	O	O	O
diverse	O	O	O	O
subpopulations	O	O	O	O
is	O	O	O	O
controlled	O	O	O	O
in	O	O	O	O
part	O	O	O	O
,	O	O	O	O
by	O	O	O	O
transcriptional	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
and	O	O	O	O
silencing	O	O	O	O
;	O	O	O	O
however	O	O	O	O
,	O	O	O	O
little	O	O	O	O
is	O	O	O	O
known	O	O	O	O
in	O	O	O	O
detail	O	O	O	O
about	O	O	O	O
the	O	O	O	O
proteins	O	O	O	O
that	O	O	O	O
influence	O	O	O	O
this	O	O	O	O
developmental	O	O	O	O
process	O	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
have	O	O	O	O
purified	O	O	O	O
a	O	O	O	O
new	O	O	O	O
T	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
cell	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
specific	I-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
TCF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
that	O	O	O	O
is	O	O	O	O
implicated	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
genes	O	O	O	O
encoding	O	O	O	O
a	O	O	O	O
major	O	O	O	O
component	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
human	B-protein	O	O	O
T	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
cell	I-protein	O	O	O
receptor	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
TCR	B-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
.	O	O	O	O

TCF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
originally	O	O	O	O
identified	O	O	O	O
and	O	O	O	O
purified	O	O	O	O
through	O	O	O	O
its	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
sites	O	O	O	O
on	O	O	O	O
the	O	O	O	O
HIV	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
1	I-DNA	O	O	O
promoter	I-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
was	O	O	O	O
found	O	O	O	O
to	O	O	O	O
bind	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
TCR	B-protein	B-DNA	O	O
alpha	O	I-DNA	O	O
enhancer	O	I-DNA	O	O
and	O	O	O	O
to	O	O	O	O
promoters	B-DNA	O	O	O
for	O	O	O	O
several	O	O	O	O
genes	B-DNA	O	O	O
expressed	O	O	O	O
at	O	O	O	O
significantly	O	O	O	O
earlier	O	O	O	O
stages	O	O	O	O
of	O	O	O	O
T	O	O	O	O
-	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
development	O	O	O	O
than	O	O	O	O
the	O	O	O	O
TCR	B-protein	B-DNA	O	O
alpha	O	I-DNA	O	O
gene	O	I-DNA	O	O
(	O	O	O	O
e	O	O	O	O
.	O	O	O	O
g	O	O	O	O
.	O	O	O	O
,	O	O	O	O
p56lck	B-DNA	O	O	O
and	O	O	O	O
CD3	B-DNA	O	O	O
delta	I-DNA	O	O	O
)	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Sequences	O	O	O	O
related	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
TCF	B-protein	B-DNA	O	O
-	I-protein	I-DNA	O	O
1	I-protein	I-DNA	O	O
alpha	I-protein	I-DNA	O	O
binding	O	I-DNA	O	O
motif	O	I-DNA	O	O
(	O	O	O	O
5	O	O	O	O
'	O	O	O	O
-	O	O	O	O
GGCACCCTTTGA	O	O	O	O
-	O	O	O	O
3	O	O	O	O
'	O	O	O	O
)	O	O	O	O
are	O	O	O	O
also	O	O	O	O
found	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
human	O	O	B-DNA	O
TCR	B-protein	B-DNA	I-DNA	O
delta	O	I-DNA	I-DNA	O
(	O	O	O	O
and	O	O	O	O
possibly	O	O	O	O
TCR	B-protein	B-DNA	O	O
beta	O	I-DNA	O	O
)	O	O	O	O
enhancers	B-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

Southwestern	O	O	O	O
and	O	O	O	O
gel	O	O	O	O
renaturation	O	O	O	O
experiments	O	O	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
use	O	O	O	O
of	O	O	O	O
purified	O	O	O	O
protein	O	O	O	O
fractions	O	O	O	O
revealed	O	O	O	O
that	O	O	O	O
TCF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
activity	O	O	O	O
is	O	O	O	O
derived	O	O	O	O
from	O	O	O	O
a	O	O	O	O
family	O	O	O	O
of	O	O	O	O
57	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
to	I-protein	O	O	O
53	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kD	I-protein	O	O	O
proteins	I-protein	O	O	O
that	O	O	O	O
are	O	O	O	O
abundantly	O	O	O	O
expressed	O	O	O	O
in	O	O	O	O
mature	O	O	O	O
and	O	O	O	O
immature	O	O	O	O
T	O	O	O	O
-	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
lines	O	O	O	O
(	O	O	O	O
Jurkat	B-cell_line	O	O	O
,	O	O	O	O
CCRF	B-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
CEM	I-cell_line	O	O	O
)	O	O	O	O
and	O	O	O	O
not	O	O	O	O
in	O	O	O	O
mature	B-cell_line	O	O	O
B	I-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
(	O	O	O	O
JY	B-cell_line	O	O	O
,	O	O	O	O
Namalwa	B-cell_line	O	O	O
)	O	O	O	O
or	O	O	O	O
nonlymphoid	B-cell_line	O	O	O
(	I-cell_line	O	O	O
HeLa	I-cell_line	O	O	O
)	I-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
lines	I-cell_line	O	O	O
.	O	O	O	O

A	O	O	O	O
small	O	O	O	O
95	O	O	O	O
-	O	O	O	O
bp	O	O	O	O
fragment	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
TCR	B-protein	B-DNA	O	O
alpha	O	I-DNA	O	O
control	O	I-DNA	O	O
region	O	I-DNA	O	O
that	O	O	O	O
contains	O	O	O	O
the	O	O	O	O
TCF	B-protein	B-DNA	O	O
-	I-protein	I-DNA	O	O
1	I-protein	I-DNA	O	O
alpha	I-protein	I-DNA	O	O
binding	O	I-DNA	O	O
site	O	I-DNA	O	O
juxtaposed	O	O	O	O
between	O	O	O	O
a	O	O	O	O
cAMP	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
response	I-DNA	O	O	O
element	I-DNA	O	O	O
(	O	O	O	O
the	O	O	O	O
CRE	B-DNA	O	O	O
or	O	O	O	O
T	B-DNA	O	O	O
alpha	I-DNA	O	O	O
1	I-DNA	O	O	O
motif	I-DNA	O	O	O
)	O	O	O	O
and	O	O	O	O
the	O	O	O	O
binding	B-DNA	O	O	O
site	I-DNA	O	O	O
for	O	O	O	O
a	O	O	O	O
distinct	O	O	O	O
lymphoid	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
specific	I-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
TCF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
behaved	O	O	O	O
as	O	O	O	O
a	O	O	O	O
potent	O	O	O	O
T	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
cell	I-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
specific	I-DNA	O	O	O
enhancer	I-DNA	O	O	O
in	O	O	O	O
vivo	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Tandem	O	O	O	O
copies	O	O	O	O
of	O	O	O	O
this	O	O	O	O
enhancer	O	O	O	O
functioned	O	O	O	O
synergistically	O	O	O	O
in	O	O	O	O
mature	B-cell_line	O	O	O
(	I-cell_line	O	O	O
Jurkat	I-cell_line	O	O	O
)	I-cell_line	O	O	O
T	I-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
lines	I-cell_line	O	O	O
as	O	O	O	O
well	O	O	O	O
as	O	O	O	O
resting	O	O	O	O
and	O	O	O	O
activated	O	O	O	O
immature	B-cell_line	O	O	O
(	I-cell_line	O	O	O
CCRF	I-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
CEM	I-cell_line	O	O	O
)	I-cell_line	O	O	O
T	I-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
lines	I-cell_line	O	O	O
.	O	O	O	O

Mutation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
TCF	B-protein	B-DNA	O	O
-	I-protein	I-DNA	O	O
1	I-protein	I-DNA	O	O
alpha	I-protein	I-DNA	O	O
binding	O	I-DNA	O	O
site	O	I-DNA	O	O
diminished	O	O	O	O
enhancer	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
and	O	O	O	O
disrupted	O	O	O	O
the	O	O	O	O
synergism	O	O	O	O
observed	O	O	O	O
in	O	O	O	O
vivo	O	O	O	O
between	O	O	O	O
tandem	B-DNA	O	O	O
enhancer	I-DNA	O	O	O
repeats	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
TCF	B-protein	B-DNA	O	O
-	I-protein	I-DNA	O	O
1	I-protein	I-DNA	O	O
alpha	I-protein	I-DNA	O	O
binding	O	I-DNA	O	O
site	O	I-DNA	O	O
was	O	O	O	O
also	O	O	O	O
required	O	O	O	O
for	O	O	O	O
TCR	B-protein	O	O	O
alpha	O	O	O	O
enhancer	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
in	O	O	O	O
transcriptionally	O	O	O	O
active	O	O	O	O
extracts	O	O	O	O
from	O	O	O	O
Jurkat	B-cell_line	O	O	O
but	O	O	O	O
not	O	O	O	O
HeLa	B-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
,	O	O	O	O
confirming	O	O	O	O
that	O	O	O	O
TCF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
is	O	O	O	O
a	O	O	O	O
T	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
cell	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
specific	I-protein	O	O	O
transcription	I-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Curiously	O	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
TCF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
binding	O	O	O	O
element	O	O	O	O
was	O	O	O	O
inactive	O	O	O	O
in	O	O	O	O
vivo	O	O	O	O
when	O	O	O	O
removed	O	O	O	O
from	O	O	O	O
its	O	O	O	O
neighboring	O	O	O	O
elements	O	O	O	O
on	O	O	O	O
the	O	O	O	O
TCR	B-protein	B-DNA	O	O
alpha	O	I-DNA	O	O
enhancer	O	I-DNA	O	O
and	O	O	O	O
positioned	O	O	O	O
in	O	O	O	O
one	O	O	O	O
or	O	O	O	O
more	O	O	O	O
copies	O	O	O	O
upstream	O	O	O	O
of	O	O	O	O
a	O	O	O	O
heterologous	B-DNA	O	O	O
promoter	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

Thus	O	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
transcriptional	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
of	O	O	O	O
TCF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
appears	O	O	O	O
to	O	O	O	O
depend	O	O	O	O
on	O	O	O	O
the	O	O	O	O
TCF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
T	B-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
CREB	B-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
transcription	B-protein	O	O	O
factors	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
the	O	O	O	O
context	O	O	O	O
of	O	O	O	O
its	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
site	O	O	O	O
within	O	O	O	O
the	O	O	O	O
TCR	B-protein	B-DNA	O	O
alpha	O	I-DNA	O	O
enhancer	O	I-DNA	O	O
.	O	O	O	O

Tandem	B-DNA	O	O	O
AP	I-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
1	I-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
binding	I-DNA	O	O	O
sites	I-DNA	O	O	O
within	O	O	O	O
the	O	O	O	O
human	B-DNA	O	O	O
beta	I-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
globin	I-DNA	O	O	O
dominant	I-DNA	O	O	O
control	I-DNA	O	O	O
region	I-DNA	O	O	O
function	O	O	O	O
as	O	O	O	O
an	O	O	O	O
inducible	B-DNA	O	O	O
enhancer	I-DNA	O	O	O
in	O	O	O	O
erythroid	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

A	O	O	O	O
powerful	O	O	O	O
enhancer	O	O	O	O
has	O	O	O	O
been	O	O	O	O
mapped	O	O	O	O
to	O	O	O	O
an	O	O	O	O
18	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
bp	I-DNA	O	O	O
DNA	I-DNA	O	O	O
segment	I-DNA	O	O	O
located	O	O	O	O
11	O	O	O	O
kb	O	O	O	O
5	O	O	O	O
'	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
human	B-DNA	O	O	O
epsilon	I-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
globin	I-DNA	O	O	O
gene	I-DNA	O	O	O
within	O	O	O	O
the	O	O	O	O
dominant	B-DNA	O	O	O
control	I-DNA	O	O	O
or	O	O	O	O
locus	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
activating	I-DNA	O	O	O
region	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

This	O	O	O	O
enhancer	B-DNA	O	O	O
is	O	O	O	O
inducible	O	O	O	O
in	O	O	O	O
K562	B-cell_line	O	O	O
human	I-cell_line	O	O	O
erythroleukemia	I-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
,	O	O	O	O
increasing	O	O	O	O
linked	O	O	O	O
gamma	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
globin	I-DNA	O	O	O
promoter	I-DNA	O	O	O
/	B-protein	O	O	O
luciferase	I-protein	O	O	O
gene	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
to	O	O	O	O
170	O	O	O	O
-	O	O	O	O
fold	O	O	O	O
over	O	O	O	O
an	O	O	O	O
enhancerless	B-DNA	O	O	O
construct	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
enhancer	B-DNA	O	O	O
consists	O	O	O	O
of	O	O	O	O
tandem	B-DNA	O	O	O
AP	I-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
1	I-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
binding	I-DNA	O	O	O
sites	I-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
phased	O	O	O	O
10	O	O	O	O
bp	O	O	O	O
apart	O	O	O	O
,	O	O	O	O
which	O	O	O	O
are	O	O	O	O
both	O	O	O	O
required	O	O	O	O
for	O	O	O	O
full	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
.	O	O	O	O

DNA	O	O	O	O
-	O	O	O	O
protein	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
assays	O	O	O	O
with	O	O	O	O
nuclear	O	O	O	O
extracts	O	O	O	O
from	O	O	O	O
induced	O	O	O	O
cells	O	O	O	O
demonstrate	O	O	O	O
a	O	O	O	O
high	B-protein	O	O	O
molecular	I-protein	O	O	O
weight	I-protein	O	O	O
complex	I-protein	O	O	O
on	O	O	O	O
the	O	O	O	O
enhancer	B-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
formation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
this	O	O	O	O
complex	O	O	O	O
also	O	O	O	O
requires	O	O	O	O
both	O	O	O	O
AP	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
1	I-DNA	O	O	O
sites	I-DNA	O	O	O
and	O	O	O	O
correlates	O	O	O	O
with	O	O	O	O
maximal	O	O	O	O
enhancer	B-DNA	O	O	O
activity	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Induction	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
enhancer	B-DNA	O	O	O
may	O	O	O	O
have	O	O	O	O
a	O	O	O	O
role	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
increase	O	O	O	O
in	O	O	O	O
globin	B-DNA	O	O	O
gene	I-DNA	O	O	O
transcription	O	O	O	O
that	O	O	O	O
characterizes	O	O	O	O
erythroid	O	O	O	O
maturation	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Enhancer	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
appears	O	O	O	O
to	O	O	O	O
be	O	O	O	O
mediated	O	O	O	O
by	O	O	O	O
the	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
of	O	O	O	O
a	O	O	O	O
complex	O	O	O	O
of	O	O	O	O
proteins	O	O	O	O
from	O	O	O	O
the	O	O	O	O
jun	B-DNA	O	O	O
and	I-DNA	O	O	O
fos	I-DNA	O	O	O
families	I-DNA	O	O	O
to	O	O	O	O
tandem	B-DNA	O	O	O
AP	I-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
1	I-DNA	O	O	O
consensus	I-DNA	O	O	O
sequences	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

Identification	O	O	O	O
of	O	O	O	O
a	O	O	O	O
novel	B-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
that	O	O	O	O
interacts	O	O	O	O
with	O	O	O	O
an	O	O	O	O
immunoglobulin	B-DNA	O	O	O
heavy	I-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
chain	I-DNA	O	O	O
promoter	I-DNA	O	O	O
and	O	O	O	O
stimulates	O	O	O	O
transcription	O	O	O	O
in	O	O	O	O
conjunction	O	O	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
lymphoid	B-protein	O	O	O
cell	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
specific	I-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
OTF2	B-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
tissue	O	O	O	O
-	O	O	O	O
specific	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
MOPC	B-DNA	O	O	O
141	I-DNA	O	O	O
immunoglobulin	I-DNA	O	O	O
heavy	I-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
chain	I-DNA	O	O	O
gene	I-DNA	O	O	O
was	O	O	O	O
studied	O	O	O	O
by	O	O	O	O
using	O	O	O	O
in	O	O	O	O
vitro	O	O	O	O
transcription	O	O	O	O
.	O	O	O	O

B	O	O	O	O
-	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
-	O	O	O	O
specific	O	O	O	O
transcription	O	O	O	O
of	O	O	O	O
this	O	O	O	O
gene	O	O	O	O
was	O	O	O	O
dependent	O	O	O	O
on	O	O	O	O
the	O	O	O	O
octamer	B-DNA	O	O	O
element	I-DNA	O	O	O
5	O	O	O	O
'	O	O	O	O
-	O	O	O	O
ATGCAAAG	O	O	O	O
-	O	O	O	O
3	O	O	O	O
'	O	O	O	O
,	O	O	O	O
located	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
upstream	B-DNA	O	O	O
region	I-DNA	O	O	O
of	O	O	O	O
this	O	O	O	O
promoter	B-DNA	O	O	O
and	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
promoters	B-DNA	O	O	O
of	O	O	O	O
all	O	O	O	O
other	O	O	O	O
immunoglobulin	O	O	O	O
heavy	O	O	O	O
-	O	O	O	O
and	O	O	O	O
light	O	O	O	O
-	O	O	O	O
chain	O	O	O	O
genes	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
interaction	O	O	O	O
of	O	O	O	O
purified	O	O	O	O
octamer	O	B-protein	O	O
transcription	B-protein	I-protein	O	O
factors	I-protein	I-protein	O	O
1	O	O	O	O
and	O	O	O	O
2	O	O	O	O
(	O	O	O	O
OTF1	B-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
OTF2	B-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
MOPC	B-DNA	O	O	O
141	I-DNA	O	O	O
promoter	I-DNA	O	O	O
was	O	O	O	O
studied	O	O	O	O
by	O	O	O	O
using	O	O	O	O
electrophoretic	O	O	O	O
mobility	O	O	O	O
shift	O	O	O	O
assays	O	O	O	O
and	O	O	O	O
DNase	B-protein	O	O	O
I	I-protein	O	O	O
footprinting	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Purified	O	O	O	O
OTF1	B-protein	O	O	O
from	O	O	O	O
HeLa	B-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
and	O	O	O	O
OTF1	B-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
OTF2	B-protein	O	O	O
from	O	O	O	O
B	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
bound	O	O	O	O
to	O	O	O	O
identical	O	O	O	O
sequences	O	O	O	O
within	O	O	O	O
the	O	O	O	O
heavy	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
chain	I-DNA	O	O	O
promoter	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
OTF	O	O	O	O
interactions	O	O	O	O
we	O	O	O	O
observed	O	O	O	O
extended	O	O	O	O
over	O	O	O	O
the	O	O	O	O
heptamer	B-DNA	O	O	O
element	I-DNA	O	O	O
5	O	O	O	O
'	O	O	O	O
-	O	O	O	O
CTCAGGA	O	O	O	O
-	O	O	O	O
3	O	O	O	O
'	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
it	O	O	O	O
seems	O	O	O	O
likely	O	O	O	O
that	O	O	O	O
the	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
purified	B-protein	O	O	O
factors	I-protein	O	O	O
involves	O	O	O	O
cooperation	O	O	O	O
between	O	O	O	O
octamer	O	O	O	O
and	O	O	O	O
heptamer	O	O	O	O
sites	O	O	O	O
in	O	O	O	O
this	O	O	O	O
promoter	B-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
addition	O	O	O	O
to	O	O	O	O
these	O	O	O	O
elements	O	O	O	O
,	O	O	O	O
we	O	O	O	O
identified	O	O	O	O
a	O	O	O	O
second	O	O	O	O
regulatory	B-DNA	O	O	O
element	I-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
N	B-DNA	O	O	O
element	I-DNA	O	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
sequence	O	O	O	O
5	O	O	O	O
'	O	O	O	O
-	O	O	O	O
GGAACCTCCCCC	O	O	O	O
-	O	O	O	O
3	O	O	O	O
'	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
N	B-DNA	O	O	O
element	I-DNA	O	O	O
could	O	O	O	O
independently	O	O	O	O
mediate	O	O	O	O
low	O	O	O	O
levels	O	O	O	O
of	O	O	O	O
transcription	O	O	O	O
in	O	O	O	O
both	O	O	O	O
B	O	O	O	O
-	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
and	O	O	O	O
HeLa	O	O	O	O
-	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
extracts	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
,	O	O	O	O
in	O	O	O	O
conjunction	O	O	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
octamer	B-DNA	O	O	O
element	I-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
it	O	O	O	O
can	O	O	O	O
promote	O	O	O	O
high	O	O	O	O
levels	O	O	O	O
of	O	O	O	O
transcription	O	O	O	O
in	O	O	O	O
B	O	O	O	O
-	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
extracts	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
N	B-DNA	O	O	O
element	I-DNA	O	O	O
bound	O	O	O	O
a	O	O	O	O
transcription	B-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
NTF	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
that	O	O	O	O
is	O	O	O	O
ubiquitous	O	O	O	O
in	O	O	O	O
cell	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
type	I-protein	O	O	O
distribution	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
NTF	B-protein	O	O	O
was	O	O	O	O
distinct	O	O	O	O
from	O	O	O	O
any	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
previously	B-protein	O	O	O
described	I-protein	O	O	O
proteins	I-protein	O	O	O
that	O	O	O	O
bind	O	O	O	O
to	O	O	O	O
similar	O	O	O	O
sequences	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Based	O	O	O	O
on	O	O	O	O
these	O	O	O	O
results	O	O	O	O
,	O	O	O	O
we	O	O	O	O
propose	O	O	O	O
that	O	O	O	O
NTF	B-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
OTF2	B-protein	O	O	O
interactions	O	O	O	O
(	O	O	O	O
both	O	O	O	O
with	O	O	O	O
their	O	O	O	O
cognate	B-DNA	O	O	O
DNA	I-DNA	O	O	O
elements	I-DNA	O	O	O
and	O	O	O	O
possibly	O	O	O	O
at	O	O	O	O
the	O	O	O	O
protein	O	O	O	O
-	O	O	O	O
protein	O	O	O	O
level	O	O	O	O
)	O	O	O	O
may	O	O	O	O
be	O	O	O	O
critical	O	O	O	O
to	O	O	O	O
B	O	O	O	O
-	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
-	O	O	O	O
specific	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
and	O	O	O	O
that	O	O	O	O
these	O	O	O	O
interactions	O	O	O	O
provide	O	O	O	O
additional	O	O	O	O
pathways	O	O	O	O
for	O	O	O	O
regulating	O	O	O	O
gene	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
.	O	O	O	O

NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
as	O	O	O	O
inducible	O	O	O	O
transcriptional	B-protein	O	O	O
activator	I-protein	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
granulocyte	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
macrophage	I-DNA	O	O	O
colony	I-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
stimulating	I-DNA	O	O	O
factor	I-DNA	O	O	O
gene	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
gene	O	O	O	O
encoding	O	O	O	O
the	O	O	O	O
granulocyte	O	B-protein	O	O
-	O	I-protein	O	O
macrophage	B-protein	I-protein	O	O
colony	I-protein	I-protein	O	O
-	I-protein	I-protein	O	O
stimulating	I-protein	I-protein	O	O
factor	I-protein	I-protein	O	O
(	O	O	O	O
GM	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
CSF	I-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
is	O	O	O	O
induced	O	O	O	O
upon	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
T	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
with	O	O	O	O
phytohemagglutinin	B-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
active	O	O	O	O
phorbolester	O	O	O	O
and	O	O	O	O
upon	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
tax1	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
a	O	O	O	O
transactivating	B-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
human	O	O	O	O
T	O	O	O	O
-	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
leukemia	O	O	O	O
virus	O	O	O	O
type	O	O	O	O
I	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
same	O	O	O	O
agents	O	O	O	O
induce	O	O	O	O
transcription	O	O	O	O
from	O	O	O	O
the	O	O	O	O
interleukin	O	O	O	O
-	O	O	O	O
2	O	O	O	O
receptor	O	O	O	O
alpha	O	O	O	O
-	O	O	O	O
chain	O	O	O	O
and	O	O	O	O
interleukin	O	O	O	O
-	O	O	O	O
2	O	O	O	O
genes	O	O	O	O
,	O	O	O	O
depending	O	O	O	O
on	O	O	O	O
promoter	B-DNA	O	O	O
elements	I-DNA	O	O	O
that	O	O	O	O
bind	O	O	O	O
the	O	O	O	O
inducible	B-protein	O	O	O
transcription	I-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
or	O	O	O	O
an	O	O	O	O
NF	B-protein	B-protein	O	O
-	I-protein	I-protein	O	O
kappa	I-protein	I-protein	O	O
B	I-protein	I-protein	O	O
-	O	I-protein	O	O
like	O	I-protein	O	O
factor	O	I-protein	O	O
)	O	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
therefore	O	O	O	O
tested	O	O	O	O
the	O	O	O	O
possibility	O	O	O	O
that	O	O	O	O
the	O	O	O	O
GM	B-protein	B-DNA	O	O
-	I-protein	I-DNA	O	O
CSF	I-protein	I-DNA	O	O
gene	O	I-DNA	O	O
is	O	O	O	O
also	O	O	O	O
regulated	O	O	O	O
by	O	O	O	O
a	O	O	O	O
cognate	O	O	O	O
motif	O	O	O	O
for	O	O	O	O
the	O	O	O	O
NF	B-protein	B-protein	O	O
-	I-protein	I-protein	O	O
kappa	I-protein	I-protein	O	O
B	I-protein	I-protein	O	O
transcription	O	I-protein	O	O
factor	O	I-protein	O	O
.	O	O	O	O

A	O	O	O	O
recent	O	O	O	O
functional	O	O	O	O
analysis	O	O	O	O
by	O	O	O	O
Miyatake	O	O	O	O
et	O	O	O	O
al	O	O	O	O
.	O	O	O	O
(	O	O	O	O
S	O	O	O	O
.	O	O	O	O
Miyatake	O	O	O	O
,	O	O	O	O
M	O	O	O	O
.	O	O	O	O
Seiki	O	O	O	O
,	O	O	O	O
M	O	O	O	O
.	O	O	O	O
Yoshida	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
K	O	O	O	O
.	O	O	O	O
Arai	O	O	O	O
,	O	O	O	O
Mol	O	O	O	O
.	O	O	O	O
Cell	O	O	O	O
.	O	O	O	O
Biol	O	O	O	O
.	O	O	O	O
8	O	O	O	O
:	O	O	O	O
5581	O	O	O	O
-	O	O	O	O
5587	O	O	O	O
,	O	O	O	O
1988	O	O	O	O
)	O	O	O	O
described	O	O	O	O
a	O	O	O	O
short	B-DNA	O	O	O
promoter	I-DNA	O	O	O
region	I-DNA	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
GM	B-protein	B-DNA	O	O
-	I-protein	I-DNA	O	O
CSF	I-protein	I-DNA	O	O
gene	O	I-DNA	O	O
that	O	O	O	O
conferred	O	O	O	O
strong	O	O	O	O
inducibility	O	O	O	O
by	O	O	O	O
T	O	O	O	O
-	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
-	O	O	O	O
activating	O	O	O	O
signals	O	O	O	O
and	O	O	O	O
tax1	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
but	O	O	O	O
no	O	O	O	O
NF	B-protein	B-DNA	O	O
-	I-protein	I-DNA	O	O
kappa	I-protein	I-DNA	O	O
B	I-protein	I-DNA	O	O
-	O	I-DNA	O	O
binding	O	I-DNA	O	O
motifs	O	I-DNA	O	O
were	O	O	O	O
identified	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Using	O	O	O	O
electrophoretic	O	O	O	O
mobility	O	O	O	O
shift	O	O	O	O
assays	O	O	O	O
,	O	O	O	O
we	O	O	O	O
showed	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
of	O	O	O	O
purified	O	O	O	O
human	O	B-protein	O	O
NF	B-protein	I-protein	O	O
-	I-protein	I-protein	O	O
kappa	I-protein	I-protein	O	O
B	I-protein	I-protein	O	O
and	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
activated	O	O	O	O
in	O	O	O	O
Jurkat	O	B-cell_line	O	O
T	B-cell_type	I-cell_line	O	O
cells	I-cell_type	I-cell_line	O	O
to	O	O	O	O
an	O	O	O	O
oligonucleotide	O	O	O	O
comprising	O	O	O	O
the	O	O	O	O
GM	B-protein	B-DNA	O	O
-	I-protein	I-DNA	O	O
CSF	I-protein	I-DNA	O	O
promoter	O	I-DNA	O	O
element	O	I-DNA	O	O
responsible	O	O	O	O
for	O	O	O	O
mediating	O	O	O	O
responsiveness	O	O	O	O
to	O	O	O	O
T	O	O	O	O
-	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
-	O	O	O	O
activating	O	O	O	O
signals	O	O	O	O
and	O	O	O	O
tax1	B-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

As	O	O	O	O
shown	O	O	O	O
by	O	O	O	O
a	O	O	O	O
methylation	O	O	O	O
interference	O	O	O	O
analysis	O	O	O	O
and	O	O	O	O
oligonucleotide	O	O	O	O
competition	O	O	O	O
experiments	O	O	O	O
,	O	O	O	O
purified	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
binds	O	O	O	O
at	O	O	O	O
positions	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
82	I-DNA	O	O	O
to	I-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
91	I-DNA	O	O	O
(	O	O	O	O
GGGAACTACC	O	O	O	O
)	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
GM	B-protein	B-DNA	O	O
-	I-protein	I-DNA	O	O
CSF	I-protein	I-DNA	O	O
promoter	O	I-DNA	O	O
sequence	O	O	O	O
with	O	O	O	O
an	O	O	O	O
affinity	O	O	O	O
similar	O	O	O	O
to	O	O	O	O
that	O	O	O	O
with	O	O	O	O
which	O	O	O	O
it	O	O	O	O
binds	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
biologically	B-DNA	O	O	O
functional	I-DNA	O	O	O
kappa	I-DNA	O	O	O
B	I-DNA	O	O	O
motif	I-DNA	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
beta	B-DNA	O	O	O
interferon	I-DNA	O	O	O
promoter	I-DNA	O	O	O
(	O	O	O	O
GGGAAATTCC	O	O	O	O
)	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Two	O	O	O	O
kappa	B-DNA	O	O	O
B	I-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
like	I-DNA	O	O	O
motifs	I-DNA	O	O	O
at	O	O	O	O
positions	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
98	I-DNA	O	O	O
to	I-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
108	I-DNA	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
GM	B-protein	B-DNA	O	O
-	I-protein	I-DNA	O	O
CSF	I-protein	I-DNA	O	O
promoter	O	I-DNA	O	O
were	O	O	O	O
also	O	O	O	O
recognized	O	O	O	O
but	O	O	O	O
with	O	O	O	O
much	O	O	O	O
lower	O	O	O	O
affinities	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Our	O	O	O	O
data	O	O	O	O
provide	O	O	O	O
strong	O	O	O	O
evidence	O	O	O	O
that	O	O	O	O
the	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
GM	B-protein	B-DNA	O	O
-	I-protein	I-DNA	O	O
CSF	I-protein	I-DNA	O	O
gene	O	I-DNA	O	O
following	O	O	O	O
T	O	O	O	O
-	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
is	O	O	O	O
controlled	O	O	O	O
by	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
NF	B-protein	B-protein	O	O
-	I-protein	I-protein	O	O
kappa	I-protein	I-protein	O	O
B	I-protein	I-protein	O	O
transcription	O	I-protein	O	O
factor	O	I-protein	O	O
to	O	O	O	O
a	O	O	O	O
high	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
affinity	I-DNA	O	O	O
binding	I-DNA	O	O	O
site	I-DNA	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
GM	B-protein	B-DNA	O	O
-	I-protein	I-DNA	O	O
CSF	I-protein	I-DNA	O	O
promoter	O	I-DNA	O	O
.	O	O	O	O

Effects	O	O	O	O
of	O	O	O	O
mitogenic	O	O	O	O
agents	O	O	O	O
upon	O	O	O	O
glucocorticoid	O	O	O	O
action	O	O	O	O
in	O	O	O	O
human	O	B-cell_type	O	O
tonsillar	O	I-cell_type	O	O
T	O	I-cell_type	O	O
-	O	I-cell_type	O	O
lymphocytes	B-cell_type	I-cell_type	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
treatment	O	O	O	O
of	O	O	O	O
human	O	B-cell_type	O	O
tonsillar	O	I-cell_type	O	O
T	O	I-cell_type	O	O
-	O	I-cell_type	O	O
lymphocytes	B-cell_type	I-cell_type	O	O
with	O	O	O	O
4	O	O	O	O
-	O	O	O	O
phorbol	O	O	O	O
12	O	O	O	O
-	O	O	O	O
myristate	O	O	O	O
13	O	O	O	O
-	O	O	O	O
acetate	O	O	O	O
(	O	O	O	O
PMA	O	O	O	O
)	O	O	O	O
,	O	O	O	O
resulted	O	O	O	O
in	O	O	O	O
about	O	O	O	O
two	O	O	O	O
fold	O	O	O	O
increase	O	O	O	O
in	O	O	O	O
glucocorticoid	B-protein	O	O	O
receptor	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
GR	B-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
number	O	O	O	O
,	O	O	O	O
without	O	O	O	O
any	O	O	O	O
significant	O	O	O	O
change	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
receptor	O	O	O	O
affinity	O	O	O	O
.	O	O	O	O

This	O	O	O	O
increase	O	O	O	O
disappeared	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
presence	O	O	O	O
of	O	O	O	O
cycloheximide	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Alone	O	O	O	O
,	O	O	O	O
PMA	O	O	O	O
and	O	O	O	O
calcium	O	O	O	O
ionophore	O	O	O	O
A23187	O	O	O	O
did	O	O	O	O
not	O	O	O	O
affect	O	O	O	O
,	O	O	O	O
but	O	O	O	O
together	O	O	O	O
stimulated	O	O	O	O
,	O	O	O	O
like	O	O	O	O
phytohaemagglutinin	B-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
PHA	B-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
,	O	O	O	O
leucine	O	O	O	O
and	O	O	O	O
,	O	O	O	O
in	O	O	O	O
particular	O	O	O	O
,	O	O	O	O
thymidine	O	O	O	O
incorporation	O	O	O	O
.	O	O	O	O

PMA	O	O	O	O
enhanced	O	O	O	O
slightly	O	O	O	O
the	O	O	O	O
stimulatory	O	O	O	O
effect	O	O	O	O
of	O	O	O	O
PHA	B-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Alone	O	O	O	O
,	O	O	O	O
these	O	O	O	O
agents	O	O	O	O
failed	O	O	O	O
to	O	O	O	O
alter	O	O	O	O
the	O	O	O	O
suppressive	O	O	O	O
effect	O	O	O	O
of	O	O	O	O
dexamethasone	O	O	O	O
on	O	O	O	O
thymidine	O	O	O	O
and	O	O	O	O
leucine	O	O	O	O
incorporation	O	O	O	O
;	O	O	O	O
however	O	O	O	O
,	O	O	O	O
PMA	O	O	O	O
-	O	O	O	O
A23187	O	O	O	O
and	O	O	O	O
PMA	O	O	O	O
-	B-protein	O	O	O
PHA	I-protein	O	O	O
combinations	O	O	O	O
appeared	O	O	O	O
to	O	O	O	O
antagonize	O	O	O	O
the	O	O	O	O
suppression	O	O	O	O
by	O	O	O	O
dexamethasone	O	O	O	O
.	O	O	O	O

To	O	O	O	O
be	O	O	O	O
or	O	O	O	O
not	O	O	O	O
to	O	O	O	O
be	O	O	O	O
a	O	O	O	O
responder	O	O	O	O
in	O	O	O	O
T	O	O	O	O
-	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
responses	O	O	O	O
:	O	O	O	O
ubiquitous	O	O	O	O
oligopeptides	O	O	O	O
in	O	O	O	O
all	O	O	O	O
proteins	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Amino	O	O	O	O
acid	O	O	O	O
sequences	O	O	O	O
of	O	O	O	O
all	O	O	O	O
proteins	O	O	O	O
are	O	O	O	O
essays	O	O	O	O
written	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
same	O	O	O	O
language	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Accordingly	O	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
same	O	O	O	O
set	O	O	O	O
of	O	O	O	O
words	O	O	O	O
and	O	O	O	O
phrases	O	O	O	O
(	O	O	O	O
oligopeptides	O	O	O	O
)	O	O	O	O
appear	O	O	O	O
in	O	O	O	O
totally	O	O	O	O
unrelated	B-protein	O	O	O
proteins	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
reason	O	O	O	O
that	O	O	O	O
only	O	O	O	O
certain	O	O	O	O
individuals	O	O	O	O
of	O	O	O	O
particular	O	O	O	O
major	B-protein	O	O	O
histocompatibility	I-protein	O	O	O
complex	I-protein	O	O	O
(	I-protein	O	O	O
MHC	I-protein	O	O	O
)	I-protein	O	O	O
haplotypes	I-protein	O	O	O
can	O	O	O	O
mount	O	O	O	O
T	O	O	O	O
-	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
responses	O	O	O	O
against	O	O	O	O
a	O	O	O	O
given	O	O	O	O
antigen	O	O	O	O
of	O	O	O	O
pathogens	O	O	O	O
is	O	O	O	O
found	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
fact	O	O	O	O
that	O	O	O	O
T	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
cell	I-protein	O	O	O
receptors	I-protein	O	O	O
are	O	O	O	O
designed	O	O	O	O
to	O	O	O	O
recognize	O	O	O	O
18	O	O	O	O
-	O	O	O	O
20	O	O	O	O
residue	O	O	O	O
-	O	O	O	O
long	O	O	O	O
peptide	O	O	O	O
fragments	O	O	O	O
sandwiched	O	O	O	O
between	O	O	O	O
two	O	O	O	O
alpha	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
helices	I-protein	O	O	O
of	O	O	O	O
class	B-protein	O	O	O
I	I-protein	O	O	O
or	O	O	O	O
class	B-protein	O	O	O
II	I-protein	O	O	O
MHC	I-protein	O	O	O
molecules	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

At	O	O	O	O
this	O	O	O	O
range	O	O	O	O
of	O	O	O	O
peptide	O	O	O	O
lengths	O	O	O	O
,	O	O	O	O
most	O	O	O	O
would	O	O	O	O
appear	O	O	O	O
as	O	O	O	O
self	O	O	O	O
,	O	O	O	O
while	O	O	O	O
nonselfness	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
remainders	O	O	O	O
are	O	O	O	O
destined	O	O	O	O
to	O	O	O	O
be	O	O	O	O
quite	O	O	O	O
ambiguous	O	O	O	O
,	O	O	O	O
hence	O	O	O	O
creating	O	O	O	O
responders	O	O	O	O
and	O	O	O	O
nonresponders	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Two	O	O	O	O
distinct	O	O	O	O
signal	O	O	O	O
transmission	O	O	O	O
pathways	O	O	O	O
in	O	O	O	O
T	B-cell_type	O	O	O
lymphocytes	I-cell_type	O	O	O
are	O	O	O	O
inhibited	O	O	O	O
by	O	O	O	O
complexes	O	O	O	O
formed	O	O	O	O
between	O	O	O	O
an	O	O	O	O
immunophilin	B-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
either	O	O	O	O
FK506	O	O	O	O
or	O	O	O	O
rapamycin	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Proliferation	O	O	O	O
and	O	O	O	O
immunologic	O	O	O	O
function	O	O	O	O
of	O	O	O	O
T	B-cell_type	O	O	O
lymphocytes	I-cell_type	O	O	O
are	O	O	O	O
initiated	O	O	O	O
by	O	O	O	O
signals	O	O	O	O
from	O	O	O	O
the	O	O	O	O
antigen	B-protein	O	O	O
receptor	I-protein	O	O	O
that	O	O	O	O
are	O	O	O	O
inhibited	O	O	O	O
by	O	O	O	O
the	O	O	O	O
immunosuppressant	O	O	O	O
FK506	O	O	O	O
but	O	O	O	O
not	O	O	O	O
by	O	O	O	O
its	O	O	O	O
structural	O	O	O	O
analog	O	O	O	O
,	O	O	O	O
rapamycin	O	O	O	O
.	O	O	O	O

On	O	O	O	O
the	O	O	O	O
other	O	O	O	O
hand	O	O	O	O
,	O	O	O	O
interleukin	B-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
IL	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
-	O	O	O	O
induced	O	O	O	O
signals	O	O	O	O
are	O	O	O	O
blocked	O	O	O	O
by	O	O	O	O
rapamycin	O	O	O	O
but	O	O	O	O
not	O	O	O	O
by	O	O	O	O
FK506	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Remarkably	O	O	O	O
,	O	O	O	O
these	O	O	O	O
two	O	O	O	O
drugs	O	O	O	O
inhibit	O	O	O	O
each	O	O	O	O
other	O	O	O	O
'	O	O	O	O
s	O	O	O	O
actions	O	O	O	O
,	O	O	O	O
raising	O	O	O	O
the	O	O	O	O
possibility	O	O	O	O
that	O	O	O	O
both	O	O	O	O
act	O	O	O	O
by	O	O	O	O
means	O	O	O	O
of	O	O	O	O
a	O	O	O	O
common	O	O	O	O
immunophilin	B-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
immunosuppressant	B-protein	O	O	O
binding	I-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
find	O	O	O	O
that	O	O	O	O
the	O	O	O	O
dissociation	O	O	O	O
constant	O	O	O	O
of	O	O	O	O
rapamycin	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
FK506	B-protein	O	O	O
binding	I-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
FKBP	B-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
Kd	O	O	O	O
=	O	O	O	O
0	O	O	O	O
.	O	O	O	O
2	O	O	O	O
nM	O	O	O	O
)	O	O	O	O
is	O	O	O	O
close	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
dissociation	O	O	O	O
constant	O	O	O	O
of	O	O	O	O
FK506	O	O	O	O
to	O	O	O	O
FKBP	B-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
Kd	O	O	O	O
=	O	O	O	O
0	O	O	O	O
.	O	O	O	O
4	O	O	O	O
nM	O	O	O	O
)	O	O	O	O
and	O	O	O	O
to	O	O	O	O
their	O	O	O	O
effective	O	O	O	O
biologic	O	O	O	O
inhibitory	O	O	O	O
concentrations	O	O	O	O
.	O	O	O	O

However	O	O	O	O
,	O	O	O	O
an	O	O	O	O
excess	O	O	O	O
of	O	O	O	O
rapamycin	O	O	O	O
is	O	O	O	O
needed	O	O	O	O
to	O	O	O	O
revert	O	O	O	O
FK506	O	O	O	O
-	O	O	O	O
mediated	O	O	O	O
inhibition	O	O	O	O
of	O	O	O	O
IL	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
production	O	O	O	O
,	O	O	O	O
apoptosis	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
transcriptional	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
AT	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
a	O	O	O	O
T	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
cell	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
specific	I-protein	O	O	O
transcription	I-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
necessary	O	O	O	O
for	O	O	O	O
IL	B-protein	B-DNA	O	O
-	I-protein	I-DNA	O	O
2	I-protein	I-DNA	O	O
gene	O	I-DNA	O	O
activation	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Similarly	O	O	O	O
,	O	O	O	O
an	O	O	O	O
excess	O	O	O	O
of	O	O	O	O
FK506	O	O	O	O
is	O	O	O	O
needed	O	O	O	O
to	O	O	O	O
revert	O	O	O	O
rapamycin	O	O	O	O
-	O	O	O	O
mediated	O	O	O	O
inhibition	O	O	O	O
of	O	O	O	O
IL	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
-	O	O	O	O
induced	O	O	O	O
proliferation	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
drug	O	O	O	O
concentrations	O	O	O	O
required	O	O	O	O
for	O	O	O	O
antagonism	O	O	O	O
may	O	O	O	O
be	O	O	O	O
explained	O	O	O	O
by	O	O	O	O
the	O	O	O	O
relative	O	O	O	O
affinity	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
drugs	O	O	O	O
to	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
by	O	O	O	O
the	O	O	O	O
abundance	O	O	O	O
of	O	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
immunophilin	B-protein	O	O	O
FKBP	B-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

FKBP	B-protein	O	O	O
has	O	O	O	O
been	O	O	O	O
shown	O	O	O	O
to	O	O	O	O
catalyze	O	O	O	O
the	O	O	O	O
interconversion	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
cis	O	O	O	O
-	O	O	O	O
and	O	O	O	O
trans	O	O	O	O
-	O	O	O	O
rotamers	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
peptidyl	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
prolyl	I-protein	O	O	O
amide	I-protein	O	O	O
bond	I-protein	O	O	O
of	O	O	O	O
peptide	O	O	O	O
substrates	O	O	O	O
;	O	O	O	O
here	O	O	O	O
we	O	O	O	O
show	O	O	O	O
that	O	O	O	O
rapamycin	O	O	O	O
,	O	O	O	O
like	O	O	O	O
FK506	O	O	O	O
,	O	O	O	O
is	O	O	O	O
a	O	O	O	O
potent	O	O	O	O
inhibitor	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
rotamase	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
of	O	O	O	O
FKBP	B-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
Ki	O	O	O	O
=	O	O	O	O
0	O	O	O	O
.	O	O	O	O
2	O	O	O	O
nM	O	O	O	O
)	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Neither	O	O	O	O
FKBP	B-protein	O	O	O
binding	O	O	O	O
nor	O	O	O	O
inhibition	O	O	O	O
of	O	O	O	O
rotamase	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
of	O	O	O	O
FKBP	B-protein	O	O	O
alone	O	O	O	O
is	O	O	O	O
sufficient	O	O	O	O
to	O	O	O	O
explain	O	O	O	O
the	O	O	O	O
biologic	O	O	O	O
actions	O	O	O	O
of	O	O	O	O
these	O	O	O	O
drugs	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Rather	O	O	O	O
,	O	O	O	O
these	O	O	O	O
findings	O	O	O	O
suggest	O	O	O	O
that	O	O	O	O
immunophilin	B-protein	O	O	O
bound	O	O	O	O
to	O	O	O	O
FK506	O	O	O	O
interferes	O	O	O	O
with	O	O	O	O
antigen	B-protein	O	O	O
receptor	I-protein	O	O	O
-	O	O	O	O
induced	O	O	O	O
signals	O	O	O	O
,	O	O	O	O
while	O	O	O	O
rapamycin	O	O	O	O
bound	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
immunophilin	B-protein	O	O	O
interferes	O	O	O	O
with	O	O	O	O
IL	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
-	O	O	O	O
induced	O	O	O	O
signals	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Adherence	O	O	O	O
-	O	O	O	O
dependent	O	O	O	O
increase	O	O	O	O
in	O	O	O	O
human	B-RNA	O	O	O
monocyte	I-RNA	O	O	O
PDGF	I-RNA	O	O	O
(	I-RNA	O	O	O
B	I-RNA	O	O	O
)	I-RNA	O	O	O
mRNA	I-RNA	O	O	O
is	O	O	O	O
associated	O	O	O	O
with	O	O	O	O
increases	O	O	O	O
in	O	O	O	O
c	O	O	O	O
-	O	O	O	O
fos	O	O	O	O
,	O	O	O	O
c	O	O	O	O
-	O	O	O	O
jun	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
EGR2	O	O	O	O
mRNA	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Adherence	O	O	O	O
is	O	O	O	O
an	O	O	O	O
important	O	O	O	O
initial	O	O	O	O
step	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
transition	O	O	O	O
of	O	O	O	O
a	O	O	O	O
circulating	B-cell_type	O	O	O
monocyte	I-cell_type	O	O	O
to	O	O	O	O
a	O	O	O	O
tissue	B-cell_type	O	O	O
macrophage	I-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

This	O	O	O	O
differentiation	O	O	O	O
is	O	O	O	O
accompanied	O	O	O	O
by	O	O	O	O
an	O	O	O	O
augmented	O	O	O	O
capacity	O	O	O	O
to	O	O	O	O
generate	O	O	O	O
growth	B-protein	O	O	O
factors	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
hypothesized	O	O	O	O
that	O	O	O	O
adherence	O	O	O	O
itself	O	O	O	O
might	O	O	O	O
be	O	O	O	O
an	O	O	O	O
important	O	O	O	O
trigger	O	O	O	O
for	O	O	O	O
a	O	O	O	O
sequence	O	O	O	O
of	O	O	O	O
gene	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
culminating	O	O	O	O
in	O	O	O	O
cells	O	O	O	O
with	O	O	O	O
increased	O	O	O	O
mRNA	B-RNA	O	O	O
encoding	O	O	O	O
profibrotic	O	O	O	O
growth	B-protein	O	O	O
factors	I-protein	O	O	O
such	O	O	O	O
as	O	O	O	O
platelet	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
derived	I-protein	O	O	O
growth	I-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
subunit	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
PDGF	B-protein	O	O	O
[	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
]	I-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
and	O	O	O	O
transforming	B-protein	O	O	O
growth	I-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
beta	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
TGF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
beta	I-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
.	O	O	O	O

After	O	O	O	O
in	O	O	O	O
vitro	O	O	O	O
adherence	O	O	O	O
,	O	O	O	O
human	O	O	O	O
monocytes	O	O	O	O
had	O	O	O	O
a	O	O	O	O
biphasic	O	O	O	O
increase	O	O	O	O
in	O	O	O	O
PDGF	B-protein	B-RNA	O	O
(	I-protein	I-RNA	O	O
B	I-protein	I-RNA	O	O
)	I-protein	I-RNA	O	O
mRNA	O	I-RNA	O	O
with	O	O	O	O
peaks	O	O	O	O
at	O	O	O	O
6	O	O	O	O
h	O	O	O	O
and	O	O	O	O
13	O	O	O	O
d	O	O	O	O
.	O	O	O	O

No	O	O	O	O
increase	O	O	O	O
in	O	O	O	O
TGF	B-protein	B-RNA	O	O
-	I-protein	I-RNA	O	O
beta	I-protein	I-RNA	O	O
mRNA	O	I-RNA	O	O
was	O	O	O	O
observed	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
6	O	O	O	O
-	O	O	O	O
h	O	O	O	O
increase	O	O	O	O
in	O	O	O	O
PDGF	B-protein	B-RNA	O	O
(	I-protein	I-RNA	O	O
B	I-protein	I-RNA	O	O
)	I-protein	I-RNA	O	O
mRNA	O	I-RNA	O	O
was	O	O	O	O
adherence	O	O	O	O
dependent	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
in	O	O	O	O
addition	O	O	O	O
,	O	O	O	O
was	O	O	O	O
abrogated	O	O	O	O
when	O	O	O	O
the	O	O	O	O
cytoskeletal	O	O	O	O
integrity	O	O	O	O
was	O	O	O	O
compromised	O	O	O	O
by	O	O	O	O
cytochalasin	O	O	O	O
D	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
6	O	O	O	O
-	O	O	O	O
h	O	O	O	O
increase	O	O	O	O
in	O	O	O	O
PDGF	B-protein	B-RNA	O	O
(	I-protein	I-RNA	O	O
B	I-protein	I-RNA	O	O
)	I-protein	I-RNA	O	O
mRNA	O	I-RNA	O	O
was	O	O	O	O
unaltered	O	O	O	O
by	O	O	O	O
adherence	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
presence	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
monocyte	O	O	O	O
stimulus	O	O	O	O
lipopolysaccharide	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Adherence	O	O	O	O
to	O	O	O	O
either	O	O	O	O
fibronectin	O	O	O	O
or	O	O	O	O
collagen	O	O	O	O
-	O	O	O	O
coated	O	O	O	O
plastic	O	O	O	O
had	O	O	O	O
little	O	O	O	O
consistent	O	O	O	O
effect	O	O	O	O
on	O	O	O	O
PDGF	B-protein	B-RNA	O	O
(	I-protein	I-RNA	O	O
B	I-protein	I-RNA	O	O
)	I-protein	I-RNA	O	O
mRNA	O	I-RNA	O	O
accumulation	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
increased	O	O	O	O
PDGF	B-protein	B-RNA	O	O
(	I-protein	I-RNA	O	O
B	I-protein	I-RNA	O	O
)	I-protein	I-RNA	O	O
mRNA	O	I-RNA	O	O
observed	O	O	O	O
in	O	O	O	O
adherent	B-cell_type	O	O	O
monocytes	I-cell_type	O	O	O
was	O	O	O	O
accompanied	O	O	O	O
by	O	O	O	O
increases	O	O	O	O
in	O	O	O	O
mRNAs	B-RNA	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
early	B-DNA	O	O	O
growth	I-DNA	O	O	O
response	I-DNA	O	O	O
genes	I-DNA	O	O	O
c	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
fos	I-DNA	O	O	O
(	O	O	O	O
maximal	O	O	O	O
at	O	O	O	O
20	O	O	O	O
min	O	O	O	O
)	O	O	O	O
,	O	O	O	O
c	O	O	O	O
-	O	O	O	O
jun	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
EGR2	O	O	O	O
(	O	O	O	O
maximal	O	O	O	O
at	O	O	O	O
6	O	O	O	O
-	O	O	O	O
24	O	O	O	O
h	O	O	O	O
)	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
increase	O	O	O	O
in	O	O	O	O
c	O	O	O	O
-	O	O	O	O
jun	O	O	O	O
and	O	O	O	O
EGR2	O	O	O	O
,	O	O	O	O
but	O	O	O	O
not	O	O	O	O
c	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
fos	I-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
mRNA	O	O	O	O
was	O	O	O	O
also	O	O	O	O
abrogated	O	O	O	O
by	O	O	O	O
cytochalasin	O	O	O	O
D	O	O	O	O
.	O	O	O	O

These	O	O	O	O
observations	O	O	O	O
suggest	O	O	O	O
that	O	O	O	O
adherence	O	O	O	O
results	O	O	O	O
in	O	O	O	O
increases	O	O	O	O
of	O	O	O	O
c	O	O	O	O
-	O	O	O	O
fos	O	O	O	O
,	O	O	O	O
c	O	O	O	O
-	O	O	O	O
jun	O	O	O	O
,	O	O	O	O
EGR2	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
PDGF	O	O	O	O
(	O	O	O	O
B	O	O	O	O
)	O	O	O	O
mRNA	O	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
addition	O	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
increases	O	O	O	O
in	O	O	O	O
c	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
jun	I-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
EGR2	B-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
PDGF	B-protein	O	O	O
(	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
)	I-protein	O	O	O
may	O	O	O	O
depend	O	O	O	O
on	O	O	O	O
cytoskeletal	O	O	O	O
rearrangement	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Modulation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
these	O	O	O	O
events	O	O	O	O
at	O	O	O	O
the	O	O	O	O
time	O	O	O	O
of	O	O	O	O
adherence	O	O	O	O
offers	O	O	O	O
a	O	O	O	O
mechanism	O	O	O	O
by	O	O	O	O
which	O	O	O	O
differential	O	O	O	O
priming	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
cells	O	O	O	O
may	O	O	O	O
be	O	O	O	O
accomplished	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Single	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
assay	O	O	O	O
of	O	O	O	O
a	O	O	O	O
transcription	B-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
reveals	O	O	O	O
a	O	O	O	O
threshold	O	O	O	O
in	O	O	O	O
transcription	O	O	O	O
activated	O	O	O	O
by	O	O	O	O
signals	O	O	O	O
emanating	O	O	O	O
from	O	O	O	O
the	O	O	O	O
T	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
cell	I-protein	O	O	O
antigen	I-protein	O	O	O
receptor	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Stimulation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
T	B-cell_type	O	O	O
lymphocytes	I-cell_type	O	O	O
through	O	O	O	O
their	O	O	O	O
antigen	B-protein	O	O	O
receptor	I-protein	O	O	O
leads	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
appearance	O	O	O	O
of	O	O	O	O
several	O	O	O	O
transcription	B-protein	O	O	O
factors	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
including	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
AT	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
which	O	O	O	O
are	O	O	O	O
involved	O	O	O	O
in	O	O	O	O
regulating	O	O	O	O
genes	O	O	O	O
required	O	O	O	O
for	O	O	O	O
immunologic	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
.	O	O	O	O

To	O	O	O	O
investigate	O	O	O	O
the	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
of	O	O	O	O
a	O	O	O	O
single	O	O	O	O
transcription	B-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
individual	B-cell_type	O	O	O
viable	I-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
,	O	O	O	O
we	O	O	O	O
have	O	O	O	O
applied	O	O	O	O
an	O	O	O	O
assay	O	O	O	O
that	O	O	O	O
uses	O	O	O	O
the	O	O	O	O
fluorescence	O	O	O	O
-	O	O	O	O
activated	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
sorter	O	O	O	O
to	O	O	O	O
quantitate	O	O	O	O
beta	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
galactosidase	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
beta	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
gal	I-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
have	O	O	O	O
analyzed	O	O	O	O
the	O	O	O	O
distribution	O	O	O	O
of	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
AT	I-protein	O	O	O
transcriptional	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
among	O	O	O	O
T	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
undergoing	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
by	O	O	O	O
using	O	O	O	O
a	O	O	O	O
construct	O	O	O	O
in	O	O	O	O
which	O	O	O	O
three	O	O	O	O
tandem	O	O	O	O
copies	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
NF	B-protein	B-DNA	O	O
-	I-protein	I-DNA	O	O
AT	I-protein	I-DNA	O	O
-	O	I-DNA	O	O
binding	O	I-DNA	O	O
site	O	I-DNA	O	O
directs	O	O	O	O
transcription	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
lacZ	B-DNA	O	O	O
gene	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

Unexpectedly	O	O	O	O
,	O	O	O	O
stimulation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
cloned	O	B-cell_line	O	O
stably	O	I-cell_line	O	O
transfected	O	I-cell_line	O	O
Jurkat	O	I-cell_line	O	O
T	B-cell_type	I-cell_line	O	O
cells	I-cell_type	I-cell_line	O	O
leads	O	O	O	O
to	O	O	O	O
a	O	O	O	O
bimodal	O	O	O	O
pattern	O	O	O	O
of	O	O	O	O
beta	O	O	O	O
-	O	O	O	O
gal	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
in	O	O	O	O
which	O	O	O	O
some	O	O	O	O
cells	O	O	O	O
express	O	O	O	O
no	O	O	O	O
beta	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
gal	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
others	O	O	O	O
express	O	O	O	O
high	O	O	O	O
levels	O	O	O	O
.	O	O	O	O

This	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
pattern	O	O	O	O
cannot	O	O	O	O
be	O	O	O	O
accounted	O	O	O	O
for	O	O	O	O
by	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
-	O	O	O	O
cycle	O	O	O	O
position	O	O	O	O
or	O	O	O	O
heritable	O	O	O	O
variation	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Further	O	O	O	O
results	O	O	O	O
,	O	O	O	O
in	O	O	O	O
which	O	O	O	O
beta	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
gal	I-protein	O	O	O
activity	O	O	O	O
is	O	O	O	O
correlated	O	O	O	O
with	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
AT	I-protein	O	O	O
-	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
,	O	O	O	O
indicate	O	O	O	O
that	O	O	O	O
the	O	O	O	O
concentration	O	O	O	O
of	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
AT	I-protein	O	O	O
must	O	O	O	O
exceed	O	O	O	O
a	O	O	O	O
critical	O	O	O	O
threshold	O	O	O	O
before	O	O	O	O
transcription	O	O	O	O
initiates	O	O	O	O
.	O	O	O	O

This	O	O	O	O
threshold	O	O	O	O
likely	O	O	O	O
reflects	O	O	O	O
the	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
AT	I-protein	O	O	O
concentration	O	O	O	O
-	O	O	O	O
dependent	O	O	O	O
assembly	O	O	O	O
of	O	O	O	O
transcription	B-protein	O	O	O
complexes	I-protein	O	O	O
at	O	O	O	O
the	O	O	O	O
promoter	B-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

Similar	O	O	O	O
constructs	O	O	O	O
controlled	O	O	O	O
by	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
or	O	O	O	O
the	O	O	O	O
entire	O	O	O	O
interleukin	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
2	I-DNA	O	O	O
enhancer	I-DNA	O	O	O
show	O	O	O	O
bimodal	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
patterns	O	O	O	O
during	O	O	O	O
induction	O	O	O	O
,	O	O	O	O
suggesting	O	O	O	O
that	O	O	O	O
thresholds	O	O	O	O
set	O	O	O	O
by	O	O	O	O
the	O	O	O	O
concentration	O	O	O	O
of	O	O	O	O
transcription	B-protein	O	O	O
factors	I-protein	O	O	O
may	O	O	O	O
be	O	O	O	O
a	O	O	O	O
common	O	O	O	O
property	O	O	O	O
of	O	O	O	O
inducible	B-DNA	O	O	O
genes	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
Epstein	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
Barr	I-DNA	O	O	O
virus	I-DNA	O	O	O
(	I-DNA	O	O	O
EBV	I-DNA	O	O	O
)	I-DNA	O	O	O
BMRF1	I-DNA	O	O	O
promoter	I-DNA	O	O	O
for	O	O	O	O
early	B-protein	O	O	O
antigen	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
EA	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
D	I-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
is	O	O	O	O
regulated	O	O	O	O
by	O	O	O	O
the	O	O	O	O
EBV	B-protein	O	O	O
transactivators	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
BRLF1	B-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
BZLF1	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
in	O	O	O	O
a	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
-	O	O	O	O
specific	O	O	O	O
manner	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
Epstein	O	B-protein	O	O
-	O	I-protein	O	O
Barr	O	I-protein	O	O
virus	O	I-protein	O	O
early	B-protein	I-protein	O	O
antigen	I-protein	I-protein	O	O
diffuse	O	I-protein	O	O
component	O	I-protein	O	O
(	O	O	O	O
EA	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
D	I-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
is	O	O	O	O
essential	O	O	O	O
for	O	O	O	O
Epstein	O	O	O	O
-	O	O	O	O
Barr	O	O	O	O
virus	B-DNA	O	O	O
DNA	I-DNA	O	O	O
polymerase	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
its	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
is	O	O	O	O
suppressed	O	O	O	O
during	O	O	O	O
latent	O	O	O	O
infection	O	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
investigated	O	O	O	O
the	O	O	O	O
regulation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
promoter	B-DNA	O	O	O
(	O	O	O	O
BMRF1	B-DNA	O	O	O
)	O	O	O	O
for	O	O	O	O
this	O	O	O	O
early	O	O	O	O
gene	O	O	O	O
by	O	O	O	O
studying	O	O	O	O
its	O	O	O	O
responsiveness	O	O	O	O
in	O	O	O	O
vitro	O	O	O	O
to	O	O	O	O
two	O	O	O	O
immediate	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
early	I-protein	O	O	O
viral	I-protein	O	O	O
transactivators	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
BZLF1	B-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
Z	B-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
and	O	O	O	O
BRLF1	B-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
R	B-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
,	O	O	O	O
focusing	O	O	O	O
on	O	O	O	O
the	O	O	O	O
differences	O	O	O	O
in	O	O	O	O
response	O	O	O	O
in	O	O	O	O
lymphoid	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
and	O	O	O	O
epithelial	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
lymphoid	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
,	O	O	O	O
Z	B-protein	O	O	O
or	O	O	O	O
R	B-protein	O	O	O
alone	O	O	O	O
produced	O	O	O	O
only	O	O	O	O
small	O	O	O	O
increases	O	O	O	O
in	O	O	O	O
EA	B-protein	B-DNA	O	O
-	I-protein	I-DNA	O	O
D	I-protein	I-DNA	O	O
promoter	O	I-DNA	O	O
activity	O	O	O	O
,	O	O	O	O
whereas	O	O	O	O
both	O	O	O	O
transactivators	B-protein	O	O	O
together	O	O	O	O
produced	O	O	O	O
a	O	O	O	O
large	O	O	O	O
stimulatory	O	O	O	O
effect	O	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
epithelial	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
Z	B-protein	O	O	O
transactivator	I-protein	O	O	O
alone	O	O	O	O
produced	O	O	O	O
maximal	O	O	O	O
stimulation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
EA	B-protein	B-DNA	O	O
-	I-protein	I-DNA	O	O
D	I-protein	I-DNA	O	O
promoter	O	I-DNA	O	O
;	O	O	O	O
the	O	O	O	O
effect	O	O	O	O
of	O	O	O	O
R	B-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
Z	B-protein	O	O	O
together	O	O	O	O
was	O	O	O	O
no	O	O	O	O
greater	O	O	O	O
than	O	O	O	O
that	O	O	O	O
of	O	O	O	O
Z	B-protein	O	O	O
alone	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Deletional	O	O	O	O
analysis	O	O	O	O
and	O	O	O	O
site	O	O	O	O
-	O	O	O	O
directed	O	O	O	O
mutagenesis	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
EA	B-protein	B-DNA	O	O
-	I-protein	I-DNA	O	O
D	I-protein	I-DNA	O	O
promoter	O	I-DNA	O	O
demonstrated	O	O	O	O
that	O	O	O	O
in	O	O	O	O
epithelial	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
the	O	O	O	O
potential	O	O	O	O
AP	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
1	I-DNA	O	O	O
binding	I-DNA	O	O	O
site	I-DNA	O	O	O
plays	O	O	O	O
an	O	O	O	O
essential	O	O	O	O
role	O	O	O	O
in	O	O	O	O
Z	B-protein	O	O	O
responsiveness	O	O	O	O
,	O	O	O	O
although	O	O	O	O
sequences	O	O	O	O
further	O	O	O	O
upstream	O	O	O	O
are	O	O	O	O
also	O	O	O	O
important	O	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
lymphoid	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
,	O	O	O	O
only	O	O	O	O
the	O	O	O	O
upstream	B-DNA	O	O	O
sequences	I-DNA	O	O	O
are	O	O	O	O
required	O	O	O	O
for	O	O	O	O
transactivation	O	O	O	O
by	O	O	O	O
the	O	O	O	O
Z	B-protein	O	O	O
/	I-protein	O	O	O
R	I-protein	O	O	O
combination	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
the	O	O	O	O
AP	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
site	I-protein	O	O	O
is	O	O	O	O
dispensable	O	O	O	O
.	O	O	O	O

These	O	O	O	O
data	O	O	O	O
suggest	O	O	O	O
that	O	O	O	O
EA	B-protein	B-DNA	O	O
-	I-protein	I-DNA	O	O
D	I-protein	I-DNA	O	O
(	O	I-DNA	O	O
BMRF1	B-DNA	I-DNA	O	O
)	O	I-DNA	O	O
promoter	O	I-DNA	O	O
regulation	O	O	O	O
by	O	O	O	O
Z	B-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
R	B-protein	O	O	O
is	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
type	O	O	O	O
specific	O	O	O	O
and	O	O	O	O
appears	O	O	O	O
to	O	O	O	O
involve	O	O	O	O
different	O	O	O	O
mechanisms	O	O	O	O
in	O	O	O	O
each	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
type	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Complementary	B-DNA	O	O	O
DNA	I-DNA	O	O	O
encoding	O	O	O	O
the	O	O	O	O
human	B-protein	O	O	O
T	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
cell	I-protein	O	O	O
FK506	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
binding	I-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
a	O	O	O	O
peptidylprolyl	B-protein	O	O	O
cis	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
trans	I-protein	O	O	O
isomerase	I-protein	O	O	O
distinct	O	O	O	O
from	O	O	O	O
cyclophilin	B-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
recently	O	O	O	O
discovered	O	O	O	O
macrolide	O	O	O	O
FK506	O	O	O	O
has	O	O	O	O
been	O	O	O	O
demonstrated	O	O	O	O
to	O	O	O	O
have	O	O	O	O
potent	O	O	O	O
immunosuppressive	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
at	O	O	O	O
concentrations	O	O	O	O
100	O	O	O	O
-	O	O	O	O
fold	O	O	O	O
lower	O	O	O	O
than	O	O	O	O
cyclosporin	O	O	O	O
A	O	O	O	O
,	O	O	O	O
a	O	O	O	O
cyclic	O	O	O	O
undecapeptide	O	O	O	O
that	O	O	O	O
is	O	O	O	O
used	O	O	O	O
to	O	O	O	O
prevent	O	O	O	O
rejection	O	O	O	O
after	O	O	O	O
transplantation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
bone	O	O	O	O
marrow	O	O	O	O
and	O	O	O	O
organs	O	O	O	O
,	O	O	O	O
such	O	O	O	O
as	O	O	O	O
kidney	O	O	O	O
,	O	O	O	O
heart	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
liver	O	O	O	O
.	O	O	O	O

After	O	O	O	O
the	O	O	O	O
recent	O	O	O	O
discovery	O	O	O	O
that	O	O	O	O
the	O	O	O	O
cyclosporin	B-protein	O	O	O
A	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
binding	I-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
cyclophilin	B-protein	O	O	O
is	O	O	O	O
identical	O	O	O	O
to	O	O	O	O
peptidylprolyl	B-protein	O	O	O
cis	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
trans	I-protein	O	O	O
isomerase	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
a	O	O	O	O
cellular	B-protein	O	O	O
binding	I-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
for	O	O	O	O
FK506	O	O	O	O
was	O	O	O	O
found	O	O	O	O
to	O	O	O	O
be	O	O	O	O
distinct	O	O	O	O
from	O	O	O	O
cyclophilin	B-protein	O	O	O
but	O	O	O	O
to	O	O	O	O
have	O	O	O	O
the	O	O	O	O
same	O	O	O	O
enzymatic	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
this	O	O	O	O
study	O	O	O	O
,	O	O	O	O
we	O	O	O	O
isolated	O	O	O	O
a	O	O	O	O
cDNA	B-DNA	O	O	O
coding	O	O	O	O
for	O	O	O	O
FK506	O	O	O	O
-	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
protein	O	O	O	O
(	O	O	O	O
FKBP	B-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
from	O	O	O	O
human	O	O	O	O
peripheral	O	O	O	O
blood	O	O	O	O
T	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
by	O	O	O	O
using	O	O	O	O
mixed	O	O	O	O
20	O	O	O	O
-	O	O	O	O
mer	O	O	O	O
oligonucleotide	O	O	O	O
probes	O	O	O	O
synthesized	O	O	O	O
on	O	O	O	O
the	O	O	O	O
basis	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
sequence	O	O	O	O
,	O	O	O	O
Glu	O	O	O	O
-	O	O	O	O
Asp	O	O	O	O
-	O	O	O	O
Gly	O	O	O	O
-	O	O	O	O
Lys	O	O	O	O
-	O	O	O	O
Lys	O	O	O	O
-	O	O	O	O
Phe	O	O	O	O
-	O	O	O	O
Asp	O	O	O	O
,	O	O	O	O
reported	O	O	O	O
for	O	O	O	O
bovine	O	B-protein	O	O
FKBP	B-protein	I-protein	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
DNA	O	O	O	O
isolated	O	O	O	O
contained	O	O	O	O
an	O	O	O	O
open	O	O	O	O
reading	O	O	O	O
frame	O	O	O	O
encoding	O	O	O	O
108	O	O	O	O
amino	O	O	O	O
acid	O	O	O	O
residues	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
first	O	O	O	O
40	O	O	O	O
residues	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
deduced	O	O	O	O
amino	B-protein	O	O	O
acid	I-protein	O	O	O
sequence	I-protein	O	O	O
were	O	O	O	O
identical	O	O	O	O
to	O	O	O	O
those	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
reported	O	O	O	O
amino	O	O	O	O
-	O	O	O	O
terminal	O	O	O	O
sequence	O	O	O	O
of	O	O	O	O
bovine	O	O	O	O
FKBP	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
indicating	O	O	O	O
that	O	O	O	O
the	O	O	O	O
DNA	O	O	O	O
sequence	O	O	O	O
isolated	O	O	O	O
represents	O	O	O	O
the	O	O	O	O
gene	O	O	O	O
coding	O	O	O	O
for	O	O	O	O
FKBP	B-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Computer	O	O	O	O
-	O	O	O	O
assisted	O	O	O	O
analysis	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
deduced	O	O	O	O
amino	O	O	O	O
acid	O	O	O	O
sequence	O	O	O	O
indicates	O	O	O	O
that	O	O	O	O
FKBP	B-protein	O	O	O
exhibits	O	O	O	O
no	O	O	O	O
internal	O	O	O	O
homology	O	O	O	O
and	O	O	O	O
does	O	O	O	O
not	O	O	O	O
have	O	O	O	O
significant	O	O	O	O
sequence	O	O	O	O
similarity	O	O	O	O
to	O	O	O	O
any	O	O	O	O
other	O	O	O	O
amino	O	O	O	O
acid	O	O	O	O
sequences	O	O	O	O
of	O	O	O	O
known	O	O	O	O
proteins	O	O	O	O
,	O	O	O	O
including	O	O	O	O
cyclophilin	B-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

This	O	O	O	O
result	O	O	O	O
suggests	O	O	O	O
that	O	O	O	O
two	O	O	O	O
catalytically	O	O	O	O
similar	O	O	O	O
proteins	O	O	O	O
,	O	O	O	O
cyclophilin	B-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
FKBP	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
evolved	O	O	O	O
independently	O	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
Northern	O	O	O	O
blot	O	O	O	O
analysis	O	O	O	O
,	O	O	O	O
mRNA	B-RNA	O	O	O
species	I-RNA	O	O	O
of	O	O	O	O
approximately	O	O	O	O
1	O	O	O	O
.	O	O	O	O
8	O	O	O	O
kilobases	O	O	O	O
that	O	O	O	O
hybridized	O	O	O	O
with	O	O	O	O
human	O	B-DNA	O	O
FKBP	B-protein	I-DNA	O	O
cDNA	O	I-DNA	O	O
were	O	O	O	O
detected	O	O	O	O
in	O	O	O	O
poly	B-RNA	O	O	O
(	I-RNA	O	O	O
A	I-RNA	O	O	O
)	I-RNA	O	O	O
+	I-RNA	O	O	O
RNAs	I-RNA	O	O	O
from	O	O	O	O
brain	O	O	O	O
,	O	O	O	O
lung	O	O	O	O
,	O	O	O	O
liver	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
placental	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
and	O	O	O	O
leukocytes	B-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

Induction	O	O	O	O
of	O	O	O	O
Jurkat	O	B-cell_line	O	O
leukemic	O	I-cell_line	O	O
T	B-cell_type	I-cell_line	O	O
cells	I-cell_type	I-cell_line	O	O
with	O	O	O	O
phorbol	O	O	O	O
12	O	O	O	O
-	O	O	O	O
myristate	O	O	O	O
13	O	O	O	O
-	O	O	O	O
acetate	O	O	O	O
and	O	O	O	O
ionomycin	O	O	O	O
did	O	O	O	O
not	O	O	O	O
affect	O	O	O	O
the	O	O	O	O
level	O	O	O	O
of	O	O	O	O
FKBP	B-protein	B-RNA	O	O
mRNA	O	I-RNA	O	O
.	O	O	O	O

Southern	O	O	O	O
blot	O	O	O	O
analysis	O	O	O	O
of	O	O	O	O
human	B-DNA	O	O	O
genomic	I-DNA	O	O	O
DNA	I-DNA	O	O	O
digested	O	O	O	O
with	O	O	O	O
different	O	O	O	O
restriction	B-protein	O	O	O
enzymes	I-protein	O	O	O
suggests	O	O	O	O
the	O	O	O	O
existence	O	O	O	O
of	O	O	O	O
only	O	O	O	O
a	O	O	O	O
few	O	O	O	O
copies	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
DNA	O	O	O	O
sequence	O	O	O	O
encoding	O	O	O	O
FKBP	B-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

This	O	O	O	O
is	O	O	O	O
in	O	O	O	O
contrast	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
result	O	O	O	O
that	O	O	O	O
as	O	O	O	O
many	O	O	O	O
as	O	O	O	O
20	O	O	O	O
copies	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
cyclophilin	B-protein	B-DNA	O	O
gene	O	I-DNA	O	O
and	O	O	O	O
possible	O	O	O	O
pseudogenes	O	O	O	O
may	O	O	O	O
be	O	O	O	O
present	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
mammalian	B-DNA	O	O	O
genome	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

Involvement	O	O	O	O
of	O	O	O	O
a	O	O	O	O
second	O	O	O	O
lymphoid	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
specific	I-DNA	O	O	O
enhancer	I-DNA	O	O	O
element	I-DNA	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
regulation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
immunoglobulin	B-DNA	O	O	O
heavy	I-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
chain	I-DNA	O	O	O
gene	I-DNA	O	O	O
expression	O	O	O	O
.	O	O	O	O

To	O	O	O	O
determine	O	O	O	O
whether	O	O	O	O
enhancer	B-DNA	O	O	O
elements	I-DNA	O	O	O
in	O	O	O	O
addition	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
highly	O	O	O	O
conserved	O	O	O	O
octamer	B-DNA	O	O	O
(	I-DNA	O	O	O
OCTA	I-DNA	O	O	O
)	I-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
nucleotide	I-DNA	O	O	O
motif	I-DNA	O	O	O
are	O	O	O	O
important	O	O	O	O
for	O	O	O	O
lymphoid	O	O	O	O
-	O	O	O	O
specific	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
immunoglobulin	B-DNA	O	O	O
heavy	I-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
chain	I-DNA	O	O	O
(	I-DNA	O	O	O
IgH	I-DNA	O	O	O
)	I-DNA	O	O	O
gene	I-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
we	O	O	O	O
have	O	O	O	O
investigated	O	O	O	O
the	O	O	O	O
effect	O	O	O	O
of	O	O	O	O
mutating	O	O	O	O
the	O	O	O	O
binding	B-DNA	O	O	O
site	I-DNA	O	O	O
for	O	O	O	O
a	O	O	O	O
putative	B-protein	O	O	O
additional	I-protein	O	O	O
lymphoid	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
specific	I-protein	O	O	O
transcription	I-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
designated	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
microB	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
murine	B-DNA	O	O	O
IgH	I-DNA	O	O	O
enhancer	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
demonstrate	O	O	O	O
that	O	O	O	O
the	O	O	O	O
NF	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
microB	I-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
binding	I-DNA	O	O	O
site	I-DNA	O	O	O
plays	O	O	O	O
a	O	O	O	O
critical	O	O	O	O
role	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
IgH	B-DNA	O	O	O
enhancer	I-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
because	O	O	O	O
mutation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
microB	O	O	O	O
DNA	O	O	O	O
motif	O	O	O	O
decreased	O	O	O	O
transcriptional	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
IgH	B-DNA	O	O	O
enhancer	I-DNA	O	O	O
in	O	O	O	O
cells	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
B	B-cell_type	O	O	O
-	I-cell_type	O	O	O
cell	I-cell_type	O	O	O
lineage	I-cell_type	O	O	O
but	O	O	O	O
not	O	O	O	O
in	O	O	O	O
nonlymphoid	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

This	O	O	O	O
effect	O	O	O	O
was	O	O	O	O
comparable	O	O	O	O
to	O	O	O	O
or	O	O	O	O
even	O	O	O	O
stronger	O	O	O	O
than	O	O	O	O
the	O	O	O	O
effect	O	O	O	O
of	O	O	O	O
a	O	O	O	O
mutation	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
OCTA	B-DNA	O	O	O
site	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

Moreover	O	O	O	O
,	O	O	O	O
combined	O	O	O	O
mutation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
both	O	O	O	O
microB	B-DNA	O	O	O
and	O	O	O	O
OCTA	B-DNA	O	O	O
sites	I-DNA	O	O	O
further	O	O	O	O
reduced	O	O	O	O
enhancer	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
in	O	O	O	O
lymphoid	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

Interestingly	O	O	O	O
,	O	O	O	O
alteration	O	O	O	O
of	O	O	O	O
either	O	O	O	O
the	O	O	O	O
microB	B-DNA	O	O	O
or	O	O	O	O
E3	B-DNA	O	O	O
site	I-DNA	O	O	O
in	O	O	O	O
a	O	O	O	O
70	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
base	I-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
pair	I-DNA	O	O	O
fragment	I-DNA	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
IgH	B-DNA	O	O	O
enhancer	I-DNA	O	O	O
that	O	O	O	O
lacks	O	O	O	O
the	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
site	O	O	O	O
for	O	O	O	O
OCTA	O	O	O	O
abolished	O	O	O	O
enhancer	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
in	O	O	O	O
lymphoid	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
completely	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Nevertheless	O	O	O	O
,	O	O	O	O
a	O	O	O	O
multimer	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
microB	B-DNA	B-DNA	O	O
motif	O	I-DNA	O	O
alone	O	O	O	O
showed	O	O	O	O
no	O	O	O	O
enhancer	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
.	O	O	O	O

DNase	O	O	O	O
footprinting	O	O	O	O
analysis	O	O	O	O
corroborated	O	O	O	O
the	O	O	O	O
functional	O	O	O	O
data	O	O	O	O
showing	O	O	O	O
that	O	O	O	O
a	O	O	O	O
lymphoid	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
specific	I-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
binds	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
microB	B-DNA	B-DNA	O	O
DNA	O	I-DNA	O	O
motif	O	I-DNA	O	O
.	O	O	O	O

Our	O	O	O	O
results	O	O	O	O
suggest	O	O	O	O
that	O	O	O	O
the	O	O	O	O
microB	B-DNA	B-DNA	O	O
element	O	I-DNA	O	O
is	O	O	O	O
a	O	O	O	O
new	O	O	O	O
crucial	O	O	O	O
element	O	O	O	O
important	O	O	O	O
for	O	O	O	O
lymphoid	O	O	O	O
-	O	O	O	O
specific	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
IgH	O	O	O	O
gene	O	O	O	O
but	O	O	O	O
that	O	O	O	O
interaction	O	O	O	O
with	O	O	O	O
another	O	O	O	O
enhancer	B-DNA	O	O	O
element	I-DNA	O	O	O
is	O	O	O	O
essential	O	O	O	O
for	O	O	O	O
its	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Stimulation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
human	O	O	O	O
immunodeficiency	O	O	O	O
virus	O	O	O	O
type	O	O	O	O
2	O	O	O	O
(	O	O	O	O
HIV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
2	O	O	O	O
)	O	O	O	O
gene	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
by	O	O	O	O
the	O	O	O	O
cytomegalovirus	O	O	O	O
and	O	O	O	O
HIV	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
2	I-DNA	O	O	O
transactivator	I-DNA	O	O	O
gene	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

Human	O	O	O	O
immunodeficiency	O	O	O	O
virus	O	O	O	O
(	O	O	O	O
HIV	O	O	O	O
)	O	O	O	O
often	O	O	O	O
causes	O	O	O	O
latent	O	O	O	O
infection	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Transactivation	O	O	O	O
by	O	O	O	O
some	O	O	O	O
DNA	O	O	O	O
viruses	O	O	O	O
has	O	O	O	O
been	O	O	O	O
implicated	O	O	O	O
in	O	O	O	O
inducing	O	O	O	O
HIV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
1	O	O	O	O
replication	O	O	O	O
and	O	O	O	O
pathogenesis	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
transactivator	B-DNA	O	O	O
(	I-DNA	O	O	O
IE	I-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
2	I-DNA	O	O	O
)	I-DNA	O	O	O
gene	I-DNA	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
human	O	O	O	O
cytomegalovirus	O	O	O	O
(	O	O	O	O
CMV	O	O	O	O
)	O	O	O	O
can	O	O	O	O
enhance	O	O	O	O
HIV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
2	O	O	O	O
as	O	O	O	O
well	O	O	O	O
as	O	O	O	O
HIV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
1	O	O	O	O
gene	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
in	O	O	O	O
vitro	O	O	O	O
.	O	O	O	O

This	O	O	O	O
inducer	O	O	O	O
can	O	O	O	O
act	O	O	O	O
in	O	O	O	O
concert	O	O	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
HIV	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
2	I-DNA	O	O	O
tat	I-DNA	O	O	O
gene	I-DNA	O	O	O
and	O	O	O	O
T	O	O	O	O
-	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
in	O	O	O	O
enhancing	O	O	O	O
gene	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
in	O	O	O	O
human	B-cell_type	O	O	O
CD4	I-cell_type	O	O	O
+	I-cell_type	O	O	O
lymphocytes	I-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

While	O	O	O	O
the	O	O	O	O
HIV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
2	O	O	O	O
and	O	O	O	O
HIV	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
1	I-DNA	O	O	O
tat	I-DNA	O	O	O
genes	I-DNA	O	O	O
and	O	O	O	O
T	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
cell	I-protein	O	O	O
activators	I-protein	O	O	O
apparently	O	O	O	O
employ	O	O	O	O
independent	O	O	O	O
modes	O	O	O	O
of	O	O	O	O
action	O	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
CMV	B-DNA	O	O	O
transactivator	I-DNA	O	O	O
in	O	O	O	O
combination	O	O	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
HIV	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
2	I-DNA	O	O	O
tat	I-DNA	O	O	O
or	O	O	O	O
T	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
cell	I-protein	O	O	O
activators	I-protein	O	O	O
may	O	O	O	O
employ	O	O	O	O
a	O	O	O	O
gene	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
pathway	O	O	O	O
with	O	O	O	O
some	O	O	O	O
common	O	O	O	O
and	O	O	O	O
some	O	O	O	O
distinct	O	O	O	O
components	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Both	O	O	O	O
HIV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
2	O	O	O	O
and	O	O	O	O
CMV	O	B-DNA	O	O
transactivators	B-protein	I-DNA	O	O
enhance	O	O	O	O
HIV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
2	O	O	O	O
gene	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
by	O	O	O	O
transcriptional	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
involving	O	O	O	O
transcript	O	O	O	O
initiation	O	O	O	O
as	O	O	O	O
well	O	O	O	O
as	O	O	O	O
elongation	O	O	O	O
,	O	O	O	O
with	O	O	O	O
CMV	O	B-DNA	O	O
transactivator	B-protein	I-DNA	O	O
affecting	O	O	O	O
elongation	O	O	O	O
more	O	O	O	O
than	O	O	O	O
the	O	O	O	O
initiation	O	O	O	O
.	O	O	O	O

A	O	O	O	O
significant	O	O	O	O
proportion	O	O	O	O
of	O	O	O	O
transcripts	B-RNA	O	O	O
appear	O	O	O	O
to	O	O	O	O
terminate	O	O	O	O
prematurely	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
absence	O	O	O	O
of	O	O	O	O
transactivators	B-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Deletion	O	O	O	O
mutation	O	O	O	O
analysis	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
HIV	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
2	I-DNA	O	O	O
long	I-DNA	O	O	O
terminal	I-DNA	O	O	O
repeat	I-DNA	O	O	O
(	O	O	O	O
LTR	B-DNA	O	O	O
)	O	O	O	O
suggests	O	O	O	O
that	O	O	O	O
the	O	O	O	O
element	O	O	O	O
that	O	O	O	O
responds	O	O	O	O
to	O	O	O	O
CMV	O	O	O	O
transactivation	O	O	O	O
in	O	O	O	O
human	B-cell_type	O	O	O
CD4	I-cell_type	O	O	O
+	I-cell_type	O	O	O
lymphocytes	I-cell_type	O	O	O
is	O	O	O	O
either	O	O	O	O
a	O	O	O	O
diffuse	O	O	O	O
one	O	O	O	O
or	O	O	O	O
located	O	O	O	O
downstream	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
HIV	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
2	I-DNA	O	O	O
enhancer	I-DNA	O	O	O
element	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

Quantitative	O	O	O	O
immunohistochemical	O	O	O	O
analysis	O	O	O	O
of	O	O	O	O
mononuclear	B-cell_type	O	O	O
infiltrates	I-cell_type	O	O	O
in	O	O	O	O
breast	O	O	O	O
carcinomas	O	O	O	O
-	O	O	O	O
-	O	O	O	O
correlation	O	O	O	O
with	O	O	O	O
tumour	O	O	O	O
differentiation	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Inflammatory	B-cell_type	O	O	O
infiltrates	I-cell_type	O	O	O
were	O	O	O	O
analysed	O	O	O	O
in	O	O	O	O
tissue	O	O	O	O
sections	O	O	O	O
of	O	O	O	O
76	O	O	O	O
breast	O	O	O	O
carcinomas	O	O	O	O
by	O	O	O	O
counting	O	O	O	O
the	O	O	O	O
percentage	O	O	O	O
of	O	O	O	O
macrophages	B-cell_type	O	O	O
,	O	O	O	O
IgA	O	O	O	O
+	O	O	O	O
and	O	O	O	O
IgG	O	O	O	O
+	O	O	O	O
plasma	O	O	O	O
cells	O	O	O	O
,	O	O	O	O
T	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
with	O	O	O	O
their	O	O	O	O
subpopulations	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
natural	B-cell_type	O	O	O
killer	I-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
by	O	O	O	O
measuring	O	O	O	O
postcapillary	O	O	O	O
venules	O	O	O	O
(	O	O	O	O
PCVs	O	O	O	O
,	O	O	O	O
found	O	O	O	O
in	O	O	O	O
12	O	O	O	O
cases	O	O	O	O
)	O	O	O	O
within	O	O	O	O
the	O	O	O	O
infiltrates	O	O	O	O
.	O	O	O	O

These	O	O	O	O
parameters	O	O	O	O
were	O	O	O	O
correlated	O	O	O	O
with	O	O	O	O
nuclear	O	O	O	O
grade	O	O	O	O
and	O	O	O	O
biochemically	O	O	O	O
determined	O	O	O	O
hormone	O	O	O	O
receptor	O	O	O	O
status	O	O	O	O
,	O	O	O	O
known	O	O	O	O
markers	O	O	O	O
of	O	O	O	O
tumour	O	O	O	O
differentiation	O	O	O	O
.	O	O	O	O

A	O	O	O	O
direct	O	O	O	O
correlation	O	O	O	O
was	O	O	O	O
found	O	O	O	O
between	O	O	O	O
the	O	O	O	O
extent	O	O	O	O
of	O	O	O	O
inflammation	O	O	O	O
and	O	O	O	O
nuclear	O	O	O	O
grade	O	O	O	O
(	O	O	O	O
P	O	O	O	O
less	O	O	O	O
than	O	O	O	O
0	O	O	O	O
.	O	O	O	O
0001	O	O	O	O
)	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
an	O	O	O	O
inverse	O	O	O	O
correlation	O	O	O	O
between	O	O	O	O
inflammation	O	O	O	O
and	O	O	O	O
oestrogen	B-protein	O	O	O
receptor	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
OR	B-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
positivity	O	O	O	O
(	O	O	O	O
P	O	O	O	O
less	O	O	O	O
than	O	O	O	O
0	O	O	O	O
.	O	O	O	O
05	O	O	O	O
)	O	O	O	O
as	O	O	O	O
well	O	O	O	O
as	O	O	O	O
inflammation	O	O	O	O
and	O	O	O	O
progesterone	B-protein	O	O	O
receptor	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
PR	B-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
positivity	O	O	O	O
(	O	O	O	O
P	O	O	O	O
less	O	O	O	O
than	O	O	O	O
0	O	O	O	O
.	O	O	O	O
05	O	O	O	O
)	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
percentage	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
OKT8	O	B-cell_line	O	O
+	O	I-cell_line	O	O
suppressor	O	I-cell_line	O	O
/	O	I-cell_line	O	O
cytotoxic	O	I-cell_line	O	O
T	B-cell_type	I-cell_line	O	O
cells	I-cell_type	I-cell_line	O	O
increased	O	O	O	O
when	O	O	O	O
the	O	O	O	O
inflammation	O	O	O	O
expanded	O	O	O	O
from	O	O	O	O
scanty	O	O	O	O
to	O	O	O	O
moderate	O	O	O	O
(	O	O	O	O
P	O	O	O	O
less	O	O	O	O
than	O	O	O	O
0	O	O	O	O
.	O	O	O	O
02	O	O	O	O
)	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
diameter	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
PCVs	O	O	O	O
also	O	O	O	O
increased	O	O	O	O
with	O	O	O	O
increasing	O	O	O	O
inflammatory	O	O	O	O
infiltrate	O	O	O	O
(	O	O	O	O
P	O	O	O	O
less	O	O	O	O
than	O	O	O	O
0	O	O	O	O
.	O	O	O	O
02	O	O	O	O
)	O	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
addition	O	O	O	O
,	O	O	O	O
a	O	O	O	O
direct	O	O	O	O
correlation	O	O	O	O
exists	O	O	O	O
between	O	O	O	O
the	O	O	O	O
diameter	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
PCVs	O	O	O	O
and	O	O	O	O
both	O	O	O	O
the	O	O	O	O
percentage	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
OKT8	O	B-cell_line	O	O
+	O	I-cell_line	O	O
T	B-cell_type	I-cell_line	O	O
cells	I-cell_type	I-cell_line	O	O
(	O	O	O	O
P	O	O	O	O
less	O	O	O	O
than	O	O	O	O
0	O	O	O	O
.	O	O	O	O
04	O	O	O	O
)	O	O	O	O
and	O	O	O	O
the	O	O	O	O
Leu	O	O	O	O
-	O	O	O	O
7	O	O	O	O
+	O	O	O	O
natural	B-cell_type	O	O	O
killer	I-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
(	O	O	O	O
P	O	O	O	O
less	O	O	O	O
than	O	O	O	O
0	O	O	O	O
.	O	O	O	O
03	O	O	O	O
)	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Reactivity	O	O	O	O
of	O	O	O	O
lymphocytes	B-cell_line	O	O	O
to	O	O	O	O
a	O	O	O	O
progesterone	B-protein	O	O	O
receptor	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
specific	I-protein	O	O	O
monoclonal	I-protein	O	O	O
antibody	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
this	O	O	O	O
study	O	O	O	O
we	O	O	O	O
present	O	O	O	O
evidence	O	O	O	O
for	O	O	O	O
reactivity	O	O	O	O
of	O	O	O	O
pregnancy	O	B-cell_type	O	O
lymphocytes	B-cell_line	I-cell_type	O	O
,	O	O	O	O
but	O	O	O	O
not	O	O	O	O
nonpregnancy	O	B-cell_type	O	O
lymphocytes	B-cell_line	I-cell_type	O	O
,	O	O	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
progesterone	B-protein	O	O	O
receptor	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
specific	I-protein	O	O	O
monoclonal	I-protein	O	O	O
antibody	I-protein	O	O	O
mPRI	B-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Using	O	O	O	O
an	O	O	O	O
avidin	B-protein	O	O	O
-	B-protein	O	O	O
biotin	I-protein	O	O	O
peroxidase	I-protein	O	O	O
detection	O	O	O	O
system	O	O	O	O
,	O	O	O	O
we	O	O	O	O
found	O	O	O	O
a	O	O	O	O
nuclear	O	O	O	O
staining	O	O	O	O
in	O	O	O	O
14	O	O	O	O
.	O	O	O	O
6	O	O	O	O
+	O	O	O	O
/	O	O	O	O
-	O	O	O	O
3	O	O	O	O
.	O	O	O	O
7	O	O	O	O
%	O	O	O	O
(	O	O	O	O
mean	O	O	O	O
+	O	O	O	O
/	O	O	O	O
-	O	O	O	O
SEM	O	O	O	O
,	O	O	O	O
N	O	O	O	O
=	O	O	O	O
27	O	O	O	O
)	O	O	O	O
of	O	O	O	O
pregnancy	O	B-cell_type	O	O
lymphocytes	B-cell_line	I-cell_type	O	O
,	O	O	O	O
while	O	O	O	O
only	O	O	O	O
0	O	O	O	O
.	O	O	O	O
47	O	O	O	O
+	O	O	O	O
/	O	O	O	O
-	O	O	O	O
0	O	O	O	O
.	O	O	O	O
33	O	O	O	O
%	O	O	O	O
(	O	O	O	O
mean	O	O	O	O
+	O	O	O	O
/	O	O	O	O
-	O	O	O	O
SEM	O	O	O	O
,	O	O	O	O
N	O	O	O	O
=	O	O	O	O
15	O	O	O	O
)	O	O	O	O
of	O	O	O	O
nonpregnancy	O	B-cell_type	O	O
lymphocytes	B-cell_line	I-cell_type	O	O
reacted	O	O	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
antibody	O	O	O	O
.	O	O	O	O

To	O	O	O	O
characterize	O	O	O	O
the	O	O	O	O
receptor	O	O	O	O
-	O	O	O	O
bearing	O	O	O	O
subset	O	O	O	O
,	O	O	O	O
CD8	O	O	O	O
+	O	O	O	O
and	O	O	O	O
CD4	O	O	O	O
+	O	O	O	O
cells	O	O	O	O
were	O	O	O	O
depleted	O	O	O	O
by	O	O	O	O
complement	O	O	O	O
-	O	O	O	O
dependent	O	O	O	O
lysis	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Depletion	O	O	O	O
of	O	O	O	O
CD8	B-cell_line	O	O	O
+	I-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
was	O	O	O	O
accompanied	O	O	O	O
by	O	O	O	O
62	O	O	O	O
+	O	O	O	O
/	O	O	O	O
-	O	O	O	O
18	O	O	O	O
%	O	O	O	O
loss	O	O	O	O
of	O	O	O	O
progesterone	B-protein	B-cell_line	O	O
receptor	I-protein	I-cell_line	O	O
-	O	I-cell_line	O	O
bearing	O	I-cell_line	O	O
cells	O	I-cell_line	O	O
,	O	O	O	O
while	O	O	O	O
depletion	O	O	O	O
of	O	O	O	O
CD4	B-cell_line	O	O	O
+	I-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
resulted	O	O	O	O
in	O	O	O	O
a	O	O	O	O
twofold	O	O	O	O
increase	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
number	O	O	O	O
of	O	O	O	O
positively	O	O	O	O
staining	O	O	O	O
lymphocytes	B-cell_line	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
nonpregnancy	O	B-cell_line	O	O
lymphocytes	B-cell_line	I-cell_line	O	O
a	O	O	O	O
3	O	O	O	O
-	O	O	O	O
day	O	O	O	O
PHA	B-protein	O	O	O
treatment	O	O	O	O
,	O	O	O	O
as	O	O	O	O
well	O	O	O	O
as	O	O	O	O
allogeneic	O	O	O	O
stimulation	O	O	O	O
,	O	O	O	O
resulted	O	O	O	O
in	O	O	O	O
a	O	O	O	O
significant	O	O	O	O
increase	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
number	O	O	O	O
of	O	O	O	O
receptor	B-cell_type	O	O	O
-	I-cell_type	O	O	O
containing	I-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

These	O	O	O	O
results	O	O	O	O
suggest	O	O	O	O
that	O	O	O	O
pregnancy	O	O	O	O
,	O	O	O	O
but	O	O	O	O
not	O	O	O	O
nonpregnancy	O	O	O	O
,	O	O	O	O
lymphocytes	B-cell_line	O	O	O
contain	O	O	O	O
progesterone	B-protein	O	O	O
binding	I-protein	O	O	O
structures	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
that	O	O	O	O
these	O	O	O	O
are	O	O	O	O
inducible	O	O	O	O
by	O	O	O	O
mitogenic	O	O	O	O
or	O	O	O	O
alloantigenic	O	O	O	O
stimuli	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Activation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
human	B-cell_line	O	O	O
CD4	I-cell_line	O	O	O
T	I-cell_line	O	O	O
lymphocytes	I-cell_line	O	O	O
.	O	O	O	O

Interaction	O	O	O	O
of	O	O	O	O
fibronectin	B-protein	O	O	O
with	O	O	O	O
VLA	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
5	I-protein	O	O	O
receptor	I-protein	O	O	O
on	O	O	O	O
CD4	B-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
induces	O	O	O	O
the	O	O	O	O
AP	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
transcription	I-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Fibronectin	B-protein	O	O	O
synergized	O	O	O	O
with	O	O	O	O
anti	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
CD3	I-protein	O	O	O
antibody	I-protein	O	O	O
to	O	O	O	O
promote	O	O	O	O
CD4	B-protein	O	O	O
cell	O	O	O	O
proliferation	O	O	O	O
in	O	O	O	O
a	O	O	O	O
serum	O	O	O	O
-	O	O	O	O
free	O	O	O	O
culture	O	O	O	O
system	O	O	O	O
whereas	O	O	O	O
no	O	O	O	O
proliferation	O	O	O	O
was	O	O	O	O
observed	O	O	O	O
when	O	O	O	O
CD4	B-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
were	O	O	O	O
cultured	O	O	O	O
with	O	O	O	O
anti	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
CD3	I-protein	O	O	O
alone	O	O	O	O
or	O	O	O	O
fibronectin	B-protein	O	O	O
alone	O	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
addition	O	O	O	O
,	O	O	O	O
anti	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
CD29	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
integrin	B-protein	O	O	O
beta	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
as	O	O	O	O
well	O	O	O	O
as	O	O	O	O
anti	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
VLA	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
5	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
human	O	B-protein	O	O
fibronectin	B-protein	I-protein	O	O
receptor	O	I-protein	O	O
)	O	O	O	O
antibodies	O	O	O	O
blocked	O	O	O	O
this	O	O	O	O
CD4	B-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
activation	O	O	O	O
in	O	O	O	O
this	O	O	O	O
system	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Although	O	O	O	O
anti	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
CD3	I-protein	O	O	O
alone	O	O	O	O
or	O	O	O	O
fibronectin	B-protein	O	O	O
alone	O	O	O	O
cannot	O	O	O	O
induce	O	O	O	O
IL	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
message	O	O	O	O
by	O	O	O	O
CD4	B-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
combination	O	O	O	O
of	O	O	O	O
anti	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
CD3	I-protein	O	O	O
plus	O	O	O	O
fibronectin	B-protein	O	O	O
induced	O	O	O	O
IL	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
message	O	O	O	O
by	O	O	O	O
CD4	B-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
an	O	O	O	O
analysis	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
molecular	O	O	O	O
mechanism	O	O	O	O
by	O	O	O	O
which	O	O	O	O
IL	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
message	O	O	O	O
was	O	O	O	O
generated	O	O	O	O
,	O	O	O	O
we	O	O	O	O
showed	O	O	O	O
that	O	O	O	O
a	O	O	O	O
fibronectin	B-protein	O	O	O
-	O	O	O	O
VLA	O	O	O	O
-	O	O	O	O
5	O	O	O	O
fibronectin	B-protein	B-protein	O	O
receptor	O	I-protein	O	O
interaction	O	O	O	O
may	O	O	O	O
contribute	O	O	O	O
an	O	O	O	O
independent	O	O	O	O
signal	O	O	O	O
distinct	O	O	O	O
from	O	O	O	O
the	O	O	O	O
CD3	B-protein	O	O	O
pathway	O	O	O	O
of	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
by	O	O	O	O
the	O	O	O	O
induction	O	O	O	O
of	O	O	O	O
an	O	O	O	O
AP	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
transcriptional	I-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Thus	O	O	O	O
the	O	O	O	O
VLA	O	B-protein	O	O
-	O	I-protein	O	O
5	O	I-protein	O	O
fibronectin	B-protein	I-protein	O	O
receptor	O	I-protein	O	O
on	O	O	O	O
CD4	B-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
can	O	O	O	O
play	O	O	O	O
a	O	O	O	O
complementary	O	O	O	O
role	O	O	O	O
in	O	O	O	O
CD3	B-protein	O	O	O
-	O	O	O	O
TCR	B-protein	O	O	O
-	O	O	O	O
mediated	O	O	O	O
signal	O	O	O	O
transduction	O	O	O	O
through	O	O	O	O
its	O	O	O	O
interaction	O	O	O	O
with	O	O	O	O
fibronectin	B-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Glucocorticoid	B-protein	O	O	O
receptors	I-protein	O	O	O
on	O	O	O	O
mononuclear	B-cell_type	O	O	O
leukocytes	I-cell_type	O	O	O
in	O	O	O	O
Alzheimer	O	O	O	O
'	O	O	O	O
s	O	O	O	O
disease	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Several	O	O	O	O
lines	O	O	O	O
of	O	O	O	O
evidence	O	O	O	O
suggest	O	O	O	O
disturbances	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
hypothalamic	O	O	O	O
-	O	O	O	O
pituitary	O	O	O	O
-	O	O	O	O
adrenal	O	O	O	O
(	O	O	O	O
HPA	O	O	O	O
)	O	O	O	O
system	O	O	O	O
in	O	O	O	O
Alzheimer	O	O	O	O
'	O	O	O	O
s	O	O	O	O
disease	O	O	O	O
(	O	O	O	O
AD	O	O	O	O
)	O	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
an	O	O	O	O
exploration	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
potential	O	O	O	O
role	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
glucocorticoid	O	O	O	O
receptor	O	O	O	O
(	O	O	O	O
GR	O	O	O	O
)	O	O	O	O
in	O	O	O	O
AD	O	O	O	O
,	O	O	O	O
GR	O	O	O	O
density	O	O	O	O
and	O	O	O	O
affinity	O	O	O	O
were	O	O	O	O
assessed	O	O	O	O
on	O	O	O	O
mononuclear	B-cell_type	O	O	O
leukocytes	I-cell_type	O	O	O
of	O	O	O	O
12	O	O	O	O
AD	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
and	O	O	O	O
12	O	O	O	O
healthy	O	O	O	O
controls	O	O	O	O
.	O	O	O	O

GR	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
characteristics	O	O	O	O
did	O	O	O	O
not	O	O	O	O
differ	O	O	O	O
between	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
and	O	O	O	O
controls	O	O	O	O
or	O	O	O	O
between	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
subdivided	O	O	O	O
according	O	O	O	O
to	O	O	O	O
diagnosis	O	O	O	O
or	O	O	O	O
associated	O	O	O	O
clinical	O	O	O	O
features	O	O	O	O
.	O	O	O	O

These	O	O	O	O
data	O	O	O	O
suggest	O	O	O	O
that	O	O	O	O
the	O	O	O	O
abnormalities	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
HPA	O	O	O	O
system	O	O	O	O
in	O	O	O	O
AD	O	O	O	O
are	O	O	O	O
not	O	O	O	O
related	O	O	O	O
to	O	O	O	O
a	O	O	O	O
GR	B-protein	O	O	O
deficiency	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Oncogene	O	O	O	O
amplification	O	O	O	O
correlates	O	O	O	O
with	O	O	O	O
dense	O	O	O	O
lymphocyte	O	O	O	O
infiltration	O	O	O	O
in	O	O	O	O
human	O	O	O	O
breast	O	O	O	O
cancers	O	O	O	O
:	O	O	O	O
a	O	O	O	O
role	O	O	O	O
for	O	O	O	O
hematopoietic	B-protein	O	O	O
growth	I-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
release	O	O	O	O
by	O	O	O	O
tumor	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
?	O	O	O	O
.	O	O	O	O

One	O	O	O	O
hundred	O	O	O	O
six	O	O	O	O
primary	O	O	O	O
breast	O	O	O	O
cancer	O	O	O	O
samples	O	O	O	O
were	O	O	O	O
analysed	O	O	O	O
for	O	O	O	O
c	O	O	O	O
-	O	O	O	O
erbB2	O	O	O	O
,	O	O	O	O
int	O	O	O	O
-	O	O	O	O
2	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
c	O	O	O	O
-	O	O	O	O
myc	O	O	O	O
gene	O	O	O	O
amplification	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Surgically	O	O	O	O
confirmed	O	O	O	O
nodal	O	O	O	O
involvement	O	O	O	O
was	O	O	O	O
observed	O	O	O	O
in	O	O	O	O
42	O	O	O	O
%	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Level	O	O	O	O
of	O	O	O	O
gene	O	O	O	O
amplification	O	O	O	O
was	O	O	O	O
studied	O	O	O	O
by	O	O	O	O
Southern	O	O	O	O
and	O	O	O	O
/	O	O	O	O
or	O	O	O	O
slot	O	O	O	O
blot	O	O	O	O
techniques	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Amplified	O	O	O	O
c	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
erbB2	I-DNA	O	O	O
gene	I-DNA	O	O	O
sequences	I-DNA	O	O	O
were	O	O	O	O
present	O	O	O	O
in	O	O	O	O
21	O	O	O	O
.	O	O	O	O
5	O	O	O	O
%	O	O	O	O
of	O	O	O	O
all	O	O	O	O
samples	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Int	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
2	I-DNA	O	O	O
was	O	O	O	O
amplified	O	O	O	O
in	O	O	O	O
13	O	O	O	O
.	O	O	O	O
1	O	O	O	O
%	O	O	O	O
and	O	O	O	O
c	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
myc	I-DNA	O	O	O
was	O	O	O	O
amplified	O	O	O	O
in	O	O	O	O
10	O	O	O	O
.	O	O	O	O
3	O	O	O	O
%	O	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
a	O	O	O	O
non	O	O	O	O
-	O	O	O	O
parametric	O	O	O	O
test	O	O	O	O
(	O	O	O	O
Kruskal	O	O	O	O
-	O	O	O	O
Wallis	O	O	O	O
)	O	O	O	O
a	O	O	O	O
strong	O	O	O	O
negative	O	O	O	O
association	O	O	O	O
was	O	O	O	O
found	O	O	O	O
between	O	O	O	O
high	O	O	O	O
levels	O	O	O	O
of	O	O	O	O
c	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
erbB2	I-DNA	O	O	O
amplification	O	O	O	O
and	O	O	O	O
absence	O	O	O	O
of	O	O	O	O
estrogen	O	O	O	O
receptor	O	O	O	O
(	O	O	O	O
ER	O	O	O	O
)	O	O	O	O
(	O	O	O	O
P	O	O	O	O
=	O	O	O	O
.	O	O	O	O
0009	O	O	O	O
)	O	O	O	O
or	O	O	O	O
progesterone	B-protein	O	O	O
receptor	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
PR	B-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
(	O	O	O	O
P	O	O	O	O
=	O	O	O	O
.	O	O	O	O
011	O	O	O	O
)	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
.	O	O	O	O

No	O	O	O	O
correlations	O	O	O	O
were	O	O	O	O
found	O	O	O	O
between	O	O	O	O
all	O	O	O	O
or	O	O	O	O
high	O	O	O	O
levels	O	O	O	O
of	O	O	O	O
amplification	O	O	O	O
of	O	O	O	O
each	O	O	O	O
oncogene	O	O	O	O
separately	O	O	O	O
or	O	O	O	O
combined	O	O	O	O
with	O	O	O	O
T	O	O	O	O
,	O	O	O	O
N	O	O	O	O
,	O	O	O	O
grade	O	O	O	O
,	O	O	O	O
multifocality	O	O	O	O
of	O	O	O	O
tumor	O	O	O	O
,	O	O	O	O
or	O	O	O	O
associated	O	O	O	O
carcinoma	O	O	O	O
in	O	O	O	O
situ	O	O	O	O
.	O	O	O	O

There	O	O	O	O
was	O	O	O	O
a	O	O	O	O
trend	O	O	O	O
approaching	O	O	O	O
statistical	O	O	O	O
significance	O	O	O	O
for	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
with	O	O	O	O
c	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
erbB2	I-DNA	O	O	O
amplifications	O	O	O	O
to	O	O	O	O
have	O	O	O	O
positive	O	O	O	O
lymph	O	O	O	O
nodes	O	O	O	O
at	O	O	O	O
surgery	O	O	O	O
(	O	O	O	O
P	O	O	O	O
=	O	O	O	O
0	O	O	O	O
.	O	O	O	O
09	O	O	O	O
)	O	O	O	O
.	O	O	O	O

A	O	O	O	O
somewhat	O	O	O	O
surprising	O	O	O	O
finding	O	O	O	O
however	O	O	O	O
was	O	O	O	O
a	O	O	O	O
very	O	O	O	O
strong	O	O	O	O
association	O	O	O	O
between	O	O	O	O
oncogene	B-DNA	O	O	O
amplification	O	O	O	O
and	O	O	O	O
dense	O	O	O	O
lymphocyte	O	O	O	O
infiltration	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
tumor	O	O	O	O
(	O	O	O	O
P	O	O	O	O
=	O	O	O	O
.	O	O	O	O
05	O	O	O	O
)	O	O	O	O
.	O	O	O	O
This	O	O	O	O
correlation	O	O	O	O
is	O	O	O	O
even	O	O	O	O
stronger	O	O	O	O
when	O	O	O	O
only	O	O	O	O
high	O	O	O	O
levels	O	O	O	O
of	O	O	O	O
amplification	O	O	O	O
are	O	O	O	O
considered	O	O	O	O
,	O	O	O	O
either	O	O	O	O
for	O	O	O	O
each	O	O	O	O
oncogene	O	O	O	O
separately	O	O	O	O
(	O	O	O	O
P	O	O	O	O
=	O	O	O	O
.	O	O	O	O
0048	O	O	O	O
)	O	O	O	O
or	O	O	O	O
in	O	O	O	O
combination	O	O	O	O
(	O	O	O	O
P	O	O	O	O
=	O	O	O	O
.	O	O	O	O
0007	O	O	O	O
)	O	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
propose	O	O	O	O
that	O	O	O	O
malignant	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
cytokine	B-protein	O	O	O
production	O	O	O	O
may	O	O	O	O
help	O	O	O	O
explain	O	O	O	O
this	O	O	O	O
observation	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Suppression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
signals	O	O	O	O
required	O	O	O	O
for	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
transcription	O	B-protein	O	O
factor	O	I-protein	O	O
NF	B-protein	I-protein	O	O
-	I-protein	I-protein	O	O
kappa	I-protein	I-protein	O	O
B	I-protein	I-protein	O	O
in	O	O	O	O
cells	O	O	O	O
constitutively	O	O	O	O
expressing	O	O	O	O
the	O	O	O	O
HTLV	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
I	I-protein	O	O	O
Tax	I-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Transient	O	O	O	O
short	O	O	O	O
-	O	O	O	O
term	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
Tax	B-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
of	O	O	O	O
human	O	O	O	O
T	O	O	O	O
-	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
leukemia	O	O	O	O
virus	O	O	O	O
type	O	O	O	O
-	O	O	O	O
I	O	O	O	O
(	O	O	O	O
HTLV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
I	O	O	O	O
)	O	O	O	O
leads	O	O	O	O
to	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
pleiotropic	O	O	O	O
transcription	O	B-protein	O	O
factor	O	I-protein	O	O
NF	B-protein	I-protein	O	O
-	I-protein	I-protein	O	O
kappa	I-protein	I-protein	O	O
B	I-protein	I-protein	O	O
.	O	O	O	O

Consistent	O	O	O	O
with	O	O	O	O
findings	O	O	O	O
obtained	O	O	O	O
with	O	O	O	O
transient	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
assays	O	O	O	O
,	O	O	O	O
we	O	O	O	O
observed	O	O	O	O
marked	O	O	O	O
accumulation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
transcription	O	B-protein	O	O
factor	O	I-protein	O	O
NF	B-protein	I-protein	O	O
-	I-protein	I-protein	O	O
kappa	I-protein	I-protein	O	O
B	I-protein	I-protein	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
nucleus	O	O	O	O
of	O	O	O	O
Namalwa	B-cell_line	O	O	O
B	I-cell_line	O	O	O
lymphoid	I-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
,	O	O	O	O
which	O	O	O	O
constitutively	O	O	O	O
express	O	O	O	O
Tax	B-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
contrast	O	O	O	O
,	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
activity	O	O	O	O
was	O	O	O	O
not	O	O	O	O
detected	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
nucleus	O	O	O	O
following	O	O	O	O
long	O	O	O	O
-	O	O	O	O
term	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
Tax	B-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
Jurkat	B-cell_line	O	O	O
T	I-cell_line	O	O	O
lymphocytes	I-cell_line	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
ability	O	O	O	O
of	O	O	O	O
both	O	O	O	O
mitogens	O	O	O	O
and	O	O	O	O
cytokines	B-protein	O	O	O
to	O	O	O	O
activate	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
was	O	O	O	O
also	O	O	O	O
blocked	O	O	O	O
in	O	O	O	O
Jurkat	B-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
constitutively	O	O	O	O
expressing	O	O	O	O
Tax	B-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

However	O	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
other	O	O	O	O
mitogen	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
inducible	I-protein	O	O	O
transcription	I-protein	O	O	O
factors	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
such	O	O	O	O
as	O	O	O	O
Fos	B-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
Jun	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
was	O	O	O	O
unaffected	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Thus	O	O	O	O
,	O	O	O	O
depending	O	O	O	O
on	O	O	O	O
the	O	O	O	O
cellular	O	O	O	O
environment	O	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
short	O	O	O	O
-	O	O	O	O
and	O	O	O	O
long	O	O	O	O
-	O	O	O	O
term	O	O	O	O
effects	O	O	O	O
of	O	O	O	O
Tax	B-protein	O	O	O
expression	O	O	O	O
can	O	O	O	O
be	O	O	O	O
quite	O	O	O	O
different	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Consequently	O	O	O	O
,	O	O	O	O
one	O	O	O	O
function	O	O	O	O
of	O	O	O	O
Tax	B-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
cells	O	O	O	O
infected	O	O	O	O
with	O	O	O	O
HTLV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
I	O	O	O	O
might	O	O	O	O
involve	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
-	O	O	O	O
type	O	O	O	O
-	O	O	O	O
specific	O	O	O	O
suppression	O	O	O	O
,	O	O	O	O
as	O	O	O	O
opposed	O	O	O	O
to	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
,	O	O	O	O
of	O	O	O	O
distinct	O	O	O	O
signal	O	O	O	O
pathways	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
cells	O	O	O	O
lines	O	O	O	O
described	O	O	O	O
here	O	O	O	O
should	O	O	O	O
be	O	O	O	O
useful	O	O	O	O
for	O	O	O	O
the	O	O	O	O
delineation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
signaling	O	O	O	O
pathways	O	O	O	O
utilized	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
selective	O	O	O	O
regulation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
gene	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Interferon	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
gamma	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
the	O	O	O	O
sexual	O	O	O	O
dimorphism	O	O	O	O
of	O	O	O	O
autoimmunity	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
sexual	O	O	O	O
difference	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
incidence	O	O	O	O
of	O	O	O	O
autoimmune	O	O	O	O
diseases	O	O	O	O
has	O	O	O	O
remained	O	O	O	O
an	O	O	O	O
enigma	O	O	O	O
for	O	O	O	O
many	O	O	O	O
years	O	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
the	O	O	O	O
examination	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
induction	O	O	O	O
of	O	O	O	O
autoimmunity	O	O	O	O
in	O	O	O	O
transgenic	O	O	O	O
mice	O	O	O	O
,	O	O	O	O
evidence	O	O	O	O
has	O	O	O	O
been	O	O	O	O
obtained	O	O	O	O
further	O	O	O	O
implicating	O	O	O	O
the	O	O	O	O
lymphokine	B-protein	O	O	O
interferon	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
gamma	I-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
etiology	O	O	O	O
of	O	O	O	O
autoimmunity	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Sex	O	O	O	O
steroid	O	O	O	O
regulation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
production	O	O	O	O
of	O	O	O	O
this	O	O	O	O
molecule	O	O	O	O
,	O	O	O	O
as	O	O	O	O
well	O	O	O	O
as	O	O	O	O
other	O	O	O	O
cytokines	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
may	O	O	O	O
help	O	O	O	O
explain	O	O	O	O
the	O	O	O	O
gender	O	O	O	O
-	O	O	O	O
specific	O	O	O	O
differences	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
immune	O	O	O	O
system	O	O	O	O
,	O	O	O	O
including	O	O	O	O
autoimmunity	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Cloning	O	O	O	O
of	O	O	O	O
a	O	O	O	O
transcriptionally	O	B-protein	O	O
active	O	I-protein	O	O
human	B-protein	I-protein	O	O
TATA	I-protein	I-protein	O	O
binding	I-protein	I-protein	O	O
factor	I-protein	I-protein	O	O
.	O	O	O	O

Transcription	B-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
IID	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
TFIID	B-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
binds	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
TATA	B-DNA	O	O	O
box	I-DNA	O	O	O
promoter	I-DNA	O	O	O
element	I-DNA	O	O	O
and	O	O	O	O
regulates	O	O	O	O
the	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
most	O	O	O	O
eukaryotic	B-DNA	O	O	O
genes	I-DNA	O	O	O
transcribed	O	O	O	O
by	O	O	O	O
RNA	B-protein	O	O	O
polymerase	I-protein	O	O	O
II	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Complementary	B-DNA	O	O	O
DNA	I-DNA	O	O	O
(	O	O	O	O
cDNA	B-DNA	O	O	O
)	O	O	O	O
encoding	O	O	O	O
a	O	O	O	O
human	O	B-protein	O	O
TFIID	B-protein	I-protein	O	O
protein	O	I-protein	O	O
has	O	O	O	O
been	O	O	O	O
cloned	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
human	O	B-protein	O	O
TFIID	B-protein	I-protein	O	O
polypeptide	O	I-protein	O	O
has	O	O	O	O
339	O	O	O	O
amino	O	O	O	O
acids	O	O	O	O
and	O	O	O	O
a	O	O	O	O
molecular	O	O	O	O
size	O	O	O	O
of	O	O	O	O
37	O	O	O	O
,	O	O	O	O
745	O	O	O	O
daltons	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
carboxyl	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
terminal	I-protein	O	O	O
181	I-protein	O	O	O
amino	I-protein	O	O	O
acids	I-protein	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
human	O	B-protein	O	O
TFIID	B-protein	I-protein	O	O
protein	O	I-protein	O	O
shares	O	O	O	O
80	O	O	O	O
%	O	O	O	O
identity	O	O	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
TFIID	B-protein	O	O	O
protein	O	O	O	O
from	O	O	O	O
Saccharomyces	O	O	O	O
cerevisiae	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
amino	B-protein	O	O	O
terminus	I-protein	O	O	O
contains	O	O	O	O
an	O	O	O	O
unusual	O	O	O	O
repeat	O	O	O	O
of	O	O	O	O
38	O	O	O	O
consecutive	O	O	O	O
glutamine	O	O	O	O
residues	O	O	O	O
and	O	O	O	O
an	O	O	O	O
X	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
Thr	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
Pro	I-protein	O	O	O
repeat	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
DNA	B-DNA	O	O	O
in	O	O	O	O
reticulocyte	O	O	O	O
lysates	O	O	O	O
or	O	O	O	O
in	O	O	O	O
Escherichia	O	O	O	O
coli	O	O	O	O
yielded	O	O	O	O
a	O	O	O	O
protein	O	O	O	O
that	O	O	O	O
was	O	O	O	O
competent	O	O	O	O
for	O	O	O	O
both	O	O	O	O
DNA	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
and	O	O	O	O
transcription	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
.	O	O	O	O

A	O	O	O	O
novel	O	O	O	O
T	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
cell	I-protein	O	O	O
trans	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
activator	I-protein	O	O	O
that	O	O	O	O
recognizes	O	O	O	O
a	O	O	O	O
phorbol	B-DNA	O	O	O
ester	I-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
inducible	I-DNA	O	O	O
element	I-DNA	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
interleukin	B-protein	B-DNA	O	O
-	I-protein	I-DNA	O	O
2	I-protein	I-DNA	O	O
promoter	O	I-DNA	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
interleukin	B-protein	B-DNA	O	O
2	I-protein	I-DNA	O	O
(	O	I-DNA	O	O
IL	B-protein	I-DNA	O	O
-	I-protein	I-DNA	O	O
2	I-protein	I-DNA	O	O
)	O	I-DNA	O	O
gene	O	I-DNA	O	O
promoter	O	I-DNA	O	O
is	O	O	O	O
recognized	O	O	O	O
by	O	O	O	O
several	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
-	O	O	O	O
type	O	O	O	O
-	O	O	O	O
specific	O	O	O	O
and	O	O	O	O
ubiquitous	O	O	O	O
transcriptional	O	O	O	O
regulators	O	O	O	O
that	O	O	O	O
integrate	O	O	O	O
information	O	O	O	O
transmitted	O	O	O	O
by	O	O	O	O
various	O	O	O	O
signaling	O	O	O	O
systems	O	O	O	O
leading	O	O	O	O
to	O	O	O	O
IL	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
production	O	O	O	O
and	O	O	O	O
T	B-cell_type	O	O	O
-	I-cell_type	O	O	O
cell	I-cell_type	O	O	O
activation	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Using	O	O	O	O
a	O	O	O	O
combination	O	O	O	O
of	O	O	O	O
transfection	O	O	O	O
,	O	O	O	O
protein	O	O	O	O
-	O	O	O	O
DNA	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
in	O	O	O	O
vitro	O	O	O	O
transcription	O	O	O	O
methods	O	O	O	O
,	O	O	O	O
we	O	O	O	O
have	O	O	O	O
discovered	O	O	O	O
the	O	O	O	O
novel	B-protein	O	O	O
T	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
cell	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
specific	I-protein	O	O	O
transcriptional	I-protein	O	O	O
activator	I-protein	O	O	O
TCF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
for	O	O	O	O
T	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
Cell	I-protein	O	O	O
Factor	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
,	O	O	O	O
which	O	O	O	O
recognizes	O	O	O	O
a	O	O	O	O
T	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
cell	I-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
specific	I-DNA	O	O	O
response	I-DNA	O	O	O
element	I-DNA	O	O	O
(	O	O	O	O
TCE	B-DNA	O	O	O
)	O	O	O	O
located	O	O	O	O
within	O	O	O	O
the	O	O	O	O
IL	B-protein	B-DNA	O	O
-	I-protein	I-DNA	O	O
2	I-protein	I-DNA	O	O
promoter	O	I-DNA	O	O
.	O	O	O	O

Although	O	O	O	O
the	O	O	O	O
TCE	B-DNA	O	O	O
is	O	O	O	O
similar	O	O	O	O
in	O	O	O	O
sequence	O	O	O	O
to	O	O	O	O
a	O	O	O	O
consensus	O	O	B-DNA	O
NF	B-protein	B-DNA	I-DNA	O
kappa	I-protein	I-DNA	I-DNA	O
B	I-protein	I-DNA	I-DNA	O
site	O	I-DNA	I-DNA	O
,	O	O	O	O
several	O	O	O	O
criteria	O	O	O	O
indicate	O	O	O	O
that	O	O	O	O
TCF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
is	O	O	O	O
distinct	O	O	O	O
from	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

However	O	O	O	O
,	O	O	O	O
like	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
TCF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
activity	O	O	O	O
is	O	O	O	O
induced	O	O	O	O
by	O	O	O	O
phorbol	O	O	O	O
esters	O	O	O	O
and	O	O	O	O
other	O	O	O	O
T	O	O	O	O
-	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
activators	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Risk	O	O	O	O
factors	O	O	O	O
for	O	O	O	O
breast	O	O	O	O
recurrence	O	O	O	O
in	O	O	O	O
premenopausal	O	O	O	O
and	O	O	O	O
postmenopausal	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
with	O	O	O	O
ductal	O	O	O	O
cancers	O	O	O	O
treated	O	O	O	O
by	O	O	O	O
conservation	O	O	O	O
therapy	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Risk	O	O	O	O
factors	O	O	O	O
for	O	O	O	O
local	O	O	O	O
failure	O	O	O	O
were	O	O	O	O
evaluated	O	O	O	O
for	O	O	O	O
496	O	O	O	O
clinical	O	O	O	O
Stage	O	O	O	O
I	O	O	O	O
-	O	O	O	O
II	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
with	O	O	O	O
infiltrating	O	O	O	O
ductal	O	O	O	O
carcinomas	O	O	O	O
(	O	O	O	O
median	O	O	O	O
follow	O	O	O	O
-	O	O	O	O
up	O	O	O	O
,	O	O	O	O
71	O	O	O	O
months	O	O	O	O
)	O	O	O	O
treated	O	O	O	O
by	O	O	O	O
conservative	O	O	O	O
surgery	O	O	O	O
and	O	O	O	O
radiotherapy	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Monofactorial	O	O	O	O
analysis	O	O	O	O
identified	O	O	O	O
the	O	O	O	O
following	O	O	O	O
factors	O	O	O	O
to	O	O	O	O
be	O	O	O	O
correlated	O	O	O	O
with	O	O	O	O
increased	O	O	O	O
risk	O	O	O	O
:	O	O	O	O
moderate	O	O	O	O
/	O	O	O	O
marked	O	O	O	O
mononuclear	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
reaction	O	O	O	O
(	O	O	O	O
MCR	O	O	O	O
)	O	O	O	O
,	O	O	O	O
high	O	O	O	O
histologic	O	O	O	O
grade	O	O	O	O
(	O	O	O	O
G	O	O	O	O
)	O	O	O	O
,	O	O	O	O
extensive	O	O	O	O
intraductal	O	O	O	O
component	O	O	O	O
(	O	O	O	O
EIC	O	O	O	O
)	O	O	O	O
,	O	O	O	O
tumor	O	O	O	O
necrosis	O	O	O	O
,	O	O	O	O
macroscopic	O	O	O	O
multiplicity	O	O	O	O
,	O	O	O	O
estrogen	B-protein	O	O	O
receptor	I-protein	O	O	O
negativity	O	O	O	O
,	O	O	O	O
anatomic	O	O	O	O
tumor	O	O	O	O
size	O	O	O	O
,	O	O	O	O
age	O	O	O	O
younger	O	O	O	O
than	O	O	O	O
40	O	O	O	O
years	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
vascular	O	O	O	O
invasion	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Only	O	O	O	O
MCR	O	O	O	O
,	O	O	O	O
G	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
EIC	O	O	O	O
proved	O	O	O	O
significant	O	O	O	O
in	O	O	O	O
Cox	O	O	O	O
multivariate	O	O	O	O
analysis	O	O	O	O
.	O	O	O	O

These	O	O	O	O
risk	O	O	O	O
factors	O	O	O	O
were	O	O	O	O
highly	O	O	O	O
age	O	O	O	O
dependent	O	O	O	O
,	O	O	O	O
with	O	O	O	O
EIC	O	O	O	O
markedly	O	O	O	O
more	O	O	O	O
prevalent	O	O	O	O
in	O	O	O	O
women	O	O	O	O
younger	O	O	O	O
than	O	O	O	O
50	O	O	O	O
,	O	O	O	O
MCR	O	O	O	O
and	O	O	O	O
G	O	O	O	O
in	O	O	O	O
women	O	O	O	O
younger	O	O	O	O
than	O	O	O	O
40	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Separate	O	O	O	O
Cox	O	O	O	O
analysis	O	O	O	O
for	O	O	O	O
premenopausal	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
showed	O	O	O	O
that	O	O	O	O
MCR	O	O	O	O
/	O	O	O	O
EIC	O	O	O	O
determined	O	O	O	O
risk	O	O	O	O
independent	O	O	O	O
of	O	O	O	O
resection	O	O	O	O
margins	O	O	O	O
:	O	O	O	O
tumors	O	O	O	O
with	O	O	O	O
MCR	O	O	O	O
had	O	O	O	O
a	O	O	O	O
28	O	O	O	O
%	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
with	O	O	O	O
EIC	O	O	O	O
a	O	O	O	O
22	O	O	O	O
%	O	O	O	O
probability	O	O	O	O
of	O	O	O	O
recurring	O	O	O	O
locally	O	O	O	O
by	O	O	O	O
5	O	O	O	O
years	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Premenopausal	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
with	O	O	O	O
neither	O	O	O	O
risk	O	O	O	O
factor	O	O	O	O
had	O	O	O	O
a	O	O	O	O
very	O	O	O	O
low	O	O	O	O
failure	O	O	O	O
rate	O	O	O	O
(	O	O	O	O
2	O	O	O	O
.	O	O	O	O
6	O	O	O	O
%	O	O	O	O
at	O	O	O	O
5	O	O	O	O
years	O	O	O	O
)	O	O	O	O
,	O	O	O	O
regardless	O	O	O	O
of	O	O	O	O
age	O	O	O	O
.	O	O	O	O

For	O	O	O	O
postmenopausal	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
risk	O	O	O	O
of	O	O	O	O
breast	O	O	O	O
recurrence	O	O	O	O
was	O	O	O	O
determined	O	O	O	O
both	O	O	O	O
by	O	O	O	O
adequacy	O	O	O	O
of	O	O	O	O
resection	O	O	O	O
margins	O	O	O	O
and	O	O	O	O
grade	O	O	O	O
,	O	O	O	O
with	O	O	O	O
a	O	O	O	O
high	O	O	O	O
local	O	O	O	O
failure	O	O	O	O
rate	O	O	O	O
for	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
having	O	O	O	O
G3	O	O	O	O
tumors	O	O	O	O
with	O	O	O	O
positive	O	O	O	O
or	O	O	O	O
indeterminate	O	O	O	O
margins	O	O	O	O
(	O	O	O	O
31	O	O	O	O
%	O	O	O	O
at	O	O	O	O
5	O	O	O	O
years	O	O	O	O
)	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
authors	O	O	O	O
conclude	O	O	O	O
that	O	O	O	O
the	O	O	O	O
microscopic	O	O	O	O
examination	O	O	O	O
is	O	O	O	O
the	O	O	O	O
only	O	O	O	O
useful	O	O	O	O
tool	O	O	O	O
for	O	O	O	O
assessing	O	O	O	O
the	O	O	O	O
risk	O	O	O	O
of	O	O	O	O
local	O	O	O	O
failure	O	O	O	O
,	O	O	O	O
which	O	O	O	O
is	O	O	O	O
quite	O	O	O	O
low	O	O	O	O
for	O	O	O	O
the	O	O	O	O
majority	O	O	O	O
of	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
treated	O	O	O	O
with	O	O	O	O
breast	O	O	O	O
conservation	O	O	O	O
.	O	O	O	O

High	O	O	O	O
-	O	O	O	O
risk	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
can	O	O	O	O
be	O	O	O	O
recognized	O	O	O	O
morphologically	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
age	O	O	O	O
dependence	O	O	O	O
of	O	O	O	O
morphologic	O	O	O	O
risk	O	O	O	O
factors	O	O	O	O
appears	O	O	O	O
to	O	O	O	O
explain	O	O	O	O
the	O	O	O	O
high	O	O	O	O
local	O	O	O	O
failure	O	O	O	O
rate	O	O	O	O
seen	O	O	O	O
in	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
younger	O	O	O	O
than	O	O	O	O
40	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Tax	B-protein	O	O	O
-	O	O	O	O
independent	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
of	O	O	O	O
multiple	O	O	O	O
cellular	B-protein	O	O	O
factors	I-protein	O	O	O
to	O	O	O	O
Tax	B-protein	B-DNA	O	O
-	O	I-DNA	O	O
response	O	I-DNA	O	O
element	O	I-DNA	O	O
DNA	O	I-DNA	O	O
of	O	O	O	O
HTLV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
I	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
human	B-DNA	O	O	O
T	I-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
cell	I-DNA	O	O	O
leukemia	I-DNA	O	O	O
virus	I-DNA	O	O	O
type	I-DNA	O	O	O
I	I-DNA	O	O	O
(	I-DNA	O	O	O
HTLV	I-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
I	I-DNA	O	O	O
)	I-DNA	O	O	O
promoter	I-DNA	O	O	O
contains	O	O	O	O
three	O	O	O	O
copies	O	O	O	O
of	O	O	O	O
imperfect	O	O	O	O
repeats	O	O	O	O
of	O	O	O	O
a	O	O	O	O
21	O	O	O	O
-	O	O	O	O
base	O	O	O	O
pair	O	O	O	O
sequence	O	O	O	O
designated	O	O	O	O
here	O	O	O	O
as	O	O	O	O
TRE	B-DNA	O	O	O
(	O	O	O	O
Tax	B-protein	B-DNA	O	O
-	O	I-DNA	O	O
response	O	I-DNA	O	O
element	O	I-DNA	O	O
)	O	O	O	O
that	O	O	O	O
is	O	O	O	O
responsive	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
virally	B-protein	O	O	O
encoded	I-protein	O	O	O
transactivator	I-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
Tax	B-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
have	O	O	O	O
identified	O	O	O	O
and	O	O	O	O
separated	O	O	O	O
four	O	O	O	O
nuclear	B-protein	O	O	O
proteins	I-protein	O	O	O
from	O	O	O	O
C81	O	O	O	O
-	O	O	O	O
66	O	O	O	O
-	O	O	O	O
45	O	O	O	O
cells	O	O	O	O
,	O	O	O	O
an	O	O	O	O
HTLV	O	B-cell_line	O	O
-	O	I-cell_line	O	O
I	O	I-cell_line	O	O
immortalized	O	I-cell_line	O	O
Tax	B-protein	I-cell_line	O	O
-	O	I-cell_line	O	O
expressing	O	I-cell_line	O	O
human	O	I-cell_line	O	O
T	O	I-cell_line	O	O
-	O	I-cell_line	O	O
lymphocyte	O	I-cell_line	O	O
line	O	I-cell_line	O	O
(	O	O	O	O
Salahuddin	O	O	O	O
et	O	O	O	O
al	O	O	O	O
.	O	O	O	O
,	O	O	O	O
1983	O	O	O	O
)	O	O	O	O
,	O	O	O	O
that	O	O	O	O
interact	O	O	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
TRE	B-DNA	B-DNA	O	O
-	O	I-DNA	O	O
DNA	O	I-DNA	O	O
,	O	O	O	O
none	O	O	O	O
of	O	O	O	O
which	O	O	O	O
are	O	O	O	O
identical	O	O	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
Tax	B-protein	B-protein	O	O
-	O	I-protein	O	O
protein	O	I-protein	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
proteins	O	O	O	O
identified	O	O	O	O
have	O	O	O	O
molecular	O	O	O	O
weights	O	O	O	O
of	O	O	O	O
about	O	O	O	O
32	O	O	O	O
,	O	O	O	O
36	O	O	O	O
to	O	O	O	O
42	O	O	O	O
,	O	O	O	O
50	O	O	O	O
and	O	O	O	O
110	O	O	O	O
kD	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Four	O	O	O	O
different	O	O	O	O
methods	O	O	O	O
were	O	O	O	O
used	O	O	O	O
to	O	O	O	O
identify	O	O	O	O
the	O	O	O	O
proteins	O	O	O	O
.	O	O	O	O

First	O	O	O	O
,	O	O	O	O
from	O	O	O	O
different	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
lines	O	O	O	O
three	O	O	O	O
or	O	O	O	O
all	O	O	O	O
four	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
nuclear	B-protein	O	O	O
proteins	I-protein	O	O	O
were	O	O	O	O
specifically	O	O	O	O
cross	O	O	O	O
-	O	O	O	O
linked	O	O	O	O
by	O	O	O	O
UV	O	O	O	O
irradiation	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
radioactively	O	O	O	O
labeled	O	O	O	O
TRE	B-DNA	B-DNA	O	O
-	O	I-DNA	O	O
DNA	O	I-DNA	O	O
fragment	O	I-DNA	O	O
.	O	O	O	O

Second	O	O	O	O
,	O	O	O	O
TRE	B-DNA	B-protein	O	O
-	O	I-protein	O	O
DNA	O	I-protein	O	O
binding	O	I-protein	O	O
proteins	O	I-protein	O	O
sedimented	O	O	O	O
through	O	O	O	O
a	O	O	O	O
glycerol	O	O	O	O
density	O	O	O	O
gradient	O	O	O	O
at	O	O	O	O
rates	O	O	O	O
corresponding	O	O	O	O
to	O	O	O	O
proteins	O	O	O	O
of	O	O	O	O
native	O	O	O	O
molecular	O	O	O	O
weights	O	O	O	O
of	O	O	O	O
35	O	O	O	O
to	O	O	O	O
50	O	O	O	O
kD	O	O	O	O
and	O	O	O	O
110	O	O	O	O
kD	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Third	O	O	O	O
,	O	O	O	O
only	O	O	O	O
the	O	O	O	O
50	B-protein	O	O	O
kD	I-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
was	O	O	O	O
retained	O	O	O	O
on	O	O	O	O
a	O	O	O	O
biotinylated	O	O	O	O
DNA	O	O	O	O
-	O	O	O	O
streptavidin	O	O	O	O
matrix	O	O	O	O
when	O	O	O	O
the	O	O	O	O
DNA	O	O	O	O
fragment	O	O	O	O
contained	O	O	O	O
the	O	O	O	O
TRE	B-DNA	B-DNA	O	O
-	O	I-DNA	O	O
DNA	O	I-DNA	O	O
.	O	O	O	O

Fourth	O	O	O	O
,	O	O	O	O
extensive	O	O	O	O
purification	O	O	O	O
by	O	O	O	O
several	O	O	O	O
cycles	O	O	O	O
of	O	O	O	O
TRE	B-DNA	O	O	O
-	O	O	O	O
DNA	O	O	O	O
affinity	O	O	O	O
chromatography	O	O	O	O
resulted	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
32	O	O	O	O
,	O	O	O	O
36	O	O	O	O
to	O	O	O	O
42	O	O	O	O
and	O	O	O	O
110	O	O	O	O
kD	O	O	O	O
proteins	O	O	O	O
and	O	O	O	O
to	O	O	O	O
less	O	O	O	O
extent	O	O	O	O
the	O	O	O	O
50	B-protein	O	O	O
kD	I-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Two	O	O	O	O
abundant	O	O	O	O
proteins	O	O	O	O
of	O	O	O	O
75	O	O	O	O
and	O	O	O	O
80	O	O	O	O
kD	O	O	O	O
were	O	O	O	O
competed	O	O	O	O
out	O	O	O	O
by	O	O	O	O
poly	O	O	O	O
[	O	O	O	O
d	O	O	O	O
(	O	O	O	O
I	O	O	O	O
-	O	O	O	O
C	O	O	O	O
)	O	O	O	O
]	O	O	O	O
in	O	O	O	O
all	O	O	O	O
reactions	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
cAMP	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
response	I-DNA	O	O	O
element	I-DNA	O	O	O
CRE	B-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
TGACGTCA	O	O	O	O
,	O	O	O	O
present	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
21	B-DNA	O	O	O
base	I-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
pair	I-DNA	O	O	O
sequence	I-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
appears	O	O	O	O
to	O	O	O	O
be	O	O	O	O
essential	O	O	O	O
for	O	O	O	O
specific	O	O	O	O
protein	O	O	O	O
-	O	O	O	O
TRE	B-DNA	O	O	O
-	O	O	O	O
DNA	O	O	O	O
interactions	O	O	O	O
because	O	O	O	O
mutation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
two	O	O	O	O
G	O	O	O	O
'	O	O	O	O
s	O	O	O	O
destroys	O	O	O	O
this	O	O	O	O
complex	O	O	O	O
.	O	O	O	O

This	O	O	O	O
result	O	O	O	O
suggests	O	O	O	O
that	O	O	O	O
the	O	O	O	O
cAMP	B-protein	O	O	O
response	I-protein	O	O	O
element	I-protein	O	O	O
binding	I-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
CREB	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
is	O	O	O	O
involved	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
protein	O	B-protein	O	O
-	O	I-protein	O	O
TRE	B-DNA	I-protein	O	O
-	O	I-protein	O	O
DNA	O	I-protein	O	O
complex	O	I-protein	O	O
and	O	O	O	O
in	O	O	O	O
mediating	O	O	O	O
the	O	O	O	O
Tax	B-protein	O	O	O
response	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Two	O	O	O	O
distinct	O	O	O	O
transcription	B-protein	O	O	O
factors	I-protein	O	O	O
that	O	O	O	O
bind	O	O	O	O
the	O	O	O	O
immunoglobulin	B-DNA	O	O	O
enhancer	I-DNA	O	O	O
microE5	B-DNA	O	O	O
/	I-DNA	O	O	O
kappa	I-DNA	O	O	O
2	I-DNA	O	O	O
motif	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

Activity	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
immunoglobulin	O	O	O	O
heavy	O	O	O	O
and	O	O	O	O
kappa	O	O	O	O
light	O	O	O	O
chain	O	O	O	O
gene	O	O	O	O
enhancers	O	O	O	O
depends	O	O	O	O
on	O	O	O	O
a	O	O	O	O
complex	O	O	O	O
interplay	O	O	O	O
of	O	O	O	O
ubiquitous	B-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
developmentally	B-protein	O	O	O
regulated	I-protein	O	O	O
proteins	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Two	O	O	O	O
complementary	B-DNA	O	O	O
DNAs	I-DNA	O	O	O
were	O	O	O	O
isolated	O	O	O	O
that	O	O	O	O
encode	O	O	O	O
proteins	O	O	O	O
,	O	O	O	O
denoted	O	O	O	O
ITF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
ITF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
that	O	O	O	O
are	O	O	O	O
expressed	O	O	O	O
in	O	O	O	O
a	O	O	O	O
variety	O	O	O	O
of	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
types	O	O	O	O
and	O	O	O	O
bind	O	O	O	O
the	O	O	O	O
microE5	B-DNA	O	O	O
/	I-DNA	O	O	O
kappa	I-DNA	O	O	O
2	I-DNA	O	O	O
motif	I-DNA	O	O	O
found	O	O	O	O
in	O	O	O	O
both	O	O	O	O
heavy	O	O	O	O
and	O	O	O	O
kappa	O	O	O	O
light	O	O	O	O
chain	O	O	O	O
enhancers	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
complementary	B-DNA	O	O	O
DNAs	I-DNA	O	O	O
are	O	O	O	O
the	O	O	O	O
products	O	O	O	O
of	O	O	O	O
distinct	O	O	O	O
genes	O	O	O	O
,	O	O	O	O
yet	O	O	O	O
both	O	O	O	O
ITF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
ITF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
are	O	O	O	O
structurally	O	O	O	O
and	O	O	O	O
functionally	O	O	O	O
similar	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
two	O	O	O	O
proteins	O	O	O	O
interact	O	O	O	O
with	O	O	O	O
one	O	O	O	O
another	O	O	O	O
through	O	O	O	O
their	O	O	O	O
putative	O	O	O	O
helix	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
loop	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
helix	I-protein	O	O	O
motifs	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
each	O	O	O	O
possesses	O	O	O	O
a	O	O	O	O
distinct	O	O	O	O
domain	O	O	O	O
that	O	O	O	O
dictates	O	O	O	O
transcription	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Elevated	O	O	O	O
glucocorticoid	B-protein	O	O	O
receptor	I-protein	O	O	O
concentrations	O	O	O	O
before	O	O	O	O
and	O	O	O	O
after	O	O	O	O
glucocorticoid	O	O	O	O
therapy	O	O	O	O
in	O	O	O	O
peripheral	B-cell_type	O	O	O
mononuclear	I-cell_type	O	O	O
leukocytes	I-cell_type	O	O	O
of	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
with	O	O	O	O
atopic	O	O	O	O
dermatitis	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
number	O	O	O	O
and	O	O	O	O
affinity	O	O	O	O
of	O	O	O	O
glucocorticoid	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
sites	O	O	O	O
in	O	O	O	O
peripheral	B-cell_type	O	O	O
mononuclear	I-cell_type	O	O	O
leukocytes	I-cell_type	O	O	O
of	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
with	O	O	O	O
atopic	O	O	O	O
dermatitis	O	O	O	O
(	O	O	O	O
AD	O	O	O	O
)	O	O	O	O
and	O	O	O	O
healthy	O	O	O	O
controls	O	O	O	O
were	O	O	O	O
determined	O	O	O	O
under	O	O	O	O
baseline	O	O	O	O
conditions	O	O	O	O
and	O	O	O	O
after	O	O	O	O
a	O	O	O	O
defined	O	O	O	O
oral	O	O	O	O
glucocorticoid	O	O	O	O
treatment	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Patients	O	O	O	O
with	O	O	O	O
AD	O	O	O	O
(	O	O	O	O
n	O	O	O	O
=	O	O	O	O
15	O	O	O	O
)	O	O	O	O
exhibited	O	O	O	O
significantly	O	O	O	O
more	O	O	O	O
glucocorticoid	B-protein	O	O	O
receptors	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
GR	B-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
per	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
than	O	O	O	O
the	O	O	O	O
control	O	O	O	O
group	O	O	O	O
(	O	O	O	O
n	O	O	O	O
=	O	O	O	O
22	O	O	O	O
)	O	O	O	O
,	O	O	O	O
while	O	O	O	O
the	O	O	O	O
GR	B-protein	O	O	O
affinity	O	O	O	O
did	O	O	O	O
not	O	O	O	O
differ	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Methylprednisolone	O	O	O	O
treatment	O	O	O	O
resulted	O	O	O	O
in	O	O	O	O
a	O	O	O	O
significant	O	O	O	O
reduction	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
GR	B-protein	O	O	O
sites	O	O	O	O
per	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
steroid	O	O	O	O
-	O	O	O	O
treated	O	O	O	O
control	O	O	O	O
group	O	O	O	O
(	O	O	O	O
n	O	O	O	O
=	O	O	O	O
10	O	O	O	O
)	O	O	O	O
in	O	O	O	O
contrast	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
dissociation	O	O	O	O
constant	O	O	O	O
was	O	O	O	O
not	O	O	O	O
affected	O	O	O	O
by	O	O	O	O
methylprednisolone	O	O	O	O
treatment	O	O	O	O
in	O	O	O	O
either	O	O	O	O
group	O	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
view	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
therapeutic	O	O	O	O
efficiency	O	O	O	O
of	O	O	O	O
glucocorticoids	O	O	O	O
in	O	O	O	O
AD	O	O	O	O
and	O	O	O	O
findings	O	O	O	O
of	O	O	O	O
abnormal	O	O	O	O
cAMP	O	O	O	O
and	O	O	O	O
cAMP	O	O	O	O
-	O	O	O	O
phosphodiesterase	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
elevated	O	O	O	O
GR	B-protein	O	O	O
concentrations	O	O	O	O
in	O	O	O	O
AD	O	O	O	O
lend	O	O	O	O
support	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
hypothesis	O	O	O	O
of	O	O	O	O
a	O	O	O	O
compensatory	O	O	O	O
GR	B-protein	O	O	O
upregulation	O	O	O	O
due	O	O	O	O
to	O	O	O	O
an	O	O	O	O
insufficient	O	O	O	O
action	O	O	O	O
of	O	O	O	O
endogenous	O	O	O	O
cortisol	O	O	O	O
or	O	O	O	O
to	O	O	O	O
altered	O	O	O	O
cAMP	O	O	O	O
-	O	O	O	O
induced	O	O	O	O
GR	B-protein	O	O	O
expression	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
actions	O	O	O	O
of	O	O	O	O
cyclosporin	O	O	O	O
A	O	O	O	O
and	O	O	O	O
FK506	O	O	O	O
suggest	O	O	O	O
a	O	O	O	O
novel	O	O	O	O
step	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
T	B-cell_type	O	O	O
lymphocytes	I-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

Cyclosporin	O	O	O	O
A	O	O	O	O
and	O	O	O	O
FK506	O	O	O	O
are	O	O	O	O
immunosuppressive	O	O	O	O
compounds	O	O	O	O
that	O	O	O	O
have	O	O	O	O
similar	O	O	O	O
inhibitory	O	O	O	O
effects	O	O	O	O
on	O	O	O	O
the	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
several	O	O	O	O
lymphokines	B-protein	O	O	O
produced	O	O	O	O
by	O	O	O	O
T	B-cell_type	O	O	O
lymphocytes	I-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

Despite	O	O	O	O
their	O	O	O	O
similar	O	O	O	O
effects	O	O	O	O
the	O	O	O	O
drugs	O	O	O	O
bind	O	O	O	O
to	O	O	O	O
two	O	O	O	O
different	O	O	O	O
cytosolic	B-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
cyclophilin	B-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
FKBP	B-protein	O	O	O
respectively	O	O	O	O
,	O	O	O	O
which	O	O	O	O
raises	O	O	O	O
the	O	O	O	O
possibility	O	O	O	O
that	O	O	O	O
they	O	O	O	O
have	O	O	O	O
different	O	O	O	O
modes	O	O	O	O
of	O	O	O	O
action	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Using	O	O	O	O
constructs	O	O	O	O
in	O	O	O	O
which	O	O	O	O
mRNA	B-RNA	O	O	O
production	O	O	O	O
controlled	O	O	O	O
by	O	O	O	O
a	O	O	O	O
specific	O	O	O	O
transcription	B-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
could	O	O	O	O
be	O	O	O	O
readily	O	O	O	O
measured	O	O	O	O
we	O	O	O	O
found	O	O	O	O
that	O	O	O	O
both	O	O	O	O
cyclosporin	O	O	O	O
A	O	O	O	O
and	O	O	O	O
FK506	O	O	O	O
completely	O	O	O	O
inhibited	O	O	O	O
transcription	O	O	O	O
activated	O	O	O	O
by	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
AT	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
NFIL2	B-protein	O	O	O
A	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
NFIL2	B-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
partially	O	O	O	O
inhibited	O	O	O	O
transcription	O	O	O	O
activated	O	O	O	O
by	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Cyclosporin	O	O	O	O
A	O	O	O	O
and	O	O	O	O
FK506	O	O	O	O
inhibited	O	O	O	O
only	O	O	O	O
transcriptional	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
that	O	O	O	O
was	O	O	O	O
dependent	O	O	O	O
on	O	O	O	O
Ca2	O	O	O	O
+	O	O	O	O
mobilization	O	O	O	O
.	O	O	O	O

However	O	O	O	O
,	O	O	O	O
cyclosporin	O	O	O	O
A	O	O	O	O
and	O	O	O	O
FK506	O	O	O	O
did	O	O	O	O
not	O	O	O	O
inhibit	O	O	O	O
Ca2	O	O	O	O
+	O	O	O	O
mobilization	O	O	O	O
dependent	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
c	B-RNA	O	O	O
-	I-RNA	O	O	O
fos	I-RNA	O	O	O
mRNA	I-RNA	O	O	O
indicating	O	O	O	O
that	O	O	O	O
only	O	O	O	O
a	O	O	O	O
subset	O	O	O	O
of	O	O	O	O
signalling	O	O	O	O
pathways	O	O	O	O
regulated	O	O	O	O
by	O	O	O	O
Ca2	O	O	O	O
+	O	O	O	O
is	O	O	O	O
sensitive	O	O	O	O
to	O	O	O	O
these	O	O	O	O
drugs	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Furthermore	O	O	O	O
,	O	O	O	O
we	O	O	O	O
did	O	O	O	O
not	O	O	O	O
observe	O	O	O	O
any	O	O	O	O
qualitative	O	O	O	O
differences	O	O	O	O
between	O	O	O	O
the	O	O	O	O
effect	O	O	O	O
of	O	O	O	O
cyclosporin	O	O	O	O
A	O	O	O	O
and	O	O	O	O
FK506	O	O	O	O
on	O	O	O	O
six	O	O	O	O
different	O	O	O	O
transcription	B-protein	O	O	O
factors	I-protein	O	O	O
which	O	O	O	O
suggests	O	O	O	O
that	O	O	O	O
these	O	O	O	O
drugs	O	O	O	O
may	O	O	O	O
interfere	O	O	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
of	O	O	O	O
a	O	O	O	O
novel	O	O	O	O
Ca2	O	O	O	O
+	O	O	O	O
dependent	O	O	O	O
step	O	O	O	O
that	O	O	O	O
regulates	O	O	O	O
several	O	O	O	O
transcription	B-protein	O	O	O
factors	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
internal	O	O	O	O
methionine	O	O	O	O
codons	O	O	O	O
of	O	O	O	O
human	B-DNA	O	O	O
T	I-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
cell	I-DNA	O	O	O
leukemia	I-DNA	O	O	O
virus	I-DNA	O	O	O
type	I-DNA	O	O	O
II	I-DNA	O	O	O
rex	I-DNA	O	O	O
gene	I-DNA	O	O	O
are	O	O	O	O
not	O	O	O	O
required	O	O	O	O
for	O	O	O	O
p24rex	B-protein	O	O	O
production	O	O	O	O
or	O	O	O	O
virus	O	O	O	O
replication	O	O	O	O
and	O	O	O	O
transformation	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Human	O	O	O	O
T	O	O	O	O
-	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
leukemia	O	O	O	O
virus	O	O	O	O
types	O	O	O	O
I	O	O	O	O
(	O	O	O	O
HTLV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
I	O	O	O	O
)	O	O	O	O
and	O	O	O	O
II	O	O	O	O
(	O	O	O	O
HTLV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
II	O	O	O	O
)	O	O	O	O
have	O	O	O	O
two	O	O	O	O
nonstructural	B-DNA	O	O	O
trans	I-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
acting	I-DNA	O	O	O
regulatory	I-DNA	O	O	O
genes	I-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
tax	B-DNA	O	O	O
and	O	O	O	O
rex	B-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
located	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
3	B-DNA	O	O	O
'	I-DNA	O	O	O
region	I-DNA	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
viral	B-DNA	O	O	O
genome	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
tax	B-DNA	B-protein	O	O
gene	O	I-protein	O	O
product	O	I-protein	O	O
(	O	O	O	O
HTLV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
I	O	O	O	O
p40tax	B-DNA	O	O	O
and	O	O	O	O
HTLV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
II	O	O	O	O
p37tax	B-DNA	O	O	O
)	O	O	O	O
is	O	O	O	O
the	O	O	O	O
transcriptional	O	O	O	O
activator	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
viral	B-DNA	O	O	O
long	I-DNA	O	O	O
terminal	I-DNA	O	O	O
repeat	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
rex	B-DNA	O	O	O
gene	I-DNA	O	O	O
encodes	O	O	O	O
two	O	O	O	O
protein	O	O	O	O
products	O	O	O	O
,	O	O	O	O
p27rex	B-protein	O	O	O
/	B-protein	O	O	O
p21rex	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
p26rex	B-protein	O	O	O
/	B-protein	O	O	O
p24rex	I-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
HTLV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
I	O	O	O	O
and	O	O	O	O
HTLV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
II	O	O	O	O
,	O	O	O	O
respectively	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Rex	B-protein	O	O	O
acts	O	O	O	O
posttranscriptionally	O	O	O	O
to	O	O	O	O
facilitate	O	O	O	O
accumulation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
full	O	O	O	O
-	O	O	O	O
length	O	O	O	O
gag	B-protein	O	O	O
/	I-protein	O	O	O
pol	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
singly	O	O	O	O
spliced	O	O	O	O
env	B-RNA	O	O	O
mRNA	I-RNA	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
cytoplasm	O	O	O	O
of	O	O	O	O
HTLV	B-cell_type	O	O	O
-	I-cell_type	O	O	O
infected	I-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

Previous	O	O	O	O
studies	O	O	O	O
showed	O	O	O	O
that	O	O	O	O
the	O	O	O	O
first	O	O	O	O
ATG	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
rex	B-DNA	B-DNA	O	O
gene	O	I-DNA	O	O
is	O	O	O	O
critical	O	O	O	O
for	O	O	O	O
Rex	B-protein	O	O	O
production	O	O	O	O
and	O	O	O	O
function	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
importance	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
internal	O	O	O	O
ATGs	O	O	O	O
to	O	O	O	O
Rex	B-protein	O	O	O
function	O	O	O	O
is	O	O	O	O
not	O	O	O	O
known	O	O	O	O
.	O	O	O	O

However	O	O	O	O
,	O	O	O	O
in	O	O	O	O
vitro	O	O	O	O
mutagenesis	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
HTLV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
I	O	O	O	O
rex	B-DNA	B-DNA	O	O
gene	O	I-DNA	O	O
has	O	O	O	O
provided	O	O	O	O
indirect	O	O	O	O
evidence	O	O	O	O
which	O	O	O	O
suggests	O	O	O	O
that	O	O	O	O
p21rex	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
by	O	O	O	O
analogy	O	O	O	O
HTLV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
II	O	O	O	O
p24rex	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
results	O	O	O	O
from	O	O	O	O
initiation	O	O	O	O
at	O	O	O	O
an	O	O	O	O
internal	O	O	O	O
AUG	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
tax	B-DNA	B-RNA	O	O
/	B-DNA	I-RNA	O	O
rex	I-DNA	I-RNA	O	O
mRNA	O	I-RNA	O	O
.	O	O	O	O

By	O	O	O	O
using	O	O	O	O
an	O	O	O	O
infectious	O	O	O	O
molecular	O	O	O	O
clone	O	O	O	O
of	O	O	O	O
HTLV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
II	O	O	O	O
,	O	O	O	O
we	O	O	O	O
investigated	O	O	O	O
the	O	O	O	O
importance	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
internal	O	O	O	O
ATGs	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
rex	B-DNA	B-DNA	O	O
gene	O	I-DNA	O	O
on	O	O	O	O
Rex	B-protein	O	O	O
protein	O	O	O	O
production	O	O	O	O
and	O	O	O	O
function	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Our	O	O	O	O
results	O	O	O	O
indicate	O	O	O	O
that	O	O	O	O
p24rex	B-protein	O	O	O
of	O	O	O	O
HTLV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
II	O	O	O	O
is	O	O	O	O
not	O	O	O	O
initiated	O	O	O	O
at	O	O	O	O
an	O	O	O	O
internal	O	O	O	O
AUG	O	O	O	O
and	O	O	O	O
that	O	O	O	O
the	O	O	O	O
internal	O	O	O	O
methionine	O	O	O	O
codons	O	O	O	O
are	O	O	O	O
not	O	O	O	O
crucial	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
function	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
rex	B-DNA	O	O	O
gene	I-DNA	O	O	O
and	O	O	O	O
,	O	O	O	O
ultimately	O	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
transforming	O	O	O	O
properties	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
virus	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Astrocytes	B-cell_type	O	O	O
and	O	O	O	O
glioblastoma	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
express	O	O	O	O
novel	O	O	O	O
octamer	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
DNA	I-protein	O	O	O
binding	I-protein	O	O	O
proteins	I-protein	O	O	O
distinct	O	O	O	O
from	O	O	O	O
the	O	O	O	O
ubiquitous	B-protein	O	O	O
Oct	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
B	B-protein	O	O	O
cell	I-protein	O	O	O
type	I-protein	O	O	O
Oct	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
proteins	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
'	B-DNA	O	O	O
octamer	I-DNA	O	O	O
'	I-DNA	O	O	O
sequence	I-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
ATGCAAAT	O	O	O	O
or	O	O	O	O
its	O	O	O	O
complement	O	O	O	O
ATTTGCAT	O	O	O	O
,	O	O	O	O
is	O	O	O	O
a	O	O	O	O
key	O	O	O	O
element	O	O	O	O
for	O	O	O	O
the	O	O	O	O
transcriptional	O	O	O	O
regulation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
immunoglobulin	B-DNA	O	O	O
genes	I-DNA	O	O	O
in	O	O	O	O
B	B-cell_type	O	O	O
-	I-cell_type	O	O	O
lymphocytes	I-cell_type	O	O	O
as	O	O	O	O
well	O	O	O	O
as	O	O	O	O
a	O	O	O	O
number	O	O	O	O
of	O	O	O	O
housekeeping	B-DNA	O	O	O
genes	I-DNA	O	O	O
in	O	O	O	O
all	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
types	O	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
lymphocytes	B-cell_type	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
octamer	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
binding	I-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
Oct	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2A	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
variants	O	O	O	O
thereof	O	O	O	O
are	O	O	O	O
thought	O	O	O	O
to	O	O	O	O
contribute	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
B	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
cell	I-DNA	O	O	O
specific	I-DNA	O	O	O
gene	I-DNA	O	O	O
expression	O	O	O	O
,	O	O	O	O
while	O	O	O	O
the	O	O	O	O
ubiquitous	O	O	O	O
protein	O	O	O	O
Oct	O	O	O	O
-	O	O	O	O
1	O	O	O	O
seems	O	O	O	O
to	O	O	O	O
control	O	O	O	O
general	O	O	O	O
octamer	B-DNA	O	O	O
site	I-DNA	O	O	O
-	O	O	O	O
dependent	O	O	O	O
transcription	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Various	O	O	O	O
other	O	O	O	O
genes	O	O	O	O
,	O	O	O	O
for	O	O	O	O
example	O	O	O	O
interleukin	O	O	O	O
-	O	O	O	O
1	O	O	O	O
and	O	O	O	O
MHC	O	O	O	O
class	O	O	O	O
II	O	O	O	O
genes	O	O	O	O
,	O	O	O	O
contain	O	O	O	O
an	O	O	O	O
octamer	B-DNA	O	O	O
sequence	I-DNA	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
promoter	B-DNA	O	O	O
and	O	O	O	O
are	O	O	O	O
expressed	O	O	O	O
in	O	O	O	O
cells	O	O	O	O
of	O	O	O	O
both	O	O	O	O
the	O	O	O	O
immune	O	O	O	O
and	O	O	O	O
nervous	O	O	O	O
systems	O	O	O	O
.	O	O	O	O

This	O	O	O	O
prompted	O	O	O	O
us	O	O	O	O
to	O	O	O	O
analyze	O	O	O	O
the	O	O	O	O
octamer	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
binding	I-protein	O	O	O
proteins	I-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
latter	O	O	O	O
cells	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Using	O	O	O	O
the	O	O	O	O
electrophoretic	O	O	O	O
mobility	O	O	O	O
shift	O	O	O	O
assay	O	O	O	O
,	O	O	O	O
at	O	O	O	O
least	O	O	O	O
six	O	O	O	O
novel	O	O	O	O
octamer	B-protein	O	O	O
binding	I-protein	O	O	O
proteins	I-protein	O	O	O
were	O	O	O	O
detected	O	O	O	O
in	O	O	O	O
nuclear	O	O	O	O
extracts	O	O	O	O
of	O	O	O	O
cultured	B-cell_type	O	O	O
mouse	I-cell_type	O	O	O
astrocytes	I-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

These	O	O	O	O
proteins	O	O	O	O
are	O	O	O	O
differentially	O	O	O	O
expressed	O	O	O	O
in	O	O	O	O
human	O	O	O	O
glioblastoma	O	O	O	O
and	O	O	O	O
neuroblastoma	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
lines	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
nervous	B-protein	O	O	O
system	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
derived	I-protein	O	O	O
(	I-protein	O	O	O
N	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
Oct	I-protein	O	O	O
)	I-protein	O	O	O
proteins	I-protein	O	O	O
bound	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
octamer	B-DNA	O	O	O
DNA	I-DNA	O	O	O
sequence	I-DNA	O	O	O
in	O	O	O	O
a	O	O	O	O
manner	O	O	O	O
which	O	O	O	O
is	O	O	O	O
indistinguishable	O	O	O	O
from	O	O	O	O
the	O	O	O	O
Oct	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
Oct	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2A	I-protein	O	O	O
proteins	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
relationship	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
N	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
Oct	I-protein	O	O	O
proteins	I-protein	O	O	O
to	O	O	O	O
Oct	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
Oct	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2A	I-protein	O	O	O
was	O	O	O	O
analyzed	O	O	O	O
by	O	O	O	O
proteolytic	O	O	O	O
clipping	O	O	O	O
bandshift	O	O	O	O
assays	O	O	O	O
and	O	O	O	O
by	O	O	O	O
their	O	O	O	O
reactivity	O	O	O	O
towards	O	O	O	O
antisera	O	O	O	O
raised	O	O	O	O
against	O	O	O	O
recombinant	O	O	O	O
Oct	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
Oct	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2A	I-protein	O	O	O
proteins	O	O	O	O
.	O	O	O	O

On	O	O	O	O
the	O	O	O	O
basis	O	O	O	O
of	O	O	O	O
these	O	O	O	O
assays	O	O	O	O
,	O	O	O	O
all	O	O	O	O
N	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
Oct	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
factors	I-protein	O	O	O
were	O	O	O	O
found	O	O	O	O
to	O	O	O	O
be	O	O	O	O
distinct	O	O	O	O
from	O	O	O	O
the	O	O	O	O
ubiquitous	O	B-protein	O	O
Oct	B-protein	I-protein	O	O
-	I-protein	I-protein	O	O
1	I-protein	I-protein	O	O
and	O	O	O	O
the	O	O	O	O
lymphoid	O	B-protein	O	O
-	O	I-protein	O	O
specific	O	I-protein	O	O
Oct	B-protein	I-protein	O	O
-	I-protein	I-protein	O	O
2A	I-protein	I-protein	O	O
proteins	O	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
melanoma	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
that	O	O	O	O
contain	O	O	O	O
the	O	O	O	O
N	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
Oct	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
3	I-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
a	O	O	O	O
transfected	O	O	O	O
lymphocyte	O	O	O	O
-	O	O	O	O
specific	O	O	O	O
promoter	O	O	O	O
was	O	O	O	O
neither	O	O	O	O
activated	O	O	O	O
nor	O	O	O	O
was	O	O	O	O
it	O	O	O	O
repressed	O	O	O	O
upon	O	O	O	O
contransfection	O	O	O	O
with	O	O	O	O
an	O	O	O	O
Oct	B-protein	B-DNA	O	O
-	I-protein	I-DNA	O	O
2A	I-protein	I-DNA	O	O
expression	O	I-DNA	O	O
vector	O	I-DNA	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
therefore	O	O	O	O
speculate	O	O	O	O
that	O	O	O	O
N	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
Oct	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
3	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
other	O	O	O	O
N	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
Oct	I-protein	O	O	O
factors	I-protein	O	O	O
have	O	O	O	O
a	O	O	O	O
specific	O	O	O	O
role	O	O	O	O
in	O	O	O	O
gene	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
in	O	O	O	O
cells	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
nervous	O	O	O	O
system	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Detection	O	O	O	O
in	O	O	O	O
non	B-cell_type	O	O	O
-	I-cell_type	O	O	O
erythroid	I-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
of	O	O	O	O
a	O	O	O	O
factor	O	O	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
characteristics	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
erythroid	B-protein	O	O	O
cell	I-protein	O	O	O
transcription	I-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
EF1	B-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
erythroid	B-protein	O	O	O
transcription	I-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
erythroid	B-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
EF1	B-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
plays	O	O	O	O
a	O	O	O	O
critical	O	O	O	O
role	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
transcription	O	O	O	O
of	O	O	O	O
erythroid	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
specific	I-DNA	O	O	O
genes	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

Here	O	O	O	O
we	O	O	O	O
report	O	O	O	O
the	O	O	O	O
presence	O	O	O	O
of	O	O	O	O
a	O	O	O	O
factor	O	O	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
mobility	O	O	O	O
and	O	O	O	O
sequence	O	O	O	O
-	O	O	O	O
specific	O	O	O	O
DNA	O	O	O	O
-	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
characteristics	O	O	O	O
of	O	O	O	O
EF1	B-protein	O	O	O
at	O	O	O	O
low	O	O	O	O
abundance	O	O	O	O
in	O	O	O	O
a	O	O	O	O
wide	O	O	O	O
variety	O	O	O	O
of	O	O	O	O
non	B-cell_type	O	O	O
-	I-cell_type	O	O	O
erythroid	I-cell_type	O	O	O
cell	I-cell_type	O	O	O
types	I-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

This	O	O	O	O
is	O	O	O	O
the	O	O	O	O
first	O	O	O	O
report	O	O	O	O
of	O	O	O	O
an	O	O	O	O
EF1	B-protein	O	O	O
-	O	O	O	O
like	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
in	O	O	O	O
non	B-cell_type	O	O	O
-	I-cell_type	O	O	O
erythroid	I-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
and	O	O	O	O
indicates	O	O	O	O
that	O	O	O	O
this	O	O	O	O
factor	O	O	O	O
may	O	O	O	O
play	O	O	O	O
a	O	O	O	O
role	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
regulation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
genes	B-DNA	O	O	O
expressed	O	O	O	O
in	O	O	O	O
such	O	O	O	O
cells	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Protein	O	O	O	O
kinase	O	O	O	O
inhibitor	O	O	O	O
H	O	O	O	O
-	O	O	O	O
7	O	O	O	O
blocks	O	O	O	O
accumulation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
unspliced	B-RNA	O	O	O
mRNA	I-RNA	O	O	O
of	O	O	O	O
human	O	O	O	O
T	O	O	O	O
-	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
leukemia	O	O	O	O
virus	O	O	O	O
type	O	O	O	O
I	O	O	O	O
(	O	O	O	O
HTLV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
I	O	O	O	O
)	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Rex	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
post	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
transcriptional	I-protein	O	O	O
regulator	I-protein	O	O	O
of	O	O	O	O
human	O	O	O	O
T	O	O	O	O
-	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
leukemia	O	O	O	O
virus	O	O	O	O
type	O	O	O	O
I	O	O	O	O
(	O	O	O	O
HTLV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
I	O	O	O	O
)	O	O	O	O
,	O	O	O	O
is	O	O	O	O
known	O	O	O	O
to	O	O	O	O
induce	O	O	O	O
accumulation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
unspliced	B-RNA	O	O	O
viral	I-RNA	O	O	O
gag	I-RNA	O	O	O
-	I-RNA	O	O	O
pol	I-RNA	O	O	O
mRNA	I-RNA	O	O	O
.	O	O	O	O

Rex	B-protein	O	O	O
is	O	O	O	O
a	O	O	O	O
phosphoprotein	B-protein	O	O	O
found	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
nucleolus	O	O	O	O
,	O	O	O	O
whose	O	O	O	O
function	O	O	O	O
may	O	O	O	O
be	O	O	O	O
regulated	O	O	O	O
by	O	O	O	O
its	O	O	O	O
localization	O	O	O	O
and	O	O	O	O
phosphorylation	O	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
have	O	O	O	O
examined	O	O	O	O
the	O	O	O	O
role	O	O	O	O
of	O	O	O	O
phosphorylation	O	O	O	O
on	O	O	O	O
Rex	B-protein	O	O	O
function	O	O	O	O
by	O	O	O	O
using	O	O	O	O
a	O	O	O	O
protein	O	O	O	O
kinase	O	O	O	O
inhibitor	O	O	O	O
,	O	O	O	O
H	O	O	O	O
-	O	O	O	O
7	O	O	O	O
[	O	O	O	O
1	O	O	O	O
-	O	O	O	O
(	O	O	O	O
5	O	O	O	O
-	O	O	O	O
isoquinolinyl	O	O	O	O
-	O	O	O	O
sulfonyl	O	O	O	O
)	O	O	O	O
-	O	O	O	O
2	O	O	O	O
-	O	O	O	O
methylpiperazine	O	O	O	O
]	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Treatment	O	O	O	O
of	O	O	O	O
an	O	O	O	O
HTLV	B-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
I	I-cell_line	O	O	O
infected	I-cell_line	O	O	O
human	I-cell_line	O	O	O
T	I-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
line	I-cell_line	O	O	O
with	O	O	O	O
H	O	O	O	O
-	O	O	O	O
7	O	O	O	O
blocked	O	O	O	O
specifically	O	O	O	O
accumulation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
unspliced	B-RNA	O	O	O
gag	I-RNA	O	O	O
-	I-RNA	O	O	O
pol	I-RNA	O	O	O
mRNA	I-RNA	O	O	O
,	O	O	O	O
resulting	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
decreased	O	O	O	O
Gag	B-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
synthesis	O	O	O	O
that	O	O	O	O
corresponds	O	O	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
decreased	O	O	O	O
in	O	O	O	O
vivo	O	O	O	O
phosphorylation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
Rex	B-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
contrast	O	O	O	O
,	O	O	O	O
other	O	O	O	O
viral	O	O	O	O
and	O	O	O	O
cellular	O	O	O	O
products	O	O	O	O
have	O	O	O	O
not	O	O	O	O
been	O	O	O	O
influenced	O	O	O	O
by	O	O	O	O
the	O	O	O	O
level	O	O	O	O
of	O	O	O	O
H	O	O	O	O
-	O	O	O	O
7	O	O	O	O
used	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Therefore	O	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
phosphorylation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
Rex	B-protein	O	O	O
is	O	O	O	O
required	O	O	O	O
for	O	O	O	O
the	O	O	O	O
viral	O	O	O	O
RNA	O	O	O	O
partition	O	O	O	O
of	O	O	O	O
HTLV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
I	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Increased	O	O	O	O
glucocorticoid	O	O	O	O
responsiveness	O	O	O	O
of	O	O	O	O
CD4	B-cell_line	O	O	O
+	I-cell_line	O	O	O
T	I-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
clonal	I-cell_line	O	O	O
lines	I-cell_line	O	O	O
grown	O	O	O	O
in	O	O	O	O
serum	O	O	O	O
-	O	O	O	O
free	O	O	O	O
media	O	O	O	O
.	O	O	O	O

CEM	B-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
C7	I-cell_line	O	O	O
,	O	O	O	O
a	O	O	O	O
human	B-cell_line	O	O	O
leukemic	I-cell_line	O	O	O
CD4	I-cell_line	O	O	O
+	I-cell_line	O	O	O
T	I-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
lymphocyte	I-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
line	I-cell_line	O	O	O
and	O	O	O	O
three	O	O	O	O
of	O	O	O	O
its	O	O	O	O
subclones	O	O	O	O
,	O	O	O	O
CEM	B-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
4R4	I-cell_line	O	O	O
,	O	O	O	O
CEM	B-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
3R43	I-cell_line	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
ICR	B-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
27	I-cell_line	O	O	O
,	O	O	O	O
previously	O	O	O	O
cultured	O	O	O	O
in	O	O	O	O
a	O	O	O	O
medium	O	O	O	O
supplemented	O	O	O	O
with	O	O	O	O
5	O	O	O	O
to	O	O	O	O
10	O	O	O	O
%	O	O	O	O
fetal	O	O	O	O
bovine	O	O	O	O
serum	O	O	O	O
,	O	O	O	O
have	O	O	O	O
been	O	O	O	O
adapted	O	O	O	O
to	O	O	O	O
serum	O	O	O	O
-	O	O	O	O
free	O	O	O	O
media	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
best	O	O	O	O
medium	O	O	O	O
of	O	O	O	O
those	O	O	O	O
tested	O	O	O	O
was	O	O	O	O
RPMI	O	O	O	O
1640	O	O	O	O
supplemented	O	O	O	O
with	O	O	O	O
5	O	O	O	O
micrograms	O	O	O	O
/	O	O	O	O
ml	O	O	O	O
each	O	O	O	O
transferrin	B-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
insulin	B-protein	O	O	O
+	O	O	O	O
5	O	O	O	O
ng	O	O	O	O
/	O	O	O	O
ml	O	O	O	O
sodium	O	O	O	O
selenite	O	O	O	O
+	O	O	O	O
/	O	O	O	O
-	O	O	O	O
0	O	O	O	O
.	O	O	O	O
1	O	O	O	O
%	O	O	O	O
bovine	B-protein	O	O	O
serum	I-protein	O	O	O
albumin	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

While	O	O	O	O
growing	O	O	O	O
either	O	O	O	O
with	O	O	O	O
or	O	O	O	O
without	O	O	O	O
albumin	O	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
several	O	O	O	O
clonal	B-cell_line	O	O	O
lines	I-cell_line	O	O	O
of	O	O	O	O
CEM	B-cell_line	O	O	O
cells	O	O	O	O
displayed	O	O	O	O
growth	O	O	O	O
similar	O	O	O	O
to	O	O	O	O
serum	O	O	O	O
-	O	O	O	O
supplemented	O	O	O	O
cultures	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Cell	O	O	O	O
proliferation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
CEM	B-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
C7	I-cell_line	O	O	O
cells	O	O	O	O
cultured	O	O	O	O
in	O	O	O	O
both	O	O	O	O
serum	O	O	O	O
-	O	O	O	O
free	O	O	O	O
media	O	O	O	O
has	O	O	O	O
been	O	O	O	O
sustained	O	O	O	O
for	O	O	O	O
3	O	O	O	O
mo	O	O	O	O
.	O	O	O	O

with	O	O	O	O
culture	O	O	O	O
doubling	O	O	O	O
times	O	O	O	O
of	O	O	O	O
about	O	O	O	O
25	O	O	O	O
h	O	O	O	O
for	O	O	O	O
both	O	O	O	O
serum	O	O	O	O
-	O	O	O	O
supplemented	O	O	O	O
and	O	O	O	O
serum	O	O	O	O
-	O	O	O	O
free	O	O	O	O
cultures	O	O	O	O
(	O	O	O	O
viability	O	O	O	O
greater	O	O	O	O
than	O	O	O	O
or	O	O	O	O
equal	O	O	O	O
to	O	O	O	O
90	O	O	O	O
%	O	O	O	O
)	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Cell	O	O	O	O
morphology	O	O	O	O
remained	O	O	O	O
essentially	O	O	O	O
the	O	O	O	O
same	O	O	O	O
in	O	O	O	O
serum	O	O	O	O
-	O	O	O	O
free	O	O	O	O
or	O	O	O	O
serum	O	O	O	O
containing	O	O	O	O
media	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
CD4	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
a	O	O	O	O
marker	O	O	O	O
for	O	O	O	O
T	B-cell_type	O	O	O
-	I-cell_type	O	O	O
derived	I-cell_type	O	O	O
lymphoid	I-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
,	O	O	O	O
was	O	O	O	O
not	O	O	O	O
significantly	O	O	O	O
different	O	O	O	O
in	O	O	O	O
serum	O	O	O	O
-	O	O	O	O
free	O	O	O	O
medium	O	O	O	O
.	O	O	O	O

When	O	O	O	O
grown	O	O	O	O
in	O	O	O	O
serum	O	O	O	O
-	O	O	O	O
free	O	O	O	O
medium	O	O	O	O
,	O	O	O	O
CEM	B-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
C7	I-cell_line	O	O	O
cells	O	O	O	O
exhibited	O	O	O	O
increased	O	O	O	O
steroid	O	O	O	O
responsiveness	O	O	O	O
as	O	O	O	O
evidenced	O	O	O	O
by	O	O	O	O
increased	O	O	O	O
glucocorticoid	B-protein	O	O	O
receptor	I-protein	O	O	O
binding	O	O	O	O
sites	O	O	O	O
,	O	O	O	O
increased	O	O	O	O
induction	O	O	O	O
of	O	O	O	O
glutamine	B-protein	O	O	O
synthetase	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
lysis	O	O	O	O
at	O	O	O	O
lower	O	O	O	O
concentrations	O	O	O	O
of	O	O	O	O
steroid	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Receptor	O	O	O	O
mutant	O	O	O	O
subclones	O	O	O	O
of	O	O	O	O
CEM	B-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
C7	I-cell_line	O	O	O
,	O	O	O	O
which	O	O	O	O
are	O	O	O	O
proven	O	O	O	O
to	O	O	O	O
be	O	O	O	O
completely	O	O	O	O
unresponsive	O	O	O	O
to	O	O	O	O
micromolar	O	O	O	O
concentrations	O	O	O	O
of	O	O	O	O
dexamethasone	O	O	O	O
when	O	O	O	O
grown	O	O	O	O
in	O	O	O	O
serum	O	O	O	O
-	O	O	O	O
supplemented	O	O	O	O
medium	O	O	O	O
,	O	O	O	O
become	O	O	O	O
partially	O	O	O	O
sensitive	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
hormone	O	O	O	O
after	O	O	O	O
growth	O	O	O	O
in	O	O	O	O
defined	O	O	O	O
medium	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
increased	O	O	O	O
sensitivity	O	O	O	O
of	O	O	O	O
CEM	B-cell_line	B-cell_line	O	O
-	I-cell_line	I-cell_line	O	O
C7	I-cell_line	I-cell_line	O	O
cells	O	I-cell_line	O	O
and	O	O	O	O
its	O	O	O	O
subclones	O	O	O	O
to	O	O	O	O
dexamethasone	O	O	O	O
in	O	O	O	O
serum	O	O	O	O
-	O	O	O	O
free	O	O	O	O
medium	O	O	O	O
returned	O	O	O	O
to	O	O	O	O
previous	O	O	O	O
levels	O	O	O	O
when	O	O	O	O
these	O	O	O	O
cells	O	O	O	O
were	O	O	O	O
recultured	O	O	O	O
in	O	O	O	O
serum	O	O	O	O
-	O	O	O	O
containing	O	O	O	O
medium	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Our	O	O	O	O
results	O	O	O	O
suggest	O	O	O	O
that	O	O	O	O
substances	O	O	O	O
in	O	O	O	O
serum	O	O	O	O
influence	O	O	O	O
steroid	O	O	O	O
effects	O	O	O	O
on	O	O	O	O
these	O	O	O	O
cells	O	O	O	O
and	O	O	O	O
that	O	O	O	O
the	O	O	O	O
molecular	O	O	O	O
details	O	O	O	O
of	O	O	O	O
glucocorticoid	O	O	O	O
hormone	O	O	O	O
action	O	O	O	O
may	O	O	O	O
be	O	O	O	O
pursued	O	O	O	O
more	O	O	O	O
precisely	O	O	O	O
in	O	O	O	O
a	O	O	O	O
clearly	O	O	O	O
defined	O	O	O	O
culture	O	O	O	O
medium	O	O	O	O
.	O	O	O	O

[	O	O	O	O
Glucocorticoid	B-protein	O	O	O
receptors	I-protein	O	O	O
on	O	O	O	O
human	O	O	O	O
peripheral	O	O	O	O
mononuclear	O	O	O	O
and	O	O	O	O
polymorphonuclear	O	O	O	O
leucocytes	O	O	O	O
:	O	O	O	O
changes	O	O	O	O
in	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
with	O	O	O	O
yang	O	O	O	O
-	O	O	O	O
deficiency	O	O	O	O
]	O	O	O	O
.	O	O	O	O

It	O	O	O	O
was	O	O	O	O
found	O	O	O	O
that	O	O	O	O
,	O	O	O	O
in	O	O	O	O
former	O	O	O	O
works	O	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
glucocorticoid	B-protein	O	O	O
receptors	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
GCR	B-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
on	O	O	O	O
peripheral	B-cell_type	O	O	O
mixed	I-cell_type	O	O	O
leucocytes	I-cell_type	O	O	O
in	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
with	O	O	O	O
Yang	O	O	O	O
-	O	O	O	O
deficiency	O	O	O	O
were	O	O	O	O
decreased	O	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
this	O	O	O	O
work	O	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
mixed	B-cell_type	O	O	O
leucocytes	I-cell_type	O	O	O
were	O	O	O	O
further	O	O	O	O
separated	O	O	O	O
into	O	O	O	O
mononuclear	O	O	O	O
(	O	O	O	O
MNL	O	O	O	O
)	O	O	O	O
and	O	O	O	O
polymorphonuclear	O	O	O	O
(	O	O	O	O
PML	O	O	O	O
)	O	O	O	O
leucocytes	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
GCR	B-protein	O	O	O
were	O	O	O	O
determined	O	O	O	O
in	O	O	O	O
each	O	O	O	O
part	O	O	O	O
of	O	O	O	O
leucocytes	B-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

GCR	B-protein	O	O	O
on	O	O	O	O
MNL	B-cell_type	O	O	O
and	O	O	O	O
PML	B-cell_type	O	O	O
in	O	O	O	O
6	O	O	O	O
Yang	O	O	O	O
deficient	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
were	O	O	O	O
3473	O	O	O	O
+	O	O	O	O
/	O	O	O	O
-	O	O	O	O
413	O	O	O	O
and	O	O	O	O
4433	O	O	O	O
+	O	O	O	O
/	O	O	O	O
-	O	O	O	O
651	O	O	O	O
sites	O	O	O	O
/	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
respectively	O	O	O	O
,	O	O	O	O
statistically	O	O	O	O
significant	O	O	O	O
from	O	O	O	O
the	O	O	O	O
normal	O	O	O	O
control	O	O	O	O
group	O	O	O	O
(	O	O	O	O
4462	O	O	O	O
+	O	O	O	O
/	O	O	O	O
-	O	O	O	O
962	O	O	O	O
and	O	O	O	O
5622	O	O	O	O
+	O	O	O	O
/	O	O	O	O
-	O	O	O	O
782	O	O	O	O
sites	O	O	O	O
/	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
respectively	O	O	O	O
,	O	O	O	O
P	O	O	O	O
less	O	O	O	O
than	O	O	O	O
0	O	O	O	O
.	O	O	O	O
05	O	O	O	O
)	O	O	O	O
.	O	O	O	O

GCR	B-protein	O	O	O
on	O	O	O	O
MNL	B-cell_type	O	O	O
,	O	O	O	O
PML	B-cell_type	O	O	O
and	O	O	O	O
mixed	B-cell_type	O	O	O
leucocytes	I-cell_type	O	O	O
in	O	O	O	O
5	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
were	O	O	O	O
determined	O	O	O	O
simultaneously	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
all	O	O	O	O
lowered	O	O	O	O
from	O	O	O	O
the	O	O	O	O
control	O	O	O	O
group	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
results	O	O	O	O
were	O	O	O	O
3369	O	O	O	O
+	O	O	O	O
/	O	O	O	O
-	O	O	O	O
370	O	O	O	O
,	O	O	O	O
4986	O	O	O	O
+	O	O	O	O
/	O	O	O	O
-	O	O	O	O
419	O	O	O	O
and	O	O	O	O
4524	O	O	O	O
+	O	O	O	O
/	O	O	O	O
-	O	O	O	O
852	O	O	O	O
sites	O	O	O	O
/	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
respectively	O	O	O	O
,	O	O	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
lowest	O	O	O	O
GCR	B-protein	O	O	O
on	O	O	O	O
MNL	B-cell_type	O	O	O
and	O	O	O	O
highest	O	O	O	O
on	O	O	O	O
PML	B-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
ubiquitous	B-protein	O	O	O
octamer	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
binding	I-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
s	O	O	O	O
)	O	O	O	O
is	O	O	O	O
sufficient	O	O	O	O
for	O	O	O	O
transcription	O	O	O	O
of	O	O	O	O
immunoglobulin	B-DNA	O	O	O
genes	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

All	O	O	O	O
immunoglobulin	B-DNA	O	O	O
genes	I-DNA	O	O	O
contain	O	O	O	O
a	O	O	O	O
conserved	O	O	O	O
octanucleotide	B-DNA	O	O	O
promoter	I-DNA	O	O	O
element	I-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
ATGCAAAT	O	O	O	O
,	O	O	O	O
which	O	O	O	O
has	O	O	O	O
been	O	O	O	O
shown	O	O	O	O
to	O	O	O	O
be	O	O	O	O
required	O	O	O	O
for	O	O	O	O
their	O	O	O	O
normal	O	O	O	O
B	O	O	O	O
-	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
-	O	O	O	O
specific	O	O	O	O
transcription	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Proteins	O	O	O	O
that	O	O	O	O
bind	O	O	O	O
this	O	O	O	O
octamer	O	O	O	O
have	O	O	O	O
been	O	O	O	O
purified	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
cDNAs	B-DNA	O	O	O
encoding	O	O	O	O
octamer	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
binding	I-protein	O	O	O
proteins	I-protein	O	O	O
have	O	O	O	O
been	O	O	O	O
cloned	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Some	O	O	O	O
of	O	O	O	O
these	O	O	O	O
proteins	O	O	O	O
(	O	O	O	O
referred	O	O	O	O
to	O	O	O	O
as	O	O	O	O
OTF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
are	O	O	O	O
lymphoid	O	O	O	O
specific	O	O	O	O
,	O	O	O	O
whereas	O	O	O	O
at	O	O	O	O
least	O	O	O	O
one	O	O	O	O
other	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
possibly	O	O	O	O
more	O	O	O	O
(	O	O	O	O
referred	O	O	O	O
to	O	O	O	O
as	O	O	O	O
OTF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
,	O	O	O	O
is	O	O	O	O
found	O	O	O	O
ubiquitously	O	O	O	O
in	O	O	O	O
all	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
types	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
exact	O	O	O	O
role	O	O	O	O
of	O	O	O	O
these	O	O	O	O
different	O	O	O	O
proteins	O	O	O	O
in	O	O	O	O
directing	O	O	O	O
the	O	O	O	O
tissue	O	O	O	O
-	O	O	O	O
specific	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
immunoglobulin	B-DNA	O	O	O
genes	I-DNA	O	O	O
is	O	O	O	O
unclear	O	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
have	O	O	O	O
identified	O	O	O	O
two	O	O	O	O
human	B-cell_line	O	O	O
pre	I-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
B	I-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
lines	I-cell_line	O	O	O
that	O	O	O	O
contain	O	O	O	O
extremely	O	O	O	O
low	O	O	O	O
levels	O	O	O	O
of	O	O	O	O
OTF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
yet	O	O	O	O
still	O	O	O	O
express	O	O	O	O
high	O	O	O	O
levels	O	O	O	O
of	O	O	O	O
steady	O	B-RNA	O	O
-	O	I-RNA	O	O
state	O	I-RNA	O	O
immunoglobulin	B-protein	I-RNA	O	O
heavy	I-protein	I-RNA	O	O
-	I-protein	I-RNA	O	O
chain	I-protein	I-RNA	O	O
mRNA	O	I-RNA	O	O
in	O	O	O	O
vivo	O	O	O	O
and	O	O	O	O
efficiently	O	O	O	O
transcribe	O	O	O	O
an	O	O	O	O
immunoglobulin	B-DNA	O	O	O
gene	I-DNA	O	O	O
in	O	O	O	O
vitro	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Addition	O	O	O	O
of	O	O	O	O
a	O	O	O	O
highly	O	O	O	O
enriched	O	O	O	O
preparation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
OTF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
made	O	O	O	O
from	O	O	O	O
one	O	O	O	O
of	O	O	O	O
these	O	O	O	O
pre	B-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
B	I-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
or	O	O	O	O
from	O	O	O	O
HeLa	B-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
specifically	O	O	O	O
stimulated	O	O	O	O
in	O	O	O	O
vitro	O	O	O	O
transcription	O	O	O	O
of	O	O	O	O
an	O	O	O	O
immunoglobulin	B-DNA	O	O	O
gene	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

Furthermore	O	O	O	O
,	O	O	O	O
OFT	O	O	O	O
-	O	O	O	O
1	O	O	O	O
appeared	O	O	O	O
to	O	O	O	O
have	O	O	O	O
approximately	O	O	O	O
the	O	O	O	O
same	O	O	O	O
transactivation	O	O	O	O
ability	O	O	O	O
as	O	O	O	O
OTF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
when	O	O	O	O
normalized	O	O	O	O
for	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
.	O	O	O	O

These	O	O	O	O
results	O	O	O	O
suggest	O	O	O	O
that	O	O	O	O
OTF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
without	O	O	O	O
OTF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
is	O	O	O	O
sufficient	O	O	O	O
for	O	O	O	O
transcription	O	O	O	O
of	O	O	O	O
immunoglobulin	B-DNA	O	O	O
genes	I-DNA	O	O	O
and	O	O	O	O
that	O	O	O	O
OTF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
alone	O	O	O	O
is	O	O	O	O
not	O	O	O	O
responsible	O	O	O	O
for	O	O	O	O
the	O	O	O	O
B	O	O	O	O
-	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
-	O	O	O	O
specific	O	O	O	O
regulation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
immunoglobulin	B-DNA	O	O	O
gene	I-DNA	O	O	O
expression	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Effects	O	O	O	O
of	O	O	O	O
aldosterone	O	O	O	O
on	O	O	O	O
intralymphocytic	O	O	O	O
sodium	O	O	O	O
and	O	O	O	O
potassium	O	O	O	O
in	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
with	O	O	O	O
essential	O	O	O	O
hypertension	O	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
vitro	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
of	O	O	O	O
aldosterone	O	O	O	O
to	O	O	O	O
mineralocorticoid	B-protein	O	O	O
receptors	I-protein	O	O	O
on	O	O	O	O
human	B-cell_type	O	O	O
mononuclear	I-cell_type	O	O	O
leukocytes	I-cell_type	O	O	O
(	O	O	O	O
HML	B-cell_type	O	O	O
)	O	O	O	O
and	O	O	O	O
its	O	O	O	O
effects	O	O	O	O
on	O	O	O	O
the	O	O	O	O
intracellular	O	O	O	O
sodium	O	O	O	O
and	O	O	O	O
potassium	O	O	O	O
concentrations	O	O	O	O
of	O	O	O	O
HML	B-cell_type	O	O	O
have	O	O	O	O
already	O	O	O	O
been	O	O	O	O
described	O	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
the	O	O	O	O
present	O	O	O	O
paper	O	O	O	O
this	O	O	O	O
easily	O	O	O	O
accessible	O	O	O	O
human	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
model	O	O	O	O
was	O	O	O	O
investigated	O	O	O	O
in	O	O	O	O
13	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
with	O	O	O	O
essential	O	O	O	O
hypertension	O	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
only	O	O	O	O
four	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
sodium	O	O	O	O
in	O	O	O	O
HML	B-cell_type	O	O	O
without	O	O	O	O
incubation	O	O	O	O
was	O	O	O	O
elevated	O	O	O	O
compared	O	O	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
range	O	O	O	O
for	O	O	O	O
normal	O	O	O	O
persons	O	O	O	O
.	O	O	O	O

A	O	O	O	O
decrease	O	O	O	O
of	O	O	O	O
intracellular	O	O	O	O
sodium	O	O	O	O
or	O	O	O	O
potassium	O	O	O	O
occurred	O	O	O	O
during	O	O	O	O
incubation	O	O	O	O
without	O	O	O	O
aldosterone	O	O	O	O
(	O	O	O	O
P	O	O	O	O
less	O	O	O	O
than	O	O	O	O
0	O	O	O	O
.	O	O	O	O
02	O	O	O	O
)	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
addition	O	O	O	O
of	O	O	O	O
1	O	O	O	O
.	O	O	O	O
4	O	O	O	O
nM	O	O	O	O
aldosterone	O	O	O	O
did	O	O	O	O
not	O	O	O	O
prevent	O	O	O	O
this	O	O	O	O
loss	O	O	O	O
of	O	O	O	O
electrolytes	O	O	O	O
as	O	O	O	O
observed	O	O	O	O
in	O	O	O	O
normal	O	O	O	O
persons	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Plasma	B-protein	O	O	O
renin	I-protein	O	O	O
activity	O	O	O	O
and	O	O	O	O
aldosterone	O	O	O	O
were	O	O	O	O
not	O	O	O	O
correlated	O	O	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
electrolyte	O	O	O	O
response	O	O	O	O
and	O	O	O	O
were	O	O	O	O
within	O	O	O	O
the	O	O	O	O
normal	O	O	O	O
limits	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
number	O	O	O	O
of	O	O	O	O
mineralocorticoid	B-protein	O	O	O
receptors	I-protein	O	O	O
/	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
were	O	O	O	O
within	O	O	O	O
or	O	O	O	O
close	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
normal	O	O	O	O
range	O	O	O	O
(	O	O	O	O
n	O	O	O	O
=	O	O	O	O
9	O	O	O	O
)	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
independence	O	O	O	O
of	O	O	O	O
intracellular	O	O	O	O
electrolytes	O	O	O	O
from	O	O	O	O
aldosterone	O	O	O	O
despite	O	O	O	O
a	O	O	O	O
normal	O	O	O	O
number	O	O	O	O
of	O	O	O	O
mineralocorticoid	B-protein	O	O	O
receptors	I-protein	O	O	O
may	O	O	O	O
reflect	O	O	O	O
an	O	O	O	O
impairment	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
mineralocorticoid	O	O	O	O
effector	O	O	O	O
mechanism	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
HML	B-cell_type	O	O	O
of	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
with	O	O	O	O
essential	O	O	O	O
hypertension	O	O	O	O
.	O	O	O	O

[	O	O	O	O
Differential	O	O	O	O
diagnostic	O	O	O	O
value	O	O	O	O
of	O	O	O	O
receptors	O	O	O	O
of	O	O	O	O
1	O	O	O	O
,	O	O	O	O
25	O	O	O	O
-	O	O	O	O
dihydroxyvitamin	O	O	O	O
D3	O	O	O	O
(	O	O	O	O
calcitriol	O	O	O	O
)	O	O	O	O
determination	O	O	O	O
in	O	O	O	O
lymphocytes	B-cell_type	O	O	O
of	O	O	O	O
children	O	O	O	O
with	O	O	O	O
rickets	O	O	O	O
and	O	O	O	O
rickets	O	O	O	O
-	O	O	O	O
like	O	O	O	O
diseases	O	O	O	O
]	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
authors	O	O	O	O
provide	O	O	O	O
the	O	O	O	O
results	O	O	O	O
of	O	O	O	O
studying	O	O	O	O
1	O	O	O	O
,	O	O	O	O
25	O	O	O	O
-	O	O	O	O
dihydroxyvitamin	O	O	O	O
D3	O	O	O	O
(	O	O	O	O
calcitriol	O	O	O	O
)	O	O	O	O
in	O	O	O	O
lymphocytes	B-cell_type	O	O	O
of	O	O	O	O
children	O	O	O	O
with	O	O	O	O
rickets	O	O	O	O
and	O	O	O	O
rickets	O	O	O	O
-	O	O	O	O
like	O	O	O	O
diseases	O	O	O	O
.	O	O	O	O

It	O	O	O	O
is	O	O	O	O
proposed	O	O	O	O
that	O	O	O	O
the	O	O	O	O
character	O	O	O	O
of	O	O	O	O
their	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
under	O	O	O	O
the	O	O	O	O
influence	O	O	O	O
of	O	O	O	O
vitamin	O	O	O	O
D	O	O	O	O
may	O	O	O	O
be	O	O	O	O
used	O	O	O	O
with	O	O	O	O
differential	O	O	O	O
diagnostic	O	O	O	O
purposes	O	O	O	O
in	O	O	O	O
view	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Regulation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
gene	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
with	O	O	O	O
double	O	O	O	O
-	O	O	O	O
stranded	O	O	O	O
phosphorothioate	O	O	O	O
oligonucleotides	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Alteration	O	O	O	O
of	O	O	O	O
gene	O	O	O	O
transcription	O	O	O	O
by	O	O	O	O
inhibition	O	O	O	O
of	O	O	O	O
specific	O	O	O	O
transcriptional	B-protein	O	O	O
regulatory	I-protein	O	O	O
proteins	I-protein	O	O	O
is	O	O	O	O
necessary	O	O	O	O
for	O	O	O	O
determining	O	O	O	O
how	O	O	O	O
these	O	O	O	O
factors	O	O	O	O
participate	O	O	O	O
in	O	O	O	O
cellular	O	O	O	O
differentiation	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
functions	O	O	O	O
of	O	O	O	O
these	O	O	O	O
proteins	O	O	O	O
can	O	O	O	O
be	O	O	O	O
antagonized	O	O	O	O
by	O	O	O	O
several	O	O	O	O
methods	O	O	O	O
,	O	O	O	O
each	O	O	O	O
with	O	O	O	O
specific	O	O	O	O
limitations	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Inhibition	O	O	O	O
of	O	O	O	O
sequence	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
specific	I-protein	O	O	O
DNA	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
binding	I-protein	O	O	O
proteins	I-protein	O	O	O
was	O	O	O	O
achieved	O	O	O	O
with	O	O	O	O
double	O	O	O	O
-	O	O	O	O
stranded	O	O	O	O
(	O	O	O	O
ds	O	O	O	O
)	O	O	O	O
phosphorothioate	O	O	O	O
oligonucleotides	O	O	O	O
that	O	O	O	O
contained	O	O	O	O
octamer	O	O	O	O
or	O	O	O	O
kappa	O	O	O	O
B	O	O	O	O
consensus	O	O	O	O
sequences	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
phosphorothioate	O	O	O	O
oligonucleotides	O	O	O	O
specifically	O	O	O	O
bound	O	O	O	O
either	O	O	O	O
octamer	B-protein	O	O	O
transcription	I-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
or	O	O	O	O
nuclear	B-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
(	I-protein	O	O	O
NF	I-protein	O	O	O
)	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
modified	O	O	O	O
oligonucleotides	O	O	O	O
accumulated	O	O	O	O
in	O	O	O	O
cells	O	O	O	O
more	O	O	O	O
effectively	O	O	O	O
than	O	O	O	O
standard	O	O	O	O
ds	O	O	O	O
oligonucleotides	O	O	O	O
and	O	O	O	O
modulated	O	O	O	O
gene	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
in	O	O	O	O
a	O	O	O	O
specific	O	O	O	O
manner	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Octamer	O	O	O	O
-	O	O	O	O
dependent	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
a	O	O	O	O
reporter	B-DNA	O	O	O
plasmid	I-DNA	O	O	O
or	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
-	O	O	O	O
dependent	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
human	B-DNA	O	O	O
immunodeficiency	I-DNA	O	O	O
virus	I-DNA	O	O	O
(	I-DNA	O	O	O
HIV	I-DNA	O	O	O
)	I-DNA	O	O	O
enhancer	I-DNA	O	O	O
was	O	O	O	O
inhibited	O	O	O	O
when	O	O	O	O
the	O	O	O	O
appropriate	O	O	O	O
phosphorothioate	O	O	O	O
oligonucleotide	O	O	O	O
was	O	O	O	O
added	O	O	O	O
to	O	O	O	O
a	O	O	O	O
transiently	B-cell_line	O	O	O
transfected	I-cell_line	O	O	O
B	I-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
line	I-cell_line	O	O	O
.	O	O	O	O

Addition	O	O	O	O
of	O	O	O	O
phosphorothioate	O	O	O	O
oligonucleotides	O	O	O	O
that	O	O	O	O
contained	O	O	O	O
the	O	O	O	O
octamer	B-DNA	O	O	O
consensus	I-DNA	O	O	O
to	O	O	O	O
Jurkat	B-cell_line	O	O	O
T	I-cell_line	O	O	O
leukemia	I-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
inhibited	O	O	O	O
interleukin	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
IL	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
secretion	O	O	O	O
to	O	O	O	O
a	O	O	O	O
degree	O	O	O	O
similar	O	O	O	O
to	O	O	O	O
that	O	O	O	O
observed	O	O	O	O
with	O	O	O	O
a	O	O	O	O
mutated	B-DNA	O	O	O
octamer	I-DNA	O	O	O
site	I-DNA	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
IL	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
2	I-DNA	O	O	O
enhancer	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
ds	O	O	O	O
phosphorothioate	O	O	O	O
oligonucleotides	O	O	O	O
probably	O	O	O	O
compete	O	O	O	O
for	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
of	O	O	O	O
specific	O	O	O	O
transcription	O	O	O	O
factors	O	O	O	O
and	O	O	O	O
may	O	O	O	O
provide	O	O	O	O
anti	O	O	O	O
-	O	O	O	O
viral	O	O	O	O
,	O	O	O	O
immunosuppressive	O	O	O	O
,	O	O	O	O
or	O	O	O	O
other	O	O	O	O
therapeutic	O	O	O	O
effects	O	O	O	O
.	O	O	O	O

[	O	O	O	O
Effect	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
regimen	O	O	O	O
of	O	O	O	O
kidney	O	O	O	O
-	O	O	O	O
tonifying	O	O	O	O
and	O	O	O	O
qi	O	O	O	O
-	O	O	O	O
invigorating	O	O	O	O
on	O	O	O	O
aging	O	O	O	O
changes	O	O	O	O
of	O	O	O	O
glucocorticoid	B-protein	O	O	O
receptor	I-protein	O	O	O
]	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
plasma	O	O	O	O
cortisol	O	O	O	O
concentration	O	O	O	O
and	O	O	O	O
the	O	O	O	O
sites	O	O	O	O
of	O	O	O	O
glucocorticoid	B-protein	O	O	O
receptor	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
GCR	B-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
peripheral	O	B-cell_type	O	O
lymphocytes	B-cell_type	I-cell_type	O	O
were	O	O	O	O
measured	O	O	O	O
in	O	O	O	O
32	O	O	O	O
healthy	O	O	O	O
aged	O	O	O	O
persons	O	O	O	O
and	O	O	O	O
13	O	O	O	O
young	O	O	O	O
adults	O	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
animal	O	O	O	O
experiment	O	O	O	O
,	O	O	O	O
GCR	B-protein	O	O	O
of	O	O	O	O
spleen	B-cell_type	O	O	O
lymphocytic	I-cell_type	O	O	O
cell	I-cell_type	O	O	O
was	O	O	O	O
also	O	O	O	O
measured	O	O	O	O
in	O	O	O	O
18	O	O	O	O
aged	O	O	O	O
rats	O	O	O	O
and	O	O	O	O
9	O	O	O	O
young	O	O	O	O
rats	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
results	O	O	O	O
showed	O	O	O	O
that	O	O	O	O
GCR	B-protein	O	O	O
was	O	O	O	O
significantly	O	O	O	O
lower	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
aged	O	O	O	O
persons	O	O	O	O
or	O	O	O	O
rats	O	O	O	O
than	O	O	O	O
that	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
young	O	O	O	O
while	O	O	O	O
the	O	O	O	O
plasma	O	O	O	O
cortisol	O	O	O	O
level	O	O	O	O
didn	O	O	O	O
'	O	O	O	O
t	O	O	O	O
change	O	O	O	O
with	O	O	O	O
aging	O	O	O	O
.	O	O	O	O

So	O	O	O	O
we	O	O	O	O
think	O	O	O	O
that	O	O	O	O
GCR	B-protein	O	O	O
is	O	O	O	O
more	O	O	O	O
sensitive	O	O	O	O
than	O	O	O	O
the	O	O	O	O
plasma	O	O	O	O
cortisol	O	O	O	O
level	O	O	O	O
to	O	O	O	O
reflect	O	O	O	O
the	O	O	O	O
aging	O	O	O	O
change	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
adrenal	O	O	O	O
cortex	O	O	O	O
function	O	O	O	O
.	O	O	O	O

After	O	O	O	O
the	O	O	O	O
treatment	O	O	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
regimen	O	O	O	O
of	O	O	O	O
Kidney	O	O	O	O
-	O	O	O	O
tonifying	O	O	O	O
and	O	O	O	O
Qi	O	O	O	O
-	O	O	O	O
invigorating	O	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
GCR	B-protein	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
aged	O	O	O	O
persons	O	O	O	O
and	O	O	O	O
rats	O	O	O	O
was	O	O	O	O
enhanced	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
in	O	O	O	O
this	O	O	O	O
way	O	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
function	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
aged	O	O	O	O
adrenal	O	O	O	O
cortex	O	O	O	O
was	O	O	O	O
improved	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Interferon	O	O	O	O
affects	O	O	O	O
nuclear	B-protein	O	O	O
proteins	I-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
cells	O	O	O	O
of	O	O	O	O
clinically	O	O	O	O
sensitive	O	O	O	O
chronic	O	O	O	O
myelogenous	O	O	O	O
leukemia	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Cytoplasmic	O	O	O	O
protein	O	O	O	O
extracts	O	O	O	O
from	O	O	O	O
chronic	B-cell_type	O	O	O
myelogenous	I-cell_type	O	O	O
leukemia	I-cell_type	O	O	O
(	I-cell_type	O	O	O
CML	I-cell_type	O	O	O
)	I-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
contained	O	O	O	O
an	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
that	O	O	O	O
altered	O	O	O	O
the	O	O	O	O
electrophoretic	O	O	O	O
mobility	O	O	O	O
of	O	O	O	O
complexes	O	O	O	O
formed	O	O	O	O
between	O	O	O	O
nuclear	B-protein	O	O	O
proteins	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
the	O	O	O	O
transcriptional	O	O	O	O
enhancers	O	O	O	O
of	O	O	O	O
interferon	O	O	O	O
(	O	O	O	O
IFN	O	O	O	O
)	O	O	O	O
-	O	O	O	O
inducible	O	O	O	O
genes	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Exposure	O	O	O	O
of	O	O	O	O
CML	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
to	O	O	O	O
IFN	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
diminished	O	O	O	O
the	O	O	O	O
effect	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
CML	B-protein	O	O	O
cytoplasmic	I-protein	O	O	O
proteins	I-protein	O	O	O
on	O	O	O	O
these	O	O	O	O
nuclear	B-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
DNA	I-protein	O	O	O
complexes	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
presence	O	O	O	O
of	O	O	O	O
clinical	O	O	O	O
responsiveness	O	O	O	O
to	O	O	O	O
IFN	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
correlated	O	O	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
sensitivity	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
IFN	B-protein	O	O	O
-	O	O	O	O
induced	O	O	O	O
change	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
electrophoretic	O	O	O	O
mobility	O	O	O	O
of	O	O	O	O
nuclear	B-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
DNA	I-protein	O	O	O
complexes	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

These	O	O	O	O
data	O	O	O	O
suggest	O	O	O	O
that	O	O	O	O
the	O	O	O	O
action	O	O	O	O
of	O	O	O	O
IFN	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
CML	O	O	O	O
may	O	O	O	O
be	O	O	O	O
linked	O	O	O	O
to	O	O	O	O
a	O	O	O	O
pathway	O	O	O	O
that	O	O	O	O
can	O	O	O	O
result	O	O	O	O
in	O	O	O	O
posttranslational	O	O	O	O
modification	O	O	O	O
of	O	O	O	O
nuclear	B-protein	O	O	O
proteins	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Epstein	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
Barr	I-protein	O	O	O
virus	I-protein	O	O	O
nuclear	I-protein	O	O	O
antigen	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
transactivates	O	O	O	O
latent	B-protein	O	O	O
membrane	I-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
LMP1	B-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Several	O	O	O	O
lines	O	O	O	O
of	O	O	O	O
evidence	O	O	O	O
are	O	O	O	O
compatible	O	O	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
hypothesis	O	O	O	O
that	O	O	O	O
Epstein	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
Barr	I-protein	O	O	O
virus	I-protein	O	O	O
(	I-protein	O	O	O
EBV	I-protein	O	O	O
)	I-protein	O	O	O
nuclear	I-protein	O	O	O
antigen	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
EBNA	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
or	O	O	O	O
leader	B-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
EBNA	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
LP	I-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
affects	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
EBV	B-protein	O	O	O
latent	I-protein	O	O	O
infection	I-protein	O	O	O
membrane	I-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
LMP1	B-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
now	O	O	O	O
demonstrate	O	O	O	O
the	O	O	O	O
following	O	O	O	O
.	O	O	O	O

(	O	O	O	O
i	O	O	O	O
)	O	O	O	O
Acute	O	O	O	O
transfection	O	O	O	O
and	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
EBNA	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
under	O	O	O	O
control	O	O	O	O
of	O	O	O	O
simian	O	O	O	O
virus	O	O	O	O
40	O	O	O	O
or	O	O	O	O
Moloney	O	O	O	O
murine	O	O	O	O
leukemia	O	O	O	O
virus	O	O	O	O
promoters	O	O	O	O
resulted	O	O	O	O
in	O	O	O	O
increased	O	O	O	O
LMP1	B-protein	O	O	O
expression	O	O	O	O
in	O	O	O	O
P3HR	B-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
1	I-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
infected	I-cell_line	O	O	O
Burkitt	I-cell_line	O	O	O
'	I-cell_line	O	O	O
s	I-cell_line	O	O	O
lymphoma	I-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
and	O	O	O	O
the	O	O	O	O
P3HR	B-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
1	I-cell_line	O	O	O
or	O	O	O	O
Daudi	B-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
line	I-cell_line	O	O	O
.	O	O	O	O

(	O	O	O	O
ii	O	O	O	O
)	O	O	O	O
Transfection	O	O	O	O
and	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
EBNA	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
LP	I-protein	O	O	O
alone	O	O	O	O
had	O	O	O	O
no	O	O	O	O
effect	O	O	O	O
on	O	O	O	O
LMP1	B-protein	O	O	O
expression	O	O	O	O
and	O	O	O	O
did	O	O	O	O
not	O	O	O	O
act	O	O	O	O
synergistically	O	O	O	O
with	O	O	O	O
EBNA	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
to	O	O	O	O
affect	O	O	O	O
LMP1	B-protein	O	O	O
expression	O	O	O	O
.	O	O	O	O

(	O	O	O	O
iii	O	O	O	O
)	O	O	O	O
LMP1	B-protein	O	O	O
expression	O	O	O	O
in	O	O	O	O
Daudi	B-cell_line	O	O	O
and	O	O	O	O
P3HR	B-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
1	I-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
infected	I-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
was	O	O	O	O
controlled	O	O	O	O
at	O	O	O	O
the	O	O	O	O
mRNA	B-RNA	O	O	O
level	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
EBNA	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
expression	O	O	O	O
in	O	O	O	O
Daudi	B-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
increased	O	O	O	O
LMP1	B-protein	B-RNA	O	O
mRNA	O	I-RNA	O	O
.	O	O	O	O

(	O	O	O	O
iv	O	O	O	O
)	O	O	O	O
No	O	O	O	O
other	O	O	O	O
EBV	B-DNA	O	O	O
genes	I-DNA	O	O	O
were	O	O	O	O
required	O	O	O	O
for	O	O	O	O
EBNA	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
transactivation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
LMP1	B-protein	O	O	O
since	O	O	O	O
cotransfection	O	O	O	O
of	O	O	O	O
recombinant	O	B-DNA	O	O
EBNA	B-protein	I-DNA	O	O
-	I-protein	I-DNA	O	O
2	I-protein	I-DNA	O	O
expression	O	I-DNA	O	O
vectors	O	I-DNA	O	O
and	O	O	O	O
genomic	O	O	O	O
LMP1	B-protein	B-DNA	O	O
DNA	O	I-DNA	O	O
fragments	O	I-DNA	O	O
enhanced	O	O	O	O
LMP1	B-protein	O	O	O
expression	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
EBV	B-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
negative	I-cell_line	O	O	O
B	I-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
lymphoma	I-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
lines	I-cell_line	O	O	O
BJAB	B-cell_line	O	O	O
,	O	O	O	O
Louckes	B-cell_line	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
BL30	B-cell_line	O	O	O
.	O	O	O	O

(	O	O	O	O
v	O	O	O	O
)	O	O	O	O
An	O	O	O	O
EBNA	B-protein	B-DNA	O	O
-	I-protein	I-DNA	O	O
2	I-protein	I-DNA	O	O
-	O	I-DNA	O	O
responsive	O	I-DNA	O	O
element	O	I-DNA	O	O
was	O	O	O	O
found	O	O	O	O
within	O	O	O	O
the	O	O	O	O
-	O	O	B-DNA	O
512	O	O	I-DNA	O
to	O	O	I-DNA	O
+	O	O	I-DNA	O
40	O	O	I-DNA	O
LMP1	B-protein	B-DNA	I-DNA	O
DNA	O	I-DNA	I-DNA	O
since	O	O	O	O
this	O	O	O	O
DNA	O	O	O	O
linked	O	O	O	O
to	O	O	O	O
a	O	O	O	O
chloramphenicol	B-protein	B-DNA	O	O
acetyltransferase	I-protein	I-DNA	O	O
reporter	O	I-DNA	O	O
gene	O	I-DNA	O	O
was	O	O	O	O
transactivated	O	O	O	O
by	O	O	O	O
cotransfection	O	O	O	O
with	O	O	O	O
an	O	O	O	O
EBNA	B-protein	B-DNA	O	O
-	I-protein	I-DNA	O	O
2	I-protein	I-DNA	O	O
expression	O	I-DNA	O	O
vector	O	I-DNA	O	O
.	O	O	O	O

(	O	O	O	O
vi	O	O	O	O
)	O	O	O	O
The	O	O	O	O
EBV	O	O	O	O
type	O	O	O	O
2	O	O	O	O
EBNA	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
transactivated	O	O	O	O
LMP1	B-protein	O	O	O
as	O	O	O	O
well	O	O	O	O
as	O	O	O	O
the	O	O	O	O
EBV	O	O	O	O
type	O	O	O	O
1	O	O	O	O
EBNA	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

(	O	O	O	O
vii	O	O	O	O
)	O	O	O	O
Two	O	O	O	O
deletions	O	O	O	O
within	O	O	O	O
the	O	O	O	O
EBNA	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
gene	O	O	O	O
which	O	O	O	O
rendered	O	O	O	O
EBV	O	O	O	O
transformation	O	O	O	O
incompetent	O	O	O	O
did	O	O	O	O
not	O	O	O	O
transactivate	O	O	O	O
LMP1	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
whereas	O	O	O	O
a	O	O	O	O
transformation	O	B-DNA	O	O
-	O	I-DNA	O	O
competent	O	I-DNA	O	O
EBNA	B-protein	I-DNA	O	O
-	I-protein	I-DNA	O	O
2	I-protein	I-DNA	O	O
deletion	O	I-DNA	O	O
mutant	O	I-DNA	O	O
did	O	O	O	O
transactivate	O	O	O	O
LMP1	B-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

LMP1	B-protein	O	O	O
is	O	O	O	O
a	O	O	O	O
potent	O	O	O	O
effector	O	O	O	O
of	O	O	O	O
B	O	O	O	O
-	O	O	O	O
lymphocyte	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
and	O	O	O	O
can	O	O	O	O
act	O	O	O	O
synergistically	O	O	O	O
with	O	O	O	O
EBNA	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
to	O	O	O	O
induce	O	O	O	O
cellular	O	O	O	O
CD23	O	O	O	O
gene	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Thus	O	O	O	O
,	O	O	O	O
EBNA	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
transactivation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
LMP1	B-protein	O	O	O
amplifies	O	O	O	O
the	O	O	O	O
biological	O	O	O	O
impact	O	O	O	O
of	O	O	O	O
EBNA	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
underscores	O	O	O	O
its	O	O	O	O
central	O	O	O	O
role	O	O	O	O
in	O	O	O	O
EBV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
induced	O	O	O	O
growth	O	O	O	O
transformation	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
c	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
fos	I-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
c	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
jun	I-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
c	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
myc	I-DNA	O	O	O
genes	I-DNA	O	O	O
is	O	O	O	O
regulated	O	O	O	O
by	O	O	O	O
heat	O	O	O	O
shock	O	O	O	O
in	O	O	O	O
human	B-cell_type	O	O	O
lymphoid	I-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
effect	O	O	O	O
of	O	O	O	O
heat	O	O	O	O
shock	O	O	O	O
on	O	O	O	O
the	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
nuclear	B-DNA	O	O	O
protooncogenes	I-DNA	O	O	O
c	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
fos	I-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
c	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
jun	I-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
c	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
myc	I-DNA	O	O	O
was	O	O	O	O
studied	O	O	O	O
in	O	O	O	O
human	B-cell_type	O	O	O
lymphoid	I-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

Heat	O	O	O	O
shock	O	O	O	O
caused	O	O	O	O
an	O	O	O	O
increase	O	O	O	O
in	O	O	O	O
c	O	O	O	O
-	O	O	O	O
fos	O	O	O	O
and	O	O	O	O
c	O	O	O	O
-	O	O	O	O
jun	O	O	O	O
mRNA	O	O	O	O
levels	O	O	O	O
and	O	O	O	O
a	O	O	O	O
decrease	O	O	O	O
in	O	O	O	O
c	B-DNA	B-RNA	O	O
-	I-DNA	I-RNA	O	O
myc	I-DNA	I-RNA	O	O
mRNA	O	I-RNA	O	O
levels	O	O	O	O
in	O	O	O	O
pre	O	O	O	O
-	O	O	O	O
B	O	O	O	O
(	O	O	O	O
Hyon	O	O	O	O
)	O	O	O	O
and	O	O	O	O
T	O	O	O	O
(	O	O	O	O
DND	O	O	O	O
-	O	O	O	O
41	O	O	O	O
)	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
lines	O	O	O	O
as	O	O	O	O
well	O	O	O	O
as	O	O	O	O
in	O	O	O	O
freshly	O	O	O	O
isolated	O	O	O	O
normal	O	O	O	O
human	O	O	O	O
thymocytes	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
changes	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
mRNA	O	O	O	O
levels	O	O	O	O
of	O	O	O	O
these	O	O	O	O
protooncogenes	B-DNA	O	O	O
in	O	O	O	O
Hyon	B-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
were	O	O	O	O
most	O	O	O	O
pronounced	O	O	O	O
at	O	O	O	O
42	O	O	O	O
and	O	O	O	O
43	O	O	O	O
degrees	O	O	O	O
C	O	O	O	O
;	O	O	O	O
kinetic	O	O	O	O
analysis	O	O	O	O
demonstrated	O	O	O	O
that	O	O	O	O
the	O	O	O	O
changes	O	O	O	O
could	O	O	O	O
be	O	O	O	O
detected	O	O	O	O
within	O	O	O	O
30	O	O	O	O
min	O	O	O	O
of	O	O	O	O
heat	O	O	O	O
shock	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Altered	O	O	O	O
transcription	O	O	O	O
of	O	O	O	O
c	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
fos	I-DNA	O	O	O
and	O	O	O	O
c	B-DNA	B-DNA	O	O
-	I-DNA	I-DNA	O	O
myc	I-DNA	I-DNA	O	O
genes	O	I-DNA	O	O
was	O	O	O	O
the	O	O	O	O
primary	O	O	O	O
effect	O	O	O	O
of	O	O	O	O
heat	O	O	O	O
shock	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Secondarily	O	O	O	O
,	O	O	O	O
heat	O	O	O	O
shock	O	O	O	O
of	O	O	O	O
Hyon	B-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
stabilized	O	O	O	O
the	O	O	O	O
c	B-DNA	B-RNA	O	O
-	I-DNA	I-RNA	O	O
myc	I-DNA	I-RNA	O	O
mRNA	O	I-RNA	O	O
level	O	O	O	O
by	O	O	O	O
increasing	O	O	O	O
its	O	O	O	O
half	O	O	O	O
-	O	O	O	O
life	O	O	O	O
from	O	O	O	O
24	O	O	O	O
to	O	O	O	O
45	O	O	O	O
min	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
overall	O	O	O	O
effect	O	O	O	O
of	O	O	O	O
heat	O	O	O	O
shock	O	O	O	O
on	O	O	O	O
c	B-DNA	B-RNA	O	O
-	I-DNA	I-RNA	O	O
myc	I-DNA	I-RNA	O	O
mRNA	O	I-RNA	O	O
level	O	O	O	O
,	O	O	O	O
however	O	O	O	O
,	O	O	O	O
was	O	O	O	O
a	O	O	O	O
marked	O	O	O	O
inhibition	O	O	O	O
of	O	O	O	O
its	O	O	O	O
transcription	O	O	O	O
.	O	O	O	O

These	O	O	O	O
results	O	O	O	O
demonstrate	O	O	O	O
that	O	O	O	O
the	O	O	O	O
transcription	O	O	O	O
of	O	O	O	O
nuclear	O	B-DNA	O	O
protooncogenes	B-DNA	I-DNA	O	O
is	O	O	O	O
regulated	O	O	O	O
by	O	O	O	O
heat	O	O	O	O
shock	O	O	O	O
indicating	O	O	O	O
a	O	O	O	O
role	O	O	O	O
for	O	O	O	O
nuclear	O	B-DNA	O	O
protooncogenes	B-DNA	I-DNA	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
stress	O	O	O	O
response	O	O	O	O
of	O	O	O	O
lymphoid	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

Mapping	O	O	O	O
of	O	O	O	O
B	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
cell	I-protein	O	O	O
epitopes	I-protein	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
human	B-protein	O	O	O
hepatitis	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
virus	I-protein	O	O	O
X	I-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
immune	O	O	O	O
response	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
X	B-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
of	O	O	O	O
human	O	O	O	O
hepatitis	O	O	O	O
B	O	O	O	O
virus	O	O	O	O
(	O	O	O	O
HBV	O	O	O	O
)	O	O	O	O
was	O	O	O	O
studied	O	O	O	O
by	O	O	O	O
epitope	O	O	O	O
mapping	O	O	O	O
by	O	O	O	O
using	O	O	O	O
a	O	O	O	O
set	O	O	O	O
of	O	O	O	O
MS2	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
HBx	I-protein	O	O	O
fusion	I-protein	O	O	O
proteins	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
synthetic	O	O	O	O
peptides	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Antibodies	O	O	O	O
in	O	O	O	O
sera	O	O	O	O
of	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
with	O	O	O	O
acute	O	O	O	O
and	O	O	O	O
chronic	O	O	O	O
HBV	O	O	O	O
infection	O	O	O	O
showed	O	O	O	O
a	O	O	O	O
multispecific	O	O	O	O
immune	O	O	O	O
response	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Each	O	O	O	O
serum	O	O	O	O
contained	O	O	O	O
antibodies	B-protein	O	O	O
to	O	O	O	O
a	O	O	O	O
different	O	O	O	O
set	O	O	O	O
of	O	O	O	O
epitopes	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
which	O	O	O	O
taken	O	O	O	O
together	O	O	O	O
cover	O	O	O	O
most	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
HBx	B-protein	O	O	O
sequence	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Some	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
epitopes	O	O	O	O
were	O	O	O	O
detectable	O	O	O	O
only	O	O	O	O
by	O	O	O	O
immunoblotting	O	O	O	O
with	O	O	O	O
fusion	B-protein	O	O	O
proteins	I-protein	O	O	O
;	O	O	O	O
others	O	O	O	O
were	O	O	O	O
detectable	O	O	O	O
only	O	O	O	O
by	O	O	O	O
an	O	O	O	O
enzyme	O	O	O	O
-	O	O	O	O
linked	O	O	O	O
immunosorbent	O	O	O	O
assay	O	O	O	O
(	O	O	O	O
ELISA	O	O	O	O
)	O	O	O	O
with	O	O	O	O
synthetic	O	O	O	O
peptides	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
carboxy	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
terminal	I-protein	O	O	O
half	I-protein	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
HBx	B-protein	B-protein	O	O
protein	O	I-protein	O	O
was	O	O	O	O
preferentially	O	O	O	O
recognized	O	O	O	O
by	O	O	O	O
antibodies	B-protein	O	O	O
from	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
with	O	O	O	O
chronic	O	O	O	O
hepatitis	O	O	O	O
and	O	O	O	O
contained	O	O	O	O
a	O	O	O	O
short	O	O	O	O
immunodominant	B-protein	O	O	O
antigenic	I-protein	O	O	O
region	I-protein	O	O	O
with	O	O	O	O
at	O	O	O	O
least	O	O	O	O
two	O	O	O	O
major	O	O	O	O
nonoverlapping	B-protein	O	O	O
epitopes	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Anti	O	O	O	O
-	O	O	O	O
HBx	B-protein	O	O	O
antibody	O	O	O	O
titers	O	O	O	O
as	O	O	O	O
revealed	O	O	O	O
by	O	O	O	O
peptide	O	O	O	O
ELISAs	O	O	O	O
were	O	O	O	O
highest	O	O	O	O
and	O	O	O	O
most	O	O	O	O
frequent	O	O	O	O
in	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
with	O	O	O	O
chronic	O	O	O	O
hepatitis	O	O	O	O
and	O	O	O	O
usually	O	O	O	O
low	O	O	O	O
in	O	O	O	O
acutely	O	O	O	O
infected	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
and	O	O	O	O
asymptomatic	O	O	O	O
carriers	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
data	O	O	O	O
demonstrate	O	O	O	O
a	O	O	O	O
remarkable	O	O	O	O
qualitative	O	O	O	O
and	O	O	O	O
quantitative	O	O	O	O
heterogeneity	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
humoral	O	O	O	O
HBx	B-protein	O	O	O
immune	O	O	O	O
response	O	O	O	O
which	O	O	O	O
can	O	O	O	O
be	O	O	O	O
monitored	O	O	O	O
by	O	O	O	O
HBx	B-protein	O	O	O
-	O	O	O	O
specific	O	O	O	O
peptide	O	O	O	O
ELISAs	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Such	O	O	O	O
tests	O	O	O	O
may	O	O	O	O
become	O	O	O	O
useful	O	O	O	O
diagnostic	O	O	O	O
tools	O	O	O	O
.	O	O	O	O

[	O	O	O	O
The	O	O	O	O
inhibitory	O	O	O	O
effect	O	O	O	O
of	O	O	O	O
hydrocortisone	O	O	O	O
on	O	O	O	O
the	O	O	O	O
chemotactic	O	O	O	O
migration	O	O	O	O
of	O	O	O	O
human	B-cell_type	O	O	O
leukocytes	I-cell_type	O	O	O
]	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Random	O	O	O	O
migration	O	O	O	O
(	O	O	O	O
RM	O	O	O	O
)	O	O	O	O
and	O	O	O	O
chemotactic	O	O	O	O
migration	O	O	O	O
(	O	O	O	O
ChtM	O	O	O	O
)	O	O	O	O
of	O	O	O	O
human	B-cell_type	O	O	O
leukocytes	I-cell_type	O	O	O
to	O	O	O	O
yeast	O	O	O	O
activated	O	O	O	O
serum	O	O	O	O
were	O	O	O	O
studied	O	O	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
modified	O	O	O	O
Boyden	O	O	O	O
chamber	O	O	O	O
method	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Both	O	O	O	O
RM	O	O	O	O
and	O	O	O	O
ChtM	O	O	O	O
showed	O	O	O	O
circadian	O	O	O	O
rhythm	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Leukocytes	B-cell_type	O	O	O
migrated	O	O	O	O
most	O	O	O	O
rapidly	O	O	O	O
at	O	O	O	O
night	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
difference	O	O	O	O
between	O	O	O	O
the	O	O	O	O
peak	O	O	O	O
(	O	O	O	O
0	O	O	O	O
:	O	O	O	O
00	O	O	O	O
)	O	O	O	O
and	O	O	O	O
trough	O	O	O	O
values	O	O	O	O
(	O	O	O	O
8	O	O	O	O
:	O	O	O	O
00	O	O	O	O
)	O	O	O	O
of	O	O	O	O
RM	O	O	O	O
and	O	O	O	O
ChtM	O	O	O	O
was	O	O	O	O
significant	O	O	O	O
statistically	O	O	O	O
(	O	O	O	O
P	O	O	O	O
less	O	O	O	O
than	O	O	O	O
0	O	O	O	O
.	O	O	O	O
01	O	O	O	O
)	O	O	O	O
.	O	O	O	O

ChtM	O	O	O	O
was	O	O	O	O
inhibited	O	O	O	O
by	O	O	O	O
hydrocortisone	O	O	O	O
(	O	O	O	O
F	O	O	O	O
)	O	O	O	O
of	O	O	O	O
physiological	O	O	O	O
concentration	O	O	O	O
(	O	O	O	O
10	O	O	O	O
(	O	O	O	O
-	O	O	O	O
9	O	O	O	O
)	O	O	O	O
-	O	O	O	O
10	O	O	O	O
(	O	O	O	O
-	O	O	O	O
7	O	O	O	O
)	O	O	O	O
mol	O	O	O	O
/	O	O	O	O
L	O	O	O	O
)	O	O	O	O
which	O	O	O	O
was	O	O	O	O
dose	O	O	O	O
-	O	O	O	O
dependent	O	O	O	O
and	O	O	O	O
completely	O	O	O	O
antagonized	O	O	O	O
by	O	O	O	O
the	O	O	O	O
competitive	O	O	O	O
antagonist	O	O	O	O
,	O	O	O	O
RU38486	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
inhibitory	O	O	O	O
effect	O	O	O	O
was	O	O	O	O
much	O	O	O	O
more	O	O	O	O
evident	O	O	O	O
with	O	O	O	O
higher	O	O	O	O
dose	O	O	O	O
(	O	O	O	O
more	O	O	O	O
than	O	O	O	O
10	O	O	O	O
(	O	O	O	O
-	O	O	O	O
5	O	O	O	O
)	O	O	O	O
mol	O	O	O	O
/	O	O	O	O
L	O	O	O	O
)	O	O	O	O
and	O	O	O	O
it	O	O	O	O
was	O	O	O	O
also	O	O	O	O
reversed	O	O	O	O
by	O	O	O	O
RU38486	O	O	O	O
,	O	O	O	O
but	O	O	O	O
only	O	O	O	O
partially	O	O	O	O
.	O	O	O	O

It	O	O	O	O
is	O	O	O	O
suggested	O	O	O	O
that	O	O	O	O
glucocorticoids	O	O	O	O
(	O	O	O	O
GC	O	O	O	O
)	O	O	O	O
may	O	O	O	O
be	O	O	O	O
a	O	O	O	O
physiological	O	O	O	O
regulator	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
of	O	O	O	O
leukocytes	B-cell_type	O	O	O
and	O	O	O	O
its	O	O	O	O
inhibitory	O	O	O	O
action	O	O	O	O
on	O	O	O	O
ChtM	O	O	O	O
may	O	O	O	O
be	O	O	O	O
involved	O	O	O	O
in	O	O	O	O
antiinflammatory	O	O	O	O
mechanisms	O	O	O	O
of	O	O	O	O
GC	O	O	O	O
of	O	O	O	O
pharmacological	O	O	O	O
doses	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
action	O	O	O	O
of	O	O	O	O
physiological	O	O	O	O
and	O	O	O	O
pharmacological	O	O	O	O
concentration	O	O	O	O
of	O	O	O	O
GC	O	O	O	O
may	O	O	O	O
be	O	O	O	O
mediated	O	O	O	O
by	O	O	O	O
low	B-protein	O	O	O
affinity	I-protein	O	O	O
specific	I-protein	O	O	O
binding	I-protein	O	O	O
sites	I-protein	O	O	O
of	O	O	O	O
glucocorticoid	B-protein	O	O	O
receptors	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Heterogeneity	O	O	O	O
of	O	O	O	O
antigen	B-protein	O	O	O
molecules	I-protein	O	O	O
recognized	O	O	O	O
by	O	O	O	O
anti	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
tax1	I-protein	O	O	O
monoclonal	I-protein	O	O	O
antibody	I-protein	O	O	O
Lt	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
4	I-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
lines	O	O	O	O
bearing	O	O	O	O
human	O	O	O	O
T	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
leukemia	O	O	O	O
virus	O	O	O	O
type	O	O	O	O
I	O	O	O	O
and	O	O	O	O
related	O	O	O	O
retroviruses	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Using	O	O	O	O
a	O	O	O	O
monoclonal	B-protein	O	O	O
antibody	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
Lt	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
4	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
directed	O	O	O	O
against	O	O	O	O
human	B-protein	B-protein	O	O
T	I-protein	I-protein	O	O
cell	I-protein	I-protein	O	O
leukemia	I-protein	I-protein	O	O
virus	I-protein	I-protein	O	O
type	I-protein	I-protein	O	O
I	I-protein	I-protein	O	O
(	I-protein	I-protein	O	O
HTLV	I-protein	I-protein	O	O
-	I-protein	I-protein	O	O
I	I-protein	I-protein	O	O
)	I-protein	I-protein	O	O
trans	I-protein	I-protein	O	O
-	I-protein	I-protein	O	O
activator	I-protein	I-protein	O	O
(	O	I-protein	O	O
tax1	B-protein	I-protein	O	O
)	O	I-protein	O	O
antigen	O	I-protein	O	O
,	O	O	O	O
we	O	O	O	O
examined	O	O	O	O
the	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
tax1	B-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
related	O	O	O	O
antigens	B-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
a	O	O	O	O
variety	O	O	O	O
of	O	O	O	O
T	B-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
lines	I-cell_line	O	O	O
bearing	O	O	O	O
HTLV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
I	O	O	O	O
and	O	O	O	O
related	O	O	O	O
retroviruses	O	O	O	O
,	O	O	O	O
simian	O	O	O	O
T	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
leukemia	O	O	O	O
virus	O	O	O	O
type	O	O	O	O
I	O	O	O	O
(	O	O	O	O
STLV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
I	O	O	O	O
)	O	O	O	O
and	O	O	O	O
HTLV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
II	O	O	O	O
,	O	O	O	O
by	O	O	O	O
immunofluorescence	O	O	O	O
and	O	O	O	O
immunoblot	O	O	O	O
assays	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Lt	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
4	I-protein	O	O	O
reacted	O	O	O	O
with	O	O	O	O
all	O	O	O	O
HTLV	B-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
I	I-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
bearing	I-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
lines	I-cell_line	O	O	O
tested	O	O	O	O
and	O	O	O	O
five	O	O	O	O
out	O	O	O	O
of	O	O	O	O
eight	O	O	O	O
simian	B-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
lines	I-cell_line	O	O	O
bearing	O	O	O	O
STLV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
I	O	O	O	O
,	O	O	O	O
but	O	O	O	O
not	O	O	O	O
with	O	O	O	O
an	O	O	O	O
HTLV	B-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
II	I-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
bearing	I-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
line	I-cell_line	O	O	O
.	O	O	O	O

Lt	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
4	I-protein	O	O	O
detected	O	O	O	O
40	O	O	O	O
kd	O	O	O	O
tax1	B-protein	B-protein	O	O
antigen	O	I-protein	O	O
molecules	O	I-protein	O	O
in	O	O	O	O
most	O	O	O	O
HTLV	B-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
I	I-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
bearing	I-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
lines	I-cell_line	O	O	O
except	O	O	O	O
one	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
line	O	O	O	O
that	O	O	O	O
expressed	O	O	O	O
39	O	B-protein	O	O
kd	O	I-protein	O	O
tax1	B-protein	I-protein	O	O
antigen	O	I-protein	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
the	O	O	O	O
STLV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
I	O	O	O	O
-	O	O	O	O
bearing	O	O	O	O
T	B-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
lines	I-cell_line	O	O	O
,	O	O	O	O
tax1	B-protein	B-protein	O	O
-	O	I-protein	O	O
related	O	I-protein	O	O
antigen	O	I-protein	O	O
molecules	O	I-protein	O	O
detected	O	O	O	O
by	O	O	O	O
Lt	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
4	I-protein	O	O	O
were	O	O	O	O
heterogeneous	O	O	O	O
,	O	O	O	O
having	O	O	O	O
molecular	O	O	O	O
weights	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
range	O	O	O	O
of	O	O	O	O
36	O	O	O	O
-	O	O	O	O
41	O	O	O	O
kd	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Characterization	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
human	B-DNA	B-protein	O	O
immunodeficiency	I-DNA	I-protein	O	O
virus	I-DNA	I-protein	O	O
type	I-DNA	I-protein	O	O
1	I-DNA	I-protein	O	O
enhancer	I-DNA	I-protein	O	O
-	O	I-protein	O	O
binding	O	I-protein	O	O
proteins	O	I-protein	O	O
from	O	O	O	O
the	O	O	O	O
human	B-cell_line	O	O	O
T	I-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
line	I-cell_line	O	O	O
Jurkat	B-cell_line	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
transcription	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
human	O	O	O	O
immunodeficiency	O	O	O	O
virus	O	O	O	O
type	O	O	O	O
1	O	O	O	O
(	O	O	O	O
HIV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
1	O	O	O	O
)	O	O	O	O
is	O	O	O	O
under	O	O	O	O
the	O	O	O	O
control	O	O	O	O
of	O	O	O	O
cellular	B-protein	O	O	O
proteins	I-protein	O	O	O
that	O	O	O	O
bind	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
viral	B-DNA	O	O	O
long	I-DNA	O	O	O
terminal	I-DNA	O	O	O
repeat	I-DNA	O	O	O
(	O	O	O	O
LTR	B-DNA	O	O	O
)	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Among	O	O	O	O
the	O	O	O	O
protein	O	O	O	O
-	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
regions	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
HIV	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
1	I-DNA	O	O	O
LTR	I-DNA	O	O	O
is	O	O	O	O
the	O	O	O	O
transcription	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
enhancer	I-DNA	O	O	O
region	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
show	O	O	O	O
that	O	O	O	O
at	O	O	O	O
least	O	O	O	O
one	O	O	O	O
inducible	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
C1	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
one	O	O	O	O
constitutive	O	B-protein	O	O
,	O	I-protein	O	O
C2	B-protein	I-protein	O	O
,	O	I-protein	O	O
protein	O	I-protein	O	O
can	O	O	O	O
bind	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
HIV	B-DNA	O	O	O
enhancer	I-DNA	O	O	O
in	O	O	O	O
Jurkat	B-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
two	O	O	O	O
proteins	O	O	O	O
differ	O	O	O	O
in	O	O	O	O
their	O	O	O	O
surface	O	O	O	O
charge	O	O	O	O
,	O	O	O	O
since	O	O	O	O
they	O	O	O	O
are	O	O	O	O
separable	O	O	O	O
by	O	O	O	O
anion	O	O	O	O
-	O	O	O	O
exchange	O	O	O	O
chromatography	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Bivalent	O	O	O	O
cations	O	O	O	O
such	O	O	O	O
as	O	O	O	O
Mg2	O	O	O	O
+	O	O	O	O
and	O	O	O	O
Zn2	O	O	O	O
+	O	O	O	O
differentially	O	O	O	O
affect	O	O	O	O
their	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
to	O	O	O	O
oligonucleotides	O	O	O	O
which	O	O	O	O
contain	O	O	O	O
the	O	O	O	O
HIV	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
enhancer	I-DNA	O	O	O
domain	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

Both	O	O	O	O
C1	B-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
C2	B-protein	O	O	O
proteins	I-protein	O	O	O
also	O	O	O	O
bind	O	O	O	O
to	O	O	O	O
a	O	O	O	O
similar	O	O	O	O
sequence	O	O	O	O
found	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
interleukin	B-protein	B-protein	B-DNA	O
-	I-protein	I-protein	I-DNA	O
2	I-protein	I-protein	I-DNA	O
-	O	I-protein	I-DNA	O
receptor	O	I-protein	I-DNA	O
alpha	O	I-protein	I-DNA	O
-	O	I-protein	I-DNA	O
subunit	O	I-protein	I-DNA	O
enhancer	O	O	I-DNA	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
inducible	O	B-protein	O	O
C1	B-protein	I-protein	O	O
protein	O	I-protein	O	O
was	O	O	O	O
partially	O	O	O	O
purified	O	O	O	O
by	O	O	O	O
three	O	O	O	O
chromatographic	O	O	O	O
steps	O	O	O	O
and	O	O	O	O
characterized	O	O	O	O
by	O	O	O	O
u	O	O	O	O
.	O	O	O	O
v	O	O	O	O
.	O	O	O	O
cross	O	O	O	O
-	O	O	O	O
linking	O	O	O	O
as	O	O	O	O
a	O	O	O	O
47	B-protein	O	O	O
kDa	I-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Differences	O	O	O	O
in	O	O	O	O
transcriptional	B-DNA	O	O	O
enhancers	I-DNA	O	O	O
of	O	O	O	O
HIV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
1	O	O	O	O
and	O	O	O	O
HIV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
2	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Response	O	O	O	O
to	O	O	O	O
T	B-cell_type	O	O	O
cell	I-cell_type	O	O	O
activation	O	O	O	O
signals	O	O	O	O
.	O	O	O	O

T	B-cell_type	O	O	O
cell	I-cell_type	O	O	O
activation	O	O	O	O
results	O	O	O	O
in	O	O	O	O
high	O	O	O	O
levels	O	O	O	O
of	O	O	O	O
HIV	O	O	O	O
replication	O	O	O	O
and	O	O	O	O
is	O	O	O	O
thought	O	O	O	O
to	O	O	O	O
be	O	O	O	O
one	O	O	O	O
mechanism	O	O	O	O
leading	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
conversion	O	O	O	O
from	O	O	O	O
latent	O	O	O	O
to	O	O	O	O
active	O	O	O	O
viral	O	O	O	O
infection	O	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
HIV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
1	O	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
sequences	O	O	O	O
that	O	O	O	O
respond	O	O	O	O
to	O	O	O	O
these	O	O	O	O
signaling	O	O	O	O
events	O	O	O	O
are	O	O	O	O
found	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
long	B-DNA	O	O	O
terminal	I-DNA	O	O	O
repeat	I-DNA	O	O	O
(	O	O	O	O
LTR	B-DNA	O	O	O
)	O	O	O	O
and	O	O	O	O
comprise	O	O	O	O
the	O	O	O	O
transcriptional	B-DNA	O	O	O
enhancer	I-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
which	O	O	O	O
contains	O	O	O	O
two	O	O	O	O
conserved	B-DNA	O	O	O
binding	I-DNA	O	O	O
sites	I-DNA	O	O	O
for	O	O	O	O
the	O	O	O	O
nuclear	B-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
corresponding	O	O	O	O
region	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
second	O	O	O	O
AIDS	O	O	O	O
retrovirus	O	O	O	O
,	O	O	O	O
HIV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
2	O	O	O	O
,	O	O	O	O
contains	O	O	O	O
a	O	O	O	O
conserved	O	O	O	O
and	O	O	O	O
a	O	O	O	O
divergent	O	O	O	O
NF	B-protein	B-DNA	O	O
kappa	I-protein	I-DNA	O	O
B	I-protein	I-DNA	O	O
binding	O	I-DNA	O	O
site	O	I-DNA	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
demonstrate	O	O	O	O
that	O	O	O	O
the	O	O	O	O
HIV	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
1	I-DNA	O	O	O
LTR	I-DNA	O	O	O
responds	O	O	O	O
better	O	O	O	O
than	O	O	O	O
the	O	O	O	O
HIV	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
2	I-DNA	O	O	O
LTR	I-DNA	O	O	O
to	O	O	O	O
T	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
signals	O	O	O	O
.	O	O	O	O

These	O	O	O	O
qualitative	O	O	O	O
differences	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
response	O	O	O	O
to	O	O	O	O
T	B-cell_type	O	O	O
cell	I-cell_type	O	O	O
activation	O	O	O	O
are	O	O	O	O
reproduced	O	O	O	O
not	O	O	O	O
only	O	O	O	O
when	O	O	O	O
HIV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
1	O	O	O	O
or	O	O	O	O
HIV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
2	O	O	O	O
enhancers	O	O	O	O
are	O	O	O	O
placed	O	O	O	O
upstream	O	O	O	O
of	O	O	O	O
a	O	O	O	O
heterologous	B-DNA	O	O	O
promoter	I-DNA	O	O	O
but	O	O	O	O
also	O	O	O	O
when	O	O	O	O
these	O	O	O	O
enhancers	B-DNA	O	O	O
are	O	O	O	O
switched	O	O	O	O
between	O	O	O	O
their	O	O	O	O
respective	O	O	O	O
LTR	B-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
electrophoretic	O	O	O	O
mobility	O	O	O	O
shift	O	O	O	O
assays	O	O	O	O
,	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
binds	O	O	O	O
to	O	O	O	O
both	O	O	O	O
conserved	O	O	O	O
sites	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
HIV	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
1	I-DNA	O	O	O
transcriptional	I-DNA	O	O	O
enhancer	I-DNA	O	O	O
and	O	O	O	O
only	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
single	O	O	O	O
conserved	O	O	O	O
site	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
HIV	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
2	I-DNA	O	O	O
transcriptional	I-DNA	O	O	O
enhancer	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

Instead	O	O	O	O
of	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
activator	B-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
3	I-protein	O	O	O
binds	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
divergent	O	O	O	O
site	O	O	O	O
in	O	O	O	O
HIV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
2	O	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
conclusion	O	O	O	O
,	O	O	O	O
HIV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
1	O	O	O	O
and	O	O	O	O
HIV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
2	O	O	O	O
are	O	O	O	O
differentially	O	O	O	O
regulated	O	O	O	O
by	O	O	O	O
T	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
signals	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
this	O	O	O	O
difference	O	O	O	O
may	O	O	O	O
account	O	O	O	O
for	O	O	O	O
the	O	O	O	O
longer	O	O	O	O
period	O	O	O	O
of	O	O	O	O
viral	O	O	O	O
latency	O	O	O	O
observed	O	O	O	O
with	O	O	O	O
HIV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
2	O	O	O	O
than	O	O	O	O
with	O	O	O	O
HIV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
1	O	O	O	O
infection	O	O	O	O
.	O	O	O	O

NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
X2	I-protein	O	O	O
that	O	O	O	O
binds	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
DRA	B-DNA	O	O	O
X2	I-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
box	I-DNA	O	O	O
is	O	O	O	O
activator	B-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Expression	O	O	O	O
cloning	O	O	O	O
of	O	O	O	O
c	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
Jun	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Human	B-protein	O	O	O
class	I-protein	O	O	O
II	I-protein	O	O	O
MHC	I-protein	O	O	O
Ag	I-protein	O	O	O
are	O	O	O	O
a	O	O	O	O
family	O	O	O	O
of	O	O	O	O
cell	B-protein	O	O	O
surface	I-protein	O	O	O
glycoproteins	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Their	O	O	O	O
constitutive	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
is	O	O	O	O
limited	O	O	O	O
to	O	O	O	O
B	B-cell_type	O	O	O
lymphocytes	I-cell_type	O	O	O
and	O	O	O	O
thymic	B-cell_type	O	O	O
epithelial	I-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
many	O	O	O	O
other	O	O	O	O
cells	O	O	O	O
their	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
can	O	O	O	O
be	O	O	O	O
induced	O	O	O	O
by	O	O	O	O
IFN	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
gamma	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Conserved	O	O	O	O
upstream	O	O	O	O
promoter	O	O	O	O
sequences	O	O	O	O
regulate	O	O	O	O
this	O	O	O	O
tissue	O	O	O	O
-	O	O	O	O
specific	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
class	B-DNA	O	O	O
II	I-DNA	O	O	O
genes	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
the	O	O	O	O
DRA	B-DNA	O	O	O
promoter	I-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
one	O	O	O	O
of	O	O	O	O
these	O	O	O	O
cis	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
acting	I-DNA	O	O	O
regulatory	I-DNA	O	O	O
motifs	I-DNA	O	O	O
is	O	O	O	O
the	O	O	O	O
X2	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
box	I-DNA	O	O	O
to	O	O	O	O
which	O	O	O	O
nuclear	B-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
X2	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
X2	I-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
binds	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Here	O	O	O	O
,	O	O	O	O
we	O	O	O	O
present	O	O	O	O
the	O	O	O	O
isolation	O	O	O	O
and	O	O	O	O
characterization	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
full	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
length	I-DNA	O	O	O
cDNA	I-DNA	O	O	O
clone	I-DNA	O	O	O
encoding	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
X2	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

This	O	O	O	O
cDNA	B-DNA	O	O	O
clone	I-DNA	O	O	O
was	O	O	O	O
isolated	O	O	O	O
by	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
cDNA	B-DNA	O	O	O
cloning	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
encodes	O	O	O	O
the	O	O	O	O
human	O	B-protein	O	O
c	B-protein	I-protein	O	O
-	I-protein	I-protein	O	O
Jun	I-protein	I-protein	O	O
protein	O	I-protein	O	O
,	O	O	O	O
which	O	O	O	O
together	O	O	O	O
with	O	O	O	O
c	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
Fos	I-protein	O	O	O
forms	O	O	O	O
the	O	O	O	O
heterodimeric	B-protein	O	O	O
activator	I-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
transcription	I-protein	O	O	O
complex	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Whereas	O	O	O	O
c	B-protein	B-protein	O	O
-	I-protein	I-protein	O	O
Fos	I-protein	I-protein	O	O
/	B-protein	I-protein	O	O
c	I-protein	I-protein	O	O
-	I-protein	I-protein	O	O
Jun	I-protein	I-protein	O	O
heterodimers	O	I-protein	O	O
do	O	O	O	O
not	O	O	O	O
exist	O	O	O	O
in	O	O	O	O
B	B-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
,	O	O	O	O
they	O	O	O	O
form	O	O	O	O
and	O	O	O	O
bind	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
X2	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
box	I-DNA	O	O	O
in	O	O	O	O
class	B-cell_line	O	O	O
II	I-cell_line	O	O	O
nonexpressing	I-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
.	O	O	O	O

Thus	O	O	O	O
,	O	O	O	O
c	B-protein	B-protein	O	O
-	I-protein	I-protein	O	O
Fos	I-protein	I-protein	O	O
/	B-protein	I-protein	O	O
c	I-protein	I-protein	O	O
-	I-protein	I-protein	O	O
Jun	I-protein	I-protein	O	O
heterodimers	O	I-protein	O	O
might	O	O	O	O
contribute	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
repression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
DRA	B-DNA	O	O	O
gene	I-DNA	O	O	O
expression	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Synthesis	O	O	O	O
of	O	O	O	O
4	O	O	O	O
,	O	O	O	O
19	O	O	O	O
-	O	O	O	O
disubstituted	O	O	O	O
derivatives	O	O	O	O
of	O	O	O	O
DOC	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Radioreceptor	O	O	O	O
assay	O	O	O	O
of	O	O	O	O
some	O	O	O	O
corticosteroid	O	O	O	O
derivatives	O	O	O	O
in	O	O	O	O
human	B-cell_type	O	O	O
mononuclear	I-cell_type	O	O	O
leukocytes	I-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

Several	O	O	O	O
new	O	O	O	O
4	O	O	O	O
,	O	O	O	O
19	O	O	O	O
-	O	O	O	O
substituted	O	O	O	O
steroids	O	O	O	O
and	O	O	O	O
previously	O	O	O	O
synthesized	O	O	O	O
corticosteroids	O	O	O	O
were	O	O	O	O
assayed	O	O	O	O
for	O	O	O	O
affinity	O	O	O	O
to	O	O	O	O
type	B-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
receptors	I-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
human	B-cell_type	O	O	O
mononuclear	I-cell_type	O	O	O
leukocytes	I-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

11	O	O	O	O
beta	O	O	O	O
,	O	O	O	O
19	O	O	O	O
-	O	O	O	O
epoxy	O	O	O	O
-	O	O	O	O
4	O	O	O	O
,	O	O	O	O
21	O	O	O	O
-	O	O	O	O
dihydroxypregn	O	O	O	O
-	O	O	O	O
4	O	O	O	O
-	O	O	O	O
ene	O	O	O	O
-	O	O	O	O
3	O	O	O	O
,	O	O	O	O
20	O	O	O	O
-	O	O	O	O
dione	O	O	O	O
(	O	O	O	O
2	O	O	O	O
)	O	O	O	O
was	O	O	O	O
hydrogenated	O	O	O	O
with	O	O	O	O
Pd	O	O	O	O
-	O	O	O	O
C	O	O	O	O
to	O	O	O	O
yield	O	O	O	O
a	O	O	O	O
mixture	O	O	O	O
of	O	O	O	O
all	O	O	O	O
four	O	O	O	O
dihydro	O	O	O	O
derivatives	O	O	O	O
5	O	O	O	O
,	O	O	O	O
accompanied	O	O	O	O
by	O	O	O	O
4	O	O	O	O
,	O	O	O	O
21	O	O	O	O
-	O	O	O	O
diacetoxy	O	O	O	O
-	O	O	O	O
11	O	O	O	O
beta	O	O	O	O
,	O	O	O	O
19	O	O	O	O
-	O	O	O	O
epoxy	O	O	O	O
-	O	O	O	O
3	O	O	O	O
-	O	O	O	O
hydroxypregnan	O	O	O	O
-	O	O	O	O
20	O	O	O	O
-	O	O	O	O
one	O	O	O	O
(	O	O	O	O
6	O	O	O	O
)	O	O	O	O
and	O	O	O	O
21	O	O	O	O
-	O	O	O	O
acetoxy	O	O	O	O
-	O	O	O	O
11	O	O	O	O
beta	O	O	O	O
,	O	O	O	O
19	O	O	O	O
-	O	O	O	O
epoxy	O	O	O	O
-	O	O	O	O
4	O	O	O	O
-	O	O	O	O
hydroxypregnane	O	O	O	O
-	O	O	O	O
3	O	O	O	O
,	O	O	O	O
20	O	O	O	O
-	O	O	O	O
dione	O	O	O	O
(	O	O	O	O
7	O	O	O	O
)	O	O	O	O
.	O	O	O	O

With	O	O	O	O
hot	O	O	O	O
acetic	O	O	O	O
+	O	O	O	O
p	O	O	O	O
-	O	O	O	O
toluenesulfonic	O	O	O	O
acid	O	O	O	O
5	O	O	O	O
underwent	O	O	O	O
rearrangement	O	O	O	O
to	O	O	O	O
21	O	O	O	O
-	O	O	O	O
acetoxy	O	O	O	O
-	O	O	O	O
11	O	O	O	O
beta	O	O	O	O
,	O	O	O	O
19	O	O	O	O
-	O	O	O	O
epoxypregn	O	O	O	O
-	O	O	O	O
5	O	O	O	O
-	O	O	O	O
ene	O	O	O	O
-	O	O	O	O
4	O	O	O	O
,	O	O	O	O
20	O	O	O	O
-	O	O	O	O
dione	O	O	O	O
(	O	O	O	O
8	O	O	O	O
)	O	O	O	O
Pd	O	O	O	O
-	O	O	O	O
C	O	O	O	O
hydrogenation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
3	O	O	O	O
,	O	O	O	O
21	O	O	O	O
-	O	O	O	O
diacetoxy	O	O	O	O
-	O	O	O	O
5	O	O	O	O
beta	O	O	O	O
,	O	O	O	O
19	O	O	O	O
-	O	O	O	O
cyclopregna	O	O	O	O
-	O	O	O	O
2	O	O	O	O
,	O	O	O	O
9	O	O	O	O
(	O	O	O	O
11	O	O	O	O
)	O	O	O	O
-	O	O	O	O
diene	O	O	O	O
-	O	O	O	O
4	O	O	O	O
,	O	O	O	O
20	O	O	O	O
-	O	O	O	O
dione	O	O	O	O
(	O	O	O	O
10	O	O	O	O
)	O	O	O	O
gave	O	O	O	O
3	O	O	O	O
,	O	O	O	O
21	O	O	O	O
-	O	O	O	O
diacetoxy	O	O	O	O
-	O	O	O	O
5	O	O	O	O
beta	O	O	O	O
,	O	O	O	O
19	O	O	O	O
-	O	O	O	O
cyclopregn	O	O	O	O
-	O	O	O	O
5	O	O	O	O
-	O	O	O	O
ene	O	O	O	O
-	O	O	O	O
4	O	O	O	O
,	O	O	O	O
20	O	O	O	O
-	O	O	O	O
dione	O	O	O	O
(	O	O	O	O
11	O	O	O	O
)	O	O	O	O
and	O	O	O	O
the	O	O	O	O
9	O	O	O	O
,	O	O	O	O
11	O	O	O	O
-	O	O	O	O
dihydro	O	O	O	O
derivative	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
latter	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Treatment	O	O	O	O
of	O	O	O	O
10	O	O	O	O
with	O	O	O	O
warm	O	O	O	O
HCl	O	O	O	O
furnished	O	O	O	O
19	O	O	O	O
-	O	O	O	O
chloro	O	O	O	O
-	O	O	O	O
4	O	O	O	O
,	O	O	O	O
21	O	O	O	O
-	O	O	O	O
dihydroxypregna	O	O	O	O
-	O	O	O	O
4	O	O	O	O
,	O	O	O	O
9	O	O	O	O
(	O	O	O	O
11	O	O	O	O
)	O	O	O	O
-	O	O	O	O
diene	O	O	O	O
-	O	O	O	O
3	O	O	O	O
,	O	O	O	O
20	O	O	O	O
-	O	O	O	O
dione	O	O	O	O
(	O	O	O	O
13	O	O	O	O
)	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Pd	O	O	O	O
-	O	O	O	O
C	O	O	O	O
hydrogenation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
its	O	O	O	O
diacetate	O	O	O	O
14	O	O	O	O
afforded	O	O	O	O
the	O	O	O	O
4	O	O	O	O
,	O	O	O	O
5	O	O	O	O
-	O	O	O	O
dihydro	O	O	O	O
derivative	O	O	O	O
18	O	O	O	O
,	O	O	O	O
19	O	O	O	O
-	O	O	O	O
chloro	O	O	O	O
-	O	O	O	O
21	O	O	O	O
-	O	O	O	O
acetoxypregn	O	O	O	O
-	O	O	O	O
9	O	O	O	O
(	O	O	O	O
11	O	O	O	O
)	O	O	O	O
-	O	O	O	O
en	O	O	O	O
-	O	O	O	O
20	O	O	O	O
-	O	O	O	O
one	O	O	O	O
(	O	O	O	O
15	O	O	O	O
)	O	O	O	O
,	O	O	O	O
its	O	O	O	O
4	O	O	O	O
-	O	O	O	O
acetoxy	O	O	O	O
derivative	O	O	O	O
16	O	O	O	O
and	O	O	O	O
the	O	O	O	O
3	O	O	O	O
,	O	O	O	O
4	O	O	O	O
-	O	O	O	O
diacetoxy	O	O	O	O
derivative	O	O	O	O
17	O	O	O	O
.	O	O	O	O

When	O	O	O	O
tested	O	O	O	O
in	O	O	O	O
a	O	O	O	O
radioreceptor	O	O	O	O
assay	O	O	O	O
in	O	O	O	O
human	B-cell_type	O	O	O
mononuclear	I-cell_type	O	O	O
leukocytes	I-cell_type	O	O	O
the	O	O	O	O
synthesized	O	O	O	O
compounds	O	O	O	O
showed	O	O	O	O
only	O	O	O	O
low	O	O	O	O
relative	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
affinities	O	O	O	O
(	O	O	O	O
RBA	O	O	O	O
)	O	O	O	O
to	O	O	O	O
type	B-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
receptor	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
highest	O	O	O	O
being	O	O	O	O
0	O	O	O	O
.	O	O	O	O
72	O	O	O	O
%	O	O	O	O
for	O	O	O	O
13	O	O	O	O
(	O	O	O	O
aldosterone	O	O	O	O
=	O	O	O	O
100	O	O	O	O
%	O	O	O	O
)	O	O	O	O
.	O	O	O	O

For	O	O	O	O
comparison	O	O	O	O
,	O	O	O	O
other	O	O	O	O
RBA	O	O	O	O
in	O	O	O	O
this	O	O	O	O
system	O	O	O	O
were	O	O	O	O
:	O	O	O	O
19	O	O	O	O
-	O	O	O	O
noraldosterone	O	O	O	O
,	O	O	O	O
20	O	O	O	O
%	O	O	O	O
;	O	O	O	O
18	O	O	O	O
-	O	O	O	O
deoxyaldosterone	O	O	O	O
,	O	O	O	O
5	O	O	O	O
.	O	O	O	O
8	O	O	O	O
%	O	O	O	O
;	O	O	O	O
18	O	O	O	O
-	O	O	O	O
deoxy	O	O	O	O
-	O	O	O	O
19	O	O	O	O
-	O	O	O	O
noraldosterone	O	O	O	O
,	O	O	O	O
4	O	O	O	O
.	O	O	O	O
7	O	O	O	O
%	O	O	O	O
;	O	O	O	O
18	O	O	O	O
,	O	O	O	O
21	O	O	O	O
-	O	O	O	O
anhydroaldosterone	O	O	O	O
,	O	O	O	O
0	O	O	O	O
.	O	O	O	O
37	O	O	O	O
%	O	O	O	O
;	O	O	O	O
17	O	O	O	O
-	O	O	O	O
isoaldosterone	O	O	O	O
,	O	O	O	O
7	O	O	O	O
.	O	O	O	O
6	O	O	O	O
%	O	O	O	O
and	O	O	O	O
apoaldosterone	O	O	O	O
,	O	O	O	O
4	O	O	O	O
.	O	O	O	O
3	O	O	O	O
%	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Cell	O	O	O	O
type	O	O	O	O
specificity	O	O	O	O
and	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
requirements	O	O	O	O
for	O	O	O	O
NFAT	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
nuclear	B-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
of	O	O	O	O
activated	B-cell_type	O	O	O
T	I-cell_type	O	O	O
-	I-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
)	O	O	O	O
transcriptional	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
determined	O	O	O	O
by	O	O	O	O
a	O	O	O	O
new	O	O	O	O
method	O	O	O	O
using	O	O	O	O
transgenic	O	O	O	O
mice	O	O	O	O
to	O	O	O	O
assay	O	O	O	O
transcriptional	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
of	O	O	O	O
an	O	O	O	O
individual	O	O	O	O
nuclear	B-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Nuclear	B-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
of	O	O	O	O
activated	B-cell_type	O	O	O
T	I-cell_type	O	O	O
-	I-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
(	O	O	O	O
NFAT	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
is	O	O	O	O
a	O	O	O	O
transcription	B-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
which	O	O	O	O
is	O	O	O	O
considered	O	O	O	O
to	O	O	O	O
be	O	O	O	O
an	O	O	O	O
important	O	O	O	O
regulator	O	O	O	O
in	O	O	O	O
early	O	O	O	O
T	O	O	O	O
-	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
have	O	O	O	O
developed	O	O	O	O
a	O	O	O	O
system	O	O	O	O
to	O	O	O	O
monitor	O	O	O	O
the	O	O	O	O
transcriptional	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
of	O	O	O	O
NFAT	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
at	O	O	O	O
the	O	O	O	O
single	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
level	O	O	O	O
in	O	O	O	O
whole	O	O	O	O
animals	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
system	O	O	O	O
is	O	O	O	O
based	O	O	O	O
on	O	O	O	O
the	O	O	O	O
use	O	O	O	O
of	O	O	O	O
an	O	O	O	O
oligomerized	O	O	O	O
NFAT	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
binding	O	O	O	O
motif	O	O	O	O
that	O	O	O	O
directs	O	O	O	O
transcription	B-protein	O	O	O
of	I-protein	O	O	O
SV40	I-protein	O	O	O
T	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
antigen	I-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
transgenic	O	O	O	O
mice	O	O	O	O
.	O	O	O	O

This	O	O	O	O
report	O	O	O	O
represents	O	O	O	O
the	O	O	O	O
first	O	O	O	O
demonstration	O	O	O	O
that	O	O	O	O
a	O	O	O	O
multimerized	O	O	O	O
short	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
motif	O	O	O	O
can	O	O	O	O
function	O	O	O	O
appropriately	O	O	O	O
in	O	O	O	O
transgenic	O	O	O	O
mice	O	O	O	O
.	O	O	O	O

NFAT	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
activity	O	O	O	O
had	O	O	O	O
previously	O	O	O	O
been	O	O	O	O
thought	O	O	O	O
to	O	O	O	O
be	O	O	O	O
confined	O	O	O	O
to	O	O	O	O
activated	B-cell_type	O	O	O
T	I-cell_type	O	O	O
-	I-cell_type	O	O	O
lymphocytes	I-cell_type	O	O	O
upon	O	O	O	O
release	O	O	O	O
of	O	O	O	O
intracellular	B-cell_type	O	O	O
calcium	I-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

By	O	O	O	O
targeting	O	O	O	O
NFAT	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
-	O	O	O	O
dependent	O	O	O	O
gene	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
in	O	O	O	O
transgenic	O	O	O	O
mice	O	O	O	O
we	O	O	O	O
discovered	O	O	O	O
new	O	O	O	O
sites	O	O	O	O
of	O	O	O	O
NFAT	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
activity	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Besides	O	O	O	O
in	O	O	O	O
T	B-cell_type	O	O	O
-	I-cell_type	O	O	O
lymphocytes	I-cell_type	O	O	O
NFAT	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
activity	O	O	O	O
could	O	O	O	O
also	O	O	O	O
be	O	O	O	O
induced	O	O	O	O
in	O	O	O	O
T	B-cell_type	O	O	O
-	I-cell_type	O	O	O
lymphocyte	I-cell_type	O	O	O
-	I-cell_type	O	O	O
depleted	I-cell_type	O	O	O
spleen	I-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
and	O	O	O	O
purified	B-cell_type	O	O	O
B	I-cell_type	O	O	O
-	I-cell_type	O	O	O
lymphocytes	I-cell_type	O	O	O
and	O	O	O	O
requires	O	O	O	O
agents	O	O	O	O
that	O	O	O	O
both	O	O	O	O
release	O	O	O	O
intracellular	O	O	O	O
calcium	O	O	O	O
and	O	O	O	O
activate	O	O	O	O
protein	B-protein	O	O	O
kinase	I-protein	O	O	O
C	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

A	O	O	O	O
difference	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
time	O	O	O	O
course	O	O	O	O
of	O	O	O	O
appearance	O	O	O	O
of	O	O	O	O
NFAT	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
activity	O	O	O	O
between	O	O	O	O
T	B-cell_type	O	O	O
-	I-cell_type	O	O	O
lymphocytes	I-cell_type	O	O	O
and	O	O	O	O
non	B-cell_type	O	O	O
-	I-cell_type	O	O	O
T	I-cell_type	O	O	O
-	I-cell_type	O	O	O
lymphocytes	I-cell_type	O	O	O
was	O	O	O	O
revealed	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Constitutive	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
was	O	O	O	O
observed	O	O	O	O
in	O	O	O	O
a	O	O	O	O
small	O	O	O	O
population	O	O	O	O
of	O	O	O	O
cells	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
dermis	O	O	O	O
and	O	O	O	O
some	O	O	O	O
mice	O	O	O	O
have	O	O	O	O
developed	O	O	O	O
skin	O	O	O	O
lesions	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Interestingly	O	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
tissue	O	O	O	O
pattern	O	O	O	O
of	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
NFAT	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
activity	O	O	O	O
resembles	O	O	O	O
the	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
pattern	O	O	O	O
described	O	O	O	O
for	O	O	O	O
HIV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
LTR	O	O	O	O
/	O	O	O	O
tat	O	O	O	O
transgenic	O	O	O	O
mice	O	O	O	O
(	O	O	O	O
Vogel	O	O	O	O
,	O	O	O	O
J	O	O	O	O
.	O	O	O	O
,	O	O	O	O
Hinrichs	O	O	O	O
,	O	O	O	O
S	O	O	O	O
.	O	O	O	O
H	O	O	O	O
.	O	O	O	O
,	O	O	O	O
Reynolds	O	O	O	O
,	O	O	O	O
R	O	O	O	O
.	O	O	O	O
K	O	O	O	O
.	O	O	O	O
,	O	O	O	O
Luciw	O	O	O	O
,	O	O	O	O
P	O	O	O	O
.	O	O	O	O
A	O	O	O	O
.	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
Jay	O	O	O	O
,	O	O	O	O
G	O	O	O	O
.	O	O	O	O
(	O	O	O	O
1988	O	O	O	O
)	O	O	O	O
Nature	O	O	O	O
335	O	O	O	O
,	O	O	O	O
606	O	O	O	O
-	O	O	O	O
611	O	O	O	O
)	O	O	O	O
.	O	O	O	O

This	O	O	O	O
similarity	O	O	O	O
in	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
and	O	O	O	O
the	O	O	O	O
fact	O	O	O	O
that	O	O	O	O
NFAT	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
has	O	O	O	O
been	O	O	O	O
shown	O	O	O	O
to	O	O	O	O
bind	O	O	O	O
functional	B-DNA	O	O	O
sequences	I-DNA	O	O	O
in	O	O	O	O
HIV	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
LTR	I-DNA	O	O	O
suggest	O	O	O	O
a	O	O	O	O
role	O	O	O	O
for	O	O	O	O
NFAT	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
dermal	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
HIV	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
LTR	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

A	O	O	O	O
novel	O	O	O	O
T	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
cell	I-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
which	O	O	O	O
recognizes	O	O	O	O
a	O	O	O	O
palindromic	B-DNA	O	O	O
sequence	I-DNA	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
negative	B-DNA	O	O	O
regulatory	I-DNA	O	O	O
element	I-DNA	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
human	B-DNA	O	O	O
immunodeficiency	I-DNA	O	O	O
virus	I-DNA	O	O	O
long	I-DNA	O	O	O
terminal	I-DNA	O	O	O
repeat	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

Two	O	O	O	O
major	B-DNA	O	O	O
protein	I-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
binding	I-DNA	O	O	O
sites	I-DNA	O	O	O
within	O	O	O	O
the	O	O	O	O
negative	B-DNA	O	O	O
regulatory	I-DNA	O	O	O
element	I-DNA	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
human	B-DNA	O	O	O
immunodeficiency	I-DNA	O	O	O
virus	I-DNA	O	O	O
type	I-DNA	O	O	O
1	I-DNA	O	O	O
long	I-DNA	O	O	O
terminal	I-DNA	O	O	O
repeat	I-DNA	O	O	O
have	O	O	O	O
been	O	O	O	O
identified	O	O	O	O
.	O	O	O	O

One	O	O	O	O
(	O	O	O	O
site	B-DNA	O	O	O
B	I-DNA	O	O	O
)	O	O	O	O
contained	O	O	O	O
a	O	O	O	O
palindromic	B-DNA	O	O	O
sequence	I-DNA	O	O	O
with	O	O	O	O
homology	O	O	O	O
to	O	O	O	O
steroid	B-DNA	O	O	O
/	I-DNA	O	O	O
thyroid	I-DNA	O	O	O
hormone	I-DNA	O	O	O
response	I-DNA	O	O	O
elements	I-DNA	O	O	O
but	O	O	O	O
was	O	O	O	O
distinct	O	O	O	O
from	O	O	O	O
previously	O	O	O	O
described	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
sites	O	O	O	O
of	O	O	O	O
this	O	O	O	O
class	O	O	O	O
.	O	O	O	O

A	O	O	O	O
novel	O	O	O	O
T	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
cell	I-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
recognized	O	O	O	O
the	O	O	O	O
palindromic	B-DNA	O	O	O
sequence	I-DNA	O	O	O
within	O	O	O	O
site	B-DNA	O	O	O
B	I-DNA	O	O	O
and	O	O	O	O
also	O	O	O	O
bound	O	O	O	O
estrogen	O	O	O	O
-	O	O	O	O
or	O	O	O	O
thyroid	O	O	O	O
hormone	O	O	O	O
-	O	O	O	O
response	O	O	O	O
elements	O	O	O	O
with	O	O	O	O
lower	O	O	O	O
affinity	O	O	O	O
.	O	O	O	O

A	O	O	O	O
7	O	O	O	O
-	O	O	O	O
base	O	O	O	O
-	O	O	O	O
pair	O	O	O	O
mutation	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
site	B-DNA	B-DNA	O	O
B	I-DNA	I-DNA	O	O
palindrome	O	I-DNA	O	O
,	O	O	O	O
which	O	O	O	O
destroyed	O	O	O	O
protein	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
,	O	O	O	O
resulted	O	O	O	O
in	O	O	O	O
increased	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
from	O	O	O	O
the	O	O	O	O
human	B-DNA	O	O	O
immunodeficiency	I-DNA	O	O	O
virus	I-DNA	O	O	O
type	I-DNA	O	O	O
1	I-DNA	O	O	O
long	I-DNA	O	O	O
terminal	I-DNA	O	O	O
repeat	I-DNA	O	O	O
in	O	O	O	O
T	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

Progesterone	O	O	O	O
suppression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
pregnancy	B-cell_type	O	O	O
lymphocytes	I-cell_type	O	O	O
is	O	O	O	O
not	O	O	O	O
mediated	O	O	O	O
by	O	O	O	O
glucocorticoid	O	O	O	O
effect	O	O	O	O
.	O	O	O	O

This	O	O	O	O
study	O	O	O	O
investigated	O	O	O	O
whether	O	O	O	O
the	O	O	O	O
suppressive	O	O	O	O
effect	O	O	O	O
of	O	O	O	O
progesterone	O	O	O	O
on	O	O	O	O
pregnancy	B-cell_type	O	O	O
lymphocytes	I-cell_type	O	O	O
is	O	O	O	O
mediated	O	O	O	O
by	O	O	O	O
specific	O	O	O	O
progesterone	B-protein	O	O	O
receptors	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
effects	O	O	O	O
of	O	O	O	O
a	O	O	O	O
competitive	O	O	O	O
progesterone	O	O	O	O
antagonist	O	O	O	O
(	O	O	O	O
RU486	O	O	O	O
)	O	O	O	O
and	O	O	O	O
a	O	O	O	O
specific	O	O	O	O
glucocorticoid	B-protein	O	O	O
receptor	I-protein	O	O	O
blocker	O	O	O	O
(	O	O	O	O
RU43044	O	O	O	O
)	O	O	O	O
were	O	O	O	O
tested	O	O	O	O
on	O	O	O	O
the	O	O	O	O
release	O	O	O	O
of	O	O	O	O
a	O	O	O	O
blocking	B-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
by	O	O	O	O
progesterone	O	O	O	O
-	O	O	O	O
treated	O	O	O	O
pregnancy	B-cell_type	O	O	O
lymphocytes	I-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

RU	O	O	O	O
486	O	O	O	O
tested	O	O	O	O
at	O	O	O	O
an	O	O	O	O
equal	O	O	O	O
concentration	O	O	O	O
as	O	O	O	O
progesterone	O	O	O	O
significantly	O	O	O	O
inhibited	O	O	O	O
the	O	O	O	O
production	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
blocking	B-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
while	O	O	O	O
RU	O	O	O	O
43044	O	O	O	O
was	O	O	O	O
without	O	O	O	O
effect	O	O	O	O
.	O	O	O	O

These	O	O	O	O
data	O	O	O	O
suggest	O	O	O	O
that	O	O	O	O
in	O	O	O	O
pregnancy	O	O	O	O
,	O	O	O	O
lymphocyte	O	O	O	O
progesterone	O	O	O	O
acts	O	O	O	O
on	O	O	O	O
specific	O	O	O	O
progesterone	B-protein	O	O	O
receptors	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
glucocorticoid	B-protein	O	O	O
binding	I-protein	O	O	O
sites	I-protein	O	O	O
are	O	O	O	O
not	O	O	O	O
involved	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
56	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
59	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kilodalton	I-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
identified	O	O	O	O
in	O	O	O	O
untransformed	B-protein	O	O	O
steroid	I-protein	O	O	O
receptor	I-protein	O	O	O
complexes	I-protein	O	O	O
is	O	O	O	O
a	O	O	O	O
unique	B-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
that	O	O	O	O
exists	O	O	O	O
in	O	O	O	O
cytosol	O	O	O	O
in	O	O	O	O
a	O	O	O	O
complex	O	O	O	O
with	O	O	O	O
both	O	O	O	O
the	O	O	O	O
70	O	O	O	O
-	O	O	O	O
and	O	O	O	O
90	O	O	O	O
-	O	O	O	O
kilodalton	O	O	O	O
heat	O	O	O	O
shock	O	O	O	O
proteins	O	O	O	O
.	O	O	O	O

It	O	O	O	O
has	O	O	O	O
previously	O	O	O	O
been	O	O	O	O
shown	O	O	O	O
that	O	O	O	O
9S	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
untransformed	O	O	O	O
progestin	O	O	O	O
,	O	O	O	O
estrogen	O	O	O	O
,	O	O	O	O
androgen	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
glucocorticoid	O	O	O	O
receptor	O	O	O	O
complexes	O	O	O	O
in	O	O	O	O
rabbit	O	O	O	O
uterine	O	O	O	O
and	O	O	O	O
liver	O	O	O	O
cytosols	O	O	O	O
contain	O	O	O	O
a	O	O	O	O
59	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kDa	I-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
[	O	O	O	O
Tai	O	O	O	O
,	O	O	O	O
P	O	O	O	O
.	O	O	O	O
K	O	O	O	O
.	O	O	O	O
,	O	O	O	O
Maeda	O	O	O	O
,	O	O	O	O
Y	O	O	O	O
.	O	O	O	O
,	O	O	O	O
Nakao	O	O	O	O
,	O	O	O	O
K	O	O	O	O
.	O	O	O	O
,	O	O	O	O
Wakim	O	O	O	O
,	O	O	O	O
N	O	O	O	O
.	O	O	O	O
G	O	O	O	O
.	O	O	O	O
,	O	O	O	O
Duhring	O	O	O	O
,	O	O	O	O
J	O	O	O	O
.	O	O	O	O
L	O	O	O	O
.	O	O	O	O
,	O	O	O	O
&	O	O	O	O
Faber	O	O	O	O
,	O	O	O	O
L	O	O	O	O
.	O	O	O	O
E	O	O	O	O
.	O	O	O	O
(	O	O	O	O
1986	O	O	O	O
)	O	O	O	O
Biochemistry	O	O	O	O
25	O	O	O	O
,	O	O	O	O
5269	O	O	O	O
-	O	O	O	O
5275	O	O	O	O
]	O	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
this	O	O	O	O
work	O	O	O	O
we	O	O	O	O
show	O	O	O	O
that	O	O	O	O
the	O	O	O	O
monoclonal	B-protein	O	O	O
antibody	I-protein	O	O	O
KN	I-protein	O	O	O
382	I-protein	O	O	O
/	I-protein	O	O	O
EC1	I-protein	O	O	O
raised	O	O	O	O
against	O	O	O	O
the	O	O	O	O
rabbit	B-protein	O	O	O
59	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kDa	I-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
reacts	O	O	O	O
with	O	O	O	O
9S	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
untransformed	B-protein	O	O	O
glucocorticoid	I-protein	O	O	O
receptor	I-protein	O	O	O
complexes	I-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
cytosol	O	O	O	O
prepared	O	O	O	O
from	O	O	O	O
human	B-cell_line	O	O	O
IM	I-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
9	I-cell_line	O	O	O
lymphocytes	I-cell_line	O	O	O
but	O	O	O	O
not	O	O	O	O
with	O	O	O	O
4S	B-protein	O	O	O
salt	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
transformed	I-protein	O	O	O
receptors	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
human	O	O	O	O
protein	O	O	O	O
recognized	O	O	O	O
by	O	O	O	O
the	O	O	O	O
EC1	B-protein	O	O	O
antibody	I-protein	O	O	O
is	O	O	O	O
a	O	O	O	O
56	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kDa	I-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
p56	B-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
of	O	O	O	O
moderate	O	O	O	O
abundance	O	O	O	O
located	O	O	O	O
predominantly	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
cytoplasm	O	O	O	O
by	O	O	O	O
indirect	O	O	O	O
immunofluorescence	O	O	O	O
.	O	O	O	O

There	O	O	O	O
are	O	O	O	O
at	O	O	O	O
least	O	O	O	O
six	O	O	O	O
isomorphs	B-protein	O	O	O
of	O	O	O	O
p56	B-protein	O	O	O
by	O	O	O	O
two	O	O	O	O
-	O	O	O	O
dimensional	O	O	O	O
gel	O	O	O	O
analysis	O	O	O	O
.	O	O	O	O

N	O	O	O	O
-	O	O	O	O
Terminal	O	O	O	O
sequencing	O	O	O	O
(	O	O	O	O
20	O	O	O	O
amino	O	O	O	O
acids	O	O	O	O
)	O	O	O	O
shows	O	O	O	O
that	O	O	O	O
p56	B-protein	O	O	O
is	O	O	O	O
a	O	O	O	O
unique	B-protein	O	O	O
human	I-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

When	O	O	O	O
p56	B-protein	O	O	O
is	O	O	O	O
immunoadsorbed	O	O	O	O
from	O	O	O	O
IM	B-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
9	I-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
cytosol	O	O	O	O
,	O	O	O	O
both	O	O	O	O
the	O	O	O	O
70	O	O	O	O
-	O	O	O	O
and	O	O	O	O
90	O	O	O	O
-	O	O	O	O
kDa	O	O	O	O
heat	O	O	O	O
shock	O	O	O	O
proteins	O	O	O	O
are	O	O	O	O
coadsorbed	O	O	O	O
in	O	O	O	O
an	O	O	O	O
immune	O	O	O	O
-	O	O	O	O
specific	O	O	O	O
manner	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Neither	O	O	O	O
heat	B-protein	O	O	O
shock	I-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
reacts	O	O	O	O
directly	O	O	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
EC1	B-protein	O	O	O
antibody	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
conclude	O	O	O	O
that	O	O	O	O
p56	B-protein	O	O	O
exists	O	O	O	O
in	O	O	O	O
cytosol	O	O	O	O
in	O	O	O	O
a	O	O	O	O
higher	O	O	O	O
order	O	O	O	O
complex	O	O	O	O
containing	O	O	O	O
hsp70	B-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
hsp90	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
both	O	O	O	O
of	O	O	O	O
which	O	O	O	O
in	O	O	O	O
turn	O	O	O	O
have	O	O	O	O
been	O	O	O	O
found	O	O	O	O
to	O	O	O	O
be	O	O	O	O
associated	O	O	O	O
with	O	O	O	O
untransformed	B-protein	O	O	O
steroid	I-protein	O	O	O
receptors	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Sequence	O	O	O	O
-	O	O	O	O
specific	O	O	O	O
DNA	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
proto	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
oncoprotein	I-protein	O	O	O
ets	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
defines	O	O	O	O
a	O	O	O	O
transcriptional	B-DNA	O	O	O
activator	I-DNA	O	O	O
sequence	I-DNA	O	O	O
within	O	O	O	O
the	O	O	O	O
long	B-DNA	O	O	O
terminal	I-DNA	O	O	O
repeat	I-DNA	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
Moloney	O	O	O	O
murine	O	O	O	O
sarcoma	O	O	O	O
virus	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
ets	B-DNA	O	O	O
proto	I-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
oncogene	I-DNA	O	O	O
family	I-DNA	O	O	O
is	O	O	O	O
a	O	O	O	O
group	O	O	O	O
of	O	O	O	O
sequence	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
related	I-DNA	O	O	O
genes	I-DNA	O	O	O
whose	O	O	O	O
normal	O	O	O	O
cellular	O	O	O	O
function	O	O	O	O
is	O	O	O	O
unknown	O	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
a	O	O	O	O
study	O	O	O	O
of	O	O	O	O
cellular	B-protein	O	O	O
proteins	I-protein	O	O	O
involved	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
transcriptional	O	O	O	O
regulation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
murine	O	O	O	O
retroviruses	O	O	O	O
in	O	O	O	O
T	B-cell_type	O	O	O
lymphocytes	I-cell_type	O	O	O
,	O	O	O	O
we	O	O	O	O
have	O	O	O	O
discovered	O	O	O	O
that	O	O	O	O
a	O	O	O	O
member	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
ets	B-DNA	O	O	O
gene	I-DNA	O	O	O
family	I-DNA	O	O	O
encodes	O	O	O	O
a	O	O	O	O
sequence	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
specific	I-protein	O	O	O
DNA	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
binding	I-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

A	O	O	O	O
mouse	O	B-DNA	O	O
ets	B-protein	I-DNA	O	O
-	I-protein	I-DNA	O	O
1	I-protein	I-DNA	O	O
cDNA	O	I-DNA	O	O
clone	O	I-DNA	O	O
was	O	O	O	O
obtained	O	O	O	O
by	O	O	O	O
screening	O	O	O	O
a	O	O	O	O
mouse	B-DNA	O	O	O
thymus	I-DNA	O	O	O
cDNA	I-DNA	O	O	O
expression	I-DNA	O	O	O
library	I-DNA	O	O	O
with	O	O	O	O
a	O	O	O	O
double	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
stranded	I-DNA	O	O	O
oligonucleotide	I-DNA	O	O	O
probe	I-DNA	O	O	O
representing	O	O	O	O
20	O	O	O	O
bp	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
Moloney	O	O	O	O
murine	O	O	O	O
sarcoma	O	O	O	O
virus	O	O	O	O
(	O	O	O	O
MSV	O	O	O	O
)	O	O	O	O
long	B-DNA	O	O	O
terminal	I-DNA	O	O	O
repeat	I-DNA	O	O	O
(	O	O	O	O
LTR	B-DNA	O	O	O
)	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
cDNA	B-DNA	O	O	O
sequence	I-DNA	O	O	O
has	O	O	O	O
an	O	O	O	O
813	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
bp	I-DNA	O	O	O
open	I-DNA	O	O	O
reading	I-DNA	O	O	O
frame	I-DNA	O	O	O
(	O	O	O	O
ORF	B-DNA	O	O	O
)	O	O	O	O
whose	O	O	O	O
predicted	O	O	O	O
amino	B-protein	O	O	O
acid	I-protein	O	O	O
sequence	I-protein	O	O	O
is	O	O	O	O
97	O	O	O	O
.	O	O	O	O
6	O	O	O	O
%	O	O	O	O
identical	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
272	B-protein	O	O	O
carboxy	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
terminal	I-protein	O	O	O
amino	I-protein	O	O	O
acids	I-protein	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
human	O	B-protein	O	O
ets	B-protein	I-protein	O	O
-	I-protein	I-protein	O	O
1	I-protein	I-protein	O	O
protein	O	I-protein	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
ORF	B-DNA	O	O	O
was	O	O	O	O
expressed	O	O	O	O
in	O	O	O	O
bacteria	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
the	O	O	O	O
30	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kD	I-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
product	I-protein	O	O	O
was	O	O	O	O
shown	O	O	O	O
to	O	O	O	O
bind	O	O	O	O
DNA	B-DNA	O	O	O
in	O	O	O	O
a	O	O	O	O
sequence	O	O	O	O
-	O	O	O	O
specific	O	O	O	O
manner	O	O	O	O
by	O	O	O	O
mobility	O	O	O	O
-	O	O	O	O
shift	O	O	O	O
assays	O	O	O	O
,	O	O	O	O
Southwestern	O	O	O	O
blot	O	O	O	O
analysis	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
methylation	O	O	O	O
interference	O	O	O	O
.	O	O	O	O

A	O	O	O	O
mutant	B-DNA	O	O	O
LTR	I-DNA	O	O	O
containing	O	O	O	O
four	O	O	O	O
base	O	O	O	O
pair	O	O	O	O
substitutions	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
ets	B-protein	B-DNA	O	O
-	I-protein	I-DNA	O	O
1	I-protein	I-DNA	O	O
binding	O	I-DNA	O	O
site	O	I-DNA	O	O
was	O	O	O	O
constructed	O	O	O	O
and	O	O	O	O
was	O	O	O	O
shown	O	O	O	O
to	O	O	O	O
have	O	O	O	O
reduced	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
in	O	O	O	O
vitro	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Transcriptional	O	O	O	O
efficiency	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
MSV	B-DNA	O	O	O
LTR	I-DNA	O	O	O
promoter	I-DNA	O	O	O
containing	O	O	O	O
this	O	O	O	O
disrupted	O	O	O	O
ets	B-protein	B-DNA	O	O
-	I-protein	I-DNA	O	O
1	I-protein	I-DNA	O	O
binding	O	I-DNA	O	O
site	O	I-DNA	O	O
was	O	O	O	O
compared	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
of	O	O	O	O
a	O	O	O	O
wild	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
type	I-DNA	O	O	O
promoter	I-DNA	O	O	O
in	O	O	O	O
mouse	O	B-cell_type	O	O
T	B-cell_type	I-cell_type	O	O
lymphocytes	I-cell_type	I-cell_type	O	O
in	O	O	O	O
culture	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
15	O	O	O	O
-	O	O	O	O
to	O	O	O	O
20	O	O	O	O
-	O	O	O	O
fold	O	O	O	O
reduction	O	O	O	O
in	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
a	O	O	O	O
reporter	B-DNA	O	O	O
gene	I-DNA	O	O	O
was	O	O	O	O
observed	O	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
propose	O	O	O	O
that	O	O	O	O
ets	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
functions	O	O	O	O
as	O	O	O	O
a	O	O	O	O
transcriptional	O	O	O	O
activator	O	O	O	O
of	O	O	O	O
mammalian	O	O	O	O
type	O	O	O	O
-	O	O	O	O
C	O	O	O	O
retroviruses	O	O	O	O
and	O	O	O	O
speculate	O	O	O	O
that	O	O	O	O
ets	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
related	I-DNA	O	O	O
genes	I-DNA	O	O	O
constitute	O	O	O	O
a	O	O	O	O
new	O	O	O	O
group	O	O	O	O
of	O	O	O	O
eukaryotic	B-protein	O	O	O
DNA	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
binding	I-protein	O	O	O
proteins	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Type	B-protein	O	O	O
II	I-protein	O	O	O
estrogen	I-protein	O	O	O
binding	I-protein	O	O	O
sites	I-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
human	B-cell_type	O	O	O
peripheral	I-cell_type	O	O	O
blood	I-cell_type	O	O	O
mononuclear	I-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
:	O	O	O	O
variations	O	O	O	O
during	O	O	O	O
the	O	O	O	O
menstrual	O	O	O	O
cycle	O	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
have	O	O	O	O
previously	O	O	O	O
reported	O	O	O	O
that	O	O	O	O
human	B-cell_type	O	O	O
peripheral	I-cell_type	O	O	O
blood	I-cell_type	O	O	O
mononuclear	I-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
(	O	O	O	O
PBMC	B-cell_type	O	O	O
)	O	O	O	O
contain	O	O	O	O
type	O	O	O	O
II	B-protein	O	O	O
estrogen	I-protein	O	O	O
binding	I-protein	O	O	O
sites	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
type	B-protein	O	O	O
II	I-protein	O	O	O
EBS	I-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
this	O	O	O	O
study	O	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
fluctuations	O	O	O	O
of	O	O	O	O
type	B-protein	O	O	O
II	I-protein	O	O	O
EBS	I-protein	O	O	O
during	O	O	O	O
the	O	O	O	O
menstrual	O	O	O	O
cycle	O	O	O	O
were	O	O	O	O
analyzed	O	O	O	O
in	O	O	O	O
6	O	O	O	O
normally	O	O	O	O
menstruating	O	O	O	O
women	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Approximately	O	O	O	O
3	O	O	O	O
times	O	O	O	O
higher	O	O	O	O
levels	O	O	O	O
of	O	O	O	O
type	B-protein	O	O	O
II	I-protein	O	O	O
EBS	I-protein	O	O	O
were	O	O	O	O
found	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
periovulatory	O	O	O	O
period	O	O	O	O
with	O	O	O	O
respect	O	O	O	O
to	O	O	O	O
both	O	O	O	O
follicular	O	O	O	O
and	O	O	O	O
luteal	O	O	O	O
phases	O	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
postmenopausal	O	O	O	O
women	O	O	O	O
the	O	O	O	O
mean	O	O	O	O
type	B-protein	O	O	O
II	I-protein	O	O	O
EBS	I-protein	O	O	O
levels	O	O	O	O
were	O	O	O	O
similar	O	O	O	O
to	O	O	O	O
those	O	O	O	O
observed	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
follicular	O	O	O	O
phase	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
cycle	O	O	O	O
.	O	O	O	O

However	O	O	O	O
,	O	O	O	O
in	O	O	O	O
3	O	O	O	O
postmenopausal	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
a	O	O	O	O
short	O	O	O	O
course	O	O	O	O
of	O	O	O	O
estrogen	O	O	O	O
or	O	O	O	O
tamoxifen	O	O	O	O
resulted	O	O	O	O
in	O	O	O	O
a	O	O	O	O
marked	O	O	O	O
increase	O	O	O	O
of	O	O	O	O
type	B-protein	O	O	O
II	I-protein	O	O	O
EBS	I-protein	O	O	O
levels	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Tamoxifen	O	O	O	O
was	O	O	O	O
also	O	O	O	O
found	O	O	O	O
to	O	O	O	O
compete	O	O	O	O
with	O	O	O	O
17	O	O	O	O
beta	O	O	O	O
-	O	O	O	O
estradiol	O	O	O	O
for	O	O	O	O
type	B-protein	O	O	O
II	I-protein	O	O	O
EBS	I-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
PBMC	B-cell_type	O	O	O
,	O	O	O	O
although	O	O	O	O
to	O	O	O	O
a	O	O	O	O
lesser	O	O	O	O
extent	O	O	O	O
than	O	O	O	O
diethylstilbestrol	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Mononuclear	B-cell_type	O	O	O
leukocyte	I-cell_type	O	O	O
glucocorticoid	B-protein	O	O	O
receptor	I-protein	O	O	O
binding	O	O	O	O
characteristics	O	O	O	O
and	O	O	O	O
down	O	O	O	O
-	O	O	O	O
regulation	O	O	O	O
in	O	O	O	O
major	O	O	O	O
depression	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Some	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
with	O	O	O	O
major	O	O	O	O
depressive	O	O	O	O
disorder	O	O	O	O
(	O	O	O	O
MDD	O	O	O	O
)	O	O	O	O
have	O	O	O	O
elevated	O	O	O	O
plasma	O	O	O	O
cortisol	O	O	O	O
concentrations	O	O	O	O
and	O	O	O	O
show	O	O	O	O
failure	O	O	O	O
to	O	O	O	O
suppress	O	O	O	O
cortisol	O	O	O	O
secretion	O	O	O	O
upon	O	O	O	O
administration	O	O	O	O
of	O	O	O	O
dexamethasone	O	O	O	O
(	O	O	O	O
DEX	O	O	O	O
)	O	O	O	O
,	O	O	O	O
yet	O	O	O	O
they	O	O	O	O
do	O	O	O	O
not	O	O	O	O
have	O	O	O	O
Cushingoid	O	O	O	O
features	O	O	O	O
.	O	O	O	O

To	O	O	O	O
study	O	O	O	O
whether	O	O	O	O
this	O	O	O	O
represents	O	O	O	O
glucocorticoid	O	O	O	O
(	O	O	O	O
GC	O	O	O	O
)	O	O	O	O
resistance	O	O	O	O
,	O	O	O	O
[	O	O	O	O
3H	O	O	O	O
]	O	O	O	O
-	O	O	O	O
DEX	O	O	O	O
-	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
assays	O	O	O	O
were	O	O	O	O
used	O	O	O	O
to	O	O	O	O
measure	O	O	O	O
,	O	O	O	O
in	O	O	O	O
vitro	O	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
GC	B-protein	O	O	O
receptor	I-protein	O	O	O
affinity	O	O	O	O
(	O	O	O	O
1	O	O	O	O
/	O	O	O	O
Kd	O	O	O	O
)	O	O	O	O
and	O	O	O	O
number	O	O	O	O
(	O	O	O	O
Bmax	O	O	O	O
)	O	O	O	O
in	O	O	O	O
mononuclear	B-cell_type	O	O	O
leukocytes	I-cell_type	O	O	O
of	O	O	O	O
11	O	O	O	O
MDD	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
and	O	O	O	O
15	O	O	O	O
control	O	O	O	O
subjects	O	O	O	O
.	O	O	O	O

No	O	O	O	O
receptor	O	O	O	O
abnormalities	O	O	O	O
were	O	O	O	O
detected	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
MDD	O	O	O	O
group	O	O	O	O
;	O	O	O	O
thus	O	O	O	O
any	O	O	O	O
cellular	O	O	O	O
defect	O	O	O	O
leading	O	O	O	O
to	O	O	O	O
a	O	O	O	O
lack	O	O	O	O
of	O	O	O	O
responsiveness	O	O	O	O
to	O	O	O	O
GC	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
MDD	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
,	O	O	O	O
if	O	O	O	O
present	O	O	O	O
,	O	O	O	O
probably	O	O	O	O
lies	O	O	O	O
beyond	O	O	O	O
the	O	O	O	O
initial	O	O	O	O
receptor	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
.	O	O	O	O

DEX	O	O	O	O
(	O	O	O	O
1	O	O	O	O
.	O	O	O	O
0	O	O	O	O
mg	O	O	O	O
orally	O	O	O	O
)	O	O	O	O
was	O	O	O	O
administered	O	O	O	O
to	O	O	O	O
study	O	O	O	O
in	O	O	O	O
vivo	B-protein	O	O	O
GC	I-protein	O	O	O
receptor	I-protein	O	O	O
down	O	O	O	O
-	O	O	O	O
regulation	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Compared	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
control	O	O	O	O
group	O	O	O	O
,	O	O	O	O
fewer	O	O	O	O
depressed	O	O	O	O
subjects	O	O	O	O
down	O	O	O	O
-	O	O	O	O
regulated	O	O	O	O
Bmax	O	O	O	O
after	O	O	O	O
DEX	O	O	O	O
.	O	O	O	O

By	O	O	O	O
paired	O	O	O	O
t	O	O	O	O
-	O	O	O	O
test	O	O	O	O
,	O	O	O	O
Bmax	O	O	O	O
decreased	O	O	O	O
significantly	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
control	O	O	O	O
group	O	O	O	O
but	O	O	O	O
not	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
depressed	O	O	O	O
group	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Receptor	O	O	O	O
number	O	O	O	O
on	O	O	O	O
the	O	O	O	O
control	O	O	O	O
day	O	O	O	O
did	O	O	O	O
not	O	O	O	O
correlate	O	O	O	O
significantly	O	O	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
degree	O	O	O	O
of	O	O	O	O
receptor	O	O	O	O
down	O	O	O	O
-	O	O	O	O
regulation	O	O	O	O
,	O	O	O	O
severity	O	O	O	O
of	O	O	O	O
depression	O	O	O	O
or	O	O	O	O
cortisol	O	O	O	O
concentrations	O	O	O	O
across	O	O	O	O
all	O	O	O	O
the	O	O	O	O
subjects	O	O	O	O
.	O	O	O	O

These	O	O	O	O
results	O	O	O	O
do	O	O	O	O
not	O	O	O	O
lend	O	O	O	O
support	O	O	O	O
to	O	O	O	O
previous	O	O	O	O
reports	O	O	O	O
suggesting	O	O	O	O
that	O	O	O	O
GC	O	O	O	O
resistance	O	O	O	O
in	O	O	O	O
MDD	O	O	O	O
results	O	O	O	O
from	O	O	O	O
a	O	O	O	O
GC	O	O	O	O
receptor	O	O	O	O
-	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
abnormality	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
they	O	O	O	O
emphasize	O	O	O	O
the	O	O	O	O
importance	O	O	O	O
of	O	O	O	O
considering	O	O	O	O
receptor	O	O	O	O
studies	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
context	O	O	O	O
of	O	O	O	O
GC	O	O	O	O
-	O	O	O	O
mediated	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
processes	O	O	O	O
in	O	O	O	O
order	O	O	O	O
to	O	O	O	O
identify	O	O	O	O
the	O	O	O	O
exact	O	O	O	O
cellular	O	O	O	O
defect	O	O	O	O
(	O	O	O	O
s	O	O	O	O
)	O	O	O	O
leading	O	O	O	O
to	O	O	O	O
GC	O	O	O	O
resistance	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Ras	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
related	I-protein	O	O	O
GTP	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
binding	I-protein	O	O	O
proteins	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
leukocyte	B-cell_type	O	O	O
signal	O	O	O	O
transduction	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Many	O	O	O	O
aspects	O	O	O	O
of	O	O	O	O
leukocyte	B-cell_type	O	O	O
function	O	O	O	O
are	O	O	O	O
regulated	O	O	O	O
by	O	O	O	O
both	O	O	O	O
heterotrimeric	B-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
Ras	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
related	I-protein	O	O	O
GTP	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
binding	I-protein	O	O	O
proteins	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
but	O	O	O	O
there	O	O	O	O
is	O	O	O	O
little	O	O	O	O
definite	O	O	O	O
information	O	O	O	O
about	O	O	O	O
their	O	O	O	O
roles	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
specialized	O	O	O	O
processes	O	O	O	O
utilized	O	O	O	O
by	O	O	O	O
leukocytes	B-cell_type	O	O	O
for	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
killing	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Recent	O	O	O	O
progress	O	O	O	O
in	O	O	O	O
understanding	O	O	O	O
the	O	O	O	O
regulation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
phagocyte	B-protein	O	O	O
NADPH	I-protein	O	O	O
oxidase	I-protein	O	O	O
by	O	O	O	O
the	O	O	O	O
Rac	B-protein	O	O	O
GTP	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
binding	I-protein	O	O	O
proteins	I-protein	O	O	O
provides	O	O	O	O
a	O	O	O	O
basis	O	O	O	O
for	O	O	O	O
defining	O	O	O	O
the	O	O	O	O
operational	O	O	O	O
characteristics	O	O	O	O
of	O	O	O	O
one	O	O	O	O
such	O	O	O	O
phagocyte	O	O	O	O
system	O	O	O	O
.	O	O	O	O

It	O	O	O	O
is	O	O	O	O
clear	O	O	O	O
from	O	O	O	O
various	O	O	O	O
studies	O	O	O	O
that	O	O	O	O
the	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
NADPH	B-protein	O	O	O
oxidase	I-protein	O	O	O
can	O	O	O	O
be	O	O	O	O
modulated	O	O	O	O
through	O	O	O	O
the	O	O	O	O
regulation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
GTP	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
GDP	I-protein	O	O	O
state	I-protein	O	O	O
of	O	O	O	O
Rac	B-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Proteins	O	O	O	O
exist	O	O	O	O
in	O	O	O	O
leukocytes	B-cell_type	O	O	O
able	O	O	O	O
to	O	O	O	O
modify	O	O	O	O
GTP	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
binding	I-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
function	O	O	O	O
in	O	O	O	O
this	O	O	O	O
manner	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
their	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
may	O	O	O	O
be	O	O	O	O
regulated	O	O	O	O
by	O	O	O	O
signals	O	O	O	O
generated	O	O	O	O
on	O	O	O	O
phagocyte	O	O	O	O
stimulation	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Proteins	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
Ras	B-protein	O	O	O
superfamily	I-protein	O	O	O
are	O	O	O	O
likely	O	O	O	O
to	O	O	O	O
be	O	O	O	O
involved	O	O	O	O
in	O	O	O	O
a	O	O	O	O
variety	O	O	O	O
of	O	O	O	O
normal	O	O	O	O
phagocyte	O	O	O	O
functions	O	O	O	O
through	O	O	O	O
their	O	O	O	O
ability	O	O	O	O
to	O	O	O	O
modulate	O	O	O	O
the	O	O	O	O
assembly	O	O	O	O
of	O	O	O	O
actin	B-protein	O	O	O
filaments	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
direct	O	O	O	O
vesicle	O	O	O	O
trafficking	O	O	O	O
and	O	O	O	O
fusion	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
so	O	O	O	O
forth	O	O	O	O
.	O	O	O	O

BSAP	B-protein	O	O	O
:	O	O	O	O
a	O	O	O	O
key	O	O	O	O
regulator	O	O	O	O
of	O	O	O	O
B	B-cell_type	O	O	O
-	I-cell_type	O	O	O
cell	I-cell_type	O	O	O
development	O	O	O	O
and	O	O	O	O
differentiation	O	O	O	O
.	O	O	O	O

B	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
cell	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
specific	I-protein	O	O	O
activator	I-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
BSAP	B-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
is	O	O	O	O
a	O	O	O	O
recently	O	O	O	O
identified	O	O	O	O
member	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
Pax	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
gene	I-DNA	O	O	O
family	I-DNA	O	O	O
of	O	O	O	O
transcription	B-protein	O	O	O
factors	I-protein	O	O	O
;	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
lymphoid	O	O	O	O
system	O	O	O	O
,	O	O	O	O
BSAP	B-protein	O	O	O
is	O	O	O	O
produced	O	O	O	O
only	O	O	O	O
in	O	O	O	O
B	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

Here	O	O	O	O
,	O	O	O	O
Markus	O	O	O	O
Neurath	O	O	O	O
,	O	O	O	O
Eckhard	O	O	O	O
Stuber	O	O	O	O
and	O	O	O	O
Warren	O	O	O	O
Strober	O	O	O	O
describe	O	O	O	O
the	O	O	O	O
molecular	O	O	O	O
structure	O	O	O	O
of	O	O	O	O
BSAP	B-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
focus	O	O	O	O
on	O	O	O	O
the	O	O	O	O
ability	O	O	O	O
of	O	O	O	O
this	O	O	O	O
protein	O	O	O	O
to	O	O	O	O
regulate	O	O	O	O
the	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
B	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
cell	I-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
specific	I-DNA	O	O	O
genes	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

They	O	O	O	O
propose	O	O	O	O
that	O	O	O	O
BSAP	B-protein	O	O	O
is	O	O	O	O
a	O	O	O	O
key	B-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
of	O	O	O	O
B	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
and	O	O	O	O
that	O	O	O	O
it	O	O	O	O
not	O	O	O	O
only	O	O	O	O
influence	O	O	O	O
B	O	O	O	O
-	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
development	O	O	O	O
but	O	O	O	O
also	O	O	O	O
influences	O	O	O	O
the	O	O	O	O
balance	O	O	O	O
between	O	O	O	O
B	O	O	O	O
-	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
proliferation	O	O	O	O
and	O	O	O	O
immunoglobulin	B-protein	O	O	O
secretion	O	O	O	O
at	O	O	O	O
later	O	O	O	O
stages	O	O	O	O
of	O	O	O	O
B	O	O	O	O
-	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
differentiation	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Down	O	O	O	O
-	O	O	O	O
regulation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
levels	O	O	O	O
in	O	O	O	O
activated	O	O	O	O
human	O	O	O	O
lymphocytes	O	O	O	O
by	O	O	O	O
1	O	O	O	O
,	O	O	O	O
25	O	O	O	O
-	O	O	O	O
dihydroxyvitamin	O	O	O	O
D3	O	O	O	O
[	O	O	O	O
published	O	O	O	O
erratum	O	O	O	O
appears	O	O	O	O
in	O	O	O	O
Proc	O	O	O	O
Natl	O	O	O	O
Acad	O	O	O	O
Sci	O	O	O	O
U	O	O	O	O
S	O	O	O	O
A	O	O	O	O
1996	O	O	O	O
Jan	O	O	O	O
9	O	O	O	O
;	O	O	O	O
93	O	O	O	O
(	O	O	O	O
1	O	O	O	O
)	O	O	O	O
:	O	O	O	O
524	O	O	O	O
]	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
effect	O	O	O	O
of	O	O	O	O
1	O	O	O	O
,	O	O	O	O
25	O	O	O	O
-	O	O	O	O
dihydroxyvitamin	O	O	O	O
D3	O	O	O	O
[	O	O	O	O
1	O	O	O	O
,	O	O	O	O
25	O	O	O	O
(	O	O	O	O
OH	O	O	O	O
)	O	O	O	O
2	O	O	O	O
)	O	O	O	O
D3	O	O	O	O
]	O	O	O	O
,	O	O	O	O
a	O	O	O	O
steroid	O	O	O	O
hormone	O	O	O	O
with	O	O	O	O
immunomodulating	O	O	O	O
properties	O	O	O	O
,	O	O	O	O
on	O	O	O	O
nuclear	B-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
proteins	O	O	O	O
was	O	O	O	O
examined	O	O	O	O
in	O	O	O	O
in	O	B-cell_line	O	O
vitro	O	I-cell_line	O	O
activated	O	I-cell_line	O	O
normal	O	I-cell_line	O	O
human	B-cell_type	I-cell_line	O	O
lymphocytes	I-cell_type	I-cell_line	O	O
by	O	O	O	O
Western	O	O	O	O
blot	O	O	O	O
analysis	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Over	O	O	O	O
a	O	O	O	O
72	O	O	O	O
-	O	O	O	O
hr	O	O	O	O
period	O	O	O	O
of	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
50	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kDa	I-protein	O	O	O
NF	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
p50	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
its	O	O	O	O
precursor	O	O	O	O
,	O	O	O	O
p105	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
was	O	O	O	O
increased	O	O	O	O
progressively	O	O	O	O
.	O	O	O	O

When	O	O	O	O
cells	O	O	O	O
were	O	O	O	O
activated	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
presence	O	O	O	O
of	O	O	O	O
1	O	O	O	O
,	O	O	O	O
25	O	O	O	O
(	O	O	O	O
OH	O	O	O	O
)	O	O	O	O
2D3	O	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
levels	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
mature	O	O	O	O
protein	O	O	O	O
as	O	O	O	O
well	O	O	O	O
as	O	O	O	O
its	O	O	O	O
precursor	O	O	O	O
were	O	O	O	O
decreased	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
effect	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
hormone	O	O	O	O
on	O	O	O	O
the	O	O	O	O
levels	O	O	O	O
of	O	O	O	O
p50	B-protein	O	O	O
was	O	O	O	O
demonstrable	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
cytosolic	O	O	O	O
and	O	O	O	O
nuclear	O	O	O	O
compartments	O	O	O	O
;	O	O	O	O
it	O	O	O	O
required	O	O	O	O
between	O	O	O	O
4	O	O	O	O
and	O	O	O	O
8	O	O	O	O
hr	O	O	O	O
and	O	O	O	O
was	O	O	O	O
specific	O	O	O	O
,	O	O	O	O
as	O	O	O	O
25	O	O	O	O
-	O	O	O	O
hydroxyvitamin	O	O	O	O
D3	O	O	O	O
and	O	O	O	O
24	O	O	O	O
,	O	O	O	O
25	O	O	O	O
-	O	O	O	O
dihydroxyvitamin	O	O	O	O
D3	O	O	O	O
were	O	O	O	O
ineffective	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Besides	O	O	O	O
p50	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
1	O	O	O	O
,	O	O	O	O
25	O	O	O	O
(	O	O	O	O
OH	O	O	O	O
)	O	O	O	O
2D3	O	O	O	O
decreased	O	O	O	O
the	O	O	O	O
levels	O	O	O	O
of	O	O	O	O
another	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
namely	O	O	O	O
c	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
rel	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
addition	O	O	O	O
,	O	O	O	O
1	O	O	O	O
,	O	O	O	O
25	O	O	O	O
(	O	O	O	O
OH	O	O	O	O
)	O	O	O	O
2D3	O	O	O	O
decreased	O	O	O	O
the	O	O	O	O
abundance	O	O	O	O
of	O	O	O	O
a	O	O	O	O
specific	B-protein	O	O	O
DNA	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
complex	I-protein	O	O	O
formed	O	O	O	O
upon	O	O	O	O
incubation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
nuclear	O	O	O	O
extracts	O	O	O	O
from	O	O	O	O
activated	O	O	O	O
lymphocytes	O	O	O	O
with	O	O	O	O
a	O	O	O	O
labeled	O	O	O	O
NF	B-protein	B-protein	O	O
-	I-protein	I-protein	O	O
kappa	I-protein	I-protein	O	O
B	I-protein	I-protein	O	O
DNA	O	I-protein	O	O
binding	O	I-protein	O	O
motif	O	I-protein	O	O
.	O	O	O	O

Further	O	O	O	O
,	O	O	O	O
1	O	O	O	O
,	O	O	O	O
25	O	O	O	O
(	O	O	O	O
OH	O	O	O	O
)	O	O	O	O
2D3	O	O	O	O
inhibited	O	O	O	O
the	O	O	O	O
transcriptional	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
of	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
Jurkat	B-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
transiently	O	O	O	O
transfected	O	O	O	O
with	O	O	O	O
a	O	O	O	O
construct	B-DNA	O	O	O
containing	O	O	O	O
four	O	O	O	O
tandem	B-DNA	O	O	O
repeats	I-DNA	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
NF	B-protein	B-DNA	O	O
-	I-protein	I-DNA	O	O
kappa	I-protein	I-DNA	O	O
B	I-protein	I-DNA	O	O
binding	O	I-DNA	O	O
sequence	O	I-DNA	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
immunoglobulin	B-DNA	O	O	O
kappa	I-DNA	O	O	O
light	I-DNA	O	O	O
chain	I-DNA	O	O	O
gene	I-DNA	O	O	O
linked	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
chloramphenicol	B-protein	B-DNA	O	O
acetyltransferase	I-protein	I-DNA	O	O
reporter	O	I-DNA	O	O
gene	O	I-DNA	O	O
.	O	O	O	O

These	O	O	O	O
observations	O	O	O	O
demonstrate	O	O	O	O
directly	O	O	O	O
that	O	O	O	O
there	O	O	O	O
is	O	O	O	O
de	O	O	O	O
novo	O	O	O	O
synthesis	O	O	O	O
of	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
during	O	O	O	O
human	O	O	O	O
lymphocyte	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
and	O	O	O	O
suggest	O	O	O	O
that	O	O	O	O
this	O	O	O	O
process	O	O	O	O
is	O	O	O	O
hormonally	O	O	O	O
regulated	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
myeloid	B-DNA	O	O	O
zinc	I-DNA	O	O	O
finger	I-DNA	O	O	O
gene	I-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
MZF	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
1	I-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
regulates	O	O	O	O
the	O	O	O	O
CD34	B-DNA	O	O	O
promoter	I-DNA	O	O	O
in	O	O	O	O
vitro	O	O	O	O
.	O	O	O	O

MZF	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
1	I-DNA	O	O	O
is	O	O	O	O
a	O	O	O	O
C2H2	B-DNA	O	O	O
zinc	I-DNA	O	O	O
finger	I-DNA	O	O	O
gene	I-DNA	O	O	O
encoding	O	O	O	O
a	O	O	O	O
putative	B-protein	O	O	O
transcriptional	I-protein	O	O	O
regulator	I-protein	O	O	O
of	O	O	O	O
myeloid	O	O	O	O
differentiation	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
MZF	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
1	I-DNA	O	O	O
protein	O	O	O	O
contains	O	O	O	O
13	O	O	O	O
C2H2	B-protein	O	O	O
zinc	I-protein	O	O	O
fingers	I-protein	O	O	O
arranged	O	O	O	O
in	O	O	O	O
bipartite	O	O	O	O
DNA	B-protein	O	O	O
binding	I-protein	O	O	O
domains	I-protein	O	O	O
containing	O	O	O	O
zinc	B-protein	O	O	O
fingers	I-protein	O	O	O
through	O	O	O	O
4	O	O	O	O
and	O	O	O	O
,	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
carboxy	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
terminus	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
5	O	O	O	O
through	O	O	O	O
13	O	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
previously	O	O	O	O
identified	O	O	O	O
the	O	O	O	O
DNA	B-DNA	O	O	O
consensus	I-DNA	O	O	O
binding	I-DNA	O	O	O
site	I-DNA	O	O	O
recognized	O	O	O	O
by	O	O	O	O
the	O	O	O	O
two	O	O	O	O
DNA	B-protein	O	O	O
binding	I-protein	O	O	O
domains	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

To	O	O	O	O
assess	O	O	O	O
the	O	O	O	O
transcription	O	O	O	O
regulatory	O	O	O	O
function	O	O	O	O
of	O	O	O	O
MZF	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
1	I-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
full	O	O	O	O
-	O	O	O	O
length	O	O	O	O
MZF	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
1	I-DNA	O	O	O
coding	O	O	O	O
region	O	O	O	O
was	O	O	O	O
fused	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
DNA	B-protein	O	O	O
binding	I-protein	O	O	O
domain	I-protein	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
yeast	O	B-protein	O	O
transactivator	O	I-protein	O	O
GAL4	B-protein	I-protein	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
vector	O	O	O	O
was	O	O	O	O
cotransfected	O	O	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
chloramphenicol	B-protein	B-DNA	O	O
acetyl	I-protein	I-DNA	O	O
transferase	I-protein	I-DNA	O	O
(	O	I-DNA	O	O
CAT	O	I-DNA	O	O
)	O	I-DNA	O	O
reporter	O	I-DNA	O	O
gene	O	I-DNA	O	O
regulated	O	O	O	O
by	O	O	O	O
the	O	O	O	O
thymidine	B-protein	B-DNA	O	O
kinase	I-protein	I-DNA	O	O
promoter	O	I-DNA	O	O
containing	O	O	O	O
GAL4	B-protein	B-DNA	O	O
DNA	O	I-DNA	O	O
binding	O	I-DNA	O	O
sites	O	I-DNA	O	O
into	O	O	O	O
NIH	B-cell_line	O	O	O
3T3	I-cell_line	O	O	O
,	O	O	O	O
293	B-cell_line	O	O	O
,	O	O	O	O
K562	B-cell_line	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
Jurkat	B-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
lines	I-cell_line	O	O	O
.	O	O	O	O

MZF	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
1	I-DNA	O	O	O
represses	O	O	O	O
CAT	B-DNA	O	O	O
reporter	I-DNA	O	O	O
gene	I-DNA	O	O	O
expression	O	O	O	O
via	O	O	O	O
GAL4	B-protein	O	O	O
binding	O	O	O	O
sites	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
nonhematopoietic	B-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
lines	I-cell_line	O	O	O
NIH	B-cell_line	O	O	O
3T3	I-cell_line	O	O	O
and	O	O	O	O
293	B-cell_line	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
contrast	O	O	O	O
,	O	O	O	O
MZF	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
1	I-DNA	O	O	O
activates	O	O	O	O
CAT	B-DNA	O	O	O
reporter	I-DNA	O	O	O
gene	I-DNA	O	O	O
expression	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
hematopoietic	B-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
lines	I-cell_line	O	O	O
K562	B-cell_line	O	O	O
and	O	O	O	O
Jurkat	B-cell_line	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
MZF	B-DNA	B-DNA	O	O
-	I-DNA	I-DNA	O	O
1	I-DNA	I-DNA	O	O
binding	O	I-DNA	O	O
sites	O	I-DNA	O	O
are	O	O	O	O
present	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
promoters	B-DNA	O	O	O
of	O	O	O	O
several	O	O	O	O
genes	B-DNA	O	O	O
expressed	O	O	O	O
during	O	O	O	O
myeloid	O	O	O	O
differentiation	O	O	O	O
,	O	O	O	O
including	O	O	O	O
the	O	O	O	O
CD34	B-DNA	O	O	O
promoter	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

MZF	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
1	I-DNA	O	O	O
transcriptional	O	O	O	O
regulation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
this	O	O	O	O
physiologically	B-DNA	O	O	O
relevant	I-DNA	O	O	O
promoter	I-DNA	O	O	O
was	O	O	O	O
assessed	O	O	O	O
in	O	O	O	O
both	O	O	O	O
hematopoietic	B-cell_line	O	O	O
and	O	O	O	O
nonhematopoietic	B-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
lines	I-cell_line	O	O	O
.	O	O	O	O

Recombinant	O	B-protein	O	O
MZF	B-DNA	I-protein	O	O
-	I-DNA	I-protein	O	O
1	I-DNA	I-protein	O	O
protein	O	I-protein	O	O
specifically	O	O	O	O
binds	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
consensus	B-DNA	O	O	O
binding	I-DNA	O	O	O
sites	I-DNA	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
CD34	B-DNA	O	O	O
promoter	I-DNA	O	O	O
in	O	O	O	O
mobility	O	O	O	O
shift	O	O	O	O
assays	O	O	O	O
.	O	O	O	O

MZF	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
1	I-DNA	O	O	O
expression	O	O	O	O
vectors	O	O	O	O
were	O	O	O	O
cotransfected	O	O	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
luciferase	B-DNA	O	O	O
reporter	I-DNA	O	O	O
plasmids	I-DNA	O	O	O
regulated	O	O	O	O
by	O	O	O	O
the	O	O	O	O
CD34	B-DNA	O	O	O
promoter	I-DNA	O	O	O
into	O	O	O	O
both	O	O	O	O
nonhematopoietic	O	O	O	O
and	O	O	O	O
hematopoietic	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
lines	O	O	O	O
.	O	O	O	O

As	O	O	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
heterologous	O	O	O	O
DNA	B-protein	O	O	O
binding	I-protein	O	O	O
domain	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
MZF	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
1	I-DNA	O	O	O
represses	O	O	O	O
reporter	B-DNA	O	O	O
gene	I-DNA	O	O	O
expression	O	O	O	O
in	O	O	O	O
nonhematopoietic	B-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
lines	I-cell_line	O	O	O
and	O	O	O	O
activates	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
in	O	O	O	O
hematopoietic	B-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
lines	I-cell_line	O	O	O
.	O	O	O	O

Activation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
CD34	B-protein	O	O	O
expression	O	O	O	O
in	O	O	O	O
hematopoietic	B-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
lines	I-cell_line	O	O	O
is	O	O	O	O
dependent	O	O	O	O
on	O	O	O	O
the	O	O	O	O
presence	O	O	O	O
of	O	O	O	O
intact	O	O	O	O
MZF	B-DNA	B-DNA	O	O
-	I-DNA	I-DNA	O	O
1	I-DNA	I-DNA	O	O
binding	O	I-DNA	O	O
sites	O	I-DNA	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
type	O	O	O	O
-	O	O	O	O
specific	O	O	O	O
regulation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
CD34	B-DNA	O	O	O
promoter	I-DNA	O	O	O
by	O	O	O	O
MZF	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
1	I-DNA	O	O	O
suggests	O	O	O	O
the	O	O	O	O
presence	O	O	O	O
of	O	O	O	O
tissue	O	O	O	O
-	O	O	O	O
specific	O	O	O	O
regulators	O	O	O	O
/	O	O	O	O
adapters	O	O	O	O
or	O	O	O	O
differential	O	O	O	O
MZF	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
1	I-DNA	O	O	O
modifications	O	O	O	O
that	O	O	O	O
determine	O	O	O	O
MZF	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
1	I-DNA	O	O	O
transcriptional	O	O	O	O
regulatory	O	O	O	O
function	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
murine	O	O	O	O
BCL6	B-DNA	O	O	O
gene	I-DNA	O	O	O
is	O	O	O	O
induced	O	O	O	O
in	O	O	O	O
activated	B-cell_type	O	O	O
lymphocytes	I-cell_type	O	O	O
as	O	O	O	O
an	O	O	O	O
immediate	B-DNA	O	O	O
early	I-DNA	O	O	O
gene	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
chromosomal	O	O	O	O
translocation	O	O	O	O
involving	O	O	O	O
3q27	B-DNA	O	O	O
is	O	O	O	O
often	O	O	O	O
detected	O	O	O	O
in	O	O	O	O
human	B-cell_type	O	O	O
B	I-cell_type	O	O	O
-	I-cell_type	O	O	O
cell	I-cell_type	O	O	O
lymphomas	I-cell_type	O	O	O
,	O	O	O	O
especially	O	O	O	O
diffuse	O	O	O	O
lymphomas	O	O	O	O
with	O	O	O	O
a	O	O	O	O
large	O	O	O	O
-	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
component	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
BCL6	B-DNA	O	O	O
gene	I-DNA	O	O	O
has	O	O	O	O
been	O	O	O	O
isolated	O	O	O	O
from	O	O	O	O
the	O	O	O	O
chromosomal	O	O	O	O
breakpoint	O	O	O	O
in	O	O	O	O
these	O	O	O	O
lymphomas	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Here	O	O	O	O
we	O	O	O	O
cloned	O	O	O	O
the	O	O	O	O
murine	B-protein	B-DNA	O	O
BCL6	I-protein	I-DNA	O	O
(	O	I-DNA	O	O
mBCL6	O	I-DNA	O	O
)	O	I-DNA	O	O
cDNA	O	I-DNA	O	O
from	O	O	O	O
the	O	O	O	O
muscle	B-DNA	O	O	O
cDNA	I-DNA	O	O	O
library	I-DNA	O	O	O
using	O	O	O	O
the	O	O	O	O
human	B-protein	B-DNA	O	O
BCL6	I-protein	I-DNA	O	O
(	O	I-DNA	O	O
hBCL6	O	I-DNA	O	O
)	O	I-DNA	O	O
cDNA	O	I-DNA	O	O
as	O	O	O	O
a	O	O	O	O
probe	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
predicted	O	O	O	O
amino	O	O	O	O
acid	O	O	O	O
sequence	O	O	O	O
was	O	O	O	O
95	O	O	O	O
%	O	O	O	O
identical	O	O	O	O
to	O	O	O	O
that	O	O	O	O
of	O	O	O	O
hBCL6	B-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

It	O	O	O	O
contains	O	O	O	O
six	O	O	O	O
repeats	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
Kruppel	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
like	I-protein	O	O	O
zinc	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
finger	I-protein	O	O	O
motif	I-protein	O	O	O
that	O	O	O	O
are	O	O	O	O
completely	O	O	O	O
identical	O	O	O	O
to	O	O	O	O
those	O	O	O	O
of	O	O	O	O
hBCL6	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
indicating	O	O	O	O
that	O	O	O	O
the	O	O	O	O
BCL6	B-DNA	O	O	O
gene	I-DNA	O	O	O
is	O	O	O	O
well	O	O	O	O
conserved	O	O	O	O
between	O	O	O	O
humans	O	O	O	O
and	O	O	O	O
mice	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
mBCL6	B-DNA	O	O	O
gene	I-DNA	O	O	O
was	O	O	O	O
ubiquitously	O	O	O	O
detected	O	O	O	O
in	O	O	O	O
adult	O	O	O	O
mouse	O	O	O	O
tissues	O	O	O	O
including	O	O	O	O
lymphatic	O	O	O	O
organs	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Furthermore	O	O	O	O
,	O	O	O	O
it	O	O	O	O
was	O	O	O	O
induced	O	O	O	O
in	O	O	O	O
lymphocytes	B-cell_type	O	O	O
activated	O	O	O	O
with	O	O	O	O
phorbol	O	O	O	O
ester	O	O	O	O
and	O	O	O	O
Ca2	O	O	O	O
+	O	O	O	O
ionophore	O	O	O	O
within	O	O	O	O
30	O	O	O	O
min	O	O	O	O
after	O	O	O	O
stimulation	O	O	O	O
.	O	O	O	O

This	O	O	O	O
induction	O	O	O	O
was	O	O	O	O
not	O	O	O	O
inhibited	O	O	O	O
by	O	O	O	O
treatment	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
cells	O	O	O	O
with	O	O	O	O
a	O	O	O	O
protein	O	O	O	O
synthesis	O	O	O	O
inhibitor	O	O	O	O
,	O	O	O	O
cycloheximide	O	O	O	O
.	O	O	O	O

These	O	O	O	O
results	O	O	O	O
suggest	O	O	O	O
that	O	O	O	O
BCL6	B-protein	O	O	O
plays	O	O	O	O
a	O	O	O	O
role	O	O	O	O
in	O	O	O	O
activated	O	B-cell_type	O	O
lymphocytes	B-cell_type	I-cell_type	O	O
as	O	O	O	O
an	O	O	O	O
immediate	O	O	O	O
early	O	O	O	O
gene	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
role	O	O	O	O
of	O	O	O	O
BSAP	B-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
Pax	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
5	I-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
in	O	O	O	O
B	O	O	O	O
-	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
development	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
hierarchy	O	O	O	O
of	O	O	O	O
transcriptional	O	O	O	O
control	O	O	O	O
in	O	O	O	O
B	O	O	O	O
-	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
development	O	O	O	O
has	O	O	O	O
recently	O	O	O	O
been	O	O	O	O
analyzed	O	O	O	O
by	O	O	O	O
targeted	O	O	O	O
gene	O	O	O	O
inactivation	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
mouse	O	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
this	O	O	O	O
manner	O	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
paired	B-DNA	O	O	O
box	I-DNA	O	O	O
containing	I-DNA	O	O	O
gene	I-DNA	O	O	O
Pax	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
5	I-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
encoding	O	O	O	O
the	O	O	O	O
B	B-protein	O	O	O
cell	I-protein	O	O	O
specific	I-protein	O	O	O
transcription	I-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
BSAP	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
has	O	O	O	O
been	O	O	O	O
shown	O	O	O	O
to	O	O	O	O
play	O	O	O	O
a	O	O	O	O
key	O	O	O	O
role	O	O	O	O
in	O	O	O	O
early	O	O	O	O
B	O	O	O	O
lymphopoiesis	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Other	O	O	O	O
experimental	O	O	O	O
strategies	O	O	O	O
have	O	O	O	O
implicated	O	O	O	O
BSAP	B-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
control	O	O	O	O
of	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
proliferation	O	O	O	O
,	O	O	O	O
isotype	O	O	O	O
switching	O	O	O	O
and	O	O	O	O
transcription	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
immunoglobulin	B-protein	B-DNA	O	O
heavy	I-protein	I-DNA	O	O
-	I-protein	I-DNA	O	O
chain	I-protein	I-DNA	O	O
gene	O	I-DNA	O	O
at	O	O	O	O
late	O	O	O	O
stages	O	O	O	O
of	O	O	O	O
B	O	O	O	O
-	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
differentiation	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
DNA	O	O	O	O
-	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
properties	O	O	O	O
of	O	O	O	O
two	B-protein	O	O	O
heat	I-protein	O	O	O
shock	I-protein	O	O	O
factors	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
HSF1	B-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
HSF3	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
are	O	O	O	O
induced	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
avian	B-cell_line	O	O	O
erythroblast	I-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
line	I-cell_line	O	O	O
HD6	B-cell_line	O	O	O
.	O	O	O	O

Avian	O	O	O	O
cells	O	O	O	O
express	O	O	O	O
three	O	O	O	O
heat	B-protein	B-DNA	O	O
shock	I-protein	I-DNA	O	O
transcription	I-protein	I-DNA	O	O
factor	I-protein	I-DNA	O	O
(	O	I-DNA	O	O
HSF	B-protein	I-DNA	O	O
)	O	I-DNA	O	O
genes	O	I-DNA	O	O
corresponding	O	O	O	O
to	O	O	O	O
a	O	O	O	O
novel	B-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
HSF3	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
homologs	O	O	O	O
of	O	O	O	O
mouse	O	O	O	O
and	O	O	O	O
human	O	O	O	O
HSF1	B-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
HSF2	B-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Analysis	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
biochemical	O	O	O	O
and	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
biological	O	O	O	O
properties	O	O	O	O
of	O	O	O	O
these	O	O	O	O
HSFs	B-protein	O	O	O
reveals	O	O	O	O
that	O	O	O	O
HSF3	B-protein	O	O	O
has	O	O	O	O
properties	O	O	O	O
in	O	O	O	O
common	O	O	O	O
with	O	O	O	O
both	O	O	O	O
HSF1	B-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
HSF2	B-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
yet	O	O	O	O
has	O	O	O	O
features	O	O	O	O
which	O	O	O	O
are	O	O	O	O
distinct	O	O	O	O
from	O	O	O	O
both	O	O	O	O
.	O	O	O	O

HSF3	B-protein	O	O	O
is	O	O	O	O
constitutively	O	O	O	O
expressed	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
erythroblast	B-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
line	I-cell_line	O	O	O
HD6	I-cell_line	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
lymphoblast	B-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
line	I-cell_line	O	O	O
MSB	I-cell_line	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
embryo	B-cell_line	O	O	O
fibroblasts	I-cell_line	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
yet	O	O	O	O
its	O	O	O	O
DNA	O	O	O	O
-	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
is	O	O	O	O
induced	O	O	O	O
only	O	O	O	O
upon	O	O	O	O
exposure	O	O	O	O
of	O	O	O	O
HD6	O	O	O	O
cells	O	O	O	O
to	O	O	O	O
heat	O	O	O	O
shock	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Acquisition	O	O	O	O
of	O	O	O	O
HSF3	B-protein	O	O	O
DNA	O	O	O	O
-	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
in	O	O	O	O
HD6	B-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
is	O	O	O	O
accompanied	O	O	O	O
by	O	O	O	O
oligomerization	O	O	O	O
from	O	O	O	O
a	O	O	O	O
non	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
DNA	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
binding	I-protein	O	O	O
dimer	I-protein	O	O	O
to	O	O	O	O
a	O	O	O	O
DNA	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
binding	I-protein	O	O	O
trimer	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
whereas	O	O	O	O
the	O	O	O	O
effect	O	O	O	O
of	O	O	O	O
heat	O	O	O	O
shock	O	O	O	O
on	O	O	O	O
HSF1	B-protein	O	O	O
is	O	O	O	O
oligomerization	O	O	O	O
of	O	O	O	O
an	O	O	O	O
inert	B-protein	O	O	O
monomer	I-protein	O	O	O
to	O	O	O	O
a	O	O	O	O
DNA	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
binding	I-protein	O	O	O
trimer	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Induction	O	O	O	O
of	O	O	O	O
HSF3	B-protein	O	O	O
DNA	O	O	O	O
-	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
is	O	O	O	O
delayed	O	O	O	O
compared	O	O	O	O
with	O	O	O	O
that	O	O	O	O
of	O	O	O	O
HSF1	B-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

As	O	O	O	O
occurs	O	O	O	O
for	O	O	O	O
HSF1	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
heat	O	O	O	O
shock	O	O	O	O
leads	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
translocation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
HSF3	B-protein	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
nucleus	O	O	O	O
.	O	O	O	O

HSF	O	O	O	O
exhibits	O	O	O	O
the	O	O	O	O
properties	O	O	O	O
of	O	O	O	O
a	O	O	O	O
transcriptional	B-protein	O	O	O
activator	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
as	O	O	O	O
judged	O	O	O	O
from	O	O	O	O
the	O	O	O	O
stimulatory	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
of	O	O	O	O
transiently	O	B-protein	O	O
overexpressed	O	I-protein	O	O
HSF3	B-protein	I-protein	O	O
measured	O	O	O	O
by	O	O	O	O
using	O	O	O	O
a	O	O	O	O
heat	B-DNA	O	O	O
shock	I-DNA	O	O	O
element	I-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
containing	I-DNA	O	O	O
reporter	I-DNA	O	O	O
construct	I-DNA	O	O	O
and	O	O	O	O
as	O	O	O	O
independently	O	O	O	O
assayed	O	O	O	O
by	O	O	O	O
the	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
of	O	O	O	O
a	O	O	O	O
chimeric	O	B-protein	O	O
GAL4	B-protein	I-protein	O	O
-	B-protein	I-protein	O	O
HSF3	I-protein	I-protein	O	O
protein	O	I-protein	O	O
on	O	O	O	O
a	O	O	O	O
GAL4	B-protein	B-DNA	O	O
reporter	O	I-DNA	O	O
construct	O	I-DNA	O	O
.	O	O	O	O

These	O	O	O	O
results	O	O	O	O
reveal	O	O	O	O
that	O	O	O	O
HSF3	B-protein	O	O	O
is	O	O	O	O
negatively	O	O	O	O
regulated	O	O	O	O
in	O	O	O	O
avian	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
and	O	O	O	O
acquires	O	O	O	O
DNA	O	O	O	O
-	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
in	O	O	O	O
certain	O	O	O	O
cells	O	O	O	O
upon	O	O	O	O
heat	O	O	O	O
shock	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Direct	O	O	O	O
demonstration	O	O	O	O
of	O	O	O	O
NFATp	B-protein	O	O	O
dephosphorylation	O	O	O	O
and	O	O	O	O
nuclear	O	O	O	O
localization	O	O	O	O
in	O	O	O	O
activated	O	B-cell_line	O	O
HT	B-cell_line	I-cell_line	O	O
-	I-cell_line	I-cell_line	O	O
2	I-cell_line	I-cell_line	O	O
cells	I-cell_line	I-cell_line	O	O
using	O	O	O	O
a	O	O	O	O
specific	O	O	O	O
NFATp	B-protein	B-protein	O	O
polyclonal	O	I-protein	O	O
antibody	O	I-protein	O	O
.	O	O	O	O

Nuclear	B-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
of	I-protein	O	O	O
activated	I-protein	O	O	O
T	I-protein	O	O	O
cells	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
NFAT	B-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
regulates	O	O	O	O
transcription	O	O	O	O
of	O	O	O	O
a	O	O	O	O
number	O	O	O	O
of	O	O	O	O
cytokine	B-protein	O	O	O
genes	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
NFAT	B-protein	O	O	O
DNA	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
is	O	O	O	O
stimulated	O	O	O	O
following	O	O	O	O
T	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Several	O	O	O	O
lines	O	O	O	O
of	O	O	O	O
evidence	O	O	O	O
have	O	O	O	O
suggested	O	O	O	O
that	O	O	O	O
NFAT	B-protein	O	O	O
is	O	O	O	O
a	O	O	O	O
substrate	O	O	O	O
for	O	O	O	O
calcineurin	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
a	O	O	O	O
serine	B-protein	O	O	O
/	I-protein	O	O	O
threonine	I-protein	O	O	O
phosphatase	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Using	O	O	O	O
a	O	O	O	O
polyclonal	O	O	O	O
antibody	O	O	O	O
to	O	O	O	O
murine	O	B-protein	O	O
NFATp	B-protein	I-protein	O	O
,	O	O	O	O
Western	O	O	O	O
blot	O	O	O	O
analysis	O	O	O	O
of	O	O	O	O
various	O	O	O	O
mouse	O	O	O	O
tissues	O	O	O	O
demonstrated	O	O	O	O
that	O	O	O	O
the	O	O	O	O
110	O	O	O	O
-	O	O	O	O
130	O	O	O	O
-	O	O	O	O
kDa	O	O	O	O
NFATp	B-protein	B-protein	O	O
protein	O	I-protein	O	O
was	O	O	O	O
highly	O	O	O	O
expressed	O	O	O	O
in	O	O	O	O
thymus	O	O	O	O
and	O	O	O	O
spleen	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Treatment	O	O	O	O
of	O	O	O	O
immunoprecipitated	O	O	O	O
NFATp	B-protein	O	O	O
from	O	O	O	O
untreated	O	O	O	O
HT	B-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
2	I-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
with	O	O	O	O
calcineurin	B-protein	O	O	O
resulted	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
dephosphorylation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
NFATp	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
demonstrating	O	O	O	O
that	O	O	O	O
NFATp	B-protein	O	O	O
is	O	O	O	O
an	O	O	O	O
in	O	O	O	O
vitro	O	O	O	O
substrate	O	O	O	O
for	O	O	O	O
calcineurin	B-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

NFATp	B-protein	O	O	O
immunoprecipitated	O	O	O	O
from	O	O	O	O
32P	O	B-cell_line	O	O
-	O	I-cell_line	O	O
labeled	O	I-cell_line	O	O
HT	B-cell_line	I-cell_line	O	O
-	I-cell_line	I-cell_line	O	O
2	I-cell_line	I-cell_line	O	O
cells	I-cell_line	I-cell_line	O	O
migrated	O	O	O	O
as	O	O	O	O
an	O	O	O	O
approximately	O	O	O	O
120	O	O	O	O
-	O	O	O	O
kDa	O	O	O	O
protein	O	O	O	O
that	O	O	O	O
was	O	O	O	O
localized	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
cytosol	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
cells	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Treatment	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
cells	O	O	O	O
with	O	O	O	O
ionomycin	O	O	O	O
resulted	O	O	O	O
in	O	O	O	O
a	O	O	O	O
decrease	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
molecular	O	O	O	O
weight	O	O	O	O
of	O	O	O	O
NFATp	B-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
a	O	O	O	O
loss	O	O	O	O
of	O	O	O	O
32P	O	O	O	O
,	O	O	O	O
consistent	O	O	O	O
with	O	O	O	O
NFATp	B-protein	O	O	O
dephosphorylation	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
dephosphorylation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
NFATp	B-protein	O	O	O
was	O	O	O	O
accompanied	O	O	O	O
by	O	O	O	O
localization	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
protein	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
nuclear	O	O	O	O
fraction	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Both	O	O	O	O
of	O	O	O	O
these	O	O	O	O
events	O	O	O	O
were	O	O	O	O
blocked	O	O	O	O
by	O	O	O	O
preincubation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
cells	O	O	O	O
with	O	O	O	O
FK506	O	O	O	O
,	O	O	O	O
a	O	O	O	O
calcineurin	B-protein	O	O	O
inhibitor	O	O	O	O
,	O	O	O	O
consistent	O	O	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
hypothesis	O	O	O	O
that	O	O	O	O
NFATp	B-protein	O	O	O
is	O	O	O	O
a	O	O	O	O
calcineurin	B-protein	O	O	O
substrate	O	O	O	O
in	O	O	O	O
cells	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Activation	O	O	O	O
and	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
nuclear	B-protein	O	O	O
factors	I-protein	O	O	O
of	O	O	O	O
activated	B-cell_type	O	O	O
T	I-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
,	O	O	O	O
NFATp	B-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
NFATc	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
in	O	O	O	O
human	B-cell_type	O	O	O
natural	I-cell_type	O	O	O
killer	I-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
:	O	O	O	O
regulation	O	O	O	O
upon	O	O	O	O
CD16	B-protein	O	O	O
ligand	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
putative	O	O	O	O
factors	O	O	O	O
that	O	O	O	O
couple	O	O	O	O
the	O	O	O	O
signal	O	O	O	O
transduction	O	O	O	O
from	O	O	O	O
surface	O	O	O	O
receptors	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
cytokine	B-protein	O	O	O
synthesis	O	O	O	O
in	O	O	O	O
natural	B-cell_type	O	O	O
killer	I-cell_type	O	O	O
(	I-cell_type	O	O	O
NK	I-cell_type	O	O	O
)	I-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
have	O	O	O	O
not	O	O	O	O
been	O	O	O	O
elucidated	O	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
report	O	O	O	O
here	O	O	O	O
that	O	O	O	O
the	O	O	O	O
nuclear	B-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
of	O	O	O	O
activated	B-cell_type	O	O	O
T	I-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
(	O	O	O	O
NFATp	B-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
,	O	O	O	O
a	O	O	O	O
cyclosporin	B-protein	O	O	O
A	I-protein	O	O	O
(	I-protein	O	O	O
CsA	I-protein	O	O	O
)	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
sensitive	I-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
that	O	O	O	O
regulates	O	O	O	O
the	O	O	O	O
transcription	O	O	O	O
of	O	O	O	O
several	O	O	O	O
cytokines	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
mediates	O	O	O	O
CD16	B-protein	O	O	O
-	O	O	O	O
induced	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
cytokine	B-protein	O	O	O
genes	I-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
human	B-cell_type	O	O	O
NK	I-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

CD16	B-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
Fc	B-protein	O	O	O
gamma	I-protein	O	O	O
RIIIA	I-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
-	O	O	O	O
induced	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
cytokine	B-RNA	O	O	O
mRNA	I-RNA	O	O	O
in	O	O	O	O
NK	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
occurs	O	O	O	O
via	O	O	O	O
a	O	O	O	O
CsA	O	O	O	O
-	O	O	O	O
sensitive	O	O	O	O
and	O	O	O	O
Ca	O	O	O	O
(	O	O	O	O
2	O	O	O	O
+	O	O	O	O
)	O	O	O	O
-	O	O	O	O
dependent	O	O	O	O
mechanism	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Stimulation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
NK	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
with	O	O	O	O
CD16	B-protein	O	O	O
ligands	O	O	O	O
induces	O	O	O	O
NFAT	B-protein	O	O	O
-	O	O	O	O
like	O	O	O	O
DNA	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
nuclear	O	O	O	O
extracts	O	O	O	O
from	O	O	O	O
these	O	O	O	O
cells	O	O	O	O
,	O	O	O	O
as	O	O	O	O
detected	O	O	O	O
in	O	O	O	O
electrophoretic	O	O	O	O
mobility	O	O	O	O
shift	O	O	O	O
assays	O	O	O	O
.	O	O	O	O

This	O	O	O	O
occurs	O	O	O	O
with	O	O	O	O
fast	O	O	O	O
kinetics	O	O	O	O
after	O	O	O	O
stimulation	O	O	O	O
,	O	O	O	O
via	O	O	O	O
a	O	O	O	O
CsA	O	O	O	O
-	O	O	O	O
sensitive	O	O	O	O
and	O	O	O	O
Ca	O	O	O	O
(	O	O	O	O
2	O	O	O	O
+	O	O	O	O
)	O	O	O	O
-	O	O	O	O
dependent	O	O	O	O
mechanism	O	O	O	O
that	O	O	O	O
does	O	O	O	O
not	O	O	O	O
require	O	O	O	O
de	O	O	O	O
novo	O	O	O	O
protein	O	O	O	O
synthesis	O	O	O	O
.	O	O	O	O

NK	B-protein	O	O	O
cell	I-protein	O	O	O
NFAT	I-protein	O	O	O
is	O	O	O	O
present	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
cytosol	O	O	O	O
of	O	O	O	O
nonstimulated	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
,	O	O	O	O
migrates	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
nucleus	O	O	O	O
upon	O	O	O	O
stimulation	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
can	O	O	O	O
associate	O	O	O	O
with	O	O	O	O
AP	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Two	O	O	O	O
distinct	O	O	O	O
molecules	O	O	O	O
,	O	O	O	O
NFATp	B-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
NFATc	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
have	O	O	O	O
been	O	O	O	O
reported	O	O	O	O
to	O	O	O	O
mediate	O	O	O	O
NFAT	B-protein	O	O	O
activity	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
results	O	O	O	O
of	O	O	O	O
supershift	O	O	O	O
assays	O	O	O	O
using	O	O	O	O
NFATp	O	O	O	O
-	O	O	O	O
and	O	O	O	O
NFATc	O	O	O	O
-	O	O	O	O
specific	O	O	O	O
antibodies	O	O	O	O
indicate	O	O	O	O
that	O	O	O	O
NK	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
early	O	O	O	O
after	O	O	O	O
CD16	B-protein	O	O	O
ligand	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
involves	O	O	O	O
primarily	O	O	O	O
,	O	O	O	O
if	O	O	O	O
not	O	O	O	O
exclusively	O	O	O	O
,	O	O	O	O
NFATp	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
Western	O	O	O	O
blot	O	O	O	O
analysis	O	O	O	O
shows	O	O	O	O
that	O	O	O	O
this	O	O	O	O
has	O	O	O	O
the	O	O	O	O
same	O	O	O	O
electrophoretic	O	O	O	O
mobility	O	O	O	O
(	O	O	O	O
approximately	O	O	O	O
120	O	O	O	O
kD	O	O	O	O
)	O	O	O	O
as	O	O	O	O
that	O	O	O	O
of	O	O	O	O
T	B-cell_type	O	O	O
lymphocytes	I-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

NK	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
do	O	O	O	O
not	O	O	O	O
express	O	O	O	O
NFATc	B-protein	O	O	O
constitutively	O	O	O	O
,	O	O	O	O
but	O	O	O	O
NFATc	B-protein	B-RNA	O	O
mRNA	O	I-RNA	O	O
accumulation	O	O	O	O
is	O	O	O	O
induced	O	O	O	O
in	O	O	O	O
these	O	O	O	O
cells	O	O	O	O
within	O	O	O	O
2	O	O	O	O
h	O	O	O	O
of	O	O	O	O
stimulation	O	O	O	O
with	O	O	O	O
CD16	O	O	O	O
ligands	O	O	O	O
.	O	O	O	O

However	O	O	O	O
,	O	O	O	O
supershift	O	O	O	O
assays	O	O	O	O
using	O	O	O	O
the	O	O	O	O
available	O	O	O	O
mAb	B-protein	O	O	O
recognizing	O	O	O	O
the	O	O	O	O
T	O	B-protein	O	O
cell	O	I-protein	O	O
NFATc	B-protein	I-protein	O	O
revealed	O	O	O	O
no	O	O	O	O
detectable	O	O	O	O
NFATc	B-protein	O	O	O
protein	O	O	O	O
in	O	O	O	O
nuclear	O	O	O	O
and	O	O	O	O
cytoplasmic	O	O	O	O
extracts	O	O	O	O
from	O	O	O	O
CD16	O	O	O	O
-	O	O	O	O
or	O	O	O	O
phorbol	B-cell_line	O	O	O
ester	I-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
stimulated	I-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
at	O	O	O	O
any	O	O	O	O
time	O	O	O	O
tested	O	O	O	O
,	O	O	O	O
up	O	O	O	O
to	O	O	O	O
4	O	O	O	O
h	O	O	O	O
.	O	O	O	O

These	O	O	O	O
results	O	O	O	O
provide	O	O	O	O
the	O	O	O	O
first	O	O	O	O
direct	O	O	O	O
evidence	O	O	O	O
that	O	O	O	O
both	O	O	O	O
CsA	O	O	O	O
-	O	O	O	O
sensitive	O	O	O	O
transcription	B-protein	O	O	O
factors	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
NFATp	B-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
NFATc	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
are	O	O	O	O
expressed	O	O	O	O
in	O	O	O	O
human	O	O	O	O
NK	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
that	O	O	O	O
their	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
and	O	O	O	O
/	O	O	O	O
or	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
can	O	O	O	O
be	O	O	O	O
regulated	O	O	O	O
in	O	O	O	O
primary	O	O	O	O
cells	O	O	O	O
by	O	O	O	O
a	O	O	O	O
single	O	O	O	O
stimulus	O	O	O	O
,	O	O	O	O
that	O	O	O	O
,	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
case	O	O	O	O
of	O	O	O	O
CD16	O	O	O	O
in	O	O	O	O
NK	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
,	O	O	O	O
results	O	O	O	O
in	O	O	O	O
early	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
NFATp	B-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
subsequently	O	O	O	O
induced	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
NFATc	B-protein	B-RNA	O	O
mRNA	O	I-RNA	O	O
.	O	O	O	O

Interleukin	O	O	O	O
2	O	O	O	O
signaling	O	O	O	O
involves	O	O	O	O
the	O	O	O	O
phosphorylation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
Stat	B-protein	O	O	O
proteins	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

One	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
most	O	O	O	O
important	O	O	O	O
cytokines	B-protein	O	O	O
involved	O	O	O	O
in	O	O	O	O
immune	O	O	O	O
response	O	O	O	O
regulation	O	O	O	O
is	O	O	O	O
interleukin	O	O	O	O
2	O	O	O	O
(	O	O	O	O
IL	O	O	O	O
-	O	O	O	O
2	O	O	O	O
)	O	O	O	O
,	O	O	O	O
a	O	O	O	O
potent	O	O	O	O
activator	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
proliferation	O	O	O	O
and	O	O	O	O
function	O	O	O	O
of	O	O	O	O
T	O	B-cell_type	O	O
lymphocytes	B-cell_type	I-cell_type	O	O
and	O	O	O	O
natural	B-cell_type	O	O	O
killer	I-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
mechanisms	O	O	O	O
by	O	O	O	O
which	O	O	O	O
the	O	O	O	O
effects	O	O	O	O
of	O	O	O	O
IL	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
are	O	O	O	O
propagated	O	O	O	O
within	O	O	O	O
cells	O	O	O	O
are	O	O	O	O
not	O	O	O	O
understood	O	O	O	O
.	O	O	O	O

While	O	O	O	O
the	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
of	O	O	O	O
IL	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
to	O	O	O	O
its	O	O	O	O
receptor	O	O	O	O
was	O	O	O	O
recently	O	O	O	O
shown	O	O	O	O
to	O	O	O	O
lead	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
two	O	O	O	O
kinases	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
Jak	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
Jak	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
3	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
subsequent	O	O	O	O
steps	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
signaling	O	O	O	O
pathway	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
nucleus	O	O	O	O
that	O	O	O	O
lead	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
specific	O	O	O	O
genes	O	O	O	O
had	O	O	O	O
not	O	O	O	O
been	O	O	O	O
characterized	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Since	O	O	O	O
many	O	O	O	O
cytokines	B-protein	O	O	O
that	O	O	O	O
activate	O	O	O	O
Jak	O	B-protein	O	O
kinases	B-protein	I-protein	O	O
also	O	O	O	O
lead	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
tyrosine	O	O	O	O
phosphorylation	O	O	O	O
and	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
members	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
Stat	B-protein	O	O	O
family	I-protein	O	O	O
of	O	O	O	O
transcription	B-protein	O	O	O
factors	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
ability	O	O	O	O
of	O	O	O	O
IL	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
to	O	O	O	O
trigger	O	O	O	O
Stat	O	O	O	O
phosphorylation	O	O	O	O
was	O	O	O	O
examined	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Exposure	O	O	O	O
of	O	O	O	O
activated	O	O	O	O
human	O	O	O	O
T	B-cell_type	O	O	O
lymphocytes	I-cell_type	O	O	O
or	O	O	O	O
of	O	O	O	O
a	O	O	O	O
natural	B-cell_type	B-cell_line	O	O
killer	I-cell_type	I-cell_line	O	O
cell	I-cell_type	I-cell_line	O	O
line	O	I-cell_line	O	O
(	O	O	O	O
NKL	B-cell_line	O	O	O
)	O	O	O	O
to	O	O	O	O
IL	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
leads	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
phosphorylation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
Stat1	B-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
Stat1	B-protein	O	O	O
beta	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
Stat3	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
as	O	O	O	O
well	O	O	O	O
as	O	O	O	O
of	O	O	O	O
two	O	O	O	O
Stat	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
related	I-protein	O	O	O
proteins	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
p94	B-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
p95	B-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

p94	B-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
p95	B-protein	O	O	O
share	O	O	O	O
homology	O	O	O	O
with	O	O	O	O
Stat1	B-protein	O	O	O
at	O	O	O	O
the	O	O	O	O
phosphorylation	B-protein	O	O	O
site	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
Src	B-protein	O	O	O
homology	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
(	I-protein	O	O	O
SH2	I-protein	O	O	O
)	I-protein	O	O	O
domain	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
but	O	O	O	O
otherwise	O	O	O	O
are	O	O	O	O
immunologically	O	O	O	O
distinct	O	O	O	O
from	O	O	O	O
Stat1	B-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

These	O	O	O	O
Stat	B-protein	O	O	O
proteins	I-protein	O	O	O
were	O	O	O	O
found	O	O	O	O
to	O	O	O	O
translocate	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
nucleus	O	O	O	O
and	O	O	O	O
to	O	O	O	O
bind	O	O	O	O
to	O	O	O	O
a	O	O	O	O
specific	B-DNA	O	O	O
DNA	I-DNA	O	O	O
sequence	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

These	O	O	O	O
findings	O	O	O	O
suggest	O	O	O	O
a	O	O	O	O
mechanism	O	O	O	O
by	O	O	O	O
which	O	O	O	O
IL	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
binding	O	O	O	O
to	O	O	O	O
its	O	O	O	O
receptor	O	O	O	O
may	O	O	O	O
activate	O	O	O	O
specific	B-DNA	O	O	O
genes	I-DNA	O	O	O
involved	O	O	O	O
in	O	O	O	O
immune	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
function	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
c	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
fos	I-DNA	O	O	O
correlates	O	O	O	O
with	O	O	O	O
IFN	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
responsiveness	O	O	O	O
in	O	O	O	O
Philadelphia	O	O	O	O
chromosome	O	O	O	O
positive	O	O	O	O
chronic	O	O	O	O
myelogenous	O	O	O	O
leukemia	O	O	O	O
.	O	O	O	O

This	O	O	O	O
study	O	O	O	O
evaluates	O	O	O	O
(	O	O	O	O
i	O	O	O	O
)	O	O	O	O
constitutive	O	O	O	O
levels	O	O	O	O
of	O	O	O	O
oncogene	B-DNA	O	O	O
and	O	O	O	O
p53	B-RNA	O	O	O
transcripts	I-RNA	O	O	O
in	O	O	O	O
chronic	O	O	O	O
phase	O	O	O	O
CML	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
and	O	O	O	O
(	O	O	O	O
ii	O	O	O	O
)	O	O	O	O
their	O	O	O	O
modulations	O	O	O	O
subsequent	O	O	O	O
to	O	O	O	O
in	O	O	O	O
vivo	O	O	O	O
therapy	O	O	O	O
with	O	O	O	O
rIFN	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
2c	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Peripheral	B-cell_type	O	O	O
blood	I-cell_type	O	O	O
mononuclear	I-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
(	O	O	O	O
pbmc	B-cell_type	O	O	O
)	O	O	O	O
and	O	O	O	O
bone	B-cell_type	O	O	O
marrow	I-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
of	O	O	O	O
26	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
were	O	O	O	O
examined	O	O	O	O
for	O	O	O	O
c	O	O	O	O
-	O	O	O	O
fos	O	O	O	O
,	O	O	O	O
c	O	O	O	O
-	O	O	O	O
myc	O	O	O	O
,	O	O	O	O
p53	O	O	O	O
and	O	O	O	O
the	O	O	O	O
hybrid	O	O	O	O
bcr	O	O	O	O
/	O	O	O	O
abl	O	O	O	O
mRNA	O	O	O	O
levels	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Results	O	O	O	O
indicated	O	O	O	O
that	O	O	O	O
(	O	O	O	O
i	O	O	O	O
)	O	O	O	O
constitutive	O	O	O	O
c	B-RNA	O	O	O
-	I-RNA	O	O	O
fos	I-RNA	O	O	O
transcript	I-RNA	O	O	O
levels	O	O	O	O
are	O	O	O	O
significantly	O	O	O	O
higher	O	O	O	O
in	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
subsequently	O	O	O	O
responding	O	O	O	O
to	O	O	O	O
IFN	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
therapy	O	O	O	O
(	O	O	O	O
p	O	O	O	O
<	O	O	O	O
0	O	O	O	O
.	O	O	O	O
01	O	O	O	O
)	O	O	O	O
and	O	O	O	O
positively	O	O	O	O
correlated	O	O	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
proportion	O	O	O	O
of	O	O	O	O
lymphocytes	B-cell_type	O	O	O
(	O	O	O	O
r	O	O	O	O
=	O	O	O	O
0	O	O	O	O
.	O	O	O	O
6895	O	O	O	O
,	O	O	O	O
p	O	O	O	O
<	O	O	O	O
0	O	O	O	O
.	O	O	O	O
01	O	O	O	O
)	O	O	O	O
and	O	O	O	O
negatively	O	O	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
proportion	O	O	O	O
of	O	O	O	O
immature	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
(	O	O	O	O
r	O	O	O	O
=	O	O	O	O
-	O	O	O	O
0	O	O	O	O
.	O	O	O	O
568	O	O	O	O
,	O	O	O	O
p	O	O	O	O
<	O	O	O	O
0	O	O	O	O
.	O	O	O	O
01	O	O	O	O
)	O	O	O	O
contained	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
pbmc	B-cell_type	O	O	O
preparations	O	O	O	O
tested	O	O	O	O
,	O	O	O	O
(	O	O	O	O
ii	O	O	O	O
)	O	O	O	O
constitutive	B-RNA	O	O	O
mRNA	I-RNA	O	O	O
levels	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
hybrid	B-DNA	O	O	O
bcr	I-DNA	O	O	O
/	I-DNA	O	O	O
abl	I-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
c	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
myc	I-DNA	O	O	O
and	O	O	O	O
p53	B-DNA	O	O	O
are	O	O	O	O
positively	O	O	O	O
correlated	O	O	O	O
with	O	O	O	O
each	O	O	O	O
other	O	O	O	O
,	O	O	O	O
but	O	O	O	O
failed	O	O	O	O
to	O	O	O	O
relate	O	O	O	O
to	O	O	O	O
disease	O	O	O	O
parameters	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
(	O	O	O	O
iii	O	O	O	O
)	O	O	O	O
acute	O	O	O	O
and	O	O	O	O
chronic	O	O	O	O
in	O	O	O	O
vivo	O	O	O	O
exposure	O	O	O	O
to	O	O	O	O
IFN	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
is	O	O	O	O
accompanied	O	O	O	O
by	O	O	O	O
upregulation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
c	O	O	O	O
-	O	O	O	O
fos	O	O	O	O
and	O	O	O	O
downregulation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
c	B-RNA	O	O	O
-	I-RNA	O	O	O
myc	I-RNA	O	O	O
mRNA	I-RNA	O	O	O
levels	O	O	O	O
in	O	O	O	O
responder	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Menopause	O	O	O	O
is	O	O	O	O
associated	O	O	O	O
with	O	O	O	O
a	O	O	O	O
significant	O	O	O	O
increase	O	O	O	O
in	O	O	O	O
blood	O	O	O	O
monocyte	O	O	O	O
number	O	O	O	O
and	O	O	O	O
a	O	O	O	O
relative	O	O	O	O
decrease	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
estrogen	B-protein	O	O	O
receptors	I-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
human	B-cell_type	O	O	O
peripheral	I-cell_type	O	O	O
monocytes	I-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

PROBLEM	O	O	O	O
:	O	O	O	O
The	O	O	O	O
clinical	O	O	O	O
significance	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
differential	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
estrogen	B-protein	O	O	O
receptor	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
ER	B-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
in	O	O	O	O
human	B-cell_type	O	O	O
monocytes	I-cell_type	O	O	O
was	O	O	O	O
evaluated	O	O	O	O
.	O	O	O	O

METHOD	O	O	O	O
:	O	O	O	O
Two	O	O	O	O
color	O	O	O	O
flow	O	O	O	O
cytometry	O	O	O	O
analysis	O	O	O	O
was	O	O	O	O
used	O	O	O	O
on	O	O	O	O
peripheral	O	O	O	O
blood	O	O	O	O
samples	O	O	O	O
of	O	O	O	O
young	O	O	O	O
and	O	O	O	O
postmenopausal	O	O	O	O
females	O	O	O	O
and	O	O	O	O
postmenopausal	O	O	O	O
females	O	O	O	O
treated	O	O	O	O
with	O	O	O	O
estrogen	O	O	O	O
replacement	O	O	O	O
therapy	O	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
addition	O	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
monocyte	O	O	O	O
and	O	O	O	O
lymphocyte	O	O	O	O
counts	O	O	O	O
and	O	O	O	O
the	O	O	O	O
blood	O	O	O	O
estrogen	O	O	O	O
levels	O	O	O	O
of	O	O	O	O
each	O	O	O	O
patient	O	O	O	O
were	O	O	O	O
determine	O	O	O	O
.	O	O	O	O

RESULTS	O	O	O	O
:	O	O	O	O
During	O	O	O	O
menopause	O	O	O	O
there	O	O	O	O
is	O	O	O	O
a	O	O	O	O
significant	O	O	O	O
decrease	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
percentage	O	O	O	O
of	O	O	O	O
ER	B-protein	B-cell_type	O	O
positive	O	I-cell_type	O	O
monocytes	O	I-cell_type	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
an	O	O	O	O
increase	O	O	O	O
in	O	O	O	O
blood	O	B-cell_type	O	O
monocyte	B-cell_type	I-cell_type	O	O
number	O	O	O	O
,	O	O	O	O
which	O	O	O	O
declines	O	O	O	O
following	O	O	O	O
estrogen	O	O	O	O
replacement	O	O	O	O
therapy	O	O	O	O
to	O	O	O	O
values	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
young	O	O	O	O
.	O	O	O	O

CONCLUSIONS	O	O	O	O
:	O	O	O	O
These	O	O	O	O
findings	O	O	O	O
suggest	O	O	O	O
that	O	O	O	O
estrogen	O	O	O	O
modulates	O	O	O	O
the	O	O	O	O
monocyte	B-cell_type	O	O	O
numbers	O	O	O	O
and	O	O	O	O
its	O	O	O	O
effects	O	O	O	O
may	O	O	O	O
be	O	O	O	O
mediated	O	O	O	O
through	O	O	O	O
the	O	O	O	O
ER	B-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
monocytes	B-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

Staphylococcal	B-protein	O	O	O
enterotoxins	I-protein	O	O	O
modulate	O	O	O	O
interleukin	B-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
receptor	I-protein	O	O	O
expression	O	O	O	O
and	O	O	O	O
ligand	O	O	O	O
-	O	O	O	O
induced	O	O	O	O
tyrosine	O	O	O	O
phosphorylation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
Janus	B-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
tyrosine	I-protein	O	O	O
kinase	I-protein	O	O	O
3	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
Jak3	B-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
and	O	O	O	O
signal	B-protein	O	O	O
transducers	I-protein	O	O	O
and	I-protein	O	O	O
activators	I-protein	O	O	O
of	I-protein	O	O	O
transcription	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
Stat	B-protein	O	O	O
proteins	I-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Staphylococcal	B-protein	O	O	O
enterotoxins	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
SE	B-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
stimulate	O	O	O	O
T	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
expressing	O	O	O	O
the	O	O	O	O
appropriate	O	O	O	O
variable	B-protein	B-protein	O	O
region	I-protein	I-protein	O	O
beta	I-protein	I-protein	O	O
chain	I-protein	I-protein	O	O
of	O	I-protein	O	O
(	O	I-protein	O	O
V	B-protein	I-protein	O	O
beta	I-protein	I-protein	O	O
)	O	I-protein	O	O
T	O	I-protein	O	O
-	O	I-protein	O	O
cell	O	I-protein	O	O
receptors	O	I-protein	O	O
and	O	O	O	O
have	O	O	O	O
been	O	O	O	O
implicated	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
pathogenesis	O	O	O	O
of	O	O	O	O
several	O	O	O	O
autoimmune	O	O	O	O
diseases	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Depending	O	O	O	O
on	O	O	O	O
costimulatory	O	O	O	O
signals	O	O	O	O
,	O	O	O	O
SE	B-protein	O	O	O
induce	O	O	O	O
either	O	O	O	O
proliferation	O	O	O	O
or	O	O	O	O
anergy	O	O	O	O
in	O	O	O	O
T	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
addition	O	O	O	O
,	O	O	O	O
SE	B-protein	O	O	O
can	O	O	O	O
induce	O	O	O	O
an	O	O	O	O
interleukin	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
IL	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
nonresponsive	O	O	O	O
state	O	O	O	O
and	O	O	O	O
apoptosis	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Here	O	O	O	O
,	O	O	O	O
we	O	O	O	O
show	O	O	O	O
that	O	O	O	O
SE	B-protein	O	O	O
induce	O	O	O	O
dynamic	O	O	O	O
changes	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
and	O	O	O	O
signal	O	O	O	O
transduction	O	O	O	O
through	O	O	O	O
the	O	O	O	O
IL	O	O	O	O
-	O	O	O	O
2	O	O	O	O
receptor	O	O	O	O
(	O	O	O	O
IL	O	O	O	O
-	O	O	O	O
2R	O	O	O	O
)	O	O	O	O
beta	O	O	O	O
and	O	O	O	O
gamma	O	O	O	O
chains	O	O	O	O
(	O	O	O	O
IL	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2R	I-protein	O	O	O
beta	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
IL	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2R	I-protein	O	O	O
gamma	I-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
in	O	O	O	O
human	B-cell_line	O	O	O
antigen	I-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
specific	I-cell_line	O	O	O
CD4	I-cell_line	O	O	O
+	I-cell_line	O	O	O
T	I-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
lines	I-cell_line	O	O	O
.	O	O	O	O

Thus	O	O	O	O
,	O	O	O	O
after	O	O	O	O
4	O	O	O	O
hr	O	O	O	O
of	O	O	O	O
exposure	O	O	O	O
to	O	O	O	O
SEA	B-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
SEB	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
IL	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2R	I-protein	O	O	O
beta	I-protein	O	O	O
was	O	O	O	O
down	O	O	O	O
-	O	O	O	O
regulated	O	O	O	O
,	O	O	O	O
IL	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2R	I-protein	O	O	O
gamma	I-protein	O	O	O
was	O	O	O	O
slightly	O	O	O	O
up	O	O	O	O
-	O	O	O	O
regulated	O	O	O	O
,	O	O	O	O
while	O	O	O	O
IL	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2R	I-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
remained	O	O	O	O
largely	O	O	O	O
unaffected	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
changes	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
composition	O	O	O	O
of	O	O	O	O
IL	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2Rs	I-protein	O	O	O
were	O	O	O	O
accompanied	O	O	O	O
by	O	O	O	O
inhibition	O	O	O	O
of	O	O	O	O
IL	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
-	O	O	O	O
induced	O	O	O	O
tyrosine	O	O	O	O
phosphorylation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
Janus	B-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
tyrosine	I-protein	O	O	O
kinase	I-protein	O	O	O
3	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
Jak3	B-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
and	O	O	O	O
signal	B-protein	O	O	O
transducers	I-protein	O	O	O
and	I-protein	O	O	O
activators	I-protein	O	O	O
of	I-protein	O	O	O
transcription	I-protein	O	O	O
called	O	O	O	O
Stat3	B-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
Stat5	B-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
parallel	O	O	O	O
experiments	O	O	O	O
,	O	O	O	O
IL	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
-	O	O	O	O
driven	O	O	O	O
proliferation	O	O	O	O
was	O	O	O	O
inhibited	O	O	O	O
significantly	O	O	O	O
.	O	O	O	O

After	O	O	O	O
16	O	O	O	O
hr	O	O	O	O
of	O	O	O	O
exposure	O	O	O	O
to	O	O	O	O
SE	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
IL	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2R	I-protein	O	O	O
beta	I-protein	O	O	O
remained	O	O	O	O
low	O	O	O	O
,	O	O	O	O
while	O	O	O	O
that	O	O	O	O
of	O	O	O	O
IL2R	B-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
IL2R	B-protein	O	O	O
gamma	I-protein	O	O	O
was	O	O	O	O
further	O	O	O	O
up	O	O	O	O
-	O	O	O	O
regulated	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
ligand	O	O	O	O
-	O	O	O	O
induced	O	O	O	O
tyrosine	O	O	O	O
phosphorylation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
Jak3	B-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
Stat	B-protein	O	O	O
proteins	I-protein	O	O	O
was	O	O	O	O
partly	O	O	O	O
normalized	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Yet	O	O	O	O
,	O	O	O	O
IL	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
-	O	O	O	O
driven	O	O	O	O
proliferation	O	O	O	O
remained	O	O	O	O
profoundly	O	O	O	O
inhibited	O	O	O	O
,	O	O	O	O
suggesting	O	O	O	O
that	O	O	O	O
signaling	O	O	O	O
events	O	O	O	O
other	O	O	O	O
than	O	O	O	O
Jak3	B-protein	O	O	O
/	B-protein	O	O	O
Stat	I-protein	O	O	O
activation	O	O	O	O
had	O	O	O	O
also	O	O	O	O
been	O	O	O	O
changed	O	O	O	O
following	O	O	O	O
SE	B-protein	O	O	O
stimulation	O	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
conclusion	O	O	O	O
,	O	O	O	O
our	O	O	O	O
data	O	O	O	O
suggest	O	O	O	O
that	O	O	O	O
SE	B-protein	O	O	O
can	O	O	O	O
modulate	O	O	O	O
IL	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2R	I-protein	O	O	O
expression	O	O	O	O
and	O	O	O	O
signal	O	O	O	O
transduction	O	O	O	O
involving	O	O	O	O
the	O	O	O	O
Jak	B-protein	O	O	O
/	I-protein	O	O	O
Stat	I-protein	O	O	O
pathway	O	O	O	O
in	O	O	O	O
CD4	B-cell_line	O	O	O
+	I-cell_line	O	O	O
T	I-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
lines	I-cell_line	O	O	O
.	O	O	O	O

Constitutive	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
activation	O	O	O	O
,	O	O	O	O
enhanced	O	O	O	O
granulopoiesis	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
neonatal	O	O	O	O
lethality	O	O	O	O
in	O	O	O	O
I	B-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
-	O	O	O	O
deficient	O	O	O	O
mice	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Transcription	B-protein	O	O	O
factors	I-protein	O	O	O
belonging	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
NF	B-protein	B-protein	O	O
-	I-protein	I-protein	O	O
kappa	I-protein	I-protein	O	O
B	I-protein	I-protein	O	O
family	O	I-protein	O	O
are	O	O	O	O
controlled	O	O	O	O
by	O	O	O	O
inhibitory	B-protein	O	O	O
I	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
proteins	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
mainly	O	O	O	O
I	B-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
I	B-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
beta	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Apparently	O	O	O	O
normal	O	O	O	O
at	O	O	O	O
birth	O	O	O	O
,	O	O	O	O
I	B-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
-	O	O	O	O
/	O	O	O	O
-	O	O	O	O
mice	O	O	O	O
exhibit	O	O	O	O
severe	O	O	O	O
runting	O	O	O	O
,	O	O	O	O
skin	O	O	O	O
defects	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
extensive	O	O	O	O
granulopoiesis	O	O	O	O
postnatally	O	O	O	O
,	O	O	O	O
typically	O	O	O	O
dying	O	O	O	O
by	O	O	O	O
8	O	O	O	O
days	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Hematopoietic	O	O	O	O
tissues	O	O	O	O
from	O	O	O	O
these	O	O	O	O
mice	O	O	O	O
display	O	O	O	O
elevated	O	O	O	O
levels	O	O	O	O
of	O	O	O	O
both	O	O	O	O
nuclear	O	B-protein	O	O
NF	B-protein	I-protein	O	O
-	I-protein	I-protein	O	O
kappa	I-protein	I-protein	O	O
B	I-protein	I-protein	O	O
and	O	O	O	O
mRNAs	B-RNA	O	O	O
of	O	O	O	O
some	O	O	O	O
,	O	O	O	O
but	O	O	O	O
not	O	O	O	O
all	O	O	O	O
,	O	O	O	O
genes	O	O	O	O
thought	O	O	O	O
to	O	O	O	O
be	O	O	O	O
regulated	O	O	O	O
by	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
elevation	O	O	O	O
results	O	O	O	O
in	O	O	O	O
these	O	O	O	O
phenotypic	O	O	O	O
abnormalities	O	O	O	O
because	O	O	O	O
mice	O	O	O	O
lacking	O	O	O	O
both	O	O	O	O
I	B-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
the	O	O	O	O
p50	B-protein	O	O	O
subunit	I-protein	O	O	O
of	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
show	O	O	O	O
a	O	O	O	O
dramatically	O	O	O	O
delayed	O	O	O	O
onset	O	O	O	O
of	O	O	O	O
abnormalities	O	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
contrast	O	O	O	O
to	O	O	O	O
hematopoietic	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
,	O	O	O	O
I	B-protein	B-cell_line	O	O
kappa	I-protein	I-cell_line	O	O
B	I-protein	I-cell_line	O	O
alpha	I-protein	I-cell_line	O	O
-	O	I-cell_line	O	O
/	O	I-cell_line	O	O
-	O	I-cell_line	O	O
embryonic	O	I-cell_line	O	O
fibroblasts	O	I-cell_line	O	O
show	O	O	O	O
minimal	O	O	O	O
constitutive	O	B-protein	O	O
NF	B-protein	I-protein	O	O
-	I-protein	I-protein	O	O
kappa	I-protein	I-protein	O	O
B	I-protein	I-protein	O	O
,	O	O	O	O
as	O	O	O	O
well	O	O	O	O
as	O	O	O	O
normal	O	O	O	O
signal	O	O	O	O
-	O	O	O	O
dependent	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
activation	O	O	O	O
that	O	O	O	O
is	O	O	O	O
concomitant	O	O	O	O
with	O	O	O	O
I	B-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
beta	I-protein	O	O	O
degradation	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Our	O	O	O	O
results	O	O	O	O
indicate	O	O	O	O
that	O	O	O	O
I	O	O	O	O
kappa	O	O	O	O
b	O	O	O	O
beta	O	O	O	O
,	O	O	O	O
but	O	O	O	O
not	O	O	O	O
I	B-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
is	O	O	O	O
required	O	O	O	O
for	O	O	O	O
the	O	O	O	O
signal	O	O	O	O
-	O	O	O	O
dependent	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
fibroblasts	B-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

However	O	O	O	O
,	O	O	O	O
I	B-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
is	O	O	O	O
required	O	O	O	O
for	O	O	O	O
the	O	O	O	O
postinduction	O	O	O	O
repression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
fibroblasts	B-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

These	O	O	O	O
results	O	O	O	O
define	O	O	O	O
distinct	O	O	O	O
roles	O	O	O	O
for	O	O	O	O
the	O	O	O	O
two	O	O	O	O
forms	O	O	O	O
of	O	O	O	O
I	B-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
demonstrate	O	O	O	O
the	O	O	O	O
necessity	O	O	O	O
for	O	O	O	O
stringent	O	O	O	O
control	O	O	O	O
of	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Interleukin	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
7	I-protein	O	O	O
can	O	O	O	O
induce	O	O	O	O
the	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
Jak	B-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
Jak	B-protein	O	O	O
3	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
STAT	B-protein	O	O	O
5	I-protein	O	O	O
proteins	I-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
murine	O	O	O	O
T	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
Janus	B-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
tyrosine	I-protein	O	O	O
kinases	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
Jak	B-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
and	O	O	O	O
STAT	B-protein	B-protein	O	O
(	O	I-protein	O	O
signal	B-protein	I-protein	O	O
transducer	I-protein	I-protein	O	O
and	I-protein	I-protein	O	O
activator	I-protein	I-protein	O	O
of	I-protein	I-protein	O	O
transcription	I-protein	I-protein	O	O
)	O	I-protein	O	O
proteins	O	I-protein	O	O
has	O	O	O	O
recently	O	O	O	O
been	O	O	O	O
linked	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
signal	O	O	O	O
transduction	O	O	O	O
mechanism	O	O	O	O
of	O	O	O	O
several	O	O	O	O
cytokines	B-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

IL	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
7	I-protein	O	O	O
was	O	O	O	O
observed	O	O	O	O
to	O	O	O	O
induce	O	O	O	O
a	O	O	O	O
rapid	O	O	O	O
and	O	O	O	O
dose	O	O	O	O
-	O	O	O	O
dependent	O	O	O	O
tyrosine	O	O	O	O
phosphorylation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
Jak	B-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
Jak	B-protein	O	O	O
3	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
concomitantly	O	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
tyrosine	O	O	O	O
phosphorylation	O	O	O	O
and	O	O	O	O
DNA	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
of	O	O	O	O
multiple	O	O	O	O
STAT	B-protein	O	O	O
proteins	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
STAT	B-protein	O	O	O
proteins	I-protein	O	O	O
utilized	O	O	O	O
by	O	O	O	O
IL	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
7	I-protein	O	O	O
were	O	O	O	O
identical	O	O	O	O
to	O	O	O	O
those	O	O	O	O
induced	O	O	O	O
by	O	O	O	O
IL	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
could	O	O	O	O
be	O	O	O	O
identified	O	O	O	O
as	O	O	O	O
various	O	O	O	O
STAT	B-protein	O	O	O
5	I-protein	O	O	O
isoforms	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Moreover	O	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
induction	O	O	O	O
of	O	O	O	O
both	O	O	O	O
Jak	O	O	O	O
1	O	O	O	O
and	O	O	O	O
3	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
STAT	B-protein	O	O	O
5	I-protein	O	O	O
activity	O	O	O	O
strongly	O	O	O	O
correlated	O	O	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
growth	O	O	O	O
-	O	O	O	O
promoting	O	O	O	O
effects	O	O	O	O
of	O	O	O	O
IL	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
7	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
suggesting	O	O	O	O
that	O	O	O	O
this	O	O	O	O
signal	O	O	O	O
transduction	O	O	O	O
mechanism	O	O	O	O
may	O	O	O	O
play	O	O	O	O
a	O	O	O	O
key	O	O	O	O
role	O	O	O	O
in	O	O	O	O
IL	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
7	I-protein	O	O	O
-	O	O	O	O
induced	O	O	O	O
proliferation	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Cytokine	B-protein	O	O	O
-	O	O	O	O
modulating	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
of	O	O	O	O
tepoxalin	O	O	O	O
,	O	O	O	O
a	O	O	O	O
new	O	O	O	O
potential	O	O	O	O
antirheumatic	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Tepoxalin	O	O	O	O
is	O	O	O	O
a	O	O	O	O
new	O	O	O	O
dual	O	O	O	O
cyclooxygenase	O	O	O	O
/	O	O	O	O
5	O	O	O	O
-	O	O	O	O
lipoxygenase	O	O	O	O
anti	O	O	O	O
-	O	O	O	O
inflammatory	O	O	O	O
compound	O	O	O	O
currently	O	O	O	O
under	O	O	O	O
clinical	O	O	O	O
investigation	O	O	O	O
.	O	O	O	O

It	O	O	O	O
has	O	O	O	O
been	O	O	O	O
shown	O	O	O	O
to	O	O	O	O
possess	O	O	O	O
anti	O	O	O	O
-	O	O	O	O
inflammatory	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
in	O	O	O	O
a	O	O	O	O
variety	O	O	O	O
of	O	O	O	O
animal	O	O	O	O
models	O	O	O	O
and	O	O	O	O
more	O	O	O	O
recently	O	O	O	O
to	O	O	O	O
inhibit	O	O	O	O
IL	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
induced	O	O	O	O
signal	O	O	O	O
transduction	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
current	O	O	O	O
study	O	O	O	O
was	O	O	O	O
conducted	O	O	O	O
to	O	O	O	O
evaluate	O	O	O	O
the	O	O	O	O
cytokine	B-protein	O	O	O
modulating	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
of	O	O	O	O
tepoxalin	O	O	O	O
and	O	O	O	O
the	O	O	O	O
role	O	O	O	O
of	O	O	O	O
iron	O	O	O	O
in	O	O	O	O
these	O	O	O	O
effects	O	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
human	B-cell_type	O	O	O
peripheral	I-cell_type	O	O	O
blood	I-cell_type	O	O	O
mononuclear	I-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
(	O	O	O	O
PBMC	B-cell_type	O	O	O
)	O	O	O	O
stimulated	O	O	O	O
with	O	O	O	O
OKT3	O	O	O	O
/	O	O	O	O
PMA	O	O	O	O
,	O	O	O	O
tepoxalin	O	O	O	O
inhibited	O	O	O	O
lymphocyte	B-cell_type	O	O	O
proliferation	O	O	O	O
with	O	O	O	O
an	O	O	O	O
IC50	O	O	O	O
of	O	O	O	O
6	O	O	O	O
microM	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Additionally	O	O	O	O
,	O	O	O	O
it	O	O	O	O
inhibited	O	O	O	O
the	O	O	O	O
production	O	O	O	O
of	O	O	O	O
LTB4	B-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
IC50	O	O	O	O
=	O	O	O	O
0	O	O	O	O
.	O	O	O	O
5	O	O	O	O
microM	O	O	O	O
)	O	O	O	O
and	O	O	O	O
the	O	O	O	O
cytokines	B-protein	O	O	O
IL	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
IL	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
6	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
TNF	B-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
IC50	O	O	O	O
=	O	O	O	O
10	O	O	O	O
-	O	O	O	O
12	O	O	O	O
microM	O	O	O	O
)	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Cytotoxicity	O	O	O	O
was	O	O	O	O
not	O	O	O	O
demonstrated	O	O	O	O
at	O	O	O	O
these	O	O	O	O
concentrations	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Add	O	O	O	O
-	O	O	O	O
back	O	O	O	O
experiments	O	O	O	O
with	O	O	O	O
either	O	O	O	O
cytokines	B-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
IL	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
or	O	O	O	O
IL	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
6	I-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
,	O	O	O	O
LTB4	B-protein	O	O	O
or	O	O	O	O
conditioned	O	O	O	O
media	O	O	O	O
failed	O	O	O	O
to	O	O	O	O
restore	O	O	O	O
the	O	O	O	O
proliferative	O	O	O	O
response	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
presence	O	O	O	O
of	O	O	O	O
tepoxalin	O	O	O	O
.	O	O	O	O

However	O	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
concurrent	O	O	O	O
addition	O	O	O	O
of	O	O	O	O
iron	O	O	O	O
(	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
form	O	O	O	O
of	O	O	O	O
ferrous	O	O	O	O
or	O	O	O	O
ferric	O	O	O	O
chloride	O	O	O	O
and	O	O	O	O
other	O	O	O	O
iron	O	O	O	O
salts	O	O	O	O
)	O	O	O	O
reversed	O	O	O	O
the	O	O	O	O
inhibition	O	O	O	O
of	O	O	O	O
proliferation	O	O	O	O
caused	O	O	O	O
by	O	O	O	O
tepoxalin	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Tepoxalin	O	O	O	O
also	O	O	O	O
inhibits	O	O	O	O
the	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
a	O	O	O	O
transcription	B-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
which	O	O	O	O
acts	O	O	O	O
on	O	O	O	O
several	O	O	O	O
cytokine	B-DNA	O	O	O
genes	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

Tepoxalin	O	O	O	O
'	O	O	O	O
s	O	O	O	O
effect	O	O	O	O
on	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
is	O	O	O	O
also	O	O	O	O
reversed	O	O	O	O
by	O	O	O	O
the	O	O	O	O
addition	O	O	O	O
of	O	O	O	O
iron	O	O	O	O
salts	O	O	O	O
.	O	O	O	O

These	O	O	O	O
data	O	O	O	O
suggest	O	O	O	O
that	O	O	O	O
the	O	O	O	O
action	O	O	O	O
of	O	O	O	O
tepoxalin	O	O	O	O
to	O	O	O	O
inhibit	O	O	O	O
proliferation	O	O	O	O
in	O	O	O	O
PBMC	B-cell_type	O	O	O
may	O	O	O	O
be	O	O	O	O
at	O	O	O	O
least	O	O	O	O
in	O	O	O	O
part	O	O	O	O
due	O	O	O	O
to	O	O	O	O
its	O	O	O	O
ability	O	O	O	O
to	O	O	O	O
reduce	O	O	O	O
the	O	O	O	O
amount	O	O	O	O
of	O	O	O	O
available	O	O	O	O
iron	O	O	O	O
resulting	O	O	O	O
in	O	O	O	O
decreased	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
subsequent	O	O	O	O
inhibition	O	O	O	O
of	O	O	O	O
cytokine	B-protein	O	O	O
production	O	O	O	O
.	O	O	O	O

N	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
and	I-protein	O	O	O
C	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
terminal	I-protein	O	O	O
sequences	I-protein	O	O	O
control	O	O	O	O
degradation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
MAD3	O	B-protein	O	O
/	O	I-protein	O	O
I	B-protein	I-protein	O	O
kappa	I-protein	I-protein	O	O
B	I-protein	I-protein	O	O
alpha	I-protein	I-protein	O	O
in	O	O	O	O
response	O	O	O	O
to	O	O	O	O
inducers	O	O	O	O
of	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
activity	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
proteolytic	O	O	O	O
degradation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
inhibitory	B-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
MAD3	O	B-protein	O	O
/	O	I-protein	O	O
I	B-protein	I-protein	O	O
kappa	I-protein	I-protein	O	O
B	I-protein	I-protein	O	O
alpha	I-protein	I-protein	O	O
in	O	O	O	O
response	O	O	O	O
to	O	O	O	O
extracellular	O	O	O	O
stimulation	O	O	O	O
is	O	O	O	O
a	O	O	O	O
prerequisite	O	O	O	O
step	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
transcription	B-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Analysis	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
human	O	B-protein	O	O
I	B-protein	I-protein	O	O
kappa	I-protein	I-protein	O	O
B	I-protein	I-protein	O	O
alpha	I-protein	I-protein	O	O
protein	O	I-protein	O	O
in	O	O	O	O
stable	O	O	O	O
transfectants	O	O	O	O
of	O	O	O	O
mouse	B-cell_line	O	O	O
70Z	I-cell_line	O	O	O
/	I-cell_line	O	O	O
3	I-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
shows	O	O	O	O
that	O	O	O	O
,	O	O	O	O
as	O	O	O	O
for	O	O	O	O
the	O	O	O	O
endogenous	O	O	O	O
murine	O	O	O	O
protein	O	O	O	O
,	O	O	O	O
exogenous	O	O	O	O
I	B-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
is	O	O	O	O
degraded	O	O	O	O
in	O	O	O	O
response	O	O	O	O
to	O	O	O	O
inducers	O	O	O	O
of	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
activity	O	O	O	O
,	O	O	O	O
such	O	O	O	O
as	O	O	O	O
phorbol	O	O	O	O
myristate	O	O	O	O
acetate	O	O	O	O
or	O	O	O	O
lipopolysaccharide	O	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
addition	O	O	O	O
,	O	O	O	O
pretreatment	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
cells	O	O	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
proteasome	B-protein	O	O	O
inhibitor	O	O	O	O
N	O	O	O	O
-	O	O	O	O
Ac	O	O	O	O
-	O	O	O	O
Leu	O	O	O	O
-	O	O	O	O
Leu	O	O	O	O
-	O	O	O	O
norleucinal	O	O	O	O
inhibits	O	O	O	O
this	O	O	O	O
ligand	O	O	O	O
-	O	O	O	O
induced	O	O	O	O
degradation	O	O	O	O
and	O	O	O	O
,	O	O	O	O
in	O	O	O	O
agreement	O	O	O	O
with	O	O	O	O
previous	O	O	O	O
studies	O	O	O	O
,	O	O	O	O
stabilizes	O	O	O	O
a	O	O	O	O
hyperphosphorylated	O	O	O	O
form	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
human	O	B-protein	O	O
I	B-protein	I-protein	O	O
kappa	I-protein	I-protein	O	O
B	I-protein	I-protein	O	O
alpha	I-protein	I-protein	O	O
protein	O	I-protein	O	O
.	O	O	O	O

By	O	O	O	O
expressing	O	O	O	O
mutant	O	O	O	O
forms	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
human	O	O	O	O
protein	O	O	O	O
in	O	O	O	O
this	O	O	O	O
cell	B-cell_line	O	O	O
line	I-cell_line	O	O	O
,	O	O	O	O
we	O	O	O	O
have	O	O	O	O
been	O	O	O	O
able	O	O	O	O
to	O	O	O	O
delineate	O	O	O	O
the	O	O	O	O
sequences	O	O	O	O
responsible	O	O	O	O
for	O	O	O	O
both	O	O	O	O
the	O	O	O	O
ligand	O	O	O	O
-	O	O	O	O
induced	O	O	O	O
phosphorylation	O	O	O	O
and	O	O	O	O
the	O	O	O	O
degradation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
I	B-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Our	O	O	O	O
results	O	O	O	O
show	O	O	O	O
that	O	O	O	O
deletion	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
C	B-protein	O	O	O
terminus	I-protein	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
I	B-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
molecule	O	O	O	O
up	O	O	O	O
to	O	O	O	O
amino	B-protein	O	O	O
acid	I-protein	O	O	O
279	I-protein	O	O	O
abolishes	O	O	O	O
constitutive	O	O	O	O
but	O	O	O	O
not	O	O	O	O
ligand	O	O	O	O
-	O	O	O	O
inducible	O	O	O	O
phosphorylation	O	O	O	O
and	O	O	O	O
inhibits	O	O	O	O
ligand	O	O	O	O
-	O	O	O	O
inducible	O	O	O	O
degradation	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Further	O	O	O	O
analysis	O	O	O	O
reveals	O	O	O	O
that	O	O	O	O
the	O	O	O	O
inducible	O	O	O	O
phosphorylation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
I	B-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
maps	O	O	O	O
to	O	O	O	O
two	O	O	O	O
serines	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
N	B-protein	O	O	O
terminus	I-protein	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
protein	O	O	O	O
(	O	O	O	O
residues	O	O	O	O
32	O	O	O	O
and	O	O	O	O
36	O	O	O	O
)	O	O	O	O
and	O	O	O	O
that	O	O	O	O
the	O	O	O	O
mutation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
either	O	O	O	O
residue	O	O	O	O
is	O	O	O	O
sufficient	O	O	O	O
to	O	O	O	O
abolish	O	O	O	O
ligand	O	O	O	O
-	O	O	O	O
induced	O	O	O	O
degradation	O	O	O	O
,	O	O	O	O
whereas	O	O	O	O
both	O	O	O	O
residues	O	O	O	O
must	O	O	O	O
be	O	O	O	O
mutated	O	O	O	O
to	O	O	O	O
abolish	O	O	O	O
inducible	O	O	O	O
phosphorylation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
protein	O	O	O	O
.	O	O	O	O

(	O	O	O	O
ABSTRACT	O	O	O	O
TRUNCATED	O	O	O	O
AT	O	O	O	O
250	O	O	O	O
WORDS	O	O	O	O
)	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Microtubules	B-protein	O	O	O
mediate	O	O	O	O
cellular	O	O	O	O
25	O	O	O	O
-	O	O	O	O
hydroxyvitamin	O	O	O	O
D3	O	O	O	O
trafficking	O	O	O	O
and	O	O	O	O
the	O	O	O	O
genomic	O	O	O	O
response	O	O	O	O
to	O	O	O	O
1	O	O	O	O
,	O	O	O	O
25	O	O	O	O
-	O	O	O	O
dihydroxyvitamin	O	O	O	O
D3	O	O	O	O
in	O	O	O	O
normal	O	O	O	O
human	B-cell_type	O	O	O
monocytes	I-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
genomic	O	O	O	O
actions	O	O	O	O
of	O	O	O	O
1	O	O	O	O
,	O	O	O	O
25	O	O	O	O
-	O	O	O	O
dihydroxyvitamin	O	O	O	O
D3	O	O	O	O
(	O	O	O	O
1	O	O	O	O
,	O	O	O	O
25	O	O	O	O
(	O	O	O	O
OH	O	O	O	O
)	O	O	O	O
2D3	O	O	O	O
)	O	O	O	O
are	O	O	O	O
mediated	O	O	O	O
by	O	O	O	O
the	O	O	O	O
intracellular	O	O	O	O
vitamin	B-protein	O	O	O
D	I-protein	O	O	O
receptor	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
VDR	B-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Although	O	O	O	O
immunocytochemistry	O	O	O	O
has	O	O	O	O
shown	O	O	O	O
that	O	O	O	O
disruption	O	O	O	O
of	O	O	O	O
microtubular	O	O	O	O
assembly	O	O	O	O
prevents	O	O	O	O
nuclear	O	O	O	O
access	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
sterol	O	B-protein	O	O
-	O	I-protein	O	O
VDR	B-protein	I-protein	O	O
complex	O	I-protein	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
role	O	O	O	O
of	O	O	O	O
microtubules	B-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
response	O	O	O	O
to	O	O	O	O
1	O	O	O	O
,	O	O	O	O
25	O	O	O	O
(	O	O	O	O
OH	O	O	O	O
)	O	O	O	O
2D3	O	O	O	O
has	O	O	O	O
not	O	O	O	O
been	O	O	O	O
studied	O	O	O	O
in	O	O	O	O
viable	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

Our	O	O	O	O
studies	O	O	O	O
examined	O	O	O	O
this	O	O	O	O
interaction	O	O	O	O
in	O	O	O	O
normal	O	O	O	O
human	B-cell_type	O	O	O
monocytes	I-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

Monocytes	O	O	O	O
convert	O	O	O	O
25	O	O	O	O
(	O	O	O	O
OH	O	O	O	O
)	O	O	O	O
D3	O	O	O	O
to	O	O	O	O
1	O	O	O	O
,	O	O	O	O
25	O	O	O	O
(	O	O	O	O
OH	O	O	O	O
)	O	O	O	O
2D3	O	O	O	O
and	O	O	O	O
to	O	O	O	O
24	O	O	O	O
-	O	O	O	O
hydroxylated	O	O	O	O
metabolites	O	O	O	O
more	O	O	O	O
polar	O	O	O	O
than	O	O	O	O
1	O	O	O	O
,	O	O	O	O
25	O	O	O	O
(	O	O	O	O
OH	O	O	O	O
)	O	O	O	O
2D3	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Microtubule	O	O	O	O
disruption	O	O	O	O
totally	O	O	O	O
abolished	O	O	O	O
the	O	O	O	O
ability	O	O	O	O
of	O	O	O	O
exogenous	O	O	O	O
1	O	O	O	O
,	O	O	O	O
25	O	O	O	O
(	O	O	O	O
OH	O	O	O	O
)	O	O	O	O
2D3	O	O	O	O
to	O	O	O	O
suppress	O	O	O	O
its	O	O	O	O
own	O	O	O	O
synthesis	O	O	O	O
and	O	O	O	O
to	O	O	O	O
induce	O	O	O	O
24	B-RNA	O	O	O
-	I-RNA	O	O	O
hydroxylase	I-RNA	O	O	O
mRNA	I-RNA	O	O	O
and	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
,	O	O	O	O
without	O	O	O	O
affecting	O	O	O	O
either	O	O	O	O
total	O	O	O	O
1	O	O	O	O
,	O	O	O	O
25	O	O	O	O
(	O	O	O	O
OH	O	O	O	O
)	O	O	O	O
2D3	O	O	O	O
uptake	O	O	O	O
or	O	O	O	O
maximal	O	O	O	O
1	O	O	O	O
,	O	O	O	O
25	O	O	O	O
(	O	O	O	O
OH	O	O	O	O
)	O	O	O	O
2D3	O	O	O	O
-	B-protein	O	O	O
VDR	I-protein	O	O	O
binding	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Thus	O	O	O	O
,	O	O	O	O
intact	O	O	O	O
microtubules	B-protein	O	O	O
are	O	O	O	O
essential	O	O	O	O
for	O	O	O	O
1	O	O	O	O
,	O	O	O	O
25	O	O	O	O
(	O	O	O	O
OH	O	O	O	O
)	O	O	O	O
2D3	O	O	O	O
-	O	O	O	O
dependent	O	O	O	O
modulation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
gene	O	O	O	O
transcription	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Interestingly	O	O	O	O
,	O	O	O	O
microtubule	B-protein	O	O	O
disruption	O	O	O	O
also	O	O	O	O
decreased	O	O	O	O
monocyte	B-cell_type	O	O	O
1	O	O	O	O
,	O	O	O	O
25	O	O	O	O
(	O	O	O	O
OH	O	O	O	O
)	O	O	O	O
2D3	O	O	O	O
synthesis	O	O	O	O
,	O	O	O	O
not	O	O	O	O
by	O	O	O	O
decreasing	O	O	O	O
the	O	O	O	O
Vmax	O	O	O	O
of	O	O	O	O
monocyte	B-cell_type	B-protein	O	O
mitochondrial	O	I-protein	O	O
1	O	I-protein	O	O
alpha	O	I-protein	O	O
-	O	I-protein	O	O
hydroxylase	O	I-protein	O	O
but	O	O	O	O
through	O	O	O	O
an	O	O	O	O
increase	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
Km	O	O	O	O
for	O	O	O	O
25	O	O	O	O
(	O	O	O	O
OH	O	O	O	O
)	O	O	O	O
2D3	O	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
examined	O	O	O	O
25	O	O	O	O
(	O	O	O	O
OH	O	O	O	O
)	O	O	O	O
D3	O	O	O	O
transport	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Microtubule	O	O	O	O
disruption	O	O	O	O
did	O	O	O	O
not	O	O	O	O
affect	O	O	O	O
total	O	O	O	O
cellular	O	O	O	O
25	O	O	O	O
(	O	O	O	O
OH	O	O	O	O
)	O	O	O	O
D3	O	O	O	O
uptake	O	O	O	O
but	O	O	O	O
reduced	O	O	O	O
its	O	O	O	O
intracellular	O	O	O	O
trafficking	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
mitochondria	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Thus	O	O	O	O
,	O	O	O	O
microtubules	B-protein	O	O	O
participate	O	O	O	O
in	O	O	O	O
intracellular	O	O	O	O
25	O	O	O	O
(	O	O	O	O
OH	O	O	O	O
)	O	O	O	O
D3	O	O	O	O
transport	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
their	O	O	O	O
integrity	O	O	O	O
determines	O	O	O	O
normal	O	O	O	O
1	O	O	O	O
,	O	O	O	O
25	O	O	O	O
(	O	O	O	O
OH	O	O	O	O
)	O	O	O	O
2D3	O	O	O	O
synthesis	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Relationship	O	O	O	O
between	O	O	O	O
Rap1	B-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
phosphorylation	O	O	O	O
and	O	O	O	O
regulation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
Ca2	O	O	O	O
+	O	O	O	O
transport	O	O	O	O
in	O	O	O	O
platelets	B-cell_type	O	O	O
:	O	O	O	O
a	O	O	O	O
new	O	O	O	O
approach	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Although	O	O	O	O
the	O	O	O	O
interrelationship	O	O	O	O
between	O	O	O	O
the	O	O	O	O
two	O	O	O	O
messengers	O	O	O	O
Ca2	O	O	O	O
+	O	O	O	O
and	O	O	O	O
cyclic	O	O	O	O
AMP	O	O	O	O
in	O	O	O	O
platelet	O	O	O	O
function	O	O	O	O
is	O	O	O	O
well	O	O	O	O
documented	O	O	O	O
,	O	O	O	O
its	O	O	O	O
mechanism	O	O	O	O
of	O	O	O	O
action	O	O	O	O
still	O	O	O	O
remains	O	O	O	O
to	O	O	O	O
be	O	O	O	O
established	O	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
investigated	O	O	O	O
here	O	O	O	O
the	O	O	O	O
question	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
regulation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
platelet	B-protein	O	O	O
Ca	I-protein	O	O	O
(	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
+	I-protein	O	O	O
)	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
ATPases	I-protein	O	O	O
by	O	O	O	O
cyclic	O	O	O	O
AMP	O	O	O	O
through	O	O	O	O
the	O	O	O	O
phosphorylation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
Rap1	B-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
using	O	O	O	O
a	O	O	O	O
pathological	O	O	O	O
model	O	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
first	O	O	O	O
found	O	O	O	O
experimental	O	O	O	O
conditions	O	O	O	O
where	O	O	O	O
Ca	O	O	O	O
(	O	O	O	O
2	O	O	O	O
+	O	O	O	O
)	O	O	O	O
-	O	O	O	O
transport	O	O	O	O
by	O	O	O	O
platelet	O	O	O	O
membrane	O	O	O	O
vesicles	O	O	O	O
appeared	O	O	O	O
to	O	O	O	O
be	O	O	O	O
dependent	O	O	O	O
on	O	O	O	O
the	O	O	O	O
phosphorylation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
Rap1	B-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Then	O	O	O	O
,	O	O	O	O
we	O	O	O	O
studied	O	O	O	O
platelets	B-cell_type	O	O	O
of	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
with	O	O	O	O
congestive	O	O	O	O
heart	O	O	O	O
failure	O	O	O	O
for	O	O	O	O
their	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
potential	O	O	O	O
97	O	B-protein	O	O
kDa	O	I-protein	O	O
Ca	B-protein	I-protein	O	O
(	I-protein	I-protein	O	O
2	I-protein	I-protein	O	O
+	I-protein	I-protein	O	O
)	I-protein	I-protein	O	O
-	I-protein	I-protein	O	O
ATPase	I-protein	I-protein	O	O
target	O	I-protein	O	O
of	O	O	O	O
regulation	O	O	O	O
through	O	O	O	O
the	O	O	O	O
Rap1	B-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
as	O	O	O	O
well	O	O	O	O
as	O	O	O	O
the	O	O	O	O
phosphorylation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
Rap1	B-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
using	O	O	O	O
the	O	O	O	O
catalytic	B-protein	O	O	O
subunit	I-protein	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
cyclic	B-protein	O	O	O
AMP	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
dependent	I-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
kinase	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
C	B-protein	O	O	O
.	I-protein	O	O	O
Sub	I-protein	O	O	O
.	I-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
the	O	O	O	O
first	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
studied	O	O	O	O
,	O	O	O	O
we	O	O	O	O
found	O	O	O	O
no	O	O	O	O
significant	O	O	O	O
modification	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
97	B-protein	O	O	O
kDa	I-protein	O	O	O
Ca	I-protein	O	O	O
(	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
+	I-protein	O	O	O
)	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
ATPase	I-protein	O	O	O
by	O	O	O	O
Western	O	O	O	O
blotting	O	O	O	O
using	O	O	O	O
the	O	O	O	O
PL	B-protein	O	O	O
/	I-protein	O	O	O
IM	I-protein	O	O	O
430	I-protein	O	O	O
monoclonal	I-protein	O	O	O
antibody	I-protein	O	O	O
which	O	O	O	O
specifically	O	O	O	O
recognized	O	O	O	O
this	O	O	O	O
isoform	O	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
contrast	O	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
Rap1	B-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
was	O	O	O	O
differentially	O	O	O	O
phosphorylated	O	O	O	O
when	O	O	O	O
using	O	O	O	O
15	O	O	O	O
micrograms	O	O	O	O
/	O	O	O	O
ml	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
C	O	O	O	O
.	O	O	O	O
Sub	O	O	O	O
.	O	O	O	O

These	O	O	O	O
results	O	O	O	O
allowed	O	O	O	O
us	O	O	O	O
to	O	O	O	O
use	O	O	O	O
these	O	O	O	O
pathological	O	O	O	O
platelets	B-cell_type	O	O	O
to	O	O	O	O
study	O	O	O	O
the	O	O	O	O
relationship	O	O	O	O
between	O	O	O	O
the	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
Rap1	B-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
the	O	O	O	O
regulation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
Ca2	O	O	O	O
+	O	O	O	O
transport	O	O	O	O
by	O	O	O	O
selecting	O	O	O	O
a	O	O	O	O
patient	O	O	O	O
with	O	O	O	O
severe	O	O	O	O
heart	O	O	O	O
failure	O	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
could	O	O	O	O
show	O	O	O	O
a	O	O	O	O
decrease	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
as	O	O	O	O
well	O	O	O	O
as	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
phosphorylation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
Rap1	B-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
demonstrate	O	O	O	O
a	O	O	O	O
lower	O	O	O	O
effect	O	O	O	O
of	O	O	O	O
C	B-protein	O	O	O
.	I-protein	O	O	O
Sub	I-protein	O	O	O
.	I-protein	O	O	O
on	O	O	O	O
Ca2	O	O	O	O
+	O	O	O	O
transport	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Finally	O	O	O	O
,	O	O	O	O
by	O	O	O	O
studying	O	O	O	O
a	O	O	O	O
further	O	O	O	O
series	O	O	O	O
of	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
,	O	O	O	O
we	O	O	O	O
could	O	O	O	O
confirm	O	O	O	O
that	O	O	O	O
the	O	O	O	O
decrease	O	O	O	O
in	O	O	O	O
Rap1	B-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
expression	O	O	O	O
in	O	O	O	O
heart	O	O	O	O
failure	O	O	O	O
,	O	O	O	O
whatever	O	O	O	O
its	O	O	O	O
extent	O	O	O	O
,	O	O	O	O
was	O	O	O	O
variable	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
could	O	O	O	O
strictly	O	O	O	O
correlate	O	O	O	O
the	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
Rap1	B-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
stimulatory	O	O	O	O
effect	O	O	O	O
of	O	O	O	O
C	B-protein	O	O	O
.	I-protein	O	O	O
Sub	I-protein	O	O	O
.	I-protein	O	O	O
on	O	O	O	O
Ca2	O	O	O	O
+	O	O	O	O
transport	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Besides	O	O	O	O
the	O	O	O	O
evidence	O	O	O	O
for	O	O	O	O
regulation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
Rap1	B-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
platelets	B-cell_type	O	O	O
from	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
with	O	O	O	O
heart	O	O	O	O
failure	O	O	O	O
,	O	O	O	O
these	O	O	O	O
findings	O	O	O	O
constitute	O	O	O	O
a	O	O	O	O
new	O	O	O	O
approach	O	O	O	O
in	O	O	O	O
favour	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
regulation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
platelet	O	O	O	O
Ca2	O	O	O	O
+	O	O	O	O
transport	O	O	O	O
through	O	O	O	O
the	O	O	O	O
phosphorylation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
Rap1	B-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

An	O	O	O	O
IRF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
-	O	O	O	O
dependent	O	O	O	O
pathway	O	O	O	O
of	O	O	O	O
DNA	O	O	O	O
damage	O	O	O	O
-	O	O	O	O
induced	O	O	O	O
apoptosis	O	O	O	O
in	O	O	O	O
mitogen	B-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
activated	I-cell_line	O	O	O
T	I-cell_line	O	O	O
lymphocytes	I-cell_line	O	O	O
.	O	O	O	O

Lymphocytes	B-cell_line	O	O	O
are	O	O	O	O
particularly	O	O	O	O
susceptible	O	O	O	O
to	O	O	O	O
DNA	O	O	O	O
damage	O	O	O	O
-	O	O	O	O
induced	O	O	O	O
apoptosis	O	O	O	O
,	O	O	O	O
a	O	O	O	O
response	O	O	O	O
which	O	O	O	O
may	O	O	O	O
serve	O	O	O	O
as	O	O	O	O
a	O	O	O	O
form	O	O	O	O
of	O	O	O	O
'	O	O	O	O
altruistic	O	O	O	O
suicide	O	O	O	O
'	O	O	O	O
to	O	O	O	O
counter	O	O	O	O
their	O	O	O	O
intrinsic	O	O	O	O
high	O	O	O	O
potential	O	O	O	O
for	O	O	O	O
mutation	O	O	O	O
and	O	O	O	O
clonal	O	O	O	O
expansion	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
tumour	B-protein	O	O	O
suppressor	I-protein	O	O	O
p53	I-protein	O	O	O
has	O	O	O	O
been	O	O	O	O
shown	O	O	O	O
to	O	O	O	O
regulate	O	O	O	O
this	O	O	O	O
type	O	O	O	O
of	O	O	O	O
apoptosis	O	O	O	O
in	O	O	O	O
thymocytes	B-cell_type	O	O	O
,	O	O	O	O
but	O	O	O	O
an	O	O	O	O
as	O	O	O	O
yet	O	O	O	O
unknown	O	O	O	O
,	O	O	O	O
p53	B-protein	O	O	O
-	O	O	O	O
independent	O	O	O	O
pathway	O	O	O	O
(	O	O	O	O
s	O	O	O	O
)	O	O	O	O
appears	O	O	O	O
to	O	O	O	O
mediate	O	O	O	O
the	O	O	O	O
same	O	O	O	O
event	O	O	O	O
in	O	O	O	O
mitogen	B-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
activated	I-cell_line	O	O	O
mature	I-cell_line	O	O	O
T	I-cell_line	O	O	O
lymphocytes	I-cell_line	O	O	O
.	O	O	O	O

Here	O	O	O	O
we	O	O	O	O
show	O	O	O	O
DNA	O	O	O	O
damage	O	O	O	O
-	O	O	O	O
induced	O	O	O	O
apoptosis	O	O	O	O
in	O	O	O	O
these	O	O	O	O
T	B-cell_type	O	O	O
lymphocytes	I-cell_type	O	O	O
is	O	O	O	O
dependent	O	O	O	O
on	O	O	O	O
the	O	O	O	O
antioncogenic	O	B-protein	O	O
transcription	B-protein	I-protein	O	O
factor	I-protein	I-protein	O	O
interferon	O	I-protein	O	O
regulatory	O	I-protein	O	O
factor	O	I-protein	O	O
(	B-protein	O	O	O
IRF	I-protein	O	O	O
)	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Thus	O	O	O	O
two	O	O	O	O
different	O	O	O	O
anti	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
onco	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
genic	I-protein	O	O	O
transcription	I-protein	O	O	O
factors	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
p53	B-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
IRF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
are	O	O	O	O
required	O	O	O	O
for	O	O	O	O
distinct	O	O	O	O
apoptotic	O	O	O	O
pathways	O	O	O	O
in	O	O	O	O
T	B-cell_type	O	O	O
lymphocytes	I-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
also	O	O	O	O
show	O	O	O	O
that	O	O	O	O
mitogen	O	O	O	O
induction	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
interleukin	B-protein	B-DNA	O	O
-	I-protein	I-DNA	O	O
1	I-protein	I-DNA	O	O
beta	I-protein	I-DNA	O	O
converting	I-protein	I-DNA	O	O
enzyme	I-protein	I-DNA	O	O
(	O	I-DNA	O	O
ICE	B-protein	I-DNA	O	O
)	O	I-DNA	O	O
gene	O	I-DNA	O	O
,	O	O	O	O
a	O	O	O	O
mammalian	B-protein	O	O	O
homologue	I-protein	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
Caenorhabditis	B-DNA	O	O	O
elegans	I-DNA	O	O	O
cell	I-DNA	O	O	O
death	I-DNA	O	O	O
gene	I-DNA	O	O	O
ced	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
3	I-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
is	O	O	O	O
IRF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
-	O	O	O	O
dependent	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Ectopic	O	O	O	O
overexpression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
IRF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
results	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
endogenous	B-DNA	O	O	O
gene	I-DNA	O	O	O
for	O	O	O	O
ICE	B-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
enhances	O	O	O	O
the	O	O	O	O
sensitivity	O	O	O	O
of	O	O	O	O
cells	O	O	O	O
to	O	O	O	O
radiation	O	O	O	O
-	O	O	O	O
induced	O	O	O	O
apoptosis	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Circadian	O	O	O	O
rhythm	O	O	O	O
of	O	O	O	O
glucocorticoid	B-protein	O	O	O
receptors	I-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
human	B-cell_type	O	O	O
peripheral	I-cell_type	O	O	O
leukocytes	I-cell_type	O	O	O
and	O	O	O	O
their	O	O	O	O
reactivity	O	O	O	O
to	O	O	O	O
glucocorticoids	O	O	O	O
.	O	O	O	O

1	O	O	O	O
)	O	O	O	O
There	O	O	O	O
exists	O	O	O	O
a	O	O	O	O
CR	O	O	O	O
of	O	O	O	O
GR	B-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
human	B-cell_type	O	O	O
leukocytes	I-cell_type	O	O	O
,	O	O	O	O
PMN	B-cell_type	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
monocytes	B-cell_type	O	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
peak	O	O	O	O
values	O	O	O	O
from	O	O	O	O
0400	O	O	O	O
to	O	O	O	O
0800	O	O	O	O
hr	O	O	O	O
and	O	O	O	O
the	O	O	O	O
trough	O	O	O	O
values	O	O	O	O
between	O	O	O	O
2300	O	O	O	O
and	O	O	O	O
0000	O	O	O	O
hr	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
difference	O	O	O	O
between	O	O	O	O
them	O	O	O	O
was	O	O	O	O
significant	O	O	O	O
statistically	O	O	O	O
.	O	O	O	O

2	O	O	O	O
)	O	O	O	O
The	O	O	O	O
FI	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
chemotactic	O	O	O	O
migration	O	O	O	O
rate	O	O	O	O
of	O	O	O	O
PMN	B-cell_type	O	O	O
by	O	O	O	O
cortisol	O	O	O	O
also	O	O	O	O
showed	O	O	O	O
diurnal	O	O	O	O
changes	O	O	O	O
which	O	O	O	O
were	O	O	O	O
synchronous	O	O	O	O
with	O	O	O	O
that	O	O	O	O
of	O	O	O	O
GR	B-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

This	O	O	O	O
indicates	O	O	O	O
that	O	O	O	O
the	O	O	O	O
CR	O	O	O	O
of	O	O	O	O
GR	B-protein	O	O	O
may	O	O	O	O
be	O	O	O	O
of	O	O	O	O
functional	O	O	O	O
significance	O	O	O	O
.	O	O	O	O

3	O	O	O	O
)	O	O	O	O
In	O	O	O	O
Cushing	O	O	O	O
'	O	O	O	O
s	O	O	O	O
syndrome	O	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
CR	O	O	O	O
of	O	O	O	O
GR	B-protein	O	O	O
was	O	O	O	O
normal	O	O	O	O
in	O	O	O	O
spite	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
fact	O	O	O	O
that	O	O	O	O
the	O	O	O	O
CR	O	O	O	O
of	O	O	O	O
plasma	O	O	O	O
cortisol	O	O	O	O
was	O	O	O	O
disturbed	O	O	O	O
.	O	O	O	O

This	O	O	O	O
indicates	O	O	O	O
the	O	O	O	O
independency	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
CR	O	O	O	O
of	O	O	O	O
GR	B-protein	O	O	O
from	O	O	O	O
that	O	O	O	O
of	O	O	O	O
cortisol	O	O	O	O
.	O	O	O	O

4	O	O	O	O
)	O	O	O	O
In	O	O	O	O
apoplexy	O	O	O	O
caused	O	O	O	O
by	O	O	O	O
brain	O	O	O	O
ischemia	O	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
CR	O	O	O	O
of	O	O	O	O
GR	B-protein	O	O	O
was	O	O	O	O
abolished	O	O	O	O
in	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
with	O	O	O	O
basal	O	O	O	O
lesions	O	O	O	O
but	O	O	O	O
preserved	O	O	O	O
when	O	O	O	O
the	O	O	O	O
lesions	O	O	O	O
were	O	O	O	O
located	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
cerebral	O	O	O	O
cortex	O	O	O	O
.	O	O	O	O

These	O	O	O	O
results	O	O	O	O
strongly	O	O	O	O
suggest	O	O	O	O
that	O	O	O	O
the	O	O	O	O
main	O	O	O	O
"	O	O	O	O
circadian	O	O	O	O
pacemaker	O	O	O	O
"	O	O	O	O
of	O	O	O	O
GR	B-protein	O	O	O
is	O	O	O	O
located	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
basal	O	O	O	O
brain	O	O	O	O
,	O	O	O	O
most	O	O	O	O
probably	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
suprachiasmatic	O	O	O	O
nuclei	O	O	O	O
as	O	O	O	O
has	O	O	O	O
been	O	O	O	O
suggested	O	O	O	O
for	O	O	O	O
rodents	O	O	O	O
.	O	O	O	O

B	B-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
lymphoblastoid	I-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
lines	I-cell_line	O	O	O
from	O	O	O	O
multiple	O	O	O	O
sclerosis	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
and	O	O	O	O
a	O	O	O	O
healthy	O	O	O	O
control	O	O	O	O
producing	O	O	O	O
a	O	O	O	O
putative	O	O	O	O
new	O	O	O	O
human	O	O	O	O
retrovirus	O	O	O	O
and	O	O	O	O
Epstein	O	O	O	O
-	O	O	O	O
Barr	O	O	O	O
virus	O	O	O	O
.	O	O	O	O

On	O	O	O	O
several	O	O	O	O
occasions	O	O	O	O
we	O	O	O	O
have	O	O	O	O
observed	O	O	O	O
retrovirus	O	O	O	O
-	O	O	O	O
like	O	O	O	O
particles	O	O	O	O
(	O	O	O	O
RVLPs	O	O	O	O
)	O	O	O	O
by	O	O	O	O
transmission	O	O	O	O
electron	O	O	O	O
microscopy	O	O	O	O
(	O	O	O	O
EM	O	O	O	O
)	O	O	O	O
of	O	O	O	O
cultured	B-cell_line	O	O	O
T	I-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
from	O	O	O	O
a	O	O	O	O
patient	O	O	O	O
with	O	O	O	O
MS	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Later	O	O	O	O
we	O	O	O	O
established	O	O	O	O
spontaneously	O	O	O	O
formed	O	O	O	O
B	B-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
lymphoblastoid	I-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
lines	I-cell_line	O	O	O
(	O	O	O	O
LCLs	B-cell_line	O	O	O
)	O	O	O	O
from	O	O	O	O
a	O	O	O	O
patient	O	O	O	O
with	O	O	O	O
an	O	O	O	O
MS	O	O	O	O
-	O	O	O	O
like	O	O	O	O
disease	O	O	O	O
and	O	O	O	O
from	O	O	O	O
another	O	O	O	O
patient	O	O	O	O
with	O	O	O	O
MS	O	O	O	O
who	O	O	O	O
had	O	O	O	O
a	O	O	O	O
reactivated	O	O	O	O
Epstein	O	O	O	O
-	O	O	O	O
Barr	O	O	O	O
virus	O	O	O	O
(	O	O	O	O
EBV	O	O	O	O
)	O	O	O	O
infection	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Both	O	O	O	O
LCLs	B-cell_line	O	O	O
were	O	O	O	O
found	O	O	O	O
by	O	O	O	O
EM	O	O	O	O
to	O	O	O	O
produce	O	O	O	O
RVLP	O	O	O	O
and	O	O	O	O
EBV	O	O	O	O
particles	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Reverse	O	O	O	O
transcriptase	O	O	O	O
(	O	O	O	O
RT	O	O	O	O
)	O	O	O	O
assays	O	O	O	O
were	O	O	O	O
positive	O	O	O	O
in	O	O	O	O
purified	O	O	O	O
viral	O	O	O	O
material	O	O	O	O
from	O	O	O	O
both	O	O	O	O
LCLs	B-cell_line	O	O	O
.	O	O	O	O

To	O	O	O	O
substantiate	O	O	O	O
these	O	O	O	O
findings	O	O	O	O
we	O	O	O	O
initiated	O	O	O	O
an	O	O	O	O
intensified	O	O	O	O
culturing	O	O	O	O
procedure	O	O	O	O
and	O	O	O	O
were	O	O	O	O
able	O	O	O	O
to	O	O	O	O
establish	O	O	O	O
LCLs	B-cell_line	O	O	O
from	O	O	O	O
5	O	O	O	O
out	O	O	O	O
of	O	O	O	O
21	O	O	O	O
consecutive	O	O	O	O
MS	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
and	O	O	O	O
1	O	O	O	O
out	O	O	O	O
of	O	O	O	O
13	O	O	O	O
consecutive	O	O	O	O
healthy	O	O	O	O
controls	O	O	O	O
.	O	O	O	O

All	O	O	O	O
LCLs	B-cell_line	O	O	O
were	O	O	O	O
found	O	O	O	O
to	O	O	O	O
produce	O	O	O	O
both	O	O	O	O
RVLP	O	O	O	O
and	O	O	O	O
EBV	O	O	O	O
particles	O	O	O	O
by	O	O	O	O
EM	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Whether	O	O	O	O
the	O	O	O	O
putative	O	O	O	O
new	O	O	O	O
retrovirus	O	O	O	O
(	O	O	O	O
es	O	O	O	O
)	O	O	O	O
and	O	O	O	O
EBV	O	O	O	O
have	O	O	O	O
any	O	O	O	O
causal	O	O	O	O
relationship	O	O	O	O
to	O	O	O	O
MS	O	O	O	O
is	O	O	O	O
still	O	O	O	O
not	O	O	O	O
known	O	O	O	O
,	O	O	O	O
but	O	O	O	O
the	O	O	O	O
findings	O	O	O	O
support	O	O	O	O
this	O	O	O	O
possibility	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Identification	O	O	O	O
of	O	O	O	O
an	O	O	O	O
ionomycin	B-DNA	O	O	O
/	I-DNA	O	O	O
cyclosporin	I-DNA	O	O	O
A	I-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
responsive	I-DNA	O	O	O
element	I-DNA	O	O	O
within	O	O	O	O
the	O	O	O	O
human	B-DNA	O	O	O
T	I-DNA	O	O	O
cell	I-DNA	O	O	O
receptor	I-DNA	O	O	O
gamma	I-DNA	O	O	O
enhancer	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

Activation	O	O	O	O
through	O	O	O	O
the	O	O	O	O
Ca2	O	O	O	O
+	O	O	O	O
/	O	O	O	O
calcineurin	B-protein	O	O	O
pathway	O	O	O	O
is	O	O	O	O
essential	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
transcription	O	O	O	O
of	O	O	O	O
many	O	O	O	O
cytokine	B-DNA	O	O	O
genes	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
conserved	B-DNA	O	O	O
cis	I-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
acting	I-DNA	O	O	O
sequence	I-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
GGAAAA	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
transcription	B-protein	O	O	O
factors	I-protein	O	O	O
binding	O	O	O	O
to	O	O	O	O
this	O	O	O	O
sequence	O	O	O	O
are	O	O	O	O
involved	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
response	O	O	O	O
to	O	O	O	O
increased	O	O	O	O
intracellular	O	O	O	O
Ca2	O	O	O	O
+	O	O	O	O
concentrations	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Here	O	O	O	O
we	O	O	O	O
report	O	O	O	O
the	O	O	O	O
identification	O	O	O	O
and	O	O	O	O
importance	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
same	O	O	O	O
sequence	O	O	O	O
in	O	O	O	O
a	O	O	O	O
non	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
cytokine	I-DNA	O	O	O
gene	I-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
human	B-cell_type	B-protein	B-DNA	O
T	I-cell_type	I-protein	I-DNA	O
cell	I-cell_type	I-protein	I-DNA	O
receptor	O	I-protein	I-DNA	O
gamma	O	I-protein	I-DNA	O
(	O	O	I-DNA	O
TCRG	B-protein	O	I-DNA	O
)	O	O	I-DNA	O
enhancer	O	O	I-DNA	O
.	O	O	O	O

Results	O	O	O	O
from	O	O	O	O
site	O	O	O	O
-	O	O	O	O
directed	O	O	O	O
mutations	O	O	O	O
and	O	O	O	O
electrophoretic	O	O	O	O
mobility	O	O	O	O
shift	O	O	O	O
assays	O	O	O	O
strongly	O	O	O	O
suggest	O	O	O	O
that	O	O	O	O
this	O	O	O	O
sequence	O	O	O	O
mediates	O	O	O	O
the	O	O	O	O
ionomycin	O	O	O	O
-	O	O	O	O
induced	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
TCRG	B-DNA	O	O	O
enhancer	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

Our	O	O	O	O
studies	O	O	O	O
provide	O	O	O	O
an	O	O	O	O
explanation	O	O	O	O
for	O	O	O	O
a	O	O	O	O
previous	O	O	O	O
observation	O	O	O	O
that	O	O	O	O
TCRG	B-RNA	O	O	O
mRNA	I-RNA	O	O	O
levels	O	O	O	O
,	O	O	O	O
but	O	O	O	O
not	O	O	O	O
mRNA	O	O	O	O
levels	O	O	O	O
for	O	O	O	O
T	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
receptor	O	O	O	O
alpha	O	O	O	O
and	O	O	O	O
-	O	O	O	O
beta	O	O	O	O
,	O	O	O	O
are	O	O	O	O
increased	O	O	O	O
by	O	O	O	O
ionomycin	O	O	O	O
treatment	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Coexpression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
NF	B-protein	B-protein	O	O
-	I-protein	I-protein	O	O
kappa	I-protein	I-protein	O	O
B	I-protein	I-protein	O	O
/	O	I-protein	O	O
Rel	O	I-protein	O	O
and	O	O	O	O
Sp1	B-protein	O	O	O
transcription	B-protein	O	O	O
factors	I-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
human	O	O	O	O
immunodeficiency	O	O	O	O
virus	O	O	O	O
1	O	O	O	O
-	O	O	O	O
induced	O	O	O	O
,	O	O	O	O
dendritic	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
-	O	O	O	O
T	O	O	O	O
-	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
syncytia	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Productive	O	O	O	O
infection	O	O	O	O
of	O	O	O	O
T	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
with	O	O	O	O
human	O	O	O	O
immunodeficiency	O	O	O	O
virus	O	O	O	O
1	O	O	O	O
(	O	O	O	O
HIV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
1	O	O	O	O
)	O	O	O	O
typically	O	O	O	O
requires	O	O	O	O
that	O	O	O	O
the	O	O	O	O
T	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
be	O	O	O	O
stimulated	O	O	O	O
with	O	O	O	O
antigens	O	O	O	O
or	O	O	O	O
mitogens	O	O	O	O
.	O	O	O	O

This	O	O	O	O
requirement	O	O	O	O
has	O	O	O	O
been	O	O	O	O
attributed	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
transcription	B-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
which	O	O	O	O
synergizes	O	O	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
constitutive	B-protein	O	O	O
transcription	I-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
Sp1	B-protein	O	O	O
to	O	O	O	O
drive	O	O	O	O
the	O	O	O	O
HIV	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
1	I-DNA	O	O	O
promoter	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

Recently	O	O	O	O
,	O	O	O	O
we	O	O	O	O
have	O	O	O	O
found	O	O	O	O
that	O	O	O	O
vigorous	O	O	O	O
replication	O	O	O	O
of	O	O	O	O
HIV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
1	O	O	O	O
takes	O	O	O	O
place	O	O	O	O
in	O	O	O	O
nonactivated	O	O	O	O
memory	O	B-cell_type	O	O
T	B-cell_type	I-cell_type	O	O
cells	I-cell_type	I-cell_type	O	O
after	O	O	O	O
syncytium	O	O	O	O
formation	O	O	O	O
with	O	O	O	O
dendritic	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
(	O	O	O	O
DCs	B-cell_type	O	O	O
)	O	O	O	O
.	O	O	O	O

These	O	O	O	O
syncytia	O	O	O	O
lack	O	O	O	O
activated	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
as	O	O	O	O
determined	O	O	O	O
by	O	O	O	O
an	O	O	O	O
absence	O	O	O	O
of	O	O	O	O
staining	O	O	O	O
for	O	O	O	O
Ki	O	O	O	O
-	O	O	O	O
67	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
cycle	O	O	O	O
antigen	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
and	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
of	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
Sp1	B-protein	O	O	O
were	O	O	O	O
,	O	O	O	O
therefore	O	O	O	O
,	O	O	O	O
analyzed	O	O	O	O
in	O	O	O	O
isolated	O	O	O	O
T	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
and	O	O	O	O
DCs	B-cell_type	O	O	O
from	O	O	O	O
humans	O	O	O	O
and	O	O	O	O
mice	O	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
have	O	O	O	O
used	O	O	O	O
immunolabeling	O	O	O	O
,	O	O	O	O
Western	O	O	O	O
blot	O	O	O	O
analysis	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
electrophoretic	O	O	O	O
mobility	O	O	O	O
shift	O	O	O	O
and	O	O	O	O
supershift	O	O	O	O
assays	O	O	O	O
.	O	O	O	O

T	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
lack	O	O	O	O
active	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
but	O	O	O	O
express	O	O	O	O
Sp1	B-protein	O	O	O
as	O	O	O	O
expected	O	O	O	O
.	O	O	O	O

DCs	B-cell_type	O	O	O
express	O	O	O	O
high	O	O	O	O
levels	O	O	O	O
of	O	O	O	O
all	O	O	O	O
known	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
Rel	B-protein	O	O	O
proteins	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
with	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
residing	O	O	O	O
primarily	O	O	O	O
within	O	O	O	O
RelB	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
p50	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
p65	B-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

However	O	O	O	O
,	O	O	O	O
DCs	B-cell_type	O	O	O
lack	O	O	O	O
Sp1	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
which	O	O	O	O
may	O	O	O	O
explain	O	O	O	O
the	O	O	O	O
failure	O	O	O	O
of	O	O	O	O
HIV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
1	O	O	O	O
to	O	O	O	O
replicate	O	O	O	O
in	O	O	O	O
purified	O	O	O	O
DCs	B-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

Coexpression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
Sp1	B-protein	O	O	O
occurs	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
heterologous	B-cell_type	O	O	O
DC	I-cell_type	O	O	O
-	I-cell_type	O	O	O
T	I-cell_type	O	O	O
-	I-cell_type	O	O	O
cell	I-cell_type	O	O	O
syncytia	I-cell_type	O	O	O
that	O	O	O	O
are	O	O	O	O
induced	O	O	O	O
by	O	O	O	O
HIV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
1	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Therefore	O	O	O	O
,	O	O	O	O
HIV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
1	O	O	O	O
-	O	O	O	O
induced	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
fusion	O	O	O	O
brings	O	O	O	O
together	O	O	O	O
factors	O	O	O	O
that	O	O	O	O
upregulate	O	O	O	O
virus	O	O	O	O
transcription	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Since	O	O	O	O
DCs	B-cell_type	O	O	O
and	O	O	O	O
memory	O	O	O	O
T	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
frequently	O	O	O	O
traffic	O	O	O	O
together	O	O	O	O
in	O	O	O	O
situ	O	O	O	O
,	O	O	O	O
these	O	O	O	O
unusual	O	O	O	O
heterologous	B-cell_type	O	O	O
syncytia	I-cell_type	O	O	O
could	O	O	O	O
develop	O	O	O	O
in	O	O	O	O
infected	O	O	O	O
individuals	O	O	O	O
and	O	O	O	O
lead	O	O	O	O
to	O	O	O	O
chronic	O	O	O	O
HIV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
1	O	O	O	O
replication	O	O	O	O
without	O	O	O	O
ostensible	O	O	O	O
immune	O	O	O	O
stimulation	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Cupric	O	O	O	O
ion	O	O	O	O
blocks	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
activation	O	O	O	O
through	O	O	O	O
inhibiting	O	O	O	O
the	O	O	O	O
signal	O	O	O	O
-	O	O	O	O
induced	O	O	O	O
phosphorylation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
I	B-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

A	O	O	O	O
transcription	B-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
which	O	O	O	O
regulates	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
various	O	O	O	O
cellular	O	O	O	O
genes	O	O	O	O
involved	O	O	O	O
in	O	O	O	O
immune	O	O	O	O
responses	O	O	O	O
and	O	O	O	O
viral	B-DNA	O	O	O
genes	I-DNA	O	O	O
including	O	O	O	O
HIV	O	O	O	O
,	O	O	O	O
is	O	O	O	O
sequestered	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
cytoplasm	O	O	O	O
as	O	O	O	O
a	O	O	O	O
complex	O	O	O	O
with	O	O	O	O
an	O	O	O	O
inhibitory	B-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
I	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Various	O	O	O	O
extracellular	O	O	O	O
signals	O	O	O	O
induce	O	O	O	O
phosphorylation	O	O	O	O
and	O	O	O	O
rapid	O	O	O	O
degradation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
I	B-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
to	O	O	O	O
release	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Cu2	O	O	O	O
+	O	O	O	O
was	O	O	O	O
found	O	O	O	O
to	O	O	O	O
inhibit	O	O	O	O
the	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
induced	O	O	O	O
by	O	O	O	O
TNF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
TPA	O	O	O	O
,	O	O	O	O
or	O	O	O	O
H2O2	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Deoxycholate	O	O	O	O
treatment	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
cytoplasmic	O	O	O	O
extract	O	O	O	O
prepared	O	O	O	O
from	O	O	O	O
cells	O	O	O	O
stimulated	O	O	O	O
by	O	O	O	O
TNF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
presence	O	O	O	O
of	O	O	O	O
Cu2	O	O	O	O
+	O	O	O	O
resulted	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
release	O	O	O	O
of	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
from	O	O	O	O
I	B-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
indicating	O	O	O	O
that	O	O	O	O
Cu2	O	O	O	O
+	O	O	O	O
interferes	O	O	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
dissociation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
NF	B-protein	B-protein	O	O
kappa	I-protein	I-protein	O	O
B	I-protein	I-protein	O	O
-	O	I-protein	O	O
I	O	I-protein	O	O
kappa	O	I-protein	O	O
B	O	I-protein	O	O
complex	O	I-protein	O	O
.	O	O	O	O

Neither	O	O	O	O
phosphorylation	O	O	O	O
nor	O	O	O	O
degradation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
I	B-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
was	O	O	O	O
observed	O	O	O	O
upon	O	O	O	O
TNF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
stimulation	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
presence	O	O	O	O
of	O	O	O	O
Cu2	O	O	O	O
+	O	O	O	O
.	O	O	O	O

These	O	O	O	O
results	O	O	O	O
indicate	O	O	O	O
that	O	O	O	O
Cu2	O	O	O	O
+	O	O	O	O
inhibits	O	O	O	O
the	O	O	O	O
release	O	O	O	O
of	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
by	O	O	O	O
blockade	O	O	O	O
of	O	O	O	O
a	O	O	O	O
signal	O	O	O	O
leading	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
phosphorylation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
I	B-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Cloning	O	O	O	O
a	O	O	O	O
cDNA	B-DNA	O	O	O
from	O	O	O	O
human	O	O	O	O
NK	O	B-cell_type	O	O
/	O	I-cell_type	O	O
T	B-cell_type	I-cell_type	O	O
cells	I-cell_type	I-cell_type	O	O
which	O	O	O	O
codes	O	O	O	O
for	O	O	O	O
a	O	O	O	O
protein	O	O	O	O
with	O	O	O	O
high	O	O	O	O
proline	O	O	O	O
content	O	O	O	O
.	O	O	O	O

A	O	O	O	O
cDNA	B-DNA	O	O	O
clone	I-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
B4	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
2	I-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
was	O	O	O	O
isolated	O	O	O	O
from	O	O	O	O
a	O	O	O	O
natural	B-DNA	O	O	O
killer	I-DNA	O	O	O
(	I-DNA	O	O	O
NK	I-DNA	O	O	O
)	I-DNA	O	O	O
minus	I-DNA	O	O	O
T	I-DNA	O	O	O
cell	I-DNA	O	O	O
subtractive	I-DNA	O	O	O
library	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
B4	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
2	I-DNA	O	O	O
clone	O	O	O	O
coded	O	O	O	O
for	O	O	O	O
an	O	O	O	O
mRNA	B-RNA	O	O	O
of	O	O	O	O
2061	O	O	O	O
bp	O	O	O	O
in	O	O	O	O
length	O	O	O	O
.	O	O	O	O

It	O	O	O	O
encodes	O	O	O	O
a	O	O	O	O
deduced	O	O	O	O
327	B-protein	O	O	O
aa	I-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
with	O	O	O	O
a	O	O	O	O
calculated	O	O	O	O
molecular	O	O	O	O
mass	O	O	O	O
of	O	O	O	O
35	O	O	O	O
.	O	O	O	O
2	O	O	O	O
kDa	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Searching	O	O	O	O
of	O	O	O	O
B4	B-DNA	B-DNA	O	O
-	I-DNA	I-DNA	O	O
2	I-DNA	I-DNA	O	O
DNA	O	I-DNA	O	O
and	O	O	O	O
protein	O	O	O	O
sequences	O	O	O	O
against	O	O	O	O
various	O	O	O	O
databases	O	O	O	O
revealed	O	O	O	O
no	O	O	O	O
high	O	O	O	O
homology	O	O	O	O
to	O	O	O	O
other	O	O	O	O
sequences	O	O	O	O
.	O	O	O	O

However	O	O	O	O
,	O	O	O	O
B4	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
2	I-DNA	O	O	O
has	O	O	O	O
an	O	O	O	O
unusually	O	O	O	O
high	O	O	O	O
proline	O	O	O	O
content	O	O	O	O
(	O	O	O	O
13	O	O	O	O
%	O	O	O	O
)	O	O	O	O
,	O	O	O	O
contains	O	O	O	O
a	O	O	O	O
putative	O	O	O	O
nuclear	B-protein	O	O	O
targeting	I-protein	O	O	O
sequence	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
has	O	O	O	O
several	O	O	O	O
SPXX	B-protein	O	O	O
motifs	I-protein	O	O	O
which	O	O	O	O
are	O	O	O	O
frequently	O	O	O	O
found	O	O	O	O
in	O	O	O	O
gene	B-protein	O	O	O
regulatory	I-protein	O	O	O
proteins	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

One	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
stretches	O	O	O	O
of	O	O	O	O
prolines	O	O	O	O
in	O	O	O	O
B4	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
2	I-DNA	O	O	O
closely	O	O	O	O
resembles	O	O	O	O
the	O	O	O	O
ligand	O	O	O	O
for	O	O	O	O
proteins	O	O	O	O
with	O	O	O	O
SH3	B-protein	O	O	O
domains	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Northern	O	O	O	O
hybridization	O	O	O	O
data	O	O	O	O
showed	O	O	O	O
that	O	O	O	O
B4	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
2	I-DNA	O	O	O
is	O	O	O	O
not	O	O	O	O
a	O	O	O	O
lymphoid	B-DNA	O	O	O
specific	I-DNA	O	O	O
gene	I-DNA	O	O	O
and	O	O	O	O
is	O	O	O	O
expressed	O	O	O	O
in	O	O	O	O
a	O	O	O	O
hepatoma	B-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
line	I-cell_line	O	O	O
and	O	O	O	O
also	O	O	O	O
weakly	O	O	O	O
transcribed	O	O	O	O
or	O	O	O	O
absent	O	O	O	O
in	O	O	O	O
a	O	O	O	O
variety	O	O	O	O
of	O	O	O	O
other	O	O	O	O
cells	O	O	O	O
.	O	O	O	O

A	O	O	O	O
polyclonal	O	O	O	O
antiserum	O	O	O	O
raised	O	O	O	O
against	O	O	O	O
recombinant	O	B-protein	O	O
B4	B-DNA	I-protein	O	O
-	I-DNA	I-protein	O	O
2	I-DNA	I-protein	O	O
recognizes	O	O	O	O
a	O	O	O	O
32	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
34	I-protein	O	O	O
kDa	I-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
lymphocytes	B-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

Activation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
JAK3	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
but	O	O	O	O
not	O	O	O	O
JAK1	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
is	O	O	O	O
critical	O	O	O	O
for	O	O	O	O
IL	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
-	O	O	O	O
induced	O	O	O	O
proliferation	O	O	O	O
and	O	O	O	O
STAT5	B-protein	O	O	O
recruitment	O	O	O	O
by	O	O	O	O
a	O	O	O	O
COOH	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
terminal	I-protein	O	O	O
region	I-protein	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
IL	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
receptor	I-protein	O	O	O
beta	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
chain	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

A	O	O	O	O
number	O	O	O	O
of	O	O	O	O
cytokines	B-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
growth	B-protein	O	O	O
factors	I-protein	O	O	O
use	O	O	O	O
the	O	O	O	O
JAK	B-protein	O	O	O
-	B-protein	O	O	O
STAT	I-protein	O	O	O
pathway	O	O	O	O
to	O	O	O	O
signal	O	O	O	O
from	O	O	O	O
the	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
membrane	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
nucleus	O	O	O	O
.	O	O	O	O

While	O	O	O	O
homodimerizing	B-protein	O	O	O
cytokine	I-protein	O	O	O
receptors	I-protein	O	O	O
may	O	O	O	O
transmit	O	O	O	O
signal	O	O	O	O
via	O	O	O	O
a	O	O	O	O
single	O	O	O	O
form	O	O	O	O
of	O	O	O	O
JAK	B-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
i	O	O	O	O
.	O	O	O	O
e	O	O	O	O
.	O	O	O	O
growth	B-protein	O	O	O
hormone	I-protein	O	O	O
receptors	I-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
,	O	O	O	O
several	O	O	O	O
multicomponent	B-protein	O	O	O
cytokine	I-protein	O	O	O
receptors	I-protein	O	O	O
have	O	O	O	O
been	O	O	O	O
shown	O	O	O	O
to	O	O	O	O
require	O	O	O	O
simultaneous	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
pairs	O	O	O	O
of	O	O	O	O
different	O	O	O	O
JAK	B-protein	O	O	O
kinases	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
i	O	O	O	O
.	O	O	O	O
e	O	O	O	O
.	O	O	O	O
interferon	B-protein	O	O	O
receptors	I-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Recent	O	O	O	O
evidence	O	O	O	O
for	O	O	O	O
a	O	O	O	O
preferential	O	O	O	O
coupling	O	O	O	O
of	O	O	O	O
JAK3	B-protein	O	O	O
to	O	O	O	O
interleukin	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
receptor	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
gamma	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
IL	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2R	I-protein	O	O	O
gamma	I-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
and	O	O	O	O
JAK1	B-protein	O	O	O
to	O	O	O	O
IL	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2R	I-protein	O	O	O
beta	I-protein	O	O	O
supports	O	O	O	O
the	O	O	O	O
concept	O	O	O	O
of	O	O	O	O
heterotrans	O	O	O	O
-	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
JAK1	B-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
JAK3	B-protein	O	O	O
caused	O	O	O	O
by	O	O	O	O
IL	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
-	O	O	O	O
induced	O	O	O	O
heterodimerization	O	O	O	O
of	O	O	O	O
their	O	O	O	O
receptor	O	O	O	O
partners	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
present	O	O	O	O
study	O	O	O	O
verified	O	O	O	O
the	O	O	O	O
ability	O	O	O	O
of	O	O	O	O
IL	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
to	O	O	O	O
cause	O	O	O	O
tyrosine	O	O	O	O
phosphorylation	O	O	O	O
and	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
JAK1	B-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
JAK3	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
but	O	O	O	O
demonstrated	O	O	O	O
that	O	O	O	O
IL	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
stimulated	O	O	O	O
JAK3	B-protein	O	O	O
to	O	O	O	O
a	O	O	O	O
significantly	O	O	O	O
larger	O	O	O	O
extent	O	O	O	O
than	O	O	O	O
JAK1	B-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
human	B-cell_type	O	O	O
T	I-cell_type	O	O	O
lymphocytes	I-cell_type	O	O	O
and	O	O	O	O
the	O	O	O	O
YT	B-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
line	I-cell_line	O	O	O
.	O	O	O	O

This	O	O	O	O
conclusion	O	O	O	O
was	O	O	O	O
based	O	O	O	O
upon	O	O	O	O
several	O	O	O	O
independent	O	O	O	O
criteria	O	O	O	O
,	O	O	O	O
including	O	O	O	O
more	O	O	O	O
vigorous	O	O	O	O
tyrosine	O	O	O	O
phosphorylation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
JAK3	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
more	O	O	O	O
marked	O	O	O	O
enzymatic	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
JAK3	B-protein	O	O	O
as	O	O	O	O
well	O	O	O	O
as	O	O	O	O
higher	O	O	O	O
abundance	O	O	O	O
of	O	O	O	O
JAK3	B-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
activated	O	O	O	O
IL	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
receptor	I-protein	O	O	O
complexes	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Furthermore	O	O	O	O
,	O	O	O	O
when	O	O	O	O
human	O	B-protein	O	O
IL	B-protein	I-protein	O	O
-	I-protein	I-protein	O	O
2R	I-protein	I-protein	O	O
beta	O	I-protein	O	O
was	O	O	O	O
stably	O	O	O	O
expressed	O	O	O	O
in	O	O	O	O
murine	B-cell_line	O	O	O
BA	I-cell_line	O	O	O
/	I-cell_line	O	O	O
F3	I-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
,	O	O	O	O
robust	O	O	O	O
IL	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
-	O	O	O	O
induced	O	O	O	O
proliferation	O	O	O	O
and	O	O	O	O
JAK3	B-protein	O	O	O
activation	O	O	O	O
occurred	O	O	O	O
without	O	O	O	O
detectable	O	O	O	O
involvement	O	O	O	O
of	O	O	O	O
either	O	O	O	O
JAK1	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
JAK2	B-protein	O	O	O
or	O	O	O	O
TYK2	B-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
therefore	O	O	O	O
propose	O	O	O	O
that	O	O	O	O
IL	B-protein	B-protein	O	O
-	I-protein	I-protein	O	O
2	I-protein	I-protein	O	O
receptor	O	I-protein	O	O
signal	O	O	O	O
transduction	O	O	O	O
does	O	O	O	O
not	O	O	O	O
depend	O	O	O	O
on	O	O	O	O
equimolar	O	O	O	O
heterodimerization	O	O	O	O
of	O	O	O	O
JAK1	B-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
JAK3	B-protein	O	O	O
following	O	O	O	O
IL	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
-	O	O	O	O
induced	O	O	O	O
heterodimerization	O	O	O	O
of	O	O	O	O
IL	B-protein	B-protein	O	O
-	I-protein	I-protein	O	O
2R	I-protein	I-protein	O	O
beta	O	I-protein	O	O
and	O	O	O	O
IL	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2R	I-protein	O	O	O
gamma	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Nonetheless	O	O	O	O
,	O	O	O	O
a	O	O	O	O
membrane	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
proximal	I-protein	O	O	O
region	I-protein	O	O	O
of	O	O	O	O
human	O	O	O	O
IL	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2R	I-protein	O	O	O
beta	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
Asn240	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
Leu335	I-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
was	O	O	O	O
critical	O	O	O	O
for	O	O	O	O
JAK3	B-protein	O	O	O
activation	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
the	O	O	O	O
amount	O	O	O	O
of	O	O	O	O
JAK3	B-protein	O	O	O
present	O	O	O	O
in	O	O	O	O
activated	O	O	O	O
IL	B-protein	B-protein	O	O
-	I-protein	I-protein	O	O
2	I-protein	I-protein	O	O
receptor	O	I-protein	O	O
complexes	O	I-protein	O	O
increased	O	O	O	O
with	O	O	O	O
time	O	O	O	O
,	O	O	O	O
suggesting	O	O	O	O
that	O	O	O	O
stabilization	O	O	O	O
of	O	O	O	O
JAK3	B-protein	O	O	O
binding	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
receptor	B-protein	O	O	O
complex	I-protein	O	O	O
relies	O	O	O	O
on	O	O	O	O
both	O	O	O	O
IL	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2R	I-protein	O	O	O
beta	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
IL	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2R	I-protein	O	O	O
gamma	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Moreover	O	O	O	O
,	O	O	O	O
STAT5	B-protein	O	O	O
was	O	O	O	O
found	O	O	O	O
to	O	O	O	O
be	O	O	O	O
the	O	O	O	O
predominant	O	O	O	O
STAT	B-protein	O	O	O
transcription	I-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
used	O	O	O	O
by	O	O	O	O
IL	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
human	O	B-cell_type	O	O
T	B-cell_type	I-cell_type	O	O
cells	I-cell_type	I-cell_type	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
specifically	O	O	O	O
required	O	O	O	O
a	O	O	O	O
COOH	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
terminal	I-protein	O	O	O
region	I-protein	O	O	O
of	O	O	O	O
IL	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2R	I-protein	O	O	O
beta	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
Ser386	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
Val525	I-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
,	O	O	O	O
while	O	O	O	O
STAT5	B-protein	O	O	O
recruitment	O	O	O	O
was	O	O	O	O
not	O	O	O	O
correlated	O	O	O	O
to	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
IL	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2R	I-protein	O	O	O
gamma	I-protein	O	O	O
or	O	O	O	O
JAK3	B-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Up	O	O	O	O
-	O	O	O	O
regulation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
high	O	O	O	O
-	O	O	O	O
affinity	O	O	O	O
dehydroepiandrosterone	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
by	O	O	O	O
dehydroepiandrosterone	O	O	O	O
in	O	O	O	O
activated	O	O	O	O
human	B-cell_type	O	O	O
T	I-cell_type	O	O	O
lymphocytes	I-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

Although	O	O	O	O
evidence	O	O	O	O
indicates	O	O	O	O
that	O	O	O	O
dehydroepiandrosterone	O	O	O	O
(	O	O	O	O
DHEA	O	O	O	O
)	O	O	O	O
exerts	O	O	O	O
direct	O	O	O	O
physiological	O	O	O	O
effects	O	O	O	O
,	O	O	O	O
its	O	O	O	O
mechanism	O	O	O	O
of	O	O	O	O
action	O	O	O	O
remains	O	O	O	O
unknown	O	O	O	O
.	O	O	O	O

DHEA	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
sites	O	O	O	O
were	O	O	O	O
examined	O	O	O	O
using	O	O	O	O
a	O	O	O	O
whole	O	O	O	O
-	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
assay	O	O	O	O
in	O	O	O	O
a	O	O	O	O
human	B-cell_line	O	O	O
T	I-cell_line	O	O	O
lymphoid	I-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
line	I-cell_line	O	O	O
,	O	O	O	O
PEER	B-cell_line	O	O	O
,	O	O	O	O
revealing	O	O	O	O
that	O	O	O	O
a	O	O	O	O
single	O	O	O	O
class	O	O	O	O
of	O	O	O	O
high	O	O	O	O
-	O	O	O	O
affinity	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
sites	O	O	O	O
for	O	O	O	O
DHEA	O	O	O	O
(	O	O	O	O
dissociation	O	O	O	O
constant	O	O	O	O
=	O	O	O	O
7	O	O	O	O
.	O	O	O	O
4	O	O	O	O
+	O	O	O	O
/	O	O	O	O
-	O	O	O	O
0	O	O	O	O
.	O	O	O	O
53	O	O	O	O
nmol	O	O	O	O
/	O	O	O	O
L	O	O	O	O
,	O	O	O	O
mean	O	O	O	O
+	O	O	O	O
/	O	O	O	O
-	O	O	O	O
SE	O	O	O	O
,	O	O	O	O
n	O	O	O	O
=	O	O	O	O
4	O	O	O	O
)	O	O	O	O
was	O	O	O	O
greatly	O	O	O	O
increased	O	O	O	O
when	O	O	O	O
treated	O	O	O	O
with	O	O	O	O
DHEA	O	O	O	O
,	O	O	O	O
phorbol	O	O	O	O
-	O	O	O	O
12	O	O	O	O
-	O	O	O	O
myristate	O	O	O	O
-	O	O	O	O
13	O	O	O	O
-	O	O	O	O
acetate	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
the	O	O	O	O
Ca2	O	O	O	O
+	O	O	O	O
ionophore	O	O	O	O
A23187	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Bound	O	O	O	O
[	O	O	O	O
3H	O	O	O	O
]	O	O	O	O
DHEA	O	O	O	O
was	O	O	O	O
displaced	O	O	O	O
sensitively	O	O	O	O
by	O	O	O	O
DHEA	O	O	O	O
and	O	O	O	O
secondarily	O	O	O	O
by	O	O	O	O
dihydrotestosterone	O	O	O	O
,	O	O	O	O
but	O	O	O	O
not	O	O	O	O
effectively	O	O	O	O
by	O	O	O	O
other	O	O	O	O
steroids	O	O	O	O
,	O	O	O	O
including	O	O	O	O
DHEA	O	O	O	O
sulfate	O	O	O	O
.	O	O	O	O

These	O	O	O	O
results	O	O	O	O
not	O	O	O	O
only	O	O	O	O
indicate	O	O	O	O
the	O	O	O	O
existence	O	O	O	O
of	O	O	O	O
a	O	O	O	O
DHEA	B-protein	O	O	O
receptor	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
but	O	O	O	O
also	O	O	O	O
suggest	O	O	O	O
that	O	O	O	O
T	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
become	O	O	O	O
susceptible	O	O	O	O
to	O	O	O	O
regulation	O	O	O	O
by	O	O	O	O
DHEA	O	O	O	O
during	O	O	O	O
the	O	O	O	O
process	O	O	O	O
of	O	O	O	O
signal	O	O	O	O
-	O	O	O	O
induced	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Ubiquitin	O	O	O	O
-	O	O	O	O
mediated	O	O	O	O
processing	O	O	O	O
of	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
transcriptional	B-protein	O	O	O
activator	I-protein	O	O	O
precursor	I-protein	O	O	O
p105	B-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Reconstitution	O	O	O	O
of	O	O	O	O
a	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
-	O	O	O	O
free	O	O	O	O
system	O	O	O	O
and	O	O	O	O
identification	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
ubiquitin	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
carrier	I-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
E2	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
a	O	O	O	O
novel	O	O	O	O
ubiquitin	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
ligase	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
E3	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
involved	O	O	O	O
in	O	O	O	O
conjugation	O	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
most	O	O	O	O
cases	O	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
transcriptional	B-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
is	O	O	O	O
a	O	O	O	O
heterodimer	B-protein	O	O	O
consisting	O	O	O	O
of	O	O	O	O
two	O	O	O	O
subunits	O	O	O	O
,	O	O	O	O
p50	B-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
p65	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
which	O	O	O	O
are	O	O	O	O
encoded	O	O	O	O
by	O	O	O	O
two	O	O	O	O
distinct	O	O	O	O
genes	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
Rel	B-DNA	O	O	O
family	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

p50	B-protein	O	O	O
is	O	O	O	O
translated	O	O	O	O
as	O	O	O	O
a	O	O	O	O
precursor	O	O	O	O
of	O	O	O	O
105	B-protein	O	O	O
kDa	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
C	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
terminal	I-protein	O	O	O
domain	I-protein	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
precursor	O	O	O	O
is	O	O	O	O
rapidly	O	O	O	O
degraded	O	O	O	O
,	O	O	O	O
forming	O	O	O	O
the	O	O	O	O
mature	B-protein	O	O	O
p50	I-protein	O	O	O
subunit	I-protein	O	O	O
consisted	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
N	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
terminal	I-protein	O	O	O
region	I-protein	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
molecule	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
mechanism	O	O	O	O
of	O	O	O	O
generation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
p50	B-protein	O	O	O
is	O	O	O	O
not	O	O	O	O
known	O	O	O	O
.	O	O	O	O

It	O	O	O	O
has	O	O	O	O
been	O	O	O	O
suggested	O	O	O	O
that	O	O	O	O
the	O	O	O	O
ubiquitin	B-protein	O	O	O
-	B-protein	O	O	O
proteasome	I-protein	O	O	O
system	O	O	O	O
is	O	O	O	O
involved	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
process	O	O	O	O
;	O	O	O	O
however	O	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
specific	O	O	O	O
enzymes	B-protein	O	O	O
involved	O	O	O	O
and	O	O	O	O
the	O	O	O	O
mechanism	O	O	O	O
of	O	O	O	O
limited	O	O	O	O
proteolysis	O	O	O	O
,	O	O	O	O
in	O	O	O	O
which	O	O	O	O
half	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
molecule	O	O	O	O
is	O	O	O	O
spared	O	O	O	O
,	O	O	O	O
have	O	O	O	O
been	O	O	O	O
obscure	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Palombella	O	O	O	O
and	O	O	O	O
colleagues	O	O	O	O
(	O	O	O	O
Palombella	O	O	O	O
,	O	O	O	O
V	O	O	O	O
.	O	O	O	O
J	O	O	O	O
.	O	O	O	O
,	O	O	O	O
Rando	O	O	O	O
,	O	O	O	O
O	O	O	O	O
.	O	O	O	O
J	O	O	O	O
.	O	O	O	O
,	O	O	O	O
Goldberg	O	O	O	O
,	O	O	O	O
A	O	O	O	O
.	O	O	O	O
L	O	O	O	O
.	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
Maniatis	O	O	O	O
,	O	O	O	O
T	O	O	O	O
.	O	O	O	O
(	O	O	O	O
1994	O	O	O	O
)	O	O	O	O
Cell	O	O	O	O
78	O	O	O	O
,	O	O	O	O
773	O	O	O	O
-	O	O	O	O
785	O	O	O	O
)	O	O	O	O
have	O	O	O	O
shown	O	O	O	O
that	O	O	O	O
ubiquitin	B-protein	O	O	O
is	O	O	O	O
required	O	O	O	O
for	O	O	O	O
the	O	O	O	O
processing	O	O	O	O
in	O	O	O	O
a	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
-	O	O	O	O
free	O	O	O	O
system	O	O	O	O
of	O	O	O	O
a	O	O	O	O
truncated	O	O	O	O
,	O	O	O	O
artificially	O	O	O	O
constructed	O	O	O	O
,	O	O	O	O
60	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kDa	I-protein	O	O	O
precursor	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

They	O	O	O	O
have	O	O	O	O
also	O	O	O	O
shown	O	O	O	O
that	O	O	O	O
proteasome	B-protein	O	O	O
inhibitors	O	O	O	O
block	O	O	O	O
the	O	O	O	O
processing	O	O	O	O
both	O	O	O	O
in	O	O	O	O
vitro	O	O	O	O
and	O	O	O	O
in	O	O	O	O
vivo	O	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
this	O	O	O	O
study	O	O	O	O
,	O	O	O	O
we	O	O	O	O
demonstrate	O	O	O	O
reconstitution	O	O	O	O
of	O	O	O	O
a	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
-	O	O	O	O
free	O	O	O	O
processing	O	O	O	O
system	O	O	O	O
and	O	O	O	O
demonstrate	O	O	O	O
directly	O	O	O	O
that	O	O	O	O
:	O	O	O	O
(	O	O	O	O
a	O	O	O	O
)	O	O	O	O
the	O	O	O	O
ubiquitin	B-protein	O	O	O
-	B-protein	O	O	O
proteasome	I-protein	O	O	O
system	O	O	O	O
is	O	O	O	O
involved	O	O	O	O
in	O	O	O	O
processing	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
intact	O	O	O	O
p105	B-protein	O	O	O
precursor	O	O	O	O
,	O	O	O	O
(	O	O	O	O
b	O	O	O	O
)	O	O	O	O
conjugation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
ubiquitin	B-protein	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
precursor	O	O	O	O
is	O	O	O	O
an	O	O	O	O
essential	O	O	O	O
intermediate	O	O	O	O
step	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
processing	O	O	O	O
,	O	O	O	O
(	O	O	O	O
c	O	O	O	O
)	O	O	O	O
the	O	O	O	O
recently	O	O	O	O
discovered	O	O	O	O
novel	O	O	O	O
species	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
ubiquitin	B-protein	B-protein	O	O
-	O	I-protein	O	O
carrier	O	I-protein	O	O
protein	O	I-protein	O	O
,	O	O	O	O
E2	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
F1	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
that	O	O	O	O
is	O	O	O	O
involved	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
conjugation	O	O	O	O
and	O	O	O	O
degradation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
p53	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
is	O	O	O	O
also	O	O	O	O
required	O	O	O	O
for	O	O	O	O
the	O	O	O	O
limited	O	O	O	O
processing	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
p105	B-protein	O	O	O
precursor	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
(	O	O	O	O
d	O	O	O	O
)	O	O	O	O
a	O	O	O	O
novel	O	O	O	O
,	O	O	O	O
approximately	O	O	O	O
320	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kDa	I-protein	O	O	O
species	I-protein	O	O	O
of	O	O	O	O
ubiquitin	B-protein	B-protein	O	O
-	O	I-protein	O	O
protein	O	I-protein	O	O
ligase	O	I-protein	O	O
,	O	O	O	O
is	O	O	O	O
involved	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
process	O	O	O	O
.	O	O	O	O

This	O	O	O	O
novel	O	O	O	O
enzyme	O	O	O	O
is	O	O	O	O
distinct	O	O	O	O
from	O	O	O	O
E6	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
AP	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
p53	B-protein	B-protein	O	O
-	O	I-protein	O	O
conjugating	O	I-protein	O	O
ligase	O	I-protein	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
from	O	O	O	O
E3	B-protein	B-protein	O	O
alpha	O	I-protein	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
"	B-protein	O	O	O
N	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
end	I-protein	O	O	O
rule	I-protein	O	O	O
"	I-protein	O	O	O
ligase	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Flutamide	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
treatment	O	O	O	O
of	O	O	O	O
hirsutism	O	O	O	O
:	O	O	O	O
long	O	O	O	O
-	O	O	O	O
term	O	O	O	O
clinical	O	O	O	O
effects	O	O	O	O
,	O	O	O	O
endocrine	O	O	O	O
changes	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
androgen	B-protein	O	O	O
receptor	I-protein	O	O	O
behavior	O	O	O	O
.	O	O	O	O

OBJECTIVE	O	O	O	O
:	O	O	O	O
To	O	O	O	O
investigate	O	O	O	O
the	O	O	O	O
long	O	O	O	O
-	O	O	O	O
term	O	O	O	O
effects	O	O	O	O
of	O	O	O	O
treatment	O	O	O	O
with	O	O	O	O
low	O	O	O	O
doses	O	O	O	O
of	O	O	O	O
flutamide	O	O	O	O
on	O	O	O	O
clinical	O	O	O	O
and	O	O	O	O
hormonal	O	O	O	O
parameters	O	O	O	O
,	O	O	O	O
as	O	O	O	O
well	O	O	O	O
as	O	O	O	O
on	O	O	O	O
the	O	O	O	O
androgen	B-protein	O	O	O
receptor	I-protein	O	O	O
status	O	O	O	O
,	O	O	O	O
in	O	O	O	O
hirsute	O	O	O	O
women	O	O	O	O
.	O	O	O	O

DESIGN	O	O	O	O
:	O	O	O	O
Eighteen	O	O	O	O
hirsute	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
with	O	O	O	O
regular	O	O	O	O
menses	O	O	O	O
were	O	O	O	O
studied	O	O	O	O
basally	O	O	O	O
and	O	O	O	O
during	O	O	O	O
treatment	O	O	O	O
with	O	O	O	O
125	O	O	O	O
mg	O	O	O	O
flutamide	O	O	O	O
,	O	O	O	O
three	O	O	O	O
times	O	O	O	O
per	O	O	O	O
day	O	O	O	O
for	O	O	O	O
12	O	O	O	O
months	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Barrier	O	O	O	O
or	O	O	O	O
intrauterine	O	O	O	O
contraception	O	O	O	O
was	O	O	O	O
used	O	O	O	O
during	O	O	O	O
the	O	O	O	O
study	O	O	O	O
in	O	O	O	O
sexually	O	O	O	O
active	O	O	O	O
women	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Safety	O	O	O	O
parameters	O	O	O	O
were	O	O	O	O
assessed	O	O	O	O
throughout	O	O	O	O
the	O	O	O	O
study	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Hirsutism	O	O	O	O
,	O	O	O	O
graded	O	O	O	O
by	O	O	O	O
the	O	O	O	O
modified	O	O	O	O
Ferriman	O	O	O	O
-	O	O	O	O
Gallwey	O	O	O	O
score	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
hormonal	O	O	O	O
parameters	O	O	O	O
were	O	O	O	O
evaluated	O	O	O	O
basally	O	O	O	O
and	O	O	O	O
at	O	O	O	O
4	O	O	O	O
-	O	O	O	O
month	O	O	O	O
intervals	O	O	O	O
during	O	O	O	O
treatment	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Gonadotropin	O	O	O	O
-	O	O	O	O
releasing	O	O	O	O
hormone	O	O	O	O
and	O	O	O	O
ACTH	O	O	O	O
stimulation	O	O	O	O
tests	O	O	O	O
were	O	O	O	O
performed	O	O	O	O
before	O	O	O	O
and	O	O	O	O
after	O	O	O	O
3	O	O	O	O
to	O	O	O	O
4	O	O	O	O
months	O	O	O	O
of	O	O	O	O
therapy	O	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
addition	O	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
concentration	O	O	O	O
of	O	O	O	O
androgen	B-protein	O	O	O
receptors	I-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
mononuclear	B-cell_type	O	O	O
leukocytes	I-cell_type	O	O	O
was	O	O	O	O
measured	O	O	O	O
,	O	O	O	O
in	O	O	O	O
both	O	O	O	O
the	O	O	O	O
follicular	O	O	O	O
and	O	O	O	O
luteal	O	O	O	O
phases	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
menstrual	O	O	O	O
cycle	O	O	O	O
,	O	O	O	O
basally	O	O	O	O
and	O	O	O	O
after	O	O	O	O
4	O	O	O	O
months	O	O	O	O
of	O	O	O	O
flutamide	O	O	O	O
treatment	O	O	O	O
.	O	O	O	O

RESULTS	O	O	O	O
:	O	O	O	O
Flutamide	O	O	O	O
was	O	O	O	O
well	O	O	O	O
tolerated	O	O	O	O
in	O	O	O	O
all	O	O	O	O
women	O	O	O	O
,	O	O	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
noticeable	O	O	O	O
exception	O	O	O	O
of	O	O	O	O
one	O	O	O	O
patient	O	O	O	O
who	O	O	O	O
presented	O	O	O	O
increased	O	O	O	O
serum	B-protein	O	O	O
transaminase	I-protein	O	O	O
after	O	O	O	O
8	O	O	O	O
months	O	O	O	O
of	O	O	O	O
therapy	B-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Hirsutism	O	O	O	O
markedly	O	O	O	O
improved	O	O	O	O
in	O	O	O	O
all	O	O	O	O
women	O	O	O	O
during	O	O	O	O
the	O	O	O	O
treatment	O	O	O	O
(	O	O	O	O
Ferriman	O	O	O	O
-	O	O	O	O
Gallwey	O	O	O	O
score	O	O	O	O
after	O	O	O	O
1	O	O	O	O
year	O	O	O	O
:	O	O	O	O
4	O	O	O	O
.	O	O	O	O
1	O	O	O	O
+	O	O	O	O
/	O	O	O	O
-	O	O	O	O
0	O	O	O	O
.	O	O	O	O
5	O	O	O	O
versus	O	O	O	O
14	O	O	O	O
.	O	O	O	O
1	O	O	O	O
+	O	O	O	O
/	O	O	O	O
-	O	O	O	O
0	O	O	O	O
.	O	O	O	O
9	O	O	O	O
)	O	O	O	O
.	O	O	O	O

A	O	O	O	O
reduction	O	O	O	O
of	O	O	O	O
serum	O	O	O	O
androgens	O	O	O	O
was	O	O	O	O
found	O	O	O	O
,	O	O	O	O
whereas	O	O	O	O
no	O	O	O	O
change	O	O	O	O
was	O	O	O	O
observed	O	O	O	O
in	O	O	O	O
either	O	O	O	O
basal	O	O	O	O
or	O	O	O	O
GnRH	O	O	O	O
-	O	O	O	O
stimulated	O	O	O	O
gonadotropins	O	O	O	O
or	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
cortisol	O	O	O	O
and	O	O	O	O
17	O	O	O	O
alpha	O	O	O	O
-	O	O	O	O
hydroxyprogesterone	O	O	O	O
response	O	O	O	O
to	O	O	O	O
ACTH	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Cycles	O	O	O	O
remained	O	O	O	O
ovulatory	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Before	O	O	O	O
treatment	O	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
number	O	O	O	O
of	O	O	O	O
androgen	B-protein	O	O	O
receptors	I-protein	O	O	O
was	O	O	O	O
higher	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
luteal	O	O	O	O
than	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
follicular	O	O	O	O
phase	O	O	O	O
.	O	O	O	O

This	O	O	O	O
rhythmic	O	O	O	O
differentiation	O	O	O	O
disappeared	O	O	O	O
after	O	O	O	O
the	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
had	O	O	O	O
been	O	O	O	O
given	O	O	O	O
the	O	O	O	O
antiandrogen	O	O	O	O
drug	O	O	O	O
.	O	O	O	O

CONCLUSIONS	O	O	O	O
:	O	O	O	O
Flutamide	O	O	O	O
is	O	O	O	O
effective	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
treatment	O	O	O	O
of	O	O	O	O
hirsutism	O	O	O	O
but	O	O	O	O
requires	O	O	O	O
constant	O	O	O	O
surveillance	O	O	O	O
of	O	O	O	O
liver	O	O	O	O
function	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Androgen	O	O	O	O
receptor	O	O	O	O
blockade	O	O	O	O
might	O	O	O	O
be	O	O	O	O
potentiated	O	O	O	O
by	O	O	O	O
a	O	O	O	O
reduction	O	O	O	O
of	O	O	O	O
serum	O	O	O	O
androgens	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Flutamide	O	O	O	O
affects	O	O	O	O
androgen	B-protein	O	O	O
receptor	I-protein	O	O	O
behavior	O	O	O	O
during	O	O	O	O
the	O	O	O	O
menstrual	O	O	O	O
cycle	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
meaning	O	O	O	O
of	O	O	O	O
this	O	O	O	O
finding	O	O	O	O
remains	O	O	O	O
to	O	O	O	O
be	O	O	O	O
elucidated	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Constitutive	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
HIV	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
tat	I-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
human	O	B-cell_line	O	O
Jurkat	B-cell_line	I-cell_line	O	O
T	I-cell_line	I-cell_line	O	O
cells	I-cell_line	I-cell_line	O	O
using	O	O	O	O
a	O	O	O	O
BK	O	O	O	O
virus	O	O	O	O
vector	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
production	O	O	O	O
and	O	O	O	O
characterization	O	O	O	O
of	O	O	O	O
Jurkat	B-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
lines	I-cell_line	O	O	O
that	O	O	O	O
constitutively	O	O	O	O
express	O	O	O	O
functional	O	O	O	O
human	O	O	O	O
immune	O	O	O	O
deficiency	O	O	O	O
virus	O	O	O	O
type	O	O	O	O
1	O	O	O	O
(	O	O	O	O
HIV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
1	O	O	O	O
)	O	O	O	O
tat	B-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
using	O	O	O	O
a	O	O	O	O
BK	O	O	O	O
virus	O	O	O	O
plasmid	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
vector	O	O	O	O
and	O	O	O	O
HIV	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
1	I-DNA	O	O	O
tat	I-DNA	O	O	O
cDNA	I-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
is	O	O	O	O
described	O	O	O	O
.	O	O	O	O

An	O	O	O	O
increased	O	O	O	O
growth	O	O	O	O
rate	O	O	O	O
of	O	O	O	O
these	O	O	O	O
Jurkat	B-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
tat	I-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
lines	I-cell_line	O	O	O
as	O	O	O	O
compared	O	O	O	O
with	O	O	O	O
control	B-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
lines	I-cell_line	O	O	O
was	O	O	O	O
observed	O	O	O	O
.	O	O	O	O

A	O	O	O	O
PEBP2	B-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
/	I-protein	O	O	O
AML	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
related	I-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
increases	O	O	O	O
osteocalcin	B-DNA	O	O	O
promoter	I-DNA	O	O	O
activity	O	O	O	O
through	O	O	O	O
its	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
to	O	O	O	O
an	O	O	O	O
osteoblast	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
specific	I-DNA	O	O	O
cis	I-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
acting	I-DNA	O	O	O
element	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

To	O	O	O	O
identify	O	O	O	O
osteoblast	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
specific	I-DNA	O	O	O
cis	I-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
acting	I-DNA	O	O	O
elements	I-DNA	O	O	O
and	O	O	O	O
trans	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
acting	I-protein	O	O	O
factors	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
we	O	O	O	O
initiated	O	O	O	O
an	O	O	O	O
analysis	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
promoter	B-DNA	O	O	O
of	O	O	O	O
a	O	O	O	O
mouse	B-DNA	O	O	O
osteocalcin	I-DNA	O	O	O
gene	I-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
an	O	O	O	O
osteoblast	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
specific	I-DNA	O	O	O
gene	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
this	O	O	O	O
promoter	O	O	O	O
,	O	O	O	O
we	O	O	O	O
identified	O	O	O	O
two	O	O	O	O
osteoblast	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
specific	I-DNA	O	O	O
cis	I-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
acting	I-DNA	O	O	O
elements	I-DNA	O	O	O
(	O	O	O	O
Ducy	O	O	O	O
,	O	O	O	O
P	O	O	O	O
.	O	O	O	O
and	O	O	O	O
Karsenty	O	O	O	O
,	O	O	O	O
G	O	O	O	O
.	O	O	O	O
(	O	O	O	O
1995	O	O	O	O
)	O	O	O	O
Mol	O	O	O	O
.	O	O	O	O
Cell	O	O	O	O
.	O	O	O	O
Biol	O	O	O	O
.	O	O	O	O
15	O	O	O	O
,	O	O	O	O
1858	O	O	O	O
-	O	O	O	O
1869	O	O	O	O
)	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
sequence	O	O	O	O
of	O	O	O	O
one	O	O	O	O
of	O	O	O	O
these	O	O	O	O
elements	B-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
OSE2	B-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
is	O	O	O	O
identical	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
DNA	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
binding	I-DNA	O	O	O
site	I-DNA	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
PEBP2	B-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
/	I-protein	O	O	O
AML	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
transcription	I-protein	O	O	O
factors	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
mammalian	B-protein	O	O	O
homologues	I-protein	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
Drosophila	B-protein	O	O	O
Runt	I-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Here	O	O	O	O
we	O	O	O	O
show	O	O	O	O
,	O	O	O	O
using	O	O	O	O
nuclear	O	O	O	O
extracts	O	O	O	O
,	O	O	O	O
recombinant	B-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
a	O	O	O	O
specific	O	O	O	O
antiserum	O	O	O	O
against	O	O	O	O
AML	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
proteins	I-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
DNA	O	O	O	O
-	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
assays	O	O	O	O
,	O	O	O	O
that	O	O	O	O
one	O	O	O	O
member	O	O	O	O
of	O	O	O	O
this	O	O	O	O
family	O	O	O	O
,	O	O	O	O
AML	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1B	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
binds	O	O	O	O
specifically	O	O	O	O
to	O	O	O	O
OSE2	B-DNA	O	O	O
and	O	O	O	O
is	O	O	O	O
immunologically	O	O	O	O
related	O	O	O	O
to	O	O	O	O
OSF2	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
factor	O	O	O	O
present	O	O	O	O
in	O	O	O	O
osteoblast	O	O	O	O
nuclear	O	O	O	O
extracts	O	O	O	O
that	O	O	O	O
binds	O	O	O	O
to	O	O	O	O
OSE2	B-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

By	O	O	O	O
DNA	O	O	O	O
cotransfection	O	O	O	O
experiments	O	O	O	O
,	O	O	O	O
we	O	O	O	O
also	O	O	O	O
demonstrate	O	O	O	O
that	O	O	O	O
AML	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1B	I-protein	O	O	O
can	O	O	O	O
increase	O	O	O	O
the	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
of	O	O	O	O
a	O	O	O	O
short	O	O	O	O
osteocalcin	B-DNA	O	O	O
promoter	I-DNA	O	O	O
through	O	O	O	O
its	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
to	O	O	O	O
OSE2	B-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

Lastly	O	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
different	O	O	O	O
mobilities	O	O	O	O
of	O	O	O	O
osteoblast	B-protein	O	O	O
nuclear	I-protein	O	O	O
extract	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
DNA	I-protein	O	O	O
complexes	I-protein	O	O	O
compared	O	O	O	O
with	O	O	O	O
T	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
cell	I-protein	O	O	O
nuclear	I-protein	O	O	O
extract	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
DNA	I-protein	O	O	O
complexes	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
along	O	O	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
inability	O	O	O	O
of	O	O	O	O
OSF2	B-protein	O	O	O
to	O	O	O	O
be	O	O	O	O
upregulated	O	O	O	O
by	O	O	O	O
retinoic	O	O	O	O
acid	O	O	O	O
,	O	O	O	O
unlike	O	O	O	O
the	O	O	O	O
other	O	O	O	O
PEBP2	B-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
factors	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
suggest	O	O	O	O
that	O	O	O	O
OSF2	B-protein	O	O	O
is	O	O	O	O
a	O	O	O	O
new	O	O	O	O
member	O	O	O	O
of	O	O	O	O
this	O	O	O	O
family	O	O	O	O
of	O	O	O	O
transcription	B-protein	O	O	O
factors	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Thus	O	O	O	O
,	O	O	O	O
this	O	O	O	O
study	O	O	O	O
demonstrates	O	O	O	O
that	O	O	O	O
AML	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1B	I-protein	O	O	O
can	O	O	O	O
increase	O	O	O	O
gene	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
an	O	O	O	O
osteoblast	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
specific	I-DNA	O	O	O
gene	I-DNA	O	O	O
through	O	O	O	O
its	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
to	O	O	O	O
an	O	O	O	O
osteoblast	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
specific	I-DNA	O	O	O
cis	I-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
acting	I-DNA	O	O	O
element	I-DNA	O	O	O
and	O	O	O	O
presents	O	O	O	O
evidence	O	O	O	O
that	O	O	O	O
OSF2	B-protein	O	O	O
is	O	O	O	O
a	O	O	O	O
member	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
PEBP2	B-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
/	I-protein	O	O	O
AML	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
family	I-protein	O	O	O
of	O	O	O	O
transcription	B-protein	O	O	O
factors	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Initiation	B-protein	O	O	O
binding	I-protein	O	O	O
repressor	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
a	O	O	O	O
factor	O	O	O	O
that	O	O	O	O
binds	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
transcription	B-DNA	O	O	O
initiation	I-DNA	O	O	O
site	I-DNA	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
histone	B-protein	B-DNA	O	O
h5	I-protein	I-DNA	O	O
gene	O	I-DNA	O	O
,	O	O	O	O
is	O	O	O	O
a	O	O	O	O
glycosylated	B-protein	O	O	O
member	I-protein	O	O	O
of	O	O	O	O
a	O	O	O	O
family	O	O	O	O
of	O	O	O	O
cell	B-protein	O	O	O
growth	I-protein	O	O	O
regulators	I-protein	O	O	O
[	O	O	O	O
corrected	O	O	O	O
]	O	O	O	O
[	O	O	O	O
published	O	O	O	O
erratum	O	O	O	O
appears	O	O	O	O
in	O	O	O	O
Mol	O	O	O	O
Cell	O	O	O	O
Biol	O	O	O	O
1996	O	O	O	O
Feb	O	O	O	O
;	O	O	O	O
16	O	O	O	O
(	O	O	O	O
2	O	O	O	O
)	O	O	O	O
:	O	O	O	O
735	O	O	O	O
]	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Initiation	B-protein	O	O	O
binding	I-protein	O	O	O
repressor	I-protein	O	O	O
[	O	O	O	O
corrected	O	O	O	O
]	O	O	O	O
(	O	O	O	O
IBR	B-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
is	O	O	O	O
a	O	O	O	O
chicken	B-protein	O	O	O
erythrocyte	I-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
apparent	O	O	O	O
molecular	O	O	O	O
mass	O	O	O	O
,	O	O	O	O
70	O	O	O	O
to	O	O	O	O
73	O	O	O	O
kDa	O	O	O	O
)	O	O	O	O
that	O	O	O	O
binds	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
sequences	O	O	O	O
spanning	O	O	O	O
the	O	O	O	O
transcription	B-DNA	O	O	O
initiation	I-DNA	O	O	O
site	I-DNA	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
histone	B-protein	B-DNA	O	O
h5	I-protein	I-DNA	O	O
gene	O	I-DNA	O	O
,	O	O	O	O
repressing	O	O	O	O
its	O	O	O	O
transcription	O	O	O	O
.	O	O	O	O

A	O	O	O	O
variety	O	O	O	O
of	O	O	O	O
other	O	O	O	O
cells	O	O	O	O
,	O	O	O	O
including	O	O	O	O
transformed	B-cell_type	O	O	O
erythroid	I-cell_type	O	O	O
precursors	I-cell_type	O	O	O
,	O	O	O	O
do	O	O	O	O
not	O	O	O	O
have	O	O	O	O
IBR	B-protein	O	O	O
but	O	O	O	O
a	O	O	O	O
factor	O	O	O	O
referred	O	O	O	O
to	O	O	O	O
as	O	O	O	O
IBF	B-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
68	O	O	O	O
to	O	O	O	O
70	O	O	O	O
kDa	O	O	O	O
)	O	O	O	O
that	O	O	O	O
recognizes	O	O	O	O
the	O	O	O	O
same	O	O	O	O
IBR	B-protein	O	O	O
sites	O	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
have	O	O	O	O
cloned	O	O	O	O
the	O	O	O	O
IBR	B-protein	B-DNA	O	O
cDNA	O	I-DNA	O	O
and	O	O	O	O
studied	O	O	O	O
the	O	O	O	O
relationship	O	O	O	O
of	O	O	O	O
IBR	B-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
IBF	B-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

IBR	B-protein	O	O	O
is	O	O	O	O
a	O	O	O	O
503	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
amino	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
acid	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
long	I-protein	O	O	O
acidic	I-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
which	O	O	O	O
is	O	O	O	O
99	O	O	O	O
.	O	O	O	O
0	O	O	O	O
%	O	O	O	O
identical	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
recently	O	O	O	O
reported	O	O	O	O
human	B-protein	O	O	O
NRF	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
/	I-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
Pal	I-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
highly	O	O	O	O
related	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
invertebrate	O	O	O	O
transcription	B-protein	O	O	O
factors	I-protein	O	O	O
P3A2	B-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
erected	B-protein	O	O	O
wing	I-protein	O	O	O
gene	I-protein	O	O	O
product	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
EWG	B-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
present	O	O	O	O
evidence	O	O	O	O
that	O	O	O	O
IBR	B-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
IBF	B-protein	O	O	O
are	O	O	O	O
most	O	O	O	O
likely	O	O	O	O
identical	O	O	O	O
proteins	O	O	O	O
,	O	O	O	O
differing	O	O	O	O
in	O	O	O	O
their	O	O	O	O
degree	O	O	O	O
of	O	O	O	O
glycosylation	O	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
have	O	O	O	O
analyzed	O	O	O	O
several	O	O	O	O
molecular	O	O	O	O
aspects	O	O	O	O
of	O	O	O	O
IBR	B-protein	O	O	O
/	I-protein	O	O	O
F	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
shown	O	O	O	O
that	O	O	O	O
the	O	O	O	O
factor	O	O	O	O
associates	O	O	O	O
as	O	O	O	O
stable	O	O	O	O
homodimers	B-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
that	O	O	O	O
the	O	O	O	O
dimer	B-protein	O	O	O
is	O	O	O	O
the	O	O	O	O
relevant	B-protein	O	O	O
DNA	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
binding	I-protein	O	O	O
species	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
evolutionarily	O	O	O	O
conserved	O	O	O	O
N	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
terminal	I-protein	O	O	O
half	I-protein	O	O	O
of	O	O	O	O
IBR	B-protein	O	O	O
/	I-protein	O	O	O
F	I-protein	O	O	O
harbors	O	O	O	O
the	O	O	O	O
DNA	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
binding	I-protein	O	O	O
/	I-protein	O	O	O
dimerization	I-protein	O	O	O
domain	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
outer	O	O	O	O
limits	O	O	O	O
,	O	O	O	O
127	O	O	O	O
to	O	O	O	O
283	O	O	O	O
)	O	O	O	O
,	O	O	O	O
one	O	O	O	O
or	O	O	O	O
several	O	O	O	O
casein	B-protein	O	O	O
kinase	I-protein	O	O	O
II	I-protein	O	O	O
sites	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
37	O	O	O	O
to	O	O	O	O
67	O	O	O	O
)	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
a	O	O	O	O
bipartite	B-protein	O	O	O
nuclear	I-protein	O	O	O
localization	I-protein	O	O	O
signal	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
89	O	O	O	O
to	O	O	O	O
106	O	O	O	O
)	O	O	O	O
which	O	O	O	O
appears	O	O	O	O
to	O	O	O	O
be	O	O	O	O
necessary	O	O	O	O
for	O	O	O	O
nuclear	O	O	O	O
targeting	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Binding	O	O	O	O
site	O	O	O	O
selection	O	O	O	O
revealed	O	O	O	O
that	O	O	O	O
the	O	O	O	O
alternating	B-protein	O	O	O
RCGCRYGCGY	I-protein	O	O	O
consensus	I-protein	O	O	O
constitutes	O	O	O	O
high	O	O	O	O
-	O	O	O	O
affinity	O	O	O	O
IBR	B-protein	B-DNA	O	O
/	I-protein	I-DNA	O	O
F	I-protein	I-DNA	O	O
binding	O	I-DNA	O	O
sites	O	I-DNA	O	O
and	O	O	O	O
that	O	O	O	O
the	O	O	O	O
direct	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
repeat	I-DNA	O	O	O
palindrome	I-DNA	O	O	O
TGCGCATGCGCA	O	O	O	O
is	O	O	O	O
the	O	O	O	O
optimal	B-DNA	O	O	O
site	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

A	O	O	O	O
survey	O	O	O	O
of	O	O	O	O
genes	B-DNA	O	O	O
potentially	O	O	O	O
regulated	O	O	O	O
by	O	O	O	O
this	O	O	O	O
family	O	O	O	O
of	O	O	O	O
factors	B-protein	O	O	O
primarily	O	O	O	O
revealed	O	O	O	O
genes	B-DNA	O	O	O
involved	O	O	O	O
in	O	O	O	O
growth	O	O	O	O
-	O	O	O	O
related	O	O	O	O
metabolism	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Triggering	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
human	O	O	O	O
interleukin	O	O	O	O
-	O	O	O	O
6	O	O	O	O
gene	O	O	O	O
by	O	O	O	O
interferon	O	O	O	O
-	O	O	O	O
gamma	O	O	O	O
and	O	O	O	O
tumor	O	O	O	O
necrosis	O	O	O	O
factor	O	O	O	O
-	O	O	O	O
alpha	O	O	O	O
in	O	O	O	O
monocytic	O	O	O	O
cells	O	O	O	O
involves	O	O	O	O
cooperation	O	O	O	O
between	O	O	O	O
interferon	B-protein	O	O	O
regulatory	I-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
Sp1	B-protein	O	O	O
transcription	B-protein	O	O	O
factors	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
investigated	O	O	O	O
the	O	O	O	O
molecular	O	O	O	O
basis	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
synergistic	O	O	O	O
induction	O	O	O	O
by	O	O	O	O
interferon	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
gamma	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
IFN	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
gamma	I-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
/	O	O	O	O
tumor	B-protein	O	O	O
necrosis	I-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
TNF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
of	O	O	O	O
human	B-DNA	O	O	O
interleukin	I-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
6	I-DNA	O	O	O
(	I-DNA	O	O	O
IL	I-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
6	I-DNA	O	O	O
)	I-DNA	O	O	O
gene	I-DNA	O	O	O
in	O	O	O	O
THP	B-cell_type	O	O	O
-	I-cell_type	O	O	O
1	I-cell_type	O	O	O
monocytic	I-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
compared	O	O	O	O
it	O	O	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
basis	O	O	O	O
of	O	O	O	O
this	O	O	O	O
induction	O	O	O	O
by	O	O	O	O
lipopolysaccharide	O	O	O	O
(	O	O	O	O
LPS	O	O	O	O
)	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Functional	O	O	O	O
studies	O	O	O	O
with	O	O	O	O
IL	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
6	I-DNA	O	O	O
promoter	I-DNA	O	O	O
demonstrated	O	O	O	O
that	O	O	O	O
three	O	O	O	O
regions	O	O	O	O
are	O	O	O	O
the	O	O	O	O
targets	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
IFN	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
gamma	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
/	O	O	O	O
or	O	O	O	O
TNF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
action	O	O	O	O
,	O	O	O	O
whereas	O	O	O	O
only	O	O	O	O
one	O	O	O	O
of	O	O	O	O
these	O	O	O	O
regions	O	O	O	O
seemed	O	O	O	O
to	O	O	O	O
be	O	O	O	O
implicated	O	O	O	O
in	O	O	O	O
LPS	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
three	O	O	O	O
regions	O	O	O	O
concerned	O	O	O	O
are	O	O	O	O
:	O	O	O	O
1	O	O	O	O
)	O	O	O	O
a	O	O	O	O
region	O	O	O	O
between	O	O	O	O
-	O	O	O	O
73	O	O	O	O
and	O	O	O	O
-	O	O	O	O
36	O	O	O	O
,	O	O	O	O
which	O	O	O	O
is	O	O	O	O
the	O	O	O	O
minimal	B-DNA	O	O	O
element	I-DNA	O	O	O
inducible	O	O	O	O
by	O	O	O	O
LPS	O	O	O	O
or	O	O	O	O
TNF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
;	O	O	O	O
2	O	O	O	O
)	O	O	O	O
an	O	O	O	O
element	O	O	O	O
located	O	O	O	O
between	O	O	O	O
-	O	O	O	O
181	O	O	O	O
and	O	O	O	O
-	O	O	O	O
73	O	O	O	O
,	O	O	O	O
which	O	O	O	O
appeared	O	O	O	O
to	O	O	O	O
regulate	O	O	O	O
the	O	O	O	O
response	O	O	O	O
to	O	O	O	O
IFN	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
gamma	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
TNF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
negatively	O	O	O	O
;	O	O	O	O
and	O	O	O	O
3	O	O	O	O
)	O	O	O	O
a	O	O	O	O
distal	B-DNA	O	O	O
element	I-DNA	O	O	O
upstream	I-DNA	O	O	O
of	O	O	O	O
-	O	O	O	O
224	O	O	O	O
,	O	O	O	O
which	O	O	O	O
was	O	O	O	O
inducible	O	O	O	O
by	O	O	O	O
IFN	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
gamma	I-protein	O	O	O
alone	O	O	O	O
.	O	O	O	O

LPS	O	O	O	O
signaling	O	O	O	O
was	O	O	O	O
found	O	O	O	O
to	O	O	O	O
involve	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
activation	O	O	O	O
by	O	O	O	O
the	O	O	O	O
p50	B-protein	O	O	O
/	I-protein	O	O	O
p65	I-protein	O	O	O
heterodimers	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Synergistic	O	O	O	O
induction	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
IL	B-protein	B-DNA	O	O
-	I-protein	I-DNA	O	O
6	I-protein	I-DNA	O	O
gene	O	I-DNA	O	O
by	O	O	O	O
IFN	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
gamma	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
TNF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
in	O	O	O	O
monocytic	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
,	O	O	O	O
involved	O	O	O	O
cooperation	O	O	O	O
between	O	O	O	O
the	O	O	O	O
IRF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
NF	B-protein	B-protein	O	O
kappa	I-protein	I-protein	O	O
B	I-protein	I-protein	O	O
p65	B-protein	I-protein	O	O
homodimers	O	I-protein	O	O
with	O	O	O	O
concomitant	O	O	O	O
removal	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
negative	O	O	O	O
effect	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
retinoblastoma	B-DNA	O	O	O
control	I-DNA	O	O	O
element	I-DNA	O	O	O
present	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
IL	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
6	I-DNA	O	O	O
promoter	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

This	O	O	O	O
removal	O	O	O	O
occurred	O	O	O	O
by	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
constitutive	O	B-protein	O	O
Sp1	B-protein	I-protein	O	O
factor	O	I-protein	O	O
,	O	O	O	O
whose	O	O	O	O
increased	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
and	O	O	O	O
phosphorylation	O	O	O	O
were	O	O	O	O
mediated	O	O	O	O
by	O	O	O	O
IFN	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
gamma	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Mutation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
Jak3	B-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
a	O	O	O	O
patient	O	O	O	O
with	O	O	O	O
SCID	O	O	O	O
:	O	O	O	O
essential	O	O	O	O
role	O	O	O	O
of	O	O	O	O
Jak3	B-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
lymphoid	O	O	O	O
development	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Males	O	O	O	O
with	O	O	O	O
X	O	O	O	O
-	O	O	O	O
linked	O	O	O	O
severe	O	O	O	O
combined	O	O	O	O
immunodeficiency	O	O	O	O
(	O	O	O	O
XSCID	O	O	O	O
)	O	O	O	O
have	O	O	O	O
defects	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
common	O	O	O	O
cytokine	B-protein	B-DNA	O	O
receptor	I-protein	I-DNA	O	O
gamma	I-protein	I-DNA	O	O
chain	I-protein	I-DNA	O	O
(	O	I-DNA	O	O
gamma	B-protein	I-DNA	O	O
c	I-protein	I-DNA	O	O
)	O	I-DNA	O	O
gene	O	I-DNA	O	O
that	O	O	O	O
encodes	O	O	O	O
a	O	O	O	O
shared	O	O	O	O
,	O	O	O	O
essential	O	O	O	O
component	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
receptors	O	O	O	O
of	O	O	O	O
interleukin	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
IL	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
,	O	O	O	O
IL	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
4	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
IL	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
7	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
IL	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
9	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
IL	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
15	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
Janus	B-protein	O	O	O
family	I-protein	O	O	O
tyrosine	I-protein	O	O	O
kinase	I-protein	O	O	O
Jak3	B-protein	O	O	O
is	O	O	O	O
the	O	O	O	O
only	O	O	O	O
signaling	O	O	O	O
molecule	O	O	O	O
known	O	O	O	O
to	O	O	O	O
be	O	O	O	O
associated	O	O	O	O
with	O	O	O	O
gamma	B-protein	O	O	O
c	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
so	O	O	O	O
it	O	O	O	O
was	O	O	O	O
hypothesized	O	O	O	O
that	O	O	O	O
defects	O	O	O	O
in	O	O	O	O
Jak3	B-protein	O	O	O
might	O	O	O	O
cause	O	O	O	O
an	O	O	O	O
XSCID	O	O	O	O
-	O	O	O	O
like	O	O	O	O
phenotype	O	O	O	O
.	O	O	O	O

A	O	O	O	O
girl	O	O	O	O
with	O	O	O	O
immunological	O	O	O	O
features	O	O	O	O
indistinguishable	O	O	O	O
from	O	O	O	O
those	O	O	O	O
of	O	O	O	O
XSCID	O	O	O	O
was	O	O	O	O
therefore	O	O	O	O
selected	O	O	O	O
for	O	O	O	O
analysis	O	O	O	O
.	O	O	O	O

An	O	O	O	O
Epstein	B-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
Barr	I-cell_line	O	O	O
virus	I-cell_line	O	O	O
(	I-cell_line	O	O	O
EBV	I-cell_line	O	O	O
)	I-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
transformed	I-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
line	I-cell_line	O	O	O
derived	O	O	O	O
from	O	O	O	O
her	O	O	O	O
lymphocytes	B-cell_type	O	O	O
had	O	O	O	O
normal	O	O	O	O
gamma	B-protein	O	O	O
c	I-protein	O	O	O
expression	O	O	O	O
but	O	O	O	O
lacked	O	O	O	O
Jak3	B-protein	B-protein	O	O
protein	O	I-protein	O	O
and	O	O	O	O
had	O	O	O	O
greatly	O	O	O	O
diminished	O	O	O	O
Jak3	B-protein	B-RNA	O	O
messenger	O	I-RNA	O	O
RNA	O	I-RNA	O	O
.	O	O	O	O

Sequencing	O	O	O	O
revealed	O	O	O	O
a	O	O	O	O
different	O	O	O	O
mutation	O	O	O	O
on	O	O	O	O
each	O	O	O	O
allele	O	O	O	O
:	O	O	O	O
a	O	O	O	O
single	O	O	O	O
nucleotide	O	O	O	O
insertion	O	O	O	O
resulting	O	O	O	O
in	O	O	O	O
a	O	O	O	O
frame	O	O	O	O
shift	O	O	O	O
and	O	O	O	O
premature	O	O	O	O
termination	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
Jak3	B-protein	B-protein	O	O
JH4	O	I-protein	O	O
domain	O	I-protein	O	O
and	O	O	O	O
a	O	O	O	O
nonsense	O	O	O	O
mutation	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
Jak3	B-protein	O	O	O
JH2	O	O	O	O
domain	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
lack	O	O	O	O
of	O	O	O	O
Jak3	B-protein	O	O	O
expression	O	O	O	O
correlated	O	O	O	O
with	O	O	O	O
impaired	O	O	O	O
B	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
signaling	O	O	O	O
,	O	O	O	O
as	O	O	O	O
demonstrated	O	O	O	O
by	O	O	O	O
the	O	O	O	O
inability	O	O	O	O
of	O	O	O	O
IL	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
4	I-protein	O	O	O
to	O	O	O	O
activate	O	O	O	O
Stat6	B-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
EBV	B-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
transformed	I-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
line	I-cell_line	O	O	O
from	O	O	O	O
the	O	O	O	O
patient	O	O	O	O
.	O	O	O	O
These	O	O	O	O
observations	O	O	O	O
indicate	O	O	O	O
that	O	O	O	O
the	O	O	O	O
functions	O	O	O	O
of	O	O	O	O
gamma	B-protein	O	O	O
c	I-protein	O	O	O
are	O	O	O	O
dependent	O	O	O	O
on	O	O	O	O
Jak3	B-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
that	O	O	O	O
Jak3	B-protein	O	O	O
is	O	O	O	O
essential	O	O	O	O
for	O	O	O	O
lymphoid	O	O	O	O
development	O	O	O	O
and	O	O	O	O
signaling	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Constitutive	O	O	O	O
overexpression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
L	B-protein	B-DNA	O	O
-	I-protein	I-DNA	O	O
selectin	I-protein	I-DNA	O	O
gene	O	I-DNA	O	O
in	O	O	O	O
fresh	O	O	O	O
leukemic	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
of	O	O	O	O
adult	O	O	O	O
T	O	O	O	O
-	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
leukemia	O	O	O	O
that	O	O	O	O
can	O	O	O	O
be	O	O	O	O
transactivated	O	O	O	O
by	O	O	O	O
human	B-protein	O	O	O
T	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
cell	I-protein	O	O	O
lymphotropic	I-protein	O	O	O
virus	I-protein	O	O	O
type	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
Tax	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

L	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
selectin	I-protein	O	O	O
is	O	O	O	O
an	O	O	O	O
adhesion	O	O	O	O
molecule	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
selectin	O	O	O	O
family	O	O	O	O
that	O	O	O	O
mediates	O	O	O	O
the	O	O	O	O
initial	O	O	O	O
step	O	O	O	O
of	O	O	O	O
leukocyte	O	O	O	O
adhesion	O	O	O	O
to	O	O	O	O
vascular	O	O	O	O
endothelium	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Upon	O	O	O	O
cellular	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
,	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
L	B-protein	B-DNA	O	O
-	I-protein	I-DNA	O	O
selectin	I-protein	I-DNA	O	O
gene	O	I-DNA	O	O
is	O	O	O	O
downregulated	O	O	O	O
at	O	O	O	O
both	O	O	O	O
the	O	O	O	O
protein	O	O	O	O
and	O	O	O	O
mRNA	O	O	O	O
levels	O	O	O	O
.	O	O	O	O

To	O	O	O	O
understand	O	O	O	O
the	O	O	O	O
mechanism	O	O	O	O
of	O	O	O	O
leukemic	B-cell_type	O	O	O
cell	I-cell_type	O	O	O
infiltration	O	O	O	O
into	O	O	O	O
organs	O	O	O	O
,	O	O	O	O
we	O	O	O	O
studied	O	O	O	O
the	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
and	O	O	O	O
regulation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
L	B-protein	B-RNA	O	O
-	I-protein	I-RNA	O	O
selectin	I-protein	I-RNA	O	O
mRNA	O	I-RNA	O	O
in	O	O	O	O
fresh	O	O	O	O
leukemic	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
of	O	O	O	O
adult	O	O	O	O
T	O	O	O	O
-	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
leukemia	O	O	O	O
(	O	O	O	O
ATL	O	O	O	O
)	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
and	O	O	O	O
investigated	O	O	O	O
the	O	O	O	O
response	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
L	B-protein	B-DNA	O	O
-	I-protein	I-DNA	O	O
selectin	I-protein	I-DNA	O	O
promoter	O	I-DNA	O	O
to	O	O	O	O
human	B-protein	O	O	O
T	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
cell	I-protein	O	O	O
lymphotropic	I-protein	O	O	O
virus	I-protein	O	O	O
type	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
(	I-protein	O	O	O
HTLV	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
)	I-protein	O	O	O
Tax	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
which	O	O	O	O
is	O	O	O	O
a	O	O	O	O
viral	B-protein	O	O	O
transcriptional	I-protein	O	O	O
transactivator	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Flow	O	O	O	O
cytometry	O	O	O	O
showed	O	O	O	O
that	O	O	O	O
L	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
selectin	I-protein	O	O	O
was	O	O	O	O
expressed	O	O	O	O
on	O	O	O	O
fresh	O	O	O	O
ATL	B-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
along	O	O	O	O
with	O	O	O	O
other	O	O	O	O
activation	B-protein	O	O	O
antigens	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Northern	O	O	O	O
blot	O	O	O	O
analysis	O	O	O	O
showed	O	O	O	O
that	O	O	O	O
ATL	B-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
overexpressed	O	O	O	O
that	O	O	O	O
L	B-protein	B-RNA	O	O
-	I-protein	I-RNA	O	O
selectin	I-protein	I-RNA	O	O
mRNA	O	I-RNA	O	O
and	O	O	O	O
that	O	O	O	O
the	O	O	O	O
level	O	O	O	O
was	O	O	O	O
aberrantly	O	O	O	O
upregulated	O	O	O	O
after	O	O	O	O
PMA	O	O	O	O
stimulation	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Studies	O	O	O	O
using	O	O	O	O
in	O	O	O	O
situ	O	O	O	O
hybridization	O	O	O	O
showed	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
L	B-protein	B-RNA	O	O
-	I-protein	I-RNA	O	O
selectin	I-protein	I-RNA	O	O
mRNA	O	I-RNA	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
infiltrating	O	O	O	O
leukemic	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
liver	O	O	O	O
of	O	O	O	O
two	O	O	O	O
ATL	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Intravenous	O	O	O	O
injection	O	O	O	O
of	O	O	O	O
a	O	O	O	O
rat	B-cell_line	O	O	O
T	I-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
line	I-cell_line	O	O	O
that	O	O	O	O
overexpresses	O	O	O	O
L	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
selectin	I-protein	O	O	O
showed	O	O	O	O
increased	O	O	O	O
organ	O	O	O	O
infiltration	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
induction	O	O	O	O
of	O	O	O	O
Tax	B-protein	O	O	O
expression	O	O	O	O
in	O	O	O	O
JPX9	B-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
resulted	O	O	O	O
in	O	O	O	O
about	O	O	O	O
a	O	O	O	O
twofold	O	O	O	O
increase	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
mRNA	B-RNA	O	O	O
expression	O	O	O	O
levels	O	O	O	O
compared	O	O	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
basal	O	O	O	O
level	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Chloramphenicol	B-protein	O	O	O
acetyltransferase	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
CAT	B-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
assay	O	O	O	O
after	O	O	O	O
transient	O	O	O	O
cotransfection	O	O	O	O
showed	O	O	O	O
about	O	O	O	O
a	O	O	O	O
fivefold	O	O	O	O
transactivation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
L	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
selectin	I-DNA	O	O	O
promoter	I-DNA	O	O	O
by	O	O	O	O
Tax	B-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
serum	O	O	O	O
level	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
shed	O	O	O	O
form	O	O	O	O
of	O	O	O	O
L	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
selectin	I-protein	O	O	O
was	O	O	O	O
significantly	O	O	O	O
increased	O	O	O	O
in	O	O	O	O
ATL	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
(	O	O	O	O
mean	O	O	O	O
+	O	O	O	O
/	O	O	O	O
-	O	O	O	O
SD	O	O	O	O
,	O	O	O	O
4	O	O	O	O
,	O	O	O	O
215	O	O	O	O
.	O	O	O	O
4	O	O	O	O
+	O	O	O	O
/	O	O	O	O
-	O	O	O	O
4	O	O	O	O
,	O	O	O	O
111	O	O	O	O
ng	O	O	O	O
/	O	O	O	O
mL	O	O	O	O
)	O	O	O	O
compared	O	O	O	O
with	O	O	O	O
those	O	O	O	O
of	O	O	O	O
asymptomatic	O	O	O	O
carriers	O	O	O	O
and	O	O	O	O
healthy	O	O	O	O
blood	O	O	O	O
donors	O	O	O	O
(	O	O	O	O
mean	O	O	O	O
+	O	O	O	O
/	O	O	O	O
-	O	O	O	O
SD	O	O	O	O
,	O	O	O	O
1	O	O	O	O
,	O	O	O	O
148	O	O	O	O
.	O	O	O	O
0	O	O	O	O
+	O	O	O	O
/	O	O	O	O
-	O	O	O	O
269	O	O	O	O
.	O	O	O	O
0	O	O	O	O
ng	O	O	O	O
/	O	O	O	O
mL	O	O	O	O
and	O	O	O	O
991	O	O	O	O
.	O	O	O	O
9	O	O	O	O
+	O	O	O	O
/	O	O	O	O
-	O	O	O	O
224	O	O	O	O
ng	O	O	O	O
/	O	O	O	O
mL	O	O	O	O
,	O	O	O	O
respectively	O	O	O	O
)	O	O	O	O
.	O	O	O	O

These	O	O	O	O
results	O	O	O	O
indicated	O	O	O	O
that	O	O	O	O
ATL	B-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
constitutively	O	O	O	O
overexpress	O	O	O	O
the	O	O	O	O
L	B-protein	B-DNA	O	O
-	I-protein	I-DNA	O	O
selectin	I-protein	I-DNA	O	O
gene	O	I-DNA	O	O
that	O	O	O	O
can	O	O	O	O
be	O	O	O	O
transactivated	O	O	O	O
by	O	O	O	O
HTLV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
1	O	O	O	O
Tax	B-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
overexpression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
L	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
selectin	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
as	O	O	O	O
well	O	O	O	O
as	O	O	O	O
of	O	O	O	O
inflammatory	B-protein	O	O	O
cytokines	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
by	O	O	O	O
ATL	B-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
may	O	O	O	O
provide	O	O	O	O
a	O	O	O	O
basis	O	O	O	O
for	O	O	O	O
ATL	B-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
to	O	O	O	O
attach	O	O	O	O
the	O	O	O	O
vascular	O	O	O	O
endothelium	O	O	O	O
,	O	O	O	O
leading	O	O	O	O
to	O	O	O	O
transmigration	O	O	O	O
and	O	O	O	O
organ	O	O	O	O
infitration	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Human	O	O	O	O
herpesvirus	O	O	O	O
6	O	O	O	O
variant	O	O	O	O
A	O	O	O	O
,	O	O	O	O
but	O	O	O	O
not	O	O	O	O
variant	O	O	O	O
B	O	O	O	O
,	O	O	O	O
infects	O	O	O	O
EBV	B-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
positive	I-cell_line	O	O	O
B	I-cell_line	O	O	O
lymphoid	I-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
,	O	O	O	O
activating	O	O	O	O
the	O	O	O	O
latent	B-DNA	O	O	O
EBV	I-DNA	O	O	O
genome	I-DNA	O	O	O
through	O	O	O	O
a	O	O	O	O
BZLF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
-	O	O	O	O
dependent	O	O	O	O
mechanism	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Human	O	O	O	O
herpesvirus	O	O	O	O
6	O	O	O	O
,	O	O	O	O
a	O	O	O	O
predominantly	O	O	O	O
T	O	O	O	O
lymphotropic	O	O	O	O
virus	O	O	O	O
,	O	O	O	O
has	O	O	O	O
been	O	O	O	O
recently	O	O	O	O
shown	O	O	O	O
to	O	O	O	O
infect	O	O	O	O
some	O	O	O	O
EBV	B-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
positive	I-cell_line	O	O	O
B	I-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
lines	I-cell_line	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
to	O	O	O	O
induce	O	O	O	O
in	O	O	O	O
them	O	O	O	O
the	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
EBV	O	O	O	O
lytic	O	O	O	O
cycle	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Here	O	O	O	O
we	O	O	O	O
have	O	O	O	O
confirmed	O	O	O	O
and	O	O	O	O
extended	O	O	O	O
such	O	O	O	O
observations	O	O	O	O
,	O	O	O	O
showing	O	O	O	O
that	O	O	O	O
(	O	O	O	O
1	O	O	O	O
)	O	O	O	O
this	O	O	O	O
phenomenon	O	O	O	O
is	O	O	O	O
restricted	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
variant	O	O	O	O
A	O	O	O	O
of	O	O	O	O
HHV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
6	O	O	O	O
:	O	O	O	O
in	O	O	O	O
fact	O	O	O	O
two	O	O	O	O
isolates	O	O	O	O
belonging	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
HHV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
6	O	O	O	O
variant	O	O	O	O
B	O	O	O	O
(	O	O	O	O
BA92	O	O	O	O
and	O	O	O	O
Z29	O	O	O	O
)	O	O	O	O
were	O	O	O	O
neither	O	O	O	O
able	O	O	O	O
to	O	O	O	O
infect	O	O	O	O
any	O	O	O	O
B	B-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
line	I-cell_line	O	O	O
,	O	O	O	O
independently	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
EBV	O	O	O	O
status	O	O	O	O
,	O	O	O	O
nor	O	O	O	O
to	O	O	O	O
induce	O	O	O	O
the	O	O	O	O
EBV	O	O	O	O
genome	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
only	O	O	O	O
exception	O	O	O	O
is	O	O	O	O
represented	O	O	O	O
by	O	O	O	O
the	O	O	O	O
P3HR1	B-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
,	O	O	O	O
in	O	O	O	O
which	O	O	O	O
,	O	O	O	O
however	O	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
infection	O	O	O	O
by	O	O	O	O
the	O	O	O	O
variant	O	O	O	O
B	O	O	O	O
does	O	O	O	O
not	O	O	O	O
determine	O	O	O	O
induction	O	O	O	O
of	O	O	O	O
EBV	B-protein	O	O	O
antigens	I-protein	O	O	O
;	O	O	O	O
(	O	O	O	O
2	O	O	O	O
)	O	O	O	O
the	O	O	O	O
presence	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
EBV	B-DNA	O	O	O
genome	I-DNA	O	O	O
contributes	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
susceptibility	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
B	B-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
lines	I-cell_line	O	O	O
to	O	O	O	O
HHV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
6	O	O	O	O
infection	O	O	O	O
,	O	O	O	O
increasing	O	O	O	O
the	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
sites	O	O	O	O
and	O	O	O	O
the	O	O	O	O
percentage	O	O	O	O
of	O	O	O	O
infectable	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
,	O	O	O	O
as	O	O	O	O
detected	O	O	O	O
by	O	O	O	O
immunoelectron	O	O	O	O
microscopy	O	O	O	O
;	O	O	O	O
and	O	O	O	O
(	O	O	O	O
3	O	O	O	O
)	O	O	O	O
HHV	B-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
6	I-cell_line	O	O	O
infected	I-cell_line	O	O	O
T	I-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
,	O	O	O	O
transfected	O	O	O	O
with	O	O	O	O
plasmids	B-DNA	O	O	O
bearing	O	O	O	O
the	O	O	O	O
promoter	B-DNA	O	O	O
regions	I-DNA	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
EBV	O	O	O	O
early	O	O	O	O
genes	O	O	O	O
BZLF1	B-DNA	O	O	O
and	O	O	O	O
BMRF1	B-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
show	O	O	O	O
a	O	O	O	O
strong	O	O	O	O
transactivation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
these	O	O	O	O
promoters	B-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

Evidence	O	O	O	O
for	O	O	O	O
normal	O	O	O	O
vitamin	B-protein	B-RNA	O	O
D	I-protein	I-RNA	O	O
receptor	I-protein	I-RNA	O	O
messenger	O	I-RNA	O	O
ribonucleic	O	I-RNA	O	O
acid	O	I-RNA	O	O
and	O	O	O	O
genotype	O	O	O	O
in	O	O	O	O
absorptive	O	O	O	O
hypercalciuria	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Absorptive	O	O	O	O
hypercalciuria	O	O	O	O
(	O	O	O	O
a	O	O	O	O
stone	O	O	O	O
-	O	O	O	O
forming	O	O	O	O
condition	O	O	O	O
)	O	O	O	O
is	O	O	O	O
characterized	O	O	O	O
by	O	O	O	O
gut	O	O	O	O
hyperabsorption	O	O	O	O
of	O	O	O	O
calcium	O	O	O	O
,	O	O	O	O
hypercalciuria	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
reduced	O	O	O	O
bone	O	O	O	O
density	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Inasmuch	O	O	O	O
as	O	O	O	O
these	O	O	O	O
features	O	O	O	O
implicate	O	O	O	O
enhanced	O	O	O	O
calcitriol	O	O	O	O
action	O	O	O	O
in	O	O	O	O
gut	O	O	O	O
and	O	O	O	O
bone	O	O	O	O
,	O	O	O	O
we	O	O	O	O
analyzed	O	O	O	O
the	O	O	O	O
vitamin	B-protein	B-DNA	O	O
D	I-protein	I-DNA	O	O
receptor	I-protein	I-DNA	O	O
(	O	I-DNA	O	O
VDR	B-protein	I-DNA	O	O
)	O	I-DNA	O	O
gene	O	I-DNA	O	O
to	O	O	O	O
ascertain	O	O	O	O
whether	O	O	O	O
an	O	O	O	O
abnormality	O	O	O	O
of	O	O	O	O
this	O	O	O	O
gene	O	O	O	O
marks	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
with	O	O	O	O
intestinal	O	O	O	O
hyperabsorption	O	O	O	O
of	O	O	O	O
calcium	O	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
have	O	O	O	O
compared	O	O	O	O
the	O	O	O	O
frequency	O	O	O	O
of	O	O	O	O
a	O	O	O	O
restriction	B-DNA	O	O	O
fragment	I-DNA	O	O	O
length	I-DNA	O	O	O
polymorphism	I-DNA	O	O	O
(	O	O	O	O
Bsm	B-DNA	O	O	O
I	I-DNA	O	O	O
)	O	O	O	O
associated	O	O	O	O
with	O	O	O	O
different	O	O	O	O
alleles	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
VDR	B-protein	B-DNA	O	O
gene	O	I-DNA	O	O
in	O	O	O	O
a	O	O	O	O
group	O	O	O	O
of	O	O	O	O
33	O	O	O	O
well	O	O	O	O
characterized	O	O	O	O
absorptive	O	O	O	O
hypercalciuric	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
and	O	O	O	O
a	O	O	O	O
group	O	O	O	O
of	O	O	O	O
36	O	O	O	O
normal	O	O	O	O
race	O	O	O	O
-	O	O	O	O
and	O	O	O	O
age	O	O	O	O
-	O	O	O	O
matched	O	O	O	O
control	O	O	O	O
subjects	O	O	O	O
.	O	O	O	O

There	O	O	O	O
was	O	O	O	O
no	O	O	O	O
difference	O	O	O	O
between	O	O	O	O
the	O	O	O	O
distribution	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
VDR	B-protein	O	O	O
alleles	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
patient	O	O	O	O
population	O	O	O	O
when	O	O	O	O
compared	O	O	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
normal	O	O	O	O
population	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
coding	O	O	O	O
region	O	O	O	O
of	O	O	O	O
VDR	B-protein	B-RNA	O	O
messenger	O	I-RNA	O	O
RNA	O	I-RNA	O	O
was	O	O	O	O
also	O	O	O	O
normal	O	O	O	O
,	O	O	O	O
as	O	O	O	O
determined	O	O	O	O
by	O	O	O	O
both	O	O	O	O
DNA	B-DNA	O	O	O
sequence	I-DNA	O	O	O
analysis	O	O	O	O
and	O	O	O	O
chemical	O	O	O	O
mismatch	O	O	O	O
cleavage	O	O	O	O
analysis	O	O	O	O
of	O	O	O	O
copy	O	O	O	O
DNA	O	O	O	O
from	O	O	O	O
11	O	O	O	O
index	O	O	O	O
absorptive	O	O	O	O
hypercalciuric	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
.	O	O	O	O

On	O	O	O	O
the	O	O	O	O
basis	O	O	O	O
of	O	O	O	O
these	O	O	O	O
results	O	O	O	O
,	O	O	O	O
we	O	O	O	O
propose	O	O	O	O
that	O	O	O	O
the	O	O	O	O
enhanced	O	O	O	O
intestinal	O	O	O	O
calcium	O	O	O	O
absorption	O	O	O	O
invariably	O	O	O	O
seen	O	O	O	O
in	O	O	O	O
absorptive	O	O	O	O
hypercalciuria	O	O	O	O
and	O	O	O	O
attendant	O	O	O	O
symptoms	O	O	O	O
of	O	O	O	O
this	O	O	O	O
disorder	O	O	O	O
are	O	O	O	O
not	O	O	O	O
attributable	O	O	O	O
to	O	O	O	O
mutations	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
VDR	B-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
are	O	O	O	O
not	O	O	O	O
linked	O	O	O	O
to	O	O	O	O
a	O	O	O	O
common	O	O	O	O
VDR	B-protein	B-DNA	O	O
genotype	O	I-DNA	O	O
.	O	O	O	O

Transcriptional	O	O	O	O
regulation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
gene	O	O	O	O
encoding	O	O	O	O
the	O	O	O	O
human	B-protein	O	O	O
C	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
type	I-protein	O	O	O
lectin	I-protein	O	O	O
leukocyte	I-protein	O	O	O
receptor	I-protein	O	O	O
AIM	B-protein	O	O	O
/	I-protein	O	O	O
CD69	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
functional	O	O	O	O
characterization	O	O	O	O
of	O	O	O	O
its	O	O	O	O
tumor	B-protein	O	O	O
necrosis	I-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
-	O	O	O	O
responsive	O	O	O	O
elements	B-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
human	B-protein	O	O	O
activation	I-protein	O	O	O
antigen	I-protein	O	O	O
CD69	B-protein	O	O	O
is	O	O	O	O
a	O	O	O	O
member	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
C	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
type	I-protein	O	O	O
animal	I-protein	O	O	O
lectin	I-protein	O	O	O
superfamily	I-protein	O	O	O
that	O	O	O	O
functions	O	O	O	O
as	O	O	O	O
a	O	O	O	O
signal	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
transmitting	I-protein	O	O	O
receptor	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Although	O	O	O	O
the	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
CD69	B-protein	O	O	O
can	O	O	O	O
be	O	O	O	O
induced	O	O	O	O
in	O	O	O	O
vitro	O	O	O	O
on	O	O	O	O
cells	O	O	O	O
of	O	O	O	O
most	O	O	O	O
hematopoietic	O	O	O	O
lineages	O	O	O	O
with	O	O	O	O
a	O	O	O	O
wide	O	O	O	O
variety	O	O	O	O
of	O	O	O	O
stimuli	O	O	O	O
,	O	O	O	O
in	O	O	O	O
vivo	O	O	O	O
it	O	O	O	O
is	O	O	O	O
mainly	O	O	O	O
expressed	O	O	O	O
by	O	O	O	O
T	O	B-cell_type	O	O
-	O	I-cell_type	O	O
lymphocytes	B-cell_type	I-cell_type	O	O
located	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
inflammatory	O	O	O	O
infiltrates	O	O	O	O
of	O	O	O	O
several	O	O	O	O
human	O	O	O	O
diseases	O	O	O	O
.	O	O	O	O

To	O	O	O	O
elucidate	O	O	O	O
the	O	O	O	O
mechanisms	O	O	O	O
that	O	O	O	O
regulate	O	O	O	O
the	O	O	O	O
constitutive	O	O	O	O
and	O	O	O	O
inducible	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
CD69	B-protein	O	O	O
by	O	O	O	O
leukocytes	B-cell_type	O	O	O
,	O	O	O	O
we	O	O	O	O
isolated	O	O	O	O
the	O	O	O	O
promoter	B-DNA	O	O	O
region	I-DNA	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
CD69	B-protein	O	O	O
gene	O	O	O	O
and	O	O	O	O
carried	O	O	O	O
out	O	O	O	O
its	O	O	O	O
functional	O	O	O	O
characterization	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Sequence	O	O	O	O
analysis	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
5	B-DNA	O	O	O
'	I-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
flanking	I-DNA	O	O	O
region	I-DNA	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
CD69	B-protein	B-DNA	O	O
gene	O	I-DNA	O	O
revealed	O	O	O	O
the	O	O	O	O
presence	O	O	O	O
of	O	O	O	O
a	O	O	O	O
potential	O	O	O	O
TATA	B-DNA	O	O	O
element	I-DNA	O	O	O
30	B-DNA	O	O	O
base	I-DNA	O	O	O
pairs	I-DNA	O	O	O
upstream	I-DNA	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
major	O	O	O	O
transcription	B-DNA	O	O	O
initiation	I-DNA	O	O	O
site	I-DNA	O	O	O
and	O	O	O	O
several	O	O	O	O
putative	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
sequences	O	O	O	O
for	O	O	O	O
inducible	O	O	O	O
transcription	B-protein	O	O	O
factors	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
Egr	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
AP	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
,	O	O	O	O
which	O	O	O	O
might	O	O	O	O
mediate	O	O	O	O
the	O	O	O	O
inducible	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
this	O	O	O	O
gene	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Transient	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
CD69	B-protein	B-DNA	O	O
promoter	O	I-DNA	O	O
-	O	I-DNA	O	O
based	O	I-DNA	O	O
reporter	O	I-DNA	O	O
gene	O	I-DNA	O	O
constructs	O	I-DNA	O	O
in	O	O	O	O
K562	B-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
indicated	O	O	O	O
that	O	O	O	O
the	O	O	O	O
proximal	O	B-DNA	O	O
promoter	B-DNA	I-DNA	O	O
region	I-DNA	I-DNA	O	O
spanning	O	O	O	O
positions	O	O	O	O
-	O	O	O	O
78	O	O	O	O
to	O	O	O	O
+	O	O	O	O
16	O	O	O	O
contained	O	O	O	O
the	O	O	O	O
cis	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
acting	I-DNA	O	O	O
sequences	I-DNA	O	O	O
necessary	O	O	O	O
for	O	O	O	O
basal	O	O	O	O
and	O	O	O	O
phorbol	O	O	O	O
12	O	O	O	O
-	O	O	O	O
myristate	O	O	O	O
13	O	O	O	O
-	O	O	O	O
acetate	O	O	O	O
-	O	O	O	O
inducible	O	O	O	O
transcription	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
CD69	B-protein	B-DNA	O	O
gene	O	I-DNA	O	O
.	O	O	O	O

Removal	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
upstream	O	O	O	O
sequences	O	O	O	O
located	O	O	O	O
between	O	O	O	O
positions	O	O	O	O
-	O	O	O	O
78	O	O	O	O
and	O	O	O	O
-	O	O	O	O
38	O	O	O	O
resulted	O	O	O	O
in	O	O	O	O
decreased	O	O	O	O
promoter	O	O	O	O
strength	O	O	O	O
and	O	O	O	O
abolished	O	O	O	O
the	O	O	O	O
response	O	O	O	O
to	O	O	O	O
phorbol	O	O	O	O
12	O	O	O	O
-	O	O	O	O
myristate	O	O	O	O
13	O	O	O	O
-	O	O	O	O
acetate	O	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
also	O	O	O	O
found	O	O	O	O
that	O	O	O	O
tumor	B-protein	O	O	O
necrosis	I-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
TNF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
is	O	O	O	O
capable	O	O	O	O
of	O	O	O	O
inducing	O	O	O	O
the	O	O	O	O
surface	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
CD69	B-protein	O	O	O
molecule	O	O	O	O
as	O	O	O	O
well	O	O	O	O
as	O	O	O	O
the	O	O	O	O
promoter	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
of	O	O	O	O
fusion	O	O	O	O
plasmids	O	O	O	O
that	O	O	O	O
contain	O	O	O	O
5	O	O	O	O
'	O	O	O	O
-	O	O	O	O
flanking	O	O	O	O
sequences	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
CD69	B-protein	O	O	O
gene	O	O	O	O
,	O	O	O	O
suggesting	O	O	O	O
that	O	O	O	O
this	O	O	O	O
cytokine	O	O	O	O
may	O	O	O	O
regulate	O	O	O	O
in	O	O	O	O
vivo	O	O	O	O
the	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
CD69	B-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

(	O	O	O	O
ABSTRACT	O	O	O	O
TRUNCATED	O	O	O	O
AT	O	O	O	O
250	O	O	O	O
WORDS	O	O	O	O
)	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Characterization	O	O	O	O
of	O	O	O	O
5	O	B-DNA	O	O
'	O	I-DNA	O	O
end	O	I-DNA	O	O
of	O	I-DNA	O	O
human	B-DNA	I-DNA	O	O
thromboxane	I-DNA	I-DNA	O	O
receptor	I-DNA	I-DNA	O	O
gene	I-DNA	I-DNA	O	O
.	O	O	O	O

Organizational	O	O	O	O
analysis	O	O	O	O
and	O	O	O	O
mapping	O	O	O	O
of	O	O	O	O
protein	O	B-DNA	O	O
kinase	O	I-DNA	O	O
C	O	I-DNA	O	O
-	O	I-DNA	O	O
-	O	I-DNA	O	O
responsive	O	I-DNA	O	O
elements	B-DNA	I-DNA	O	O
regulating	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
in	O	O	O	O
platelets	B-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

Platelet	B-cell_type	B-protein	O	O
thromboxane	O	I-protein	O	O
receptors	O	I-protein	O	O
are	O	O	O	O
acutely	O	O	O	O
and	O	O	O	O
reversibly	O	O	O	O
upregulated	O	O	O	O
after	O	O	O	O
acute	O	O	O	O
myocardial	O	O	O	O
infarction	O	O	O	O
.	O	O	O	O

To	O	O	O	O
determine	O	O	O	O
if	O	O	O	O
platelet	O	O	O	O
thromboxane	B-protein	O	O	O
receptors	I-protein	O	O	O
are	O	O	O	O
under	O	O	O	O
transcriptional	O	O	O	O
control	O	O	O	O
,	O	O	O	O
we	O	O	O	O
isolated	O	O	O	O
and	O	O	O	O
characterized	O	O	O	O
human	B-DNA	O	O	O
genomic	I-DNA	O	O	O
DNA	I-DNA	O	O	O
clones	I-DNA	O	O	O
containing	O	O	O	O
the	O	O	O	O
5	B-DNA	O	O	O
'	I-DNA	O	O	O
flanking	I-DNA	O	O	O
region	I-DNA	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
thromboxane	B-DNA	O	O	O
receptor	I-DNA	O	O	O
gene	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
exon	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
intron	I-DNA	O	O	O
structure	I-DNA	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
5	B-DNA	O	O	O
'	I-DNA	O	O	O
portion	I-DNA	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
thromboxane	B-protein	B-DNA	O	O
receptor	I-protein	I-DNA	O	O
gene	O	I-DNA	O	O
was	O	O	O	O
determined	O	O	O	O
initially	O	O	O	O
by	O	O	O	O
comparing	O	O	O	O
the	O	O	O	O
nucleotide	B-DNA	O	O	O
sequence	I-DNA	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
5	B-DNA	O	O	O
'	I-DNA	O	O	O
flanking	I-DNA	O	O	O
genomic	I-DNA	O	O	O
clone	I-DNA	O	O	O
with	O	O	O	O
that	O	O	O	O
of	O	O	O	O
a	O	O	O	O
novel	O	B-DNA	O	O
human	O	I-DNA	O	O
uterine	O	I-DNA	O	O
thromboxane	B-protein	I-DNA	O	O
receptor	I-protein	I-DNA	O	O
cDNA	O	I-DNA	O	O
that	O	O	O	O
extended	O	O	O	O
the	O	O	O	O
mRNA	B-RNA	O	O	O
141	B-DNA	O	O	O
bp	I-DNA	O	O	O
further	I-DNA	O	O	O
upstream	I-DNA	O	O	O
than	O	O	O	O
the	O	O	O	O
previously	B-DNA	O	O	O
identified	I-DNA	O	O	O
human	I-DNA	O	O	O
placental	I-DNA	O	O	O
cDNA	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

A	O	O	O	O
major	O	O	O	O
transcription	B-DNA	O	O	O
initiation	I-DNA	O	O	O
site	I-DNA	O	O	O
was	O	O	O	O
located	O	O	O	O
in	O	O	O	O
three	O	O	O	O
human	O	O	O	O
tissues	O	O	O	O
approximately	O	O	O	O
560	B-DNA	O	O	O
bp	I-DNA	O	O	O
upstream	I-DNA	O	O	O
from	O	O	O	O
the	O	O	O	O
translation	B-DNA	O	O	O
initiation	I-DNA	O	O	O
codon	I-DNA	O	O	O
and	O	O	O	O
380	B-DNA	O	O	O
bp	I-DNA	O	O	O
upstream	I-DNA	O	O	O
from	O	O	O	O
any	O	O	O	O
previously	O	O	O	O
identified	O	O	O	O
transcription	B-DNA	O	O	O
initiation	I-DNA	O	O	O
site	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
thromboxane	B-protein	B-DNA	O	O
receptor	I-protein	I-DNA	O	O
gene	O	I-DNA	O	O
has	O	O	O	O
neither	O	O	O	O
a	O	O	O	O
TATA	B-DNA	O	O	O
nor	O	O	O	O
a	O	O	O	O
CAAT	B-DNA	O	O	O
consensus	I-DNA	O	O	O
site	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

Promoter	O	O	O	O
function	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
5	B-DNA	O	O	O
'	I-DNA	O	O	O
flanking	I-DNA	O	O	O
region	I-DNA	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
thromboxane	B-protein	B-DNA	O	O
receptor	I-protein	I-DNA	O	O
gene	O	I-DNA	O	O
was	O	O	O	O
evaluated	O	O	O	O
by	O	O	O	O
transfection	O	O	O	O
of	O	O	O	O
thromboxane	B-protein	B-DNA	B-DNA	O
receptor	I-protein	I-DNA	I-DNA	O
gene	O	I-DNA	I-DNA	O
promoter	O	O	I-DNA	O
/	O	O	I-DNA	O
chloramphenicol	B-protein	O	I-DNA	O
acetyltransferase	I-protein	O	I-DNA	O
(	O	O	I-DNA	O
CAT	B-protein	O	I-DNA	O
)	O	O	I-DNA	O
chimera	O	O	I-DNA	O
plasmids	O	O	I-DNA	O
into	O	O	O	O
platelet	O	O	O	O
-	O	O	O	O
like	O	O	O	O
K562	B-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
.	O	O	O	O

Thromboxane	O	O	O	O
receptor	B-DNA	O	O	O
promoter	I-DNA	O	O	O
activity	O	O	O	O
,	O	O	O	O
as	O	O	O	O
assessed	O	O	O	O
by	O	O	O	O
CAT	B-protein	O	O	O
expression	O	O	O	O
,	O	O	O	O
was	O	O	O	O
relatively	O	O	O	O
weak	O	O	O	O
but	O	O	O	O
was	O	O	O	O
significantly	O	O	O	O
enhanced	O	O	O	O
by	O	O	O	O
phorbol	O	O	O	O
ester	O	O	O	O
treatment	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Functional	O	O	O	O
analysis	O	O	O	O
of	O	O	O	O
5	B-DNA	O	O	O
'	I-DNA	O	O	O
deletion	I-DNA	O	O	O
constructs	I-DNA	O	O	O
in	O	O	O	O
transfected	O	O	O	O
K562	B-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
and	O	O	O	O
gel	O	O	O	O
mobility	O	O	O	O
shift	O	O	O	O
localized	O	O	O	O
the	O	O	O	O
major	O	O	O	O
phorbol	O	O	O	O
ester	O	O	O	O
-	O	O	O	O
responsive	O	O	O	O
motifs	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
thromboxane	B-protein	B-DNA	O	O
receptor	I-protein	I-DNA	O	O
gene	O	I-DNA	O	O
promoter	O	O	O	O
to	O	O	O	O
a	O	O	O	O
cluster	O	O	O	O
of	O	O	O	O
activator	B-protein	B-DNA	O	O
protein	I-protein	I-DNA	O	O
-	I-protein	I-DNA	O	O
2	I-protein	I-DNA	O	O
(	O	I-DNA	O	O
AP	B-protein	I-DNA	O	O
-	I-protein	I-DNA	O	O
2	I-protein	I-DNA	O	O
)	O	I-DNA	O	O
binding	O	I-DNA	O	O
consensus	O	I-DNA	O	O
sites	O	I-DNA	O	O
located	O	O	O	O
approximately	O	O	O	O
1	O	O	O	O
.	O	O	O	O
8	O	O	O	O
kb	O	O	O	O
5	O	O	O	O
'	O	O	O	O
from	O	O	O	O
the	O	O	O	O
transcription	B-DNA	O	O	O
initiation	I-DNA	O	O	O
site	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

These	O	O	O	O
studies	O	O	O	O
are	O	O	O	O
the	O	O	O	O
first	O	O	O	O
to	O	O	O	O
determine	O	O	O	O
the	O	O	O	O
structure	O	O	O	O
and	O	O	O	O
organization	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
5	O	O	O	O
'	O	O	O	O
end	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
thromboxane	B-protein	B-DNA	O	O
receptor	I-protein	I-DNA	O	O
gene	O	I-DNA	O	O
and	O	O	O	O
demonstrate	O	O	O	O
that	O	O	O	O
thromboxane	B-protein	B-DNA	O	O
receptor	I-protein	I-DNA	O	O
gene	O	I-DNA	O	O
expression	O	O	O	O
can	O	O	O	O
be	O	O	O	O
regulated	O	O	O	O
by	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
protein	B-protein	O	O	O
kinase	I-protein	O	O	O
C	I-protein	O	O	O
via	O	O	O	O
induction	O	O	O	O
of	O	O	O	O
an	O	O	O	O
AP	B-protein	B-protein	O	O
-	I-protein	I-protein	O	O
2	I-protein	I-protein	O	O
-	O	I-protein	O	O
like	O	I-protein	O	O
nuclear	O	I-protein	O	O
factor	O	I-protein	O	O
binding	O	O	O	O
to	O	O	O	O
upstream	B-DNA	O	O	O
promoter	I-DNA	O	O	O
elements	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

These	O	O	O	O
findings	O	O	O	O
strongly	O	O	O	O
suggest	O	O	O	O
that	O	O	O	O
the	O	O	O	O
mechanism	O	O	O	O
for	O	O	O	O
previously	O	O	O	O
described	O	O	O	O
upregulation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
platelet	B-protein	O	O	O
thromboxane	I-protein	O	O	O
receptors	I-protein	O	O	O
after	O	O	O	O
acute	O	O	O	O
myocardial	O	O	O	O
infarction	O	O	O	O
is	O	O	O	O
increased	O	O	O	O
thromboxane	B-protein	B-DNA	O	O
receptor	I-protein	I-DNA	O	O
gene	O	I-DNA	O	O
transcription	O	O	O	O
in	O	O	O	O
platelet	B-cell_type	O	O	O
-	I-cell_type	O	O	O
progenitor	I-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

Estrogen	B-protein	O	O	O
receptor	I-protein	O	O	O
concentration	O	O	O	O
and	O	O	O	O
social	O	O	O	O
factors	O	O	O	O
as	O	O	O	O
predictors	O	O	O	O
of	O	O	O	O
natural	O	O	O	O
killer	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
in	O	O	O	O
early	O	O	O	O
-	O	O	O	O
stage	O	O	O	O
breast	O	O	O	O
cancer	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Confirmation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
a	O	O	O	O
model	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Previous	O	O	O	O
work	O	O	O	O
of	O	O	O	O
ours	O	O	O	O
has	O	O	O	O
demonstrated	O	O	O	O
that	O	O	O	O
a	O	O	O	O
significant	O	O	O	O
amount	O	O	O	O
of	O	O	O	O
natural	O	O	O	O
killer	O	O	O	O
(	O	O	O	O
NK	O	O	O	O
)	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
variance	O	O	O	O
after	O	O	O	O
surgery	O	O	O	O
in	O	O	O	O
stage	O	O	O	O
I	O	O	O	O
and	O	O	O	O
II	O	O	O	O
breast	O	O	O	O
cancer	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
could	O	O	O	O
be	O	O	O	O
accounted	O	O	O	O
for	O	O	O	O
by	O	O	O	O
both	O	O	O	O
the	O	O	O	O
estrogen	B-protein	O	O	O
receptor	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
ER	B-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
status	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
tumor	O	O	O	O
and	O	O	O	O
by	O	O	O	O
social	O	O	O	O
factors	O	O	O	O
,	O	O	O	O
namely	O	O	O	O
,	O	O	O	O
perceived	O	O	O	O
social	O	O	O	O
support	O	O	O	O
and	O	O	O	O
seeking	O	O	O	O
social	O	O	O	O
support	O	O	O	O
as	O	O	O	O
a	O	O	O	O
general	O	O	O	O
coping	O	O	O	O
strategy	O	O	O	O
.	O	O	O	O

As	O	O	O	O
considerable	O	O	O	O
evidence	O	O	O	O
has	O	O	O	O
accumulated	O	O	O	O
that	O	O	O	O
social	O	O	O	O
support	O	O	O	O
in	O	O	O	O
both	O	O	O	O
animal	O	O	O	O
and	O	O	O	O
human	O	O	O	O
populations	O	O	O	O
may	O	O	O	O
have	O	O	O	O
survival	O	O	O	O
value	O	O	O	O
,	O	O	O	O
we	O	O	O	O
sought	O	O	O	O
to	O	O	O	O
test	O	O	O	O
the	O	O	O	O
reliability	O	O	O	O
of	O	O	O	O
this	O	O	O	O
regression	O	O	O	O
model	O	O	O	O
,	O	O	O	O
using	O	O	O	O
coping	O	O	O	O
and	O	O	O	O
perceived	O	O	O	O
support	O	O	O	O
factor	O	O	O	O
values	O	O	O	O
obtained	O	O	O	O
at	O	O	O	O
3	O	O	O	O
months	O	O	O	O
after	O	O	O	O
surgery	O	O	O	O
to	O	O	O	O
account	O	O	O	O
for	O	O	O	O
concurrent	O	O	O	O
follow	O	O	O	O
-	O	O	O	O
up	O	O	O	O
NK	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
in	O	O	O	O
this	O	O	O	O
serially	O	O	O	O
assessed	O	O	O	O
group	O	O	O	O
of	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
.	O	O	O	O

It	O	O	O	O
was	O	O	O	O
found	O	O	O	O
that	O	O	O	O
the	O	O	O	O
most	O	O	O	O
significant	O	O	O	O
variable	O	O	O	O
predicting	O	O	O	O
NK	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
at	O	O	O	O
follow	O	O	O	O
-	O	O	O	O
up	O	O	O	O
was	O	O	O	O
tumor	O	O	O	O
ER	B-protein	O	O	O
concentration	O	O	O	O
,	O	O	O	O
with	O	O	O	O
higher	O	O	O	O
NK	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
associated	O	O	O	O
with	O	O	O	O
ER	B-protein	O	O	O
-	O	O	O	O
status	O	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
addition	O	O	O	O
,	O	O	O	O
seeking	O	O	O	O
social	O	O	O	O
support	O	O	O	O
as	O	O	O	O
a	O	O	O	O
coping	O	O	O	O
strategy	O	O	O	O
,	O	O	O	O
as	O	O	O	O
well	O	O	O	O
as	O	O	O	O
the	O	O	O	O
perceived	O	O	O	O
quality	O	O	O	O
of	O	O	O	O
support	O	O	O	O
,	O	O	O	O
also	O	O	O	O
entered	O	O	O	O
the	O	O	O	O
model	O	O	O	O
to	O	O	O	O
account	O	O	O	O
for	O	O	O	O
a	O	O	O	O
significant	O	O	O	O
amount	O	O	O	O
of	O	O	O	O
NK	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
variance	O	O	O	O
(	O	O	O	O
multivariate	O	O	O	O
F	O	O	O	O
=	O	O	O	O
5	O	O	O	O
.	O	O	O	O
25	O	O	O	O
,	O	O	O	O
p	O	O	O	O
less	O	O	O	O
than	O	O	O	O
0	O	O	O	O
.	O	O	O	O
001	O	O	O	O
)	O	O	O	O
.	O	O	O	O

If	O	O	O	O
,	O	O	O	O
as	O	O	O	O
the	O	O	O	O
literature	O	O	O	O
suggests	O	O	O	O
,	O	O	O	O
NK	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
is	O	O	O	O
relevant	O	O	O	O
to	O	O	O	O
breast	O	O	O	O
cancer	O	O	O	O
control	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
since	O	O	O	O
ER	B-protein	O	O	O
-	O	O	O	O
tumors	O	O	O	O
have	O	O	O	O
a	O	O	O	O
worse	O	O	O	O
prognosis	O	O	O	O
,	O	O	O	O
we	O	O	O	O
suggest	O	O	O	O
here	O	O	O	O
that	O	O	O	O
perhaps	O	O	O	O
such	O	O	O	O
tumors	O	O	O	O
are	O	O	O	O
resistant	O	O	O	O
to	O	O	O	O
control	O	O	O	O
by	O	O	O	O
NK	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
because	O	O	O	O
they	O	O	O	O
lack	O	O	O	O
the	O	O	O	O
ability	O	O	O	O
to	O	O	O	O
attract	O	O	O	O
an	O	O	O	O
accumulation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
effector	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
tumor	O	O	O	O
site	O	O	O	O
,	O	O	O	O
or	O	O	O	O
because	O	O	O	O
blocking	O	O	O	O
factors	O	O	O	O
at	O	O	O	O
the	O	O	O	O
site	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
tumor	O	O	O	O
prevent	O	O	O	O
local	O	O	O	O
tumor	O	O	O	O
control	O	O	O	O
at	O	O	O	O
the	O	O	O	O
site	O	O	O	O
of	O	O	O	O
action	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
finding	O	O	O	O
related	O	O	O	O
to	O	O	O	O
social	O	O	O	O
support	O	O	O	O
also	O	O	O	O
replicates	O	O	O	O
results	O	O	O	O
from	O	O	O	O
an	O	O	O	O
independent	O	O	O	O
sample	O	O	O	O
of	O	O	O	O
breast	O	O	O	O
cancer	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
.	O	O	O	O

This	O	O	O	O
finding	O	O	O	O
,	O	O	O	O
taken	O	O	O	O
together	O	O	O	O
with	O	O	O	O
other	O	O	O	O
evidence	O	O	O	O
that	O	O	O	O
this	O	O	O	O
social	O	O	O	O
variable	O	O	O	O
is	O	O	O	O
associated	O	O	O	O
with	O	O	O	O
longer	O	O	O	O
survival	O	O	O	O
in	O	O	O	O
breast	O	O	O	O
cancer	O	O	O	O
populations	O	O	O	O
,	O	O	O	O
underscores	O	O	O	O
the	O	O	O	O
potential	O	O	O	O
importance	O	O	O	O
of	O	O	O	O
this	O	O	O	O
social	O	O	O	O
support	O	O	O	O
variable	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Our	O	O	O	O
findings	O	O	O	O
also	O	O	O	O
suggest	O	O	O	O
one	O	O	O	O
possible	O	O	O	O
immunological	O	O	O	O
variable	O	O	O	O
involved	O	O	O	O
,	O	O	O	O
with	O	O	O	O
potential	O	O	O	O
clinical	O	O	O	O
significance	O	O	O	O
,	O	O	O	O
for	O	O	O	O
this	O	O	O	O
patient	O	O	O	O
population	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Solution	O	O	O	O
structure	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
sequence	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
specific	I-DNA	O	O	O
HMG	I-DNA	O	O	O
box	I-DNA	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
lymphocyte	B-protein	O	O	O
transcriptional	I-protein	O	O	O
activator	I-protein	O	O	O
Sox	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
4	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Two	O	O	O	O
groups	O	O	O	O
of	O	O	O	O
HMG	B-protein	O	O	O
box	I-protein	O	O	O
proteins	I-protein	O	O	O
are	O	O	O	O
distinguished	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Proteins	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
first	O	O	O	O
group	O	O	O	O
contain	O	O	O	O
multiple	O	O	O	O
HMG	B-protein	O	O	O
boxes	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
are	O	O	O	O
non	O	O	O	O
-	O	O	O	O
sequence	O	O	O	O
-	O	O	O	O
specific	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
recognize	O	O	O	O
structural	O	O	O	O
features	O	O	O	O
as	O	O	O	O
found	O	O	O	O
in	O	O	O	O
cruciform	B-DNA	O	O	O
DNA	I-DNA	O	O	O
and	O	O	O	O
cross	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
over	I-DNA	O	O	O
DNA	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
abundant	O	O	O	O
chromosomal	B-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
HMG	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
belongs	O	O	O	O
to	O	O	O	O
this	O	O	O	O
subgroup	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Proteins	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
second	O	O	O	O
group	O	O	O	O
carry	O	O	O	O
a	O	O	O	O
single	B-protein	O	O	O
HMG	I-protein	O	O	O
box	I-protein	O	O	O
with	O	O	O	O
affinity	O	O	O	O
for	O	O	O	O
the	O	O	O	O
minor	B-DNA	O	O	O
groove	I-DNA	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
heptamer	B-DNA	O	O	O
motif	I-DNA	O	O	O
AACAAAG	O	O	O	O
or	O	O	O	O
variations	O	O	O	O
thereof	O	O	O	O
.	O	O	O	O

A	O	O	O	O
solution	O	O	O	O
structure	O	O	O	O
for	O	O	O	O
the	O	O	O	O
non	O	O	O	O
-	O	O	O	O
sequence	O	O	O	O
-	O	O	O	O
specific	O	O	O	O
C	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
terminal	I-protein	O	O	O
HMG	I-protein	O	O	O
box	I-protein	O	O	O
of	O	O	O	O
HMG	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
has	O	O	O	O
recently	O	O	O	O
been	O	O	O	O
proposed	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Now	O	O	O	O
,	O	O	O	O
we	O	O	O	O
report	O	O	O	O
the	O	O	O	O
solution	O	O	O	O
structure	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
sequence	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
specific	I-protein	O	O	O
HMG	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
box	I-protein	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
SRY	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
related	I-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
Sox	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
4	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

NMR	O	O	O	O
analysis	O	O	O	O
demonstrated	O	O	O	O
the	O	O	O	O
presence	O	O	O	O
of	O	O	O	O
three	O	O	O	O
alpha	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
helices	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
Val10	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
Gln22	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
Glu30	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
Leu41	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
Phe50	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
Tyr65	I-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
connected	O	O	O	O
by	O	O	O	O
loop	B-protein	O	O	O
regions	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
Ser23	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
Ala49	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
Leu42	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
Pro49	I-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Helices	O	O	O	O
I	O	O	O	O
and	O	O	O	O
II	O	O	O	O
are	O	O	O	O
positioned	O	O	O	O
in	O	O	O	O
an	O	O	O	O
antiparallel	B-protein	O	O	O
mode	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
form	O	O	O	O
one	O	O	O	O
arm	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
HMG	B-protein	O	O	O
box	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Helix	B-protein	O	O	O
III	I-protein	O	O	O
is	O	O	O	O
less	O	O	O	O
rigid	O	O	O	O
,	O	O	O	O
makes	O	O	O	O
an	O	O	O	O
average	O	O	O	O
angle	O	O	O	O
of	O	O	O	O
about	O	O	O	O
90	O	O	O	O
degrees	O	O	O	O
with	O	O	O	O
helices	O	O	O	O
I	O	O	O	O
and	O	O	O	O
II	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
constitutes	O	O	O	O
the	O	O	O	O
other	O	O	O	O
arm	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
molecule	O	O	O	O
.	O	O	O	O

As	O	O	O	O
in	O	O	O	O
HMG1B	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
overall	O	O	O	O
structure	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
Sox	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
4	I-protein	O	O	O
HMG	B-protein	O	O	O
box	I-protein	O	O	O
is	O	O	O	O
L	O	O	O	O
-	O	O	O	O
shaped	O	O	O	O
and	O	O	O	O
is	O	O	O	O
maintained	O	O	O	O
by	O	O	O	O
a	O	O	O	O
cluster	O	O	O	O
of	O	O	O	O
conserved	O	O	O	O
,	O	O	O	O
mainly	O	O	O	O
aromatic	O	O	O	O
residues	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Nuclear	B-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
IL6	I-protein	O	O	O
activates	O	O	O	O
the	O	O	O	O
human	B-DNA	O	O	O
IL	I-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
4	I-DNA	O	O	O
promoter	I-DNA	O	O	O
in	O	O	O	O
T	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

Positive	B-DNA	O	O	O
regulatory	I-DNA	O	O	O
element	I-DNA	O	O	O
I	I-DNA	O	O	O
(	O	O	O	O
PRE	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
I	I-DNA	O	O	O
)	O	O	O	O
is	O	O	O	O
a	O	O	O	O
strong	O	O	O	O
enhancer	B-DNA	O	O	O
element	I-DNA	O	O	O
essential	O	O	O	O
for	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
human	B-DNA	O	O	O
IL	I-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
4	I-DNA	O	O	O
gene	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

To	O	O	O	O
identify	O	O	O	O
transcription	B-protein	O	O	O
factors	I-protein	O	O	O
binding	O	O	O	O
to	O	O	O	O
PRE	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
I	I-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
we	O	O	O	O
screened	O	O	O	O
a	O	O	O	O
cDNA	B-DNA	O	O	O
expression	I-DNA	O	O	O
library	I-DNA	O	O	O
from	O	O	O	O
Jurkat	O	B-cell_line	O	O
T	B-cell_type	I-cell_line	O	O
cells	I-cell_type	I-cell_line	O	O
and	O	O	O	O
isolated	O	O	O	O
a	O	O	O	O
cDNA	B-DNA	O	O	O
encoding	O	O	O	O
nuclear	B-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
(	B-protein	O	O	O
NF	I-protein	O	O	O
)	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
IL6	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
also	O	O	O	O
known	O	O	O	O
as	O	O	O	O
C	B-protein	O	O	O
/	I-protein	O	O	O
EBP	I-protein	O	O	O
beta	I-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
.	O	O	O	O

NF	B-RNA	O	O	O
-	I-RNA	O	O	O
IL6	I-RNA	O	O	O
mRNA	I-RNA	O	O	O
was	O	O	O	O
found	O	O	O	O
in	O	O	O	O
human	O	B-cell_line	O	O
Jurkat	O	I-cell_line	O	O
T	B-cell_type	I-cell_line	O	O
cells	I-cell_type	I-cell_line	O	O
and	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
mouse	B-cell_line	O	O	O
Th2	I-cell_line	O	O	O
clone	I-cell_line	O	O	O
D10	B-cell_line	O	O	O
,	O	O	O	O
but	O	O	O	O
not	O	O	O	O
in	O	O	O	O
Th1	B-cell_line	O	O	O
clone	I-cell_line	O	O	O
29	I-cell_line	O	O	O
.	O	O	O	O

rNF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
IL6	I-protein	O	O	O
expressed	O	O	O	O
in	O	O	O	O
bacteria	O	O	O	O
was	O	O	O	O
shown	O	O	O	O
to	O	O	O	O
specifically	O	O	O	O
bind	O	O	O	O
to	O	O	O	O
PRE	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
I	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

PRE	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
I	I-DNA	O	O	O
forms	O	O	O	O
multiple	B-protein	O	O	O
DNA	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
complexes	I-protein	O	O	O
with	O	O	O	O
nuclear	O	O	O	O
extracts	O	O	O	O
from	O	O	O	O
Jurkat	B-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
.	O	O	O	O

Some	O	O	O	O
of	O	O	O	O
these	O	O	O	O
complexes	O	O	O	O
were	O	O	O	O
demonstrated	O	O	O	O
to	O	O	O	O
contain	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
IL6	I-protein	O	O	O
by	O	O	O	O
using	O	O	O	O
anti	O	B-protein	O	O
-	O	I-protein	O	O
C	B-protein	I-protein	O	O
/	I-protein	I-protein	O	O
EBP	I-protein	I-protein	O	O
beta	I-protein	I-protein	O	O
Abs	O	I-protein	O	O
.	O	O	O	O

Overexpression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
IL6	I-protein	O	O	O
enhanced	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
chloramphenicol	B-protein	B-DNA	O	O
acetyl	I-protein	I-DNA	O	O
transferase	I-protein	I-DNA	O	O
reporter	O	I-DNA	O	O
gene	O	I-DNA	O	O
linked	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
PRE	B-DNA	B-protein	O	O
-	I-DNA	I-protein	O	O
I	I-DNA	I-protein	O	O
-	O	I-protein	O	O
thymidine	O	I-protein	O	O
kinase	O	I-protein	O	O
or	O	O	O	O
the	O	O	O	O
human	B-protein	B-DNA	O	O
IL	I-protein	I-DNA	O	O
-	I-protein	I-DNA	O	O
4	I-protein	I-DNA	O	O
promoter	O	I-DNA	O	O
more	O	O	O	O
than	O	O	O	O
10	O	O	O	O
-	O	O	O	O
fold	O	O	O	O
in	O	O	O	O
Jurkat	B-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
.	O	O	O	O

Promoter	O	O	O	O
deletion	O	O	O	O
studies	O	O	O	O
revealed	O	O	O	O
two	O	O	O	O
additional	O	O	O	O
NF	B-protein	B-DNA	O	O
-	I-protein	I-DNA	O	O
IL6	I-protein	I-DNA	O	O
binding	O	I-DNA	O	O
sites	O	I-DNA	O	O
located	O	O	O	O
at	O	O	O	O
positions	O	O	O	O
-	O	O	O	O
44	O	O	O	O
to	O	O	O	O
-	O	O	O	O
36	O	O	O	O
(	O	O	O	O
C	B-protein	O	O	O
/	I-protein	O	O	O
EBP	I-protein	O	O	O
proximal	I-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
and	O	O	O	O
-	O	O	O	O
87	O	O	O	O
to	O	O	O	O
-	O	O	O	O
79	O	O	O	O
(	O	O	O	O
C	B-protein	O	O	O
/	I-protein	O	O	O
EBP	I-protein	O	O	O
medial	I-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
,	O	O	O	O
respectively	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Our	O	O	O	O
results	O	O	O	O
demonstrate	O	O	O	O
that	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
IL6	I-protein	O	O	O
is	O	O	O	O
involved	O	O	O	O
in	O	O	O	O
transcriptional	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
human	B-protein	B-DNA	O	O
IL	I-protein	I-DNA	O	O
-	I-protein	I-DNA	O	O
4	I-protein	I-DNA	O	O
promoter	O	I-DNA	O	O
in	O	O	O	O
T	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

Identification	O	O	O	O
of	O	O	O	O
an	O	O	O	O
I	B-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
associated	I-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
kinase	I-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
a	O	O	O	O
human	B-cell_line	O	O	O
monocytic	I-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
line	I-cell_line	O	O	O
and	O	O	O	O
determination	O	O	O	O
of	O	O	O	O
its	O	O	O	O
phosphorylation	B-protein	O	O	O
sites	I-protein	O	O	O
on	O	O	O	O
I	B-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Nuclear	B-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
is	O	O	O	O
stored	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
cytoplasm	O	O	O	O
as	O	O	O	O
an	O	O	O	O
inactive	O	O	O	O
form	O	O	O	O
through	O	O	O	O
interaction	O	O	O	O
with	O	O	O	O
I	B-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Stimulation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
cells	O	O	O	O
leads	O	O	O	O
to	O	O	O	O
a	O	O	O	O
rapid	O	O	O	O
phosphorylation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
I	B-protein	B-protein	O	O
kappa	I-protein	I-protein	O	O
B	I-protein	I-protein	O	O
alpha	O	I-protein	O	O
,	O	O	O	O
which	O	O	O	O
is	O	O	O	O
presumed	O	O	O	O
to	O	O	O	O
be	O	O	O	O
important	O	O	O	O
for	O	O	O	O
the	O	O	O	O
subsequent	O	O	O	O
degradation	O	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
have	O	O	O	O
recently	O	O	O	O
reported	O	O	O	O
the	O	O	O	O
establishment	O	O	O	O
of	O	O	O	O
a	O	O	O	O
lipopolysaccharide	O	O	O	O
(	O	O	O	O
LPS	O	O	O	O
)	O	O	O	O
-	O	O	O	O
dependent	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
-	O	O	O	O
free	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
system	O	O	O	O
of	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
association	O	O	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
induction	O	O	O	O
of	O	O	O	O
I	B-protein	B-protein	O	O
kappa	I-protein	I-protein	O	O
B	I-protein	I-protein	O	O
alpha	O	I-protein	O	O
phosphorylation	O	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
this	O	O	O	O
study	O	O	O	O
,	O	O	O	O
we	O	O	O	O
have	O	O	O	O
identified	O	O	O	O
a	O	O	O	O
kinase	B-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
extracts	O	O	O	O
from	O	O	O	O
the	O	O	O	O
LPS	B-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
stimulated	I-cell_line	O	O	O
human	I-cell_line	O	O	O
monocytic	I-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
line	I-cell_line	O	O	O
,	O	O	O	O
THP	B-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
1	I-cell_line	O	O	O
,	O	O	O	O
that	O	O	O	O
specifically	O	O	O	O
binds	O	O	O	O
and	O	O	O	O
phosphorylates	O	O	O	O
I	B-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

LPS	O	O	O	O
stimulation	O	O	O	O
transiently	O	O	O	O
enhanced	O	O	O	O
the	O	O	O	O
I	B-protein	B-protein	O	O
kappa	I-protein	I-protein	O	O
B	I-protein	I-protein	O	O
alpha	O	I-protein	O	O
-	B-protein	O	O	O
bound	I-protein	O	O	O
kinase	I-protein	O	O	O
activity	O	O	O	O
in	O	O	O	O
THP	B-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
1	I-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
.	O	O	O	O

Mutational	O	O	O	O
analyses	O	O	O	O
of	O	O	O	O
I	B-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
alpha	O	O	O	O
and	O	O	O	O
competition	O	O	O	O
experiments	O	O	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
synthetic	O	O	O	O
peptides	O	O	O	O
identified	O	O	O	O
major	O	O	O	O
phosphorylation	B-protein	O	O	O
sites	I-protein	O	O	O
by	O	O	O	O
the	O	O	O	O
bound	O	O	O	O
kinase	B-protein	O	O	O
as	O	O	O	O
Ser	O	O	O	O
and	O	O	O	O
Thr	O	O	O	O
residues	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
C	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
terminal	I-protein	O	O	O
acidic	I-protein	O	O	O
domain	I-protein	O	O	O
of	O	O	O	O
I	B-protein	B-protein	O	O
kappa	I-protein	I-protein	O	O
B	I-protein	I-protein	O	O
alpha	O	I-protein	O	O
.	O	O	O	O

Moreover	O	O	O	O
,	O	O	O	O
we	O	O	O	O
show	O	O	O	O
that	O	O	O	O
the	O	O	O	O
peptide	O	O	O	O
,	O	O	O	O
corresponding	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
C	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
terminal	I-protein	O	O	O
acidic	I-protein	O	O	O
domain	I-protein	O	O	O
of	O	O	O	O
I	B-protein	B-protein	O	O
kappa	I-protein	I-protein	O	O
B	I-protein	I-protein	O	O
alpha	O	I-protein	O	O
,	O	O	O	O
blocked	O	O	O	O
the	O	O	O	O
LPS	O	O	O	O
-	O	O	O	O
induced	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
activation	O	O	O	O
as	O	O	O	O
well	O	O	O	O
as	O	O	O	O
inducible	O	O	O	O
phosphorylation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
endogenous	O	O	O	O
I	B-protein	B-protein	O	O
kappa	I-protein	I-protein	O	O
B	I-protein	I-protein	O	O
alpha	O	I-protein	O	O
in	O	O	O	O
a	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
-	O	O	O	O
free	O	O	O	O
system	O	O	O	O
using	O	O	O	O
THP	B-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
1	I-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
.	O	O	O	O

These	O	O	O	O
results	O	O	O	O
suggested	O	O	O	O
that	O	O	O	O
the	O	O	O	O
bound	B-protein	O	O	O
kinase	I-protein	O	O	O
is	O	O	O	O
involved	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
signaling	O	O	O	O
pathway	O	O	O	O
of	O	O	O	O
LPS	O	O	O	O
by	O	O	O	O
inducing	O	O	O	O
the	O	O	O	O
phosphorylation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
C	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
terminal	I-protein	O	O	O
region	I-protein	O	O	O
of	O	O	O	O
I	B-protein	B-protein	O	O
kappa	I-protein	I-protein	O	O
B	I-protein	I-protein	O	O
alpha	O	I-protein	O	O
and	O	O	O	O
subsequent	O	O	O	O
dissociation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O
I	B-protein	B-protein	O	O
kappa	I-protein	I-protein	O	O
B	I-protein	I-protein	O	O
alpha	I-protein	I-protein	O	O
complex	O	I-protein	O	O
.	O	O	O	O

Bik	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
a	O	O	O	O
novel	O	O	O	O
death	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
inducing	I-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
shares	O	O	O	O
a	O	O	O	O
distinct	O	O	O	O
sequence	O	O	O	O
motif	O	O	O	O
with	O	O	O	O
Bcl	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
family	I-protein	O	O	O
proteins	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
interacts	O	O	O	O
with	O	O	O	O
viral	O	O	O	O
and	O	O	O	O
cellular	B-protein	O	O	O
survival	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
promoting	I-protein	O	O	O
proteins	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
survival	O	O	O	O
-	O	O	O	O
promoting	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
Bcl	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
family	I-protein	O	O	O
of	O	O	O	O
proteins	O	O	O	O
appears	O	O	O	O
to	O	O	O	O
be	O	O	O	O
modulated	O	O	O	O
by	O	O	O	O
interactions	O	O	O	O
between	O	O	O	O
various	O	O	O	O
cellular	B-protein	O	O	O
proteins	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
have	O	O	O	O
identified	O	O	O	O
a	O	O	O	O
novel	O	O	O	O
cellular	B-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
Bik	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
that	O	O	O	O
interacts	O	O	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
cellular	B-protein	O	O	O
survival	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
promoting	I-protein	O	O	O
proteins	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
Bcl	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
Bcl	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
xL	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
as	O	O	O	O
well	O	O	O	O
as	O	O	O	O
the	O	O	O	O
viral	B-protein	O	O	O
survival	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
promoting	I-protein	O	O	O
proteins	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
Epstein	B-protein	O	O	O
Barr	I-protein	O	O	O
virus	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
BHRF1	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
adenovirus	B-protein	O	O	O
E1B	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
19	I-protein	O	O	O
kDa	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
transient	O	O	O	O
transfection	O	O	O	O
assays	O	O	O	O
,	O	O	O	O
Bik	B-protein	O	O	O
promotes	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
death	O	O	O	O
in	O	O	O	O
a	O	O	O	O
manner	O	O	O	O
similar	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
death	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
promoting	I-protein	O	O	O
members	I-protein	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
Bcl	B-protein	B-protein	O	O
-	I-protein	I-protein	O	O
2	I-protein	I-protein	O	O
family	O	I-protein	O	O
,	O	O	O	O
Bax	B-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
Bak	B-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

This	O	O	O	O
death	O	O	O	O
-	O	O	O	O
promoting	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
of	O	O	O	O
Bik	B-protein	O	O	O
can	O	O	O	O
be	O	O	O	O
suppressed	O	O	O	O
by	O	O	O	O
coexpression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
Bcl	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
Bcl	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
XL	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
EBV	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
BHRF1	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
E1B	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
19	I-protein	O	O	O
kDa	I-protein	O	O	O
proteins	O	O	O	O
suggesting	O	O	O	O
that	O	O	O	O
Bik	B-protein	O	O	O
may	O	O	O	O
be	O	O	O	O
a	O	O	O	O
common	O	O	O	O
target	O	O	O	O
for	O	O	O	O
both	O	O	O	O
cellular	O	O	O	O
and	O	O	O	O
viral	O	O	O	O
anti	O	O	O	O
-	O	O	O	O
apoptotic	O	O	O	O
proteins	O	O	O	O
.	O	O	O	O

While	O	O	O	O
Bik	B-protein	O	O	O
does	O	O	O	O
not	O	O	O	O
show	O	O	O	O
overt	O	O	O	O
homology	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
BH1	B-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
BH2	B-protein	O	O	O
conserved	O	O	O	O
domains	O	O	O	O
characteristic	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
Bcl	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
family	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
it	O	O	O	O
does	O	O	O	O
share	O	O	O	O
a	O	O	O	O
9	O	O	O	O
amino	B-protein	O	O	O
acid	I-protein	O	O	O
domain	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
BH3	B-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
with	O	O	O	O
Bax	B-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
Bak	B-protein	O	O	O
which	O	O	O	O
may	O	O	O	O
be	O	O	O	O
a	O	O	O	O
critical	O	O	O	O
determinant	O	O	O	O
for	O	O	O	O
the	O	O	O	O
death	O	O	O	O
-	O	O	O	O
promoting	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
of	O	O	O	O
these	O	O	O	O
proteins	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
human	B-DNA	O	O	O
TCF	I-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
1	I-DNA	O	O	O
gene	I-DNA	O	O	O
encodes	O	O	O	O
a	O	O	O	O
nuclear	B-protein	O	O	O
DNA	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
binding	I-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
uniquely	O	O	O	O
expressed	O	O	O	O
in	O	O	O	O
normal	O	O	O	O
and	O	O	O	O
neoplastic	O	O	O	O
T	O	O	O	O
-	O	O	O	O
lineage	O	O	O	O
lymphocytes	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
TCF	B-protein	B-DNA	O	O
-	I-protein	I-DNA	O	O
1	I-protein	I-DNA	O	O
gene	O	I-DNA	O	O
encodes	O	O	O	O
a	O	O	O	O
putative	B-protein	O	O	O
transcription	I-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
with	O	O	O	O
affinity	O	O	O	O
for	O	O	O	O
a	O	O	O	O
sequence	B-DNA	O	O	O
motif	I-DNA	O	O	O
occurring	O	O	O	O
in	O	O	O	O
a	O	O	O	O
number	O	O	O	O
of	O	O	O	O
T	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
cell	I-DNA	O	O	O
enhancers	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

TCF	B-protein	B-RNA	O	O
-	I-protein	I-RNA	O	O
1	I-protein	I-RNA	O	O
mRNA	O	I-RNA	O	O
was	O	O	O	O
originally	O	O	O	O
found	O	O	O	O
to	O	O	O	O
be	O	O	O	O
expressed	O	O	O	O
in	O	O	O	O
a	O	O	O	O
T	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
-	O	O	O	O
specific	O	O	O	O
fashion	O	O	O	O
within	O	O	O	O
a	O	O	O	O
set	O	O	O	O
of	O	O	O	O
human	B-cell_line	O	O	O
and	O	O	O	O
mouse	B-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
lines	I-cell_line	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
contrast	O	O	O	O
,	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
reportedly	O	O	O	O
occurs	O	O	O	O
in	O	O	O	O
multiple	O	O	O	O
nonlymphoid	O	O	O	O
tissues	O	O	O	O
during	O	O	O	O
murine	O	O	O	O
embryogenesis	O	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
have	O	O	O	O
now	O	O	O	O
raised	O	O	O	O
a	O	O	O	O
monoclonal	B-protein	O	O	O
antibody	I-protein	O	O	O
to	O	O	O	O
document	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
and	O	O	O	O
biochemistry	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
human	O	B-protein	O	O
TCF	B-protein	I-protein	O	O
-	I-protein	I-protein	O	O
1	I-protein	I-protein	O	O
protein	O	I-protein	O	O
.	O	O	O	O

As	O	O	O	O
expected	O	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
TCF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
was	O	O	O	O
detectable	O	O	O	O
only	O	O	O	O
in	O	O	O	O
cell	B-cell_line	O	O	O
lines	I-cell_line	O	O	O
of	I-cell_line	O	O	O
T	I-cell_line	O	O	O
lineage	I-cell_line	O	O	O
.	O	O	O	O

Its	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
was	O	O	O	O
always	O	O	O	O
restricted	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
nucleus	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Immunohistochemistry	O	O	O	O
on	O	O	O	O
a	O	O	O	O
panel	O	O	O	O
of	O	O	O	O
human	O	O	O	O
tissues	O	O	O	O
revealed	O	O	O	O
that	O	O	O	O
the	O	O	O	O
TCF	B-protein	B-protein	O	O
-	I-protein	I-protein	O	O
1	I-protein	I-protein	O	O
protein	O	I-protein	O	O
was	O	O	O	O
found	O	O	O	O
exclusively	O	O	O	O
in	O	O	O	O
thymocytes	O	O	O	O
and	O	O	O	O
in	O	O	O	O
CD3	O	B-cell_line	O	O
+	O	I-cell_line	O	O
T	B-cell_type	I-cell_line	O	O
cells	I-cell_type	I-cell_line	O	O
in	O	O	O	O
peripheral	O	O	O	O
lymphoid	O	O	O	O
tissues	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Western	O	O	O	O
blotting	O	O	O	O
yielded	O	O	O	O
a	O	O	O	O
set	O	O	O	O
of	O	O	O	O
bands	O	O	O	O
ranging	O	O	O	O
from	O	O	O	O
25	O	O	O	O
kD	O	O	O	O
to	O	O	O	O
55	O	O	O	O
kD	O	O	O	O
,	O	O	O	O
resulting	O	O	O	O
from	O	O	O	O
extensive	O	O	O	O
alternative	O	O	O	O
splicing	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
TCF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
protein	O	O	O	O
was	O	O	O	O
detectable	O	O	O	O
in	O	O	O	O
all	O	O	O	O
samples	O	O	O	O
of	O	O	O	O
a	O	O	O	O
set	O	O	O	O
of	O	O	O	O
22	O	O	O	O
T	B-cell_type	O	O	O
-	I-cell_type	O	O	O
cell	I-cell_type	O	O	O
malignancies	I-cell_type	O	O	O
of	O	O	O	O
various	O	O	O	O
stages	O	O	O	O
of	O	O	O	O
maturation	O	O	O	O
,	O	O	O	O
but	O	O	O	O
was	O	O	O	O
absent	O	O	O	O
from	O	O	O	O
a	O	O	O	O
large	O	O	O	O
number	O	O	O	O
of	O	O	O	O
other	O	O	O	O
hematologic	B-cell_type	O	O	O
neoplasms	I-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

These	O	O	O	O
observations	O	O	O	O
imply	O	O	O	O
a	O	O	O	O
T	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
-	O	O	O	O
specific	O	O	O	O
function	O	O	O	O
for	O	O	O	O
TCF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
a	O	O	O	O
notion	O	O	O	O
corroborated	O	O	O	O
by	O	O	O	O
recent	O	O	O	O
observations	O	O	O	O
on	O	O	O	O
Tcf	O	O	O	O
-	O	O	O	O
1	O	O	O	O
knock	O	O	O	O
-	O	O	O	O
out	O	O	O	O
mice	O	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
addition	O	O	O	O
,	O	O	O	O
these	O	O	O	O
results	O	O	O	O
indicate	O	O	O	O
that	O	O	O	O
nuclear	O	O	O	O
TCF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
expression	O	O	O	O
can	O	O	O	O
serve	O	O	O	O
as	O	O	O	O
a	O	O	O	O
pan	O	O	O	O
-	O	O	O	O
T	O	O	O	O
-	O	O	O	O
lineage	O	O	O	O
marker	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
diagnosis	O	O	O	O
of	O	O	O	O
lymphoid	O	O	O	O
malignancies	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Cross	O	O	O	O
-	O	O	O	O
linking	O	O	O	O
of	O	O	O	O
Fc	B-protein	O	O	O
gamma	I-protein	O	O	O
receptors	I-protein	O	O	O
activates	O	O	O	O
HIV	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
1	I-DNA	O	O	O
long	I-DNA	O	O	O
terminal	I-DNA	O	O	O
repeat	I-DNA	O	O	O
-	O	O	O	O
driven	O	O	O	O
transcription	O	O	O	O
in	O	O	O	O
human	B-cell_type	O	O	O
monocytes	I-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

Elevation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
levels	O	O	O	O
of	O	O	O	O
circulating	B-protein	O	O	O
immune	I-protein	O	O	O
complexes	I-protein	O	O	O
frequently	O	O	O	O
accompanies	O	O	O	O
HIV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
1	O	O	O	O
infection	O	O	O	O
and	O	O	O	O
is	O	O	O	O
a	O	O	O	O
prognostic	O	O	O	O
indicator	O	O	O	O
of	O	O	O	O
clinical	O	O	O	O
progression	O	O	O	O
from	O	O	O	O
asymptomatic	O	O	O	O
infection	O	O	O	O
to	O	O	O	O
AIDS	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Here	O	O	O	O
we	O	O	O	O
report	O	O	O	O
that	O	O	O	O
cross	O	O	O	O
-	O	O	O	O
linking	O	O	O	O
of	O	O	O	O
Fc	B-protein	O	O	O
gamma	I-protein	O	O	O
RI	I-protein	O	O	O
or	O	O	O	O
Fc	B-protein	O	O	O
gamma	I-protein	O	O	O
RII	I-protein	O	O	O
by	O	O	O	O
adherent	B-protein	O	O	O
human	I-protein	O	O	O
IgG	I-protein	O	O	O
or	O	O	O	O
by	O	O	O	O
specific	O	O	O	O
anti	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
Fc	I-protein	O	O	O
gamma	I-protein	O	O	O
R	I-protein	O	O	O
mAb	I-protein	O	O	O
activates	O	O	O	O
HIV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
1	O	O	O	O
gene	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
human	B-cell_line	O	O	O
monocytic	I-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
line	I-cell_line	O	O	O
BF24	B-cell_line	O	O	O
and	O	O	O	O
increased	O	O	O	O
HIV	B-RNA	O	O	O
RNA	I-RNA	O	O	O
expression	O	O	O	O
in	O	O	O	O
monocytes	B-cell_type	O	O	O
from	O	O	O	O
HIV	O	O	O	O
infected	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
as	O	O	O	O
assayed	O	O	O	O
by	O	O	O	O
reverse	O	O	O	O
transcription	O	O	O	O
-	O	O	O	O
PCR	O	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
THP	B-cell_line	B-cell_line	O	O
-	I-cell_line	I-cell_line	O	O
1	I-cell_line	I-cell_line	O	O
cells	O	I-cell_line	O	O
,	O	O	O	O
Fc	B-protein	O	O	O
gamma	I-protein	O	O	O
R	I-protein	O	O	O
cross	O	O	O	O
-	O	O	O	O
linking	O	O	O	O
induced	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
which	O	O	O	O
is	O	O	O	O
known	O	O	O	O
to	O	O	O	O
bind	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
regulatory	B-DNA	O	O	O
region	I-DNA	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
long	B-DNA	O	O	O
terminal	I-DNA	O	O	O
repeat	I-DNA	O	O	O
(	O	O	O	O
LTR	B-DNA	O	O	O
)	O	O	O	O
of	O	O	O	O
HIV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
1	O	O	O	O
and	O	O	O	O
to	O	O	O	O
activate	O	O	O	O
HIV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
1	O	O	O	O
transcription	O	O	O	O
.	O	O	O	O
Anti	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
TNF	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
antibody	I-protein	O	O	O
but	O	O	O	O
not	O	O	O	O
anti	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
IL	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
beta	I-protein	O	O	O
antibody	I-protein	O	O	O
strongly	O	O	O	O
inhibited	O	O	O	O
both	O	O	O	O
the	O	O	O	O
induction	O	O	O	O
of	O	O	O	O
HIV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
1	O	O	O	O
-	O	O	O	O
LTR	B-DNA	O	O	O
-	O	O	O	O
driven	O	O	O	O
transcription	O	O	O	O
and	O	O	O	O
the	O	O	O	O
induction	O	O	O	O
of	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
by	O	O	O	O
Fc	B-protein	O	O	O
gamma	I-protein	O	O	O
R	I-protein	O	O	O
cross	O	O	O	O
-	O	O	O	O
linking	O	O	O	O
.	O	O	O	O

These	O	O	O	O
results	O	O	O	O
indicate	O	O	O	O
that	O	O	O	O
Fc	B-protein	O	O	O
gamma	I-protein	O	O	O
R	I-protein	O	O	O
can	O	O	O	O
mediate	O	O	O	O
a	O	O	O	O
TNF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
-	O	O	O	O
dependent	O	O	O	O
induction	O	O	O	O
of	O	O	O	O
HIV	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
1	I-DNA	O	O	O
gene	I-DNA	O	O	O
transcription	O	O	O	O
and	O	O	O	O
suggest	O	O	O	O
that	O	O	O	O
immune	B-protein	O	O	O
complexes	I-protein	O	O	O
may	O	O	O	O
contribute	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
pathophysiology	O	O	O	O
of	O	O	O	O
HIV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
1	O	O	O	O
infection	O	O	O	O
by	O	O	O	O
augmenting	O	O	O	O
viral	O	O	O	O
replication	O	O	O	O
in	O	O	O	O
monocytes	B-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

Signalling	O	O	O	O
via	O	O	O	O
CD28	B-protein	O	O	O
of	O	O	O	O
human	B-cell_line	O	O	O
naive	I-cell_line	O	O	O
neonatal	I-cell_line	O	O	O
T	I-cell_line	O	O	O
lymphocytes	I-cell_line	O	O	O
.	O	O	O	O

Accessory	O	O	O	O
molecules	O	O	O	O
play	O	O	O	O
a	O	O	O	O
crucial	O	O	O	O
role	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
development	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
T	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
response	O	O	O	O
to	O	O	O	O
antigenic	O	O	O	O
challenge	O	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
have	O	O	O	O
examined	O	O	O	O
the	O	O	O	O
role	O	O	O	O
of	O	O	O	O
CD28	B-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
modulating	O	O	O	O
the	O	O	O	O
'	O	O	O	O
naive	O	O	O	O
'	O	O	O	O
neonatal	O	O	O	O
T	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
response	O	O	O	O
to	O	O	O	O
anti	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
CD2	I-protein	O	O	O
-	O	O	O	O
mediated	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
.	O	O	O	O

To	O	O	O	O
compare	O	O	O	O
the	O	O	O	O
role	O	O	O	O
of	O	O	O	O
CD28	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
neonatal	B-cell_type	O	O	O
and	O	O	O	O
adult	O	B-cell_type	O	O
T	B-cell_type	I-cell_type	O	O
cells	I-cell_type	I-cell_type	O	O
were	O	O	O	O
stimulated	O	O	O	O
with	O	O	O	O
a	O	O	O	O
pair	O	O	O	O
of	O	O	O	O
mitogenic	B-protein	O	O	O
anti	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
CD2	I-protein	O	O	O
antibodies	I-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
presence	O	O	O	O
or	O	O	O	O
absence	O	O	O	O
of	O	O	O	O
anti	O	B-protein	O	O
-	O	I-protein	O	O
CD28	B-protein	I-protein	O	O
MoAb	O	I-protein	O	O
.	O	O	O	O

With	O	O	O	O
anti	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
CD2	I-protein	O	O	O
alone	O	O	O	O
,	O	O	O	O
neonatal	B-cell_type	O	O	O
T	I-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
proliferated	O	O	O	O
slightly	O	O	O	O
but	O	O	O	O
produced	O	O	O	O
no	O	O	O	O
detectable	O	O	O	O
IL	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
whereas	O	O	O	O
adult	O	O	O	O
T	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
proliferated	O	O	O	O
vigorously	O	O	O	O
,	O	O	O	O
with	O	O	O	O
significant	O	O	O	O
IL	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
production	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Costimulation	O	O	O	O
with	O	O	O	O
anti	O	B-protein	O	O
-	O	I-protein	O	O
CD28	B-protein	I-protein	O	O
MoAb	O	I-protein	O	O
greatly	O	O	O	O
enhanced	O	O	O	O
the	O	O	O	O
proliferative	O	O	O	O
response	O	O	O	O
of	O	O	O	O
neonatal	O	B-cell_type	O	O
T	B-cell_type	I-cell_type	O	O
cells	I-cell_type	I-cell_type	O	O
to	O	O	O	O
levels	O	O	O	O
equivalent	O	O	O	O
to	O	O	O	O
those	O	O	O	O
of	O	O	O	O
adult	O	B-cell_type	O	O
T	B-cell_type	I-cell_type	O	O
cells	I-cell_type	I-cell_type	O	O
,	O	O	O	O
whereas	O	O	O	O
adult	O	B-cell_type	O	O
T	B-cell_type	I-cell_type	O	O
cells	I-cell_type	I-cell_type	O	O
showed	O	O	O	O
only	O	O	O	O
slight	O	O	O	O
increases	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Although	O	O	O	O
IL	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
secretion	O	O	O	O
was	O	O	O	O
increased	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
presence	O	O	O	O
of	O	O	O	O
anti	O	B-protein	O	O
-	O	I-protein	O	O
CD28	B-protein	I-protein	O	O
MoAb	O	I-protein	O	O
,	O	O	O	O
neonatal	B-cell_type	O	O	O
T	I-cell_type	O	O	O
cell	I-cell_type	O	O	O
IL	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
production	O	O	O	O
remained	O	O	O	O
lower	O	O	O	O
than	O	O	O	O
in	O	O	O	O
adults	O	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
contrast	O	O	O	O
,	O	O	O	O
enhancement	O	O	O	O
of	O	O	O	O
IL	B-protein	B-RNA	O	O
-	I-protein	I-RNA	O	O
2	I-protein	I-RNA	O	O
mRNA	O	I-RNA	O	O
expression	O	O	O	O
in	O	O	O	O
neonates	O	O	O	O
was	O	O	O	O
similar	O	O	O	O
to	O	O	O	O
adult	O	O	O	O
levels	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Anti	O	O	O	O
-	O	O	O	O
CD28	B-protein	B-protein	O	O
MoAb	O	I-protein	O	O
costimulation	O	O	O	O
increased	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
levels	O	O	O	O
in	O	O	O	O
neonates	O	O	O	O
,	O	O	O	O
albeit	O	O	O	O
to	O	O	O	O
levels	O	O	O	O
lower	O	O	O	O
than	O	O	O	O
that	O	O	O	O
of	O	O	O	O
adults	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
cellular	O	O	O	O
mechanism	O	O	O	O
governing	O	O	O	O
the	O	O	O	O
diminished	O	O	O	O
proliferative	O	O	O	O
response	O	O	O	O
of	O	O	O	O
neonatal	B-cell_type	O	O	O
T	I-cell_type	O	O	O
lymphocytes	I-cell_type	O	O	O
to	O	O	O	O
anti	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
CD2	I-protein	O	O	O
may	O	O	O	O
therefore	O	O	O	O
be	O	O	O	O
due	O	O	O	O
to	O	O	O	O
decreased	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
induction	O	O	O	O
,	O	O	O	O
reduced	O	O	O	O
IL	B-protein	B-RNA	O	O
-	I-protein	I-RNA	O	O
2	I-protein	I-RNA	O	O
mRNA	O	I-RNA	O	O
expression	O	O	O	O
and	O	O	O	O
deficient	O	O	O	O
IL	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
production	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Although	O	O	O	O
anti	O	B-protein	O	O
-	O	I-protein	O	O
CD28	B-protein	I-protein	O	O
MoAb	O	I-protein	O	O
costimulation	O	O	O	O
enhances	O	O	O	O
all	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
above	O	O	O	O
signals	O	O	O	O
,	O	O	O	O
NF	O	O	O	O
kappa	O	O	O	O
B	O	O	O	O
and	O	O	O	O
IL	O	O	O	O
-	O	O	O	O
2	O	O	O	O
levels	O	O	O	O
remain	O	O	O	O
lower	O	O	O	O
than	O	O	O	O
in	O	O	O	O
adults	O	O	O	O
,	O	O	O	O
suggesting	O	O	O	O
the	O	O	O	O
need	O	O	O	O
for	O	O	O	O
further	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
requirements	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
neonate	O	O	O	O
.	O	O	O	O

TCL1	O	O	O	O
oncogene	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
in	O	O	O	O
preleukemic	O	B-cell_type	O	O
T	B-cell_type	I-cell_type	O	O
cells	I-cell_type	I-cell_type	O	O
from	O	O	O	O
a	O	O	O	O
case	O	O	O	O
of	O	O	O	O
ataxia	O	O	O	O
-	O	O	O	O
telangiectasia	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
TCL1	B-DNA	O	O	O
oncogene	I-DNA	O	O	O
on	O	O	O	O
human	B-DNA	O	O	O
chromosome	I-DNA	O	O	O
14q32	B-DNA	O	O	O
.	I-DNA	O	O	O
1	I-DNA	O	O	O
is	O	O	O	O
involved	O	O	O	O
in	O	O	O	O
chromosome	O	O	O	O
translocations	O	O	O	O
[	O	O	O	O
t	B-DNA	O	O	O
(	I-DNA	O	O	O
14	I-DNA	O	O	O
;	I-DNA	O	O	O
14	I-DNA	O	O	O
)	I-DNA	O	O	O
(	I-DNA	O	O	O
q11	I-DNA	O	O	O
;	I-DNA	O	O	O
q32	I-DNA	O	O	O
.	I-DNA	O	O	O
1	I-DNA	O	O	O
)	I-DNA	O	O	O
and	O	O	O	O
t	B-DNA	O	O	O
(	I-DNA	O	O	O
7	I-DNA	O	O	O
;	I-DNA	O	O	O
14	I-DNA	O	O	O
)	I-DNA	O	O	O
(	I-DNA	O	O	O
q35	I-DNA	O	O	O
;	I-DNA	O	O	O
q32	I-DNA	O	O	O
.	I-DNA	O	O	O
1	I-DNA	O	O	O
)	I-DNA	O	O	O
]	O	O	O	O
and	O	O	O	O
inversions	O	O	O	O
[	O	O	O	O
inv14	B-DNA	O	O	O
(	I-DNA	O	O	O
q11	I-DNA	O	O	O
;	I-DNA	O	O	O
q32	I-DNA	O	O	O
.	I-DNA	O	O	O
1	I-DNA	O	O	O
)	I-DNA	O	O	O
]	O	O	O	O
with	O	O	O	O
TCR	B-DNA	O	O	O
alpha	I-DNA	O	O	O
/	I-DNA	O	O	O
beta	I-DNA	O	O	O
loci	I-DNA	O	O	O
in	O	O	O	O
T	O	O	O	O
-	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
leukemias	O	O	O	O
,	O	O	O	O
such	O	O	O	O
as	O	O	O	O
T	O	O	O	O
-	O	O	O	O
prolymphocytic	O	O	O	O
(	O	O	O	O
T	O	O	O	O
-	O	O	O	O
PLL	O	O	O	O
)	O	O	O	O
.	O	O	O	O

It	O	O	O	O
is	O	O	O	O
also	O	O	O	O
involved	O	O	O	O
in	O	O	O	O
T	O	O	O	O
-	O	O	O	O
acute	O	O	O	O
and	O	O	O	O
-	O	O	O	O
chronic	O	O	O	O
leukemias	O	O	O	O
arising	O	O	O	O
in	O	O	O	O
cases	O	O	O	O
of	O	O	O	O
ataxia	O	O	O	O
-	O	O	O	O
telangiectasia	O	O	O	O
(	O	O	O	O
AT	O	O	O	O
)	O	O	O	O
,	O	O	O	O
an	O	O	O	O
immunodeficiency	O	O	O	O
syndrome	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Similar	O	O	O	O
chromosomal	O	O	O	O
rearrangements	O	O	O	O
occur	O	O	O	O
also	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
clonally	O	O	O	O
expanded	O	O	O	O
T	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
in	O	O	O	O
AT	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
before	O	O	O	O
the	O	O	O	O
appearance	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
overt	O	O	O	O
leukemia	O	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
have	O	O	O	O
analyzed	O	O	O	O
the	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
TCL1	B-RNA	O	O	O
mRNA	I-RNA	O	O	O
and	O	O	O	O
protein	B-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
peripheral	B-cell_type	O	O	O
blood	I-cell_type	O	O	O
lymphocytes	I-cell_type	O	O	O
(	O	O	O	O
PBLs	B-cell_type	O	O	O
)	O	O	O	O
from	O	O	O	O
four	O	O	O	O
AT	O	O	O	O
cases	O	O	O	O
and	O	O	O	O
from	O	O	O	O
healthy	O	O	O	O
controls	O	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
found	O	O	O	O
that	O	O	O	O
the	O	O	O	O
TCL1	B-DNA	O	O	O
gene	I-DNA	O	O	O
was	O	O	O	O
overexpressed	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
PBLs	B-cell_type	O	O	O
of	O	O	O	O
an	O	O	O	O
AT	O	O	O	O
patient	O	O	O	O
with	O	O	O	O
a	O	O	O	O
large	B-cell_line	O	O	O
clonal	I-cell_line	O	O	O
T	I-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
population	I-cell_line	O	O	O
exhibiting	O	O	O	O
the	O	O	O	O
t	O	O	O	O
(	O	O	O	O
14	O	O	O	O
;	O	O	O	O
14	O	O	O	O
)	O	O	O	O
translocation	O	O	O	O
but	O	O	O	O
not	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
lymphocytes	B-cell_type	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
other	O	O	O	O
cases	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Fluorescence	O	O	O	O
in	O	O	O	O
situ	O	O	O	O
hybridization	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
TCL1	B-DNA	O	O	O
genomic	I-DNA	O	O	O
locus	I-DNA	O	O	O
to	O	O	O	O
lymphocyte	O	O	O	O
metaphases	O	O	O	O
from	O	O	O	O
the	O	O	O	O
AT	O	O	O	O
patient	O	O	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
T	O	O	O	O
-	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
clonal	O	O	O	O
expansion	O	O	O	O
showed	O	O	O	O
that	O	O	O	O
the	O	O	O	O
breakpoint	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
t	O	O	O	O
(	O	O	O	O
14	O	O	O	O
;	O	O	O	O
14	O	O	O	O
)	O	O	O	O
translocation	O	O	O	O
lies	O	O	O	O
within	O	O	O	O
the	O	O	O	O
TCL1	B-DNA	O	O	O
locus	I-DNA	O	O	O
and	O	O	O	O
is	O	O	O	O
accompanied	O	O	O	O
by	O	O	O	O
an	O	O	O	O
inverted	B-DNA	O	O	O
duplication	I-DNA	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
distal	B-DNA	O	O	O
part	I-DNA	O	O	O
of	O	O	O	O
chromosome	B-DNA	O	O	O
14	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

These	O	O	O	O
data	O	O	O	O
indicate	O	O	O	O
that	O	O	O	O
TCL1	B-DNA	O	O	O
is	O	O	O	O
activated	O	O	O	O
in	O	O	O	O
preleukemic	B-cell_line	O	O	O
clonal	I-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
as	O	O	O	O
a	O	O	O	O
consequence	O	O	O	O
of	O	O	O	O
chromosome	O	O	O	O
translocation	O	O	O	O
involving	O	O	O	O
sequences	O	O	O	O
from	O	O	O	O
the	O	O	O	O
TCR	B-DNA	O	O	O
locus	I-DNA	O	O	O
at	O	O	O	O
14q11	B-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

Deregulation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
TCL1	B-DNA	O	O	O
is	O	O	O	O
the	O	O	O	O
first	O	O	O	O
event	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
initiation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
malignancy	O	O	O	O
in	O	O	O	O
these	O	O	O	O
types	O	O	O	O
of	O	O	O	O
leukemias	O	O	O	O
and	O	O	O	O
represents	O	O	O	O
a	O	O	O	O
potential	O	O	O	O
tool	O	O	O	O
for	O	O	O	O
clinical	O	O	O	O
evaluation	O	O	O	O
.	O	O	O	O

C	B-protein	O	O	O
/	I-protein	O	O	O
EBP	I-protein	O	O	O
proteins	I-protein	O	O	O
activate	O	O	O	O
transcription	O	O	O	O
from	O	O	O	O
the	O	O	O	O
human	B-DNA	O	O	O
immunodeficiency	I-DNA	O	O	O
virus	I-DNA	O	O	O
type	I-DNA	O	O	O
1	I-DNA	O	O	O
long	I-DNA	O	O	O
terminal	I-DNA	O	O	O
repeat	I-DNA	O	O	O
in	O	O	O	O
macrophages	O	O	O	O
/	O	O	O	O
monocytes	B-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

Three	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
sites	O	O	O	O
for	O	O	O	O
C	B-protein	O	O	O
/	I-protein	O	O	O
EBP	I-protein	O	O	O
proteins	I-protein	O	O	O
are	O	O	O	O
found	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
human	B-DNA	O	O	O
immunodeficiency	I-DNA	O	O	O
virus	I-DNA	O	O	O
type	I-DNA	O	O	O
1	I-DNA	O	O	O
(	I-DNA	O	O	O
HIV	I-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
1	I-DNA	O	O	O
)	I-DNA	O	O	O
long	I-DNA	O	O	O
terminal	I-DNA	O	O	O
repeat	I-DNA	O	O	O
(	O	O	O	O
LTR	B-DNA	O	O	O
)	O	O	O	O
(	O	O	O	O
V	O	O	O	O
.	O	O	O	O
M	O	O	O	O
.	O	O	O	O
Tesmer	O	O	O	O
,	O	O	O	O
A	O	O	O	O
.	O	O	O	O
Rajadhyaksha	O	O	O	O
,	O	O	O	O
J	O	O	O	O
.	O	O	O	O
Babin	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
M	O	O	O	O
.	O	O	O	O
Bina	O	O	O	O
,	O	O	O	O
Proc	O	O	O	O
.	O	O	O	O
Natl	O	O	O	O
.	O	O	O	O
Acad	O	O	O	O
.	O	O	O	O
Sci	O	O	O	O
.	O	O	O	O
USA	O	O	O	O
90	O	O	O	O
:	O	O	O	O
7298	O	O	O	O
-	O	O	O	O
7302	O	O	O	O
,	O	O	O	O
1993	O	O	O	O
)	O	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
have	O	O	O	O
determined	O	O	O	O
the	O	O	O	O
functional	O	O	O	O
role	O	O	O	O
of	O	O	O	O
C	B-protein	O	O	O
/	I-protein	O	O	O
EBP	I-protein	O	O	O
proteins	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
C	B-DNA	O	O	O
/	I-DNA	O	O	O
EBP	I-DNA	O	O	O
sites	I-DNA	O	O	O
in	O	O	O	O
regulating	O	O	O	O
transcription	O	O	O	O
from	O	O	O	O
the	O	O	O	O
HIV	O	B-DNA	O	O
-	O	I-DNA	O	O
1	O	I-DNA	O	O
LTR	B-DNA	I-DNA	O	O
in	O	O	O	O
monocytes	B-cell_type	B-cell_type	O	O
/	O	I-cell_type	O	O
macrophages	O	I-cell_type	O	O
.	O	O	O	O

Inhibition	O	O	O	O
of	O	O	O	O
endogenous	O	B-protein	O	O
C	B-protein	I-protein	O	O
/	I-protein	I-protein	O	O
EBP	I-protein	I-protein	O	O
proteins	I-protein	I-protein	O	O
,	O	O	O	O
using	O	O	O	O
either	O	O	O	O
an	O	O	O	O
excess	O	O	O	O
of	O	O	O	O
C	B-DNA	O	O	O
/	I-DNA	O	O	O
EBP	I-DNA	O	O	O
binding	I-DNA	O	O	O
sites	I-DNA	O	O	O
or	O	O	O	O
a	O	O	O	O
trans	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
dominant	I-DNA	O	O	O
negative	I-DNA	O	O	O
inhibitor	I-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
demonstrated	O	O	O	O
that	O	O	O	O
C	B-protein	O	O	O
/	I-protein	O	O	O
EBP	I-protein	O	O	O
proteins	I-protein	O	O	O
are	O	O	O	O
required	O	O	O	O
for	O	O	O	O
basal	O	O	O	O
and	O	O	O	O
activated	O	O	O	O
levels	O	O	O	O
of	O	O	O	O
HIV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
1	O	O	O	O
LTR	B-DNA	O	O	O
transcription	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
promonocytic	B-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
line	I-cell_line	O	O	O
U937	I-cell_line	O	O	O
.	O	O	O	O

Northern	O	O	O	O
(	O	O	O	O
RNA	O	O	O	O
)	O	O	O	O
blots	O	O	O	O
and	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
assays	O	O	O	O
showed	O	O	O	O
that	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
IL6	I-protein	O	O	O
is	O	O	O	O
the	O	O	O	O
only	O	O	O	O
known	O	O	O	O
C	B-protein	O	O	O
/	I-protein	O	O	O
EBP	I-protein	O	O	O
family	I-protein	O	O	O
member	I-protein	O	O	O
which	O	O	O	O
is	O	O	O	O
increased	O	O	O	O
when	O	O	O	O
U937	B-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
are	O	O	O	O
activated	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Mutational	O	O	O	O
analyses	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
HIV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
1	O	O	O	O
LTR	B-DNA	O	O	O
showed	O	O	O	O
that	O	O	O	O
one	O	O	O	O
C	B-DNA	O	O	O
/	I-DNA	O	O	O
EBP	I-DNA	O	O	O
site	I-DNA	O	O	O
is	O	O	O	O
required	O	O	O	O
for	O	O	O	O
normal	O	O	O	O
LTR	B-DNA	O	O	O
transcription	O	O	O	O
both	O	O	O	O
before	O	O	O	O
and	O	O	O	O
after	O	O	O	O
cellular	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
and	O	O	O	O
that	O	O	O	O
the	O	O	O	O
two	O	O	O	O
3	O	O	O	O
'	O	O	O	O
C	B-DNA	O	O	O
/	I-DNA	O	O	O
EBP	I-DNA	O	O	O
sites	I-DNA	O	O	O
are	O	O	O	O
functionally	O	O	O	O
equivalent	O	O	O	O
.	O	O	O	O

However	O	O	O	O
,	O	O	O	O
transcription	O	O	O	O
from	O	O	O	O
crippled	O	B-DNA	O	O
HIV	O	I-DNA	O	O
-	O	I-DNA	O	O
1	O	I-DNA	O	O
LTRs	B-DNA	I-DNA	O	O
lacking	O	O	O	O
C	B-DNA	O	O	O
/	I-DNA	O	O	O
EBP	I-DNA	O	O	O
sites	I-DNA	O	O	O
can	O	O	O	O
still	O	O	O	O
be	O	O	O	O
induced	O	O	O	O
following	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
U937	B-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
.	O	O	O	O

Several	O	O	O	O
models	O	O	O	O
are	O	O	O	O
suggested	O	O	O	O
for	O	O	O	O
how	O	O	O	O
elevated	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
IL6	I-protein	O	O	O
may	O	O	O	O
participate	O	O	O	O
in	O	O	O	O
an	O	O	O	O
autostimulatory	O	O	O	O
loop	O	O	O	O
involving	O	O	O	O
HIV	O	O	O	O
infection	O	O	O	O
,	O	O	O	O
macrophage	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
,	O	O	O	O
cytokine	B-protein	O	O	O
expression	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
HIV	O	O	O	O
replication	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Human	O	O	O	O
immunodeficiency	O	O	O	O
virus	O	O	O	O
type	O	O	O	O
-	O	O	O	O
2	O	O	O	O
gene	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
:	O	O	O	O
two	O	O	O	O
enhancers	B-DNA	O	O	O
and	O	O	O	O
their	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
by	O	O	O	O
T	B-cell_type	O	O	O
-	I-cell_type	O	O	O
cell	I-cell_type	O	O	O
activators	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
human	O	O	O	O
immunodeficiency	O	O	O	O
viruses	O	O	O	O
(	O	O	O	O
HIVs	O	O	O	O
)	O	O	O	O
may	O	O	O	O
include	O	O	O	O
a	O	O	O	O
spectrum	O	O	O	O
of	O	O	O	O
retroviruses	O	O	O	O
with	O	O	O	O
varying	O	O	O	O
potential	O	O	O	O
to	O	O	O	O
infect	O	O	O	O
their	O	O	O	O
host	O	O	O	O
,	O	O	O	O
undergo	O	O	O	O
long	O	O	O	O
periods	O	O	O	O
of	O	O	O	O
latent	O	O	O	O
infection	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
induce	O	O	O	O
pathology	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Since	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
viruses	O	O	O	O
is	O	O	O	O
in	O	O	O	O
large	O	O	O	O
part	O	O	O	O
regulated	O	O	O	O
by	O	O	O	O
the	O	O	O	O
sequence	B-DNA	O	O	O
elements	I-DNA	O	O	O
in	O	O	O	O
their	O	O	O	O
long	B-DNA	O	O	O
terminal	I-DNA	O	O	O
repeats	I-DNA	O	O	O
(	O	O	O	O
LTRs	B-DNA	O	O	O
)	O	O	O	O
,	O	O	O	O
this	O	O	O	O
study	O	O	O	O
was	O	O	O	O
directed	O	O	O	O
to	O	O	O	O
an	O	O	O	O
analysis	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
regulatory	B-DNA	O	O	O
elements	I-DNA	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
HIV	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
2	I-DNA	O	O	O
LTR	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
HIV	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
2	I-DNA	O	O	O
LTR	I-DNA	O	O	O
was	O	O	O	O
found	O	O	O	O
to	O	O	O	O
contain	O	O	O	O
two	O	O	O	O
enhancers	B-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

One	O	O	O	O
of	O	O	O	O
these	O	O	O	O
enhancers	B-DNA	O	O	O
is	O	O	O	O
,	O	O	O	O
in	O	O	O	O
part	O	O	O	O
,	O	O	O	O
identical	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
HIV	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
1	I-DNA	O	O	O
enhancer	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

This	O	O	O	O
enhancer	B-DNA	O	O	O
in	O	O	O	O
HIV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
1	O	O	O	O
is	O	O	O	O
the	O	O	O	O
T	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
cell	I-DNA	O	O	O
activation	I-DNA	O	O	O
response	I-DNA	O	O	O
element	I-DNA	O	O	O
;	O	O	O	O
in	O	O	O	O
HIV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
2	O	O	O	O
,	O	O	O	O
however	O	O	O	O
,	O	O	O	O
it	O	O	O	O
is	O	O	O	O
the	O	O	O	O
second	B-DNA	O	O	O
enhancer	I-DNA	O	O	O
that	O	O	O	O
is	O	O	O	O
mainly	O	O	O	O
responsible	O	O	O	O
for	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
in	O	O	O	O
response	O	O	O	O
to	O	O	O	O
T	O	O	O	O
-	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
activators	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
second	O	O	O	O
enhancer	B-DNA	O	O	O
interacts	O	O	O	O
with	O	O	O	O
two	O	O	O	O
nuclear	B-protein	O	O	O
binding	I-protein	O	O	O
proteins	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
85	O	O	O	O
kD	O	O	O	O
and	O	O	O	O
27	O	O	O	O
kD	O	O	O	O
mobility	O	O	O	O
)	O	O	O	O
that	O	O	O	O
appear	O	O	O	O
to	O	O	O	O
be	O	O	O	O
required	O	O	O	O
for	O	O	O	O
optimal	O	O	O	O
enhancer	O	O	O	O
function	O	O	O	O
and	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Observations	O	O	O	O
such	O	O	O	O
as	O	O	O	O
these	O	O	O	O
encourage	O	O	O	O
the	O	O	O	O
speculation	O	O	O	O
that	O	O	O	O
there	O	O	O	O
may	O	O	O	O
be	O	O	O	O
subtle	O	O	O	O
differences	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
regulation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
HIV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
1	O	O	O	O
and	O	O	O	O
HIV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
2	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
that	O	O	O	O
may	O	O	O	O
be	O	O	O	O
relevant	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
possible	O	O	O	O
longer	O	O	O	O
latency	O	O	O	O
and	O	O	O	O
reduced	O	O	O	O
pathogenicity	O	O	O	O
of	O	O	O	O
HIV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
2	O	O	O	O
.	O	O	O	O

NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
M	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
chicken	B-protein	O	O	O
C	I-protein	O	O	O
/	I-protein	O	O	O
EBP	I-protein	O	O	O
beta	I-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
induces	O	O	O	O
eosinophilic	O	O	O	O
differentiation	O	O	O	O
and	O	O	O	O
apoptosis	O	O	O	O
in	O	O	O	O
a	O	O	O	O
hematopoietic	B-cell_line	O	O	O
progenitor	I-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
line	I-cell_line	O	O	O
.	O	O	O	O

CAAT	B-DNA	B-protein	O	O
/	I-DNA	I-protein	O	O
enhancer	I-DNA	I-protein	O	O
binding	O	I-protein	O	O
proteins	O	I-protein	O	O
(	O	O	O	O
C	B-protein	O	O	O
/	I-protein	O	O	O
EBPs	I-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
are	O	O	O	O
transcriptional	O	O	O	O
activators	O	O	O	O
implicated	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
differentiation	O	O	O	O
processes	O	O	O	O
of	O	O	O	O
various	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
lineages	O	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
have	O	O	O	O
shown	O	O	O	O
earlier	O	O	O	O
that	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
M	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
chicken	B-protein	O	O	O
homolog	I-protein	O	O	O
of	O	O	O	O
C	B-protein	O	O	O
/	I-protein	O	O	O
EBP	I-protein	O	O	O
beta	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
is	O	O	O	O
specifically	O	O	O	O
expressed	O	O	O	O
in	O	O	O	O
myelomonocytic	O	O	O	O
and	O	O	O	O
eosinophilic	O	O	O	O
cells	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
hematopoietic	O	O	O	O
system	O	O	O	O
.	O	O	O	O

To	O	O	O	O
investigate	O	O	O	O
the	O	O	O	O
role	O	O	O	O
of	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
M	I-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
hematopoietic	B-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
lineage	I-cell_line	O	O	O
commitment	O	O	O	O
,	O	O	O	O
we	O	O	O	O
constructed	O	O	O	O
a	O	O	O	O
conditional	O	O	O	O
form	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
protein	O	O	O	O
by	O	O	O	O
fusing	O	O	O	O
it	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
hormone	B-protein	O	O	O
binding	I-protein	O	O	O
domain	I-protein	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
human	B-protein	O	O	O
estrogen	I-protein	O	O	O
receptor	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

This	O	O	O	O
construct	O	O	O	O
was	O	O	O	O
stably	O	O	O	O
expressed	O	O	O	O
in	O	O	O	O
a	O	O	O	O
multipotent	B-cell_line	O	O	O
progenitor	I-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
line	I-cell_line	O	O	O
transformed	O	O	O	O
by	O	O	O	O
the	O	O	O	O
Myb	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
Ets	I-protein	O	O	O
oncoprotein	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
report	O	O	O	O
here	O	O	O	O
that	O	O	O	O
both	O	O	O	O
NF	B-protein	B-DNA	O	O
-	I-protein	I-DNA	O	O
M	I-protein	I-DNA	O	O
-	O	I-DNA	O	O
dependent	O	I-DNA	O	O
promoter	O	I-DNA	O	O
constructs	O	I-DNA	O	O
and	O	O	O	O
resident	O	O	O	O
genes	O	O	O	O
could	O	O	O	O
be	O	O	O	O
activated	O	O	O	O
by	O	O	O	O
addition	O	O	O	O
of	O	O	O	O
beta	O	O	O	O
-	O	O	O	O
estradiol	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
NF	B-protein	B-protein	B-cell_line	O
-	I-protein	I-protein	I-cell_line	O
M	I-protein	I-protein	I-cell_line	O
-	O	I-protein	I-cell_line	O
estrogen	O	I-protein	I-cell_line	O
receptor	O	I-protein	I-cell_line	O
expressing	O	O	I-cell_line	O
progenitors	O	O	I-cell_line	O
.	O	O	O	O

At	O	O	O	O
the	O	O	O	O
same	O	O	O	O
time	O	O	O	O
,	O	O	O	O
we	O	O	O	O
observed	O	O	O	O
a	O	O	O	O
down	O	O	O	O
-	O	O	O	O
regulation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
progenitor	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
specific	I-protein	O	O	O
surface	I-protein	O	O	O
markers	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
the	O	O	O	O
up	O	O	O	O
-	O	O	O	O
regulation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
differentiation	B-protein	O	O	O
markers	I-protein	O	O	O
restricted	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
eosinophil	B-cell_type	O	O	O
and	O	O	O	O
myeloid	B-cell_type	O	O	O
lineages	I-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
addition	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
onset	O	O	O	O
of	O	O	O	O
differentiation	O	O	O	O
,	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
death	O	O	O	O
was	O	O	O	O
induced	O	O	O	O
with	O	O	O	O
typical	O	O	O	O
apoptotic	O	O	O	O
features	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Our	O	O	O	O
results	O	O	O	O
suggest	O	O	O	O
that	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
M	I-protein	O	O	O
plays	O	O	O	O
an	O	O	O	O
important	O	O	O	O
role	O	O	O	O
in	O	O	O	O
commitment	O	O	O	O
along	O	O	O	O
the	O	O	O	O
eosinophil	B-cell_type	O	O	O
lineage	I-cell_type	O	O	O
and	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
induction	O	O	O	O
of	O	O	O	O
apoptosis	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Prolactin	B-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
interleukin	B-protein	B-protein	O	O
-	I-protein	I-protein	O	O
2	I-protein	I-protein	O	O
receptors	O	I-protein	O	O
in	O	O	O	O
T	B-cell_type	O	O	O
lymphocytes	I-cell_type	O	O	O
signal	O	O	O	O
through	O	O	O	O
a	O	O	O	O
MGF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
STAT5	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
like	I-protein	O	O	O
transcription	I-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
surface	O	O	O	O
receptors	O	O	O	O
for	O	O	O	O
PRL	B-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
interleukin	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
IL	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
are	O	O	O	O
structurally	O	O	O	O
distinct	O	O	O	O
,	O	O	O	O
but	O	O	O	O
share	O	O	O	O
regulatory	O	O	O	O
tasks	O	O	O	O
in	O	O	O	O
T	B-cell_type	O	O	O
lymphocytes	I-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

They	O	O	O	O
can	O	O	O	O
stimulate	O	O	O	O
proliferation	O	O	O	O
and	O	O	O	O
activate	O	O	O	O
transcription	O	O	O	O
of	O	O	O	O
over	O	O	O	O
-	O	O	O	O
lapping	O	O	O	O
sets	O	O	O	O
of	O	O	O	O
genes	O	O	O	O
of	O	O	O	O
T	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

PRL	B-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
IL	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
receptor	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
are	O	O	O	O
both	O	O	O	O
linked	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
Jak	B-protein	O	O	O
/	I-protein	O	O	O
Stat	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
signal	B-protein	O	O	O
transducer	I-protein	O	O	O
and	I-protein	O	O	O
activator	I-protein	O	O	O
of	I-protein	O	O	O
transcription	I-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
pathway	O	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
investigated	O	O	O	O
the	O	O	O	O
ability	O	O	O	O
of	O	O	O	O
PRL	B-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
IL	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
to	O	O	O	O
activate	O	O	O	O
Stat	B-protein	O	O	O
proteins	I-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
different	O	O	O	O
T	B-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
lines	I-cell_line	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
DNA	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
specificities	O	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
reactivities	O	O	O	O
toward	O	O	O	O
Stat	O	O	O	O
-	O	O	O	O
specific	O	O	O	O
antisera	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
the	O	O	O	O
mol	O	O	O	O
wt	O	O	O	O
of	O	O	O	O
IL	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
-	O	O	O	O
and	O	O	O	O
PRL	B-protein	B-protein	O	O
-	O	I-protein	O	O
induced	O	I-protein	O	O
DNA	O	I-protein	O	O
-	O	I-protein	O	O
binding	O	I-protein	O	O
proteins	O	I-protein	O	O
in	O	O	O	O
Nb2	O	O	O	O
and	O	O	O	O
C196	O	O	O	O
T	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
lines	O	O	O	O
were	O	O	O	O
investigated	O	O	O	O
.	O	O	O	O

A	O	O	O	O
comparison	O	O	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
Stat	B-protein	O	O	O
proteins	I-protein	O	O	O
induced	O	O	O	O
by	O	O	O	O
interferon	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
gamma	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
PRL	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
IL	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
6	I-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
T47D	B-cell_line	O	O	O
mammary	I-cell_line	O	O	O
tumor	I-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
was	O	O	O	O
made	O	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
found	O	O	O	O
that	O	O	O	O
these	O	O	O	O
parameters	O	O	O	O
were	O	O	O	O
indistinguishable	O	O	O	O
for	O	O	O	O
one	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
PRL	O	O	O	O
-	O	O	O	O
and	O	O	O	O
IL	O	O	O	O
-	O	O	O	O
2	O	O	O	O
-	O	O	O	O
induced	O	O	O	O
factors	O	O	O	O
.	O	O	O	O

A	O	O	O	O
transcription	O	O	O	O
factor	O	O	O	O
closely	O	O	O	O
related	O	O	O	O
to	O	O	O	O
mammary	B-protein	O	O	O
gland	I-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
Stat5	I-protein	O	O	O
is	O	O	O	O
rapidly	O	O	O	O
activated	O	O	O	O
upon	O	O	O	O
interaction	O	O	O	O
of	O	O	O	O
IL	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
PRL	B-protein	O	O	O
with	O	O	O	O
their	O	O	O	O
respective	O	O	O	O
receptors	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Activation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
a	O	O	O	O
second	O	O	O	O
protein	O	O	O	O
related	O	O	O	O
to	O	O	O	O
Stat1	B-protein	O	O	O
was	O	O	O	O
also	O	O	O	O
observed	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Our	O	O	O	O
results	O	O	O	O
emphasize	O	O	O	O
the	O	O	O	O
role	O	O	O	O
of	O	O	O	O
PRL	B-protein	O	O	O
as	O	O	O	O
a	O	O	O	O
regulator	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
immune	O	O	O	O
response	O	O	O	O
and	O	O	O	O
indicate	O	O	O	O
that	O	O	O	O
the	O	O	O	O
Stat	B-protein	O	O	O
factors	I-protein	O	O	O
mammary	B-protein	O	O	O
gland	I-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
Stat5	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
Stat1	B-protein	O	O	O
play	O	O	O	O
a	O	O	O	O
role	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
regulation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
gene	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
during	O	O	O	O
T	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
development	O	O	O	O
.	O	O	O	O

ETS1	B-protein	O	O	O
transactivates	O	O	O	O
the	O	O	O	O
human	B-DNA	O	O	O
GM	I-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
CSF	I-DNA	O	O	O
promoter	I-DNA	O	O	O
in	O	O	O	O
Jurkat	B-cell_line	O	O	O
T	I-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
stimulated	O	O	O	O
with	O	O	O	O
PMA	O	O	O	O
and	O	O	O	O
ionomycin	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Activation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
T	B-cell_type	O	O	O
helper	I-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
results	O	O	O	O
in	O	O	O	O
coordinate	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
a	O	O	O	O
number	O	O	O	O
of	O	O	O	O
cytokines	B-protein	O	O	O
involved	O	O	O	O
in	O	O	O	O
differentiation	O	O	O	O
,	O	O	O	O
proliferation	O	O	O	O
and	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
haematopoietic	O	O	O	O
system	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Granulocyte	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
macrophage	I-protein	O	O	O
colony	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
stimulating	I-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
GM	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
CSF	I-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
is	O	O	O	O
one	O	O	O	O
such	O	O	O	O
cytokine	B-protein	O	O	O
whose	O	O	O	O
increased	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
results	O	O	O	O
partly	O	O	O	O
from	O	O	O	O
increases	O	O	O	O
in	O	O	O	O
transcription	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Cis	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
acting	I-DNA	O	O	O
elements	I-DNA	O	O	O
with	O	O	O	O
NF	B-DNA	O	O	O
kappa	I-DNA	O	O	O
B	I-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
AP	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
1	I-DNA	O	O	O
and	O	O	O	O
ETS	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
like	I-DNA	O	O	O
motifs	I-DNA	O	O	O
have	O	O	O	O
been	O	O	O	O
identified	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
promoter	O	O	O	O
region	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
GM	B-protein	B-DNA	O	O
-	I-protein	I-DNA	O	O
CSF	I-protein	I-DNA	O	O
gene	O	I-DNA	O	O
,	O	O	O	O
which	O	O	O	O
are	O	O	O	O
important	O	O	O	O
for	O	O	O	O
transcriptional	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
following	O	O	O	O
PMA	O	O	O	O
and	O	O	O	O
ionomycin	O	O	O	O
stimulation	O	O	O	O
.	O	O	O	O

A	O	O	O	O
number	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
ETS	B-protein	O	O	O
family	I-protein	O	O	O
of	O	O	O	O
transcription	B-protein	O	O	O
factors	I-protein	O	O	O
are	O	O	O	O
expressed	O	O	O	O
in	O	O	O	O
T	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
,	O	O	O	O
including	O	O	O	O
ETS1	B-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
ELF1	B-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Here	O	O	O	O
we	O	O	O	O
describe	O	O	O	O
the	O	O	O	O
ability	O	O	O	O
of	O	O	O	O
these	O	O	O	O
factors	O	O	O	O
to	O	O	O	O
interact	O	O	O	O
with	O	O	O	O
a	O	O	O	O
site	O	O	O	O
(	O	O	O	O
GM5	B-DNA	O	O	O
)	O	O	O	O
,	O	O	O	O
located	O	O	O	O
within	O	O	O	O
the	O	O	O	O
CLE0	B-DNA	O	O	O
element	I-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
-	B-DNA	O	O	O
47	I-DNA	O	O	O
to	I-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
40	I-DNA	O	O	O
upstream	I-DNA	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
GM	B-protein	B-DNA	O	O
-	I-protein	I-DNA	O	O
CSF	I-protein	I-DNA	O	O
transcription	O	I-DNA	O	O
initiation	O	I-DNA	O	O
site	O	I-DNA	O	O
.	O	O	O	O

Exogenous	O	O	O	O
ETS1	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
but	O	O	O	O
not	O	O	O	O
ELF1	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
can	O	O	O	O
transactivate	O	O	O	O
GM	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
CSF	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
through	O	O	O	O
the	O	O	O	O
GM5	B-DNA	O	O	O
site	O	O	O	O
,	O	O	O	O
in	O	O	O	O
a	O	O	O	O
PMA	O	O	O	O
/	O	O	O	O
ionomycin	O	O	O	O
dependent	O	O	O	O
manner	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Other	O	O	O	O
unidentified	O	O	O	O
ETS	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
like	I-protein	O	O	O
factors	I-protein	O	O	O
present	O	O	O	O
in	O	O	O	O
Jurkat	B-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
are	O	O	O	O
also	O	O	O	O
capable	O	O	O	O
of	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
GM5	B-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

Mutation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
core	O	O	O	O
ETS	B-DNA	O	O	O
binding	I-DNA	O	O	O
site	I-DNA	O	O	O
from	O	O	O	O
-	B-DNA	O	O	O
GGAA	I-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
to	I-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
GGAT	I-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
prevents	O	O	O	O
the	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
of	O	O	O	O
ETS	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
like	I-protein	O	O	O
factors	I-protein	O	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
exception	O	O	O	O
of	O	O	O	O
ETS1	B-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
GM	B-protein	B-DNA	O	O
-	I-protein	I-DNA	O	O
CSF	I-protein	I-DNA	O	O
promoter	O	I-DNA	O	O
,	O	O	O	O
modified	O	O	O	O
in	O	O	O	O
this	O	O	O	O
way	O	O	O	O
to	O	O	O	O
be	O	O	O	O
ETS1	B-protein	O	O	O
specific	O	O	O	O
,	O	O	O	O
is	O	O	O	O
fully	O	O	O	O
responsive	O	O	O	O
to	O	O	O	O
PMA	O	O	O	O
/	O	O	O	O
ionomycin	O	O	O	O
induction	O	O	O	O
,	O	O	O	O
in	O	O	O	O
addition	O	O	O	O
to	O	O	O	O
ETS1	B-protein	O	O	O
transactivation	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
presence	O	O	O	O
of	O	O	O	O
PMA	O	O	O	O
and	O	O	O	O
ionomycin	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Together	O	O	O	O
these	O	O	O	O
data	O	O	O	O
suggest	O	O	O	O
that	O	O	O	O
ETS1	B-protein	O	O	O
may	O	O	O	O
be	O	O	O	O
involved	O	O	O	O
in	O	O	O	O
mediating	O	O	O	O
the	O	O	O	O
increased	O	O	O	O
GM	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
CSF	I-protein	O	O	O
production	O	O	O	O
associated	O	O	O	O
with	O	O	O	O
T	B-cell_type	O	O	O
cell	I-cell_type	O	O	O
activation	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Quantitation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
beta	B-protein	B-RNA	O	O
1	I-protein	I-RNA	O	O
triiodothyronine	I-protein	I-RNA	O	O
receptor	I-protein	I-RNA	O	O
mRNA	O	I-RNA	O	O
in	O	O	O	O
human	O	O	O	O
tissues	O	O	O	O
by	O	O	O	O
competitive	O	O	O	O
reverse	O	O	O	O
transcription	O	O	O	O
polymerase	O	O	O	O
chain	O	O	O	O
reaction	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Thyroid	O	O	O	O
hormones	O	O	O	O
act	O	O	O	O
by	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
to	O	O	O	O
nuclear	B-protein	O	O	O
receptor	I-protein	O	O	O
proteins	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
thyroid	B-protein	O	O	O
hormone	I-protein	O	O	O
receptors	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
TR	B-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
alpha	O	O	O	O
and	O	O	O	O
beta	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Data	O	O	O	O
from	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
culture	O	O	O	O
and	O	O	O	O
animal	O	O	O	O
studies	O	O	O	O
indicate	O	O	O	O
that	O	O	O	O
TR	B-protein	O	O	O
expression	O	O	O	O
may	O	O	O	O
be	O	O	O	O
regulated	O	O	O	O
to	O	O	O	O
modulate	O	O	O	O
target	O	O	O	O
organ	O	O	O	O
responsiveness	O	O	O	O
to	O	O	O	O
thyroid	O	O	O	O
hormone	O	O	O	O
.	O	O	O	O

To	O	O	O	O
investigate	O	O	O	O
whether	O	O	O	O
such	O	O	O	O
adaptive	O	O	O	O
changes	O	O	O	O
in	O	O	O	O
TR	B-protein	O	O	O
expression	O	O	O	O
occur	O	O	O	O
in	O	O	O	O
humans	O	O	O	O
,	O	O	O	O
we	O	O	O	O
determined	O	O	O	O
the	O	O	O	O
mRNA	O	O	O	O
levels	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
hTR	B-protein	O	O	O
beta	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
various	O	O	O	O
thyroid	O	O	O	O
states	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Patients	O	O	O	O
with	O	O	O	O
overt	O	O	O	O
hypo	O	O	O	O
-	O	O	O	O
or	O	O	O	O
hyperthyroidism	O	O	O	O
were	O	O	O	O
enrolled	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
study	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Total	B-RNA	O	O	O
RNA	I-RNA	O	O	O
was	O	O	O	O
isolated	O	O	O	O
from	O	O	O	O
peripheral	B-cell_type	O	O	O
blood	I-cell_type	O	O	O
mononuclear	I-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
and	O	O	O	O
hTR	B-protein	B-RNA	O	O
beta	I-protein	I-RNA	O	O
1	I-protein	I-RNA	O	O
mRNA	O	I-RNA	O	O
levels	O	O	O	O
determined	O	O	O	O
by	O	O	O	O
quantitative	O	O	O	O
competitive	O	O	O	O
reverse	O	O	O	O
transcription	O	O	O	O
PCR	O	O	O	O
.	O	O	O	O

For	O	O	O	O
comparison	O	O	O	O
,	O	O	O	O
hTR	B-protein	B-RNA	O	O
beta	I-protein	I-RNA	O	O
1	I-protein	I-RNA	O	O
mRNA	O	I-RNA	O	O
levels	O	O	O	O
were	O	O	O	O
determined	O	O	O	O
in	O	O	O	O
lymphocytes	B-cell_type	O	O	O
and	O	O	O	O
normal	O	O	O	O
thyroid	O	O	O	O
tissue	O	O	O	O
of	O	O	O	O
euthyroid	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Human	B-protein	B-RNA	O	O
TR	I-protein	I-RNA	O	O
beta	I-protein	I-RNA	O	O
1	I-protein	I-RNA	O	O
mRNA	O	I-RNA	O	O
levels	O	O	O	O
in	O	O	O	O
lymphocytes	B-cell_type	O	O	O
were	O	O	O	O
1	O	O	O	O
.	O	O	O	O
8	O	O	O	O
+	O	O	O	O
/	O	O	O	O
-	O	O	O	O
0	O	O	O	O
.	O	O	O	O
4	O	O	O	O
,	O	O	O	O
1	O	O	O	O
.	O	O	O	O
9	O	O	O	O
+	O	O	O	O
/	O	O	O	O
-	O	O	O	O
0	O	O	O	O
.	O	O	O	O
5	O	O	O	O
,	O	O	O	O
1	O	O	O	O
.	O	O	O	O
1	O	O	O	O
+	O	O	O	O
/	O	O	O	O
-	O	O	O	O
0	O	O	O	O
.	O	O	O	O
4	O	O	O	O
10	O	O	O	O
(	O	O	O	O
-	O	O	O	O
18	O	O	O	O
)	O	O	O	O
mol	O	O	O	O
/	O	O	O	O
microgram	O	O	O	O
RNA	O	O	O	O
in	O	O	O	O
hypo	O	O	O	O
-	O	O	O	O
,	O	O	O	O
eu	O	O	O	O
-	O	O	O	O
and	O	O	O	O
hyperthyroid	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
,	O	O	O	O
respectively	O	O	O	O
,	O	O	O	O
corresponding	O	O	O	O
to	O	O	O	O
an	O	O	O	O
estimated	O	O	O	O
0	O	O	O	O
.	O	O	O	O
5	O	O	O	O
-	O	O	O	O
2	O	O	O	O
molecules	O	O	O	O
per	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Although	O	O	O	O
the	O	O	O	O
mean	O	O	O	O
hTR	B-protein	B-RNA	O	O
beta	I-protein	I-RNA	O	O
1	I-protein	I-RNA	O	O
mRNA	O	I-RNA	O	O
levels	O	O	O	O
were	O	O	O	O
40	O	O	O	O
%	O	O	O	O
lower	O	O	O	O
in	O	O	O	O
hyperthyroid	O	O	O	O
than	O	O	O	O
in	O	O	O	O
euthyroid	O	O	O	O
subjects	O	O	O	O
,	O	O	O	O
this	O	O	O	O
difference	O	O	O	O
did	O	O	O	O
not	O	O	O	O
reach	O	O	O	O
statistical	O	O	O	O
significance	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Similar	O	O	O	O
levels	O	O	O	O
of	O	O	O	O
hTR	B-protein	B-RNA	O	O
beta	I-protein	I-RNA	O	O
1	I-protein	I-RNA	O	O
mRNA	O	I-RNA	O	O
levels	O	O	O	O
were	O	O	O	O
detected	O	O	O	O
in	O	O	O	O
thyroid	O	O	O	O
gland	O	O	O	O
from	O	O	O	O
euthyroid	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
summary	O	O	O	O
,	O	O	O	O
we	O	O	O	O
developed	O	O	O	O
an	O	O	O	O
assay	O	O	O	O
for	O	O	O	O
the	O	O	O	O
quantitative	O	O	O	O
determination	O	O	O	O
of	O	O	O	O
hTR	B-protein	B-RNA	O	O
beta	I-protein	I-RNA	O	O
1	I-protein	I-RNA	O	O
mRNA	O	I-RNA	O	O
levels	O	O	O	O
in	O	O	O	O
small	O	O	O	O
human	O	O	O	O
tissue	O	O	O	O
samples	O	O	O	O
,	O	O	O	O
containing	O	O	O	O
as	O	O	O	O
little	O	O	O	O
as	O	O	O	O
50	O	O	O	O
ng	O	O	O	O
of	O	O	O	O
total	O	O	O	O
RNA	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Absolute	O	O	O	O
hTR	B-protein	B-RNA	O	O
beta	I-protein	I-RNA	O	O
1	I-protein	I-RNA	O	O
mRNA	O	I-RNA	O	O
levels	O	O	O	O
are	O	O	O	O
very	O	O	O	O
low	O	O	O	O
with	O	O	O	O
an	O	O	O	O
estimated	O	O	O	O
one	O	O	O	O
molecule	O	O	O	O
of	O	O	O	O
mRNA	B-RNA	O	O	O
being	O	O	O	O
present	O	O	O	O
in	O	O	O	O
a	O	O	O	O
mononuclear	B-cell_type	O	O	O
blood	I-cell_type	O	O	O
cell	I-cell_type	O	O	O
or	O	O	O	O
thyrocyte	B-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

No	O	O	O	O
up	O	O	O	O
-	O	O	O	O
regulation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
hTR	B-protein	O	O	O
beta	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
was	O	O	O	O
seen	O	O	O	O
in	O	O	O	O
hypothyroid	O	O	O	O
relative	O	O	O	O
to	O	O	O	O
euthyroid	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
.	O	O	O	O

However	O	O	O	O
,	O	O	O	O
there	O	O	O	O
is	O	O	O	O
a	O	O	O	O
non	O	O	O	O
-	O	O	O	O
significant	O	O	O	O
trend	O	O	O	O
towards	O	O	O	O
a	O	O	O	O
down	O	O	O	O
-	O	O	O	O
regulation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
hTR	B-protein	B-RNA	O	O
beta	I-protein	I-RNA	O	O
1	I-protein	I-RNA	O	O
mRNA	O	I-RNA	O	O
levels	O	O	O	O
in	O	O	O	O
hyperthyroid	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Multiple	O	O	O	O
proteins	B-protein	O	O	O
interact	O	O	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
nuclear	B-DNA	O	O	O
inhibitory	I-DNA	O	O	O
protein	I-DNA	O	O	O
repressor	I-DNA	O	O	O
element	I-DNA	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
human	B-DNA	O	O	O
interleukin	I-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
3	I-DNA	O	O	O
promoter	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

T	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
interleukin	B-protein	O	O	O
3	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
IL	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
3	I-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
is	O	O	O	O
directed	O	O	O	O
by	O	O	O	O
positive	O	O	O	O
and	O	O	O	O
negative	O	O	O	O
cis	O	O	O	O
-	O	O	O	O
acting	O	O	O	O
DNA	O	O	O	O
elements	O	O	O	O
clustered	O	O	O	O
within	O	O	O	O
300	O	O	O	O
base	O	O	O	O
pairs	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
transcriptional	B-DNA	O	O	O
start	I-DNA	O	O	O
site	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

A	O	O	O	O
strong	O	O	O	O
repressor	B-protein	O	O	O
element	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
termed	O	O	O	O
nuclear	B-protein	O	O	O
inhibitory	I-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
NIP	B-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
,	O	O	O	O
was	O	O	O	O
previously	O	O	O	O
mapped	O	O	O	O
to	O	O	O	O
a	O	O	O	O
segment	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
IL	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
3	I-DNA	O	O	O
promoter	I-DNA	O	O	O
between	O	O	O	O
nucleotides	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
271	I-DNA	O	O	O
and	I-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
250	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

Functional	O	O	O	O
characterization	O	O	O	O
of	O	O	O	O
this	O	O	O	O
element	O	O	O	O
demonstrates	O	O	O	O
that	O	O	O	O
it	O	O	O	O
can	O	O	O	O
mediate	O	O	O	O
repression	O	O	O	O
when	O	O	O	O
linked	O	O	O	O
in	O	O	O	O
cis	O	O	O	O
to	O	O	O	O
a	O	O	O	O
heterologous	B-DNA	O	O	O
promoter	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

DNA	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
experiments	O	O	O	O
were	O	O	O	O
carried	O	O	O	O
out	O	O	O	O
to	O	O	O	O
characterize	O	O	O	O
the	O	O	O	O
repressor	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Using	O	O	O	O
varying	O	O	O	O
conditions	O	O	O	O
,	O	O	O	O
three	O	O	O	O
distinct	O	O	O	O
complexes	O	O	O	O
were	O	O	O	O
shown	O	O	O	O
to	O	O	O	O
interact	O	O	O	O
specifically	O	O	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
NIP	B-protein	B-DNA	O	O
region	O	I-DNA	O	O
,	O	O	O	O
although	O	O	O	O
only	O	O	O	O
one	O	O	O	O
correlates	O	O	O	O
with	O	O	O	O
repressor	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Complex	B-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
results	O	O	O	O
from	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
of	O	O	O	O
a	O	O	O	O
ubiquitous	O	O	O	O
polypeptide	O	O	O	O
that	O	O	O	O
recognizes	O	O	O	O
the	O	O	O	O
3	B-DNA	O	O	O
'	I-DNA	O	O	O
portion	I-DNA	O	O	O
of	O	O	O	O
this	O	O	O	O
sequence	O	O	O	O
and	O	O	O	O
is	O	O	O	O
not	O	O	O	O
required	O	O	O	O
for	O	O	O	O
repression	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Complex	B-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
corresponds	O	O	O	O
to	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
of	O	O	O	O
transcription	B-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
upstream	B-protein	O	O	O
stimulatory	I-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
to	O	O	O	O
an	O	O	O	O
E	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
box	I-DNA	O	O	O
motif	I-DNA	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
5	B-DNA	O	O	O
'	I-DNA	O	O	O
portion	I-DNA	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
NIP	B-protein	B-DNA	O	O
region	O	I-DNA	O	O
.	O	O	O	O

DNA	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
specificity	O	O	O	O
of	O	O	O	O
complex	O	O	O	O
3	O	O	O	O
overlaps	O	O	O	O
with	O	O	O	O
that	O	O	O	O
of	O	O	O	O
upstream	B-protein	O	O	O
stimulatory	I-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
but	O	O	O	O
is	O	O	O	O
clearly	O	O	O	O
distinct	O	O	O	O
.	O	O	O	O

To	O	O	O	O
determine	O	O	O	O
which	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
latter	O	O	O	O
two	O	O	O	O
complexes	O	O	O	O
represents	O	O	O	O
NIP	B-protein	O	O	O
activity	O	O	O	O
,	O	O	O	O
we	O	O	O	O
incorporated	O	O	O	O
small	O	O	O	O
alterations	O	O	O	O
into	O	O	O	O
the	O	O	O	O
NIP	B-protein	B-DNA	O	O
site	O	I-DNA	O	O
of	O	O	O	O
an	O	O	O	O
IL	B-DNA	B-DNA	O	O
-	I-DNA	I-DNA	O	O
3	I-DNA	I-DNA	O	O
promoter	I-DNA	I-DNA	O	O
-	O	I-DNA	O	O
linked	O	I-DNA	O	O
reporter	O	I-DNA	O	O
construct	O	I-DNA	O	O
and	O	O	O	O
examined	O	O	O	O
their	O	O	O	O
effects	O	O	O	O
on	O	O	O	O
NIP	B-protein	O	O	O
-	O	O	O	O
mediated	O	O	O	O
repression	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Functional	O	O	O	O
specificity	O	O	O	O
for	O	O	O	O
repression	O	O	O	O
matches	O	O	O	O
the	O	O	O	O
DNA	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
specificity	O	O	O	O
of	O	O	O	O
complex	B-protein	O	O	O
3	I-protein	O	O	O
;	O	O	O	O
both	O	O	O	O
repressor	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
and	O	O	O	O
complex	B-protein	O	O	O
3	I-protein	O	O	O
binding	O	O	O	O
require	O	O	O	O
the	O	O	O	O
consensus	B-DNA	O	O	O
sequence	I-DNA	O	O	O
CTCACNTNC	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
hematopoietic	B-protein	O	O	O
transcription	I-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
PU	B-protein	O	O	O
.	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
is	O	O	O	O
downregulated	O	O	O	O
in	O	O	O	O
human	B-cell_line	O	O	O
multiple	I-cell_line	O	O	O
myeloma	I-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
lines	I-cell_line	O	O	O
.	O	O	O	O

PU	B-protein	O	O	O
.	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
is	O	O	O	O
a	O	O	O	O
hematopoietic	B-protein	O	O	O
transcription	I-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
belonging	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
Ets	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
family	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

It	O	O	O	O
is	O	O	O	O
identical	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
Spi	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
1	I-DNA	O	O	O
oncogene	I-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
which	O	O	O	O
is	O	O	O	O
implicated	O	O	O	O
in	O	O	O	O
spleen	O	O	O	O
focus	O	O	O	O
-	O	O	O	O
forming	O	O	O	O
virus	O	O	O	O
-	O	O	O	O
induced	O	O	O	O
murine	O	O	O	O
erythroleukemias	O	O	O	O
.	O	O	O	O

PU	B-protein	O	O	O
.	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
seems	O	O	O	O
to	O	O	O	O
be	O	O	O	O
required	O	O	O	O
for	O	O	O	O
early	O	O	O	O
development	O	O	O	O
of	O	O	O	O
multiple	B-cell_type	O	O	O
hematopoietic	I-cell_type	O	O	O
lineages	I-cell_type	O	O	O
,	O	O	O	O
but	O	O	O	O
its	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
in	O	O	O	O
mature	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
is	O	O	O	O
preferentially	O	O	O	O
observed	O	O	O	O
in	O	O	O	O
cells	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
B	B-cell_type	O	O	O
-	I-cell_type	O	O	O
cell	I-cell_type	O	O	O
-	I-cell_type	O	O	O
and	I-cell_type	O	O	O
monocyte	I-cell_type	O	O	O
/	I-cell_type	O	O	O
macrophage	I-cell_type	O	O	O
-	I-cell_type	O	O	O
differentiation	I-cell_type	O	O	O
lineage	I-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

It	O	O	O	O
binds	O	O	O	O
the	O	O	O	O
so	O	O	O	O
-	O	O	O	O
called	O	O	O	O
Pu	B-DNA	O	O	O
box	I-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
an	O	O	O	O
important	O	O	O	O
tissue	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
specific	I-DNA	O	O	O
regulatory	I-DNA	O	O	O
DNA	I-DNA	O	O	O
element	I-DNA	O	O	O
present	O	O	O	O
in	O	O	O	O
a	O	O	O	O
number	O	O	O	O
of	O	O	O	O
genes	O	O	O	O
expressed	O	O	O	O
in	O	O	O	O
these	O	O	O	O
cell	B-cell_type	O	O	O
lineages	I-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
have	O	O	O	O
analyzed	O	O	O	O
the	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
and	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
of	O	O	O	O
PU	B-protein	O	O	O
.	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
during	O	O	O	O
human	O	O	O	O
B	O	O	O	O
-	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
development	O	O	O	O
using	O	O	O	O
a	O	O	O	O
panel	O	O	O	O
of	O	O	O	O
B	B-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
lines	I-cell_line	O	O	O
representing	O	O	O	O
different	O	O	O	O
stages	O	O	O	O
of	O	O	O	O
maturation	O	O	O	O
,	O	O	O	O
from	O	O	O	O
early	B-cell_line	O	O	O
precursors	I-cell_line	O	O	O
to	O	O	O	O
differentiated	B-cell_line	O	O	O
plasma	I-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
.	O	O	O	O

PU	B-protein	B-RNA	O	O
.	I-protein	I-RNA	O	O
1	I-protein	I-RNA	O	O
mRNA	O	I-RNA	O	O
expression	O	O	O	O
and	O	O	O	O
PU	B-protein	O	O	O
.	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
DNA	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
,	O	O	O	O
as	O	O	O	O
measured	O	O	O	O
by	O	O	O	O
Northern	O	O	O	O
blot	O	O	O	O
analysis	O	O	O	O
and	O	O	O	O
electrophoretic	O	O	O	O
mobility	O	O	O	O
shift	O	O	O	O
assay	O	O	O	O
,	O	O	O	O
respectively	O	O	O	O
,	O	O	O	O
were	O	O	O	O
evident	O	O	O	O
in	O	O	O	O
cell	B-cell_line	O	O	O
lines	I-cell_line	O	O	O
representing	O	O	O	O
pro	O	O	O	O
-	O	O	O	O
B	O	O	O	O
,	O	O	O	O
pre	O	O	O	O
-	O	O	O	O
B	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
mature	O	O	O	O
B	O	O	O	O
cells	O	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
could	O	O	O	O
also	O	O	O	O
show	O	O	O	O
Pu	B-DNA	O	O	O
box	I-DNA	O	O	O
-	O	O	O	O
dependent	O	O	O	O
transactivation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
a	O	O	O	O
reporter	O	O	O	O
gene	O	O	O	O
in	O	O	O	O
transient	O	O	O	O
transfections	O	O	O	O
in	O	O	O	O
these	O	O	O	O
cell	B-cell_line	O	O	O
lines	I-cell_line	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
contrast	O	O	O	O
,	O	O	O	O
in	O	O	O	O
a	O	O	O	O
number	O	O	O	O
of	O	O	O	O
multiple	B-cell_line	O	O	O
myeloma	I-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
lines	I-cell_line	O	O	O
,	O	O	O	O
representing	O	O	O	O
differentiated	B-cell_type	O	O	O
,	I-cell_type	O	O	O
plasma	I-cell_type	O	O	O
cell	I-cell_type	O	O	O
-	I-cell_type	O	O	O
like	I-cell_type	O	O	O
B	I-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
,	O	O	O	O
PU	B-protein	O	O	O
.	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
DNA	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
,	O	O	O	O
mRNA	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
Pu	B-DNA	O	O	O
box	I-DNA	O	O	O
-	O	O	O	O
dependent	O	O	O	O
transactivation	O	O	O	O
were	O	O	O	O
absent	O	O	O	O
or	O	O	O	O
detectable	O	O	O	O
at	O	O	O	O
a	O	O	O	O
very	O	O	O	O
low	O	O	O	O
level	O	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
lymphoblastoid	B-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
lines	I-cell_line	O	O	O
,	O	O	O	O
which	O	O	O	O
exemplify	O	O	O	O
an	O	O	O	O
intermediate	O	O	O	O
stage	O	O	O	O
of	O	O	O	O
B	O	O	O	O
-	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
differentiation	O	O	O	O
,	O	O	O	O
a	O	O	O	O
reduced	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
and	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
were	O	O	O	O
observed	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
findings	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
human	O	B-cell_line	O	O
multiple	B-cell_line	I-cell_line	O	O
myeloma	I-cell_line	I-cell_line	O	O
cell	I-cell_line	I-cell_line	O	O
lines	I-cell_line	I-cell_line	O	O
represent	O	O	O	O
the	O	O	O	O
first	O	O	O	O
examples	O	O	O	O
of	O	O	O	O
B	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
with	O	O	O	O
downregulated	O	O	O	O
PU	B-protein	O	O	O
.	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
expression	O	O	O	O
and	O	O	O	O
apparently	O	O	O	O
contradict	O	O	O	O
observations	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
murine	O	O	O	O
system	O	O	O	O
in	O	O	O	O
which	O	O	O	O
PU	B-protein	O	O	O
.	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
is	O	O	O	O
expressed	O	O	O	O
and	O	O	O	O
active	O	O	O	O
in	O	O	O	O
plasmacytoma	B-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
lines	I-cell_line	O	O	O
.	O	O	O	O

At	O	O	O	O
present	O	O	O	O
,	O	O	O	O
it	O	O	O	O
is	O	O	O	O
unclear	O	O	O	O
whether	O	O	O	O
the	O	O	O	O
lack	O	O	O	O
of	O	O	O	O
PU	B-protein	O	O	O
.	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
expression	O	O	O	O
and	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
in	O	O	O	O
human	O	B-cell_line	O	O
multiple	B-cell_line	I-cell_line	O	O
myeloma	I-cell_line	I-cell_line	O	O
cell	I-cell_line	I-cell_line	O	O
lines	I-cell_line	I-cell_line	O	O
represents	O	O	O	O
a	O	O	O	O
malignancy	O	O	O	O
-	O	O	O	O
associated	O	O	O	O
defect	O	O	O	O
in	O	O	O	O
these	O	O	O	O
cells	O	O	O	O
or	O	O	O	O
exemplifies	O	O	O	O
a	O	O	O	O
normal	O	O	O	O
developmental	O	O	O	O
regulation	O	O	O	O
in	O	O	O	O
terminally	O	B-cell_type	O	O
differentiated	O	I-cell_type	O	O
B	B-cell_type	I-cell_type	O	O
cells	I-cell_type	I-cell_type	O	O
.	O	O	O	O

Regulation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
granulocyte	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
macrophage	I-protein	O	O	O
colony	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
stimulating	I-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
E	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
selectin	I-protein	O	O	O
expression	O	O	O	O
in	O	O	O	O
endothelial	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
by	O	O	O	O
cyclosporin	O	O	O	O
A	O	O	O	O
and	O	O	O	O
the	O	O	O	O
T	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
cell	I-protein	O	O	O
transcription	I-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
NFAT	B-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Nuclear	B-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
of	I-protein	O	O	O
activated	I-protein	O	O	O
T	I-protein	O	O	O
cells	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
NFAT	B-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
was	O	O	O	O
originally	O	O	O	O
described	O	O	O	O
as	O	O	O	O
a	O	O	O	O
T	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
cell	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
specific	I-protein	O	O	O
transcription	I-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
athat	O	O	O	O
supported	O	O	O	O
the	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
cytokine	B-protein	O	O	O
gene	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
and	O	O	O	O
mediated	O	O	O	O
the	O	O	O	O
immunoregulatory	B-protein	O	O	O
effects	O	O	O	O
of	O	O	O	O
cyclosporin	O	O	O	O
A	O	O	O	O
(	O	O	O	O
CsA	O	O	O	O
)	O	O	O	O
.	O	O	O	O

As	O	O	O	O
we	O	O	O	O
observed	O	O	O	O
that	O	O	O	O
activated	B-cell_type	O	O	O
endothelial	I-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
also	O	O	O	O
expressed	O	O	O	O
NFAT	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
we	O	O	O	O
tested	O	O	O	O
the	O	O	O	O
antiinflammatory	O	O	O	O
properties	O	O	O	O
of	O	O	O	O
CsA	O	O	O	O
in	O	O	O	O
endothelial	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

Significantly	O	O	O	O
,	O	O	O	O
CsA	O	O	O	O
completely	O	O	O	O
suppressed	O	O	O	O
the	O	O	O	O
induction	O	O	O	O
of	O	O	O	O
NFAT	B-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
endothelial	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
and	O	O	O	O
inhibited	O	O	O	O
the	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
of	O	O	O	O
granulocyte	B-protein	B-DNA	O	O
-	I-protein	I-DNA	O	O
macrophage	I-protein	I-DNA	O	O
colony	I-protein	I-DNA	O	O
-	I-protein	I-DNA	O	O
stimulating	I-protein	I-DNA	O	O
factor	I-protein	I-DNA	O	O
(	O	I-DNA	O	O
GM	B-protein	I-DNA	O	O
-	I-protein	I-DNA	O	O
CSF	I-protein	I-DNA	O	O
)	O	I-DNA	O	O
gene	O	I-DNA	O	O
regulatory	O	I-DNA	O	O
elements	O	I-DNA	O	O
that	O	O	O	O
use	O	O	O	O
NFAT	B-protein	O	O	O
by	O	O	O	O
60	O	O	O	O
%	O	O	O	O
.	O	O	O	O

CsA	O	O	O	O
similarly	O	O	O	O
mediated	O	O	O	O
a	O	O	O	O
reduction	O	O	O	O
of	O	O	O	O
up	O	O	O	O
to	O	O	O	O
65	O	O	O	O
%	O	O	O	O
in	O	O	O	O
GM	B-protein	B-RNA	O	O
-	I-protein	I-RNA	O	O
CSF	I-protein	I-RNA	O	O
mRNA	O	I-RNA	O	O
and	O	O	O	O
protein	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
in	O	O	O	O
activated	B-cell_type	O	O	O
endothelial	I-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

CsA	O	O	O	O
also	O	O	O	O
suppressed	O	O	O	O
E	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
selectin	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
but	O	O	O	O
not	O	O	O	O
vascular	B-protein	O	O	O
cell	I-protein	O	O	O
adhesion	I-protein	O	O	O
molecule	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
VCAM	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
in	O	O	O	O
endothelial	O	O	O	O
cells	O	O	O	O
,	O	O	O	O
even	O	O	O	O
though	O	O	O	O
the	O	O	O	O
E	B-protein	B-DNA	O	O
-	I-protein	I-DNA	O	O
selectin	I-protein	I-DNA	O	O
promoter	O	I-DNA	O	O
is	O	O	O	O
activated	O	O	O	O
by	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
rather	O	O	O	O
than	O	O	O	O
NFAT	B-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Hence	O	O	O	O
,	O	O	O	O
induction	O	O	O	O
of	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
surface	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
this	O	O	O	O
leukocyte	B-protein	O	O	O
adhesion	I-protein	O	O	O
molecule	I-protein	O	O	O
by	O	O	O	O
tumor	B-protein	O	O	O
necrosis	I-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
(	I-protein	O	O	O
TNF	I-protein	O	O	O
)	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
was	O	O	O	O
reduced	O	O	O	O
by	O	O	O	O
40	O	O	O	O
%	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
presence	O	O	O	O
of	O	O	O	O
CsA	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
this	O	O	O	O
was	O	O	O	O
reflected	O	O	O	O
by	O	O	O	O
a	O	O	O	O
29	O	O	O	O
%	O	O	O	O
decrease	O	O	O	O
in	O	O	O	O
neutrophil	B-cell_type	O	O	O
adhesion	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
effects	O	O	O	O
of	O	O	O	O
CsA	O	O	O	O
on	O	O	O	O
endothelial	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
were	O	O	O	O
also	O	O	O	O
detected	O	O	O	O
at	O	O	O	O
the	O	O	O	O
chromatin	B-DNA	O	O	O
structure	O	O	O	O
level	O	O	O	O
,	O	O	O	O
as	O	O	O	O
DNasel	B-protein	B-DNA	O	O
hypersensitive	O	I-DNA	O	O
sites	O	I-DNA	O	O
within	O	O	O	O
both	O	O	O	O
the	O	O	O	O
GM	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
CSF	I-protein	O	O	O
enhancer	O	O	O	O
and	O	O	O	O
the	O	O	O	O
E	B-protein	B-DNA	O	O
-	I-protein	I-DNA	O	O
selectin	I-protein	I-DNA	O	O
promoter	O	I-DNA	O	O
were	O	O	O	O
suppressed	O	O	O	O
by	O	O	O	O
CsA	O	O	O	O
.	O	O	O	O

This	O	O	O	O
represents	O	O	O	O
the	O	O	O	O
first	O	O	O	O
report	O	O	O	O
of	O	O	O	O
NFAT	B-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
endothelial	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
and	O	O	O	O
suggests	O	O	O	O
mechanisms	O	O	O	O
by	O	O	O	O
which	O	O	O	O
CsA	O	O	O	O
could	O	O	O	O
function	O	O	O	O
as	O	O	O	O
an	O	O	O	O
antiinflammatory	O	O	O	O
agent	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Costimulation	O	O	O	O
requirement	O	O	O	O
for	O	O	O	O
AP	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
transcription	O	O	O	O
factor	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
in	O	O	O	O
T	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
transcriptional	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
IL	B-protein	B-DNA	O	O
-	I-protein	I-DNA	O	O
2	I-protein	I-DNA	O	O
promoter	O	I-DNA	O	O
requires	O	O	O	O
T	B-cell_type	O	O	O
-	I-cell_type	O	O	O
cell	I-cell_type	O	O	O
costimulation	O	O	O	O
delivered	O	O	O	O
by	O	O	O	O
the	O	O	O	O
TCR	B-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
the	O	O	O	O
auxiliary	B-protein	O	O	O
receptor	I-protein	O	O	O
CD28	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Several	O	O	O	O
transcription	B-protein	O	O	O
factors	I-protein	O	O	O
participate	O	O	O	O
in	O	O	O	O
IL	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
promoter	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
,	O	O	O	O
among	O	O	O	O
which	O	O	O	O
are	O	O	O	O
AP	B-protein	B-protein	O	O
-	I-protein	I-protein	O	O
1	I-protein	I-protein	O	O
-	O	I-protein	O	O
like	O	I-protein	O	O
factors	O	I-protein	O	O
and	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Protein	O	O	O	O
phosphorylation	O	O	O	O
has	O	O	O	O
an	O	O	O	O
important	O	O	O	O
role	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
regulation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
these	O	O	O	O
two	O	O	O	O
factors	O	O	O	O
:	O	O	O	O
(	O	O	O	O
1	O	O	O	O
)	O	O	O	O
it	O	O	O	O
induces	O	O	O	O
the	O	O	O	O
transactivating	O	O	O	O
capacity	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
AP	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
c	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
Jun	I-protein	O	O	O
;	O	O	O	O
and	O	O	O	O
(	O	O	O	O
2	O	O	O	O
)	O	O	O	O
it	O	O	O	O
is	O	O	O	O
involved	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
release	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
cytoplasmic	B-protein	O	O	O
inhibitor	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
I	B-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
from	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
allowing	O	O	O	O
translocation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
latter	O	O	O	O
into	O	O	O	O
the	O	O	O	O
nucleus	O	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
have	O	O	O	O
recently	O	O	O	O
shown	O	O	O	O
that	O	O	O	O
both	O	O	O	O
phosphorylation	O	O	O	O
processes	O	O	O	O
require	O	O	O	O
T	O	O	O	O
-	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
costimulation	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Furthermore	O	O	O	O
,	O	O	O	O
in	O	O	O	O
activated	B-cell_type	O	O	O
T	I-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
kinetics	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
two	O	O	O	O
phosphorylation	O	O	O	O
events	O	O	O	O
are	O	O	O	O
essentially	O	O	O	O
similar	O	O	O	O
.	O	O	O	O

According	O	O	O	O
to	O	O	O	O
our	O	O	O	O
results	O	O	O	O
,	O	O	O	O
however	O	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
kinases	O	O	O	O
responsible	O	O	O	O
for	O	O	O	O
the	O	O	O	O
two	O	O	O	O
processes	O	O	O	O
are	O	O	O	O
distinct	O	O	O	O
entities	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Whereas	O	O	O	O
TPCK	B-protein	O	O	O
inhibits	O	O	O	O
phosphorylation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
I	B-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
,	O	O	O	O
consequently	O	O	O	O
,	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
it	O	O	O	O
markedly	O	O	O	O
enhances	O	O	O	O
the	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
of	O	O	O	O
JNK	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
MAP	B-protein	O	O	O
kinase	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
related	I-protein	O	O	O
kinase	I-protein	O	O	O
that	O	O	O	O
phosphorylates	O	O	O	O
the	O	O	O	O
transactivation	B-protein	O	O	O
domain	I-protein	O	O	O
of	O	O	O	O
c	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
Jun	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
,	O	O	O	O
therefore	O	O	O	O
,	O	O	O	O
propose	O	O	O	O
the	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
scheme	O	O	O	O
presented	O	O	O	O
in	O	O	O	O
FIGURE	O	O	O	O
3	O	O	O	O
for	O	O	O	O
T	O	O	O	O
-	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
costimulation	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Costimulation	O	O	O	O
results	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
a	O	O	O	O
signaling	O	O	O	O
pathway	O	O	O	O
that	O	O	O	O
leads	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
simultaneous	O	O	O	O
induction	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
two	O	O	O	O
transcription	B-protein	O	O	O
factors	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
AP	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Integration	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
signals	O	O	O	O
generated	O	O	O	O
by	O	O	O	O
TCR	B-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
CD28	B-protein	O	O	O
engagement	O	O	O	O
occurs	O	O	O	O
along	O	O	O	O
this	O	O	O	O
pathway	O	O	O	O
,	O	O	O	O
which	O	O	O	O
then	O	O	O	O
bifurcates	O	O	O	O
to	O	O	O	O
induce	O	O	O	O
I	B-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
phosphorylation	O	O	O	O
and	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
activation	O	O	O	O
on	O	O	O	O
the	O	O	O	O
one	O	O	O	O
hand	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
JNK	B-protein	O	O	O
activation	O	O	O	O
and	O	O	O	O
c	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
Jun	I-protein	O	O	O
phosphorylation	O	O	O	O
on	O	O	O	O
the	O	O	O	O
other	O	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
are	O	O	O	O
currently	O	O	O	O
engaged	O	O	O	O
in	O	O	O	O
defining	O	O	O	O
where	O	O	O	O
the	O	O	O	O
two	O	O	O	O
signals	O	O	O	O
integrate	O	O	O	O
along	O	O	O	O
the	O	O	O	O
AP	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
/	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
pathway	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Regulation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
human	O	O	O	O
immunodeficiency	O	O	O	O
virus	O	O	O	O
type	O	O	O	O
1	O	O	O	O
and	O	O	O	O
cytokine	O	O	O	O
gene	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
in	O	O	O	O
myeloid	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
by	O	O	O	O
NF	B-protein	B-protein	O	O
-	I-protein	I-protein	O	O
kappa	I-protein	I-protein	O	O
B	I-protein	I-protein	O	O
/	O	I-protein	O	O
Rel	O	I-protein	O	O
transcription	B-protein	O	O	O
factors	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

CD4	B-cell_line	O	O	O
+	I-cell_line	O	O	O
macrophages	I-cell_line	O	O	O
in	O	O	O	O
tissues	O	O	O	O
such	O	O	O	O
as	O	O	O	O
lung	O	O	O	O
,	O	O	O	O
skin	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
lymph	O	O	O	O
nodes	O	O	O	O
,	O	O	O	O
promyelocytic	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
in	O	O	O	O
bone	O	O	O	O
marrow	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
peripheral	B-cell_type	O	O	O
blood	I-cell_type	O	O	O
monocytes	I-cell_type	O	O	O
serve	O	O	O	O
as	O	O	O	O
important	O	O	O	O
targets	O	O	O	O
and	O	O	O	O
reservoirs	O	O	O	O
for	O	O	O	O
human	O	O	O	O
immunodeficiency	O	O	O	O
virus	O	O	O	O
type	O	O	O	O
1	O	O	O	O
(	O	O	O	O
HIV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
1	O	O	O	O
)	O	O	O	O
replication	O	O	O	O
.	O	O	O	O

HIV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
1	O	O	O	O
-	O	O	O	O
infected	O	O	O	O
myeloid	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
are	O	O	O	O
often	O	O	O	O
diminished	O	O	O	O
in	O	O	O	O
their	O	O	O	O
ability	O	O	O	O
to	O	O	O	O
participate	O	O	O	O
in	O	O	O	O
chemotaxis	O	O	O	O
,	O	O	O	O
phagocytosis	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
intracellular	O	O	O	O
killing	O	O	O	O
.	O	O	O	O

HIV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
1	O	O	O	O
infection	O	O	O	O
of	O	O	O	O
myeloid	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
can	O	O	O	O
lead	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
surface	B-protein	O	O	O
receptors	I-protein	O	O	O
associated	O	O	O	O
with	O	O	O	O
cellular	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
and	O	O	O	O
/	O	O	O	O
or	O	O	O	O
differentiation	O	O	O	O
that	O	O	O	O
increase	O	O	O	O
the	O	O	O	O
responsiveness	O	O	O	O
of	O	O	O	O
these	O	O	O	O
cells	O	O	O	O
to	O	O	O	O
cytokines	B-protein	O	O	O
secreted	O	O	O	O
by	O	O	O	O
neighboring	O	O	O	O
cells	O	O	O	O
as	O	O	O	O
well	O	O	O	O
as	O	O	O	O
to	O	O	O	O
bacteria	O	O	O	O
or	O	O	O	O
other	O	O	O	O
pathogens	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Enhancement	O	O	O	O
of	O	O	O	O
HIV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
1	O	O	O	O
replication	O	O	O	O
is	O	O	O	O
related	O	O	O	O
in	O	O	O	O
part	O	O	O	O
to	O	O	O	O
increased	O	O	O	O
DNA	O	O	O	O
-	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
of	O	O	O	O
cellular	O	B-protein	O	O
transcription	B-protein	I-protein	O	O
factors	I-protein	I-protein	O	O
such	O	O	O	O
as	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
binds	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
HIV	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
1	I-DNA	O	O	O
enhancer	I-DNA	O	O	O
region	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
long	B-DNA	O	O	O
terminal	I-DNA	O	O	O
repeat	I-DNA	O	O	O
and	O	O	O	O
contributes	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
inducibility	O	O	O	O
of	O	O	O	O
HIV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
1	O	O	O	O
gene	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
in	O	O	O	O
response	O	O	O	O
to	O	O	O	O
multiple	O	O	O	O
activating	O	O	O	O
agents	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Phosphorylation	O	O	O	O
and	O	O	O	O
degradation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
cytoplasmic	B-protein	O	O	O
inhibitor	I-protein	O	O	O
I	B-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
alpha	O	O	O	O
are	O	O	O	O
crucial	O	O	O	O
regulatory	O	O	O	O
events	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
DNA	O	O	O	O
-	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Both	O	O	O	O
N	O	O	O	O
-	O	O	O	O
and	O	O	O	O
C	O	O	O	O
-	O	O	O	O
terminal	O	O	O	O
residues	O	O	O	O
of	O	O	O	O
I	B-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
alpha	O	O	O	O
are	O	O	O	O
required	O	O	O	O
for	O	O	O	O
inducer	O	O	O	O
-	O	O	O	O
mediated	O	O	O	O
degradation	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Chronic	O	O	O	O
HIV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
1	O	O	O	O
infection	O	O	O	O
of	O	O	O	O
myeloid	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
leads	O	O	O	O
to	O	O	O	O
constitutive	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
DNA	O	O	O	O
-	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
and	O	O	O	O
provides	O	O	O	O
an	O	O	O	O
intranuclear	O	O	O	O
environment	O	O	O	O
capable	O	O	O	O
of	O	O	O	O
perpetuating	O	O	O	O
HIV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
1	O	O	O	O
replication	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Increased	O	O	O	O
intracellular	O	O	O	O
stores	O	O	O	O
of	O	O	O	O
latent	O	B-protein	O	O
NF	B-protein	I-protein	O	O
-	I-protein	I-protein	O	O
kappa	I-protein	I-protein	O	O
B	I-protein	I-protein	O	O
may	O	O	O	O
also	O	O	O	O
result	O	O	O	O
in	O	O	O	O
rapid	O	O	O	O
inducibility	O	O	O	O
of	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
-	O	O	O	O
dependent	O	O	O	O
cytokine	B-protein	O	O	O
gene	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
response	O	O	O	O
to	O	O	O	O
secondary	O	O	O	O
pathogenic	O	O	O	O
infections	O	O	O	O
or	O	O	O	O
antigenic	O	O	O	O
challenge	O	O	O	O
,	O	O	O	O
cytokine	B-protein	O	O	O
gene	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
is	O	O	O	O
rapidly	O	O	O	O
induced	O	O	O	O
,	O	O	O	O
enhanced	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
sustained	O	O	O	O
over	O	O	O	O
prolonged	O	O	O	O
periods	O	O	O	O
in	O	O	O	O
HIV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
1	O	O	O	O
-	O	O	O	O
infected	O	O	O	O
myeloid	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
compared	O	O	O	O
with	O	O	O	O
uninfected	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

Elevated	O	O	O	O
levels	O	O	O	O
of	O	O	O	O
several	O	O	O	O
inflammatory	B-protein	O	O	O
cytokines	I-protein	O	O	O
have	O	O	O	O
been	O	O	O	O
detected	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
sera	O	O	O	O
of	O	O	O	O
HIV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
1	O	O	O	O
-	O	O	O	O
infected	O	O	O	O
individuals	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Secretion	O	O	O	O
of	O	O	O	O
myeloid	O	B-protein	O	O
cell	O	I-protein	O	O
-	O	I-protein	O	O
derived	O	I-protein	O	O
cytokines	B-protein	I-protein	O	O
may	O	O	O	O
both	O	O	O	O
increase	O	O	O	O
virus	O	O	O	O
production	O	O	O	O
and	O	O	O	O
contribute	O	O	O	O
to	O	O	O	O
AIDS	O	O	O	O
-	O	O	O	O
associated	O	O	O	O
disorders	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Steroid	O	O	O	O
mediated	O	O	O	O
lysis	O	O	O	O
of	O	O	O	O
lymphoblasts	B-cell_type	O	O	O
requires	O	O	O	O
the	O	O	O	O
DNA	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
region	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
steroid	O	O	O	O
hormone	O	O	O	O
receptor	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Glucocorticoids	O	O	O	O
kill	O	O	O	O
certain	O	O	O	O
types	O	O	O	O
of	O	O	O	O
lymphoblasts	B-cell_type	O	O	O
,	O	O	O	O
but	O	O	O	O
the	O	O	O	O
mechanisms	O	O	O	O
are	O	O	O	O
unknown	O	O	O	O
.	O	O	O	O

It	O	O	O	O
is	O	O	O	O
clear	O	O	O	O
that	O	O	O	O
sufficient	O	O	O	O
numbers	O	O	O	O
of	O	O	O	O
functional	O	O	O	O
glucocorticoid	B-protein	O	O	O
receptors	I-protein	O	O	O
are	O	O	O	O
required	O	O	O	O
to	O	O	O	O
mediate	O	O	O	O
lysis	O	O	O	O
,	O	O	O	O
but	O	O	O	O
whether	O	O	O	O
they	O	O	O	O
do	O	O	O	O
so	O	O	O	O
through	O	O	O	O
the	O	O	O	O
classical	O	O	O	O
model	O	O	O	O
of	O	O	O	O
steroid	O	O	O	O
hormone	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
and	O	O	O	O
modulation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
gene	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
has	O	O	O	O
not	O	O	O	O
been	O	O	O	O
established	O	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
this	O	O	O	O
report	O	O	O	O
we	O	O	O	O
have	O	O	O	O
asked	O	O	O	O
which	O	O	O	O
region	O	O	O	O
(	O	O	O	O
s	O	O	O	O
)	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
steroid	B-protein	O	O	O
receptor	I-protein	O	O	O
are	O	O	O	O
important	O	O	O	O
for	O	O	O	O
mediating	O	O	O	O
lysis	O	O	O	O
in	O	O	O	O
leukemic	O	B-cell_type	O	O
T	O	I-cell_type	O	O
lymphoblasts	B-cell_type	I-cell_type	O	O
.	O	O	O	O

CEM	O	B-cell_line	O	O
-	O	I-cell_line	O	O
ICR	O	I-cell_line	O	O
27	O	I-cell_line	O	O
leukemic	O	I-cell_line	O	O
lymphoblasts	B-cell_type	I-cell_line	O	O
,	O	O	O	O
a	O	O	O	O
clone	O	O	O	O
of	O	O	O	O
CEM	B-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
which	O	O	O	O
lack	O	O	O	O
functional	O	O	O	O
glucocorticoid	B-protein	O	O	O
receptors	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
therefore	O	O	O	O
are	O	O	O	O
neither	O	O	O	O
lysed	O	O	O	O
by	O	O	O	O
dexamethasone	O	O	O	O
nor	O	O	O	O
capable	O	O	O	O
of	O	O	O	O
showing	O	O	O	O
glutamine	B-protein	O	O	O
synthetase	I-protein	O	O	O
induction	O	O	O	O
,	O	O	O	O
were	O	O	O	O
provided	O	O	O	O
with	O	O	O	O
steroid	B-protein	O	O	O
receptors	I-protein	O	O	O
by	O	O	O	O
DNA	O	O	O	O
transfections	O	O	O	O
of	O	O	O	O
various	O	O	O	O
receptor	O	O	O	O
gene	O	O	O	O
constructs	O	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
measured	O	O	O	O
steroid	O	O	O	O
mediated	O	O	O	O
lysis	O	O	O	O
,	O	O	O	O
receptor	O	O	O	O
number	O	O	O	O
and	O	O	O	O
induction	O	O	O	O
of	O	O	O	O
glutamine	B-protein	O	O	O
synthetase	I-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
transfected	B-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
.	O	O	O	O

Our	O	O	O	O
results	O	O	O	O
provide	O	O	O	O
evidence	O	O	O	O
that	O	O	O	O
the	O	O	O	O
lysis	O	O	O	O
mechanism	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
ICR27	O	B-cell_line	O	O
lymphoblasts	B-cell_type	I-cell_line	O	O
is	O	O	O	O
restored	O	O	O	O
when	O	O	O	O
functional	O	O	O	O
receptor	O	O	O	O
number	O	O	O	O
is	O	O	O	O
restored	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
DNA	B-protein	O	O	O
binding	I-protein	O	O	O
region	I-protein	O	O	O
specifying	O	O	O	O
high	O	O	O	O
affinity	O	O	O	O
for	O	O	O	O
GRE	B-DNA	O	O	O
sites	I-DNA	O	O	O
is	O	O	O	O
required	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Lysis	O	O	O	O
is	O	O	O	O
mediated	O	O	O	O
by	O	O	O	O
any	O	O	O	O
steroid	O	O	O	O
that	O	O	O	O
allows	O	O	O	O
for	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
receptor	O	O	O	O
containing	O	O	O	O
such	O	O	O	O
a	O	O	O	O
region	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Our	O	O	O	O
data	O	O	O	O
support	O	O	O	O
the	O	O	O	O
view	O	O	O	O
that	O	O	O	O
steroid	O	O	O	O
-	O	O	O	O
mediated	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
death	O	O	O	O
occurs	O	O	O	O
by	O	O	O	O
a	O	O	O	O
process	O	O	O	O
requiring	O	O	O	O
direct	O	O	O	O
interaction	O	O	O	O
of	O	O	O	O
steroid	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
receptor	I-protein	O	O	O
complexes	I-protein	O	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
genome	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Functional	O	O	O	O
characterization	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
murine	B-protein	O	O	O
homolog	I-protein	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
B	B-protein	O	O	O
cell	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
specific	I-protein	O	O	O
coactivator	I-protein	O	O	O
BOB	B-protein	O	O	O
.	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
/	I-protein	O	O	O
OBF	I-protein	O	O	O
.	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

B	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
-	O	O	O	O
specific	O	O	O	O
transcriptional	O	O	O	O
promoter	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
mediated	O	O	O	O
by	O	O	O	O
the	O	O	O	O
octamer	B-DNA	O	O	O
motif	I-DNA	O	O	O
requires	O	O	O	O
the	O	O	O	O
Oct1	B-protein	O	O	O
or	O	O	O	O
Oct2	B-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
additional	O	O	O	O
B	B-protein	O	O	O
cell	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
restricted	I-protein	O	O	O
cofactors	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

One	O	O	O	O
such	O	O	O	O
cofactor	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
BOB	B-protein	O	O	O
.	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
/	I-protein	O	O	O
OBF	I-protein	O	O	O
.	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
was	O	O	O	O
recently	O	O	O	O
isolated	O	O	O	O
from	O	O	O	O
human	B-cell_type	O	O	O
B	I-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

Here	O	O	O	O
,	O	O	O	O
we	O	O	O	O
describe	O	O	O	O
the	O	O	O	O
isolation	O	O	O	O
and	O	O	O	O
detailed	O	O	O	O
characterization	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
murine	B-protein	O	O	O
homolog	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Full	O	O	O	O
-	O	O	O	O
length	O	O	O	O
cDNAs	B-DNA	O	O	O
and	O	O	O	O
genomic	B-DNA	O	O	O
clones	I-DNA	O	O	O
were	O	O	O	O
isolated	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
the	O	O	O	O
gene	O	O	O	O
structure	O	O	O	O
was	O	O	O	O
determined	O	O	O	O
.	O	O	O	O
Comparison	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
deduced	O	O	O	O
amino	O	O	O	O
acids	O	O	O	O
shows	O	O	O	O
88	O	O	O	O
%	O	O	O	O
sequence	O	O	O	O
identity	O	O	O	O
between	O	O	O	O
mouse	O	O	O	O
and	O	O	O	O
human	O	O	O	O
BOB	O	O	O	O
.	O	O	O	O
1	O	O	O	O
/	O	O	O	O
OBF	O	O	O	O
.	O	O	O	O
1	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
NH2	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
terminal	I-protein	O	O	O
126	I-protein	O	O	O
amino	I-protein	O	O	O
acids	I-protein	O	O	O
of	O	O	O	O
BOB	B-protein	O	O	O
.	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
/	I-protein	O	O	O
OBF	I-protein	O	O	O
.	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
are	O	O	O	O
both	O	O	O	O
essential	O	O	O	O
and	O	O	O	O
sufficient	O	O	O	O
for	O	O	O	O
interaction	O	O	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
POU	B-protein	O	O	O
domains	I-protein	O	O	O
of	O	O	O	O
either	O	O	O	O
Oct1	B-protein	O	O	O
or	O	O	O	O
Oct2	B-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

This	O	O	O	O
protein	O	O	O	O
-	O	O	O	O
protein	O	O	O	O
interaction	O	O	O	O
does	O	O	O	O
not	O	O	O	O
require	O	O	O	O
the	O	O	O	O
simultaneous	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
of	O	O	O	O
Oct	B-protein	O	O	O
proteins	I-protein	O	O	O
to	O	O	O	O
DNA	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
high	O	O	O	O
resolution	O	O	O	O
footprinting	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
Oct	B-DNA	O	O	O
-	O	O	O	O
DNA	O	O	O	O
interaction	O	O	O	O
reveals	O	O	O	O
that	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
of	O	O	O	O
BOB	B-protein	O	O	O
.	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
/	I-protein	O	O	O
OBF	I-protein	O	O	O
.	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
to	O	O	O	O
Oct1	B-protein	O	O	O
or	O	O	O	O
Oct2	B-protein	O	O	O
does	O	O	O	O
not	O	O	O	O
alter	O	O	O	O
the	O	O	O	O
interaction	O	O	O	O
with	O	O	O	O
DNA	O	O	O	O
.	O	O	O	O

BOB	B-protein	O	O	O
.	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
/	I-protein	O	O	O
OBF	I-protein	O	O	O
.	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
can	O	O	O	O
efficiently	O	O	O	O
activate	O	O	O	O
octamer	O	O	O	O
-	O	O	O	O
dependent	O	O	O	O
promoters	O	O	O	O
in	O	O	O	O
fibroblasts	B-cell_type	O	O	O
;	O	O	O	O
however	O	O	O	O
,	O	O	O	O
it	O	O	O	O
fails	O	O	O	O
to	O	O	O	O
stimulate	O	O	O	O
octamer	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
dependent	I-DNA	O	O	O
enhancer	I-DNA	O	O	O
activity	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Fusion	O	O	O	O
of	O	O	O	O
subdomains	O	O	O	O
of	O	O	O	O
BOB	B-protein	O	O	O
.	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
/	I-protein	O	O	O
OBF	I-protein	O	O	O
.	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
GAL4	B-protein	O	O	O
DNA	I-protein	O	O	O
binding	I-protein	O	O	O
domain	I-protein	O	O	O
reveals	O	O	O	O
that	O	O	O	O
both	O	O	O	O
NH2	O	O	O	O
-	O	O	O	O
and	O	O	O	O
COOH	O	O	O	O
-	O	O	O	O
terminal	O	O	O	O
domains	O	O	O	O
of	O	O	O	O
BOB	B-protein	O	O	O
.	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
/	I-protein	O	O	O
OBF	I-protein	O	O	O
.	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
contribute	O	O	O	O
to	O	O	O	O
full	O	O	O	O
transactivation	O	O	O	O
function	O	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
COOH	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
terminal	I-protein	O	O	O
domain	I-protein	O	O	O
is	O	O	O	O
more	O	O	O	O
efficient	O	O	O	O
in	O	O	O	O
this	O	O	O	O
transactivation	O	O	O	O
assay	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Consistent	O	O	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
failure	O	O	O	O
of	O	O	O	O
full	O	B-protein	O	O
-	O	I-protein	O	O
length	O	I-protein	O	O
BOB	B-protein	I-protein	O	O
.	I-protein	I-protein	O	O
1	I-protein	I-protein	O	O
/	I-protein	I-protein	O	O
OBF	I-protein	I-protein	O	O
.	I-protein	I-protein	O	O
1	I-protein	I-protein	O	O
to	O	O	O	O
stimulate	O	O	O	O
octamer	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
dependent	I-DNA	O	O	O
enhancer	I-DNA	O	O	O
elements	I-DNA	O	O	O
in	O	O	O	O
non	B-cell_type	O	O	O
B	I-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
GAL4	B-protein	O	O	O
fusions	I-protein	O	O	O
likewise	O	O	O	O
only	O	O	O	O
stimulate	O	O	O	O
from	O	O	O	O
a	O	O	O	O
promoter	O	O	O	O
-	O	O	O	O
proximal	O	O	O	O
position	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Anti	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
immunoglobulin	I-protein	O	O	O
M	I-protein	O	O	O
activates	O	O	O	O
nuclear	B-protein	O	O	O
calcium	I-protein	O	O	O
/	I-protein	O	O	O
calmodulin	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
dependent	I-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
kinase	I-protein	O	O	O
II	I-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
human	B-cell_type	O	O	O
B	I-cell_type	O	O	O
lymphocytes	I-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
and	O	O	O	O
others	O	O	O	O
have	O	O	O	O
previously	O	O	O	O
shown	O	O	O	O
that	O	O	O	O
the	O	O	O	O
nuclear	B-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
Ets	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
is	O	O	O	O
phosphorylated	O	O	O	O
in	O	O	O	O
a	O	O	O	O
calcium	O	O	O	O
-	O	O	O	O
dependent	O	O	O	O
manner	O	O	O	O
after	O	O	O	O
ligation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
immunoglobulin	B-protein	O	O	O
(	I-protein	O	O	O
Ig	I-protein	O	O	O
)	I-protein	O	O	O
M	I-protein	O	O	O
on	O	O	O	O
B	B-cell_type	O	O	O
lymphocytes	I-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

As	O	O	O	O
this	O	O	O	O
phosphorylation	O	O	O	O
was	O	O	O	O
independent	O	O	O	O
of	O	O	O	O
protein	B-protein	O	O	O
kinase	I-protein	O	O	O
C	I-protein	O	O	O
activity	O	O	O	O
,	O	O	O	O
we	O	O	O	O
tested	O	O	O	O
whether	O	O	O	O
a	O	O	O	O
calcium	B-protein	O	O	O
/	I-protein	O	O	O
calmodulin	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
dependent	I-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
kinase	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
CaM	B-protein	O	O	O
kinase	I-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
might	O	O	O	O
phosphorylate	O	O	O	O
the	O	O	O	O
Ets	B-protein	B-protein	O	O
-	I-protein	I-protein	O	O
1	I-protein	I-protein	O	O
protein	O	I-protein	O	O
after	O	O	O	O
elevation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
intracellular	O	O	O	O
free	O	O	O	O
calcium	O	O	O	O
concentrations	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
dephosphorylated	O	O	O	O
form	O	O	O	O
of	O	O	O	O
Ets	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
has	O	O	O	O
been	O	O	O	O
shown	O	O	O	O
to	O	O	O	O
bind	O	O	O	O
to	O	O	O	O
chromatin	B-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
suggesting	O	O	O	O
that	O	O	O	O
the	O	O	O	O
operative	B-protein	O	O	O
kinase	I-protein	O	O	O
should	O	O	O	O
be	O	O	O	O
detectable	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
nucleus	O	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
prepared	O	O	O	O
nuclear	O	O	O	O
extracts	O	O	O	O
from	O	O	O	O
two	O	O	O	O
human	B-cell_line	O	O	O
B	I-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
lines	I-cell_line	O	O	O
in	O	O	O	O
which	O	O	O	O
increased	O	O	O	O
intracellular	O	O	O	O
free	O	O	O	O
calcium	O	O	O	O
levels	O	O	O	O
correlated	O	O	O	O
with	O	O	O	O
increased	O	O	O	O
phosphorylation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
Ets	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
protein	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Activity	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
CaM	B-protein	O	O	O
kinases	I-protein	O	O	O
was	O	O	O	O
determined	O	O	O	O
using	O	O	O	O
a	O	O	O	O
synthetic	O	O	O	O
peptide	O	O	O	O
substrate	O	O	O	O
both	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
absence	O	O	O	O
and	O	O	O	O
presence	O	O	O	O
of	O	O	O	O
an	O	O	O	O
inhibitor	O	O	O	O
specific	O	O	O	O
for	O	O	O	O
the	O	O	O	O
CaM	B-protein	B-protein	O	O
kinase	I-protein	I-protein	O	O
family	O	I-protein	O	O
,	O	O	O	O
KN	O	O	O	O
-	O	O	O	O
62	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Stimulation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
cells	O	O	O	O
with	O	O	O	O
anti	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
IgM	I-protein	O	O	O
led	O	O	O	O
to	O	O	O	O
increased	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
of	O	O	O	O
a	O	O	O	O
nuclear	B-protein	O	O	O
kinase	I-protein	O	O	O
that	O	O	O	O
could	O	O	O	O
phosphorylate	O	O	O	O
the	O	O	O	O
peptide	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
this	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
was	O	O	O	O
reduced	O	O	O	O
by	O	O	O	O
10	O	O	O	O
microM	O	O	O	O
KN	O	O	O	O
-	O	O	O	O
62	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Kinase	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
was	O	O	O	O
reduced	O	O	O	O
in	O	O	O	O
lysates	O	O	O	O
preadsorbed	O	O	O	O
using	O	O	O	O
an	O	O	O	O
antibody	B-protein	O	O	O
specific	O	O	O	O
for	O	O	O	O
CaM	B-protein	O	O	O
kinase	I-protein	O	O	O
II	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Two	O	O	O	O
-	O	O	O	O
dimensional	O	O	O	O
phosphopeptide	O	O	O	O
maps	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
Ets	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
protein	O	O	O	O
from	O	O	O	O
cells	O	O	O	O
incubated	O	O	O	O
with	O	O	O	O
ionomycin	O	O	O	O
or	O	O	O	O
anti	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
IgM	I-protein	O	O	O
contained	O	O	O	O
two	O	O	O	O
unique	O	O	O	O
phosphopeptides	O	O	O	O
that	O	O	O	O
were	O	O	O	O
absent	O	O	O	O
in	O	O	O	O
untreated	O	O	O	O
cells	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Incubation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
isolated	B-protein	O	O	O
Ets	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
with	O	O	O	O
purified	O	O	O	O
CaM	B-protein	O	O	O
kinase	I-protein	O	O	O
II	I-protein	O	O	O
produced	O	O	O	O
phosphorylation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
peptides	O	O	O	O
that	O	O	O	O
migrated	O	O	O	O
identically	O	O	O	O
to	O	O	O	O
those	O	O	O	O
found	O	O	O	O
in	O	O	O	O
cells	O	O	O	O
incubated	O	O	O	O
with	O	O	O	O
either	O	O	O	O
anti	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
IgM	I-protein	O	O	O
or	O	O	O	O
ionomycin	O	O	O	O
.	O	O	O	O

These	O	O	O	O
data	O	O	O	O
suggest	O	O	O	O
a	O	O	O	O
model	O	O	O	O
of	O	O	O	O
signal	O	O	O	O
transduction	O	O	O	O
by	O	O	O	O
the	O	O	O	O
antigen	B-protein	O	O	O
receptor	I-protein	O	O	O
on	O	O	O	O
B	B-cell_type	O	O	O
lymphocytes	I-cell_type	O	O	O
in	O	O	O	O
which	O	O	O	O
increased	O	O	O	O
intracellular	O	O	O	O
free	O	O	O	O
calcium	O	O	O	O
can	O	O	O	O
rapidly	O	O	O	O
activate	O	O	O	O
nuclear	B-protein	O	O	O
CaM	I-protein	O	O	O
kinase	I-protein	O	O	O
II	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
potentially	O	O	O	O
resulting	O	O	O	O
in	O	O	O	O
phosphorylation	O	O	O	O
and	O	O	O	O
regulation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
DNA	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
binding	I-protein	O	O	O
proteins	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Transcriptional	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
and	O	O	O	O
repression	O	O	O	O
,	O	O	O	O
two	O	O	O	O
properties	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
lymphoid	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
specific	I-protein	O	O	O
transcription	I-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
Oct	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2a	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
lymphoid	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
specific	I-protein	O	O	O
transcription	I-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
Oct	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2a	I-protein	O	O	O
contains	O	O	O	O
two	O	O	O	O
transcriptional	B-protein	O	O	O
activation	I-protein	O	O	O
domains	I-protein	O	O	O
which	O	O	O	O
are	O	O	O	O
located	O	O	O	O
within	O	O	O	O
the	O	O	O	O
N	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
terminal	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
C	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
terminal	I-protein	O	O	O
regions	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

To	O	O	O	O
study	O	O	O	O
their	O	O	O	O
differential	B-protein	O	O	O
activation	I-protein	O	O	O
properties	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
we	O	O	O	O
linked	O	O	O	O
the	O	O	O	O
isolated	O	O	O	O
effector	B-protein	O	O	O
domains	I-protein	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
GAL4	B-protein	O	O	O
DNA	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
binding	I-protein	O	O	O
domain	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
have	O	O	O	O
shown	O	O	O	O
that	O	O	O	O
both	O	O	O	O
activating	O	O	O	O
regions	O	O	O	O
of	O	O	O	O
Oct	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2a	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
isolated	O	O	O	O
from	O	O	O	O
their	O	O	O	O
natural	O	O	O	O
context	O	O	O	O
,	O	O	O	O
can	O	O	O	O
activate	O	O	O	O
transcription	O	O	O	O
as	O	O	O	O
promoter	B-protein	O	O	O
factors	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
contrast	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
C	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
terminus	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
by	O	O	O	O
the	O	O	O	O
N	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
terminal	I-protein	O	O	O
domain	I-protein	O	O	O
is	O	O	O	O
dependent	O	O	O	O
on	O	O	O	O
a	O	O	O	O
yet	O	O	O	O
unidentified	O	O	O	O
factor	O	O	O	O
(	O	O	O	O
s	O	O	O	O
)	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
simian	B-DNA	O	O	O
virus	I-DNA	O	O	O
40	I-DNA	O	O	O
enhancer	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
results	O	O	O	O
obtained	O	O	O	O
by	O	O	O	O
duplication	O	O	O	O
of	O	O	O	O
activation	B-protein	O	O	O
domains	I-protein	O	O	O
or	O	O	O	O
their	O	O	O	O
mixed	O	O	O	O
combination	O	O	O	O
suggest	O	O	O	O
that	O	O	O	O
the	O	O	O	O
domains	O	O	O	O
are	O	O	O	O
functionally	O	O	O	O
independent	O	O	O	O
.	O	O	O	O

However	O	O	O	O
,	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
from	O	O	O	O
a	O	O	O	O
remote	O	O	O	O
position	O	O	O	O
could	O	O	O	O
only	O	O	O	O
be	O	O	O	O
achieved	O	O	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
C	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
terminus	I-protein	O	O	O
of	O	O	O	O
Oct	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2a	I-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
B	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
lymphoid	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
,	O	O	O	O
higher	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
levels	O	O	O	O
were	O	O	O	O
observed	O	O	O	O
,	O	O	O	O
suggesting	O	O	O	O
that	O	O	O	O
distinct	O	O	O	O
B	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
cell	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
specific	I-protein	O	O	O
cofactors	I-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
concert	O	O	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
effector	B-protein	O	O	O
domains	I-protein	O	O	O
of	O	O	O	O
Oct	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2a	I-protein	O	O	O
might	O	O	O	O
be	O	O	O	O
involved	O	O	O	O
in	O	O	O	O
mediating	O	O	O	O
transcription	O	O	O	O
from	O	O	O	O
proximal	O	O	O	O
and	O	O	O	O
remote	O	O	O	O
positions	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Furthermore	O	O	O	O
,	O	O	O	O
we	O	O	O	O
identified	O	O	O	O
a	O	O	O	O
repression	O	O	O	O
domain	O	O	O	O
at	O	O	O	O
the	O	O	O	O
N	O	O	O	O
-	O	O	O	O
terminus	O	O	O	O
of	O	O	O	O
Oct	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2a	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

When	O	O	O	O
transferred	O	O	O	O
to	O	O	O	O
a	O	O	O	O
potent	O	O	O	O
activator	O	O	O	O
,	O	O	O	O
transcriptional	O	O	O	O
stimulation	O	O	O	O
was	O	O	O	O
inhibited	O	O	O	O
efficiently	O	O	O	O
.	O	O	O	O

These	O	O	O	O
results	O	O	O	O
underscore	O	O	O	O
the	O	O	O	O
modular	O	O	O	O
structure	O	O	O	O
of	O	O	O	O
Oct	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2a	I-protein	O	O	O
with	O	O	O	O
separable	O	O	O	O
domains	O	O	O	O
for	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
and	O	O	O	O
repression	O	O	O	O
and	O	O	O	O
suggest	O	O	O	O
that	O	O	O	O
Oct	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2a	I-protein	O	O	O
might	O	O	O	O
have	O	O	O	O
complex	O	O	O	O
regulatory	O	O	O	O
functions	O	O	O	O
in	O	O	O	O
vivo	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Nonopsonic	O	O	O	O
phagocytosis	O	O	O	O
of	O	O	O	O
Pseudomonas	O	O	O	O
aeruginosa	O	O	O	O
by	O	O	O	O
macrophages	B-cell_type	O	O	O
and	O	O	O	O
polymorphonuclear	B-cell_type	O	O	O
leukocytes	I-cell_type	O	O	O
requires	O	O	O	O
the	O	O	O	O
presence	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
bacterial	O	O	O	O
flagellum	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Whereas	O	O	O	O
the	O	O	O	O
mechanism	O	O	O	O
of	O	O	O	O
nonopsonic	O	O	O	O
phagocytosis	O	O	O	O
of	O	O	O	O
Pseudomonas	O	O	O	O
aeruginosa	O	O	O	O
has	O	O	O	O
been	O	O	O	O
described	O	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
bacterial	O	O	O	O
ligands	O	O	O	O
required	O	O	O	O
are	O	O	O	O
poorly	O	O	O	O
understood	O	O	O	O
.	O	O	O	O

To	O	O	O	O
identify	O	O	O	O
the	O	O	O	O
requisite	O	O	O	O
bacterial	O	O	O	O
ligands	O	O	O	O
,	O	O	O	O
studies	O	O	O	O
with	O	O	O	O
isogenic	O	O	O	O
mutants	O	O	O	O
of	O	O	O	O
P	O	O	O	O
.	O	O	O	O
aeruginosa	O	O	O	O
PAK	O	O	O	O
lacking	O	O	O	O
pili	O	O	O	O
,	O	O	O	O
flagella	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
the	O	O	O	O
RpoN	B-protein	O	O	O
sigma	I-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
were	O	O	O	O
undertaken	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
RpoN	O	O	O	O
mutant	O	O	O	O
,	O	O	O	O
lacking	O	O	O	O
pili	O	O	O	O
,	O	O	O	O
flagella	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
nonpilus	B-protein	O	O	O
adhesins	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
bound	O	O	O	O
poorly	O	O	O	O
and	O	O	O	O
was	O	O	O	O
resistant	O	O	O	O
to	O	O	O	O
ingestion	O	O	O	O
by	O	O	O	O
both	O	O	O	O
macrophages	B-cell_type	O	O	O
and	O	O	O	O
neutrophils	B-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

Pili	O	O	O	O
were	O	O	O	O
not	O	O	O	O
absolutely	O	O	O	O
required	O	O	O	O
for	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
or	O	O	O	O
phagocytosis	O	O	O	O
of	O	O	O	O
P	O	O	O	O
.	O	O	O	O
aeruginosa	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
presence	O	O	O	O
of	O	O	O	O
a	O	O	O	O
flagellum	O	O	O	O
was	O	O	O	O
not	O	O	O	O
required	O	O	O	O
for	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
of	O	O	O	O
P	O	O	O	O
.	O	O	O	O
aeruginosa	O	O	O	O
to	O	O	O	O
macrophages	B-cell_type	O	O	O
but	O	O	O	O
was	O	O	O	O
critical	O	O	O	O
for	O	O	O	O
the	O	O	O	O
subsequent	O	O	O	O
internalization	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
bacterium	O	O	O	O
,	O	O	O	O
suggesting	O	O	O	O
that	O	O	O	O
this	O	O	O	O
factor	O	O	O	O
or	O	O	O	O
a	O	O	O	O
surface	O	O	O	O
ligand	O	O	O	O
associated	O	O	O	O
with	O	O	O	O
its	O	O	O	O
assembly	O	O	O	O
was	O	O	O	O
responsible	O	O	O	O
for	O	O	O	O
stimulation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
nonopsonic	O	O	O	O
phagocytosis	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Identification	O	O	O	O
of	O	O	O	O
essential	O	O	O	O
GATA	B-DNA	O	O	O
and	O	O	O	O
Ets	B-DNA	O	O	O
binding	I-DNA	O	O	O
motifs	I-DNA	O	O	O
within	O	O	O	O
the	O	O	O	O
promoter	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
platelet	B-DNA	O	O	O
glycoprotein	I-DNA	O	O	O
Ib	I-DNA	O	O	O
alpha	I-DNA	O	O	O
gene	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

Platelet	B-protein	O	O	O
glycoprotein	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
GP	B-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
Ib	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
IX	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
V	I-protein	O	O	O
is	O	O	O	O
a	O	O	O	O
multisubunit	B-protein	O	O	O
adhesion	I-protein	O	O	O
receptor	I-protein	O	O	O
that	O	O	O	O
supports	O	O	O	O
platelet	O	O	O	O
attachment	O	O	O	O
to	O	O	O	O
thrombogenic	O	O	O	O
surfaces	O	O	O	O
at	O	O	O	O
sites	O	O	O	O
of	O	O	O	O
vascular	O	O	O	O
injury	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
congenital	O	O	O	O
absence	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
receptor	O	O	O	O
results	O	O	O	O
in	O	O	O	O
a	O	O	O	O
bleeding	O	O	O	O
disorder	O	O	O	O
associated	O	O	O	O
with	O	O	O	O
"	B-cell_type	O	O	O
giant	I-cell_type	O	O	O
"	I-cell_type	O	O	O
platelets	I-cell_type	O	O	O
,	O	O	O	O
a	O	O	O	O
condition	O	O	O	O
linking	O	O	O	O
the	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
complex	O	O	O	O
to	O	O	O	O
platelet	O	O	O	O
morphogenesis	O	O	O	O
.	O	O	O	O

To	O	O	O	O
understand	O	O	O	O
better	O	O	O	O
the	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
GP	B-protein	B-protein	O	O
Ib	B-protein	I-protein	O	O
-	I-protein	I-protein	O	O
IX	I-protein	I-protein	O	O
-	I-protein	I-protein	O	O
V	I-protein	I-protein	O	O
complex	O	I-protein	O	O
,	O	O	O	O
studies	O	O	O	O
were	O	O	O	O
undertaken	O	O	O	O
to	O	O	O	O
define	O	O	O	O
the	O	O	O	O
essential	O	O	O	O
genetic	B-DNA	O	O	O
elements	I-DNA	O	O	O
supporting	O	O	O	O
the	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
alpha	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
subunit	I-protein	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
complex	O	O	O	O
(	O	O	O	O
GP	B-protein	B-protein	O	O
Ib	O	I-protein	O	O
alpha	O	I-protein	O	O
)	O	O	O	O
.	O	O	O	O

GP	B-protein	B-DNA	O	O
Ib	O	I-DNA	O	O
alpha	O	I-DNA	O	O
promoter	O	I-DNA	O	O
activity	O	O	O	O
was	O	O	O	O
evaluated	O	O	O	O
by	O	O	O	O
transfection	O	O	O	O
of	O	O	O	O
human	B-cell_type	O	O	O
erythroleukemia	I-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
with	O	O	O	O
reporter	O	O	O	O
plasmids	O	O	O	O
coding	O	O	O	O
for	O	O	O	O
the	O	O	O	O
enzyme	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
luciferase	B-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Studies	O	O	O	O
were	O	O	O	O
initiated	O	O	O	O
with	O	O	O	O
a	O	O	O	O
fragment	O	O	O	O
extending	O	O	O	O
2	O	O	O	O
,	O	O	O	O
738	O	O	O	O
nucleotides	O	O	O	O
5	O	O	O	O
'	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
transcription	B-DNA	O	O	O
start	I-DNA	O	O	O
site	I-DNA	O	O	O
and	O	O	O	O
lead	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
identification	O	O	O	O
of	O	O	O	O
253	O	O	O	O
nucleotides	O	O	O	O
retaining	O	O	O	O
full	O	O	O	O
promoter	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
in	O	O	O	O
human	B-cell_type	O	O	O
erythroleukemia	I-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
cells	O	O	O	O
of	O	O	O	O
nonhematopoietic	B-cell_type	O	O	O
lineage	I-cell_type	O	O	O
,	O	O	O	O
human	B-cell_type	O	O	O
endothelial	I-cell_type	O	O	O
and	O	O	O	O
HeLa	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
GP	B-protein	B-protein	B-DNA	O
Ib	O	I-protein	I-DNA	O
alpha	O	I-protein	I-DNA	O
promoter	O	O	I-DNA	O
activity	O	O	O	O
was	O	O	O	O
no	O	O	O	O
greater	O	O	O	O
than	O	O	O	O
background	O	O	O	O
levels	O	O	O	O
obtained	O	O	O	O
with	O	O	O	O
promoterless	B-DNA	O	O	O
constructs	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

Gel	O	O	O	O
shift	O	O	O	O
assays	O	O	O	O
and	O	O	O	O
site	O	O	O	O
-	O	O	O	O
directed	O	O	O	O
mutagenesis	O	O	O	O
studies	O	O	O	O
defined	O	O	O	O
essential	O	O	O	O
GATA	B-DNA	O	O	O
and	O	O	O	O
Ets	B-DNA	O	O	O
binding	I-DNA	O	O	O
motifs	I-DNA	O	O	O
93	B-DNA	O	O	O
and	I-DNA	O	O	O
150	I-DNA	O	O	O
nucleotides	I-DNA	O	O	O
upstream	I-DNA	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
transcription	B-DNA	O	O	O
start	I-DNA	O	O	O
site	I-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
a	O	O	O	O
finding	O	O	O	O
which	O	O	O	O
further	O	O	O	O
substantiates	O	O	O	O
these	O	O	O	O
elements	O	O	O	O
as	O	O	O	O
important	O	O	O	O
determinants	O	O	O	O
of	O	O	O	O
megakaryocytic	O	O	O	O
gene	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
results	O	O	O	O
define	O	O	O	O
essential	O	O	O	O
cis	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
acting	I-DNA	O	O	O
elements	I-DNA	O	O	O
responsible	O	O	O	O
for	O	O	O	O
the	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
GP	B-protein	B-protein	O	O
Ib	O	I-protein	O	O
alpha	O	I-protein	O	O
and	O	O	O	O
provide	O	O	O	O
insights	O	O	O	O
into	O	O	O	O
molecular	O	O	O	O
events	O	O	O	O
coinciding	O	O	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
release	O	O	O	O
of	O	O	O	O
normal	B-cell_type	O	O	O
platelets	I-cell_type	O	O	O
into	O	O	O	O
the	O	O	O	O
bloodstream	O	O	O	O
.	O	O	O	O

CD30	B-protein	O	O	O
ligation	O	O	O	O
induces	O	O	O	O
nuclear	B-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
activation	O	O	O	O
in	O	O	O	O
human	B-cell_line	O	O	O
T	I-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
lines	I-cell_line	O	O	O
.	O	O	O	O

CD30	B-protein	O	O	O
is	O	O	O	O
a	O	O	O	O
recently	O	O	O	O
described	O	O	O	O
member	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
tumor	B-protein	B-protein	O	O
necrosis	I-protein	I-protein	O	O
factor	I-protein	I-protein	O	O
/	B-protein	I-protein	O	O
nerve	I-protein	I-protein	O	O
growth	I-protein	I-protein	O	O
factor	I-protein	I-protein	O	O
receptor	O	I-protein	O	O
superfamily	O	I-protein	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
this	O	O	O	O
report	O	O	O	O
,	O	O	O	O
we	O	O	O	O
show	O	O	O	O
that	O	O	O	O
following	O	O	O	O
incubation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
L540	B-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
(	O	O	O	O
Hodgkin	O	B-cell_line	O	O
'	O	I-cell_line	O	O
s	O	I-cell_line	O	O
disease	O	I-cell_line	O	O
-	O	I-cell_line	O	O
derived	O	I-cell_line	O	O
,	O	I-cell_line	O	O
T	O	I-cell_line	O	O
cell	O	I-cell_line	O	O
-	O	I-cell_line	O	O
like	O	I-cell_line	O	O
,	O	I-cell_line	O	O
CD30	B-protein	I-cell_line	O	O
+	O	I-cell_line	O	O
cells	O	I-cell_line	O	O
)	O	O	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
agonistic	O	B-protein	O	O
anti	O	I-protein	O	O
-	O	I-protein	O	O
CD30	B-protein	I-protein	O	O
monoclonal	O	I-protein	O	O
antibodies	O	I-protein	O	O
(	O	O	O	O
mAb	B-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
M44	B-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
M67	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
two	O	O	O	O
nuclear	B-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
(	I-protein	O	O	O
NF	I-protein	O	O	O
)	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
DNA	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
activities	O	O	O	O
were	O	O	O	O
induced	O	O	O	O
in	O	O	O	O
nuclear	O	O	O	O
extracts	O	O	O	O
,	O	O	O	O
as	O	O	O	O
determined	O	O	O	O
in	O	O	O	O
gel	O	O	O	O
retardation	O	O	O	O
assays	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
effect	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
mAb	B-protein	O	O	O
towards	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
activation	O	O	O	O
was	O	O	O	O
rapid	O	O	O	O
,	O	O	O	O
as	O	O	O	O
it	O	O	O	O
occurred	O	O	O	O
within	O	O	O	O
20	O	O	O	O
min	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
was	O	O	O	O
sustained	O	O	O	O
for	O	O	O	O
up	O	O	O	O
to	O	O	O	O
6	O	O	O	O
h	O	O	O	O
.	O	O	O	O

By	O	O	O	O
comparison	O	O	O	O
,	O	O	O	O
an	O	O	O	O
isotype	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
matched	I-protein	O	O	O
antibody	I-protein	O	O	O
had	O	O	O	O
no	O	O	O	O
effect	O	O	O	O
on	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
activation	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Moreover	O	O	O	O
,	O	O	O	O
in	O	O	O	O
human	B-cell_line	O	O	O
T	I-cell_line	O	O	O
helper	I-cell_line	O	O	O
(	I-cell_line	O	O	O
Th	I-cell_line	O	O	O
)	I-cell_line	O	O	O
clones	I-cell_line	O	O	O
functionally	O	O	O	O
characterized	O	O	O	O
as	O	O	O	O
being	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
type	O	O	O	O
0	O	O	O	O
,	O	O	O	O
type	O	O	O	O
1	O	O	O	O
and	O	O	O	O
type	O	O	O	O
2	O	O	O	O
(	O	O	O	O
28	O	O	O	O
%	O	O	O	O
,	O	O	O	O
<	O	O	O	O
1	O	O	O	O
%	O	O	O	O
und	O	O	O	O
93	O	O	O	O
%	O	O	O	O
CD30	O	O	O	O
+	O	O	O	O
,	O	O	O	O
respectively	O	O	O	O
)	O	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
extent	O	O	O	O
of	O	O	O	O
CD30	B-protein	O	O	O
-	O	O	O	O
mediated	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
activation	O	O	O	O
correlated	O	O	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
proportion	O	O	O	O
of	O	O	O	O
CD30	B-cell_line	O	O	O
+	I-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
all	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
lines	O	O	O	O
investigated	O	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
NF	B-protein	B-protein	O	O
-	I-protein	I-protein	O	O
kappa	I-protein	I-protein	O	O
B	I-protein	I-protein	O	O
complexes	O	I-protein	O	O
induced	O	O	O	O
following	O	O	O	O
CD30	B-protein	O	O	O
engagement	O	O	O	O
were	O	O	O	O
shown	O	O	O	O
to	O	O	O	O
contain	O	O	O	O
p50	B-protein	O	O	O
NF	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B1	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
p65	B-protein	O	O	O
RelA	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
possibly	O	O	O	O
other	O	O	O	O
transcription	B-protein	O	O	O
factors	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Collectively	O	O	O	O
,	O	O	O	O
our	O	O	O	O
results	O	O	O	O
demonstrate	O	O	O	O
that	O	O	O	O
nuclear	O	O	O	O
translocation	O	O	O	O
and	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
rank	O	O	O	O
among	O	O	O	O
the	O	O	O	O
short	O	O	O	O
-	O	O	O	O
term	O	O	O	O
cellular	O	O	O	O
responses	O	O	O	O
elicited	O	O	O	O
following	O	O	O	O
CD30	B-protein	O	O	O
ligation	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Pathogenesis	O	O	O	O
of	O	O	O	O
atherosclerosis	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
earliest	O	O	O	O
lesion	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
development	O	O	O	O
of	O	O	O	O
an	O	O	O	O
atherosclerotic	O	O	O	O
plaque	O	O	O	O
is	O	O	O	O
the	O	O	O	O
fatty	O	O	O	O
streak	O	O	O	O
.	O	O	O	O

This	O	O	O	O
chronic	O	O	O	O
inflammatory	O	O	O	O
reaction	O	O	O	O
results	O	O	O	O
from	O	O	O	O
a	O	O	O	O
sequence	O	O	O	O
of	O	O	O	O
events	O	O	O	O
that	O	O	O	O
begins	O	O	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
trapping	O	O	O	O
of	O	O	O	O
low	O	O	O	O
density	O	O	O	O
lipoprotein	O	O	O	O
(	O	O	O	O
LDL	O	O	O	O
)	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
subendothelial	O	O	O	O
space	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
artery	O	O	O	O
wall	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
trapped	O	O	O	O
LDL	O	O	O	O
is	O	O	O	O
seeded	O	O	O	O
with	O	O	O	O
oxidative	O	O	O	O
species	O	O	O	O
released	O	O	O	O
by	O	O	O	O
the	O	O	O	O
overlying	O	O	O	O
endothelium	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
lipid	O	O	O	O
oxidation	O	O	O	O
is	O	O	O	O
initiated	O	O	O	O
within	O	O	O	O
the	O	O	O	O
LDL	O	O	O	O
particle	O	O	O	O
.	O	O	O	O
Some	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
lipids	O	O	O	O
that	O	O	O	O
result	O	O	O	O
lead	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
NFkB	O	B-protein	O	O
-	O	I-protein	O	O
like	O	I-protein	O	O
transcription	B-protein	I-protein	O	O
factors	I-protein	I-protein	O	O
that	O	O	O	O
cause	O	O	O	O
the	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
genes	O	O	O	O
whose	O	O	O	O
protein	B-protein	O	O	O
products	I-protein	O	O	O
mediate	O	O	O	O
monocyte	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
,	O	O	O	O
monocyte	B-cell_type	O	O	O
chemotaxis	O	O	O	O
into	O	O	O	O
the	O	O	O	O
subendothelial	O	O	O	O
space	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
conversion	O	O	O	O
into	O	O	O	O
macrophages	B-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

At	O	O	O	O
least	O	O	O	O
1	O	O	O	O
major	B-DNA	O	O	O
gene	I-DNA	O	O	O
modulates	O	O	O	O
the	O	O	O	O
oxidation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
LDL	O	O	O	O
lipids	O	O	O	O
and	O	O	O	O
/	O	O	O	O
or	O	O	O	O
the	O	O	O	O
biologic	O	O	O	O
response	O	O	O	O
to	O	O	O	O
these	O	O	O	O
lipids	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
inverse	O	O	O	O
relation	O	O	O	O
between	O	O	O	O
high	O	O	O	O
density	O	O	O	O
lipoprotein	O	O	O	O
(	O	O	O	O
HDL	O	O	O	O
)	O	O	O	O
and	O	O	O	O
atherosclerotic	O	O	O	O
events	O	O	O	O
may	O	O	O	O
in	O	O	O	O
part	O	O	O	O
be	O	O	O	O
due	O	O	O	O
to	O	O	O	O
enzymes	B-protein	O	O	O
associated	O	O	O	O
with	O	O	O	O
HDL	O	O	O	O
that	O	O	O	O
destroy	O	O	O	O
the	O	O	O	O
biologically	O	O	O	O
active	O	O	O	O
lipids	O	O	O	O
generated	O	O	O	O
in	O	O	O	O
LDL	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Estrogen	B-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
progesterone	B-protein	O	O	O
receptors	I-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
vernal	O	O	O	O
keratoconjunctivitis	O	O	O	O
.	O	O	O	O

PURPOSE	O	O	O	O
:	O	O	O	O
Sex	O	O	O	O
-	O	O	O	O
related	O	O	O	O
influences	O	O	O	O
have	O	O	O	O
been	O	O	O	O
implicated	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
pathogenesis	O	O	O	O
of	O	O	O	O
vernal	O	O	O	O
keratoconjunctivitis	O	O	O	O
(	O	O	O	O
VKC	O	O	O	O
)	O	O	O	O
,	O	O	O	O
an	O	O	O	O
allergic	O	O	O	O
eosinophilic	O	O	O	O
disease	O	O	O	O
.	O	O	O	O

METHODS	O	O	O	O
:	O	O	O	O
The	O	O	O	O
authors	O	O	O	O
evaluated	O	O	O	O
tarsal	O	O	O	O
and	O	O	O	O
bulbar	O	O	O	O
conjunctival	O	O	O	O
biopsies	O	O	O	O
from	O	O	O	O
seven	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
with	O	O	O	O
severe	O	O	O	O
and	O	O	O	O
symptomatic	O	O	O	O
VKC	O	O	O	O
for	O	O	O	O
the	O	O	O	O
presence	O	O	O	O
of	O	O	O	O
estrogen	O	O	O	O
and	O	O	O	O
progesterone	B-protein	O	O	O
receptors	I-protein	O	O	O
by	O	O	O	O
using	O	O	O	O
monoclonal	B-protein	O	O	O
antibodies	I-protein	O	O	O
with	O	O	O	O
a	O	O	O	O
peroxidase	O	O	O	O
-	O	O	O	O
antiperoxidase	O	O	O	O
technique	O	O	O	O
.	O	O	O	O

RESULTS	O	O	O	O
:	O	O	O	O
Both	O	O	O	O
the	O	O	O	O
epithelium	O	O	O	O
and	O	O	O	O
subepithelium	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
tarsal	O	O	O	O
and	O	O	O	O
bulbar	O	O	O	O
conjunctiva	O	O	O	O
of	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
with	O	O	O	O
VKC	O	O	O	O
,	O	O	O	O
but	O	O	O	O
not	O	O	O	O
those	O	O	O	O
of	O	O	O	O
four	O	O	O	O
nonatopic	O	O	O	O
control	O	O	O	O
subjects	O	O	O	O
,	O	O	O	O
showed	O	O	O	O
intense	O	O	O	O
positive	O	O	O	O
staining	O	O	O	O
for	O	O	O	O
estrogen	O	O	O	O
and	O	O	O	O
progesterone	B-protein	O	O	O
receptors	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Immunofluorescence	O	O	O	O
colocalization	O	O	O	O
of	O	O	O	O
both	O	O	O	O
estrogen	B-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
progesterone	B-protein	O	O	O
receptors	I-protein	O	O	O
with	O	O	O	O
eosinophil	B-protein	O	O	O
cationic	I-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
showed	O	O	O	O
that	O	O	O	O
approximately	O	O	O	O
70	O	O	O	O
%	O	O	O	O
of	O	O	O	O
positive	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
were	O	O	O	O
eosinophils	B-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

CONCLUSIONS	O	O	O	O
:	O	O	O	O
Sexual	O	O	O	O
hormones	O	O	O	O
,	O	O	O	O
through	O	O	O	O
their	O	O	O	O
receptors	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
may	O	O	O	O
influence	O	O	O	O
the	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
of	O	O	O	O
eosinophils	B-cell_type	O	O	O
in	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
with	O	O	O	O
VKC	O	O	O	O
.	O	O	O	O

CIITA	B-protein	O	O	O
activates	O	O	O	O
the	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
MHC	B-DNA	O	O	O
class	I-DNA	O	O	O
II	I-DNA	O	O	O
genes	I-DNA	O	O	O
in	O	O	O	O
mouse	O	O	O	O
T	O	O	O	O
cells	O	O	O	O
.	O	O	O	O

It	O	O	O	O
has	O	O	O	O
long	O	O	O	O
been	O	O	O	O
a	O	O	O	O
puzzle	O	O	O	O
that	O	O	O	O
MHC	B-protein	O	O	O
class	I-protein	O	O	O
II	I-protein	O	O	O
molecules	I-protein	O	O	O
are	O	O	O	O
expressed	O	O	O	O
in	O	O	O	O
human	B-cell_type	O	O	O
T	I-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
after	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
but	O	O	O	O
not	O	O	O	O
in	O	O	O	O
mouse	B-cell_type	O	O	O
T	I-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
;	O	O	O	O
this	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
is	O	O	O	O
believed	O	O	O	O
to	O	O	O	O
play	O	O	O	O
a	O	O	O	O
role	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
mediated	O	O	O	O
immune	O	O	O	O
response	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Recently	O	O	O	O
the	O	O	O	O
MHC	B-protein	O	O	O
class	I-protein	O	O	O
II	I-protein	O	O	O
transactivator	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
CIITA	B-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
has	O	O	O	O
been	O	O	O	O
reported	O	O	O	O
to	O	O	O	O
be	O	O	O	O
a	O	O	O	O
major	B-protein	O	O	O
regulatory	I-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
for	O	O	O	O
both	O	O	O	O
the	O	O	O	O
constitutive	O	O	O	O
and	O	O	O	O
IFN	O	O	O	O
inducible	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
MHC	B-DNA	O	O	O
class	I-DNA	O	O	O
II	I-DNA	O	O	O
genes	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

Here	O	O	O	O
we	O	O	O	O
show	O	O	O	O
that	O	O	O	O
human	B-cell_type	O	O	O
T	I-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
expressing	O	O	O	O
MHC	O	O	O	O
class	O	O	O	O
II	O	O	O	O
have	O	O	O	O
CIITA	B-protein	O	O	O
transcripts	O	O	O	O
while	O	O	O	O
MHC	O	O	O	O
class	O	O	O	O
II	O	O	O	O
-	O	O	O	O
negative	O	O	O	O
human	B-cell_type	O	O	O
T	I-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
and	O	O	O	O
mouse	B-cell_type	O	O	O
T	I-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
do	O	O	O	O
not	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
MHC	B-DNA	O	O	O
class	I-DNA	O	O	O
II	I-DNA	O	O	O
genes	I-DNA	O	O	O
in	O	O	O	O
mouse	B-cell_type	O	O	O
T	I-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
can	O	O	O	O
be	O	O	O	O
reconstituted	O	O	O	O
upon	O	O	O	O
transfection	O	O	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
human	O	B-DNA	O	O
CIITA	B-protein	I-DNA	O	O
cDNA	O	I-DNA	O	O
.	O	O	O	O

These	O	O	O	O
data	O	O	O	O
indicate	O	O	O	O
that	O	O	O	O
the	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
CIITA	B-protein	O	O	O
explains	O	O	O	O
the	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
or	O	O	O	O
lack	O	O	O	O
of	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
MHC	B-protein	O	O	O
class	I-protein	O	O	O
II	I-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
human	B-cell_type	O	O	O
and	O	O	O	O
mouse	B-cell_type	O	O	O
T	I-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
respectively	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Anti	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
Ro	I-protein	O	O	O
(	I-protein	O	O	O
SSA	I-protein	O	O	O
)	I-protein	O	O	O
autoantibodies	I-protein	O	O	O
are	O	O	O	O
associated	O	O	O	O
with	O	O	O	O
T	B-DNA	O	O	O
cell	I-DNA	O	O	O
receptor	I-DNA	O	O	O
beta	I-DNA	O	O	O
genes	I-DNA	O	O	O
in	O	O	O	O
systemic	O	O	O	O
lupus	O	O	O	O
erythematosus	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Several	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
heterogeneous	O	O	O	O
clinical	O	O	O	O
manifestations	O	O	O	O
of	O	O	O	O
systemic	O	O	O	O
lupus	O	O	O	O
erythematosus	O	O	O	O
have	O	O	O	O
been	O	O	O	O
associated	O	O	O	O
with	O	O	O	O
specific	O	O	O	O
autoantibodies	B-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Associations	O	O	O	O
between	O	O	O	O
HLA	B-protein	O	O	O
class	I-protein	O	O	O
II	I-protein	O	O	O
antigens	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
autoantibodies	B-protein	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
ribonucleoproteins	B-protein	O	O	O
Ro	B-protein	O	O	O
(	I-protein	O	O	O
SSA	I-protein	O	O	O
)	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
La	B-protein	O	O	O
(	I-protein	O	O	O
SSB	I-protein	O	O	O
)	I-protein	O	O	O
have	O	O	O	O
been	O	O	O	O
reported	O	O	O	O
in	O	O	O	O
these	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Because	O	O	O	O
HLA	B-protein	O	O	O
class	I-protein	O	O	O
II	I-protein	O	O	O
molecules	I-protein	O	O	O
present	O	O	O	O
antigen	O	O	O	O
to	O	O	O	O
T	B-protein	O	O	O
cell	I-protein	O	O	O
receptors	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
TCRs	B-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
,	O	O	O	O
we	O	O	O	O
have	O	O	O	O
searched	O	O	O	O
for	O	O	O	O
a	O	O	O	O
TCR	B-DNA	O	O	O
gene	I-DNA	O	O	O
associated	O	O	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
production	O	O	O	O
of	O	O	O	O
anti	O	B-protein	O	O
-	O	I-protein	O	O
Ro	B-protein	I-protein	O	O
(	I-protein	I-protein	O	O
SSA	I-protein	I-protein	O	O
)	I-protein	I-protein	O	O
antibodies	O	I-protein	O	O
.	O	O	O	O

A	O	O	O	O
pair	O	O	O	O
of	O	O	O	O
restriction	B-DNA	O	O	O
fragment	I-DNA	O	O	O
length	I-DNA	O	O	O
polymorphisms	I-DNA	O	O	O
(	O	O	O	O
RFLPs	B-DNA	O	O	O
)	O	O	O	O
,	O	O	O	O
one	O	O	O	O
of	O	O	O	O
which	O	O	O	O
hybridizes	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
TCR	B-DNA	O	O	O
constant	I-DNA	O	O	O
region	I-DNA	O	O	O
C	I-DNA	O	O	O
beta	I-DNA	O	O	O
1	I-DNA	O	O	O
and	O	O	O	O
the	O	O	O	O
other	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
C	B-DNA	O	O	O
beta	I-DNA	O	O	O
2	I-DNA	O	O	O
gene	I-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
has	O	O	O	O
been	O	O	O	O
identified	O	O	O	O
,	O	O	O	O
suggesting	O	O	O	O
these	O	O	O	O
may	O	O	O	O
be	O	O	O	O
genotypic	O	O	O	O
markers	O	O	O	O
for	O	O	O	O
an	O	O	O	O
extended	O	O	O	O
region	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
TCR	B-DNA	O	O	O
beta	I-DNA	O	O	O
locus	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

This	O	O	O	O
RFLP	B-DNA	O	O	O
pair	I-DNA	O	O	O
occurs	O	O	O	O
in	O	O	O	O
76	O	O	O	O
%	O	O	O	O
of	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
with	O	O	O	O
Ro	B-protein	O	O	O
(	I-protein	O	O	O
SSA	I-protein	O	O	O
)	I-protein	O	O	O
precipitins	O	O	O	O
,	O	O	O	O
84	O	O	O	O
%	O	O	O	O
of	O	O	O	O
anti	O	O	O	O
-	O	O	O	O
Ro	B-protein	O	O	O
(	I-protein	O	O	O
SSA	I-protein	O	O	O
)	I-protein	O	O	O
-	O	O	O	O
positive	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
lacking	O	O	O	O
La	B-protein	O	O	O
(	I-protein	O	O	O
SSB	I-protein	O	O	O
)	I-protein	O	O	O
precipitins	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
but	O	O	O	O
only	O	O	O	O
41	O	O	O	O
%	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
lacking	O	O	O	O
both	O	O	O	O
precipitins	B-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
P	O	O	O	O
=	O	O	O	O
0	O	O	O	O
.	O	O	O	O
0004	O	O	O	O
)	O	O	O	O
.	O	O	O	O

This	O	O	O	O
disproportionate	O	O	O	O
occurrence	O	O	O	O
in	O	O	O	O
a	O	O	O	O
subset	O	O	O	O
of	O	O	O	O
lupus	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
indicates	O	O	O	O
that	O	O	O	O
these	O	O	O	O
RFLPs	B-DNA	O	O	O
are	O	O	O	O
not	O	O	O	O
disease	O	O	O	O
susceptibility	O	O	O	O
markers	O	O	O	O
,	O	O	O	O
but	O	O	O	O
rather	O	O	O	O
are	O	O	O	O
important	O	O	O	O
markers	O	O	O	O
for	O	O	O	O
TCR	B-DNA	O	O	O
genes	I-DNA	O	O	O
whose	O	O	O	O
products	O	O	O	O
are	O	O	O	O
involved	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
production	O	O	O	O
of	O	O	O	O
anti	O	B-protein	O	O
-	O	I-protein	O	O
Ro	B-protein	I-protein	O	O
(	I-protein	I-protein	O	O
SSA	I-protein	I-protein	O	O
)	I-protein	I-protein	O	O
antibodies	O	I-protein	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
majority	O	O	O	O
of	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
who	O	O	O	O
have	O	O	O	O
these	O	O	O	O
RFLPs	B-DNA	O	O	O
and	O	O	O	O
HLA	B-protein	O	O	O
class	I-protein	O	O	O
II	I-protein	O	O	O
antigens	I-protein	O	O	O
previously	O	O	O	O
associated	O	O	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
anti	O	O	O	O
-	O	O	O	O
Ro	B-protein	O	O	O
(	I-protein	O	O	O
SSA	I-protein	O	O	O
)	I-protein	O	O	O
response	O	O	O	O
make	O	O	O	O
this	O	O	O	O
antibody	O	O	O	O
,	O	O	O	O
suggesting	O	O	O	O
that	O	O	O	O
interactions	O	O	O	O
between	O	O	O	O
products	O	O	O	O
of	O	O	O	O
these	O	O	O	O
loci	B-DNA	O	O	O
occur	I-DNA	O	O	O
in	O	O	O	O
response	O	O	O	O
to	O	O	O	O
Ro	B-protein	O	O	O
(	I-protein	O	O	O
SSA	I-protein	O	O	O
)	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Inhibition	O	O	O	O
of	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
AT	I-protein	O	O	O
-	O	O	O	O
dependent	O	O	O	O
transcription	O	O	O	O
by	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
:	O	O	O	O
implications	O	O	O	O
for	O	O	O	O
differential	O	O	O	O
gene	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
in	O	O	O	O
T	B-cell_type	O	O	O
helper	I-cell_type	O	O	O
cell	I-cell_type	O	O	O
subsets	I-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

Activation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
individual	O	O	O	O
CD4	B-cell_line	O	O	O
+	I-cell_line	O	O	O
T	I-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
results	O	O	O	O
in	O	O	O	O
differential	O	O	O	O
lymphokine	B-protein	O	O	O
expression	O	O	O	O
:	O	O	O	O
interleukin	B-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
IL	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
is	O	O	O	O
preferentially	O	O	O	O
produced	O	O	O	O
by	O	O	O	O
T	B-cell_line	O	O	O
helper	I-cell_line	O	O	O
type	I-cell_line	O	O	O
1	I-cell_line	O	O	O
(	I-cell_line	O	O	O
TH1	I-cell_line	O	O	O
)	I-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
,	O	O	O	O
which	O	O	O	O
are	O	O	O	O
involved	O	O	O	O
in	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
-	O	O	O	O
mediated	O	O	O	O
immune	O	O	O	O
responses	O	O	O	O
,	O	O	O	O
whereas	O	O	O	O
IL	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
4	I-protein	O	O	O
is	O	O	O	O
synthesized	O	O	O	O
by	O	O	O	O
TH2	B-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
,	O	O	O	O
which	O	O	O	O
are	O	O	O	O
essential	O	O	O	O
for	O	O	O	O
humoral	O	O	O	O
immunity	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
Ca	B-protein	O	O	O
(	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
+	I-protein	O	O	O
)	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
dependent	I-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
ATp	I-protein	O	O	O
plays	O	O	O	O
a	O	O	O	O
key	O	O	O	O
role	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
inducible	O	O	O	O
transcription	O	O	O	O
of	O	O	O	O
both	O	O	O	O
these	O	O	O	O
lymphokine	B-DNA	O	O	O
genes	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

However	O	O	O	O
,	O	O	O	O
while	O	O	O	O
IL2	B-protein	O	O	O
expression	O	O	O	O
requires	O	O	O	O
the	O	O	O	O
contribution	O	O	O	O
of	O	O	O	O
Ca	O	O	O	O
(	O	O	O	O
2	O	O	O	O
+	O	O	O	O
)	O	O	O	O
-	O	O	O	O
and	O	O	O	O
protein	B-protein	O	O	O
kinase	I-protein	O	O	O
C	I-protein	O	O	O
-	O	O	O	O
dependent	O	O	O	O
signals	O	O	O	O
,	O	O	O	O
we	O	O	O	O
report	O	O	O	O
that	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
human	B-protein	O	O	O
IL4	I-protein	O	O	O
transcription	O	O	O	O
through	O	O	O	O
the	O	O	O	O
Ca	O	O	O	O
(	O	O	O	O
2	O	O	O	O
+	O	O	O	O
)	O	O	O	O
-	O	O	O	O
dependent	O	O	O	O
pathway	O	O	O	O
is	O	O	O	O
diminished	O	O	O	O
by	O	O	O	O
protein	B-protein	O	O	O
kinase	I-protein	O	O	O
C	I-protein	O	O	O
stimulation	O	O	O	O
in	O	O	O	O
Jurkat	B-cell_line	O	O	O
T	I-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
.	O	O	O	O

This	O	O	O	O
phenomenon	O	O	O	O
is	O	O	O	O
due	O	O	O	O
to	O	O	O	O
mutually	O	O	O	O
exclusive	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
of	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
ATp	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
P	B-DNA	O	O	O
sequence	I-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
an	O	O	O	O
element	O	O	O	O
located	O	O	O	O
69	B-DNA	O	O	O
bp	I-DNA	O	O	O
upstream	I-DNA	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
IL4	B-DNA	O	O	O
transcription	I-DNA	O	O	O
initiation	I-DNA	O	O	O
site	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

Human	B-DNA	O	O	O
IL4	I-DNA	O	O	O
promoter	I-DNA	O	O	O
-	O	O	O	O
mediated	O	O	O	O
transcription	O	O	O	O
is	O	O	O	O
downregulated	O	O	O	O
in	O	O	O	O
Jurkat	B-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
stimulated	O	O	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
NF	B-protein	B-protein	O	O
-	I-protein	I-protein	O	O
kappa	I-protein	I-protein	O	O
B	I-protein	I-protein	O	O
-	O	I-protein	O	O
activating	O	I-protein	O	O
cytokine	O	I-protein	O	O
tumor	B-protein	O	O	O
necrosis	I-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
suppressed	O	O	O	O
in	O	O	O	O
RelA	B-protein	B-cell_line	O	O
-	O	I-cell_line	O	O
overexpressing	O	I-cell_line	O	O
cells	O	I-cell_line	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
contrast	O	O	O	O
,	O	O	O	O
protein	B-protein	O	O	O
kinase	I-protein	O	O	O
C	I-protein	O	O	O
stimulation	O	O	O	O
or	O	O	O	O
RelA	B-protein	O	O	O
overexpression	O	O	O	O
does	O	O	O	O
not	O	O	O	O
affect	O	O	O	O
the	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
of	O	O	O	O
a	O	O	O	O
human	B-protein	B-DNA	O	O
IL4	I-protein	I-DNA	O	O
promoter	O	I-DNA	O	O
containing	O	O	O	O
a	O	O	O	O
mouse	O	B-DNA	O	O
P	B-DNA	I-DNA	O	O
sequence	I-DNA	I-DNA	O	O
,	O	O	O	O
which	O	O	O	O
is	O	O	O	O
a	O	O	O	O
higher	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
affinity	I-DNA	O	O	O
site	I-DNA	O	O	O
for	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
ATp	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
a	O	O	O	O
lower	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
affinity	I-DNA	O	O	O
site	I-DNA	O	O	O
for	O	O	O	O
RelA	B-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Thus	O	O	O	O
,	O	O	O	O
competition	O	O	O	O
between	O	O	O	O
two	O	O	O	O
general	O	O	O	O
transcriptional	B-protein	O	O	O
activators	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
RelA	B-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
ATp	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
mediates	O	O	O	O
the	O	O	O	O
inhibitory	O	O	O	O
effect	O	O	O	O
of	O	O	O	O
protein	B-protein	O	O	O
kinase	I-protein	O	O	O
C	I-protein	O	O	O
stimulation	O	O	O	O
on	O	O	O	O
IL4	B-protein	O	O	O
expression	O	O	O	O
and	O	O	O	O
may	O	O	O	O
contribute	O	O	O	O
to	O	O	O	O
differential	O	O	O	O
gene	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
in	O	O	O	O
TH	B-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
.	O	O	O	O

Regulation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
balance	O	O	O	O
of	O	O	O	O
cytokine	B-protein	O	O	O
production	O	O	O	O
and	O	O	O	O
the	O	O	O	O
signal	O	O	O	O
transducer	O	O	O	O
and	O	O	O	O
activator	O	O	O	O
of	O	O	O	O
transcription	O	O	O	O
(	O	O	O	O
STAT	B-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
transcription	O	O	O	O
factor	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
by	O	O	O	O
cytokines	B-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
inflammatory	O	O	O	O
synovial	O	O	O	O
fluids	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
balance	O	O	O	O
between	O	O	O	O
type	O	O	O	O
1	O	O	O	O
and	O	O	O	O
2	O	O	O	O
T	O	O	O	O
helper	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
cytokine	O	O	O	O
production	O	O	O	O
plays	O	O	O	O
an	O	O	O	O
important	O	O	O	O
role	O	O	O	O
in	O	O	O	O
several	O	O	O	O
animal	O	O	O	O
models	O	O	O	O
of	O	O	O	O
autoimmunity	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
skewed	O	O	O	O
patterns	O	O	O	O
of	O	O	O	O
cytokine	B-protein	O	O	O
expression	O	O	O	O
have	O	O	O	O
been	O	O	O	O
described	O	O	O	O
in	O	O	O	O
human	O	O	O	O
inflammatory	O	O	O	O
diseases	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Many	O	O	O	O
cytokines	B-protein	O	O	O
activate	O	O	O	O
signal	O	B-protein	O	O
transducer	O	I-protein	O	O
and	O	I-protein	O	O
activation	O	I-protein	O	O
of	O	I-protein	O	O
transcription	O	I-protein	O	O
(	O	I-protein	O	O
STAT	B-protein	I-protein	O	O
)	O	I-protein	O	O
transcription	O	I-protein	O	O
factors	O	I-protein	O	O
,	O	O	O	O
which	O	O	O	O
,	O	O	O	O
in	O	O	O	O
turn	O	O	O	O
,	O	O	O	O
activate	O	O	O	O
transcription	O	O	O	O
of	O	O	O	O
inflammatory	O	O	O	O
effector	O	O	O	O
genes	O	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
used	O	O	O	O
mononuclear	B-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
priming	I-cell_line	O	O	O
cultures	I-cell_line	O	O	O
and	O	O	O	O
inflammatory	B-cell_type	O	O	O
synovial	I-cell_type	O	O	O
fluids	I-cell_type	O	O	O
(	O	O	O	O
SFs	B-cell_type	O	O	O
)	O	O	O	O
derived	O	O	O	O
from	O	O	O	O
arthritis	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
to	O	O	O	O
examine	O	O	O	O
the	O	O	O	O
regulation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
cytokine	B-protein	O	O	O
production	O	O	O	O
and	O	O	O	O
STAT	B-protein	O	O	O
activity	O	O	O	O
by	O	O	O	O
an	O	O	O	O
inflammatory	O	O	O	O
synovial	O	O	O	O
microenvironment	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Exposure	O	O	O	O
to	O	O	O	O
SFs	B-cell_type	O	O	O
during	O	O	O	O
priming	O	O	O	O
resulted	O	O	O	O
in	O	O	O	O
an	O	O	O	O
81	O	O	O	O
%	O	O	O	O
inhibition	O	O	O	O
of	O	O	O	O
interferon	B-protein	O	O	O
(	I-protein	O	O	O
IFN	I-protein	O	O	O
)	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
gamma	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
but	O	O	O	O
not	O	O	O	O
interleukin	B-protein	O	O	O
(	I-protein	O	O	O
IL	I-protein	O	O	O
)	I-protein	O	O	O
4	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
production	O	O	O	O
by	O	O	O	O
effector	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
generated	O	O	O	O
in	O	O	O	O
priming	O	O	O	O
cultures	O	O	O	O
.	O	O	O	O

SF	O	O	O	O
suppression	O	O	O	O
was	O	O	O	O
mediated	O	O	O	O
by	O	O	O	O
IL	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
4	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
IL	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
10	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
inhibition	O	O	O	O
of	O	O	O	O
IL	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
12	I-protein	O	O	O
expression	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
it	O	O	O	O
was	O	O	O	O
reversed	O	O	O	O
in	O	O	O	O
a	O	O	O	O
dominant	O	O	O	O
fashion	O	O	O	O
by	O	O	O	O
exogenous	O	O	O	O
IL	O	O	O	O
-	O	O	O	O
12	O	O	O	O
.	O	O	O	O

SFs	B-cell_type	O	O	O
blocked	O	O	O	O
the	O	O	O	O
sustained	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
of	O	O	O	O
transcription	B-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
Stat1	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
but	O	O	O	O
not	O	O	O	O
Stat3	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
during	O	O	O	O
the	O	O	O	O
priming	O	O	O	O
period	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
Stat1	B-protein	O	O	O
activity	O	O	O	O
was	O	O	O	O
differentially	O	O	O	O
regulated	O	O	O	O
by	O	O	O	O
cytokines	B-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
parallel	O	O	O	O
with	O	O	O	O
their	O	O	O	O
positive	O	O	O	O
or	O	O	O	O
negative	O	O	O	O
regulation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
IFN	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
gamma	I-protein	O	O	O
production	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Active	O	O	O	O
Stat3	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
but	O	O	O	O
not	O	O	O	O
Stat1	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
was	O	O	O	O
detected	O	O	O	O
in	O	O	O	O
cells	O	O	O	O
from	O	O	O	O
inflamed	O	O	O	O
joints	O	O	O	O
.	O	O	O	O

These	O	O	O	O
results	O	O	O	O
suggest	O	O	O	O
a	O	O	O	O
role	O	O	O	O
for	O	O	O	O
altered	O	O	O	O
balance	O	O	O	O
of	O	O	O	O
Stat1	O	O	O	O
and	O	O	O	O
Stat3	O	O	O	O
transcriptional	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
regulation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
T	B-cell_type	O	O	O
cell	I-cell_type	O	O	O
differentiation	O	O	O	O
and	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
pathogenesis	O	O	O	O
of	O	O	O	O
inflammatory	O	O	O	O
synovitis	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Triggering	O	O	O	O
of	O	O	O	O
complement	B-protein	O	O	O
receptors	I-protein	O	O	O
CR1	B-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
CD35	B-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
and	O	O	O	O
CR3	B-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
CD11b	B-protein	O	O	O
/	I-protein	O	O	O
CD18	I-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
induces	O	O	O	O
nuclear	O	O	O	O
translocation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
p50	B-protein	O	O	O
/	I-protein	O	O	O
p65	I-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
in	O	O	O	O
human	B-cell_type	O	O	O
monocytes	I-cell_type	O	O	O
and	O	O	O	O
enhances	O	O	O	O
viral	O	O	O	O
replication	O	O	O	O
in	O	O	O	O
HIV	B-cell_type	O	O	O
-	I-cell_type	O	O	O
infected	I-cell_type	O	O	O
monocytic	I-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

Monocyte	B-cell_type	O	O	O
/	I-cell_type	O	O	O
macrophages	I-cell_type	O	O	O
may	O	O	O	O
harbor	O	O	O	O
HIV	O	O	O	O
in	O	O	O	O
a	O	O	O	O
nonproductive	O	O	O	O
fashion	O	O	O	O
for	O	O	O	O
prolonged	O	O	O	O
periods	O	O	O	O
of	O	O	O	O
time	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Viral	O	O	O	O
gene	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
may	O	O	O	O
be	O	O	O	O
reactivated	O	O	O	O
by	O	O	O	O
stimulation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
cells	O	O	O	O
with	O	O	O	O
LPS	O	O	O	O
or	O	O	O	O
cytokines	B-protein	O	O	O
such	O	O	O	O
as	O	O	O	O
TNF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
vitro	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
effect	O	O	O	O
of	O	O	O	O
LPS	O	O	O	O
and	O	O	O	O
TNF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
is	O	O	O	O
mediated	O	O	O	O
by	O	O	O	O
their	O	O	O	O
ability	O	O	O	O
to	O	O	O	O
induce	O	O	O	O
nuclear	O	O	O	O
translocation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
DNA	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
binding	I-protein	O	O	O
heterodimer	I-protein	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
p50	B-protein	O	O	O
/	I-protein	O	O	O
p65	I-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
,	O	O	O	O
which	O	O	O	O
binds	O	O	O	O
to	O	O	O	O
a	O	O	O	O
specific	O	O	O	O
sequence	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
HIV	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
long	I-DNA	O	O	O
terminal	I-DNA	O	O	O
repeat	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
present	O	O	O	O
study	O	O	O	O
demonstrates	O	O	O	O
that	O	O	O	O
triggering	O	O	O	O
of	O	O	O	O
complement	B-protein	O	O	O
receptors	I-protein	O	O	O
CR1	B-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
CD35	B-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
and	O	O	O	O
CR3	B-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
CD11b	B-protein	O	O	O
/	I-protein	O	O	O
CD18	I-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
enhances	O	O	O	O
viral	O	O	O	O
replication	O	O	O	O
in	O	O	O	O
HIV	B-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
infected	I-cell_line	O	O	O
human	I-cell_line	O	O	O
monocytic	I-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
.	O	O	O	O

Monocytic	B-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
lines	I-cell_line	O	O	O
and	O	O	O	O
normal	O	O	O	O
peripheral	O	O	O	O
blood	O	O	O	O
monocytes	O	O	O	O
were	O	O	O	O
infected	O	O	O	O
with	O	O	O	O
HIV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
1	O	O	O	O
in	O	O	O	O
vitro	O	O	O	O
and	O	O	O	O
cultured	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
presence	O	O	O	O
or	O	O	O	O
absence	O	O	O	O
of	O	O	O	O
F	B-protein	O	O	O
(	I-protein	O	O	O
ab	I-protein	O	O	O
'	I-protein	O	O	O
)	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
fragments	I-protein	O	O	O
of	O	O	O	O
monoclonal	O	B-protein	O	O
anti	O	I-protein	O	O
-	O	I-protein	O	O
CR1	B-protein	I-protein	O	O
or	O	O	O	O
anti	O	B-protein	O	O
-	O	I-protein	O	O
CR3	B-protein	I-protein	O	O
Abs	O	I-protein	O	O
or	O	O	O	O
with	O	O	O	O
C3	B-protein	O	O	O
fragments	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Stimulation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
CR1	B-protein	O	O	O
or	O	O	O	O
CR3	B-protein	O	O	O
induces	O	O	O	O
a	O	O	O	O
two	O	O	O	O
-	O	O	O	O
to	O	O	O	O
fourfold	O	O	O	O
increase	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
amount	O	O	O	O
of	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
-	O	O	O	O
associated	O	O	O	O
and	O	O	O	O
released	O	O	O	O
p24	B-protein	O	O	O
Ag	I-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
cell	B-cell_line	O	O	O
cultures	I-cell_line	O	O	O
that	O	O	O	O
was	O	O	O	O
equivalent	O	O	O	O
to	O	O	O	O
that	O	O	O	O
observed	O	O	O	O
in	O	O	O	O
control	B-cell_line	O	O	O
cultures	I-cell_line	O	O	O
triggered	O	O	O	O
with	O	O	O	O
LPS	O	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
further	O	O	O	O
observed	O	O	O	O
that	O	O	O	O
stimulation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
CR1	B-protein	O	O	O
or	O	O	O	O
CR3	B-protein	O	O	O
induces	O	O	O	O
the	O	O	O	O
nuclear	O	O	O	O
translocation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
p50	B-protein	O	O	O
/	I-protein	O	O	O
p65	I-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
infected	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

Translocation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
p50	B-protein	O	O	O
/	I-protein	O	O	O
p65	I-protein	O	O	O
was	O	O	O	O
also	O	O	O	O
observed	O	O	O	O
following	O	O	O	O
stimulation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
CR1	B-protein	O	O	O
or	O	O	O	O
CR3	B-protein	O	O	O
of	O	O	O	O
uninfected	B-cell_type	O	O	O
peripheral	I-cell_type	O	O	O
blood	I-cell_type	O	O	O
monocytes	I-cell_type	O	O	O
from	O	O	O	O
HIV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
seronegative	O	O	O	O
donors	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
amount	O	O	O	O
of	O	O	O	O
protein	O	O	O	O
translocated	O	O	O	O
was	O	O	O	O
similar	O	O	O	O
to	O	O	O	O
that	O	O	O	O
observed	O	O	O	O
when	O	O	O	O
cells	O	O	O	O
were	O	O	O	O
stimulated	O	O	O	O
with	O	O	O	O
rhTNF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

TNF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
did	O	O	O	O
not	O	O	O	O
mediate	O	O	O	O
the	O	O	O	O
translocation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
p50	B-protein	O	O	O
/	I-protein	O	O	O
p65	I-protein	O	O	O
induced	O	O	O	O
by	O	O	O	O
triggering	O	O	O	O
of	O	O	O	O
complement	B-protein	O	O	O
receptors	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Taken	O	O	O	O
together	O	O	O	O
,	O	O	O	O
these	O	O	O	O
observations	O	O	O	O
suggest	O	O	O	O
that	O	O	O	O
HIV	O	O	O	O
gene	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
may	O	O	O	O
be	O	O	O	O
activated	O	O	O	O
in	O	O	O	O
infected	B-cell_type	O	O	O
monocytes	I-cell_type	O	O	O
through	O	O	O	O
interaction	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
cells	O	O	O	O
with	O	O	O	O
complement	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
opsonized	I-protein	O	O	O
particles	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
that	O	O	O	O
enhanced	O	O	O	O
viral	O	O	O	O
replication	O	O	O	O
is	O	O	O	O
associated	O	O	O	O
with	O	O	O	O
C3	B-protein	O	O	O
receptor	I-protein	O	O	O
-	O	O	O	O
mediated	O	O	O	O
nuclear	O	O	O	O
translocation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
complex	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Attenuation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
gamma	B-protein	O	O	O
interferon	I-protein	O	O	O
-	O	O	O	O
induced	O	O	O	O
tyrosine	O	O	O	O
phosphorylation	O	O	O	O
in	O	O	O	O
mononuclear	B-cell_type	O	O	O
phagocytes	I-cell_type	O	O	O
infected	O	O	O	O
with	O	O	O	O
Leishmania	O	O	O	O
donovani	O	O	O	O
:	O	O	O	O
selective	O	O	O	O
inhibition	O	O	O	O
of	O	O	O	O
signaling	O	O	O	O
through	O	O	O	O
Janus	B-protein	O	O	O
kinases	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
Stat1	B-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
induction	O	O	O	O
of	O	O	O	O
gene	O	O	O	O
transcription	O	O	O	O
in	O	O	O	O
response	O	O	O	O
to	O	O	O	O
gamma	B-protein	O	O	O
interferon	I-protein	O	O	O
is	O	O	O	O
impaired	O	O	O	O
in	O	O	O	O
mononuclear	B-cell_type	O	O	O
phagocytes	I-cell_type	O	O	O
infected	O	O	O	O
with	O	O	O	O
Leishmania	O	O	O	O
donovani	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
the	O	O	O	O
mechanisms	O	O	O	O
involved	O	O	O	O
are	O	O	O	O
not	O	O	O	O
fully	O	O	O	O
understood	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
changes	O	O	O	O
in	O	O	O	O
gene	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
brought	O	O	O	O
about	O	O	O	O
by	O	O	O	O
gamma	B-protein	O	O	O
interferon	I-protein	O	O	O
are	O	O	O	O
thought	O	O	O	O
to	O	O	O	O
involve	O	O	O	O
transient	O	O	O	O
increases	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
activities	O	O	O	O
of	O	O	O	O
cellular	B-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
tyrosine	I-protein	O	O	O
kinases	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
including	O	O	O	O
the	O	O	O	O
Janus	B-protein	O	O	O
kinases	I-protein	O	O	O
Jak1	B-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
Jak2	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
leading	O	O	O	O
to	O	O	O	O
tyrosine	O	O	O	O
phosphorylation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
transcription	O	B-protein	O	O
factor	O	I-protein	O	O
Stat1	B-protein	I-protein	O	O
.	O	O	O	O

To	O	O	O	O
investigate	O	O	O	O
the	O	O	O	O
mechanisms	O	O	O	O
accounting	O	O	O	O
for	O	O	O	O
the	O	O	O	O
impaired	O	O	O	O
responses	O	O	O	O
to	O	O	O	O
gamma	B-protein	O	O	O
interferon	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
a	O	O	O	O
model	O	O	O	O
system	O	O	O	O
for	O	O	O	O
examining	O	O	O	O
overall	O	O	O	O
changes	O	O	O	O
in	O	O	O	O
protein	O	O	O	O
tyrosine	O	O	O	O
phosphorylation	O	O	O	O
,	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
Jak1	B-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
Jak2	B-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
phosphorylation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
Stat1	B-protein	O	O	O
was	O	O	O	O
developed	O	O	O	O
in	O	O	O	O
phorbol	B-cell_line	O	O	O
12	I-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
myristate	I-cell_line	O	O	O
13	I-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
acetate	I-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
differentiated	I-cell_line	O	O	O
U	I-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
937	I-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
.	O	O	O	O

Analysis	O	O	O	O
of	O	O	O	O
whole	O	O	O	O
-	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
lysates	O	O	O	O
by	O	O	O	O
antiphosphotyrosine	O	O	O	O
immunoblotting	O	O	O	O
showed	O	O	O	O
that	O	O	O	O
incubation	O	O	O	O
with	O	O	O	O
gamma	B-protein	O	O	O
interferon	I-protein	O	O	O
brought	O	O	O	O
about	O	O	O	O
specific	O	O	O	O
increases	O	O	O	O
in	O	O	O	O
phosphotyrosine	O	O	O	O
labeling	O	O	O	O
of	O	O	O	O
several	O	O	O	O
proteins	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Increased	O	O	O	O
labeling	O	O	O	O
of	O	O	O	O
these	O	O	O	O
proteins	O	O	O	O
occurred	O	O	O	O
to	O	O	O	O
similar	O	O	O	O
extents	O	O	O	O
in	O	O	O	O
control	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
and	O	O	O	O
in	O	O	O	O
cells	O	O	O	O
that	O	O	O	O
had	O	O	O	O
been	O	O	O	O
infected	O	O	O	O
with	O	O	O	O
L	O	O	O	O
.	O	O	O	O
donovani	O	O	O	O
for	O	O	O	O
16	O	O	O	O
h	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Jak1	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
Jak2	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
Stat1	B-protein	O	O	O
were	O	O	O	O
immunoprecipitated	O	O	O	O
from	O	O	O	O
control	O	O	O	O
and	O	O	O	O
interferon	B-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
treated	I-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
tyrosine	O	O	O	O
phosphorylation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
these	O	O	O	O
proteins	O	O	O	O
,	O	O	O	O
detected	O	O	O	O
by	O	O	O	O
antiphosphotyrosine	O	O	O	O
immunoblotting	O	O	O	O
was	O	O	O	O
used	O	O	O	O
to	O	O	O	O
measured	O	O	O	O
their	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Tyrosine	O	O	O	O
phosphorylation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
Jak1	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
Jak2	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
Stat1	B-protein	O	O	O
increased	O	O	O	O
markedly	O	O	O	O
,	O	O	O	O
in	O	O	O	O
a	O	O	O	O
dose	O	O	O	O
-	O	O	O	O
dependent	O	O	O	O
manner	O	O	O	O
,	O	O	O	O
in	O	O	O	O
U	B-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
937	I-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
incubated	O	O	O	O
with	O	O	O	O
gamma	B-protein	O	O	O
interferon	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
contrast	O	O	O	O
,	O	O	O	O
in	O	O	O	O
cells	O	O	O	O
infected	O	O	O	O
with	O	O	O	O
L	O	O	O	O
.	O	O	O	O
donovani	O	O	O	O
,	O	O	O	O
tyrosine	O	O	O	O
phosphorylation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
Jak1	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
Jak2	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
Stat1	B-protein	O	O	O
was	O	O	O	O
markedly	O	O	O	O
impaired	O	O	O	O
.	O	O	O	O

This	O	O	O	O
effect	O	O	O	O
was	O	O	O	O
dependent	O	O	O	O
upon	O	O	O	O
the	O	O	O	O
duration	O	O	O	O
of	O	O	O	O
exposure	O	O	O	O
to	O	O	O	O
L	O	O	O	O
.	O	O	O	O
donovani	O	O	O	O
and	O	O	O	O
was	O	O	O	O
maximal	O	O	O	O
and	O	O	O	O
complete	O	O	O	O
at	O	O	O	O
16	O	O	O	O
h	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Results	O	O	O	O
similar	O	O	O	O
to	O	O	O	O
those	O	O	O	O
observed	O	O	O	O
with	O	O	O	O
U	B-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
937	I-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
were	O	O	O	O
also	O	O	O	O
obtained	O	O	O	O
with	O	O	O	O
human	B-cell_type	O	O	O
peripheral	I-cell_type	O	O	O
blood	I-cell_type	O	O	O
monocytes	I-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

These	O	O	O	O
findings	O	O	O	O
indicate	O	O	O	O
that	O	O	O	O
infection	O	O	O	O
of	O	O	O	O
human	B-cell_type	O	O	O
mononuclear	I-cell_type	O	O	O
phagocytes	I-cell_type	O	O	O
with	O	O	O	O
L	O	O	O	O
.	O	O	O	O
donovani	O	O	O	O
leads	O	O	O	O
to	O	O	O	O
impaired	O	O	O	O
gamma	B-protein	O	O	O
interferon	I-protein	O	O	O
-	O	O	O	O
mediated	O	O	O	O
tyrosine	O	O	O	O
phosphorylation	O	O	O	O
and	O	O	O	O
selective	O	O	O	O
effects	O	O	O	O
on	O	O	O	O
the	O	O	O	O
Jak	O	O	O	O
-	O	O	O	O
Stat1	B-protein	O	O	O
pathway	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Unresponsiveness	O	O	O	O
to	O	O	O	O
gamma	B-protein	O	O	O
interferon	I-protein	O	O	O
for	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
this	O	O	O	O
pathway	O	O	O	O
may	O	O	O	O
explain	O	O	O	O
impaired	O	O	O	O
transcriptional	O	O	O	O
responses	O	O	O	O
in	O	O	O	O
leishmania	B-cell_type	O	O	O
-	I-cell_type	O	O	O
infected	I-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

Mutually	O	O	O	O
exclusive	O	O	O	O
interaction	O	O	O	O
of	O	O	O	O
a	O	O	O	O
novel	O	O	O	O
matrix	B-protein	O	O	O
attachment	I-protein	O	O	O
region	I-protein	O	O	O
binding	I-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
the	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
muNR	I-protein	O	O	O
enhancer	I-protein	O	O	O
repressor	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Implications	O	O	O	O
for	O	O	O	O
regulation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
immunoglobulin	B-protein	O	O	O
heavy	I-protein	O	O	O
chain	I-protein	O	O	O
expression	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
immunoglobulin	B-protein	O	O	O
heavy	I-protein	O	O	O
chain	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
IgH	B-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
intronic	O	O	O	O
enhancer	O	O	O	O
stimulates	O	O	O	O
transcription	O	O	O	O
from	O	O	O	O
functional	O	O	O	O
promoters	O	O	O	O
in	O	O	O	O
B	O	O	O	O
lymphocytes	O	O	O	O
but	O	O	O	O
not	O	O	O	O
other	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
types	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
observation	O	O	O	O
that	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
sites	O	O	O	O
for	O	O	O	O
the	O	O	O	O
nuclear	B-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
mu	I-protein	O	O	O
negative	I-protein	O	O	O
regulator	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
muNR	I-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
enhancer	O	O	O	O
repressor	O	O	O	O
overlap	O	O	O	O
nuclear	B-protein	O	O	O
matrix	I-protein	O	O	O
attachment	I-protein	O	O	O
regions	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
MARs	B-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
in	O	O	O	O
this	O	O	O	O
enhancer	B-DNA	O	O	O
has	O	O	O	O
lead	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
hypothesis	O	O	O	O
that	O	O	O	O
the	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
type	O	O	O	O
specificity	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
enhancer	B-DNA	O	O	O
might	O	O	O	O
be	O	O	O	O
controlled	O	O	O	O
by	O	O	O	O
regulating	O	O	O	O
nuclear	O	O	O	O
matrix	O	O	O	O
attachment	O	O	O	O
(	O	O	O	O
Scheuermann	O	O	O	O
,	O	O	O	O
R	O	O	O	O
.	O	O	O	O
H	O	O	O	O
.	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
Chen	O	O	O	O
,	O	O	O	O
U	O	O	O	O
.	O	O	O	O
(	O	O	O	O
1989	O	O	O	O
)	O	O	O	O
Genes	O	O	O	O
&	O	O	O	O
Dev	O	O	O	O
.	O	O	O	O
3	O	O	O	O
,	O	O	O	O
1255	O	O	O	O
-	O	O	O	O
1266	O	O	O	O
)	O	O	O	O
.	O	O	O	O

To	O	O	O	O
understand	O	O	O	O
the	O	O	O	O
role	O	O	O	O
of	O	O	O	O
MARs	B-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
IgH	B-protein	B-DNA	O	O
enhancer	O	I-DNA	O	O
regulation	O	O	O	O
,	O	O	O	O
we	O	O	O	O
have	O	O	O	O
identified	O	O	O	O
a	O	O	O	O
novel	O	O	O	O
MAR	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
binding	I-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
MAR	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
BP1	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
from	O	O	O	O
soluble	O	O	O	O
nuclear	O	O	O	O
matrix	O	O	O	O
preparations	O	O	O	O
based	O	O	O	O
on	O	O	O	O
its	O	O	O	O
ability	O	O	O	O
to	O	O	O	O
bind	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
MARs	B-protein	O	O	O
associated	O	O	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
IgH	B-protein	B-DNA	O	O
enhancer	O	I-DNA	O	O
.	O	O	O	O

Purified	O	O	O	O
MAR	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
BP1	I-protein	O	O	O
migrates	O	O	O	O
as	O	O	O	O
a	O	O	O	O
33	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kDa	I-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
it	O	O	O	O
can	O	O	O	O
be	O	O	O	O
found	O	O	O	O
in	O	O	O	O
nuclear	O	O	O	O
matrix	O	O	O	O
preparations	O	O	O	O
from	O	O	O	O
a	O	O	O	O
number	O	O	O	O
of	O	O	O	O
different	O	O	O	O
types	O	O	O	O
of	O	O	O	O
lymphoid	B-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
lines	I-cell_line	O	O	O
.	O	O	O	O

Although	O	O	O	O
specific	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
sites	O	O	O	O
have	O	O	O	O
been	O	O	O	O
difficult	O	O	O	O
to	O	O	O	O
localize	O	O	O	O
by	O	O	O	O
chemical	O	O	O	O
or	O	O	O	O
enzymatic	O	O	O	O
footprinting	O	O	O	O
procedures	O	O	O	O
,	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
muNR	I-protein	O	O	O
binding	O	O	O	O
sites	O	O	O	O
are	O	O	O	O
critical	O	O	O	O
for	O	O	O	O
efficient	O	O	O	O
MAR	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
BP1	I-protein	O	O	O
binding	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Indeed	O	O	O	O
,	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
IgH	B-protein	B-DNA	O	O
enhancer	O	I-DNA	O	O
to	O	O	O	O
either	O	O	O	O
intact	O	O	O	O
nuclear	O	O	O	O
matrix	O	O	O	O
preparations	O	O	O	O
or	O	O	O	O
to	O	O	O	O
MAR	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
BP1	I-protein	O	O	O
is	O	O	O	O
mutually	O	O	O	O
exclusive	O	O	O	O
to	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
muNR	I-protein	O	O	O
binding	O	O	O	O
.	O	O	O	O

These	O	O	O	O
results	O	O	O	O
are	O	O	O	O
consistent	O	O	O	O
with	O	O	O	O
a	O	O	O	O
model	O	O	O	O
for	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
-	O	O	O	O
type	O	O	O	O
specific	O	O	O	O
regulation	O	O	O	O
in	O	O	O	O
which	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
NF	B-protein	B-protein	O	O
-	I-protein	I-protein	O	O
muNR	I-protein	I-protein	O	O
repressor	O	I-protein	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
IgH	B-protein	B-DNA	O	O
enhancer	O	I-DNA	O	O
prevents	O	O	O	O
nuclear	O	O	O	O
matrix	O	O	O	O
attachment	O	O	O	O
in	O	O	O	O
inappropriate	O	O	O	O
cells	O	O	O	O
by	O	O	O	O
interfering	O	O	O	O
with	O	O	O	O
MAR	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
BP1	I-protein	O	O	O
/	B-DNA	O	O	O
enhancer	I-DNA	O	O	O
interaction	O	O	O	O
.	O	O	O	O

PU	B-protein	O	O	O
.	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
Spi	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
and	O	O	O	O
C	B-protein	O	O	O
/	I-protein	O	O	O
EBP	I-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
regulate	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
granulocyte	B-protein	B-DNA	O	O
-	I-protein	I-DNA	O	O
macrophage	I-protein	I-DNA	O	O
colony	I-protein	I-DNA	O	O
-	I-protein	I-DNA	O	O
stimulating	I-protein	I-DNA	O	O
factor	I-protein	I-DNA	O	O
receptor	I-protein	I-DNA	O	O
alpha	O	I-DNA	O	O
gene	O	I-DNA	O	O
.	O	O	O	O

Growth	B-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
receptors	I-protein	O	O	O
play	O	O	O	O
an	O	O	O	O
important	O	O	O	O
role	O	O	O	O
in	O	O	O	O
hematopoiesis	O	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
order	O	O	O	O
to	O	O	O	O
further	O	O	O	O
understand	O	O	O	O
the	O	O	O	O
mechanisms	O	O	O	O
directing	O	O	O	O
the	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
these	O	O	O	O
key	O	O	O	O
regulators	O	O	O	O
of	O	O	O	O
hematopoiesis	O	O	O	O
,	O	O	O	O
we	O	O	O	O
initiated	O	O	O	O
a	O	O	O	O
study	O	O	O	O
investigating	O	O	O	O
the	O	O	O	O
transcription	B-protein	O	O	O
factors	I-protein	O	O	O
activating	O	O	O	O
the	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
granulocyte	B-protein	B-DNA	O	O
-	I-protein	I-DNA	O	O
macrophage	I-protein	I-DNA	O	O
colony	I-protein	I-DNA	O	O
-	I-protein	I-DNA	O	O
stimulating	I-protein	I-DNA	O	O
factor	I-protein	I-DNA	O	O
(	O	I-DNA	O	O
GM	B-protein	I-DNA	O	O
-	I-protein	I-DNA	O	O
CSF	I-protein	I-DNA	O	O
)	O	I-DNA	O	O
receptor	O	I-DNA	O	O
alpha	O	I-DNA	O	O
gene	O	I-DNA	O	O
.	O	O	O	O

Here	O	O	O	O
,	O	O	O	O
we	O	O	O	O
demonstrate	O	O	O	O
that	O	O	O	O
the	O	O	O	O
human	O	O	B-DNA	O
GM	B-protein	B-protein	I-DNA	O
-	I-protein	I-protein	I-DNA	O
CSF	I-protein	I-protein	I-DNA	O
receptor	O	I-protein	I-DNA	O
alpha	O	I-protein	I-DNA	O
promoter	O	O	I-DNA	O
directs	O	O	O	O
reporter	B-DNA	O	O	O
gene	I-DNA	O	O	O
activity	O	O	O	O
in	O	O	O	O
a	O	O	O	O
tissue	O	O	O	O
-	O	O	O	O
specific	O	O	O	O
fashion	O	O	O	O
in	O	O	O	O
myelomonocytic	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
,	O	O	O	O
which	O	O	O	O
correlates	O	O	O	O
with	O	O	O	O
its	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
pattern	O	O	O	O
as	O	O	O	O
analyzed	O	O	O	O
by	O	O	O	O
reverse	O	O	O	O
transcription	O	O	O	O
PCR	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
GM	B-protein	B-protein	B-DNA	O
-	I-protein	I-protein	I-DNA	O
CSF	I-protein	I-protein	I-DNA	O
receptor	O	I-protein	I-DNA	O
alpha	O	I-protein	I-DNA	O
promoter	O	O	I-DNA	O
contains	O	O	O	O
an	O	O	O	O
important	O	O	O	O
functional	O	O	O	O
site	O	O	O	O
between	O	O	O	O
positions	O	O	O	O
-	O	O	O	O
53	O	O	O	O
and	O	O	O	O
-	O	O	O	O
41	O	O	O	O
as	O	O	O	O
identified	O	O	O	O
by	O	O	O	O
deletion	O	O	O	O
analysis	O	O	O	O
of	O	O	O	O
reporter	B-DNA	O	O	O
constructs	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
show	O	O	O	O
that	O	O	O	O
the	O	O	O	O
myeloid	O	O	O	O
and	O	O	O	O
B	B-protein	O	O	O
cell	I-protein	O	O	O
transcription	I-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
PU	B-protein	O	O	O
.	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
binds	O	O	O	O
specifically	O	O	O	O
to	O	O	O	O
this	O	O	O	O
site	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Furthermore	O	O	O	O
,	O	O	O	O
we	O	O	O	O
demonstrate	O	O	O	O
that	O	O	O	O
a	O	O	O	O
CCAAT	B-DNA	O	O	O
site	I-DNA	O	O	O
located	O	O	O	O
upstream	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
PU	B-protein	B-DNA	O	O
.	I-protein	I-DNA	O	O
1	I-protein	I-DNA	O	O
site	O	I-DNA	O	O
between	O	O	O	O
positions	O	O	O	O
-	O	O	O	O
70	O	O	O	O
and	O	O	O	O
-	O	O	O	O
54	O	O	O	O
is	O	O	O	O
involved	O	O	O	O
in	O	O	O	O
positive	O	O	O	O
-	O	O	O	O
negative	O	O	O	O
regulation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
GM	B-protein	B-protein	B-DNA	O
-	I-protein	I-protein	I-DNA	O
CSF	I-protein	I-protein	I-DNA	O
receptor	O	I-protein	I-DNA	O
alpha	O	I-protein	I-DNA	O
promoter	O	O	I-DNA	O
activity	O	O	O	O
.	O	O	O	O

C	B-protein	O	O	O
/	I-protein	O	O	O
EBP	I-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
is	O	O	O	O
the	O	O	O	O
major	O	O	O	O
CCAAT	B-DNA	B-protein	O	O
/	I-DNA	I-protein	O	O
enhancer	I-DNA	I-protein	O	O
-	O	I-protein	O	O
binding	O	I-protein	O	O
protein	O	I-protein	O	O
(	O	O	O	O
C	B-protein	O	O	O
/	I-protein	O	O	O
EBP	I-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
form	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
to	O	O	O	O
this	O	O	O	O
site	O	O	O	O
in	O	O	O	O
nuclear	O	O	O	O
extracts	O	O	O	O
of	O	O	O	O
U937	B-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
.	O	O	O	O

Point	O	O	O	O
mutations	O	O	O	O
of	O	O	O	O
either	O	O	O	O
the	O	O	O	O
PU	B-protein	B-DNA	O	O
.	I-protein	I-DNA	O	O
1	I-protein	I-DNA	O	O
site	O	I-DNA	O	O
or	O	O	O	O
the	O	O	O	O
C	B-protein	B-DNA	O	O
/	I-protein	I-DNA	O	O
EBP	I-protein	I-DNA	O	O
site	O	I-DNA	O	O
that	O	O	O	O
abolish	O	O	O	O
the	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
respective	O	O	O	O
factors	O	O	O	O
result	O	O	O	O
in	O	O	O	O
a	O	O	O	O
significant	O	O	O	O
decrease	O	O	O	O
of	O	O	O	O
GM	B-protein	B-protein	B-DNA	O
-	I-protein	I-protein	I-DNA	O
CSF	I-protein	I-protein	I-DNA	O
receptor	O	I-protein	I-DNA	O
alpha	O	I-protein	I-DNA	O
promoter	O	O	I-DNA	O
activity	O	O	O	O
in	O	O	O	O
myelomonocytic	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
only	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Furthermore	O	O	O	O
,	O	O	O	O
we	O	O	O	O
demonstrate	O	O	O	O
that	O	O	O	O
in	O	O	O	O
myeloid	O	O	O	O
and	O	O	O	O
B	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
extracts	O	O	O	O
,	O	O	O	O
PU	B-protein	O	O	O
.	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
forms	O	O	O	O
a	O	O	O	O
novel	O	O	O	O
,	O	O	O	O
specific	O	O	O	O
,	O	O	O	O
more	O	O	O	O
slowly	O	O	O	O
migrating	O	O	O	O
complex	O	O	O	O
(	O	O	O	O
PU	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
SF	I-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
when	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
the	O	O	O	O
GM	B-protein	B-protein	B-DNA	O
-	I-protein	I-protein	I-DNA	O
CSF	I-protein	I-protein	I-DNA	O
receptor	O	I-protein	I-DNA	O
alpha	O	I-protein	I-DNA	O
promoter	O	O	I-DNA	O
PU	B-protein	B-DNA	O	O
.	I-protein	I-DNA	O	O
1	I-protein	I-DNA	O	O
site	O	I-DNA	O	O
.	O	O	O	O

This	O	O	O	O
is	O	O	O	O
the	O	O	O	O
first	O	O	O	O
demonstration	O	O	O	O
of	O	O	O	O
a	O	O	O	O
specific	O	O	O	O
interaction	O	O	O	O
with	O	O	O	O
PU	B-protein	O	O	O
.	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
on	O	O	O	O
a	O	O	O	O
myeloid	O	B-DNA	O	O
PU	B-protein	I-DNA	O	O
.	I-protein	I-DNA	O	O
1	I-protein	I-DNA	O	O
binding	O	I-DNA	O	O
site	O	I-DNA	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
novel	O	O	O	O
complex	O	O	O	O
is	O	O	O	O
distinct	O	O	O	O
from	O	O	O	O
that	O	O	O	O
described	O	O	O	O
previously	O	O	O	O
as	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
to	O	O	O	O
B	B-DNA	O	O	O
cell	I-DNA	O	O	O
enhancer	I-DNA	O	O	O
sites	I-DNA	O	O	O
and	O	O	O	O
can	O	O	O	O
be	O	O	O	O
formed	O	O	O	O
by	O	O	O	O
addition	O	O	O	O
of	O	O	O	O
PU	B-protein	O	O	O
.	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
to	O	O	O	O
extracts	O	O	O	O
from	O	O	O	O
certain	O	O	O	O
nonmyeloid	B-cell_type	O	O	O
cell	I-cell_type	O	O	O
types	I-cell_type	O	O	O
which	O	O	O	O
do	O	O	O	O
not	O	O	O	O
express	O	O	O	O
PU	B-protein	O	O	O
.	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
including	O	O	O	O
T	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
and	O	O	O	O
epithelial	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
,	O	O	O	O
but	O	O	O	O
not	O	O	O	O
from	O	O	O	O
erythroid	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

Furthermore	O	O	O	O
,	O	O	O	O
we	O	O	O	O
demonstrate	O	O	O	O
that	O	O	O	O
the	O	O	O	O
PU	B-protein	B-protein	O	O
-	I-protein	I-protein	O	O
SF	I-protein	I-protein	O	O
complex	O	I-protein	O	O
binds	O	O	O	O
to	O	O	O	O
PU	B-protein	O	O	O
.	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
sites	O	O	O	O
found	O	O	O	O
on	O	O	O	O
a	O	O	O	O
number	O	O	O	O
of	O	O	O	O
myeloid	B-DNA	O	O	O
promoters	I-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
its	O	O	O	O
formation	O	O	O	O
requires	O	O	O	O
an	O	O	O	O
intact	O	O	O	O
PU	B-protein	B-DNA	O	O
.	I-protein	I-DNA	O	O
1	I-protein	I-DNA	O	O
site	O	I-DNA	O	O
adjacent	O	O	O	O
to	O	O	O	O
a	O	O	O	O
single	O	O	O	O
-	O	O	O	O
stranded	O	O	O	O
region	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
PU	B-protein	O	O	O
.	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
nonmyeloid	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
can	O	O	O	O
activate	O	O	O	O
the	O	O	O	O
GM	B-protein	B-DNA	O	O
-	I-protein	I-DNA	O	O
CSF	I-protein	I-DNA	O	O
receptor	O	I-DNA	O	O
alpha	O	I-DNA	O	O
promoter	O	I-DNA	O	O
.	O	O	O	O

Deletion	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
amino	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
terminal	I-protein	O	O	O
region	I-protein	O	O	O
of	O	O	O	O
PU	B-protein	O	O	O
.	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
results	O	O	O	O
in	O	O	O	O
a	O	O	O	O
failure	O	O	O	O
to	O	O	O	O
form	O	O	O	O
the	O	O	O	O
PU	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
SF	I-protein	O	O	O
complex	O	O	O	O
and	O	O	O	O
in	O	O	O	O
a	O	O	O	O
concomitant	O	O	O	O
loss	O	O	O	O
of	O	O	O	O
transactivation	O	O	O	O
,	O	O	O	O
suggesting	O	O	O	O
that	O	O	O	O
formation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
PU	B-protein	B-protein	O	O
-	I-protein	I-protein	O	O
SF	I-protein	I-protein	O	O
complex	O	I-protein	O	O
is	O	O	O	O
of	O	O	O	O
functional	O	O	O	O
importance	O	O	O	O
for	O	O	O	O
the	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
GM	B-protein	B-DNA	O	O
-	I-protein	I-DNA	O	O
CSF	I-protein	I-DNA	O	O
receptor	O	I-DNA	O	O
alpha	O	I-DNA	O	O
promoter	O	I-DNA	O	O
.	O	O	O	O

Finally	O	O	O	O
,	O	O	O	O
we	O	O	O	O
demonstrate	O	O	O	O
that	O	O	O	O
C	B-protein	B-protein	O	O
/	I-protein	I-protein	O	O
EBP	I-protein	I-protein	O	O
alpha	O	I-protein	O	O
can	O	O	O	O
also	O	O	O	O
active	O	O	O	O
the	O	O	O	O
GM	B-protein	B-protein	B-DNA	O
-	I-protein	I-protein	I-DNA	O
CSF	I-protein	I-protein	I-DNA	O
receptor	O	I-protein	I-DNA	O
alpha	O	I-protein	I-DNA	O
promoter	O	O	I-DNA	O
in	O	O	O	O
nonmyeloid	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

(	O	O	O	O
ABSTRACT	O	O	O	O
TRUNCATED	O	O	O	O
AT	O	O	O	O
400	O	O	O	O
WORDS	O	O	O	O
)	O	O	O	O
.	O	O	O	O

HMG	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
I	I-protein	O	O	O
binds	O	O	O	O
to	O	O	O	O
GATA	B-DNA	O	O	O
motifs	I-DNA	O	O	O
:	O	O	O	O
implications	O	O	O	O
for	O	O	O	O
an	O	O	O	O
HPFH	O	O	O	O
syndrome	O	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
have	O	O	O	O
examined	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
nuclear	B-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
HMG	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
I	I-protein	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
human	B-DNA	O	O	O
gamma	I-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
globin	I-DNA	O	O	O
promoter	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
find	O	O	O	O
that	O	O	O	O
HMG	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
I	I-protein	O	O	O
binds	O	O	O	O
preferentially	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
more	O	O	O	O
3	O	O	O	O
'	O	O	O	O
of	O	O	O	O
a	O	O	O	O
pair	O	O	O	O
of	O	O	O	O
GATA	B-DNA	O	O	O
motifs	I-DNA	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
gamma	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
globin	I-DNA	O	O	O
promoter	I-DNA	O	O	O
;	O	O	O	O
this	O	O	O	O
paired	O	O	O	O
motif	O	O	O	O
is	O	O	O	O
bound	O	O	O	O
by	O	O	O	O
the	O	O	O	O
erythroid	O	B-protein	O	O
factor	O	I-protein	O	O
GATA	B-protein	I-protein	O	O
-	I-protein	I-protein	O	O
1	I-protein	I-protein	O	O
.	O	O	O	O

A	O	O	O	O
naturally	O	O	O	O
occurring	O	O	O	O
mutation	O	O	O	O
(	O	O	O	O
-	O	O	O	O
175	O	O	O	O
T	O	O	O	O
-	O	O	O	O
C	O	O	O	O
)	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
area	O	O	O	O
bound	O	O	O	O
by	O	O	O	O
HMG	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
I	I-protein	O	O	O
results	O	O	O	O
in	O	O	O	O
overexpression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
gamma	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
globin	I-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
adult	B-cell_type	O	O	O
red	I-cell_type	O	O	O
blood	I-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
(	O	O	O	O
HPFH	B-cell_type	O	O	O
)	O	O	O	O
and	O	O	O	O
up	O	O	O	O
-	O	O	O	O
regulation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
gamma	B-protein	B-DNA	O	O
-	I-protein	I-DNA	O	O
globin	I-protein	I-DNA	O	O
promoter	O	I-DNA	O	O
in	O	O	O	O
in	O	O	O	O
vitro	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
assays	O	O	O	O
;	O	O	O	O
HMG	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
I	I-protein	O	O	O
does	O	O	O	O
not	O	O	O	O
bind	O	O	O	O
to	O	O	O	O
this	O	O	O	O
mutant	B-DNA	O	O	O
sequence	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

A	O	O	O	O
survey	O	O	O	O
of	O	O	O	O
GATA	B-DNA	O	O	O
motifs	I-DNA	O	O	O
from	O	O	O	O
other	O	O	O	O
globin	B-DNA	O	O	O
cis	I-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
elements	I-DNA	O	O	O
demonstrates	O	O	O	O
HMG	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
I	I-protein	O	O	O
binding	O	O	O	O
to	O	O	O	O
most	O	O	O	O
of	O	O	O	O
them	O	O	O	O
.	O	O	O	O

These	O	O	O	O
findings	O	O	O	O
implicate	O	O	O	O
HMG	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
I	I-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
HPFH	B-cell_type	O	O	O
phenotype	O	O	O	O
;	O	O	O	O
we	O	O	O	O
speculate	O	O	O	O
that	O	O	O	O
it	O	O	O	O
may	O	O	O	O
participate	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
formation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
multiprotein	B-protein	O	O	O
complexes	I-protein	O	O	O
that	O	O	O	O
regulate	O	O	O	O
globin	O	O	O	O
gene	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Constitutive	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
different	O	O	O	O
Jak	B-protein	O	O	O
tyrosine	I-protein	O	O	O
kinases	I-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
human	B-protein	O	O	O
T	I-protein	O	O	O
cell	I-protein	O	O	O
leukemia	I-protein	O	O	O
virus	I-protein	O	O	O
type	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
(	I-protein	O	O	O
HTLV	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
)	I-protein	O	O	O
tax	I-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
or	O	O	O	O
virus	B-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
transformed	I-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
.	O	O	O	O

HTLV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
1	O	O	O	O
infection	O	O	O	O
causes	O	O	O	O
an	O	O	O	O
adult	O	O	O	O
T	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
leukemia	O	O	O	O
in	O	O	O	O
humans	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
viral	B-protein	O	O	O
encoded	I-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
tax	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
is	O	O	O	O
thought	O	O	O	O
to	O	O	O	O
play	O	O	O	O
an	O	O	O	O
important	O	O	O	O
role	O	O	O	O
in	O	O	O	O
oncogenesis	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Our	O	O	O	O
previous	O	O	O	O
data	O	O	O	O
obtained	O	O	O	O
from	O	O	O	O
a	O	O	O	O
tax	B-protein	O	O	O
transgenic	O	O	O	O
mouse	O	O	O	O
model	O	O	O	O
revealed	O	O	O	O
that	O	O	O	O
tax	B-protein	O	O	O
transforms	O	O	O	O
mouse	B-cell_type	O	O	O
fibroblasts	I-cell_type	O	O	O
but	O	O	O	O
not	O	O	O	O
thymocytes	B-cell_type	O	O	O
,	O	O	O	O
despite	O	O	O	O
comparable	O	O	O	O
levels	O	O	O	O
of	O	O	O	O
tax	B-protein	O	O	O
expression	O	O	O	O
in	O	O	O	O
both	O	O	O	O
tissues	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Constitutive	O	O	O	O
tyrosine	O	O	O	O
phosphorylation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
a	O	O	O	O
130	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kD	I-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
s	O	O	O	O
)	O	O	O	O
was	O	O	O	O
observed	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
tax	B-protein	O	O	O
transformed	B-cell_line	O	O	O
fibroblast	I-cell_line	O	O	O
B	I-cell_line	O	O	O
line	I-cell_line	O	O	O
and	O	O	O	O
in	O	O	O	O
HTLV	B-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
1	I-cell_line	O	O	O
transformed	I-cell_line	O	O	O
human	I-cell_line	O	O	O
lymphoid	I-cell_line	O	O	O
lines	I-cell_line	O	O	O
,	O	O	O	O
but	O	O	O	O
not	O	O	O	O
in	O	O	O	O
thymocytes	B-cell_type	O	O	O
from	O	O	O	O
Thy	O	O	O	O
-	O	O	O	O
tax	O	O	O	O
transgenic	O	O	O	O
mice	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Phosphotyrosine	O	O	O	O
immunoprecipitation	O	O	O	O
followed	O	O	O	O
by	O	O	O	O
Western	O	O	O	O
blot	O	O	O	O
analysis	O	O	O	O
with	O	O	O	O
a	O	O	O	O
set	O	O	O	O
of	O	O	O	O
Jak	B-protein	B-protein	O	O
kinase	I-protein	I-protein	O	O
specific	O	I-protein	O	O
antibodies	O	I-protein	O	O
,	O	O	O	O
identified	O	O	O	O
p130	O	O	O	O
as	O	O	O	O
Jak2	B-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
tax	B-protein	O	O	O
transformed	O	O	O	O
mouse	B-cell_line	O	O	O
fibroblastic	I-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
line	I-cell_line	O	O	O
and	O	O	O	O
Jak3	B-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
HTLV	B-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
1	I-cell_line	O	O	O
transformed	I-cell_line	O	O	O
human	I-cell_line	O	O	O
T	I-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
lines	I-cell_line	O	O	O
.	O	O	O	O

Phosphorylation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
Jak2	B-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
tax	B-protein	B-cell_line	O	O
transformed	O	I-cell_line	O	O
cells	O	I-cell_line	O	O
resulted	O	O	O	O
from	O	O	O	O
high	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
IL	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
6	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Tyrosine	O	O	O	O
phosphorylation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
this	O	O	O	O
protein	O	O	O	O
could	O	O	O	O
also	O	O	O	O
be	O	O	O	O
induced	O	O	O	O
in	O	O	O	O
Balb	B-cell_line	O	O	O
/	I-cell_line	O	O	O
c3T3	I-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
using	O	O	O	O
a	O	O	O	O
supernatant	O	O	O	O
from	O	O	O	O
the	O	O	O	O
B	B-cell_line	O	O	O
line	I-cell_line	O	O	O
,	O	O	O	O
which	O	O	O	O
was	O	O	O	O
associated	O	O	O	O
with	O	O	O	O
induction	O	O	O	O
of	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
proliferation	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Both	O	O	O	O
phosphorylation	O	O	O	O
and	O	O	O	O
proliferation	O	O	O	O
were	O	O	O	O
inhibited	O	O	O	O
by	O	O	O	O
IL	B-protein	B-protein	O	O
-	I-protein	I-protein	O	O
6	I-protein	I-protein	O	O
neutralizing	O	I-protein	O	O
antibodies	O	I-protein	O	O
.	O	O	O	O

Constitutive	O	O	O	O
phosphorylation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
Jak	B-protein	O	O	O
kinases	I-protein	O	O	O
may	O	O	O	O
facilitate	O	O	O	O
tumor	O	O	O	O
growth	O	O	O	O
in	O	O	O	O
both	O	O	O	O
HTLV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
1	O	O	O	O
infected	O	O	O	O
human	O	O	O	O
T	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
and	O	O	O	O
the	O	O	O	O
transgenic	O	O	O	O
mouse	O	O	O	O
model	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Regulation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
c	B-DNA	B-RNA	O	O
-	I-DNA	I-RNA	O	O
jun	I-DNA	I-RNA	O	O
mRNA	O	I-RNA	O	O
expression	O	O	O	O
by	O	O	O	O
hydroxyurea	O	O	O	O
in	O	O	O	O
human	B-cell_line	O	O	O
K562	I-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
during	O	O	O	O
erythroid	O	O	O	O
differentiation	O	O	O	O
[	O	O	O	O
published	O	O	O	O
erratum	O	O	O	O
appears	O	O	O	O
in	O	O	O	O
Biochim	O	O	O	O
Biophys	O	O	O	O
Acta	O	O	O	O
1995	O	O	O	O
Dec	O	O	O	O
27	O	O	O	O
;	O	O	O	O
1264	O	O	O	O
(	O	O	O	O
3	O	O	O	O
)	O	O	O	O
:	O	O	O	O
409	O	O	O	O
]	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Hydroxyurea	O	O	O	O
(	O	O	O	O
HU	O	O	O	O
)	O	O	O	O
is	O	O	O	O
an	O	O	O	O
antitumor	O	O	O	O
agent	O	O	O	O
which	O	O	O	O
also	O	O	O	O
induces	O	O	O	O
hemoglobinization	O	O	O	O
during	O	O	O	O
erythroid	O	O	O	O
differentiation	O	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
addition	O	O	O	O
,	O	O	O	O
HU	O	O	O	O
stimulates	O	O	O	O
the	O	O	O	O
synthesis	O	O	O	O
of	O	O	O	O
fetal	B-protein	O	O	O
hemoglobin	I-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
sickle	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
anemia	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
.	O	O	O	O

To	O	O	O	O
further	O	O	O	O
understand	O	O	O	O
its	O	O	O	O
mechanism	O	O	O	O
of	O	O	O	O
action	O	O	O	O
,	O	O	O	O
we	O	O	O	O
investigated	O	O	O	O
the	O	O	O	O
effects	O	O	O	O
of	O	O	O	O
HU	O	O	O	O
on	O	O	O	O
regulation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
c	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
jun	I-DNA	O	O	O
expression	O	O	O	O
prior	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
onset	O	O	O	O
of	O	O	O	O
erythroid	O	O	O	O
differentiation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
K562	B-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
.	O	O	O	O

HU	O	O	O	O
induced	O	O	O	O
a	O	O	O	O
dose	O	O	O	O
-	O	O	O	O
dependent	O	O	O	O
stimulation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
c	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
jun	I-DNA	O	O	O
synthesis	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
levels	O	O	O	O
of	O	O	O	O
c	B-DNA	B-RNA	O	O
-	I-DNA	I-RNA	O	O
jun	I-DNA	I-RNA	O	O
mRNA	O	I-RNA	O	O
was	O	O	O	O
elevated	O	O	O	O
4	O	O	O	O
to	O	O	O	O
7	O	O	O	O
.	O	O	O	O
5	O	O	O	O
-	O	O	O	O
fold	O	O	O	O
by	O	O	O	O
HU	O	O	O	O
within	O	O	O	O
2	O	O	O	O
h	O	O	O	O
.	O	O	O	O

This	O	O	O	O
was	O	O	O	O
followed	O	O	O	O
by	O	O	O	O
a	O	O	O	O
gradual	O	O	O	O
decline	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
basal	O	O	O	O
level	O	O	O	O
by	O	O	O	O
24	O	O	O	O
h	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Both	O	O	O	O
nuclear	O	O	O	O
run	O	O	O	O
-	O	O	O	O
on	O	O	O	O
and	O	O	O	O
actinomycin	O	O	O	O
D	O	O	O	O
pulse	O	O	O	O
experiments	O	O	O	O
strongly	O	O	O	O
indicate	O	O	O	O
that	O	O	O	O
HU	O	O	O	O
regulates	O	O	O	O
c	B-RNA	O	O	O
-	I-RNA	O	O	O
jun	I-RNA	O	O	O
mRNA	I-RNA	O	O	O
expression	O	O	O	O
by	O	O	O	O
increasing	O	O	O	O
the	O	O	O	O
rate	O	O	O	O
of	O	O	O	O
synthesis	O	O	O	O
as	O	O	O	O
well	O	O	O	O
as	O	O	O	O
stabilizing	O	O	O	O
the	O	O	O	O
c	B-DNA	B-RNA	O	O
-	I-DNA	I-RNA	O	O
jun	I-DNA	I-RNA	O	O
mRNA	O	I-RNA	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
addition	O	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
level	O	O	O	O
of	O	O	O	O
jun	B-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
was	O	O	O	O
elevated	O	O	O	O
by	O	O	O	O
2	O	O	O	O
to	O	O	O	O
5	O	O	O	O
-	O	O	O	O
fold	O	O	O	O
within	O	O	O	O
4	O	O	O	O
h	O	O	O	O
in	O	O	O	O
HU	B-cell_line	O	O	O
treated	I-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
.	O	O	O	O

Furthermore	O	O	O	O
,	O	O	O	O
concentrations	O	O	O	O
of	O	O	O	O
HU	O	O	O	O
below	O	O	O	O
250	O	O	O	O
microM	O	O	O	O
slightly	O	O	O	O
increased	O	O	O	O
the	O	O	O	O
5X	O	O	O	O
AP	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
/	B-protein	O	O	O
CAT	I-protein	O	O	O
activity	O	O	O	O
.	O	O	O	O

These	O	O	O	O
results	O	O	O	O
strongly	O	O	O	O
suggest	O	O	O	O
that	O	O	O	O
HU	O	O	O	O
induces	O	O	O	O
both	O	O	O	O
transcriptional	O	O	O	O
and	O	O	O	O
post	O	O	O	O
-	O	O	O	O
transcription	O	O	O	O
regulation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
c	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
jun	I-DNA	O	O	O
during	O	O	O	O
erythroid	O	O	O	O
differentiation	O	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
vivo	O	O	O	O
and	O	O	O	O
in	O	O	O	O
vitro	O	O	O	O
effects	O	O	O	O
of	O	O	O	O
glucocorticoids	O	O	O	O
on	O	O	O	O
lymphocyte	O	O	O	O
proliferation	O	O	O	O
in	O	O	O	O
man	O	O	O	O
:	O	O	O	O
relationship	O	O	O	O
to	O	O	O	O
glucocorticoid	B-protein	O	O	O
receptors	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Interrelations	O	O	O	O
between	O	O	O	O
the	O	O	O	O
hypothalamic	O	O	O	O
-	O	O	O	O
pituitary	O	O	O	O
-	O	O	O	O
adrenal	O	O	O	O
system	O	O	O	O
(	O	O	O	O
HPA	O	O	O	O
)	O	O	O	O
and	O	O	O	O
the	O	O	O	O
immune	O	O	O	O
system	O	O	O	O
represent	O	O	O	O
a	O	O	O	O
well	O	O	O	O
-	O	O	O	O
documented	O	O	O	O
biological	O	O	O	O
phenomenon	O	O	O	O
.	O	O	O	O

While	O	O	O	O
in	O	O	O	O
vitro	O	O	O	O
administration	O	O	O	O
of	O	O	O	O
glucocorticoids	O	O	O	O
may	O	O	O	O
inhibit	O	O	O	O
concanavalin	O	O	O	O
A	O	O	O	O
(	O	O	O	O
Con	O	O	O	O
A	O	O	O	O
)	O	O	O	O
-	O	O	O	O
and	O	O	O	O
phytohemagglutinin	O	O	O	O
(	O	O	O	O
PHA	O	O	O	O
)	O	O	O	O
-	O	O	O	O
induced	O	O	O	O
T	O	O	O	O
-	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
proliferation	O	O	O	O
,	O	O	O	O
pokeweed	B-protein	O	O	O
mitogen	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
PWM	B-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
-	O	O	O	O
driven	O	O	O	O
B	O	O	O	O
-	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
mitogenesis	O	O	O	O
is	O	O	O	O
relatively	O	O	O	O
resistant	O	O	O	O
to	O	O	O	O
glucocorticoids	O	O	O	O
.	O	O	O	O

To	O	O	O	O
further	O	O	O	O
explore	O	O	O	O
the	O	O	O	O
link	O	O	O	O
between	O	O	O	O
the	O	O	O	O
HPA	O	O	O	O
and	O	O	O	O
the	O	O	O	O
immune	O	O	O	O
system	O	O	O	O
in	O	O	O	O
relation	O	O	O	O
to	O	O	O	O
glucocorticoid	B-protein	O	O	O
receptor	I-protein	O	O	O
function	O	O	O	O
,	O	O	O	O
dose	O	O	O	O
-	O	O	O	O
response	O	O	O	O
curves	O	O	O	O
were	O	O	O	O
obtained	O	O	O	O
for	O	O	O	O
Con	O	O	O	O
A	O	O	O	O
-	O	O	O	O
and	O	O	O	O
PHA	B-protein	O	O	O
-	O	O	O	O
induced	O	O	O	O
T	O	O	O	O
-	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
mitogenesis	O	O	O	O
,	O	O	O	O
PWM	B-protein	O	O	O
-	O	O	O	O
generated	O	O	O	O
B	O	O	O	O
-	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
mitogenesis	O	O	O	O
and	O	O	O	O
spontaneous	O	O	O	O
lymphocyte	O	O	O	O
proliferation	O	O	O	O
in	O	O	O	O
13	O	O	O	O
healthy	O	O	O	O
controls	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Glucocorticoid	O	O	O	O
effects	O	O	O	O
were	O	O	O	O
assessed	O	O	O	O
in	O	O	O	O
vivo	O	O	O	O
by	O	O	O	O
depletion	O	O	O	O
of	O	O	O	O
endogenous	O	O	O	O
glucocorticoids	O	O	O	O
after	O	O	O	O
oral	O	O	O	O
administration	O	O	O	O
of	O	O	O	O
1	O	O	O	O
.	O	O	O	O
5	O	O	O	O
g	O	O	O	O
metyrapone	O	O	O	O
(	O	O	O	O
MET	O	O	O	O
)	O	O	O	O
and	O	O	O	O
subsequent	O	O	O	O
glucocorticoid	O	O	O	O
replacement	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
in	O	O	O	O
vitro	O	O	O	O
by	O	O	O	O
incubation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
cells	O	O	O	O
with	O	O	O	O
different	O	O	O	O
doses	O	O	O	O
of	O	O	O	O
dexamethasone	O	O	O	O
(	O	O	O	O
DEX	O	O	O	O
)	O	O	O	O
.	O	O	O	O

There	O	O	O	O
was	O	O	O	O
a	O	O	O	O
significant	O	O	O	O
decrease	O	O	O	O
in	O	O	O	O
PWM	B-protein	O	O	O
-	O	O	O	O
induced	O	O	O	O
B	O	O	O	O
-	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
mitogenesis	O	O	O	O
and	O	O	O	O
a	O	O	O	O
more	O	O	O	O
pronounced	O	O	O	O
effect	O	O	O	O
of	O	O	O	O
DEX	O	O	O	O
administered	O	O	O	O
in	O	O	O	O
vitro	O	O	O	O
on	O	O	O	O
spontaneous	O	O	O	O
lymphocyte	O	O	O	O
proliferation	O	O	O	O
after	O	O	O	O
MET	O	O	O	O
treatment	O	O	O	O
when	O	O	O	O
compared	O	O	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
DEX	O	O	O	O
plus	O	O	O	O
MET	O	O	O	O
pretreated	O	O	O	O
condition	O	O	O	O
in	O	O	O	O
vivo	O	O	O	O
.	O	O	O	O

These	O	O	O	O
data	O	O	O	O
suggest	O	O	O	O
that	O	O	O	O
the	O	O	O	O
inhibition	O	O	O	O
of	O	O	O	O
spontaneous	O	O	O	O
lymphocyte	O	O	O	O
proliferation	O	O	O	O
by	O	O	O	O
glucocorticoids	O	O	O	O
in	O	O	O	O
vitro	O	O	O	O
is	O	O	O	O
related	O	O	O	O
to	O	O	O	O
glucocorticoid	B-protein	O	O	O
receptor	I-protein	O	O	O
function	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
decrease	O	O	O	O
in	O	O	O	O
PWM	B-protein	O	O	O
-	O	O	O	O
generated	O	O	O	O
B	O	O	O	O
-	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
proliferation	O	O	O	O
following	O	O	O	O
cortisol	O	O	O	O
depletion	O	O	O	O
by	O	O	O	O
MET	O	O	O	O
may	O	O	O	O
be	O	O	O	O
seen	O	O	O	O
in	O	O	O	O
connection	O	O	O	O
with	O	O	O	O
impaired	O	O	O	O
glucocorticoid	O	O	O	O
-	O	O	O	O
mediated	O	O	O	O
induction	O	O	O	O
of	O	O	O	O
interleukin	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
receptor	I-protein	O	O	O
synthesis	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Transcription	O	O	O	O
specific	O	O	O	O
differences	O	O	O	O
visualized	O	O	O	O
by	O	O	O	O
fluorescence	O	O	O	O
in	O	O	O	O
situ	O	O	O	O
hybridization	O	O	O	O
pattern	O	O	O	O
on	O	O	O	O
interphase	O	O	O	O
nuclei	O	O	O	O
of	O	O	O	O
different	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
types	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Application	O	O	O	O
of	O	O	O	O
a	O	O	O	O
"	O	O	O	O
formamide	O	O	O	O
free	O	O	O	O
"	O	O	O	O
and	O	O	O	O
thus	O	O	O	O
"	O	O	O	O
material	O	O	O	O
preserving	O	O	O	O
"	O	O	O	O
in	O	O	O	O
situ	O	O	O	O
hybridization	O	O	O	O
technique	O	O	O	O
using	O	O	O	O
the	O	O	O	O
cDNA	B-DNA	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
myf3	B-DNA	O	O	O
gene	I-DNA	O	O	O
revealed	O	O	O	O
the	O	O	O	O
following	O	O	O	O
results	O	O	O	O
:	O	O	O	O
Human	B-cell_type	O	O	O
rhabdomyosarcoma	I-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
,	O	O	O	O
characterized	O	O	O	O
by	O	O	O	O
a	O	O	O	O
high	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
myf3	B-DNA	O	O	O
show	O	O	O	O
intensive	O	O	O	O
hybridization	O	O	O	O
signals	O	O	O	O
in	O	O	O	O
their	O	O	O	O
interphase	O	O	O	O
.	O	O	O	O

RNase	B-protein	O	O	O
treatment	O	O	O	O
prior	O	O	O	O
to	O	O	O	O
hybridization	O	O	O	O
considerably	O	O	O	O
reduces	O	O	O	O
the	O	O	O	O
size	O	O	O	O
of	O	O	O	O
this	O	O	O	O
signals	O	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
comparison	O	O	O	O
,	O	O	O	O
isolated	O	O	O	O
nuclei	O	O	O	O
of	O	O	O	O
human	B-cell_type	O	O	O
lymphocytes	I-cell_type	O	O	O
in	O	O	O	O
which	O	O	O	O
no	O	O	O	O
need	O	O	O	O
for	O	O	O	O
the	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
this	O	O	O	O
gene	O	O	O	O
exists	O	O	O	O
,	O	O	O	O
show	O	O	O	O
barely	O	O	O	O
hybridization	O	O	O	O
signals	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Correspondingly	O	O	O	O
,	O	O	O	O
RNase	B-protein	O	O	O
treatment	O	O	O	O
had	O	O	O	O
no	O	O	O	O
effect	O	O	O	O
on	O	O	O	O
hybridization	O	O	O	O
pattern	O	O	O	O
at	O	O	O	O
all	O	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
conclusion	O	O	O	O
an	O	O	O	O
increased	O	O	O	O
transcription	O	O	O	O
efficiency	O	O	O	O
of	O	O	O	O
a	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
type	O	O	O	O
specific	O	O	O	O
gene	O	O	O	O
is	O	O	O	O
accompanied	O	O	O	O
by	O	O	O	O
a	O	O	O	O
higher	O	O	O	O
hybridization	O	O	O	O
accessibility	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
corresponding	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
nuclei	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Oncogenicity	O	O	O	O
of	O	O	O	O
human	O	O	O	O
papillomavirus	O	O	O	O
-	O	O	O	O
or	O	O	O	O
adenovirus	O	O	O	O
-	O	O	O	O
transformed	O	O	O	O
cells	O	O	O	O
correlates	O	O	O	O
with	O	O	O	O
resistance	O	O	O	O
to	O	O	O	O
lysis	O	O	O	O
by	O	O	O	O
natural	B-cell_type	O	O	O
killer	I-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
reasons	O	O	O	O
for	O	O	O	O
the	O	O	O	O
dissimilar	O	O	O	O
oncogenicities	O	O	O	O
of	O	O	O	O
human	O	O	O	O
adenoviruses	O	O	O	O
and	O	O	O	O
human	O	O	O	O
papillomaviruses	O	O	O	O
(	O	O	O	O
HPV	O	O	O	O
)	O	O	O	O
in	O	O	O	O
humans	O	O	O	O
are	O	O	O	O
unknown	O	O	O	O
but	O	O	O	O
may	O	O	O	O
relate	O	O	O	O
to	O	O	O	O
differences	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
capacities	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
E1A	B-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
E7	B-protein	O	O	O
proteins	I-protein	O	O	O
to	O	O	O	O
target	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
for	O	O	O	O
rejection	O	O	O	O
by	O	O	O	O
the	O	O	O	O
host	B-cell_type	O	O	O
natural	I-cell_type	O	O	O
killer	I-cell_type	O	O	O
(	I-cell_type	O	O	O
NK	I-cell_type	O	O	O
)	I-cell_type	O	O	O
cell	I-cell_type	O	O	O
response	O	O	O	O
.	O	O	O	O

As	O	O	O	O
one	O	O	O	O
test	O	O	O	O
of	O	O	O	O
this	O	O	O	O
hypothesis	O	O	O	O
,	O	O	O	O
we	O	O	O	O
compared	O	O	O	O
the	O	O	O	O
abilities	O	O	O	O
of	O	O	O	O
E1A	B-protein	O	O	O
-	O	O	O	O
and	O	O	O	O
E7	B-protein	O	O	O
-	O	O	O	O
expressing	O	O	O	O
human	O	O	O	O
fibroblastic	O	O	O	O
or	O	O	O	O
keratinocyte	O	O	O	O
-	O	O	O	O
derived	O	O	O	O
human	O	O	O	O
cells	O	O	O	O
to	O	O	O	O
be	O	O	O	O
selectively	O	O	O	O
killed	O	O	O	O
by	O	O	O	O
either	O	O	O	O
unstimulated	B-cell_type	O	O	O
or	O	O	O	O
interferon	B-cell_line	O	O	O
(	I-cell_line	O	O	O
IFN	I-cell_line	O	O	O
)	I-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
activated	I-cell_line	O	O	O
NK	I-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
.	O	O	O	O

Cells	O	O	O	O
expressing	O	O	O	O
the	O	O	O	O
E1A	B-protein	B-protein	O	O
oncoprotein	O	I-protein	O	O
were	O	O	O	O
selectively	O	O	O	O
killed	O	O	O	O
by	O	O	O	O
unstimulated	B-cell_line	O	O	O
NK	I-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
,	O	O	O	O
while	O	O	O	O
the	O	O	O	O
same	O	O	O	O
parental	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
but	O	O	O	O
expressing	O	O	O	O
the	O	O	O	O
HPV	O	O	O	O
type	O	O	O	O
16	O	O	O	O
(	O	O	O	O
HPV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
16	O	O	O	O
)	O	O	O	O
or	O	O	O	O
HPV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
18	O	O	O	O
E7	B-protein	B-protein	O	O
oncoprotein	O	I-protein	O	O
were	O	O	O	O
resistant	O	O	O	O
to	O	O	O	O
NK	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
lysis	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
ability	O	O	O	O
of	O	O	O	O
IFN	B-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
activated	I-cell_line	O	O	O
NK	I-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
to	O	O	O	O
selectively	O	O	O	O
kill	O	O	O	O
virally	O	O	O	O
transformed	O	O	O	O
cells	O	O	O	O
depends	O	O	O	O
on	O	O	O	O
IFN	B-protein	O	O	O
'	O	O	O	O
s	O	O	O	O
ability	O	O	O	O
to	O	O	O	O
induce	O	O	O	O
resistance	O	O	O	O
to	O	O	O	O
NK	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
lysis	O	O	O	O
in	O	O	O	O
normal	O	O	O	O
(	O	O	O	O
i	O	O	O	O
.	O	O	O	O
e	O	O	O	O
.	O	O	O	O
,	O	O	O	O
non	B-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
viral	I-cell_line	O	O	O
oncogene	I-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
expressing	I-cell_line	O	O	O
)	O	O	O	O
but	O	O	O	O
not	O	O	O	O
virally	B-cell_line	O	O	O
transformed	I-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
.	O	O	O	O

E1A	B-protein	O	O	O
blocked	O	O	O	O
IFN	B-protein	O	O	O
'	O	O	O	O
s	O	O	O	O
induction	O	O	O	O
of	O	O	O	O
cytolytic	O	O	O	O
resistance	O	O	O	O
,	O	O	O	O
resulting	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
selective	O	O	O	O
lysis	O	O	O	O
of	O	O	O	O
adenovirus	B-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
transformed	I-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
by	O	O	O	O
IFN	B-protein	B-cell_line	O	O
-	O	I-cell_line	O	O
activated	O	I-cell_line	O	O
NK	O	I-cell_line	O	O
cells	O	I-cell_line	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
extent	O	O	O	O
of	O	O	O	O
IFN	B-protein	O	O	O
-	O	O	O	O
induced	O	O	O	O
NK	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
killing	O	O	O	O
of	O	O	O	O
E1A	B-protein	B-cell_line	O	O
-	O	I-cell_line	O	O
expressing	O	I-cell_line	O	O
cells	O	I-cell_line	O	O
was	O	O	O	O
proportional	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
level	O	O	O	O
of	O	O	O	O
E1A	B-protein	O	O	O
expression	O	O	O	O
and	O	O	O	O
correlated	O	O	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
ability	O	O	O	O
of	O	O	O	O
E1A	B-protein	O	O	O
to	O	O	O	O
block	O	O	O	O
IFN	B-protein	O	O	O
-	O	O	O	O
stimulated	O	O	O	O
gene	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
in	O	O	O	O
target	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
contrast	O	O	O	O
,	O	O	O	O
E7	B-protein	O	O	O
blocked	O	O	O	O
neither	O	O	O	O
IFN	B-protein	O	O	O
-	O	O	O	O
stimulated	O	O	O	O
gene	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
nor	O	O	O	O
IFN	B-protein	O	O	O
'	O	O	O	O
s	O	O	O	O
induction	O	O	O	O
of	O	O	O	O
cytolytic	O	O	O	O
resistance	O	O	O	O
,	O	O	O	O
thereby	O	O	O	O
precluding	O	O	O	O
the	O	O	O	O
selective	O	O	O	O
lysis	O	O	O	O
of	O	O	O	O
HPV	B-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
transformed	I-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
by	O	O	O	O
IFN	B-protein	B-cell_line	O	O
-	O	I-cell_line	O	O
activated	O	I-cell_line	O	O
NK	O	I-cell_line	O	O
cells	O	I-cell_line	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
conclusion	O	O	O	O
,	O	O	O	O
E1A	B-protein	O	O	O
expression	O	O	O	O
marks	O	O	O	O
cells	O	O	O	O
for	O	O	O	O
destruction	O	O	O	O
by	O	O	O	O
the	O	O	O	O
host	O	O	O	O
NK	B-cell_type	O	O	O
cell	I-cell_type	O	O	O
response	O	O	O	O
,	O	O	O	O
whereas	O	O	O	O
the	O	O	O	O
E7	B-protein	B-protein	O	O
oncoprotein	O	I-protein	O	O
lacks	O	O	O	O
this	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Regulation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
IkB	B-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
phosphorylation	O	O	O	O
by	O	O	O	O
PKC	O	O	O	O
-	O	O	O	O
and	O	O	O	O
Ca	O	O	O	O
(	O	O	O	O
2	O	O	O	O
+	O	O	O	O
)	O	O	O	O
-	O	O	O	O
dependent	O	O	O	O
signal	O	O	O	O
transduction	O	O	O	O
pathways	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
Ca	B-protein	O	O	O
(	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
+	I-protein	O	O	O
)	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
dependent	I-protein	O	O	O
phosphatase	I-protein	O	O	O
calcineurin	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
a	O	O	O	O
target	O	O	O	O
of	O	O	O	O
FK506	O	O	O	O
and	O	O	O	O
CsA	O	O	O	O
,	O	O	O	O
synergizes	O	O	O	O
with	O	O	O	O
PKC	B-protein	O	O	O
-	O	O	O	O
induced	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
nuclear	B-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
(	I-protein	O	O	O
NF	I-protein	O	O	O
)	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
T	B-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
lines	I-cell_line	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
have	O	O	O	O
investigated	O	O	O	O
whether	O	O	O	O
this	O	O	O	O
synergy	O	O	O	O
is	O	O	O	O
present	O	O	O	O
in	O	O	O	O
other	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
types	O	O	O	O
and	O	O	O	O
the	O	O	O	O
mechanism	O	O	O	O
(	O	O	O	O
s	O	O	O	O
)	O	O	O	O
by	O	O	O	O
which	O	O	O	O
these	O	O	O	O
two	O	O	O	O
pathways	O	O	O	O
lead	O	O	O	O
to	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
activation	O	O	O	O
.	O	O	O	O

While	O	O	O	O
this	O	O	O	O
synergy	O	O	O	O
is	O	O	O	O
present	O	O	O	O
in	O	O	O	O
other	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
types	O	O	O	O
,	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
monocytic	B-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
line	I-cell_line	O	O	O
U937	I-cell_line	O	O	O
calcineurin	B-protein	O	O	O
is	O	O	O	O
also	O	O	O	O
sufficient	O	O	O	O
to	O	O	O	O
activate	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Having	O	O	O	O
previously	O	O	O	O
shown	O	O	O	O
that	O	O	O	O
Ca	O	O	O	O
(	O	O	O	O
2	O	O	O	O
+	O	O	O	O
)	O	O	O	O
-	O	O	O	O
and	O	O	O	O
PKC	O	O	O	O
-	O	O	O	O
dependent	O	O	O	O
pathways	O	O	O	O
synergize	O	O	O	O
by	O	O	O	O
accelerating	O	O	O	O
the	O	O	O	O
degradation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
IkB	B-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
we	O	O	O	O
focused	O	O	O	O
on	O	O	O	O
the	O	O	O	O
regulation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
IkB	B-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
phosphorylation	O	O	O	O
.	O	O	O	O

While	O	O	O	O
PKC	B-protein	O	O	O
-	O	O	O	O
dependent	O	O	O	O
pathways	O	O	O	O
sequentially	O	O	O	O
result	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
phosphorylation	O	O	O	O
and	O	O	O	O
in	O	O	O	O
an	O	O	O	O
incomplete	O	O	O	O
degradation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
IkB	B-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
T	B-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
lines	I-cell_line	O	O	O
,	O	O	O	O
co	O	O	O	O
-	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
Ca	O	O	O	O
(	O	O	O	O
2	O	O	O	O
+	O	O	O	O
)	O	O	O	O
-	O	O	O	O
dependent	O	O	O	O
pathways	O	O	O	O
accelerates	O	O	O	O
the	O	O	O	O
rate	O	O	O	O
of	O	O	O	O
IkB	B-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
phosphorylation	O	O	O	O
and	O	O	O	O
results	O	O	O	O
in	O	O	O	O
its	O	O	O	O
complete	O	O	O	O
degradation	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Activation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
Ca	O	O	O	O
(	O	O	O	O
2	O	O	O	O
+	O	O	O	O
)	O	O	O	O
-	O	O	O	O
dependent	O	O	O	O
pathways	O	O	O	O
alone	O	O	O	O
do	O	O	O	O
not	O	O	O	O
result	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
phosphorylation	O	O	O	O
and	O	O	O	O
/	O	O	O	O
or	O	O	O	O
degradation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
IkB	B-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
Jurkat	B-cell_line	O	O	O
T	I-cell_line	O	O	O
or	O	O	O	O
in	O	O	O	O
U937	B-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
.	O	O	O	O

Treatment	O	O	O	O
of	O	O	O	O
T	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
selective	O	O	O	O
PKC	B-protein	O	O	O
inhibitor	O	O	O	O
GF109203X	O	O	O	O
abrogates	O	O	O	O
the	O	O	O	O
PMA	O	O	O	O
-	O	O	O	O
induced	O	O	O	O
IkB	B-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
phosphorylation	O	O	O	O
/	O	O	O	O
degradation	O	O	O	O
irrespective	O	O	O	O
of	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
Ca	O	O	O	O
(	O	O	O	O
2	O	O	O	O
+	O	O	O	O
)	O	O	O	O
-	O	O	O	O
dependent	O	O	O	O
pathways	O	O	O	O
,	O	O	O	O
but	O	O	O	O
not	O	O	O	O
the	O	O	O	O
phosphorylation	O	O	O	O
and	O	O	O	O
degradation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
IkB	B-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
induced	O	O	O	O
by	O	O	O	O
TNF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
a	O	O	O	O
PKC	B-protein	O	O	O
-	O	O	O	O
independent	O	O	O	O
stimulus	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Contrary	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
interaction	O	O	O	O
with	O	O	O	O
PKC	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
Ca	O	O	O	O
(	O	O	O	O
2	O	O	O	O
+	O	O	O	O
)	O	O	O	O
-	O	O	O	O
dependent	O	O	O	O
pathways	O	O	O	O
synergize	O	O	O	O
with	O	O	O	O
TNF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
not	O	O	O	O
at	O	O	O	O
the	O	O	O	O
level	O	O	O	O
of	O	O	O	O
IkB	B-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
phosphorylation	O	O	O	O
,	O	O	O	O
but	O	O	O	O
at	O	O	O	O
the	O	O	O	O
level	O	O	O	O
of	O	O	O	O
its	O	O	O	O
degradation	O	O	O	O
.	O	O	O	O

These	O	O	O	O
results	O	O	O	O
indicate	O	O	O	O
that	O	O	O	O
Ca	O	O	O	O
(	O	O	O	O
2	O	O	O	O
+	O	O	O	O
)	O	O	O	O
-	O	O	O	O
dependent	O	O	O	O
pathways	O	O	O	O
,	O	O	O	O
including	O	O	O	O
the	O	O	O	O
phosphatase	B-protein	O	O	O
calcineurin	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
participate	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
regulation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
a	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
specific	O	O	O	O
fashion	O	O	O	O
and	O	O	O	O
synergize	O	O	O	O
with	O	O	O	O
PKC	B-protein	O	O	O
-	O	O	O	O
dependent	O	O	O	O
and	O	O	O	O
-	O	O	O	O
independent	O	O	O	O
pathways	O	O	O	O
at	O	O	O	O
the	O	O	O	O
level	O	O	O	O
of	O	O	O	O
IkB	B-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
phosphorylation	O	O	O	O
and	O	O	O	O
degradation	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Vitamin	O	O	O	O
E	O	O	O	O
therapy	O	O	O	O
of	O	O	O	O
acute	O	O	O	O
CCl4	O	O	O	O
-	O	O	O	O
induced	O	O	O	O
hepatic	O	O	O	O
injury	O	O	O	O
in	O	O	O	O
mice	O	O	O	O
is	O	O	O	O
associated	O	O	O	O
with	O	O	O	O
inhibition	O	O	O	O
of	O	O	O	O
nuclear	B-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
binding	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Oxidative	O	O	O	O
stress	O	O	O	O
,	O	O	O	O
with	O	O	O	O
reactive	O	O	O	O
oxygen	O	O	O	O
intermediate	O	O	O	O
formation	O	O	O	O
,	O	O	O	O
may	O	O	O	O
represent	O	O	O	O
a	O	O	O	O
common	O	O	O	O
mechanism	O	O	O	O
by	O	O	O	O
which	O	O	O	O
liver	O	O	O	O
injury	O	O	O	O
is	O	O	O	O
induced	O	O	O	O
by	O	O	O	O
diverse	O	O	O	O
etiologies	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Oxidative	O	O	O	O
stress	O	O	O	O
enhances	O	O	O	O
nuclear	B-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
activity	O	O	O	O
has	O	O	O	O
been	O	O	O	O
shown	O	O	O	O
to	O	O	O	O
enhance	O	O	O	O
the	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
cytotoxic	B-protein	O	O	O
cytokines	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Acute	O	O	O	O
hepatic	O	O	O	O
injury	O	O	O	O
caused	O	O	O	O
by	O	O	O	O
reactive	O	O	O	O
oxygen	O	O	O	O
intermediate	O	O	O	O
production	O	O	O	O
was	O	O	O	O
induced	O	O	O	O
by	O	O	O	O
an	O	O	O	O
intraperitoneal	O	O	O	O
injection	O	O	O	O
of	O	O	O	O
CCl4	O	O	O	O
in	O	O	O	O
mice	O	O	O	O
.	O	O	O	O

This	O	O	O	O
injury	O	O	O	O
was	O	O	O	O
significantly	O	O	O	O
inhibited	O	O	O	O
by	O	O	O	O
intravenous	O	O	O	O
pretreatment	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
mice	O	O	O	O
with	O	O	O	O
a	O	O	O	O
water	O	O	O	O
-	O	O	O	O
soluble	O	O	O	O
emulsion	O	O	O	O
of	O	O	O	O
alpha	O	O	O	O
-	O	O	O	O
tocopherol	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Alpha	O	O	O	O
-	O	O	O	O
tocopherol	O	O	O	O
treatment	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
mice	O	O	O	O
given	O	O	O	O
the	O	O	O	O
CCl4	O	O	O	O
also	O	O	O	O
reduced	O	O	O	O
the	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
binding	O	O	O	O
to	O	O	O	O
levels	O	O	O	O
approaching	O	O	O	O
those	O	O	O	O
found	O	O	O	O
in	O	O	O	O
normal	O	O	O	O
mice	O	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
vitro	O	O	O	O
treatment	O	O	O	O
of	O	O	O	O
a	O	O	O	O
monocyte	O	O	O	O
/	O	O	O	O
macrophage	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
line	O	O	O	O
with	O	O	O	O
CCl4	O	O	O	O
led	O	O	O	O
to	O	O	O	O
enhanced	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
binding	O	O	O	O
and	O	O	O	O
an	O	O	O	O
increase	O	O	O	O
in	O	O	O	O
tumor	B-protein	B-RNA	O	O
necrosis	I-protein	I-RNA	O	O
factor	I-protein	I-RNA	O	O
-	I-protein	I-RNA	O	O
alpha	I-protein	I-RNA	O	O
(	O	I-RNA	O	O
TNF	B-protein	I-RNA	O	O
-	I-protein	I-RNA	O	O
alpha	I-protein	I-RNA	O	O
)	O	I-RNA	O	O
messenger	O	I-RNA	O	O
RNA	O	I-RNA	O	O
levels	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Liver	O	O	O	O
specimens	O	O	O	O
taken	O	O	O	O
from	O	O	O	O
patients	O	O	O	O
with	O	O	O	O
acute	O	O	O	O
fulminant	O	O	O	O
hepatitis	O	O	O	O
had	O	O	O	O
markedly	O	O	O	O
increased	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
binding	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
in	O	O	O	O
comparison	O	O	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
of	O	O	O	O
normal	O	O	O	O
livers	O	O	O	O
.	O	O	O	O

These	O	O	O	O
data	O	O	O	O
demonstrate	O	O	O	O
that	O	O	O	O
abolishing	O	O	O	O
acute	O	O	O	O
hepatic	O	O	O	O
injury	O	O	O	O
with	O	O	O	O
alpha	O	O	O	O
-	O	O	O	O
tocopherol	O	O	O	O
,	O	O	O	O
a	O	O	O	O
free	O	O	O	O
radical	O	O	O	O
scavenger	O	O	O	O
,	O	O	O	O
also	O	O	O	O
eliminated	O	O	O	O
increased	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
binding	O	O	O	O
.	O	O	O	O

It	O	O	O	O
is	O	O	O	O
tempting	O	O	O	O
to	O	O	O	O
speculate	O	O	O	O
that	O	O	O	O
enhanced	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
expression	O	O	O	O
caused	O	O	O	O
by	O	O	O	O
free	O	O	O	O
radical	O	O	O	O
production	O	O	O	O
/	O	O	O	O
oxidative	O	O	O	O
stress	O	O	O	O
may	O	O	O	O
modulate	O	O	O	O
liver	O	O	O	O
injury	O	O	O	O
,	O	O	O	O
perhaps	O	O	O	O
through	O	O	O	O
an	O	O	O	O
effect	O	O	O	O
on	O	O	O	O
cytotoxic	B-protein	O	O	O
cytokine	I-protein	O	O	O
synthesis	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Immunosuppression	O	O	O	O
by	O	O	O	O
glucocorticoids	O	O	O	O
:	O	O	O	O
inhibition	O	O	O	O
of	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
activity	O	O	O	O
through	O	O	O	O
induction	O	O	O	O
of	O	O	O	O
I	B-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
synthesis	O	O	O	O
[	O	O	O	O
see	O	O	O	O
comments	O	O	O	O
]	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Glucocorticoids	O	O	O	O
are	O	O	O	O
among	O	O	O	O
the	O	O	O	O
most	O	O	O	O
potent	O	O	O	O
anti	O	O	O	O
-	O	O	O	O
inflammatory	O	O	O	O
and	O	O	O	O
immunosuppressive	O	O	O	O
agents	O	O	O	O
.	O	O	O	O

They	O	O	O	O
inhibit	O	O	O	O
synthesis	O	O	O	O
of	O	O	O	O
almost	O	O	O	O
all	O	O	O	O
known	O	O	O	O
cytokines	B-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
of	O	O	O	O
several	O	O	O	O
cell	B-protein	O	O	O
surface	I-protein	O	O	O
molecules	I-protein	O	O	O
required	O	O	O	O
for	O	O	O	O
immune	O	O	O	O
function	O	O	O	O
,	O	O	O	O
but	O	O	O	O
the	O	O	O	O
mechanism	O	O	O	O
underlying	O	O	O	O
this	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
has	O	O	O	O
been	O	O	O	O
unclear	O	O	O	O
.	O	O	O	O
Here	O	O	O	O
it	O	O	O	O
is	O	O	O	O
shown	O	O	O	O
that	O	O	O	O
glucocorticoids	O	O	O	O
are	O	O	O	O
potent	O	O	O	O
inhibitors	O	O	O	O
of	O	O	O	O
nuclear	B-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
in	O	O	O	O
mice	O	O	O	O
and	O	O	O	O
cultured	B-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
.	O	O	O	O

This	O	O	O	O
inhibition	O	O	O	O
is	O	O	O	O
mediated	O	O	O	O
by	O	O	O	O
induction	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
I	B-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
alpha	O	O	O	O
inhibitory	O	O	O	O
protein	O	O	O	O
,	O	O	O	O
which	O	O	O	O
traps	O	O	O	O
activated	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
inactive	B-protein	O	O	O
cytoplasmic	I-protein	O	O	O
complexes	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Because	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
activates	O	O	O	O
many	O	O	O	O
immunoregulatory	B-DNA	O	O	O
genes	I-DNA	O	O	O
in	O	O	O	O
response	O	O	O	O
to	O	O	O	O
pro	O	O	O	O
-	O	O	O	O
inflammatory	O	O	O	O
stimuli	O	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
inhibition	O	O	O	O
of	O	O	O	O
its	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
can	O	O	O	O
be	O	O	O	O
a	O	O	O	O
major	O	O	O	O
component	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
anti	O	O	O	O
-	O	O	O	O
inflammatory	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
of	O	O	O	O
glucocorticoids	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Transcriptional	O	O	O	O
repression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
interleukin	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
2	I-DNA	O	O	O
gene	I-DNA	O	O	O
by	O	O	O	O
vitamin	O	O	O	O
D3	O	O	O	O
:	O	O	O	O
direct	O	O	O	O
inhibition	O	O	O	O
of	O	O	O	O
NFATp	B-protein	O	O	O
/	I-protein	O	O	O
AP	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
complex	I-protein	O	O	O
formation	O	O	O	O
by	O	O	O	O
a	O	O	O	O
nuclear	B-protein	O	O	O
hormone	I-protein	O	O	O
receptor	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

T	O	O	O	O
-	O	O	O	O
lymphocyte	O	O	O	O
proliferation	O	O	O	O
is	O	O	O	O
suppressed	O	O	O	O
by	O	O	O	O
1	O	O	O	O
,	O	O	O	O
25	O	O	O	O
-	O	O	O	O
dihydroxyvitamin	O	O	O	O
D3	O	O	O	O
[	O	O	O	O
1	O	O	O	O
,	O	O	O	O
25	O	O	O	O
(	O	O	O	O
OH	O	O	O	O
)	O	O	O	O
2D3	O	O	O	O
]	O	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
active	O	O	O	O
metabolite	O	O	O	O
of	O	O	O	O
vitamin	O	O	O	O
D3	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
is	O	O	O	O
associated	O	O	O	O
with	O	O	O	O
a	O	O	O	O
decrease	O	O	O	O
in	O	O	O	O
interleukin	O	O	O	O
2	O	O	O	O
(	O	O	O	O
IL	O	O	O	O
-	O	O	O	O
2	O	O	O	O
)	O	O	O	O
,	O	O	O	O
gamma	O	O	O	O
interferon	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
granulocyte	O	O	O	O
-	O	O	O	O
macrophage	O	O	O	O
colony	O	O	O	O
-	O	O	O	O
stimulating	O	O	O	O
factor	O	O	O	O
mRNA	O	O	O	O
levels	O	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
report	O	O	O	O
here	O	O	O	O
that	O	O	O	O
1	O	O	O	O
,	O	O	O	O
25	O	O	O	O
(	O	O	O	O
OH	O	O	O	O
)	O	O	O	O
2D3	O	O	O	O
-	O	O	O	O
mediated	O	O	O	O
repression	O	O	O	O
in	O	O	O	O
Jurkat	B-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
is	O	O	O	O
cycloheximide	O	O	O	O
resistant	O	O	O	O
,	O	O	O	O
suggesting	O	O	O	O
that	O	O	O	O
it	O	O	O	O
is	O	O	O	O
a	O	O	O	O
direct	O	O	O	O
transcriptional	O	O	O	O
repressive	O	O	O	O
effect	O	O	O	O
on	O	O	O	O
IL	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
expression	O	O	O	O
by	O	O	O	O
the	O	O	O	O
vitamin	B-protein	O	O	O
D3	I-protein	O	O	O
receptor	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
VDR	B-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
therefore	O	O	O	O
examined	O	O	O	O
vitamin	O	O	O	O
D3	O	O	O	O
-	O	O	O	O
mediated	O	O	O	O
repression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
activated	O	O	O	O
IL	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
expression	O	O	O	O
by	O	O	O	O
cotransfecting	O	O	O	O
Jurkat	B-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
with	O	O	O	O
IL	B-protein	B-DNA	O	O
-	I-protein	I-DNA	O	O
2	I-protein	I-DNA	O	O
promoter	O	I-DNA	O	O
/	O	I-DNA	O	O
reporter	O	I-DNA	O	O
constructs	O	I-DNA	O	O
and	O	O	O	O
a	O	O	O	O
VDR	B-protein	B-DNA	O	O
overexpression	O	I-DNA	O	O
vector	O	I-DNA	O	O
and	O	O	O	O
by	O	O	O	O
DNA	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
delineated	O	O	O	O
an	O	O	O	O
element	O	O	O	O
conferring	O	O	O	O
both	O	O	O	O
DNA	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
by	O	O	O	O
the	O	O	O	O
receptor	O	O	O	O
in	O	O	O	O
vitro	O	O	O	O
and	O	O	O	O
1	O	O	O	O
,	O	O	O	O
25	O	O	O	O
(	O	O	O	O
OH	O	O	O	O
)	O	O	O	O
2D3	O	O	O	O
-	O	O	O	O
mediated	O	O	O	O
repression	O	O	O	O
in	O	O	O	O
vivo	O	O	O	O
to	O	O	O	O
a	O	O	O	O
short	O	O	O	O
40	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
bp	I-DNA	O	O	O
region	I-DNA	O	O	O
encompassing	O	O	O	O
an	O	O	O	O
important	O	O	O	O
positive	B-DNA	O	O	O
regulatory	I-DNA	O	O	O
element	I-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
NF	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
AT	I-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
1	I-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
which	O	O	O	O
is	O	O	O	O
bound	O	O	O	O
by	O	O	O	O
a	O	O	O	O
T	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
cell	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
specific	I-protein	O	O	O
transcription	I-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
NFATp	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
as	O	O	O	O
well	O	O	O	O
as	O	O	O	O
by	O	O	O	O
AP	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

VDR	B-protein	B-protein	O	O
DNA	O	I-protein	O	O
-	O	I-protein	O	O
binding	O	I-protein	O	O
mutants	O	I-protein	O	O
were	O	O	O	O
unable	O	O	O	O
to	O	O	O	O
either	O	O	O	O
bind	O	O	O	O
to	O	O	O	O
this	O	O	O	O
element	O	O	O	O
in	O	O	O	O
vitro	O	O	O	O
or	O	O	O	O
repress	O	O	O	O
in	O	O	O	O
vivo	O	O	O	O
;	O	O	O	O
the	O	O	O	O
VDR	B-protein	B-protein	O	O
DNA	O	I-protein	O	O
-	O	I-protein	O	O
binding	O	I-protein	O	O
domain	O	I-protein	O	O
alone	O	O	O	O
,	O	O	O	O
however	O	O	O	O
,	O	O	O	O
bound	O	O	O	O
the	O	O	O	O
element	O	O	O	O
but	O	O	O	O
also	O	O	O	O
could	O	O	O	O
not	O	O	O	O
repress	O	O	O	O
IL	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
expression	O	O	O	O
.	O	O	O	O

These	O	O	O	O
results	O	O	O	O
indicate	O	O	O	O
that	O	O	O	O
DNA	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
by	O	O	O	O
VDR	B-protein	O	O	O
is	O	O	O	O
necessary	O	O	O	O
but	O	O	O	O
not	O	O	O	O
sufficient	O	O	O	O
to	O	O	O	O
mediate	O	O	O	O
IL	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
repression	O	O	O	O
.	O	O	O	O

By	O	O	O	O
combining	O	O	O	O
partially	B-protein	O	O	O
purified	I-protein	O	O	O
proteins	I-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
vitro	O	O	O	O
,	O	O	O	O
we	O	O	O	O
observed	O	O	O	O
the	O	O	O	O
loss	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
bound	O	O	O	O
NFATp	B-protein	B-protein	O	O
/	O	I-protein	O	O
AP	O	I-protein	O	O
-	O	I-protein	O	O
1	O	I-protein	O	O
-	O	I-protein	O	O
DNA	O	I-protein	O	O
complex	O	I-protein	O	O
upon	O	O	O	O
inclusion	O	O	O	O
of	O	O	O	O
VDR	B-protein	O	O	O
or	O	O	O	O
VDR	B-protein	B-protein	O	O
-	O	I-protein	O	O
retinoid	O	I-protein	O	O
X	O	I-protein	O	O
receptor	O	I-protein	O	O
.	O	O	O	O

Order	O	O	O	O
of	O	O	O	O
addition	O	O	O	O
and	O	O	O	O
off	O	O	O	O
-	O	O	O	O
rate	O	O	O	O
experiments	O	O	O	O
indicate	O	O	O	O
that	O	O	O	O
the	O	O	O	O
VDR	B-protein	B-protein	O	O
-	O	I-protein	O	O
retinoid	O	I-protein	O	O
X	O	I-protein	O	O
receptor	O	I-protein	O	O
heterodimer	O	I-protein	O	O
blocks	O	O	O	O
NFATp	B-protein	B-protein	O	O
/	O	I-protein	O	O
AP	B-protein	I-protein	O	O
-	I-protein	I-protein	O	O
1	I-protein	I-protein	O	O
complex	O	I-protein	O	O
formation	O	O	O	O
and	O	O	O	O
then	O	O	O	O
stably	O	O	O	O
associates	O	O	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
NF	B-DNA	B-DNA	O	O
-	I-DNA	I-DNA	O	O
AT	I-DNA	I-DNA	O	O
-	I-DNA	I-DNA	O	O
1	I-DNA	I-DNA	O	O
element	O	I-DNA	O	O
.	O	O	O	O

This	O	O	O	O
direct	O	O	O	O
inhibition	O	O	O	O
by	O	O	O	O
a	O	O	O	O
nuclear	O	O	O	O
hormone	O	O	O	O
receptor	O	O	O	O
of	O	O	O	O
transcriptional	B-protein	O	O	O
activators	I-protein	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
IL	B-protein	B-DNA	O	O
-	I-protein	I-DNA	O	O
2	I-protein	I-DNA	O	O
gene	O	I-DNA	O	O
may	O	O	O	O
provide	O	O	O	O
a	O	O	O	O
mechanistic	O	O	O	O
explanation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
how	O	O	O	O
vitamin	O	O	O	O
derivatives	O	O	O	O
can	O	O	O	O
act	O	O	O	O
as	O	O	O	O
potent	O	O	O	O
immunosuppressive	O	O	O	O
agents	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Tissue	O	O	O	O
-	O	O	O	O
specific	O	O	O	O
regulation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
rabbit	O	B-DNA	O	O
15	B-protein	I-DNA	O	O
-	I-protein	I-DNA	O	O
lipoxygenase	I-protein	I-DNA	O	O
gene	O	I-DNA	O	O
in	O	O	O	O
erythroid	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
by	O	O	O	O
a	O	O	O	O
transcriptional	B-DNA	O	O	O
silencer	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
15	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
lipoxygenase	I-DNA	O	O	O
(	I-DNA	O	O	O
lox	I-DNA	O	O	O
)	I-DNA	O	O	O
gene	I-DNA	O	O	O
is	O	O	O	O
expressed	O	O	O	O
in	O	O	O	O
a	O	O	O	O
tissue	O	O	O	O
-	O	O	O	O
specific	O	O	O	O
manner	O	O	O	O
,	O	O	O	O
predominantly	O	O	O	O
in	O	O	O	O
erythroid	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
but	O	O	O	O
also	O	O	O	O
in	O	O	O	O
airway	B-cell_type	O	O	O
epithelial	I-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
and	O	O	O	O
eosinophils	B-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
demonstrate	O	O	O	O
in	O	O	O	O
this	O	O	O	O
report	O	O	O	O
that	O	O	O	O
the	O	O	O	O
5	B-DNA	O	O	O
'	I-DNA	O	O	O
flanking	I-DNA	O	O	O
DNA	I-DNA	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
15	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
lox	I-DNA	O	O	O
gene	I-DNA	O	O	O
contains	O	O	O	O
sequences	O	O	O	O
which	O	O	O	O
down	O	O	O	O
-	O	O	O	O
regulate	O	O	O	O
its	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
in	O	O	O	O
a	O	O	O	O
variety	O	O	O	O
of	O	O	O	O
non	B-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
erythroid	I-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
lines	I-cell_line	O	O	O
but	O	O	O	O
not	O	O	O	O
in	O	O	O	O
two	O	O	O	O
erythroid	B-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
lines	I-cell_line	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
element	O	O	O	O
has	O	O	O	O
characteristics	O	O	O	O
of	O	O	O	O
a	O	O	O	O
transcriptional	B-DNA	O	O	O
'	I-DNA	O	O	O
silencer	I-DNA	O	O	O
'	I-DNA	O	O	O
since	O	O	O	O
it	O	O	O	O
functions	O	O	O	O
in	O	O	O	O
both	O	O	O	O
orientations	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
main	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
silencer	B-DNA	O	O	O
has	O	O	O	O
been	O	O	O	O
mapped	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
first	O	O	O	O
900	O	O	O	O
bp	O	O	O	O
of	O	O	O	O
5	B-DNA	O	O	O
'	I-DNA	O	O	O
flanking	I-DNA	O	O	O
DNA	I-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
which	O	O	O	O
contains	O	O	O	O
nine	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
sites	O	O	O	O
for	O	O	O	O
a	O	O	O	O
nuclear	B-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
present	O	O	O	O
in	O	O	O	O
non	O	O	O	O
-	O	O	O	O
erythroid	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
but	O	O	O	O
not	O	O	O	O
in	O	O	O	O
erythroid	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

These	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
sites	O	O	O	O
have	O	O	O	O
similar	O	O	O	O
sequences	O	O	O	O
and	O	O	O	O
multiple	O	O	O	O
copies	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
binding	B-DNA	O	O	O
sites	I-DNA	O	O	O
confer	O	O	O	O
tissue	O	O	O	O
-	O	O	O	O
specific	O	O	O	O
down	O	O	O	O
-	O	O	O	O
regulation	O	O	O	O
when	O	O	O	O
attached	O	O	O	O
to	O	O	O	O
a	O	O	O	O
minimal	O	B-DNA	O	O
lox	B-DNA	I-DNA	O	O
promoter	I-DNA	I-DNA	O	O
fragment	O	I-DNA	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
5	B-DNA	O	O	O
'	I-DNA	O	O	O
flanking	I-DNA	O	O	O
DNA	I-DNA	O	O	O
also	O	O	O	O
contains	O	O	O	O
a	O	O	O	O
cluster	O	O	O	O
of	O	O	O	O
three	O	O	O	O
binding	B-DNA	O	O	O
sites	I-DNA	O	O	O
for	O	O	O	O
the	O	O	O	O
GATA	B-protein	O	O	O
family	I-protein	O	O	O
of	O	O	O	O
transcription	B-protein	O	O	O
factors	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Phosphorylation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
transcription	B-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
NFATp	B-protein	O	O	O
inhibits	O	O	O	O
its	O	O	O	O
DNA	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
in	O	O	O	O
cyclosporin	B-cell_line	O	O	O
A	I-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
treated	I-cell_line	O	O	O
human	I-cell_line	O	O	O
B	I-cell_line	O	O	O
and	O	O	O	O
T	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

Cyclosporin	O	O	O	O
A	O	O	O	O
(	O	O	O	O
CsA	O	O	O	O
)	O	O	O	O
exerts	O	O	O	O
its	O	O	O	O
immunosuppressive	O	O	O	O
effect	O	O	O	O
by	O	O	O	O
inhibiting	O	O	O	O
the	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
of	O	O	O	O
nuclear	B-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
of	O	O	O	O
activated	O	O	O	O
T	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
(	O	O	O	O
NFAT	B-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
,	O	O	O	O
thus	O	O	O	O
preventing	O	O	O	O
transcriptional	O	O	O	O
induction	O	O	O	O
of	O	O	O	O
several	O	O	O	O
cytokine	O	O	O	O
genes	O	O	O	O
.	O	O	O	O

This	O	O	O	O
effect	O	O	O	O
is	O	O	O	O
thought	O	O	O	O
to	O	O	O	O
be	O	O	O	O
largely	O	O	O	O
mediated	O	O	O	O
through	O	O	O	O
inactivation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
phosphatase	O	O	O	O
calcineurin	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
which	O	O	O	O
in	O	O	O	O
turn	O	O	O	O
inhibits	O	O	O	O
translocation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
an	O	O	O	O
NFAT	B-protein	O	O	O
component	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
nucleus	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Here	O	O	O	O
we	O	O	O	O
report	O	O	O	O
that	O	O	O	O
CsA	O	O	O	O
treatment	O	O	O	O
of	O	O	O	O
Raji	B-cell_line	O	O	O
B	I-cell_line	O	O	O
and	O	O	O	O
Jurkat	O	B-cell_line	O	O
T	B-cell_line	I-cell_line	O	O
cell	I-cell_line	I-cell_line	O	O
lines	I-cell_line	I-cell_line	O	O
yields	O	O	O	O
a	O	O	O	O
phosphorylated	O	O	O	O
form	O	O	O	O
of	O	O	O	O
NFATp	B-protein	O	O	O
that	O	O	O	O
is	O	O	O	O
inhibited	O	O	O	O
in	O	O	O	O
DNA	O	O	O	O
-	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
and	O	O	O	O
in	O	O	O	O
its	O	O	O	O
ability	O	O	O	O
to	O	O	O	O
form	O	O	O	O
an	O	O	O	O
NFAT	B-protein	O	O	O
complex	I-protein	O	O	O
with	O	O	O	O
Fos	B-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
Jun	B-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Immunoblot	O	O	O	O
analyses	O	O	O	O
and	O	O	O	O
metabolic	O	O	O	O
labeling	O	O	O	O
with	O	O	O	O
[	O	O	O	O
32P	O	O	O	O
]	O	O	O	O
orthophosphate	O	O	O	O
show	O	O	O	O
that	O	O	O	O
CsA	O	O	O	O
alters	O	O	O	O
NFATp	B-protein	O	O	O
migration	O	O	O	O
on	O	O	O	O
SDS	O	O	O	O
-	O	O	O	O
polyacrylamide	O	O	O	O
gel	O	O	O	O
electrophoresis	O	O	O	O
by	O	O	O	O
increasing	O	O	O	O
its	O	O	O	O
phosphorylation	O	O	O	O
level	O	O	O	O
without	O	O	O	O
affecting	O	O	O	O
subcellular	O	O	O	O
distribution	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Dephosphorylation	O	O	O	O
by	O	O	O	O
in	O	O	O	O
vitro	O	O	O	O
treatment	O	O	O	O
with	O	O	O	O
calcineurin	B-protein	O	O	O
or	O	O	O	O
alkaline	B-protein	O	O	O
phosphatase	I-protein	O	O	O
restores	O	O	O	O
NFATp	B-protein	O	O	O
DNA	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
and	O	O	O	O
its	O	O	O	O
ability	O	O	O	O
to	O	O	O	O
reconstitute	O	O	O	O
an	O	O	O	O
NFAT	B-protein	O	O	O
complex	I-protein	O	O	O
with	O	O	O	O
Fos	B-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
Jun	B-protein	O	O	O
proteins	O	O	O	O
.	O	O	O	O

These	O	O	O	O
data	O	O	O	O
point	O	O	O	O
to	O	O	O	O
a	O	O	O	O
new	O	O	O	O
mechanism	O	O	O	O
for	O	O	O	O
CsA	O	O	O	O
-	O	O	O	O
sensitive	O	O	O	O
regulation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
NFATp	B-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
which	O	O	O	O
dephosphorylation	O	O	O	O
is	O	O	O	O
critical	O	O	O	O
for	O	O	O	O
DNA	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Transcription	B-protein	O	O	O
factors	I-protein	O	O	O
as	O	O	O	O
targets	O	O	O	O
for	O	O	O	O
oxidative	O	O	O	O
signalling	O	O	O	O
during	O	O	O	O
lymphocyte	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
previously	O	O	O	O
have	O	O	O	O
demonstrated	O	O	O	O
a	O	O	O	O
requirement	O	O	O	O
for	O	O	O	O
oxidative	O	O	O	O
events	O	O	O	O
during	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
cycle	O	O	O	O
entry	O	O	O	O
in	O	O	O	O
T	B-cell_type	O	O	O
lymphocytes	I-cell_type	O	O	O
and	O	O	O	O
have	O	O	O	O
hypothesised	O	O	O	O
that	O	O	O	O
reactive	O	O	O	O
oxygen	O	O	O	O
species	O	O	O	O
may	O	O	O	O
act	O	O	O	O
as	O	O	O	O
intracellular	O	O	O	O
signalling	O	O	O	O
agents	O	O	O	O
during	O	O	O	O
lymphocyte	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
the	O	O	O	O
current	O	O	O	O
study	O	O	O	O
,	O	O	O	O
cysteamine	O	O	O	O
,	O	O	O	O
an	O	O	O	O
aminothiol	O	O	O	O
compound	O	O	O	O
with	O	O	O	O
antioxidant	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
,	O	O	O	O
has	O	O	O	O
been	O	O	O	O
used	O	O	O	O
to	O	O	O	O
further	O	O	O	O
investigate	O	O	O	O
the	O	O	O	O
role	O	O	O	O
of	O	O	O	O
oxidative	O	O	O	O
signalling	O	O	O	O
during	O	O	O	O
lymphocyte	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Treatment	O	O	O	O
of	O	O	O	O
normal	O	O	O	O
human	B-cell_type	O	O	O
peripheral	I-cell_type	O	O	O
blood	I-cell_type	O	O	O
lymphocytes	I-cell_type	O	O	O
with	O	O	O	O
cysteamine	O	O	O	O
in	O	O	O	O
vitro	O	O	O	O
was	O	O	O	O
found	O	O	O	O
to	O	O	O	O
inhibit	O	O	O	O
proliferation	O	O	O	O
in	O	O	O	O
a	O	O	O	O
dose	O	O	O	O
-	O	O	O	O
dependent	O	O	O	O
manner	O	O	O	O
,	O	O	O	O
with	O	O	O	O
essentially	O	O	O	O
complete	O	O	O	O
inhibition	O	O	O	O
occurring	O	O	O	O
at	O	O	O	O
a	O	O	O	O
dose	O	O	O	O
of	O	O	O	O
400	O	O	O	O
microM	O	O	O	O
.	O	O	O	O

This	O	O	O	O
inhibitory	O	O	O	O
effect	O	O	O	O
was	O	O	O	O
limited	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
first	O	O	O	O
2	O	O	O	O
h	O	O	O	O
after	O	O	O	O
mitogenic	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
,	O	O	O	O
localizing	O	O	O	O
the	O	O	O	O
time	O	O	O	O
-	O	O	O	O
frame	O	O	O	O
of	O	O	O	O
action	O	O	O	O
of	O	O	O	O
cysteamine	O	O	O	O
to	O	O	O	O
within	O	O	O	O
the	O	O	O	O
commitment	O	O	O	O
period	O	O	O	O
.	O	O	O	O

It	O	O	O	O
therefore	O	O	O	O
was	O	O	O	O
of	O	O	O	O
interest	O	O	O	O
to	O	O	O	O
establish	O	O	O	O
which	O	O	O	O
,	O	O	O	O
if	O	O	O	O
any	O	O	O	O
,	O	O	O	O
commitment	O	O	O	O
events	O	O	O	O
were	O	O	O	O
affected	O	O	O	O
by	O	O	O	O
oxidative	O	O	O	O
signalling	O	O	O	O
during	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
cycle	O	O	O	O
entry	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Taking	O	O	O	O
the	O	O	O	O
IL	B-protein	B-DNA	O	O
-	I-protein	I-DNA	O	O
2	I-protein	I-DNA	O	O
gene	O	I-DNA	O	O
as	O	O	O	O
a	O	O	O	O
candidate	O	O	O	O
,	O	O	O	O
we	O	O	O	O
examined	O	O	O	O
the	O	O	O	O
effect	O	O	O	O
of	O	O	O	O
cysteamine	O	O	O	O
treatment	O	O	O	O
on	O	O	O	O
early	B-DNA	O	O	O
gene	I-DNA	O	O	O
expression	O	O	O	O
during	O	O	O	O
lymphocyte	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
on	O	O	O	O
the	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
of	O	O	O	O
transcription	B-protein	O	O	O
factors	I-protein	O	O	O
AP	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
AT	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
Oct1	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
whose	O	O	O	O
functions	O	O	O	O
are	O	O	O	O
required	O	O	O	O
for	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
IL	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
mRNA	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Cysteamine	O	O	O	O
treatment	O	O	O	O
inhibited	O	O	O	O
both	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
IL	B-protein	B-RNA	O	O
-	I-protein	I-RNA	O	O
2	I-protein	I-RNA	O	O
mRNA	O	I-RNA	O	O
and	O	O	O	O
secretion	O	O	O	O
of	O	O	O	O
IL	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
into	O	O	O	O
the	O	O	O	O
culture	O	O	O	O
medium	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
inhibitory	O	O	O	O
effect	O	O	O	O
of	O	O	O	O
cysteamine	O	O	O	O
may	O	O	O	O
be	O	O	O	O
mediated	O	O	O	O
at	O	O	O	O
least	O	O	O	O
in	O	O	O	O
part	O	O	O	O
by	O	O	O	O
an	O	O	O	O
effect	O	O	O	O
on	O	O	O	O
transcription	B-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
function	O	O	O	O
,	O	O	O	O
as	O	O	O	O
the	O	O	O	O
DNA	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
activities	O	O	O	O
of	O	O	O	O
AP	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
NF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
extracted	O	O	O	O
from	O	O	O	O
mitogen	B-cell_type	O	O	O
-	I-cell_type	O	O	O
stimulated	I-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
were	O	O	O	O
significantly	O	O	O	O
inhibited	O	O	O	O
by	O	O	O	O
cysteamine	O	O	O	O
treatment	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Interestingly	O	O	O	O
,	O	O	O	O
Oct1	O	O	O	O
and	O	O	O	O
NF	O	O	O	O
-	O	O	O	O
AT	O	O	O	O
DNA	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
were	O	O	O	O
not	O	O	O	O
affected	O	O	O	O
by	O	O	O	O
cysteamine	O	O	O	O
treatment	O	O	O	O
,	O	O	O	O
suggesting	O	O	O	O
that	O	O	O	O
oxidative	O	O	O	O
signalling	O	O	O	O
processes	O	O	O	O
operate	O	O	O	O
in	O	O	O	O
a	O	O	O	O
selective	O	O	O	O
manner	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
identification	O	O	O	O
of	O	O	O	O
regulatory	B-protein	O	O	O
proteins	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
such	O	O	O	O
as	O	O	O	O
transcription	B-protein	O	O	O
factors	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
as	O	O	O	O
molecular	O	O	O	O
targets	O	O	O	O
for	O	O	O	O
oxidative	O	O	O	O
signalling	O	O	O	O
provides	O	O	O	O
further	O	O	O	O
evidence	O	O	O	O
to	O	O	O	O
implicate	O	O	O	O
oxidative	O	O	O	O
signalling	O	O	O	O
as	O	O	O	O
being	O	O	O	O
intimately	O	O	O	O
involved	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
G0	O	O	O	O
to	O	O	O	O
G1	O	O	O	O
phase	O	O	O	O
transition	O	O	O	O
in	O	O	O	O
T	B-cell_type	O	O	O
lymphocytes	I-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

Sex	O	O	O	O
and	O	O	O	O
age	O	O	O	O
distribution	O	O	O	O
of	O	O	O	O
1	B-protein	O	O	O
,	I-protein	O	O	O
25	I-protein	O	O	O
(	I-protein	O	O	O
OH	I-protein	O	O	O
)	I-protein	O	O	O
2D3	I-protein	O	O	O
receptors	I-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
peripheral	B-cell_type	O	O	O
blood	I-cell_type	O	O	O
mononuclear	I-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
from	O	O	O	O
normal	O	O	O	O
human	O	O	O	O
subjects	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Specific	O	O	O	O
receptors	O	O	O	O
for	O	O	O	O
1	O	O	O	O
,	O	O	O	O
25	O	O	O	O
Dihydroxyvitamin	O	O	O	O
D3	O	O	O	O
have	O	O	O	O
been	O	O	O	O
described	O	O	O	O
in	O	O	O	O
human	O	O	O	O
peripheral	B-cell_type	O	O	O
blood	I-cell_type	O	O	O
mononuclear	I-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
(	O	O	O	O
PBMC	B-cell_type	O	O	O
)	O	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
have	O	O	O	O
tried	O	O	O	O
to	O	O	O	O
find	O	O	O	O
out	O	O	O	O
whether	O	O	O	O
these	O	O	O	O
receptors	O	O	O	O
could	O	O	O	O
show	O	O	O	O
any	O	O	O	O
difference	O	O	O	O
in	O	O	O	O
sex	O	O	O	O
or	O	O	O	O
age	O	O	O	O
distribution	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Twenty	O	O	O	O
two	O	O	O	O
healthy	O	O	O	O
men	O	O	O	O
aged	O	O	O	O
21	O	O	O	O
-	O	O	O	O
66	O	O	O	O
yr	O	O	O	O
(	O	O	O	O
mean	O	O	O	O
+	O	O	O	O
/	O	O	O	O
-	O	O	O	O
SD	O	O	O	O
41	O	O	O	O
.	O	O	O	O
0	O	O	O	O
+	O	O	O	O
/	O	O	O	O
-	O	O	O	O
13	O	O	O	O
.	O	O	O	O
6	O	O	O	O
)	O	O	O	O
and	O	O	O	O
nineteen	O	O	O	O
healthy	O	O	O	O
women	O	O	O	O
aged	O	O	O	O
22	O	O	O	O
-	O	O	O	O
60	O	O	O	O
yr	O	O	O	O
(	O	O	O	O
38	O	O	O	O
.	O	O	O	O
9	O	O	O	O
+	O	O	O	O
/	O	O	O	O
-	O	O	O	O
13	O	O	O	O
.	O	O	O	O
9	O	O	O	O
)	O	O	O	O
have	O	O	O	O
been	O	O	O	O
studied	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
mean	O	O	O	O
dissociation	O	O	O	O
constant	O	O	O	O
(	O	O	O	O
Kd	O	O	O	O
)	O	O	O	O
was	O	O	O	O
similar	O	O	O	O
in	O	O	O	O
both	O	O	O	O
sexes	O	O	O	O
(	O	O	O	O
1	O	O	O	O
.	O	O	O	O
35	O	O	O	O
+	O	O	O	O
/	O	O	O	O
-	O	O	O	O
0	O	O	O	O
.	O	O	O	O
70	O	O	O	O
x	O	O	O	O
10	O	O	O	O
(	O	O	O	O
-	O	O	O	O
10	O	O	O	O
)	O	O	O	O
M	O	O	O	O
in	O	O	O	O
males	O	O	O	O
,	O	O	O	O
1	O	O	O	O
.	O	O	O	O
13	O	O	O	O
+	O	O	O	O
/	O	O	O	O
-	O	O	O	O
0	O	O	O	O
.	O	O	O	O
66	O	O	O	O
x	O	O	O	O
10	O	O	O	O
(	O	O	O	O
-	O	O	O	O
10	O	O	O	O
)	O	O	O	O
M	O	O	O	O
in	O	O	O	O
females	O	O	O	O
)	O	O	O	O
,	O	O	O	O
but	O	O	O	O
the	O	O	O	O
concentration	O	O	O	O
of	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
sites	O	O	O	O
(	O	O	O	O
Nmax	O	O	O	O
)	O	O	O	O
was	O	O	O	O
significantly	O	O	O	O
lower	O	O	O	O
in	O	O	O	O
females	O	O	O	O
(	O	O	O	O
2	O	O	O	O
.	O	O	O	O
32	O	O	O	O
+	O	O	O	O
/	O	O	O	O
-	O	O	O	O
0	O	O	O	O
.	O	O	O	O
92	O	O	O	O
fmol	O	O	O	O
/	O	O	O	O
10	O	O	O	O
(	O	O	O	O
7	O	O	O	O
)	O	O	O	O
PBMC	B-cell_type	O	O	O
vs	O	O	O	O
4	O	O	O	O
.	O	O	O	O
43	O	O	O	O
+	O	O	O	O
/	O	O	O	O
-	O	O	O	O
1	O	O	O	O
.	O	O	O	O
38	O	O	O	O
fmol	O	O	O	O
/	O	O	O	O
10	O	O	O	O
(	O	O	O	O
7	O	O	O	O
)	O	O	O	O
PBMC	B-cell_type	O	O	O
in	O	O	O	O
males	O	O	O	O
;	O	O	O	O
p	O	O	O	O
=	O	O	O	O
0	O	O	O	O
.	O	O	O	O
0001	O	O	O	O
)	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Neither	O	O	O	O
Kd	O	O	O	O
nor	O	O	O	O
Nmax	O	O	O	O
were	O	O	O	O
significantly	O	O	O	O
correlated	O	O	O	O
with	O	O	O	O
age	O	O	O	O
.	O	O	O	O

No	O	O	O	O
difference	O	O	O	O
was	O	O	O	O
found	O	O	O	O
between	O	O	O	O
pre	O	O	O	O
and	O	O	O	O
postmenopausal	O	O	O	O
women	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Further	O	O	O	O
studies	O	O	O	O
are	O	O	O	O
needed	O	O	O	O
to	O	O	O	O
elucidate	O	O	O	O
if	O	O	O	O
this	O	O	O	O
sex	O	O	O	O
difference	O	O	O	O
in	O	O	O	O
PBMC	B-cell_type	B-protein	O	O
receptors	O	I-protein	O	O
for	O	O	O	O
1	O	O	O	O
.	O	O	O	O
25	O	O	O	O
Dihydroxyvitamin	O	O	O	O
D3	O	O	O	O
is	O	O	O	O
of	O	O	O	O
any	O	O	O	O
pathophysiological	O	O	O	O
relevance	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
Id2	O	O	O	O
and	O	O	O	O
Id3	O	O	O	O
mRNA	O	O	O	O
in	O	O	O	O
human	B-cell_type	O	O	O
lymphocytes	I-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

Helix	B-protein	B-protein	O	O
-	I-protein	I-protein	O	O
loop	I-protein	I-protein	O	O
-	I-protein	I-protein	O	O
helix	I-protein	I-protein	O	O
(	O	I-protein	O	O
HLH	B-protein	I-protein	O	O
)	O	I-protein	O	O
transcription	O	I-protein	O	O
factors	O	I-protein	O	O
are	O	O	O	O
involved	O	O	O	O
in	O	O	O	O
cellular	O	O	O	O
growth	O	O	O	O
and	O	O	O	O
differentiation	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
Id	B-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
inhibitor	O	O	O	O
of	O	O	O	O
DNA	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
and	O	O	O	O
differentiation	O	O	O	O
)	O	O	O	O
HLH	B-protein	O	O	O
proteins	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
in	O	O	O	O
a	O	O	O	O
dominantly	O	O	O	O
negative	O	O	O	O
fashion	O	O	O	O
,	O	O	O	O
regulate	O	O	O	O
transcriptional	O	O	O	O
activities	O	O	O	O
of	O	O	O	O
basic	B-protein	O	O	O
HLH	I-protein	O	O	O
proteins	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
examined	O	O	O	O
by	O	O	O	O
northern	O	O	O	O
hybridization	O	O	O	O
the	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
Id2	O	O	O	O
and	O	O	O	O
Id3	O	O	O	O
mRNA	O	O	O	O
in	O	O	O	O
human	B-cell_line	O	O	O
leukemia	I-cell_line	O	O	O
/	I-cell_line	O	O	O
lymphoma	I-cell_line	O	O	O
lines	I-cell_line	O	O	O
and	O	O	O	O
patient	O	O	O	O
samples	O	O	O	O
,	O	O	O	O
as	O	O	O	O
well	O	O	O	O
as	O	O	O	O
resting	O	O	O	O
and	O	O	O	O
activated	B-cell_line	O	O	O
normal	I-cell_line	O	O	O
human	I-cell_line	O	O	O
lymphocytes	I-cell_line	O	O	O
from	O	O	O	O
peripheral	O	O	O	O
blood	O	O	O	O
(	O	O	O	O
PBL	B-cell_type	O	O	O
)	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
Id2	B-protein	B-RNA	O	O
mRNA	O	I-RNA	O	O
was	O	O	O	O
abundantly	O	O	O	O
expressed	O	O	O	O
in	O	O	O	O
5	B-cell_line	O	O	O
/	I-cell_line	O	O	O
12	I-cell_line	O	O	O
T	I-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
and	O	O	O	O
3	B-cell_line	O	O	O
/	I-cell_line	O	O	O
4	I-cell_line	O	O	O
B	I-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
lines	I-cell_line	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
Id3	B-protein	B-RNA	O	O
mRNA	O	I-RNA	O	O
was	O	O	O	O
detected	O	O	O	O
in	O	O	O	O
4	B-cell_line	O	O	O
/	I-cell_line	O	O	O
12	I-cell_line	O	O	O
T	I-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
and	O	O	O	O
3	B-cell_line	O	O	O
/	I-cell_line	O	O	O
4	I-cell_line	O	O	O
B	I-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
lines	I-cell_line	O	O	O
.	O	O	O	O

Interestingly	O	O	O	O
,	O	O	O	O
Id2	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
but	O	O	O	O
not	O	O	O	O
Id3	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
mRNA	O	O	O	O
was	O	O	O	O
strongly	O	O	O	O
expressed	O	O	O	O
in	O	O	O	O
4	B-cell_line	O	O	O
/	I-cell_line	O	O	O
5	I-cell_line	O	O	O
T	I-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
lines	I-cell_line	O	O	O
infected	O	O	O	O
with	O	O	O	O
human	O	O	O	O
T	O	O	O	O
-	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
leukemia	O	O	O	O
virus	O	O	O	O
type	O	O	O	O
I	O	O	O	O
(	O	O	O	O
HTLV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
I	O	O	O	O
)	O	O	O	O
(	O	O	O	O
ATL	B-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
1k	I-cell_line	O	O	O
,	O	O	O	O
MT	B-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
2	I-cell_line	O	O	O
,	O	O	O	O
S	B-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
LB1	I-cell_line	O	O	O
)	O	O	O	O
and	O	O	O	O
type	O	O	O	O
II	O	O	O	O
(	O	O	O	O
Mo	B-cell_line	O	O	O
)	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Another	O	O	O	O
unexpected	O	O	O	O
finding	O	O	O	O
was	O	O	O	O
that	O	O	O	O
T	O	O	O	O
-	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
leukemias	O	O	O	O
and	O	O	O	O
T	B-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
lines	I-cell_line	O	O	O
often	O	O	O	O
expressed	O	O	O	O
either	O	O	O	O
Id2	B-protein	O	O	O
or	O	O	O	O
Id3	B-protein	B-RNA	O	O
mRNA	O	I-RNA	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
addition	O	O	O	O
,	O	O	O	O
resting	O	B-cell_type	O	O
PBL	B-cell_type	I-cell_type	O	O
constitutively	O	O	O	O
expressed	O	O	O	O
prominent	O	O	O	O
levels	O	O	O	O
of	O	O	O	O
Id2	B-protein	B-RNA	O	O
mRNA	O	I-RNA	O	O
,	O	O	O	O
but	O	O	O	O
not	O	O	O	O
Id3	B-protein	B-RNA	O	O
mRNA	O	I-RNA	O	O
.	O	O	O	O

Upon	O	O	O	O
PHA	B-protein	O	O	O
-	O	O	O	O
stimulation	O	O	O	O
,	O	O	O	O
Id2	B-protein	O	O	O
expression	O	O	O	O
decreased	O	O	O	O
and	O	O	O	O
Id3	B-protein	O	O	O
levels	O	O	O	O
increased	O	O	O	O
with	O	O	O	O
biphasic	O	O	O	O
kinetics	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Taken	O	O	O	O
together	O	O	O	O
,	O	O	O	O
our	O	O	O	O
studies	O	O	O	O
revealed	O	O	O	O
three	O	O	O	O
unexpected	O	O	O	O
findings	O	O	O	O
which	O	O	O	O
require	O	O	O	O
further	O	O	O	O
analysis	O	O	O	O
:	O	O	O	O
(	O	O	O	O
1	O	O	O	O
)	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
Id2	B-protein	B-RNA	O	O
mRNA	O	I-RNA	O	O
is	O	O	O	O
often	O	O	O	O
associated	O	O	O	O
with	O	O	O	O
lymphocytic	O	O	O	O
transformation	O	O	O	O
by	O	O	O	O
HTLV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
I	O	O	O	O
or	O	O	O	O
-	O	O	O	O
II	O	O	O	O
;	O	O	O	O
(	O	O	O	O
2	O	O	O	O
)	O	O	O	O
T	O	O	O	O
-	O	O	O	O
cells	O	O	O	O
usually	O	O	O	O
express	O	O	O	O
either	O	O	O	O
Id2	B-protein	O	O	O
or	O	O	O	O
Id3	B-protein	B-RNA	O	O
mRNA	O	I-RNA	O	O
,	O	O	O	O
but	O	O	O	O
B	O	O	O	O
-	O	O	O	O
cells	O	O	O	O
often	O	O	O	O
express	O	O	O	O
both	O	O	O	O
simultaneously	O	O	O	O
;	O	O	O	O
(	O	O	O	O
3	O	O	O	O
)	O	O	O	O
non	O	O	O	O
-	O	O	O	O
dividing	O	O	O	O
,	O	O	O	O
normal	O	O	O	O
PBL	B-cell_type	O	O	O
express	O	O	O	O
high	O	O	O	O
levels	O	O	O	O
of	O	O	O	O
Id2	B-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
no	O	O	O	O
Id3	B-protein	B-RNA	O	O
mRNA	O	I-RNA	O	O
;	O	O	O	O
and	O	O	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
onset	O	O	O	O
of	O	O	O	O
cellular	O	O	O	O
proliferation	O	O	O	O
,	O	O	O	O
levels	O	O	O	O
of	O	O	O	O
Id2	B-protein	B-RNA	O	O
mRNA	O	I-RNA	O	O
decrease	O	O	O	O
while	O	O	O	O
levels	O	O	O	O
of	O	O	O	O
Id3	B-protein	B-RNA	O	O
mRNA	O	I-RNA	O	O
increase	O	O	O	O
,	O	O	O	O
suggesting	O	O	O	O
that	O	O	O	O
regulation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
these	O	O	O	O
closely	O	O	O	O
related	O	O	O	O
genes	B-DNA	O	O	O
is	O	O	O	O
disparate	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Salicylates	O	O	O	O
inhibit	O	O	O	O
lipopolysaccharide	O	O	O	O
-	O	O	O	O
induced	O	O	O	O
transcriptional	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
tissue	O	O	O	O
factor	O	O	O	O
gene	O	O	O	O
in	O	O	O	O
human	B-cell_type	O	O	O
monocytic	I-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

Binding	O	O	O	O
of	O	O	O	O
plasma	B-protein	O	O	O
Factor	I-protein	O	O	O
VII	I-protein	O	O	O
/	I-protein	O	O	O
VIIa	I-protein	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
tissue	B-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
(	I-protein	O	O	O
TF	I-protein	O	O	O
)	I-protein	O	O	O
receptor	I-protein	O	O	O
initiates	O	O	O	O
the	O	O	O	O
coagulation	B-protein	O	O	O
protease	I-protein	O	O	O
cascades	O	O	O	O
.	O	O	O	O

TF	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
by	O	O	O	O
circulating	B-cell_type	O	O	O
monocytes	I-cell_type	O	O	O
is	O	O	O	O
associated	O	O	O	O
with	O	O	O	O
thrombotic	O	O	O	O
and	O	O	O	O
inflammatory	O	O	O	O
complications	O	O	O	O
in	O	O	O	O
a	O	O	O	O
variety	O	O	O	O
of	O	O	O	O
diseases	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Transcriptional	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
human	B-DNA	O	O	O
TF	I-DNA	O	O	O
gene	I-DNA	O	O	O
in	O	O	O	O
monocytic	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
exposed	O	O	O	O
to	O	O	O	O
bacterial	O	O	O	O
lipopolysaccharide	O	O	O	O
(	O	O	O	O
LPS	O	O	O	O
)	O	O	O	O
is	O	O	O	O
mediated	O	O	O	O
by	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
of	O	O	O	O
c	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
Rel	I-protein	O	O	O
/	I-protein	O	O	O
p65	I-protein	O	O	O
heterodimers	I-protein	O	O	O
to	O	O	O	O
a	O	O	O	O
kappa	B-DNA	O	O	O
B	I-DNA	O	O	O
site	I-DNA	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
TF	B-DNA	O	O	O
promoter	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

Here	O	O	O	O
,	O	O	O	O
we	O	O	O	O
report	O	O	O	O
that	O	O	O	O
a	O	O	O	O
family	O	O	O	O
of	O	O	O	O
anti	O	O	O	O
-	O	O	O	O
inflammatory	O	O	O	O
agents	O	O	O	O
,	O	O	O	O
known	O	O	O	O
as	O	O	O	O
the	O	O	O	O
salicylates	O	O	O	O
,	O	O	O	O
inhibited	O	O	O	O
LPS	O	O	O	O
induction	O	O	O	O
of	O	O	O	O
TF	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
and	O	O	O	O
TF	B-DNA	O	O	O
gene	I-DNA	O	O	O
transcription	O	O	O	O
in	O	O	O	O
human	B-cell_type	O	O	O
monocytes	I-cell_type	O	O	O
and	O	O	O	O
monocytic	B-cell_line	O	O	O
THP	I-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
1	I-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
at	O	O	O	O
clinically	O	O	O	O
relevant	O	O	O	O
doses	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Furthermore	O	O	O	O
,	O	O	O	O
sodium	O	O	O	O
salicylate	O	O	O	O
blocked	O	O	O	O
the	O	O	O	O
LPS	O	O	O	O
-	O	O	O	O
induced	O	O	O	O
proteolytic	O	O	O	O
degradation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
I	B-protein	O	O	O
kappa	I-protein	O	O	O
B	I-protein	O	O	O
alpha	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
which	O	O	O	O
prevented	O	O	O	O
the	O	O	O	O
nuclear	O	O	O	O
translocation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
c	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
Rel	I-protein	O	O	O
/	I-protein	O	O	O
p65	I-protein	O	O	O
heterodimers	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
contrast	O	O	O	O
,	O	O	O	O
two	O	O	O	O
other	O	O	O	O
nonsteroidal	O	O	O	O
anti	O	O	O	O
-	O	O	O	O
inflammatory	O	O	O	O
drugs	O	O	O	O
,	O	O	O	O
ibuprofen	O	O	O	O
and	O	O	O	O
indomethacin	O	O	O	O
,	O	O	O	O
did	O	O	O	O
not	O	O	O	O
inhibit	O	O	O	O
LPS	O	O	O	O
induction	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
TF	B-DNA	O	O	O
gene	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

These	O	O	O	O
results	O	O	O	O
indicated	O	O	O	O
that	O	O	O	O
salicylates	O	O	O	O
inhibited	O	O	O	O
LPS	O	O	O	O
induction	O	O	O	O
of	O	O	O	O
TF	B-DNA	O	O	O
gene	I-DNA	O	O	O
transcription	O	O	O	O
in	O	O	O	O
monocytic	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
by	O	O	O	O
preventing	O	O	O	O
nuclear	O	O	O	O
translocation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
c	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
Rel	I-protein	O	O	O
/	I-protein	O	O	O
p65	I-protein	O	O	O
heterodimers	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
clinical	O	O	O	O
benefits	O	O	O	O
of	O	O	O	O
salicylates	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
treatment	O	O	O	O
of	O	O	O	O
several	O	O	O	O
diseases	O	O	O	O
,	O	O	O	O
including	O	O	O	O
atherosclerosis	O	O	O	O
and	O	O	O	O
rheumatoid	O	O	O	O
arthritis	O	O	O	O
,	O	O	O	O
may	O	O	O	O
be	O	O	O	O
related	O	O	O	O
to	O	O	O	O
their	O	O	O	O
ability	O	O	O	O
to	O	O	O	O
reduce	O	O	O	O
monocyte	O	O	O	O
gene	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Activation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
signal	O	O	O	O
transducer	O	O	O	O
and	O	O	O	O
transcription	O	O	O	O
(	O	O	O	O
STAT	B-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
signaling	O	O	O	O
pathway	O	O	O	O
in	O	O	O	O
a	O	O	O	O
primary	O	O	O	O
T	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
response	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Critical	O	O	O	O
role	O	O	O	O
for	O	O	O	O
IL	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
6	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
T	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
is	O	O	O	O
initiated	O	O	O	O
by	O	O	O	O
interaction	O	O	O	O
of	O	O	O	O
specific	O	O	O	O
Ags	B-protein	O	O	O
with	O	O	O	O
TCR	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
followed	O	O	O	O
by	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
intracellular	O	O	O	O
biochemical	O	O	O	O
events	O	O	O	O
leading	O	O	O	O
to	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
several	O	O	O	O
genes	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
signal	O	O	O	O
transducer	O	O	O	O
and	O	O	O	O
activator	O	O	O	O
of	O	O	O	O
transcription	B-protein	O	O	O
(	I-protein	O	O	O
STAT	I-protein	O	O	O
)	I-protein	O	O	O
proteins	I-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
a	O	O	O	O
primary	O	O	O	O
TCR	B-protein	O	O	O
-	O	O	O	O
mediated	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
T	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
have	O	O	O	O
been	O	O	O	O
explored	O	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
purified	O	B-cell_type	O	O
human	O	I-cell_type	O	O
peripheral	O	I-cell_type	O	O
blood	O	I-cell_type	O	O
T	B-cell_type	I-cell_type	O	O
cells	I-cell_type	I-cell_type	O	O
,	O	O	O	O
nuclear	B-protein	O	O	O
STAT	I-protein	O	O	O
proteins	I-protein	O	O	O
were	O	O	O	O
activated	O	O	O	O
approximately	O	O	O	O
3	O	O	O	O
h	O	O	O	O
after	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
by	O	O	O	O
cross	O	O	O	O
-	O	O	O	O
linked	O	O	O	O
anti	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
CD3	I-protein	O	O	O
Abs	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

These	O	O	O	O
STAT	B-protein	O	O	O
proteins	I-protein	O	O	O
were	O	O	O	O
detected	O	O	O	O
by	O	O	O	O
using	O	O	O	O
the	O	O	O	O
IFN	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
gamma	I-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
activated	I-DNA	O	O	O
sequence	I-DNA	O	O	O
(	O	O	O	O
GAS	B-DNA	O	O	O
)	O	O	O	O
and	O	O	O	O
related	O	O	O	O
oligonucleotides	O	O	O	O
as	O	O	O	O
probes	O	O	O	O
in	O	O	O	O
electrophoretic	O	O	O	O
mobility	O	O	O	O
shift	O	O	O	O
assay	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Analysis	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
nuclear	O	O	O	O
extracts	O	O	O	O
with	O	O	O	O
anti	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
STAT	I-protein	O	O	O
Abs	I-protein	O	O	O
indicated	O	O	O	O
that	O	O	O	O
they	O	O	O	O
contained	O	O	O	O
STAT	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
3	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
additional	O	O	O	O
proteins	O	O	O	O
crossreactive	O	O	O	O
with	O	O	O	O
the	O	O	O	O
STAT	B-protein	O	O	O
family	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
induction	O	O	O	O
of	O	O	O	O
STAT	B-protein	O	O	O
activity	O	O	O	O
was	O	O	O	O
inhibited	O	O	O	O
completely	O	O	O	O
by	O	O	O	O
pretreatment	O	O	O	O
with	O	O	O	O
either	O	O	O	O
cycloheximide	O	O	O	O
or	O	O	O	O
cyclosporin	O	O	O	O
A	O	O	O	O
,	O	O	O	O
thus	O	O	O	O
indicating	O	O	O	O
that	O	O	O	O
the	O	O	O	O
induction	O	O	O	O
was	O	O	O	O
due	O	O	O	O
to	O	O	O	O
a	O	O	O	O
secondary	B-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
produced	O	O	O	O
by	O	O	O	O
the	O	O	O	O
activated	O	O	O	O
T	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

As	O	O	O	O
neutralizing	O	B-protein	O	O
anti	O	I-protein	O	O
-	O	I-protein	O	O
IL	B-protein	I-protein	O	O
-	I-protein	I-protein	O	O
6	I-protein	I-protein	O	O
Abs	O	I-protein	O	O
effectively	O	O	O	O
down	O	O	O	O
-	O	O	O	O
regulated	O	O	O	O
the	O	O	O	O
early	O	O	O	O
induction	O	O	O	O
of	O	O	O	O
STAT	B-protein	O	O	O
proteins	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
as	O	O	O	O
exogenously	O	O	O	O
added	O	O	O	O
IL	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
6	I-protein	O	O	O
rapidly	O	O	O	O
activated	O	O	O	O
DNA	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
similar	O	O	O	O
to	O	O	O	O
TCR	B-protein	O	O	O
-	O	O	O	O
mediated	O	O	O	O
bindings	O	O	O	O
,	O	O	O	O
it	O	O	O	O
can	O	O	O	O
be	O	O	O	O
concluded	O	O	O	O
that	O	O	O	O
IL	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
6	I-protein	O	O	O
is	O	O	O	O
the	O	O	O	O
factor	O	O	O	O
responsible	O	O	O	O
for	O	O	O	O
the	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
STAT	B-protein	O	O	O
proteins	I-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
a	O	O	O	O
primary	O	O	O	O
T	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
response	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
normal	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
cycle	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
program	O	O	O	O
is	O	O	O	O
exploited	O	O	O	O
during	O	O	O	O
the	O	O	O	O
infection	O	O	O	O
of	O	O	O	O
quiescent	B-cell_type	O	O	O
B	I-cell_type	O	O	O
lymphocytes	I-cell_type	O	O	O
by	O	O	O	O
Epstein	O	O	O	O
-	O	O	O	O
Barr	O	O	O	O
virus	O	O	O	O
.	O	O	O	O

B	B-cell_type	O	O	O
lymphocytes	I-cell_type	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
peripheral	O	O	O	O
circulation	O	O	O	O
are	O	O	O	O
maintained	O	O	O	O
in	O	O	O	O
a	O	O	O	O
non	O	O	O	O
-	O	O	O	O
proliferative	O	O	O	O
state	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Antigen	O	O	O	O
recognition	O	O	O	O
stimulates	O	O	O	O
limited	O	O	O	O
proliferation	O	O	O	O
,	O	O	O	O
whereas	O	O	O	O
infection	O	O	O	O
with	O	O	O	O
Epstein	O	O	O	O
-	O	O	O	O
Barr	O	O	O	O
virus	O	O	O	O
(	O	O	O	O
EBV	O	O	O	O
)	O	O	O	O
results	O	O	O	O
in	O	O	O	O
continual	O	O	O	O
proliferation	O	O	O	O
and	O	O	O	O
the	O	O	O	O
outgrowth	O	O	O	O
of	O	O	O	O
immortal	B-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
lines	I-cell_line	O	O	O
.	O	O	O	O

Because	O	O	O	O
it	O	O	O	O
is	O	O	O	O
not	O	O	O	O
clear	O	O	O	O
at	O	O	O	O
which	O	O	O	O
point	O	O	O	O
in	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
cycle	O	O	O	O
the	O	O	O	O
peripheral	O	B-cell_type	O	O
B	B-cell_type	I-cell_type	O	O
lymphocytes	I-cell_type	I-cell_type	O	O
are	O	O	O	O
arrested	O	O	O	O
,	O	O	O	O
we	O	O	O	O
characterized	O	O	O	O
the	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
several	O	O	O	O
cell	B-DNA	O	O	O
cycle	I-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
associated	I-DNA	O	O	O
genes	I-DNA	O	O	O
in	O	O	O	O
quiescent	O	O	O	O
and	O	O	O	O
stimulated	O	O	O	O
cells	O	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
show	O	O	O	O
that	O	O	O	O
the	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
four	O	O	O	O
cell	B-DNA	O	O	O
genes	I-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
cdc	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
2	I-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
cyclin	B-DNA	O	O	O
E	I-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
CD23	B-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
cyclin	B-DNA	O	O	O
D2	I-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
are	O	O	O	O
up	O	O	O	O
-	O	O	O	O
regulated	O	O	O	O
approximately	O	O	O	O
100	O	O	O	O
-	O	O	O	O
fold	O	O	O	O
as	O	O	O	O
a	O	O	O	O
result	O	O	O	O
of	O	O	O	O
EBV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
mediated	O	O	O	O
immortalization	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Because	O	O	O	O
these	O	O	O	O
genes	O	O	O	O
play	O	O	O	O
a	O	O	O	O
positive	O	O	O	O
role	O	O	O	O
in	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
proliferation	O	O	O	O
,	O	O	O	O
we	O	O	O	O
suggest	O	O	O	O
that	O	O	O	O
this	O	O	O	O
regulatory	O	O	O	O
switch	O	O	O	O
contributes	O	O	O	O
to	O	O	O	O
controlling	O	O	O	O
entry	O	O	O	O
into	O	O	O	O
the	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
cycle	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Transient	O	O	O	O
stimulation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
quiescent	O	B-cell_type	O	O
B	B-cell_type	I-cell_type	O	O
lymphocytes	I-cell_type	I-cell_type	O	O
with	O	O	O	O
either	O	O	O	O
a	O	O	O	O
cocktail	O	O	O	O
of	O	O	O	O
anti	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
CD40	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
anti	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
IgM	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
IL4	B-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
or	O	O	O	O
EBV	O	O	O	O
results	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
rapid	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
same	O	O	O	O
four	O	O	O	O
genes	O	O	O	O
,	O	O	O	O
suggesting	O	O	O	O
that	O	O	O	O
,	O	O	O	O
after	O	O	O	O
infection	O	O	O	O
,	O	O	O	O
EBV	O	O	O	O
exploits	O	O	O	O
the	O	O	O	O
normal	O	O	O	O
program	O	O	O	O
of	O	O	O	O
B	B-cell_type	O	O	O
-	I-cell_type	O	O	O
lymphocyte	I-cell_type	O	O	O
cell	O	O	O	O
cycle	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Expression	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
chemokine	B-protein	O	O	O
receptor	I-protein	O	O	O
BLR2	B-protein	O	O	O
/	I-protein	O	O	O
EBI1	I-protein	O	O	O
is	O	O	O	O
specifically	O	O	O	O
transactivated	O	O	O	O
by	O	O	O	O
Epstein	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
Barr	I-protein	O	O	O
virus	I-protein	O	O	O
nuclear	I-protein	O	O	O
antigen	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
our	O	O	O	O
attempt	O	O	O	O
to	O	O	O	O
identify	O	O	O	O
chemokine	B-protein	O	O	O
receptors	I-protein	O	O	O
that	O	O	O	O
are	O	O	O	O
related	O	O	O	O
to	O	O	O	O
Burkitt	B-protein	O	O	O
'	I-protein	O	O	O
s	I-protein	O	O	O
lymphoma	I-protein	O	O	O
receptor	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
BLR1	B-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
and	O	O	O	O
are	O	O	O	O
expressed	O	O	O	O
in	O	O	O	O
activated	B-cell_type	O	O	O
lymphocytes	I-cell_type	O	O	O
we	O	O	O	O
used	O	O	O	O
RT	O	O	O	O
-	O	O	O	O
PCR	O	O	O	O
resulting	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
isolation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
a	O	O	O	O
cDNA	O	O	O	O
encoding	O	O	O	O
a	O	O	O	O
seven	B-protein	O	O	O
transmembrane	I-protein	O	O	O
receptor	I-protein	O	O	O
termed	O	O	O	O
BLR2	B-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
protein	O	O	O	O
shows	O	O	O	O
significant	O	O	O	O
sequence	O	O	O	O
similarities	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
family	O	O	O	O
of	O	O	O	O
G	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
coupled	O	O	O	O
chemokine	B-protein	O	O	O
receptors	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
turned	O	O	O	O
out	O	O	O	O
to	O	O	O	O
be	O	O	O	O
identical	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
recently	O	O	O	O
described	O	O	O	O
receptor	B-protein	O	O	O
EBI1	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Northern	O	O	O	O
blot	O	O	O	O
analysis	O	O	O	O
revealed	O	O	O	O
that	O	O	O	O
BLR2	B-protein	B-RNA	O	O
mRNA	O	I-RNA	O	O
could	O	O	O	O
be	O	O	O	O
highly	O	O	O	O
stimulated	O	O	O	O
in	O	O	O	O
mitogen	O	O	O	O
-	O	O	O	O
and	O	O	O	O
anti	O	O	O	O
-	O	O	O	O
CD3	O	O	O	O
-	O	O	O	O
treated	O	O	O	O
peripheral	O	O	O	O
blood	O	O	O	O
lymphocytes	O	O	O	O
.	O	O	O	O

BLR2	B-protein	B-RNA	O	O
-	O	I-RNA	O	O
specific	O	I-RNA	O	O
mRNA	O	I-RNA	O	O
could	O	O	O	O
be	O	O	O	O
detected	O	O	O	O
in	O	O	O	O
all	O	O	O	O
Epstein	B-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
Barr	I-cell_line	O	O	O
virus	I-cell_line	O	O	O
positive	I-cell_line	O	O	O
B	I-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
lines	I-cell_line	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
show	O	O	O	O
that	O	O	O	O
transcription	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
BLR2	B-protein	B-DNA	O	O
gene	O	I-DNA	O	O
could	O	O	O	O
be	O	O	O	O
specifically	O	O	O	O
induced	O	O	O	O
in	O	O	O	O
Epstein	B-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
Barr	I-cell_line	O	O	O
virus	I-cell_line	O	O	O
negative	I-cell_line	O	O	O
BL	I-cell_line	O	O	O
41	I-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
via	O	O	O	O
estrogen	O	O	O	O
-	O	O	O	O
mediated	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
Epstein	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
Barr	I-protein	O	O	O
virus	I-protein	O	O	O
nuclear	I-protein	O	O	O
antigen	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
a	O	O	O	O
key	O	O	O	O
regulator	O	O	O	O
of	O	O	O	O
viral	B-DNA	O	O	O
and	O	O	O	O
cellular	B-DNA	O	O	O
genes	I-DNA	O	O	O
in	O	O	O	O
immortalized	B-cell_line	O	O	O
B	I-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
.	O	O	O	O

Our	O	O	O	O
data	O	O	O	O
suggest	O	O	O	O
an	O	O	O	O
involvement	O	O	O	O
of	O	O	O	O
BLR2	B-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
regulation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
migration	O	O	O	O
in	O	O	O	O
activated	B-cell_type	O	O	O
lymphocytes	I-cell_type	O	O	O
and	O	O	O	O
in	O	O	O	O
viral	O	O	O	O
pathogenesis	O	O	O	O
.	O	O	O	O

A	O	O	O	O
central	O	O	O	O
role	O	O	O	O
for	O	O	O	O
a	O	O	O	O
single	B-DNA	O	O	O
c	I-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
Myb	I-DNA	O	O	O
binding	I-DNA	O	O	O
site	I-DNA	O	O	O
in	O	O	O	O
a	O	O	O	O
thymic	B-DNA	O	O	O
locus	I-DNA	O	O	O
control	I-DNA	O	O	O
region	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

Locus	B-DNA	O	O	O
control	I-DNA	O	O	O
regions	I-DNA	O	O	O
(	O	O	O	O
LCRs	B-DNA	O	O	O
)	O	O	O	O
are	O	O	O	O
powerful	O	O	O	O
assemblies	O	O	O	O
of	O	O	O	O
cis	B-DNA	O	O	O
elements	I-DNA	O	O	O
that	O	O	O	O
organize	O	O	O	O
the	O	O	O	O
actions	O	O	O	O
of	O	O	O	O
cell	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
type	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
specific	I-protein	O	O	O
trans	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
acting	I-protein	O	O	O
factors	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

A	O	O	O	O
2	B-protein	O	O	O
.	I-protein	O	O	O
3	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kb	I-protein	O	O	O
LCR	I-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
human	B-DNA	B-DNA	O	O
adenosine	I-DNA	I-DNA	O	O
deaminase	I-DNA	I-DNA	O	O
(	I-DNA	I-DNA	O	O
ADA	I-DNA	I-DNA	O	O
)	I-DNA	I-DNA	O	O
gene	I-DNA	I-DNA	O	O
first	O	I-DNA	O	O
intron	O	I-DNA	O	O
,	O	O	O	O
which	O	O	O	O
controls	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
in	O	O	O	O
thymocytes	B-cell_type	O	O	O
,	O	O	O	O
is	O	O	O	O
composed	O	O	O	O
of	O	O	O	O
a	O	O	O	O
200	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
bp	I-DNA	O	O	O
enhancer	I-DNA	O	O	O
domain	I-DNA	O	O	O
and	O	O	O	O
extended	O	O	O	O
flanking	O	O	O	O
sequences	O	O	O	O
that	O	O	O	O
facilitate	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
from	O	O	O	O
within	O	O	O	O
chromatin	B-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

Prior	O	O	O	O
analyses	O	O	O	O
have	O	O	O	O
demonstrated	O	O	O	O
that	O	O	O	O
the	O	O	O	O
enhancer	B-DNA	O	O	O
contains	O	O	O	O
a	O	O	O	O
28	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
bp	I-DNA	O	O	O
core	I-DNA	O	O	O
region	I-DNA	O	O	O
and	O	O	O	O
local	O	O	O	O
adjacent	O	O	O	O
augmentative	O	O	O	O
cis	B-DNA	O	O	O
elements	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
now	O	O	O	O
show	O	O	O	O
that	O	O	O	O
the	O	O	O	O
core	O	O	O	O
contains	O	O	O	O
a	O	O	O	O
single	O	O	O	O
critical	O	O	O	O
c	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
Myb	I-DNA	O	O	O
binding	I-DNA	O	O	O
site	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
both	O	O	O	O
transiently	B-cell_line	O	O	O
cotransfected	I-cell_line	O	O	O
human	I-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
and	O	O	O	O
stable	O	O	O	O
chromatin	B-cell_line	O	O	O
-	I-cell_line	O	O	O
integrated	I-cell_line	O	O	O
yeast	I-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
,	O	O	O	O
c	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
Myb	I-protein	O	O	O
strongly	O	O	O	O
transactivated	B-DNA	O	O	O
reporter	I-DNA	O	O	O
constructs	I-DNA	O	O	O
that	O	O	O	O
contained	O	O	O	O
polymerized	B-DNA	O	O	O
core	I-DNA	O	O	O
sequences	I-DNA	O	O	O
.	O	O	O	O

c	B-protein	B-protein	O	O
-	I-protein	I-protein	O	O
Myb	I-protein	I-protein	O	O
protein	O	I-protein	O	O
was	O	O	O	O
strongly	O	O	O	O
evident	O	O	O	O
in	O	O	O	O
T	B-cell_type	O	O	O
lymphoblasts	I-cell_type	O	O	O
in	O	O	O	O
which	O	O	O	O
the	O	O	O	O
enhancer	B-DNA	O	O	O
was	O	O	O	O
active	O	O	O	O
and	O	O	O	O
was	O	O	O	O
localized	O	O	O	O
within	O	O	O	O
discrete	O	O	O	O
nuclear	O	O	O	O
structures	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Fetal	O	O	O	O
murine	O	O	O	O
thymus	O	O	O	O
exhibited	O	O	O	O
a	O	O	O	O
striking	O	O	O	O
concordance	O	O	O	O
of	O	O	O	O
endogenous	O	O	O	O
c	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
myb	I-DNA	O	O	O
expression	O	O	O	O
with	O	O	O	O
that	O	O	O	O
of	O	O	O	O
mouse	B-DNA	O	O	O
ADA	I-DNA	O	O	O
and	O	O	O	O
human	B-DNA	O	O	O
ADA	I-DNA	O	O	O
LCR	I-DNA	O	O	O
-	O	O	O	O
directed	O	O	O	O
transgene	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Point	O	O	O	O
mutation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
c	B-protein	B-DNA	O	O
-	I-protein	I-DNA	O	O
Myb	I-protein	I-DNA	O	O
site	O	I-DNA	O	O
within	O	O	O	O
the	O	O	O	O
intact	O	O	O	O
2	B-protein	O	O	O
.	I-protein	O	O	O
3	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
kb	I-protein	O	O	O
LCR	I-protein	O	O	O
severely	O	O	O	O
attenuated	O	O	O	O
enhancer	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
in	O	O	O	O
transfections	O	O	O	O
and	O	O	O	O
LCR	B-DNA	O	O	O
activity	O	O	O	O
in	O	O	O	O
transgenic	O	B-cell_line	O	O
thymocytes	B-cell_type	I-cell_line	O	O
.	O	O	O	O

Within	O	O	O	O
the	O	O	O	O
context	O	O	O	O
of	O	O	O	O
a	O	O	O	O
complex	B-DNA	O	O	O
enhancer	I-DNA	O	O	O
and	O	O	O	O
LCR	B-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
c	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
Myb	I-protein	O	O	O
can	O	O	O	O
act	O	O	O	O
as	O	O	O	O
an	O	O	O	O
organizer	O	O	O	O
of	O	O	O	O
thymocyte	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
specific	I-DNA	O	O	O
gene	I-DNA	O	O	O
expression	O	O	O	O
via	O	O	O	O
a	O	O	O	O
single	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
site	O	O	O	O
.	O	O	O	O

A	O	O	O	O
regulatory	B-DNA	O	O	O
element	I-DNA	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
human	B-DNA	O	O	O
interleukin	I-DNA	O	O	O
2	I-DNA	O	O	O
gene	I-DNA	O	O	O
promoter	I-DNA	O	O	O
is	O	O	O	O
a	O	O	O	O
binding	B-DNA	O	O	O
site	I-DNA	O	O	O
for	O	O	O	O
the	O	O	O	O
zinc	B-protein	O	O	O
finger	I-protein	O	O	O
proteins	I-protein	O	O	O
Sp1	B-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
EGR	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Activation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
interleukin	B-protein	B-DNA	O	O
2	I-protein	I-DNA	O	O
(	O	I-DNA	O	O
IL	B-protein	I-DNA	O	O
-	I-protein	I-DNA	O	O
2	I-protein	I-DNA	O	O
)	O	I-DNA	O	O
gene	O	I-DNA	O	O
after	O	O	O	O
antigen	O	O	O	O
recognition	O	O	O	O
is	O	O	O	O
a	O	O	O	O
critical	O	O	O	O
event	O	O	O	O
for	O	O	O	O
T	O	O	O	O
cell	O	O	O	O
proliferation	O	O	O	O
and	O	O	O	O
effector	O	O	O	O
function	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Prior	O	O	O	O
studies	O	O	O	O
have	O	O	O	O
identified	O	O	O	O
several	O	O	O	O
transcription	B-protein	O	O	O
factors	I-protein	O	O	O
that	O	O	O	O
contribute	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
IL	B-protein	B-DNA	O	O
-	I-protein	I-DNA	O	O
2	I-protein	I-DNA	O	O
promoter	O	I-DNA	O	O
in	O	O	O	O
stimulated	B-cell_type	O	O	O
T	I-cell_type	O	O	O
lymphocytes	I-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

Here	O	O	O	O
we	O	O	O	O
describe	O	O	O	O
a	O	O	O	O
novel	O	O	O	O
regulatory	B-DNA	O	O	O
element	I-DNA	O	O	O
within	O	O	O	O
the	O	O	O	O
IL	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
2	I-DNA	O	O	O
promoter	I-DNA	O	O	O
located	O	O	O	O
immediately	O	O	O	O
upstream	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
nuclear	B-protein	B-DNA	O	O
factor	I-protein	I-DNA	O	O
of	I-protein	I-DNA	O	O
activated	I-protein	I-DNA	O	O
T	I-protein	I-DNA	O	O
cell	I-protein	I-DNA	O	O
(	O	I-DNA	O	O
NFAT	B-protein	I-DNA	O	O
)	O	I-DNA	O	O
domain	O	I-DNA	O	O
.	O	O	O	O

This	O	O	O	O
region	O	O	O	O
(	O	O	O	O
termed	O	O	O	O
the	O	O	O	O
zinc	B-DNA	O	O	O
finger	I-DNA	O	O	O
protein	I-DNA	O	O	O
binding	I-DNA	O	O	O
region	I-DNA	O	O	O
(	O	O	O	O
ZIP	B-DNA	O	O	O
)	O	O	O	O
)	O	O	O	O
serves	O	O	O	O
as	O	O	O	O
binding	O	O	O	O
site	O	O	O	O
for	O	O	O	O
two	O	O	O	O
differently	O	O	O	O
regulated	O	O	O	O
zinc	B-protein	O	O	O
finger	I-protein	O	O	O
proteins	I-protein	O	O	O
:	O	O	O	O
the	O	O	O	O
constitutively	B-protein	O	O	O
expressed	I-protein	O	O	O
transcription	I-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
Sp1	B-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
the	O	O	O	O
inducible	B-protein	O	O	O
early	I-protein	O	O	O
growth	I-protein	O	O	O
response	I-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
EGR	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
unstimulated	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
which	O	O	O	O
do	O	O	O	O
not	O	O	O	O
secrete	O	O	O	O
IL	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
only	O	O	O	O
Sp1	B-protein	O	O	O
binds	O	O	O	O
to	O	O	O	O
this	O	O	O	O
region	O	O	O	O
,	O	O	O	O
while	O	O	O	O
in	O	O	O	O
stimulated	O	B-cell_line	O	O
IL	B-protein	I-cell_line	O	O
-	I-protein	I-cell_line	O	O
2	I-protein	I-cell_line	O	O
secreting	O	I-cell_line	O	O
cells	O	I-cell_line	O	O
the	O	O	O	O
inducible	O	B-protein	O	O
EGR	B-protein	I-protein	O	O
-	I-protein	I-protein	O	O
1	I-protein	I-protein	O	O
protein	O	I-protein	O	O
recognizes	O	O	O	O
this	O	O	O	O
element	O	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
Jurkat	B-cell_line	O	O	O
T	I-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
,	O	O	O	O
the	O	O	O	O
ZIP	B-DNA	B-DNA	O	O
site	O	I-DNA	O	O
serves	O	O	O	O
as	O	O	O	O
an	O	O	O	O
activator	O	O	O	O
for	O	O	O	O
IL	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
gene	O	O	O	O
expression	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
a	O	O	O	O
combination	O	O	O	O
of	O	O	O	O
ZIP	B-DNA	O	O	O
and	O	O	O	O
NFAT	B-protein	B-DNA	O	O
binding	O	I-DNA	O	O
sites	O	I-DNA	O	O
is	O	O	O	O
required	O	O	O	O
for	O	O	O	O
maximal	O	O	O	O
IL	B-protein	B-DNA	O	O
-	I-protein	I-DNA	O	O
2	I-protein	I-DNA	O	O
promoter	O	I-DNA	O	O
activity	O	O	O	O
.	O	O	O	O

These	O	O	O	O
results	O	O	O	O
suggest	O	O	O	O
a	O	O	O	O
critical	O	O	O	O
role	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
ZIP	B-DNA	O	O	O
site	I-DNA	O	O	O
for	O	O	O	O
IL	B-protein	B-DNA	O	O
-	I-protein	I-DNA	O	O
2	I-protein	I-DNA	O	O
promoter	O	I-DNA	O	O
activity	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Activation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
HIV	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
1	I-DNA	O	O	O
enhancer	I-DNA	O	O	O
by	O	O	O	O
the	O	O	O	O
LEF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
HMG	I-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
on	O	O	O	O
nucleosome	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
assembled	I-DNA	O	O	O
DNA	I-DNA	O	O	O
in	O	O	O	O
vitro	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Lymphoid	B-protein	O	O	O
enhancer	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
binding	I-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
LEF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
is	O	O	O	O
a	O	O	O	O
regulatory	B-protein	O	O	O
high	I-protein	O	O	O
mobility	I-protein	O	O	O
group	I-protein	O	O	O
(	I-protein	O	O	O
HMG	I-protein	O	O	O
)	I-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
that	O	O	O	O
activates	O	O	O	O
the	O	O	O	O
T	B-protein	B-DNA	O	O
cell	I-protein	I-DNA	O	O
receptor	I-protein	I-DNA	O	O
alpha	I-protein	I-DNA	O	O
(	O	I-DNA	O	O
TCR	B-protein	I-DNA	O	O
alpha	I-protein	I-DNA	O	O
)	O	I-DNA	O	O
enhancer	O	I-DNA	O	O
in	O	O	O	O
a	O	O	O	O
context	O	O	O	O
-	O	O	O	O
restricted	O	O	O	O
manner	O	O	O	O
in	O	O	O	O
T	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
.	O	O	O	O

In	O	O	O	O
this	O	O	O	O
paper	O	O	O	O
we	O	O	O	O
demonstrate	O	O	O	O
that	O	O	O	O
the	O	O	O	O
distal	O	O	O	O
region	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
human	B-DNA	O	O	O
immunodeficiency	I-DNA	O	O	O
virus	I-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
1	I-DNA	O	O	O
(	I-DNA	O	O	O
HIV	I-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
1	I-DNA	O	O	O
)	I-DNA	O	O	O
enhancer	I-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
which	O	O	O	O
contains	O	O	O	O
DNA	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
binding	I-DNA	O	O	O
sites	I-DNA	O	O	O
for	O	O	O	O
LEF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
Ets	O	O	O	O
-	O	O	O	O
1	O	O	O	O
,	O	O	O	O
also	O	O	O	O
provides	O	O	O	O
a	O	O	O	O
functional	O	O	O	O
context	O	O	O	O
for	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
by	O	O	O	O
LEF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

First	O	O	O	O
,	O	O	O	O
we	O	O	O	O
show	O	O	O	O
that	O	O	O	O
mutations	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
LEF	B-protein	B-DNA	O	O
-	I-protein	I-DNA	O	O
1	I-protein	I-DNA	O	O
-	O	I-DNA	O	O
binding	O	I-DNA	O	O
site	O	I-DNA	O	O
inhibit	O	O	O	O
the	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
of	O	O	O	O
multimerized	B-DNA	O	O	O
copies	I-DNA	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
HIV	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
1	I-DNA	O	O	O
enhancer	I-DNA	O	O	O
in	O	O	O	O
Jurkat	B-cell_line	O	O	O
T	I-cell_line	O	O	O
cells	I-cell_line	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
that	O	O	O	O
LEF	B-protein	B-protein	O	O
-	I-protein	I-protein	O	O
1	I-protein	I-protein	O	O
/	O	I-protein	O	O
GAL4	O	I-protein	O	O
can	O	O	O	O
activate	O	O	O	O
a	O	O	O	O
GAL4	O	B-DNA	O	O
-	O	I-DNA	O	O
substituted	O	I-DNA	O	O
HIV	B-DNA	I-DNA	O	O
-	I-DNA	I-DNA	O	O
1	I-DNA	I-DNA	O	O
enhancer	I-DNA	I-DNA	O	O
80	O	O	O	O
-	O	O	O	O
to	O	O	O	O
100	O	O	O	O
-	O	O	O	O
fold	O	O	O	O
in	O	O	O	O
vivo	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Second	O	O	O	O
,	O	O	O	O
recombinant	O	B-protein	O	O
LEF	B-protein	I-protein	O	O
-	I-protein	I-protein	O	O
1	I-protein	I-protein	O	O
is	O	O	O	O
shown	O	O	O	O
to	O	O	O	O
activate	O	O	O	O
HIV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
1	O	O	O	O
transcription	O	O	O	O
on	O	O	O	O
chromatin	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
assembled	I-DNA	O	O	O
DNA	I-DNA	O	O	O
in	O	O	O	O
vitro	O	O	O	O
.	O	O	O	O

By	O	O	O	O
using	O	O	O	O
a	O	O	O	O
nucleosome	B-protein	O	O	O
-	O	O	O	O
assembly	O	O	O	O
system	O	O	O	O
derived	O	O	O	O
from	O	O	O	O
Drosophila	O	O	O	O
embryos	O	O	O	O
,	O	O	O	O
we	O	O	O	O
find	O	O	O	O
that	O	O	O	O
the	O	O	O	O
packaging	O	O	O	O
of	O	O	O	O
DNA	O	O	O	O
into	O	O	O	O
chromatin	B-DNA	O	O	O
in	O	O	O	O
vitro	O	O	O	O
strongly	O	O	O	O
represses	O	O	O	O
HIV	O	O	O	O
-	O	O	O	O
1	O	O	O	O
transcription	O	O	O	O
and	O	O	O	O
that	O	O	O	O
repression	O	O	O	O
can	O	O	O	O
be	O	O	O	O
counteracted	O	O	O	O
efficiently	O	O	O	O
by	O	O	O	O
preincubation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
DNA	O	O	O	O
with	O	O	O	O
LEF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
or	O	O	O	O
LEF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
Ets	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
supplemented	O	O	O	O
with	O	O	O	O
fractions	O	O	O	O
containing	O	O	O	O
the	O	O	O	O
promoter	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
binding	I-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
Sp1	B-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Addition	O	O	O	O
of	O	O	O	O
TFE	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
3	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
which	O	O	O	O
binds	O	O	O	O
to	O	O	O	O
an	O	O	O	O
E	B-DNA	O	O	O
-	I-DNA	O	O	O
box	I-DNA	O	O	O
motif	I-DNA	O	O	O
upstream	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
LEF	O	O	O	O
-	O	O	O	O
1	O	O	O	O
and	O	O	O	O
Ets	O	O	O	O
-	O	O	O	O
1	O	O	O	O
sites	O	O	O	O
,	O	O	O	O
further	O	O	O	O
augments	O	O	O	O
transcription	O	O	O	O
in	O	O	O	O
this	O	O	O	O
system	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Individually	O	O	O	O
or	O	O	O	O
collectively	O	O	O	O
,	O	O	O	O
none	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
three	O	O	O	O
enhancer	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
binding	I-protein	O	O	O
proteins	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
LEF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
Ets	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
TFE	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
3	I-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
could	O	O	O	O
activate	O	O	O	O
transcription	O	O	O	O
in	O	O	O	O
the	O	O	O	O
absence	O	O	O	O
of	O	O	O	O
Sp1	B-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

A	O	O	O	O
truncation	B-protein	O	O	O
mutant	I-protein	O	O	O
of	O	O	O	O
LEF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
HMG	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
88	I-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
,	O	O	O	O
which	O	O	O	O
contains	O	O	O	O
the	O	O	O	O
HMG	B-protein	O	O	O
box	I-protein	O	O	O
but	O	O	O	O
lacks	O	O	O	O
the	O	O	O	O
trans	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
activation	I-protein	O	O	O
domain	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
did	O	O	O	O
not	O	O	O	O
activate	O	O	O	O
transcription	O	O	O	O
from	O	O	O	O
nucleosomal	B-DNA	O	O	O
DNA	I-DNA	O	O	O
,	O	O	O	O
indicating	O	O	O	O
that	O	O	O	O
bending	O	O	O	O
of	O	O	O	O
DNA	O	O	O	O
by	O	O	O	O
the	O	O	O	O
HMG	B-protein	O	O	O
domain	I-protein	O	O	O
is	O	O	O	O
not	O	O	O	O
sufficient	O	O	O	O
to	O	O	O	O
activate	O	O	O	O
transcription	O	O	O	O
in	O	O	O	O
vitro	O	O	O	O
.	O	O	O	O

We	O	O	O	O
conclude	O	O	O	O
that	O	O	O	O
transcription	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
by	O	O	O	O
LEF	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
vitro	O	O	O	O
is	O	O	O	O
a	O	O	O	O
chromatin	B-DNA	O	O	O
-	O	O	O	O
dependent	O	O	O	O
process	O	O	O	O
that	O	O	O	O
requires	O	O	O	O
a	O	O	O	O
functional	O	O	O	O
trans	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
activation	I-protein	O	O	O
domain	I-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
addition	O	O	O	O
to	O	O	O	O
the	O	O	O	O
HMG	B-protein	O	O	O
domain	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

HIV	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
envelope	I-protein	O	O	O
glycoproteins	I-protein	O	O	O
induce	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
activated	O	O	O	O
protein	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
CD4	O	B-cell_type	O	O
+	O	I-cell_type	O	O
T	B-cell_type	I-cell_type	O	O
cells	I-cell_type	I-cell_type	O	O
[	O	O	O	O
published	O	O	O	O
erratum	O	O	O	O
appears	O	O	O	O
in	O	O	O	O
J	O	O	O	O
Biol	O	O	O	O
Chem	O	O	O	O
1995	O	O	O	O
Dec	O	O	O	O
1	O	O	O	O
;	O	O	O	O
270	O	O	O	O
(	O	O	O	O
48	O	O	O	O
)	O	O	O	O
:	O	O	O	O
29038	O	O	O	O
]	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Activation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
CD4	O	B-cell_type	O	O
positive	O	I-cell_type	O	O
T	B-cell_type	I-cell_type	O	O
cells	I-cell_type	I-cell_type	O	O
is	O	O	O	O
a	O	O	O	O
primary	O	O	O	O
requirement	O	O	O	O
for	O	O	O	O
human	O	O	O	O
immunodeficiency	O	O	O	O
virus	O	O	O	O
(	O	O	O	O
HIV	O	O	O	O
)	O	O	O	O
entry	O	O	O	O
,	O	O	O	O
efficient	O	O	O	O
HIV	O	O	O	O
replication	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
progression	O	O	O	O
to	O	O	O	O
AIDS	O	O	O	O
,	O	O	O	O
Utilizing	O	O	O	O
CD4	B-cell_line	O	O	O
positive	I-cell_line	O	O	O
T	I-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
lines	I-cell_line	O	O	O
and	O	O	O	O
purified	O	B-cell_type	O	O
T	B-cell_type	I-cell_type	O	O
cells	I-cell_type	I-cell_type	O	O
from	O	O	O	O
normal	O	O	O	O
individuals	O	O	O	O
,	O	O	O	O
we	O	O	O	O
have	O	O	O	O
demonstrated	O	O	O	O
that	O	O	O	O
native	B-protein	O	O	O
envelope	I-protein	O	O	O
glycoproteins	I-protein	O	O	O
of	O	O	O	O
HIV	O	O	O	O
,	O	O	O	O
gp	B-protein	O	O	O
160	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
can	O	O	O	O
induce	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
transcription	B-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
,	I-protein	O	O	O
activated	I-protein	O	O	O
protein	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
(	O	O	O	O
AP	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
)	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
stimulatory	O	O	O	O
effects	O	O	O	O
of	O	O	O	O
gp160	B-protein	O	O	O
are	O	O	O	O
mediated	O	O	O	O
through	O	O	O	O
the	O	O	O	O
CD4	B-protein	O	O	O
molecule	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
since	O	O	O	O
treatment	O	O	O	O
of	O	O	O	O
gp160	B-protein	O	O	O
with	O	O	O	O
soluble	O	O	O	O
CD4	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
IgG	I-protein	O	O	O
abrogates	O	O	O	O
its	O	O	O	O
activity	O	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
CD4	B-cell_line	O	O	O
negative	I-cell_line	O	O	O
T	I-cell_line	O	O	O
cell	I-cell_line	O	O	O
lines	I-cell_line	O	O	O
fail	O	O	O	O
to	O	O	O	O
be	O	O	O	O
stimulated	O	O	O	O
with	O	O	O	O
gp160	B-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

Immunoprecipitation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
the	O	O	O	O
gp	B-protein	O	O	O
160	I-protein	O	O	O
-	O	O	O	O
induced	O	O	O	O
nuclear	O	O	O	O
extracts	O	O	O	O
with	O	O	O	O
polyclonal	B-protein	O	O	O
antibodies	I-protein	O	O	O
to	O	O	O	O
Fos	B-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
Jun	B-protein	O	O	O
proteins	I-protein	O	O	O
indicates	O	O	O	O
that	O	O	O	O
AP	B-protein	B-protein	O	O
-	I-protein	I-protein	O	O
1	I-protein	I-protein	O	O
complex	O	I-protein	O	O
is	O	O	O	O
comprised	O	O	O	O
of	O	O	O	O
members	O	O	O	O
of	O	O	O	O
these	O	O	O	O
family	O	O	O	O
of	O	O	O	O
proteins	O	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
gp160	B-protein	B-protein	O	O
-	O	I-protein	O	O
induced	O	I-protein	O	O
AP	B-protein	I-protein	O	O
-	I-protein	I-protein	O	O
1	I-protein	I-protein	O	O
complex	O	I-protein	O	O
is	O	O	O	O
dependent	O	O	O	O
upon	O	O	O	O
protein	O	O	O	O
tyrosine	O	O	O	O
phosphorylation	O	O	O	O
and	O	O	O	O
is	O	O	O	O
protein	O	O	O	O
synthesis	O	O	O	O
-	O	O	O	O
independent	O	O	O	O
.	O	O	O	O

This	O	O	O	O
stimulation	O	O	O	O
can	O	O	O	O
also	O	O	O	O
be	O	O	O	O
abolished	O	O	O	O
by	O	O	O	O
inhibitors	O	O	O	O
of	O	O	O	O
protein	B-protein	O	O	O
kinase	I-protein	O	O	O
C	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
but	O	O	O	O
it	O	O	O	O
is	O	O	O	O
unaffected	O	O	O	O
by	O	O	O	O
calcium	O	O	O	O
channel	O	O	O	O
blocker	O	O	O	O
or	O	O	O	O
cyclosporine	O	O	O	O
A	O	O	O	O
.	O	O	O	O

This	O	O	O	O
gp160	B-protein	O	O	O
treatment	O	O	O	O
adversely	O	O	O	O
affects	O	O	O	O
the	O	O	O	O
functional	O	O	O	O
capabilities	O	O	O	O
of	O	O	O	O
T	B-cell_type	O	O	O
cells	I-cell_type	O	O	O
:	O	O	O	O
pre	O	O	O	O
-	O	O	O	O
treatment	O	O	O	O
of	O	O	O	O
CD4	O	B-cell_type	O	O
+	O	I-cell_type	O	O
T	B-cell_type	I-cell_type	O	O
cells	I-cell_type	I-cell_type	O	O
with	O	O	O	O
gp160	B-protein	O	O	O
for	O	O	O	O
4	O	O	O	O
h	O	O	O	O
at	O	O	O	O
37	O	O	O	O
degrees	O	O	O	O
C	O	O	O	O
inhibited	O	O	O	O
anti	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
CD3	I-protein	O	O	O
-	O	O	O	O
induced	O	O	O	O
interleukin	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
secretion	O	O	O	O
.	O	O	O	O

Effects	O	O	O	O
similar	O	O	O	O
to	O	O	O	O
gp160	B-protein	O	O	O
were	O	O	O	O
seen	O	O	O	O
with	O	O	O	O
anti	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
CD4	I-protein	O	O	O
mAb	I-protein	O	O	O
.	O	O	O	O

The	O	O	O	O
aberrant	O	O	O	O
activation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
AP	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
1	I-protein	O	O	O
by	O	O	O	O
gp160	B-protein	O	O	O
in	O	O	O	O
CD4	O	B-cell_type	O	O
positive	O	I-cell_type	O	O
T	B-cell_type	I-cell_type	O	O
cells	I-cell_type	I-cell_type	O	O
could	O	O	O	O
result	O	O	O	O
in	O	O	O	O
up	O	O	O	O
-	O	O	O	O
regulation	O	O	O	O
of	O	O	O	O
cytokines	B-protein	O	O	O
containing	O	O	O	O
AP	B-protein	B-DNA	O	O
-	I-protein	I-DNA	O	O
1	I-protein	I-DNA	O	O
sites	O	I-DNA	O	O
,	O	O	O	O
e	O	O	O	O
.	O	O	O	O
g	O	O	O	O
.	O	O	O	O
interleukin	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
3	I-protein	O	O	O
and	O	O	O	O
granulocyte	B-protein	O	O	O
macrophage	I-protein	O	O	O
colony	I-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
stimulating	I-protein	O	O	O
factor	I-protein	O	O	O
,	O	O	O	O
and	O	O	O	O
concurrently	O	O	O	O
lead	O	O	O	O
to	O	O	O	O
T	B-cell_type	O	O	O
cell	I-cell_type	O	O	O
unresponsiveness	O	O	O	O
by	O	O	O	O
inhibiting	O	O	O	O
interleukin	B-protein	O	O	O
-	I-protein	O	O	O
2	I-protein	O	O	O
secretion	O	O	O	O
.	O	O	O	O